《中級(jí)食品檢驗(yàn)工 》課件-實(shí)訓(xùn)任務(wù)1 培養(yǎng)基的配制

實(shí)訓(xùn)任務(wù)1培養(yǎng)基的配制中級(jí)食品檢驗(yàn)工目錄二

培養(yǎng)基的種類一

原理三

培養(yǎng)基的主要成分四

培養(yǎng)基的制備大多數(shù)微生物均可用人工方法培養(yǎng)。以人工方法配制成的適合微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)稱為培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長素以及水分等。另外，培養(yǎng)基還應(yīng)具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。一、原理二、培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基按物理狀態(tài)分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基；按組成成分分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基；按作用分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、活體培養(yǎng)基及厭氧培養(yǎng)基等。（1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基。此培養(yǎng)基含有微生物所需要的基本營養(yǎng)成分，如肉湯培養(yǎng)基。二、培養(yǎng)基的種類（2）加富培養(yǎng)基。此培養(yǎng)基是在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入葡萄糖、血液、血清或酵母浸膏等物質(zhì)，可供營養(yǎng)要求較高的微生物生長，如血平板、血清肉湯等。（3）選擇培養(yǎng)基。此培養(yǎng)基是根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)σ恍┪锢?、化學(xué)條件的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。利用這種培養(yǎng)基可以把所需要的微生物從混雜的其他微生物中分離出來。二、培養(yǎng)基的種類（4）鑒別培養(yǎng)基。此培養(yǎng)基中可以加入某種試劑或化學(xué)藥品，使微生物培養(yǎng)后發(fā)生某種變化，從而鑒別不同類型的微生物，如伊紅-美藍(lán)（EMB)培養(yǎng)基、糖發(fā)酵管、醋酸鉛培養(yǎng)基等。（5）活體培養(yǎng)基。有一些微生物可以在活的動(dòng)植物體或離體的活組織細(xì)胞內(nèi)生長繁殖，因此，某些活的動(dòng)植物體或離體的活組織細(xì)胞對(duì)這些微生物來說是很好的培養(yǎng)基。二、培養(yǎng)基的種類（6）厭氧培養(yǎng)基。專性厭氧菌不能在有氧的情況下生長，所以必須將培養(yǎng)基與環(huán)境中的空氣隔絕，或降低培養(yǎng)基中的氧化還原電位，如在液體培養(yǎng)基的表面上加蓋凡士林或蠟，或在液體培養(yǎng)基中加入碎肉塊制成庖肉培養(yǎng)基等。此外，也可以利用物理或化學(xué)的方法除去培養(yǎng)環(huán)境中的氧，以保證厭氧環(huán)境。（1）營養(yǎng)物質(zhì)。營養(yǎng)物質(zhì)有蛋白胨、肉浸汁和牛肉膏、糖(醇）類、血液、雞蛋與動(dòng)物血清、生長因子、無機(jī)鹽類。（2）水分。制備培養(yǎng)基時(shí)常用蒸餾水（因蒸餾水中不含雜質(zhì)），也可用自來水、井水等，但需先煮沸，使部分鹽類沉淀，再經(jīng)過濾方可使用。三、培養(yǎng)基的主要成分三、培養(yǎng)基的主要成分

（3）凝固物質(zhì)

配制固體培養(yǎng)基的凝固物質(zhì)有瓊脂、明膠和卵蛋白及血清等。瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質(zhì)，是應(yīng)用最廣的凝固劑，其化學(xué)成分主要是多糖。加瓊脂制成的培養(yǎng)基在98~100℃下熔化，于45℃以下凝固。但多次反復(fù)熔化后，其凝固性會(huì)降低。瓊脂對(duì)細(xì)菌本身無營養(yǎng)價(jià)值，自然界中僅有極少數(shù)的細(xì)菌能分解它。根據(jù)瓊脂含量的多少，可配制成不同性狀的培養(yǎng)基。另外，由于各種牌號(hào)瓊脂的凝固能力不同以及當(dāng)時(shí)的氣溫不同，配制時(shí)其用量應(yīng)酌情增減，夏季可適當(dāng)多加。三、培養(yǎng)基的主要成分（4)抑制劑。在制備某些培養(yǎng)基時(shí)需加入一定的抑制劑，來抑制非檢出菌的生長或使其少生長，以利于檢出菌的生長。抑制劑種類很多，常用的有膽鹽、煌綠、玫瑰紅酸、亞硫酸鈉及抗生素等。這些物質(zhì)具有選擇性抑菌作用。（5）指示劑。為便于了解和觀察細(xì)菌是否利用和分解糖類等物質(zhì)，常在某些培養(yǎng)基中加入一定種類的指示劑，如酸堿指示劑、氧化還原指示劑等。四、培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基的制備過程為：稱量藥品→溶解→調(diào)節(jié)pH值一熔化瓊脂→過濾分裝→包扎、標(biāo)記→滅菌擺斜面或倒平板。（1）稱量藥品。根據(jù)培養(yǎng)基的配方，依次準(zhǔn)確稱取各種藥品，放入適當(dāng)大小的燒杯中，不要加入瓊脂。蛋白胨極易吸潮，故稱量時(shí)要迅速。（2）溶解。用量筒取一定量（約占培養(yǎng)基總量的1/2）的蒸餾水倒入盛有藥品的燒杯中，在放有石棉網(wǎng)的電爐上用小火加熱，并用玻璃棒攪拌，以防液體溢出。待各種藥品完全溶解后，停止加熱，補(bǔ)足水分。如果配方中有淀粉，則先將淀粉用少量冷水調(diào)成糊狀，并在火上加熱攪拌，然后加足水分及其他原料，待完全熔化后，補(bǔ)足水分。四、培養(yǎng)基的制備（3）調(diào)節(jié)pH值。根據(jù)培養(yǎng)基對(duì)pH值的要求，用50g/L的氫氧化鈉或5%(體積分?jǐn)?shù)）的鹽酸溶液調(diào)至所需pH值。可用pH試紙或酸度計(jì)等測定pH值。（4）熔化瓊脂。固體或半固體培養(yǎng)基必須加入一定量的瓊脂，將盛有培養(yǎng)基的器皿置于電爐上一邊攪拌一邊加熱，直至瓊脂完全熔化后才能停止攪拌，并補(bǔ)足水分。四、培養(yǎng)基的制備（5）過濾分裝

先將過濾分裝裝置安裝好。如果是液體培養(yǎng)基，則需玻璃漏斗中放一層濾紙，如果是固體或半固體培養(yǎng)基，則需在漏斗中放多層紗布，或兩層紗布夾一層薄薄的脫脂棉，趁熱進(jìn)行過濾，過濾后立即進(jìn)行分裝。分裝時(shí)注意不要使培養(yǎng)基沾染在管口或瓶口，以免浸濕棉塞，引起污染。液體分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。固體分裝量為管高的1/5，半固體分裝量一般以試管高度的1/3為宜；分裝三角瓶，以不超過三角瓶容積的一半為宜。四、培養(yǎng)基的制備（6）包扎、標(biāo)記。培養(yǎng)基分裝后加好棉塞或試管帽，再包上一層防潮紙，用棉繩系好。在包裝紙上標(biāo)明培養(yǎng)基的名稱、制備組別和操作者姓名、日期等。（7）滅菌。上述培養(yǎng)基應(yīng)按培養(yǎng)基配方中規(guī)定的條件及時(shí)進(jìn)行滅菌。普通培養(yǎng)基的滅菌溫度為121℃，滅菌時(shí)長為20