成都龍泉中學(xué)2025屆高考生物五模試卷含解析

成都龍泉中學(xué)2025屆高考生物五模試卷注意事項：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑，如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號?；卮鸱沁x擇題時，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．細(xì)胞衰老和干細(xì)胞耗竭是機體衰老的重要標(biāo)志，轉(zhuǎn)錄激活因子YAP是發(fā)育和細(xì)胞命運決定中發(fā)揮重要作用的蛋白質(zhì)。研究人員利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)和定向分化技術(shù)來產(chǎn)生YAP特異性缺失的人胚胎干細(xì)胞，YAP缺失的干細(xì)胞會表現(xiàn)出嚴(yán)重的加速衰老。下列敘述錯誤的是（）A．推測YAP在維持人體干細(xì)胞年輕態(tài)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用B．轉(zhuǎn)錄激活因子YAP的合成需要在核糖體上進行C．YAP缺失的干細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能會發(fā)生改變D．CRISPR/Cas9基因編輯過程中，基因中的高能磷酸鍵會斷裂2．基因流是指生物個體從其發(fā)生地分散出去而導(dǎo)致不同種群之間基因交流的過程，可發(fā)生在同種或不同種的生物種群之間。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．鄰近的種群間基因頻率有較大差異，說明它們之間不存在基因流B．基因流發(fā)生的時間和發(fā)生的強度將會顯著影響物種形成的概率C．不同物種間的基因流可以極大地豐富自然界生物多樣化的程度D．種群之間的基因流被地理隔離所阻斷是形成新物種的一種途徑3．下列關(guān)于細(xì)胞生命歷程的敘述錯誤的是（）A．人體造血干細(xì)胞分化為各種血細(xì)胞的過程是不可逆的B．細(xì)胞分化會導(dǎo)致mRNA的種類和數(shù)量發(fā)生改變C．細(xì)胞凋亡的速率與其功能有關(guān)，白細(xì)胞凋亡的速率比紅細(xì)胞的慢4．為探究酵母菌的細(xì)胞呼吸，將酵母菌破碎并進行差速離心處理，得到細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體，與酵母菌分別裝入A～F試管中，加入不同的物質(zhì)，進行了如下實驗（見下表）。據(jù)實驗分析以下說法正確的是（）注：“＋”表示加入了適量的相關(guān)物質(zhì)，“－”表示未加入相關(guān)物質(zhì)。A．B、C、E試管會產(chǎn)生CO2和H2OB．根據(jù)試管B、D、F的實驗結(jié)果可判斷出酵母菌進行無氧呼吸的場所C．在同一細(xì)胞內(nèi)無氧呼吸能夠同時產(chǎn)生酒精和乳酸D．氧氣的產(chǎn)生發(fā)生在線粒體內(nèi)膜5．圖中是以每個營養(yǎng)級生物的數(shù)量多少而繪制的金字塔，其中1、2、3分別代表第一、二、三個營養(yǎng)級的生物，下面哪條食物鏈與該金字塔相符（）①草②樹③昆蟲④兔⑤鳥⑥狼A．②→③→⑤ B．①→④→⑥C．①→③→⑥ D．③→④→⑥6．實驗材料的選擇直接影響實驗結(jié)果，甚至決定實驗的成敗。下列相關(guān)說法中正確的是（）A．用紫色洋蔥鱗片葉外表皮作實驗材料，“觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布”B．恩格爾曼使用小球藻作實驗材料，證實了光合作用的發(fā)生場所是葉綠體C．菠菜葉的下表皮細(xì)胞含有豐富的葉綠素，不用染色就可以觀察到葉綠體D．觀察植物細(xì)胞的減數(shù)分裂時，不選用已開放豌豆花的花藥作實驗材料7．科學(xué)研究表明，一定范圍內(nèi)溫度的變化會對細(xì)胞某些生理過程帶來一定的影響。下列有關(guān)溫度對細(xì)胞影響的說法錯誤的是（）A．一定范圍內(nèi)升高溫度會使水分子通過細(xì)胞膜的速率增大B．被動運輸不消耗能量，因此低溫不會影響被動運輸速率C．在探究溫度對水分子通過半透膜速率的影響時至少需要設(shè)三組實驗D．胞吞、胞吐過程受溫度變化的影響8．（10分）研究表明，植物頂端優(yōu)勢狀態(tài)下發(fā)現(xiàn)不同植物激素對側(cè)芽生長的影響不同（如下表所示）。下列相關(guān)敘述正確的是（）組別A組в組C組處理方式不作處理細(xì)胞分裂素處理側(cè)芽赤霉素處理頂芽側(cè)芽生長情況生長受抑制抑制作用解除抑制作用加強A．A、C組比較，用赤霉素處理頂芽能使頂端優(yōu)勢現(xiàn)象不明顯B．A組側(cè)芽生長受抑制是因為側(cè)芽細(xì)胞不能產(chǎn)生生長素C．A、B組比較，表明細(xì)胞分裂素與生長素的生理作用相反D．A組側(cè)芽受到抑制是因為頂芽產(chǎn)生的生長素運輸?shù)絺?cè)芽積累過多二、非選擇題9．（10分）生長素可以促進扦插枝條的生根。研究人員使用不同量的生長素處理某植物枝條，每個用量處理的枝條數(shù)都是50個。觀察兩個月后的存活枝條數(shù)、生根枝條數(shù)以及首次出根所需天數(shù)，結(jié)果如圖所示。請回答下列問題：（1）生長素的化學(xué)本質(zhì)是_______________。植物激素除了生長素以外，還有細(xì)胞分裂素、乙烯和_______________等四類。（2）由圖可知，不用生長素處理也會有1/5左右的枝條生根，但與其他組相比，較明顯的區(qū)別是_______________________。（3）若要確定生長素促進該植物枝條生根效果最佳的用量，還需要觀測的指標(biāo)包括_____________(答出兩點即可)。（4）在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，經(jīng)常施用人工合成的植物生長調(diào)節(jié)劑。在施用時，要綜合考慮施用目的、價格、施用是否方便以及_____________(答出兩條即可)等因素，還要考慮施用時間、方式、濃度、次數(shù)及處理部位等問題。10．（14分）豬感染豬博卡病毒會導(dǎo)致嚴(yán)重腹瀉。豬博卡病毒DNA是單鏈，長度僅為1．2kb，但能編碼4種蛋白質(zhì)（NSl、NPl、VP2、VP1），該病毒DNA與編碼的蛋白質(zhì)對應(yīng)關(guān)系如下圖。（1）豬博卡病毒DNA雖短，但可以編碼4種蛋白質(zhì)，據(jù)圖分析原因是___________。（2）基因工程制備疫苗，獲取NS1基因片段采用PCR技術(shù)的目的是___________，以便于與載體DNA連接。（3）基因工程的核心步驟是___________，可用___________將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞。若在分子水平上檢測基因是否表達，可采用___________方法。（4）該基因工程制備的疫苗是否有效，個體生物學(xué)水平上的鑒定過程是：___________。11．（14分）基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來的一種分子生物學(xué)技術(shù)。請結(jié)合圖示回答下列有關(guān)問題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。（1）將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構(gòu)建打靶載體（基因表達載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術(shù)將打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機會發(fā)生同源重組。（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過__________技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過動物細(xì)胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時不用的細(xì)胞進行__________保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細(xì)胞”或“生殖細(xì)胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。12．酶是細(xì)胞合成的生物催化劑。隨著科技的發(fā)展，酶已走近人們的生產(chǎn)和生活。請回答下列有關(guān)問題：（1）在工業(yè)生產(chǎn)果汁時，常常利用果膠酶破除果肉細(xì)胞壁以提高出汁率。果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱，包括______________________________(至少寫出兩個)等。（2）加酶洗衣粉是指含有_______________的洗衣粉。對于衣服上的血漬或奶漬，清洗時不能使用開水，原因是_______________。（3）酶反應(yīng)速度可以用單位時間內(nèi)、單位體積中_______________來表示。影響酶活性的外界條件包括pH、_______________等。在探究溫度或pH對酶活性的影響時，是否需要設(shè)置對照實驗?如需要如何設(shè)置?_______________。（4）工業(yè)生產(chǎn)中，若把酶固定在不溶于水的載體上可以被反復(fù)利用。一般來講，酶更適合采用_______________和物理吸附法固定化。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】

基因編輯技術(shù)是一種精準(zhǔn)改變目標(biāo)DNA序列的技術(shù)，其原理是使基因發(fā)生定向突變。轉(zhuǎn)錄激活因子YAP是發(fā)育和細(xì)胞命運決定中發(fā)揮重要作用的蛋白質(zhì)，YAP缺失的干細(xì)胞會表現(xiàn)出嚴(yán)重的加速衰老。【詳解】A、根據(jù)“YAP缺失的干細(xì)胞會表現(xiàn)出嚴(yán)重的加速衰老”，可推測YAP在維持人體干細(xì)胞年輕態(tài)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，A正確；B、轉(zhuǎn)錄激活因子YAP是一種蛋白質(zhì)，其合成場所是核糖體，B正確；C、“YAP缺失的干細(xì)胞會表現(xiàn)出嚴(yán)重的加速衰老”，而細(xì)胞衰老過程中形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能會發(fā)生改變，所以YAP缺失的干細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能會發(fā)生改變，C正確；D、CRISPR/Cas9基因編輯過程中，基因中的磷酸二酯鍵會斷裂，D錯誤。故選D。2、A【解析】

現(xiàn)代生物進化理論的內(nèi)容：

種群是生物進化的基本單位，生物進化的實質(zhì)是種群基因頻率的改變。突變和基因重組、自然選擇及隔離是物種形成過程的三個基本環(huán)節(jié)，通過它們的綜合作用，種群產(chǎn)生分化，最終導(dǎo)致新物種形成。隔離是新物種形成的必要條件。注意理解題意中基因流的含義是解題的關(guān)鍵?！驹斀狻緼、由題意可知，基因流可發(fā)生在同種或不同種的生物種群之間，所以鄰近的種群間可能存在基因流，A錯誤；B、生物進化的實質(zhì)是種群基因頻率的改變。故基因交流發(fā)生的時間和發(fā)生的強度將會顯著影響物種形成的概率，B正確；C、不同物種間的基因交流可形成多種多樣的基因型，為自然選擇提供了更多的材料，極大地豐富了自然界生物多樣化的程度，C正確；D、種群之間的基因交流被地理隔離所阻斷是形成新物種的一種途徑，除此外，不經(jīng)過地理隔離也可能會形成新物種，如多倍體的形成，D正確。故選A。3、C【解析】

1、細(xì)胞分化在一個有性繁殖的多細(xì)胞生物個體中，胚胎細(xì)胞分裂后的未定型細(xì)胞或簡單可塑性細(xì)胞，在形態(tài)和化學(xué)組成上向?qū)Ｒ恍曰蛱禺愋苑较蜣D(zhuǎn)化，演化成特定的細(xì)胞類型的這一過程。2、細(xì)胞凋亡指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同，細(xì)胞凋亡不是一件被動的過程，而是主動過程，它涉及一系列基因的激活、表達以及調(diào)控等的作用，它并不是病理條件下，自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動爭取的一種死亡過程?！驹斀狻緼、細(xì)胞分化過程一般是不可逆的，人體造血干細(xì)胞分化為各種血細(xì)胞的過程是不可逆的，A正確；B、細(xì)胞分化產(chǎn)生的不同細(xì)胞內(nèi)的部分基因會選擇性表達，導(dǎo)致mRNA的種類和數(shù)量發(fā)生改變，B正確；C、白細(xì)胞凋亡的速率比紅細(xì)胞快，是由于細(xì)胞凋亡的速度與其自身功能密切相關(guān)，C錯誤；故選C?！军c睛】結(jié)合細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的內(nèi)容分析選項。4、B【解析】

酵母菌在有氧條件下進行有氧呼吸，無氧條件下進行無氧呼吸。有氧呼吸三個階段的場所分別為細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體基質(zhì)、線粒體內(nèi)膜，無氧呼吸兩個階段都發(fā)生細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中；由表格可知，A試管中不能進行呼吸作用，B試管中進行了無氧呼吸，能夠產(chǎn)生酒精和CO2，C試管中能夠進行呼吸作用的第二、三階段，能產(chǎn)生水和CO2，D試管中不能進行呼吸作用，E試管中能進行有氧呼吸，F(xiàn)試管中能進行無氧呼吸?！驹斀狻緼、C、E試管中能進行有氧呼吸，產(chǎn)生CO2和H2O，B試管進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2，不能產(chǎn)生水，A錯誤；B、研究酵母菌無氧呼吸的場所，需要在無氧條件下進行對照實驗，故根據(jù)B、D、F試管的實驗結(jié)果可判斷酵母菌無氧呼吸的場所，B正確；C、同一細(xì)胞內(nèi)無氧呼吸僅能產(chǎn)生酒精或乳酸的一種，C錯誤；D、氧氣的消耗發(fā)生在線粒體內(nèi)膜，酵母菌不能進行光合作用不能產(chǎn)生氧氣，D錯誤；故選B。5、A【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示為以每個營養(yǎng)級生物的數(shù)量多少而繪制的金字塔，其中a、b、c分別代表第一、二、三營養(yǎng)級的生物，即第二營養(yǎng)級生物數(shù)量最多，其次是第三營養(yǎng)級，而生產(chǎn)者數(shù)量最少。【詳解】A、在②→③→⑤這條食物鏈中，昆蟲的數(shù)量最多，其次是鳥，最后是樹，與題圖相符，A正確；B、在①→④→⑥這條食物鏈中，草的數(shù)量多于兔，與題圖不符合，B錯誤；C、在①→③→⑥這條食物鏈中，草的數(shù)量多于昆蟲，與題圖不符合，C錯誤；D、在③→④→⑥中起點是昆蟲，昆蟲屬于第二營養(yǎng)級，不符合食物鏈的寫法，食物鏈必須從第一營養(yǎng)級開始，且位于第一營養(yǎng)級的生物必須是生產(chǎn)者，D錯誤。故選A。6、D【解析】

“觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布”實驗，應(yīng)用甲基綠和吡羅紅對細(xì)胞染色，故實驗材料應(yīng)選擇無色或色淺的。水綿的葉綠體為帶狀，恩格爾曼通過利用水綿和好氧細(xì)菌進行實驗證實了光合作用的場所是葉綠體。表皮細(xì)胞不含葉綠體?！驹斀狻緼、“觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布”應(yīng)選擇無色或色淺的細(xì)胞，紫色洋蔥鱗片葉外表皮含紫色的大液泡，不適合做該實驗的實驗材料，A錯誤；

B、恩格爾曼利用水綿證實了光合作用的場所是葉綠體，B錯誤；C、菠菜葉下表皮細(xì)胞不含葉綠體，C錯誤；

D、豌豆是自花傳粉、閉花授粉的植物，其減數(shù)分裂發(fā)生在開花前，因此觀察植物細(xì)胞的減數(shù)分裂，不可選用開放的豌豆花的花藥作為實驗材料，D正確。

?故選D。7、B【解析】

本題考查溫度對細(xì)胞生理過程的影響。一定范圍內(nèi)升高溫度會使膜的流動性增強，物質(zhì)運輸速率增強。自由擴散和協(xié)助擴散雖然不消耗能量，但溫度會影響磷脂和蛋白質(zhì)的運動，從而影響被動運輸速率。胞吞、胞吐需要能量，溫度會影響呼吸酶的活性，改變呼吸速率，進而影響胞吞、胞吐。【詳解】A、溫度會影響細(xì)胞膜的流動性，在一定范圍內(nèi)升高溫度，會加快水分子通過細(xì)胞膜的速率，降低溫度則會減慢水分子通過細(xì)胞膜的速率，A正確；B、對自由擴散和協(xié)助擴散來說，低溫會影響細(xì)胞膜的流動性，從而影響物質(zhì)運輸速率，B錯誤；C、在探究溫度對水分子通過半透膜速率的影響時，至少需要設(shè)置高溫組、低溫組和處于常溫狀態(tài)下的對照組，C正確；D、胞吞、胞吐過程需要消耗能量，而溫度可影響細(xì)胞呼吸速率，從而影響能量供應(yīng)，故胞吞、胞吐過程受溫度變化的影響，D正確。故選B。【點睛】實驗遵循的三個基本原則：對照、單一變量和等量原則。8、D【解析】

根據(jù)表格信息可知，植物在頂端優(yōu)勢狀態(tài)下側(cè)芽生長受抑制，用細(xì)胞分裂素處理側(cè)芽后，側(cè)芽生長的抑制作用被解除，說明細(xì)胞分裂素可解除生長素對側(cè)芽的抑制作用，用赤霉素處理頂芽，側(cè)芽的抑制作用增強，說明赤霉素能加強生長素對側(cè)芽的抑制作用。【詳解】A、C組用赤霉素處理頂芽后，側(cè)芽被抑制作用加強，頂端優(yōu)勢現(xiàn)象比A組更明顯，A錯誤；BD、A組側(cè)芽生長受抑制是由于頂芽產(chǎn)生的生長素運輸?shù)絺?cè)芽，在側(cè)芽處積累，使側(cè)芽處的生長素濃度過高而抑制了側(cè)芽的生長，并不是側(cè)芽不產(chǎn)生生長素，B錯誤；D正確；C、A組和B組比較，可說明細(xì)胞分裂素能緩解生長素對側(cè)芽的抑制作用，但不能說明細(xì)胞分裂素和生長素的生理作用相反，C錯誤。故選D。二、非選擇題9、吲哚乙酸赤霉素、脫落酸首次出根所需天數(shù)較多每個枝條的生根數(shù)量、根的長度藥物效果、藥物毒性、藥物殘留【解析】

根據(jù)題意可知，實驗的自變量是不同的生長素用量，因變量有首次出根所需天數(shù)，第60天存活的枝條數(shù)，第60天生根的枝條數(shù)。【詳解】（1）植物生長素的化學(xué)本質(zhì)是吲哚乙酸。植物激素包括生長素、細(xì)胞分裂素、赤霉素、乙烯和脫落酸五類。（2）實驗中不用生長素處理也有部分枝條生根，原因是枝條自身含有內(nèi)源生長素，但是含量較少，積累到生根所需濃度時間長，故首次出根所需天數(shù)較多。（3）一定量的生長素能夠促進枝條生根，若要確定生根效果最佳的用量，還需要觀測的指標(biāo)包括每個枝條的生根數(shù)量、根的長度等。（4）在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，施用生長調(diào)節(jié)劑時，要綜合考慮施用目的、藥物效果、藥物毒性、藥物殘留、價格和施用是否方便等因素。還要考慮施用時間、方式、濃度、次數(shù)及處理部位等問題?！军c睛】插條本身含有少量的內(nèi)源生長素，故不用生長素處理也會生根。10、翻譯蛋白質(zhì)的基因片段存在重疊，保證了翻譯蛋白質(zhì)所需的對應(yīng)基因長度獲取限制性核酸內(nèi)切酶位點基因表達載體的構(gòu)建顯微注射法抗原-抗體雜交讓豬博卡病毒感染豬，觀察其是否出現(xiàn)嚴(yán)重腹瀉【解析】

基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲?。虎诨虮磉_載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測與表達。從分子水平上檢測目的基因的方法：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)?！驹斀狻浚?）據(jù)圖分析，編碼VP1和VP2蛋白質(zhì)的基因存在重疊片段，因此雖然豬博卡病毒DNA比較短，但是基因片段存在重疊，保證了翻譯蛋白質(zhì)所需的對應(yīng)基因長度。（2）PCR技術(shù)擴增目的基因時需要設(shè)計引物，往往在引物設(shè)計上含有限制性核酸內(nèi)切酶的位點，這樣便于目的基因和載體DNA連接。（3）基因工程的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建，需要的酶是限制酶和DNA連接酶。通常用顯微注射技術(shù)將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞。基因表達的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，因此要在分子水平上檢測目的基因在受體細(xì)胞中是否成功表達，可采用抗原-抗體雜交方法。（4）從個體水平檢測疫苗是否有效，直接讓豬博卡病毒感染豬，觀察其是否出現(xiàn)嚴(yán)重腹瀉?！军c睛】本題側(cè)重考查考生的記憶和理解能力，對考生的獲取信息和分析問題的能力也有所考查，需要考生能夠準(zhǔn)確識記基因工程的一般步驟，并能理解其原理。11、載體（或質(zhì)粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）生殖細(xì)胞【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）分析題圖可知，將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質(zhì)粒）上，構(gòu)建打靶載體（基因表達載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過顯微注射技術(shù)導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡，因此為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入