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出口食品過敏原成分檢測第15部分:實時熒光PCR方法檢測芹菜成分2013-03-01發(fā)布2013-09-16實施 工出口食品過敏原成分檢測第15部分:GB/T27403實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品分子生物學檢測致敏原又稱過敏原或變態(tài)反應原,是指能夠使人發(fā)生過敏的抗原,芹菜是光敏性蔬菜,過量食用標準中致敏原芹菜成分即指芹菜特異性DNA片段。用10%鹽酸調(diào)pH至8.0,121℃,高壓滅菌20min,備用。25.3蛋白酶K(20mg/μL)。3盒提取模板DNA。取5μLDNA溶液加ddH?O梯度稀釋至1mL,使用核酸蛋白分析儀或紫外分光光度計測260nmc=A?6o×N×50/1000…………(1)A?6o——260nm處的吸光值;7.4.1實時熒光PCR反應體系c)如35.0<Ct值<40.0,則重復一次。如再次擴增后Ct值仍為<40.0,則判定被檢樣品陽性;如再次擴增后Ct值≥40.0,則判定被檢樣品陰性。致敏原芹菜成分的基因擴增靶標參考序列檢測過程中防止交叉污染的措施按照GB/T27403中的規(guī)定執(zhí)行。TTTGATCCACCGACTTACAGTGGTTTGAGATATATATTACATGCCAGTGTTATGTTTGGATTACGGTGTGATGAGTCAGCGTTATCTGT
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