2025屆山東棗莊八中高三第三次模擬考試生物試卷含解析

2025屆山東棗莊八中高三第三次模擬考試生物試卷注意事項1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列關(guān)于細胞內(nèi)核酸的說法，正確的是（）A．真核細胞內(nèi)DNA和RNA的合成都在細胞核內(nèi)完成B．mRNA和tRNA均為單鏈不含氫鍵C．DNA聚合酶可以與RNA結(jié)合并催化轉(zhuǎn)錄過程D．核酸的多樣性決定了蛋白質(zhì)的多樣性2．如圖為碳循環(huán)示意圖，甲、乙、丙表示生態(tài)系統(tǒng)中的三種成分，下列敘述正確的是：A．碳循環(huán)是指二氧化碳在甲與丙之間不斷循環(huán)的過程B．乙在該生態(tài)系統(tǒng)中均處于第二營養(yǎng)級C．甲、乙、丙共同組成生物群落D．生物X可能不具有細胞核，生物Y不可能含有線粒體3．下列敘述中，正確的是（）A．抑癌基因調(diào)節(jié)細胞周期，控制細胞生長和分裂B．細胞的體積和表面積的比值越大，物質(zhì)運輸?shù)男试礁撸接欣诩毎c外界進行物質(zhì)交換C．生物進化的過程中，種群基因頻率發(fā)生改變標志著這個種群發(fā)生了進化D．DNA聚合酶和RNA聚合酶的結(jié)合位點分別在DNA、RNA上，二者在有絲分裂間期比較活躍4．德國生理學家華爾柏在研究線粒體數(shù)量時，統(tǒng)計了某動物部分組織細胞中的線粒體數(shù)據(jù)，如下表所示。下列相關(guān)說法錯誤的是（）肝細胞腎皮質(zhì)細胞平滑肌細胞心肌細胞950個400個260個12500個A．線粒體具有雙層膜結(jié)構(gòu)，其中產(chǎn)生能量最多的部位是基質(zhì)B．不同細胞的線粒體數(shù)量有差異與其執(zhí)行不同的細胞功能有關(guān)C．心肌細胞線粒體含量最多的原因是心肌消耗的能量多D．表中數(shù)據(jù)可以看出線粒體的多少與細胞新陳代謝的強弱有關(guān)5．家貓體色由X染色體上一對等位基因E、e控制，只含基因E的個體為黑貓，只含基因e的個體為黃貓，其他個體為玳瑁貓。下列敘述錯誤的是（）A．玳瑁貓的基因型一定為XEXe B．玳瑁貓與黃貓雜交，后代中黃貓的概率為1/4C．黑貓和黃貓的基因型種數(shù)相同 D．用黑貓和黃貓雜交，后代玳瑁貓的概率為1/26．圖甲為利用酵母菌釀制葡萄酒的實驗裝置，在其他條件相同且適宜的情況下，測得一段時間內(nèi)裝置中相關(guān)物質(zhì)含量的變化如曲線乙所示，下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述不正確的是（）A．圖乙中曲線①、②可分別表示裝置甲中O2濃度、酒精濃度的變化B．用裝置甲進行果醋發(fā)酵時，需同時打開閥a、bC．果酒、果醋和腐乳制作所需的適宜溫度均為30℃D．果酒、果醋和腐乳制作所用的菌種不全是原核生物二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）現(xiàn)有兩種淀粉酶A與B，某生物興趣小組為探究不同溫度條件下這兩種淀粉酶的話性，設(shè)計實驗如下：實驗原理：溫度等條件可以影響酶的活性；淀粉在淀粉酶的催化作用下產(chǎn)生麥芽糖。實驗材料：一定濃度的淀粉溶液、相同濃度的淀粉酶A和淀粉酶B溶液、水浴缸、溫度計等。實驗過程：如表所示，組別步驟12345678①設(shè)置水浴缸溫度（℃）2030405020304050②取8支試管各加入淀粉溶液（mL），分別保溫5min1010101010101010③另取8支試管各加入等量淀粉酶溶液，分別保溫5min酶A酶A酶A酶A酶A酶A酶A酶A④將同組兩個試管中的淀粉溶液與淀粉酶溶液混合搖勻，保溫5min實驗結(jié)果：圖甲是40℃時測定酶A催化淀粉水解生成的麥芽糖的量隨時間變化的曲線；圖乙是實驗第④步保溫5分鐘后對各組淀粉剩余含量進行檢測的結(jié)果。（1）生物體內(nèi)的酶是由__________產(chǎn)生的，本質(zhì)是________，酶能起催化作用的機理是__________。（2）該實驗的自變量是__________，無關(guān)變量有_________________（至少寫出2種）。（3）若適當降低溫度，圖甲中P點將向_________（填“左”或“右”）移動，原因是____________________，因此酶制劑適于在_________下保存。（4）實驗用分光光度計檢測底物淀粉的剩余量來表示酶的活性，該實驗不能用斐林試劑檢測生成物麥芽糖的含量，原因是______________________________。8．（10分）某雌雄異株植物，其性別分化受等位基因M、m控制。研究發(fā)現(xiàn)，含基因M的受精卵發(fā)育成雄株。該植物剛萌發(fā)形成的嫩莖有綠色、紫色與紅色三種類型，依次由基因aB、ab、a控制，且前者對后者完全顯性。（1）該植物雌株的基因型是____________，雄株的基因型是____________。綠莖雄株有_______種基因型。（2）在一個該植物的種群中，雌株與雄株的數(shù)目比為1∶1，m基因的頻率為_________。（3）該植物的嫩莖具有很髙的食用與藥用價值，研究發(fā)現(xiàn)，雄株萌發(fā)產(chǎn)生的嫩莖數(shù)量多、品質(zhì)好。為讓雜交子代全為雄株，育種工作者成功培育出一種“超雄株”。該“超雄株”的基因型為______。育種工作者培育“超雄株”采用的方法可能是_____________。9．（10分）科研人員利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療。其技術(shù)流程如下圖1所示，圖2、圖3分別表示了干擾素基因及質(zhì)粒的相關(guān)信息。（1）在圖1治療過程中是否體現(xiàn)細胞的全能性____（是/否），為什么？________________________。（2）圖1步驟③將基因?qū)隕S細胞而不是導(dǎo)入到上皮細胞是因為ES細胞具有__________________。（3）據(jù)圖2、圖3，對干擾素基因片段和質(zhì)粒進行酶切時，可選用的限制酶組合為________________。（4）為了得到實驗所需的大量干擾素基因，研究人員利用PCR技術(shù)進行擴增。由于DNA復(fù)制時，子鏈只能由5′向3′方向延伸，因此可以從下圖A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取_____________作為引物。若要將1個干擾素基因復(fù)制4次，則需要在緩沖液中至少加入_______個引物。（5）將步驟③獲得的ES細胞在熒光顯微鏡下觀察，選擇發(fā)_____________色熒光的細胞進行體外誘導(dǎo)。為檢測干擾素基因是否表達，可以采用_____________方法進行檢測。10．（10分）轉(zhuǎn)染是指利用一定手段使外源基因進入細胞中并穩(wěn)定表達的過程。腺病毒載體常用于外源基因的轉(zhuǎn)染，這在基因治療、疫苗研發(fā)和動物細胞培養(yǎng)的可視化監(jiān)控方面有著廣闊的應(yīng)用前景。回答下列問題。（l）腺病毒營____活，用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載體上具有____識別和結(jié)合的部位，是外源基因在受體細胞中啟動表達的關(guān)鍵。（2）構(gòu)建腺病毒載體時，先用同種限制酶對腺病毒DNA和外源基因進行切割，可獲得相同的____，再用DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的___。（3）通過腺病毒載體將藍色熒光基因轉(zhuǎn)染山羊耳緣成纖維細胞，利用藍色熒光直觀監(jiān)控細胞的體外培養(yǎng)過程。首先將山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或_______處理得到單個成纖維細胞，培養(yǎng)至貼滿瓶壁時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為________。這時，重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)進行_______培養(yǎng)。培養(yǎng)時使用的合成培養(yǎng)基，通常需加入___等一些天然成分，以滿足細胞對營養(yǎng)物質(zhì)的全面需求。11．（15分）從自然界篩選嗜鹽菌（好氧型）的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→計數(shù)及性能測定。（1）培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣往往從高鹽環(huán)境采集，說明了在自然界尋找各種目的菌株時，遵循的共同原則是根據(jù)目的菌株_________________________。（2）富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件，使其在群落中的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對嗜鹽產(chǎn)淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇以________為唯一碳源的培養(yǎng)基，并在高鹽條件下培養(yǎng)。在富集培養(yǎng)過程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，一方面使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率；另一方面能_____________，從而更有利于該微生物的生長繁殖。（3）在純化嗜鹽菌時，實驗操作如圖，則采用的接種方法是___________，根據(jù)該圖可判斷，正確完成圖示的實驗操作，接種環(huán)要求灼燒_______________次。（4）可采用稀釋涂布平板法對嗜鹽菌進行計數(shù)，其原理是_____________________，統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，即可推測出樣品活菌數(shù)；計數(shù)結(jié)果往往比實際活菌數(shù)低，是因為_________________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

1、核酸是遺傳信息的攜帶者，是一切生物的遺傳物質(zhì)，在生物體的遺傳、變異和蛋白質(zhì)的生物合成中具有重要作用；細胞中的核酸根據(jù)所含五碳糖的不同分為DNA（脫氧核糖核酸）和RNA（核糖核酸）兩種，構(gòu)成DNA與RNA的基本單位分別是脫氧核苷酸和核糖核苷酸，每個脫氧核苷酸分子是由一分子磷酸、一分子脫氧核糖和一分子含氮堿基形成，每個核糖核苷酸分子是由一分子磷酸、一分子核糖和一分子含氮堿基形成。2、構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)多樣性的直接原因與構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸的種類、數(shù)目、排列順序和肽鏈盤曲折疊形成的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)千差萬別有關(guān)?！驹斀狻緼、真核細胞的線粒體和葉綠體中都有環(huán)狀的DNA，都可以進行復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，所以DNA和RNA的合成不一定都在細胞核里進行，A錯誤；B、tRNA為三葉草形狀，部分區(qū)域堿基互補配對形成雙鏈結(jié)構(gòu)，含有氫鍵，B錯誤；C、DNA聚合酶與DNA結(jié)合并催化DNA的復(fù)制過程，RNA聚合酶與DNA結(jié)合并催化轉(zhuǎn)錄過程，C錯誤；D、蛋白質(zhì)是基因表達的結(jié)果，其多樣性取決于核酸的多樣性，D正確。故選D。2、C【解析】

A、分析題圖可知，甲為生產(chǎn)者，乙為消費者，丙為分解者。碳循環(huán)是指二氧化碳在甲、乙、丙與無機環(huán)境之間不斷循環(huán)的過程，A錯誤；B、乙在該生態(tài)系統(tǒng)中處于第二、第三等多個營養(yǎng)級，B錯誤；C、甲、乙、丙共同組成了該區(qū)域中的所有生物，即生物群落，C正確；D、生物X是生產(chǎn)者，可能不具有成形的細胞核，如硝化細菌，生物Y是分解者，可能含有線粒體，如蚯蚓，D錯誤。故選C。【點睛】本題考查生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能的有關(guān)知識，意在考查考生識圖能力和能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力。3、C【解析】

1、細胞不能無限長大的原因：（1）細胞中細胞核所控制的范圍有限，所以一般細胞生長到一定體積就會分裂；（2）細胞的表面積與體積的比值叫做相對面積，細胞越小該比值越大，細胞與外界的物質(zhì)交換速率越快，有利于細胞的生長。2、種群是生物進化的基本單位，生物進化的實質(zhì)在于種群基因頻率的改變?！驹斀狻緼、原癌基因可調(diào)節(jié)細胞周期，控制細胞的生長和分裂進程，A錯誤；B、細胞的體積和表面積的比值越小，物質(zhì)運輸?shù)男试礁撸接欣诩毎c外界進行物質(zhì)交換，B錯誤；C、生物進化的實質(zhì)在于種群基因頻率的改變，當種群基因頻率發(fā)生改變時，該種群一定發(fā)生了進化，C正確；D、DNA聚合酶和RNA聚合酶的結(jié)合位點都在DNA上，二者在有絲分裂間期比較活躍，D錯誤。故選C。4、A【解析】

線粒體是有氧呼吸的主要場所，代謝活動約旺盛的細胞，需要的能量越多，從體細胞中線粒體的數(shù)目可判斷其新陳代謝的強弱?！驹斀狻緼、線粒體具有雙層膜結(jié)構(gòu)，有氧呼吸中產(chǎn)生能量最多的是第三階段，發(fā)生在線粒體內(nèi)膜，A錯誤；B、不同細胞的功能不同，生命活動消耗的能量不同，結(jié)構(gòu)決定功能，所具有的線粒體數(shù)目是不同的，B正確；C、從圖中看看出四種細胞中心肌細胞的線粒體數(shù)目是最多的，說明其新陳代謝最強，從圖表中可以推測，新陳代謝強弱依次是心肌細胞＞肝細胞＞腎皮質(zhì)細胞＞平滑肌細胞，C正確；D、線粒體的多少與細胞新陳代謝的強弱有關(guān)，由圖可知，不同細胞的線粒體數(shù)目不同，心肌細胞為了維持規(guī)律性收縮運動，需要大能量，故而線粒體數(shù)目也較多，D正確。故選A?！军c睛】有氧呼吸的化學反應(yīng)式為，分為三個階段，每個階段的物質(zhì)與能量變化如下：5、B【解析】

根據(jù)題干信息，貓的黑毛基因E和黃毛基因e在X染色體上，相關(guān)基因型和性狀的關(guān)系：XEXEXEXeXeXeXEYXeY黑色雌貓玳瑁雌貓黃色雌貓黑色雄貓黃色雄貓【詳解】A、由題干信息可知：玳瑁貓應(yīng)同時含E、e基因，故其基因型一定為XEXe，A正確；B、玳瑁貓與黃貓雜交，黃貓雄貓（XeY）×玳瑁雌貓（XEXe），后代中黃貓的概率為1/2，B錯誤；C、黑貓的基因型有兩種XEXE和XEY，黃貓的基因型有兩種XeXe和XeY，黑貓和黃貓的基因型種數(shù)相同，C正確；D、黑毛雄貓（XEY）×黃毛雌貓（XeXe）或黃色雄貓（XeY）×黑色雌貓（XEXE），子代出現(xiàn)玳瑁貓（XEXe）的概率均為1/2，D正確。故選B?！军c睛】解答此題需用遺傳學的語言“遺傳圖解”，結(jié)合基因型和性狀的關(guān)系，對后代的情況進行分析，可用列表法輔助作答。6、C【解析】

題圖分析：圖甲為利用酵母菌釀制葡萄酒的實驗裝置，其中充氣口a是在連接充氣泵進行充氣用的；排氣口b是在酒精發(fā)酵時用來排出CO2的；出料口是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接，其目的是防止空氣中微生物的污染。圖乙表示圖甲發(fā)酵裝置中相關(guān)物質(zhì)含量的變化。①物質(zhì)隨發(fā)酵時間延長逐漸下降，②物質(zhì)隨發(fā)酵時間延長逐漸上升?！驹斀狻緼、酵母菌開始進行有氧呼吸，不斷消耗氧氣，因此曲線①表示裝置甲中O2濃度的變化，酵母菌發(fā)酵過程中不斷產(chǎn)生酒精，因此曲線②表示裝置甲中酒精濃度的變化，A正確；B、果醋發(fā)酵時需要氧氣，因此用裝置甲進行果醋發(fā)酵時，需同時打開閥a、b，B正確；C、果酒、果醋和腐乳的制作所需的適宜溫度分別是18~25℃，30～35℃，15~18℃，C錯誤；D、果酒、腐乳制作所用的菌種分別是酵母菌、毛霉，都是真核生物，果醋制作所用的菌種是醋酸菌，是原核生物，D正確。故選C。二、綜合題：本大題共4小題7、活細胞蛋白質(zhì)或RNA降低化學反應(yīng)的活化能溫度、酶的種類pH、反應(yīng)時間、溶液的量、淀粉的濃度、酶的濃度等右溫度降低會引起酶A的活性下降，酶催化反應(yīng)完成所需的時間增加低溫（0~4℃）斐林試劑檢測時需水浴加熱，會導(dǎo)致反應(yīng)體系溫度發(fā)生改變，影響實驗結(jié)果【解析】

影響酶促反應(yīng)的因素。在底物足夠，其他因素適宜的條件下，酶促反應(yīng)的速度與酶濃度成正比；在酶量一定的情況下，酶促反應(yīng)速率隨底物濃度的增加而加快，酶促反應(yīng)增加到一定值時，由于受到酶濃度的限制，此時即使再增加底物濃度，反應(yīng)幾乎不再改變；在一定溫度范圍內(nèi)酶促反應(yīng)速率隨溫度的升高而加快，在一定條件下，每一種酶在某一溫度時活力最大，稱最適溫度；當溫度高與最適溫度時，酶促反應(yīng)速率反而隨溫度的升高而降低?！驹斀狻浚?）酶是活細胞產(chǎn)生的具有催化作用的有機物，絕大多數(shù)是蛋白質(zhì)，少數(shù)是RNA。因此，生物體內(nèi)的酶是由活細胞產(chǎn)生的，本質(zhì)是蛋白質(zhì)或RNA，酶能降低化學反應(yīng)的活化能，進而加快反應(yīng)速度。（2）本實驗的目的為，探究不同溫度條件下這兩種淀粉酶的活性，據(jù)此可知，該實驗的自變量是溫度、酶的種類，因變量是反應(yīng)速率，檢測指標是麥芽糖的產(chǎn)生量，無關(guān)變量有pH、反應(yīng)時間、溶液的量、淀粉的濃度、酶的濃度等，實驗中保證無關(guān)變量相同且適宜。（3）由圖乙實驗結(jié)果可知，在20～50℃范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，酶A活性逐漸升高，因此可知，由40℃適當降低溫度，酶的活性會下降，即P點會向右移動，為了保持酶活性需要將酶置于低溫（0~4℃）保存。（4）由于斐林試劑檢測時需水浴加熱，會導(dǎo)致反應(yīng)體系溫度發(fā)生改變，影響實驗結(jié)果，因此本實驗用分光光度計檢測底物淀粉的剩余量來表示酶的活性?！军c睛】熟知酶的概念以及酶活性的影響因素是解答本題的關(guān)鍵！正確分析圖表內(nèi)容并能正確獲取信息是解答本題的另一關(guān)鍵！8、mmMm375%MM單倍體育種【解析】

根據(jù)題意分析可知：該雌雄異株植物的性別分化受等位基因M、m控制，含基因M的受精卵發(fā)育成雄株，則雌株基因組成為mm。由于嫩莖有綠色、紫色與紅色三種類型，依次由基因aB、ab、a控制，且前者對后者完全顯性，則綠色莖的基因型為aBaB、aBab、aBa共3種，紫色莖的基因型為abab、aba共2種，紅色莖的基因型為aa共1種?！驹斀狻浚?）根據(jù)題意可知，含基因M的受精卵發(fā)育成雄株，即雌株基因組成為mm，由于雌株只能產(chǎn)生m，所以子代不會出現(xiàn)MM，故雄株的基因組成是Mm。綠色莖的基因型為aBaB、aBab、aBa，故綠莖雄株的基因型為aBaBMm、aBabMm、aBaMm共3種。（2）在一個種群中雌雄比例為1∶1，由于雌株基因組成為mm，雄株的基因組成是Mm，則M基因頻率為1/2×1/2=1/4，m的基因頻率為1-1/4=3/4，即75%。（3）含基因M的受精卵發(fā)育成雄株，超雄株的后代全為雄株，說明雄株只產(chǎn)生一種類型的配子M，可推測超雄株的基因型是MM。這種超雄株的培養(yǎng)可能是采用了花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株幼苗，再用秋水仙素處理得到正常二倍體雄株，這種育種方法為單倍體育種?！军c睛】本題考查基因的分離定律、自由組合定律、基因頻率的計算和育種的相關(guān)知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題和解決問題的能力。9、否并沒有發(fā)育成完整個體發(fā)育的全能性HindIII和PstI或EcoRI和PstIB和C30綠色抗原-抗體雜交【解析】

1.細胞的全能性是指已經(jīng)分化的細胞，仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能。目前已經(jīng)證明了植物細胞具有全能性，動物細胞的細胞核具有全能性。通常情況下分化程度越高的細胞全能性越低，生殖細胞的全能性高于體細胞，植物細胞的全能性高于植物細胞。2.哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞。ES細胞具有胚胎細胞的特性，在形態(tài)上，表現(xiàn)為體積小、細胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，即可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞。3.目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原--抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）在圖1治療過程中并未體現(xiàn)細胞的全能性，因為整個過程中并未發(fā)育成完整個體。（2）因為ES細胞具有發(fā)育的全能性，所以在進行基因治療時，選擇ES細胞進行改造，即圖1中的步驟③。（3）據(jù)圖2、圖3中的酶切位點分析可知，SamI不能選用，因為該酶的識別位點位于目的基因內(nèi)部，目的基因兩端的酶切位點在質(zhì)粒當中都包含，而且使用這些酶切割后依然能保留一種標記基因的存在，所以構(gòu)建基因表達載體是可以選擇目的基因兩端的酶切位點進行組合，據(jù)此可知，在對干擾素基因片段和質(zhì)粒進行酶切時，可選用的限制酶組合為HindIII和PstI或EcoRI和PstI。（4）用PCR技術(shù)進行擴增目的基因時。由于DNA復(fù)制過程中子鏈只能由5′向3′方向延伸，又因DNA分子中的兩條鏈是反向平行的，因此可以選為引物的單鏈DNA片段為B和C。由于每個新合成的DNA單鏈中都需要有引物才能合成，因此，若要將1個干擾素基因復(fù)制4次，則需要加入的引物數(shù)量為24×2-2=30個。（5）由于在構(gòu)建基因表達載體時，綠色熒光蛋白基因沒有被破壞，因此，在進行篩選時，可用該基因作為標記基因進行檢測，據(jù)此可知，將步驟③獲得的ES細胞在熒光顯微鏡下觀察時應(yīng)選擇發(fā)綠色熒光的細胞進行體外誘導(dǎo)，因為發(fā)綠光的ES細胞意味著含有干擾素基因?；虮磉_是指基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的過程，所以檢測基因是否表達就是檢測是否合成了相關(guān)的蛋白質(zhì)，這里的蛋白質(zhì)是指干擾素，應(yīng)采用抗原-抗體雜交方法進行檢測?！军c睛】熟知基因工程原理和操作步驟是解答本題的關(guān)鍵，辨圖能力以及對相關(guān)基礎(chǔ)知識的掌握是解答本題的另一關(guān)鍵！10、寄生RNA聚合酶黏性末端或平末端磷酸二酯鍵膠原蛋白酶細胞的接觸抑制傳代血清、血漿【解析】

1、基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。構(gòu)建基因表達載體時需要用同種限制酶切割目的基因和載體，以產(chǎn)生相同的末端，然后用DNA連接酶連接，恢復(fù)被切開的核苷酸之間的磷酸二酯鍵，RNA聚合酶能夠與啟動子識別并結(jié)合催化轉(zhuǎn)錄的進行，這是是外源基因在受體細胞中啟動表達的關(guān)鍵。2、動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。【詳解】（1）腺病毒屬于動物病毒，其無細胞結(jié)構(gòu)，營寄生生活，必須寄生于宿主的活細胞中才能繁殖；用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載體上應(yīng)具有RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位啟動子，這樣才能驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄形成mRNA，最終合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)。（2）構(gòu)建腺病毒載體時，先用同種限制酶對腺病毒DNA和外源基因進行切割，可以獲得相同的黏性末端或平末端，再用DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開的兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）對山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理得到單個成