云南省尋甸縣第五中學2025屆高考生物押題試卷含解析

云南省尋甸縣第五中學2025屆高考生物押題試卷請考生注意：1．請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應位置上，請用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認真閱讀答題紙上的《注意事項》，按規(guī)定答題。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．為研究生長素類似物2，4-D對某植物插枝生根的作用，科研人員獲得了如表所示實驗結(jié)果。下列敘述錯誤的是組別甲組乙組丙組2，4-D濃度（mol/L）10-1010-50生根數(shù)目（條）43822A．本實驗還可以利用根的總長度作為檢測指標B．若欲探究2，4-D對插枝生根的最適濃度，應在10-10到10-5之間設置濃度梯度實驗C．用三種溶液處理插枝的時間應該相同D．該實驗可以說明低濃度的2，4-D促進插枝生根，高濃度的2，4-D抑制插枝生根2．下列關于遺傳物質(zhì)的探索的敘述，正確的是（）A．將加熱殺死的S型菌與R型活菌混合后注射到小鼠體內(nèi)，小鼠體內(nèi)的S型菌都由R型菌轉(zhuǎn)化而來B．將S型菌的DNA、蛋白質(zhì)、多糖等物質(zhì)分別與R型活菌混合培養(yǎng)，培養(yǎng)基中均有R型菌C．赫爾希和蔡斯的實驗中，離心后細菌主要存在于沉淀物中，新形成的噬菌體都帶有35SD．用B型TMV（煙草花葉病毒）的RNA和A型TMV的蛋白質(zhì)重組而成的病毒感染煙草，會得到2種子代病毒3．下列關于細胞核的敘述，錯誤的是（）A．蛋白質(zhì)和脂質(zhì)是核膜的主要成分，核膜具有流動性和選擇透過性B．RNA聚合酶在細胞核內(nèi)合成后，通過核孔運輸?shù)郊毎|(zhì)C．人體內(nèi)蛋白質(zhì)合成旺盛的細胞，核孔的數(shù)量多、核仁體積大D．細胞核是細胞的控制中心，細胞核內(nèi)DNA的含量保持相對穩(wěn)定4．下列四種現(xiàn)象中，可以用右面的數(shù)學模型表示的是（）A．條件適宜、底物充足時反應速率隨酶量變化的情況B．萌發(fā)的種子中自由水與結(jié)合水的比值隨時間變化的情況C．基因型為Aa的個體自交，后代中純合子所占的比例隨自交代數(shù)變化的情況D．在食物充裕、氣候適宜等理想條件下，種群數(shù)量隨時間變化的情況5．下列有關生物進化的敘述，錯誤的是()A．長期的地理隔離可能產(chǎn)生生殖隔離，從而形成新物種B．細菌在接觸青霉素后才產(chǎn)生抗藥性突變個體C．狼和兔子通過相互選擇，達到共同進化D．外來物種入侵可改變生物進化的速度和方向6．某雄性果蠅的Ⅱ號染色體上有基因D和基因E，它們編碼的蛋白質(zhì)前3個氨基酸堿基序列如圖所示（起始密碼子均為AUG）。下列說法錯誤的是（不考慮突變和基因重組）（）A．基因D和基因E轉(zhuǎn)錄時模板鏈不同B．基因D若從原位上斷裂下來則有磷酸二酯鍵的斷裂C．基因E在該果蠅次級精母細胞中的個數(shù)可能為0或2D．減數(shù)分裂過程中等位基因伴隨鏈和β鏈的分開而分離二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）紫藤具有生物量大，生長快，壽命長和能固氮等眾多優(yōu)點，是一種優(yōu)質(zhì)觀賞豆科植物。某興趣小組研究了重金屬Pb污染嚴重地區(qū)的紫藤生長狀況，其中圖甲是提取和分離紫藤葉片中色素實驗，圖乙是研究在不同溫度條件下，紫藤細胞呼吸和光合作用速率的變化情況，請根據(jù)所學知識，回答下列問題：（1）圖甲中分離葉綠體宜采用的方法是________________紫藤葉片中色素主要存在于紫藤細胞中的________________中，圖甲試管能檢測到光合作用的光反應過程________________（填標號），能檢測到細胞呼吸的是________________（填標號）。（2）參照圖乙可知，紫藤可以生存的溫度范圍是____________，圖乙中的“光合作用消耗量”指的是________________（填“表觀光合速率”“真正光合速率”或“條件不足無法判定”）。（3）研究顯示，在重金屬Pb濃度達到1000mg/kg的嚴重污染地區(qū)，紫藤可以正常生長，但在紫藤的葉片和莖干中檢測到的重金屬Pb含量極低，可能的原因是________________（至少寫出兩項）8．（10分）家蠶的性別決定方式為ZW型，家蠶體色正常與油質(zhì)透明為一對相對性狀，油質(zhì)透明由Z染色體上的隱性基因b控制，且在W染色體上沒有其等位基因?；卮鹣铝袉栴}：（1）用正常雄性與油質(zhì)透明雌性雜交得到F1，F(xiàn)1只有一種表現(xiàn)型，則雜交親本的基因型為_____，F(xiàn)1個體自由交配，F(xiàn)2會出現(xiàn)油質(zhì)透明的家蠶，其性別是____性。（2）為了給飼養(yǎng)場提供產(chǎn)絲能力強的雄蠶，科研人員選擇基因型為_________的親本進行雜交，使其子代中雌性均為油質(zhì)透明，雄性均為正常。（3）位于常染色體上的D/d基因，當d基因純合時可使雄蠶性反轉(zhuǎn)成不育的雌蠶，但對雌蠶沒有影響。在考慮D/d基因的情況下，若一只純合正常雄蠶與一只純合油質(zhì)透明雌蠶雜交，所得F1代的雌雄蠶隨機交配，F(xiàn)2代雌雄比例為5︰3，則親本雌蠶的基因型為_____，F(xiàn)2代雌蠶中共有______種基因型，其中不含W染色體的個體所占比例為______。9．（10分）下圖是有關甲?。@隱性基因分別用A、a表示）和乙?。@隱性基因分別用B、b表示）的某家庭遺傳系譜圖，其中部分人員的基因檢測結(jié)果如下表所示，四種條帶各代表基因A、a、B、b中的一種。1號2號5號6號7號8號條帶1————————？條帶2——————條帶3——————————條帶4————————請回答下列問題：（1）代表a基因的是條帶_______；乙病的遺傳方式是________；8號的基因檢測結(jié)果與7號相同的概率是_______。（2）7號再次懷孕，若B超檢查顯示是女性，醫(yī)生建議還需要進一步做兩種病的基因檢測，理由是___________________________________。（3）調(diào)查乙病致病基因在某地的基因頻率可直接由_________（填“男性”“女性”或“整個”）群體中的發(fā)病率得出。10．（10分）蜘蛛絲是自然界中機械性能最好的天然蛋白纖維，其強度高于制作防彈衣的凱夫拉纖維，有廣泛的應用前景，但如何大量獲取蜘蛛絲纖維的問題一直未解決。近期，中國科學家利用基因工程技術成功的在家蠶絲腺細胞中大量表達蜘蛛絲蛋白。（1）在轉(zhuǎn)基因過程中，若利用圖所示質(zhì)粒構(gòu)建基因表達載體，需要用_____________酶來切割目的基因，該切割方法的優(yōu)點是_____________________________________________(答出一點即可)。（2）為獲取大量的蜘蛛絲基因，常采用_______________技術對該基因進行擴增。擴增蜘蛛絲基因前，需根據(jù)目的基因的核苷酸序列設計__________種引物。進行擴增時需先加熱至90～95℃，加入引物后冷卻至55~60℃，以上調(diào)控溫度操作的目的是____________________。（3）載體中的啟動子是____________酶的識別結(jié)合位點，以便于驅(qū)動遺傳信息的表達過程；而載體本身的擴增，需借助于載體上的_________________；載體上的標記基因的作用是_____________________________。（4）研究人員發(fā)現(xiàn)若將蛛絲蛋白31號位的色氨酸替換為酪氨酸，蛛絲韌性可提高50％，這項成果用到的生物工程技術為____________________________。11．（15分）二倍體生物（2n）體細胞中染色體多一條稱為三體（2n+1），染色體少一條稱為單體（2n–1）。三體在減數(shù)分裂時，三條同源染色體中的任意兩條移向一極，另一條移向另一極。單體在減數(shù)分裂時，未聯(lián)會的染色體隨機移向一極。野生煙草（2n=48）種群中普遍存在著各對染色體的相應三體與單體植株，常用來測定基因所在的染色體。現(xiàn)有若干純合綠株（G）、黃綠株（g）的二倍體、三體和單體植株，假設各種配子育性相同，各種基因型的個體均能成活?；卮鹣铝袉栴}：（1）野生煙草中有___________種三體植株。若選用純合的三體與純合的二倍體雜交，能不能只用一代雜交實驗確定G/g基因所在的染色體?___________。（2）若選用單體與二倍體進行一代雜交實驗可以測定G/g基因所在的染色體，請簡要寫出實驗思路、預期實驗結(jié)果及結(jié)論___________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

A、研究生長素類似物2，4-D對植物插枝生根的作用，可以用生根數(shù)或根的總長度作為檢測指標，A正確；B、與濃度為0時比較，2，4-D濃度為10-5mol/L時，對生根表現(xiàn)為抑制，為10-10mol/L時，對生根表現(xiàn)為促進，探究2，4-D對插枝生根的最適濃度，應在0到10-10之間設置濃度梯度實驗，B錯誤；C、該實驗自變量為2，4-D濃度，時間為無關變量，三種溶液處理插枝的時間應該相同，C正確；D、該實驗可以說明低濃度的2，4-D促進插枝生根，高濃度的2，4-D抑制插枝生根，D正確。故選B。2、B【解析】

肺炎雙球菌體外轉(zhuǎn)化實驗與噬菌體侵染細菌實驗的比較：肺炎雙球菌體外轉(zhuǎn)化實驗噬菌體侵染細菌實驗不同點方法不同直接分離：分離S型細菌的DNA、多糖、蛋白質(zhì)等，分別與R型菌混合培養(yǎng)同位素標記：分別用32P和35S標記DNA和蛋白質(zhì)結(jié)論不同證明DNA是遺傳物質(zhì)，蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)證明DNA是遺傳物質(zhì)，不能證明蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)（因蛋白質(zhì)沒有進入細菌體內(nèi)）相同點①均使DNA和蛋白質(zhì)區(qū)分開，單獨處理，觀察它們各自的作用；②都遵循了對照原則；③都能證明DNA是遺傳物質(zhì)，但都不能證明DNA是主要的遺傳物質(zhì)【詳解】A、將加熱殺死的S型細菌與R型活菌混合后注射到小鼠體內(nèi)，小鼠體內(nèi)的S型細菌一部分是由S型細菌轉(zhuǎn)化而來，一部分是由轉(zhuǎn)化后的R型細菌分裂而來，A錯誤；B、將S型細菌的DNA、蛋白質(zhì)、多糖等物質(zhì)分別與R型活菌混合培養(yǎng)，培養(yǎng)基中均有R型菌，B正確；C、赫爾希和蔡斯的實驗中，離心后細菌主要存在于沉淀物中，新形成的噬菌體都不含35S，C錯誤；D、用B型TMV（煙草花葉病毒）的RNA和A型TMV的蛋白質(zhì)重組而成的病毒感染煙草，會得到B型TMV一種病毒，D錯誤。故選B。3、B【解析】

基因表達是指將來自基因的遺傳信息合成功能性基因產(chǎn)物的過程，基因表達產(chǎn)物通常是蛋白質(zhì)。基因表達包括轉(zhuǎn)錄和翻譯。轉(zhuǎn)錄過程由RNA聚合酶進行，以DNA為模板，產(chǎn)物為RNA。RNA聚合酶沿著一段DNA移動，留下新合成的RNA鏈。翻譯過程是以信使RNA（mRNA）為模板，指導合成蛋白質(zhì)的過程。細胞核是真核細胞內(nèi)最大、最重要的細胞結(jié)構(gòu)，是細胞遺傳與代謝的調(diào)控中心，是真核細胞區(qū)別于原核細胞最顯著的標志之一（極少數(shù)真核細胞無細胞核，如哺乳動物的成熟的紅細胞，高等植物成熟的篩管細胞等）。核孔是蛋白質(zhì)、RNA等大分子出入的通道。【詳解】A、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)（磷脂）是核膜的主要成分，核膜具有流動性和選擇透過性，A正確；B、RNA聚合酶是蛋白質(zhì)，在核糖體上合成，B錯誤；C、蛋白質(zhì)的合成包括轉(zhuǎn)錄和翻譯，轉(zhuǎn)錄主要在細胞核中進行，RNA通過核孔進入細胞質(zhì)翻譯，且核仁與核糖體的形成有關，因此人體內(nèi)蛋白質(zhì)合成旺盛的細胞，核孔的數(shù)量多、核仁體積大，C正確；D、細胞核內(nèi)的DNA是遺傳物質(zhì)，細胞核是細胞的控制中心，細胞核內(nèi)DNA的含量保持相對穩(wěn)定，D正確。故選B。4、B【解析】

分析曲線圖：在一定范圍內(nèi)，隨著橫軸因素的升高，縱軸所代表的數(shù)據(jù)逐漸增大；超過一定范圍后，隨著橫軸因素的升高，縱軸所代表的數(shù)據(jù)不再升高，說明此時存在某種限制因素?！驹斀狻緼、條件適宜、底物充足時反應速率隨酶量的變化是呈正比例關系，A錯誤；B、種子萌發(fā)過程中，細胞代謝逐漸增強，因此在一定的范圍內(nèi)，自由水與結(jié)合水的比值隨時間延長而升高，該圖可以表示萌發(fā)的種子中自由水含量隨時間變化的情況，B正確；C、基因型為Aa的個體自交，后代中純合子所占的比例起點應該為0，C錯誤；D、在食物（養(yǎng)料）充足和空間條件充裕、氣候適宜的理想條件下，種群數(shù)量呈指數(shù)增長，呈現(xiàn)J型，D錯誤。故選B。【點睛】本題結(jié)合曲線圖，考查探究影響酶活性的因素、水的存在形式、自交、種群數(shù)量增長等知識，要求考生識記相關知識，能運用所學的知識準確判斷各選項。5、B【解析】

本題考查現(xiàn)代生物進化理論，考查對現(xiàn)代生物進化理論的理解。明確生物變異方向和進化方向的關系是解答本題的關鍵?！驹斀狻块L期的地理隔離可能使不同種群向不同方向進化，產(chǎn)生生殖隔離，從而形成新物種，A項正確；細菌在接觸青霉素之前個體之間就存在抗藥性的差異，青霉素的作用只是消滅不抗藥的個體，使抗藥的個體保留下來，B項錯誤；狼和兔子通過相互選擇，共同進化，各自發(fā)展自己的特征，C項正確；外來物種入侵會擠壓本地物種的生存空間，使本地生物多樣性減低，改變生物進化的速度和方向，D項正確。6、D【解析】

分析題圖：某雄性果蠅的Ⅱ號染色體上有基因D和基因E，它們編碼各自蛋白質(zhì)的前3個氨基酸的DNA序列如圖，起始密碼子為AUG，可推知基因D以β鏈為模板合成mRNA，而基因E以鏈為模板合成mRNA?！驹斀狻緼、根據(jù)起始密碼子為AUG可以確定基因D轉(zhuǎn)錄時模板鏈是β鏈，基因E是α鏈，A正確；B、基因D若從原位上斷裂下來伴隨四個磷酸二酯鍵的斷裂，B正確；C、不考慮突變和基因重組，基因E在該果蠅體細胞中未復制時有1或2個，此時該果蠅的基因型為Ee或EE，因此初級精母細胞中基因E復制后有2或4個，次級精母細胞中含同源染色體中的一條，這條染色體上可能含基因e，則基因E的個數(shù)為0，這條染色體上可能含基因E，則基因E的個數(shù)為2，C正確；D、減數(shù)分裂過程中等位基因分離是隨著同源染色體分離，并沒有α鏈和β鏈的分開，D錯誤。故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、離心（或差速離心）類囊體膜（或葉綠體）BA5～35℃真正光合速率重金屬Pb富集于紫藤的地下部分、紫藤能分解吸收進入體內(nèi)的重金屬Pb、紫藤能拒絕吸收重金屬Pb【解析】

1.葉綠體是植物光合作用的場所．光合作用根據(jù)是否需要光，分為光反應階段和暗反應階段，其中光反應發(fā)生在葉綠體的類囊體薄膜上，暗反應發(fā)生在葉綠體基質(zhì)中。2.圖乙中，隨溫度的升高，細胞呼吸產(chǎn)生量逐漸增加，但光合作用消耗量先增加后減少。【詳解】（1）分離細胞器的方法是差速離心法，故圖甲中分離葉綠體宜采用的方法是離心（或差速離心）；紫藤葉片中色素主要存在于紫藤細胞中的葉綠體的類囊體薄膜中；B試管中存在完整的葉綠體，光反應需要色素吸收光，且需要ADP和磷酸等原料，故圖甲試管能檢測到光合作用的光反應過程B，能檢測到細胞呼吸的是A分離出葉綠體的細胞質(zhì)。（2）參照圖乙可知，5～35℃過程中，紫藤的光合作用消耗量都大于細胞呼吸產(chǎn)生量，故可以生存的溫度范圍是5～35℃；圖乙中的“光合作用消耗量”指光合作用消耗二氧化碳的量，是真正光合速率。（3）研究顯示，在重金屬Pb濃度達到1000mg/kg的嚴重污染地區(qū)，紫藤可以正常生長，但在紫藤的葉片和莖干中檢測到的重金屬Pb含量極低，可能的原因是紫藤能拒絕吸收重金屬Pb或者重金屬Pb進入紫藤后富集于紫藤的地下部分、紫藤能分解吸收進入體內(nèi)的重金屬Pb?！军c睛】本題綜合考查光合作用的過程，影響因素及相關實驗，屬于對理解、應用層次的考查，影響光合速率的條件：光照強度、溫度和空氣中二氧化碳濃度。8、ZBZB，ZbW雌ZbZb×ZBWddZbW81/5【解析】

某種家蠶的性別決定是ZW型，雄蠶和雌蠶的性染色體組成分別是ZZ和ZW，由題目中的信息可知，油質(zhì)透明雄性的基因型為ZbZb，正常雄性的基因型為ZBZB和ZBZb，油質(zhì)透明雌性基因型為ZbW，正常雌性基因型為ZBW，根據(jù)題目中的問題進行分析判斷才能做出準確回答?！驹斀狻浚?）用正常雄性與油質(zhì)透明雌性雜交得到F1，F(xiàn)1只有一種表現(xiàn)型，說明親本雄性的基因型為ZBZB，雌性為ZbW；F1個體的基因型為ZBZb和ZBW，表現(xiàn)型為雌雄都為正常，F(xiàn)1個體隨機交配得F2中出現(xiàn)油質(zhì)透明的基因型為ZbW，其性別為雌性。（2）為了給飼養(yǎng)場提供產(chǎn)絲能力強的雄蠶，則應該通過雜交獲得油質(zhì)透明的雌蠶（ZbW），選擇油質(zhì)透明的雄蠶（ZbZb）和正常雌蠶（ZBW）雜交，這樣后代雄蠶都是正常（ZBZb），雌蠶都是油質(zhì)透明（ZbW）。（3）由題意知，D（d）、B（b）分別位于2對同源染色體上，因此遵循自由組合定律，讓一只純合正常雄蠶與一只純合油質(zhì)透明雌蠶雜交，所得F1代的雌雄蠶隨機交配，如果不考慮D/d，F(xiàn)2代雌雄比例為1︰1，而考慮D/d基因，F(xiàn)2代雌雄比例為5︰3，說明有1/8雄蠶發(fā)生性逆轉(zhuǎn)，dd的概率是1/4，子一代的基因型是Dd×Dd，親代雄蠶基因型是DDZBZB，雌蠶基因型是ddZbW；子一代的基因型是DdZBZb、DdZBW，子二代雌蠶基因型是D_ZBW、D_ZbW、ddZBW、ddZbW、ddZBZ-，8種；不含W染色體的雌蠶個體是ddZBZ-，占2/10=1/5?！军c睛】本題旨在考查學生理解基因分離定律和自由組合定律的實質(zhì)，ZW型的性別決定和伴性遺傳，基因?qū)π誀畹挠绊懀盐罩R的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡，并應用相關知識結(jié)合題干信息進行推理、綜合解答問題。9、3伴X染色體隱性遺傳2/36號（AaXbY）與7號（AaXBXb）生育的女孩可能患乙病也可能不患乙病，同時可能患甲病也可能不患甲病男性【解析】

從系譜圖看出，5號是甲病患者，且為女性，其父母均不患甲病，故甲病是常染色體隱性遺傳病；且1號、2號均是甲病基因攜帶者，即基因型為Aa，另據(jù)基因檢測帶譜，1號與2號都含有條帶1和條帶3，結(jié)合5號的基因檢測帶譜，判斷條帶1代表A基因、條帶3代表a基因；5號同時具有B和b基因，但表現(xiàn)正常，說明乙病是隱性遺傳病，2號只有B基因，其兒子即6號不患乙病，進一步說明乙病是伴X染色體隱性遺傳病?！驹斀狻浚?）根據(jù)以上分析可知，條帶1代表A基因、條帶3代表a基因；乙病的遺傳方式是伴X染色體隱性遺傳??；6號（AaXbY）與7號（AaXBXb）所生的8號表現(xiàn)正常，基因型可能為A_XBXb，因此與7號基因檢測結(jié)果相同即基因型相同的概率是2/3。（2）6號（AaXbY）與7號（AaXBXb）生育的女孩，甲病與性別無關，可能患甲病也可能不患甲病，就乙病而言，女孩可能患乙病也可能不患乙病，因此還需要進一步做兩種病的基因檢測。（3）乙病是伴X染色體隱性遺傳病，其基因頻率等于男性群體中的發(fā)病率。【點睛】本題考查基因的分離定律和自由組合定律、人類遺傳病及其監(jiān)測和預防等，考查學生的獲取信息的能力和理解能力。10、XbaI和SacI防止目的基因自身環(huán)化、防止目的基因反向連接PCR2使DNA解鏈，然后使引物結(jié)合到互補DNA鏈上RNA聚合酶復制原點重組DNA的鑒別與選擇蛋白質(zhì)工程【解析】

1、基因工程的操作步驟包括：目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。其中基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟?；虮磉_載體的構(gòu)建：①過程：一般用同一種限制酶切割目的基因和運載體，再用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子。②目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達和發(fā)揮作用。③基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因。（1）啟動子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始；（2）終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束；（3）標記基因便于目的基因的鑒定和篩選。2、PCR擴增技術：PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構(gòu)成：（1）模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應作準備。（2）模板DNA與引物的退火（復性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合。（3）引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的作用下，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈。【詳解】（1）識圖分析可知，構(gòu)建基因表達載體時，目的基因需要插入到啟動子和終止子之間，圖中啟動子和終止子之間存在XbaI和SacI的酶切位點，因此需要用XbaI和SacI限制酶切割目的基因，以產(chǎn)生與質(zhì)粒相同的末端，相比用同一種酶進行酶切，用兩種酶切割可以防止目的基因自身環(huán)化或防止目的基因反向連接。（2）為獲取大量的蜘蛛絲基因，常采用PCR擴增技術擴增目的基因。利用PCR技術擴增蜘蛛絲基因前，需根據(jù)目的基因的核苷酸序列設計2種引物分別與2條模板鏈結(jié)合；進行PCR時需加熱至90~95℃然后冷卻至55~60℃，此操作的目的是使DNA解鏈，然后使引物結(jié)合到互補DNA鏈上。（3）基因表達載體中的啟動子能夠與RNA聚合酶識別和結(jié)合，才能驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程，而載體本身的擴增，需借助于載體上的復制原點進行，載體上的標記基因的作用是鑒別與篩選含有重組DNA的受體細胞。（4）研究人員發(fā)現(xiàn)若將蛛絲蛋白31號位的色氨酸替換為酪氨酸，蛛絲韌性可提高50％，這是對現(xiàn)