2023年全國職業(yè)院校技能大賽-檢驗檢疫技術(shù)賽項規(guī)程

全國職業(yè)院校技能大賽

賽項規(guī)程

賽項名稱：檢驗檢疫技術(shù)

英文名稱：InspectionandQuarantineTechnology

賽項組別：高等職業(yè)教育

賽項編號：GZ041

1

一、賽項信息

賽項類別

每年賽隔年賽（奇數(shù)年/雙數(shù)年）

賽項組別

□中等職業(yè)教育高等職業(yè)教育

學(xué)生賽（個人/團體）□教師賽（試點）□師生同賽（試點）

涉及專業(yè)大類、專業(yè)類、專業(yè)及核心課程

核心課程

專業(yè)大類專業(yè)類專業(yè)名稱

（對應(yīng)每個專業(yè)，明確涉及的專業(yè)核心課程）

臨床基本檢驗、微生物學(xué)檢驗、生物化

醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)

學(xué)檢驗、免疫學(xué)技術(shù)與檢驗、血液學(xué)檢

（520501）

醫(yī)藥衛(wèi)生醫(yī)學(xué)技術(shù)類驗、寄生蟲學(xué)檢驗

大類（52）（5205）衛(wèi)生檢驗與檢

疫技術(shù)衛(wèi)生微生物檢驗、免疫學(xué)檢驗

（520508）

對接產(chǎn)業(yè)行業(yè)、對應(yīng)崗位（群）及核心能力

核心能力

產(chǎn)業(yè)行業(yè)崗位（群）

（對應(yīng)每個崗位（群），明確核心能力要求）

1.采集、處理和保存臨床檢驗標本、開展臨床檢

驗標本測定、檢驗結(jié)果初步分析判斷、操作常用

檢驗儀器

2.儀器設(shè)備進行常規(guī)保養(yǎng)及一般維護

臨床醫(yī)學(xué)檢驗

醫(yī)藥衛(wèi)生輸（采供）血3.血液、骨髓中常見細胞及臨床檢驗標本中常見

衛(wèi)生檢驗與檢疫病原體形態(tài)的辨別和鑒別、分析判斷危急值的能

力

4.實驗室質(zhì)量控制及管理能力

5.與醫(yī)生、護士及相關(guān)人員有效溝通、實驗室質(zhì)

量控制及管理、使用信息管理系統(tǒng)

2

二、競賽目標

本賽項響應(yīng)黨的二十大“提高基層防病治病和健康管理能力”

及“十四五”健康中國建設(shè)號召，旨在“以賽促學(xué)、以賽促教、以

賽促改”，提高人才培養(yǎng)質(zhì)量，推動校企深度融合。

（一）促進新技術(shù)、新產(chǎn)業(yè)、新業(yè)態(tài)、新模式的應(yīng)用

隨著科技的發(fā)展和經(jīng)濟的變革，新技術(shù)、新產(chǎn)業(yè)、新業(yè)態(tài)、新

模式層出不窮，全國職業(yè)院校檢驗檢疫技術(shù)專業(yè)應(yīng)積極對接新變

革，引領(lǐng)技術(shù)革新和產(chǎn)業(yè)升級。舉辦全國大賽將鼓勵選手在檢驗檢

疫技術(shù)領(lǐng)域中探索新技術(shù)、新方法，挖掘新業(yè)務(wù)、新模式，為產(chǎn)教

融合提供更多新思路和新方案。

（二）加強職普融通和產(chǎn)教融合

職業(yè)教育的核心在于培養(yǎng)社會需求的技術(shù)技能人才，這要求職

業(yè)院校與社會緊密結(jié)合，加強職普融通和產(chǎn)教融合。本大賽將通過

與社會、行業(yè)的深入合作，為選手提供更加貼近實際的競賽題目，

幫助選手更好地適應(yīng)社會需求，增強職業(yè)素養(yǎng)和實踐能力。

（三）滿足產(chǎn)教協(xié)同育人目標

產(chǎn)教協(xié)同育人是高等職業(yè)教育的重要特點，也是教育部提出的

重要目標。舉辦全國大賽將通過與企業(yè)、行業(yè)的深入合作，為選手

提供更加貼近實際的競賽任務(wù)和環(huán)境，幫助選手更好地融入行業(yè)，

了解相關(guān)工作流程和操作規(guī)程，提高實際工作能力。

三、競賽內(nèi)容

（一）賽項內(nèi)容選擇及結(jié)構(gòu)

對接行業(yè)標準，重點考查選手對理論知識和核心技能的掌握及

團隊合作、人際溝通、分析和解決問題的職業(yè)素養(yǎng)。賽項含三個模

塊：理論知識、形態(tài)學(xué)、核心技能。內(nèi)容與技能要求如下：

1.理論知識（100分，45分鐘）

3

理論考題由公開題庫抽題（70%）和專家現(xiàn)場命題（30%）組

成。范圍對接臨床醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)（初級）士資格考試，參考臨床醫(yī)

學(xué)檢驗技術(shù)（初級）士資格考試大綱（涉及課程有臨床基本檢驗、

生物化學(xué)檢驗、免疫學(xué)技術(shù)及檢驗、微生物學(xué)檢驗、血液學(xué)檢驗、

寄生蟲學(xué)檢驗）。共90題，滿分100分，其中單選題70題，每題

1分，多選題10題，每題2分，是非題10題，每題1分。理論考

試在機房進行，計算機閱卷評分。

2.形態(tài)學(xué)（100分，42分鐘）

圖片來自形態(tài)學(xué)軟件圖片庫（600張圖片，公開），考前專家

隨機從公開的圖片中抽取70張，從未公開的圖片庫中抽取30張，

隨機組合后形成100張考試圖片。圖片自動播放，每圖答題時間25

秒，播放1次，答案寫在紙質(zhì)答卷上。允許圖片庫每年更新。考核

范圍為外周血常見血細胞（正常、異常）、常見骨髓細胞、尿液細

胞、管型、結(jié)晶和其他有形結(jié)構(gòu)、寄生蟲（卵）等。

3.核心技能

針對臨床基本檢驗、微生物學(xué)檢驗、生物化學(xué)及免疫學(xué)檢驗臨

床崗位設(shè)置考核項目：臨床基本檢驗（100分，30分鐘）、微生物

學(xué)檢驗（100分，22分鐘）、生物化學(xué)及免疫學(xué)檢驗（100分，55

分鐘）。

（理論知識和形態(tài)學(xué)是每個選手必考項目，核心技能中的項目

每個選手隨機抽取一項考核）

（二）特色與創(chuàng)新

1.賽項涵蓋職業(yè)典型工作任務(wù)

賽項包含理論知識、形態(tài)學(xué)、核心技能三個模塊，綜合考核選

手對臨床基本檢驗、生物化學(xué)檢驗、微生物學(xué)檢驗、免疫學(xué)技術(shù)及

檢驗和血液學(xué)檢驗中的理論知識和核心技能的掌握，全面考察選手

4

工作習(xí)慣、生物安全意識、標準化操作能力、熟練操作常用儀器設(shè)

備能力、質(zhì)量控制意識等職業(yè)素養(yǎng)。

2.賽項對接職業(yè)需求和行業(yè)標準

廣泛征求行業(yè)、企業(yè)專家意見，邀請全國知名專家進行頂層設(shè)

計，采用理論和技能相結(jié)合、手工和儀器操作相結(jié)合、基本技能和

先進技術(shù)相結(jié)合的模式，緊密對接臨床崗位工作實際。邀請行業(yè)專

家擔任大賽評委，高標準考評賽項組織及實施，確保賽項起點高、

標準高。

3.賽項引領(lǐng)職業(yè)教育教學(xué)改革

賽項設(shè)計對職業(yè)院校辦學(xué)條件和辦學(xué)水平提出高要求，促進職

業(yè)院校辦學(xué)條件的改善，提升人才培養(yǎng)質(zhì)量和辦學(xué)水平，推動校、

市和國家三級大賽發(fā)展，引領(lǐng)職業(yè)教育改革和發(fā)展。

比賽時

模塊主要內(nèi)容分值

長（min）（分）

考核內(nèi)容對接臨床醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)（初

模級）士資格考試，涉及課程有臨床基

理論知識（必

塊本檢驗、生物化學(xué)檢驗、免疫學(xué)技術(shù)45100

考）

一與檢驗、微生物學(xué)檢驗、血液學(xué)檢驗、

寄生蟲學(xué)檢驗

外周血常見血液細胞（正常、異常）、

模

形態(tài)學(xué)（必常見骨髓細胞，寄生蟲（卵），尿沉

塊42100

考）渣標本中的各種細胞、管型、結(jié)晶和

二

其他有形結(jié)構(gòu)等的形態(tài)特點

模微生物學(xué)檢驗項目22100分

核心技能（3

塊臨床基本檢驗項目30100分

選1）

三生物化學(xué)及免疫學(xué)檢驗項目55100分

四、競賽方式

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1.本賽項為學(xué)校組隊參賽，按照每個參賽隊三個賽項的總分排

序，評出團體獎。

2.參賽選手須為高等職業(yè)學(xué)校在籍全日制高職學(xué)生和本科學(xué)

生；參賽選手年齡不超過25周歲。

3.初賽由各省、自治區(qū)、直轄市組織，每所學(xué)校只允許一個代

表隊參加，每隊由3名選手組成。凡在往屆全國職業(yè)院校技能大賽

中獲一等獎的選手，不得再申報和參加該項比賽。初賽結(jié)束后，各

省、自治區(qū)、直轄市參賽隊伍數(shù)以正式比賽報名通知為準，每個參

賽隊由1名領(lǐng)隊、3名選手和2名指導(dǎo)教師組成，不得跨校組隊，

暫不邀請境外代表隊參賽。

4.競賽時，理論知識和形態(tài)學(xué)為必考項目，核心技能為選考項

目。理論知識和形態(tài)學(xué)考試優(yōu)先采用機考，考題的70%從公開題目

中抽取，30%由專家現(xiàn)場命題。理論考試完成后計算機自動閱卷評

分；形態(tài)學(xué)考試完成后，由評委組集體閱卷；核心技能考試為現(xiàn)場

操作考試，包括對操作過程、結(jié)果分析、操作時間和職業(yè)素養(yǎng)的綜

合評定。

五、競賽流程

（一）競賽日程

日期時間內(nèi)容地點

8:00～12:00參賽選手報到入住酒店

13:30～15:30賽項說明會、領(lǐng)隊會承辦校會場

14:00～15:30參賽選手熟悉賽場賽場

第一天14:00～15:30裁判培訓(xùn)、理論、形態(tài)組卷賽場

15:50～16:40模塊一：理論知識考試機房

16:50～17:40模塊二：形態(tài)學(xué)考試機房

17:30～18:00專家檢查場地封閉賽場賽場

6

8:00～8:50開幕式會場

9:10～13:10模塊三（1）：微生物學(xué)檢驗賽場

12:10～13:30午餐承辦校食堂

第二天模塊三（2）：臨床基本檢驗

9:10～12:00賽場

模塊三（3）：生物化學(xué)及免疫學(xué)檢驗

模塊三（2）：臨床基本檢驗

13:00～18:00賽場

模塊三（3）：生物化學(xué)及免疫學(xué)檢驗

模塊三（1）：微生物學(xué)檢驗（細菌分區(qū)

8:00～12:00賽場

劃線結(jié)果觀察）

8:00～12:00統(tǒng)分賽場

第三天12:00～13:00午餐承辦校食堂

13:30～16:00打印證書統(tǒng)分室

16:30～17:30閉賽式、頒獎會場

17:30后參賽隊離會

注：最終賽程安排以承辦校公布競賽日程為準。

（二）整體比賽流程

（三）選手比賽流程

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六、競賽規(guī)則

（一）選手報名

1.參賽名額省、自治區(qū)、直轄市參賽隊伍數(shù)以正式比賽報名通知

為準，每隊3名選手。

2.報名資格：參賽選手須為高等職業(yè)學(xué)校在籍全日制高職學(xué)生和

本科學(xué)生，年齡不超過25周歲，全國職業(yè)院校技能大賽中獲一等獎

的選手不得再次參加本比賽。

3.報名要求：確認參賽選手和指導(dǎo)教師后不得隨意更換，無法參

賽者，須由省級教育行政部門出具書面說明，經(jīng)大賽執(zhí)委會核實后予

以更換。競賽開始后，不得更換參賽隊員。

（二）競賽管理

競賽過程中抽簽、檢錄、比賽、成績評定與公布、頒獎等賽事活

動詳細流程見“競賽流程”。

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（三）參賽要求

所有參賽人員應(yīng)樹立正確的參賽觀，嚴格遵守《全國職業(yè)院校技

能大賽章程》。

1.參賽選手

須穿著大賽統(tǒng)一定制短袖T恤衫，黑色長褲；女生著白色護士鞋，

男生著黑色皮鞋；選手不得佩戴裝飾物，不得攜帶手機進入賽區(qū)。

須嚴格遵守操作流程和規(guī)則，并自覺接受裁判的監(jiān)督和警示。若

因突發(fā)故障導(dǎo)致比賽中斷，應(yīng)提請裁判確認其原因，由裁判視情況做

出裁定。

比賽時間到，由裁判示意比賽結(jié)束，選手須終止操作。如有特殊

情況，須經(jīng)裁判同意后做特殊處理。

2.裁判員

（1）須統(tǒng)一佩戴由大賽組委會印制的相應(yīng)證件方可進入工作崗

位；

（2）賽前須簽訂保密協(xié)議、接受培訓(xùn)并參加試評；

（3）賽中認真履職，做到客觀公正、準確評判，不得做與裁判

工作無關(guān)的事情。

3.工作人員

（1）須統(tǒng)一佩戴由大賽組委會印制的相應(yīng)證件方可進入工作崗

位；

（2）認真履職。遇突發(fā)事件，按照工作預(yù)案，組織指揮人員疏

散，確保人員安全。

七、技術(shù)規(guī)范

（一）教育部《高等職業(yè)教育專業(yè)簡介（2022年）》

專業(yè)能力要求：

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（1）具備良好的生物安全意識，熟練采集、處理和保存標本的

能力；

（2）具有開展臨床檢驗標本、輸血項目檢測、病理標本制作及

檢驗結(jié)果初步分析判斷的能力；

（3）具有熟練操作常用檢驗儀器的能力、儀器常規(guī)保養(yǎng)及一般

維護的能力；

（4）具有對血液、骨髓中常見細胞及臨床檢驗標本中常見病原

體形態(tài)的辨別和鑒別能力；

（5）具有分析判斷危急值的能力，能主動與醫(yī)生、護士及相關(guān)

人員及時有效地溝通；

（6）具有一定的實驗室質(zhì)量控制及管理能力；

（7）具有適應(yīng)產(chǎn)業(yè)數(shù)字化發(fā)展需求的信息技術(shù)和數(shù)字技術(shù)，能

熟練使用醫(yī)院與實驗室信息管理系統(tǒng)開展工作；

（8）具有探究學(xué)習(xí)、終身學(xué)習(xí)和可持續(xù)發(fā)展的能力。

（二）行業(yè)、職業(yè)技術(shù)標準

臨床血液與體液檢驗基本技術(shù)標準（WS/T806—2022）、《血液

分析儀》（YY/T0653-2017）、《血細胞分析參考區(qū)間》WS/T405-2012、

《紅細胞和白細胞計數(shù)參考方法》WS/T245-2005、《臨床微生物檢

驗基本技術(shù)標準》（WS/T805—2022）、《臨床化學(xué)檢驗基本技術(shù)標

準》（WS/T804—2022）、《白蛋白測定試劑盒》（YY/T1444-2016）、

《臨床常用生化檢驗項目參考區(qū)間第2部分：血清總蛋白、白蛋白》

（WS/T404.2-2012）、《乙型病毒性肝炎診斷標準》（WS299-2008）。

（三）職業(yè)資格標準

1.中國合格評定國家認可委員會.《CNAS-CL02：醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)

量和能力認可準則》。

2.尚紅、王毓三、申子瑜.《全國臨床檢驗操作規(guī)程（第4版）》.

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人民衛(wèi)生出版社，2015年3月。

（四）相關(guān)知識與技能

1.白細胞計數(shù)基本原理

用白細胞稀釋液將血液稀釋一定的倍數(shù)，破壞溶解紅細胞。將稀

釋的血液注入血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計數(shù)一定體積的白細胞數(shù)，

換算求出1L血液中的白細胞總數(shù)。

2.白細胞分類原理

將血液制成涂片，瑞氏染色后在100×鏡下分類觀察各種類型白

細胞。

3.五分類血球分析儀白細胞檢測原理

吸入一定體積的抗凝全血，血標本在稀釋液和溶血劑的作用下制

成一定濃度的白細胞懸液，根據(jù)流體力學(xué)鞘流技術(shù)原理，當細胞通過

儀器檢測器受到固定波長的激光照射，根據(jù)光的折射、反射、前向角

等信號識別和計數(shù)細胞。分別在儀器內(nèi)WBC計數(shù)區(qū)和RBC/PLT計

數(shù)區(qū)及Hb測定區(qū)檢測分析，得出每升血液中WBC、RBC、PLT和

Hb結(jié)果，并通過內(nèi)置軟件運算處理，計算出血細胞相關(guān)參數(shù)。

4.酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）原理

將已知的抗原或抗體吸附在固相載體（聚苯乙烯微量反應(yīng)板）表

面，使酶標記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進行，用洗滌法將液相中的

游離成分洗除。常用的ELISA方法類型有雙抗體夾心法、雙抗原夾

心法、競爭法、間接法、捕獲法。

八、技術(shù)環(huán)境

1.競賽場地：設(shè)置臨床基本檢驗賽場、微生物學(xué)檢驗賽場和生物

化學(xué)及免疫學(xué)檢驗賽場、理論知識考試賽場、形態(tài)學(xué)考試賽場，觀摩

區(qū)、休息區(qū)與醫(yī)療室，賽場設(shè)置候考室、競賽室、計分室、準備室，

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滿足視頻監(jiān)控無死角要求，具備開放辦賽和現(xiàn)場直播條件，能夠做到

在不影響比賽的前提下，全過程、全方位安排現(xiàn)場直播，設(shè)置觀摩區(qū)，

并通過網(wǎng)絡(luò)、電視、報刊等多種途徑對大賽進行賽前、賽中、賽后全

過程的宣傳報道，能全方位宣傳大賽。

檢驗檢疫技術(shù)賽項比賽賽場一覽表

競賽

賽場名面積工位實驗物品儀器設(shè)備

稱數(shù)

實驗臺、圓椅、瓷盤

(小)、計時器、待檢標

①數(shù)碼攝像顯微鏡：有抓拍鏡下圖片和

本、試管架、試管、微

保存圖片功能，電光源、雙目，放大倍

量吸管、移液管、洗耳

數(shù)1000倍，目鏡10×，物鏡10×、40×、

球、白細胞稀釋液、計

臨床基100×

150數(shù)板、蓋玻片、染盤、

本檢驗4個②全自動五分類血液分析儀：散點圖需

m2染液、紗布、洗瓶、鏡

賽場≥1個，直方圖需≥3個；線性范圍：WBC：

油、鏡頭清潔液、擦鏡

0～99×109/L，PLT：0～999×109/L；提供

紙、標簽紙、記號筆、

與儀器配套的中文處理數(shù)據(jù)管理軟件，

蠟筆、數(shù)碼攝像顯微

軟件有質(zhì)控管理功能；配電腦和打印機

鏡、全自動血液分析儀

等

實驗臺、圓椅、瓷盤①生物安全柜：B2型，負壓設(shè)計，雙人

(小)、待檢標本、試管②紅外滅菌器：接種環(huán)或針消毒滅菌安

架、接種環(huán)、生理鹽水、全、方便。加熱孔內(nèi)溫度可達到800℃以

酒精燈、打火機、載玻上

微生物片、染盤、革蘭染液、③恒溫培養(yǎng)箱：微電腦程序控制溫度，

300

學(xué)檢驗8個吸水紙、洗瓶、計時器、LCD數(shù)碼顯示、控溫精度高，數(shù)字溫度

m2

賽場鏡油、鏡頭清潔液、擦顯示精度0.1℃?？烧{(diào)整設(shè)定溫度使箱內(nèi)

鏡紙、標簽紙、記號筆、溫度范圍控制在0℃～100℃，調(diào)節(jié)增量

蠟筆、數(shù)碼攝像顯微為1℃。門上裝有大視野三層鋼化玻璃觀

鏡、紅外滅菌器、生物察窗，便于隨時觀察箱體內(nèi)物品

安全柜、細菌恒溫培養(yǎng)④數(shù)碼攝像顯微鏡：有抓拍鏡下圖片和

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箱等保存圖片功能，電光源、雙目，放大倍

數(shù)1000倍，目鏡10×，物鏡10×、40×、

100×

半自動生化分析儀：吸光度范圍：0?

2.5A；穩(wěn)定性較好；分析方法：終點法、

速率法，線性和非線性校準，支持單/雙

波長；光源：鹵鎢燈。輸入：觸摸屏，

可通過USB連接鼠標或鍵盤；記憶不少

于3000個樣品結(jié)果不低于1000個質(zhì)控

實驗臺、圓椅、瓷盤

結(jié)果

(小)、計時器、待檢標

②恒溫水浴鍋：溫控精確，數(shù)字顯示，

本、試管架、試管、移

自動控溫；加熱功率：300W；溫控范圍：

生物化液管、洗耳球、移液槍、

室溫0?100度；升溫速度：由室溫升至

學(xué)及免300移液槍頭、總蛋白檢測

8個沸點小于70分鐘，容積：3.3L以上

疫學(xué)檢m2試劑、恒溫水浴鍋、半

③酶標儀：有8通道或12通道光路檢測。

驗賽場自動生化分析儀、吸水

波長范圍覆蓋400nm-800nm，標配

紙、乙肝病毒表面抗體

450nm/630nm/492nm濾光片。板條類型：

檢測試劑、洗瓶、恒溫

標準96孔。具有振板功能。由單片微機

水浴鍋、酶標儀等

控制。同時可測量12個孔。用軟膜鍵盤

輸入測量條件及參數(shù)。酶標板可自動進

入、推出?？呻p波長交替測量。判讀、

計算濃度及輸出結(jié)果實現(xiàn)自動化。配有

全點陣液晶顯示器及微型漢字打印機，

可用漢字顯示輸出測量條件與結(jié)果

理論知400200選用穩(wěn)定可靠軟件系統(tǒng)，能夠滿足多并發(fā)和高并發(fā)量；能夠同時

識考試m2個滿足至少200人以上同時在線登錄；采用B/S模式不用安裝客戶端；

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賽場考核方式能夠從試題庫中按照章節(jié)知識點進行隨機抽取試題，能

夠在試卷中添加和修改試題，具有編輯試題和試卷分析與答案糾

錯功能；能夠?qū)崿F(xiàn)相同試題隨機順序自動生成試卷以保證每個考

生相同試題不同順序；考核系統(tǒng)具備防作弊功能，不允許離開答

題頁面；具有專家閱卷功能和計算機將自動評分功能，專家可對

某一道題或幾道題進行單獨評分，支持多個專家同時評一套題；

如：A專家評第1題，B專家評2～5題，C專家評6～8題。評分后系

統(tǒng)自動進行平均分計算及匯總

1.系統(tǒng)要求：軟件集資源庫，教學(xué)，訓(xùn)練，大賽，數(shù)據(jù)分析為一

體，性能穩(wěn)定，能滿足多并發(fā)和高并發(fā)量；能夠同時滿足至少200

人以上同時在線登錄；采用B/S模式，不用安裝客戶端，具有一題

多答案的匹配功能。系統(tǒng)可進行形態(tài)、細胞分類、綜合案例的考

試。系統(tǒng)具備防作弊功能，不允許離開答題頁面，能夠自動保存

考試進度，支持斷電、斷網(wǎng)、死機續(xù)考，競賽結(jié)束后自動評分，

一鍵導(dǎo)出成績及相關(guān)答題記錄，具有試卷分析與答案糾錯功能

形態(tài)學(xué)2.形態(tài)學(xué)、細胞分類計數(shù)、綜合案例等考試內(nèi)容可為一體。可進

400200

考試賽行練習(xí)及競賽模式的一鍵切換，競賽模式下可將形態(tài)細胞識別題、

m2個

場形態(tài)切片細胞分類計數(shù)題、綜合案例分析題隨機組合生成一套考

卷進行上機答題。具有專家閱卷功能和計算機將自動評分功能，

專家可對某一道題或幾道題進行單獨評分，支持多個專家同時評

一套題；如：A專家評第1題，B專家評2～5題，C專家評6～8題。

評分后系統(tǒng)自動進行平均分計算及匯總

3.具有Word導(dǎo)、EXCEL導(dǎo)入功能：提供導(dǎo)入模板，支持Word、

EXCEL中圖片直接批量導(dǎo)入，無需要一條一條的錄入及上傳圖

片。具有圖片壓縮包導(dǎo)入功能：實現(xiàn)圖片打包批量導(dǎo)入

600800

觀摩區(qū)大屏現(xiàn)場直播，可分屏顯示不同考場畫面

m2人

醫(yī)療室50m22人醫(yī)務(wù)工作者，配有診療室，有緊急救護能力

2.保證水電供應(yīng)正常，有備用水源和電源。

14

3.設(shè)置候考區(qū)

4.技能競賽區(qū)

（1）選手準備室：供選手抽簽、換衣、戴帽口罩手套等。

（2）器材準備室：準備技術(shù)操作相關(guān)用物。

（3）等候區(qū)：選手比賽結(jié)束后休息。

5.工作區(qū)包括分數(shù)登記室、閱卷室、仲裁室、監(jiān)督室、裁判休息

室、工作人員休息室、醫(yī)務(wù)室。選手通道與工作人員通道、考核后選

手與未考核選手進出賽場的路徑分別隔離，不相互交叉。

九、競賽樣題

競賽賽卷由理論知識考核、形態(tài)學(xué)考核和核心技能操作三個模塊

試卷組成。

模塊一：理論知識考試題

理論考題由公開題庫抽題（70%）和專家現(xiàn)場命題（30%）組成。

范圍對接臨床醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)（初級）士資格考試，參考臨床醫(yī)學(xué)檢驗

技術(shù)（初級）士資格考試大綱（涉及課程有臨床基本檢驗、生物化學(xué)

檢驗、免疫學(xué)技術(shù)及檢驗、微生物學(xué)檢驗、血液學(xué)檢驗、寄生蟲學(xué)檢

驗）。樣題如下：

1.試卷卷頭：全國職業(yè)院校檢驗檢疫技術(shù)技能競賽理論知識考試

試卷（高職組、本科組）

2.考核內(nèi)容及方法：共90題，其中含70道單選題、10道多選題

和10道是非題?？碱}由計算機根據(jù)命題范圍從題庫中隨機抽取及專

家現(xiàn)場命題共同組成，考試成績由計算機評分系統(tǒng)自動生成。

3.考核樣題

序號單選題每題1分、多選題每題2分、是非題每題1分考生答案得分

（單選題）成人靜脈采血，采血的部位通常是

1

A手背靜脈

15

B肘部靜脈

C頸外靜脈

D內(nèi)踝靜脈

E股靜脈

（單選題）患者，女，27歲。貧血貌，往日查血常規(guī)紅細胞計數(shù)

減低，HCT偏低，今日來醫(yī)院查血常規(guī)。給此患者采血，錯誤的

是

A壓脈帶不宜束臂時間過長，以免血小板檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差

2

B囑患者空腹進行血常規(guī)檢查

C采血至抗凝管后及時顛倒混勻，使血液與抗凝劑充分混勻

D一次性采集足夠的血液，以免重復(fù)采血

E采血后及時送檢

（單選題）不能用于觀察細菌動力的方法是

A革蘭染色法

B暗視野熒光法

3

C半固體穿刺法

D懸滴法

E壓滴法

（單選題）決定抗原與抗體反應(yīng)特異性的物質(zhì)基礎(chǔ)是

4

A載體B佐劑C抗原決定簇DTD-AgETI-Ag

（單選題）決定某種物質(zhì)免疫原性因素不包括

5

A特異性B異物性C大分子性D化學(xué)成分E結(jié)構(gòu)復(fù)雜性

（多選題）關(guān)于肝素，正確的說法有

A可加強抗凝血酶Ⅲ的作用

B有對抗凝血酶的作用

6

C有阻止血小板聚集的作用

D是紅細胞脆性試驗理想的抗凝劑

E適合于血液學(xué)一般檢查

（多選題）下列關(guān)于高三酰甘油血癥說法正確的是（多選）

A血清中TG水平輕度升高

B冠心病、糖尿病、腎病、甲狀腺功能減退常有繼發(fā)性高TG

7C高TG是冠心病的獨立危險因素

D高糖低脂肪膳食可以促進內(nèi)源性TG合成

ETG降低可見于慢性阻塞性肺疾病、腦梗死、甲狀腺功能亢進癥、

營養(yǎng)不良等

（多選題）高脂蛋白血癥的臨床分型包括

8A高膽固醇血癥B高密度脂蛋白血癥C高三酰甘油血癥D混

合型高脂血癥E低高密度脂蛋白血癥

（是非題）用改良Neubauer計數(shù)板計數(shù)細胞時，對壓線細胞應(yīng)遵

9

循的計數(shù)原則：數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右

10（是非題）正常人血漿的比密約為1.025～1.030

………

模塊二：形態(tài)學(xué)考核

16

1．試卷卷頭：全國職業(yè)院校檢驗檢疫技術(shù)技能競賽形態(tài)學(xué)考試

試卷（高職組、本科組）

2．考核內(nèi)容及方法：共100題，形態(tài)考核分布原則上骨髓細胞

形態(tài)30%、血液形態(tài)30%、體液形態(tài)20%、寄生蟲形態(tài)15%、微生

物形態(tài)5%?？碱}由計算機根據(jù)命題范圍從題庫中隨機抽取及專家現(xiàn)

場命題共同組成。

3.命題方式：形態(tài)學(xué)考題由來自于形態(tài)學(xué)軟件圖片庫（600張圖

片，公開）抽取圖片（70%）和專家現(xiàn)場從考核命題范圍中未公開的

圖庫中抽取圖片（30%）組成。

4.形態(tài)學(xué)檢驗考核范圍

序號形態(tài)范圍

骨髓紅系、粒系、巨核細胞系、淋巴細胞系、漿細胞系、單核細胞系及其它細胞等（骨

1

細胞髓題庫內(nèi)所有細胞）

（1）紅細胞：網(wǎng)織紅細胞、靶形紅細胞、橢圓形紅細胞、口形紅細胞、球形紅細

胞、點彩紅細胞

血液（2）粒細胞：中性桿狀核粒細胞、中性分葉核粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒

2

細胞細胞

（3）成熟淋巴細胞及異常淋巴細胞

（4）成熟單核細胞

（1）細胞：上皮細胞、紅細胞、白細胞等

（2）管型：透明管型、細顆粒管型、粗顆粒管型、細胞管型等

3體液

（3）結(jié)晶：尿酸結(jié)晶、草酸鈣結(jié)晶、三聯(lián)磷酸鹽結(jié)晶、碳酸鈣結(jié)晶等

（4）脫落細胞

4寄生蟲瘧原蟲、受精蛔蟲卵，鉤蟲卵等，需標注全稱

5微生物革蘭陽性球菌、革蘭陰性球菌、革蘭陽性桿菌、革蘭陰性桿菌等

5.試卷模板

全國職業(yè)院校檢驗檢疫技術(shù)技能競賽形態(tài)學(xué)考試試卷（高職組、

本科組）

17

（觀察計算機中展示的圖片，在25秒內(nèi)，在對應(yīng)題號中正確寫

出所指示的形態(tài)名稱）

編號形態(tài)名稱扣分

1單核細胞（例）

2淋巴細胞（例）

3原始紅細胞（例）

4鉤蟲卵（例）

5革蘭陰性桿菌（例）

6（1）原始漿細胞（2）中性桿狀核粒細胞（例）

…………

100組織嗜堿細胞（肥大細胞）（例）

總分

閱卷人：復(fù)核人：

模塊三：核心技能考核

（一）臨床基本檢驗

全國職業(yè)院校檢驗檢疫技術(shù)技能競賽

臨床基本檢驗-白細胞計數(shù)和分類試卷（高職組、本科組）

一、競賽說明：

1.主要考核醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)、衛(wèi)生檢驗與檢疫技術(shù)專業(yè)學(xué)生規(guī)

范操作血細胞分析儀、血常規(guī)結(jié)果審核、復(fù)檢規(guī)則應(yīng)用（手工白細胞

計數(shù)）、血涂片制備和觀察等專業(yè)能力。

2.項目滿分100分，完成時間30分鐘；

3.獨立完成，不得相互詢問或討論。

4.考核成績?yōu)椴僮鬟^程、操作結(jié)果、操作時間和職業(yè)素養(yǎng)評分之

和。

5全部操作過程時間和操作后處理時間計入時間限額，超過規(guī)定

時間將終止操作。

二、實驗原理

18

1.血細胞分析儀工作原理：吸入一定體積的抗凝全血，血標本在

稀釋液和溶血劑的作用下制成一定濃度的白細胞懸液，根據(jù)流體力學(xué)

鞘流技術(shù)原理，當細胞通過儀器檢測器受到固定波長的激光照射，根

據(jù)光的折射、反射、前向角等信號識別和計數(shù)細胞。分別在儀器內(nèi)

WBC計數(shù)區(qū)和RBC/PLT計數(shù)區(qū)及Hb測定區(qū)檢測分析，得出每升血

液中WBC、RBC、PLT和Hb結(jié)果，并通過內(nèi)置軟件運算處理，計

算出血細胞相關(guān)參數(shù)。

2.手工白細胞計數(shù)原理：用白細胞稀釋液將抗凝全血稀釋一定的

倍數(shù)，同時破壞溶解紅細胞。將稀釋的血液注入血細胞計數(shù)板，在顯

微鏡下計數(shù)一定體積的白細胞數(shù)，經(jīng)換算求出1L血液中的白細胞總

數(shù)。

3.血涂片制備原理：將一小滴血液均勻涂在玻片上，呈單層分布，

制成薄血片。用瑞氏染液進行染色。細胞中的堿性物質(zhì)如紅細胞中的

血紅蛋白及嗜酸性粒細胞中的嗜酸性顆粒等與酸性染料伊紅結(jié)合染

成紅色；細胞中的酸性物質(zhì)如淋巴細胞胞質(zhì)及嗜堿性粒細胞中的嗜堿

性顆粒等與堿性染料亞甲藍結(jié)合染成藍色；中性粒細胞的中性顆粒呈

等電狀態(tài)與伊紅和亞甲藍均可結(jié)合，染成淡紫紅色。

三、實驗器材和試劑

1.血細胞分析儀：五分類全自動血細胞分析儀，已大保養(yǎng)、已校

準，可打印出三種血細胞直方圖。

2.數(shù)碼攝像顯微鏡、計算器等。

3.耗材：一次性小試管、試管架、血細胞計數(shù)板、計數(shù)板專用血

蓋片、1.00ml刻度吸管、洗耳球、20μl微量吸管、乳膠頭（有孔和無

孔可自選）、干棉球、鏡油、鏡頭清潔劑、擦鏡紙、紗布、簽字筆、

記號筆、吸水紙、草稿紙、免洗消毒洗手液、面盆、抹布、廢液缸、

銳器盒和醫(yī)用污物缸、載玻片、推片、蠟筆、染色盤、染色架等。

19

4.試劑

（1）血細胞分析儀配套試劑：溶血素、稀釋液、清洗液等。

（2）白細胞稀釋液：2%冰乙酸溶液中加入10g/L結(jié)晶紫（或亞

甲藍）3滴過濾后使用。

（3）瑞氏染色：Ⅰ液、Ⅱ液。

四、實驗標本

血細胞分析儀全血質(zhì)控物、新鮮EDTA-K2抗凝全血。

五、操作步驟

1.血液常規(guī)檢驗（儀器法）

（1）開機前準備：

①檢查稀釋液、清洗液、溶血素是否充足，有無過期；試劑管路

是否彎折，連接是否可靠。

②各電源線是否正確連接。

③廢液桶是否清空。

③打印紙安裝是否正確，是否足夠。（以上內(nèi)容需逐項口頭報告）

（2）開機：按廠家培訓(xùn)進行，儀器初始化過程結(jié)束后，系統(tǒng)自

動進入“計數(shù)”界面。（賽時已開機選手需口頭報告是否開機）

（3）稀釋液本底檢查：賽時已進行本底檢測（選手需口頭報告

本底是否正常）。

（4）檢測模式選擇：選全血模式。（選手需口頭報告檢測模式）

（5）全血質(zhì)控物檢測與審核：質(zhì)控物放至室溫15～30min，平

衡至室溫，手動混勻質(zhì)控物。結(jié)果在控時方可檢測標本。（賽時質(zhì)控

已做需選手口頭報告質(zhì)控在控情況）

（6）標本檢測與結(jié)果打印：取出標本觀察有無凝集，無凝集時

上下顛倒混勻5～8次，上機檢測并打印報告，檢測后標本放原位。

20

（7）關(guān)機：一般以先清洗后關(guān)機為原則。（賽時無需關(guān)機但需

口頭報告清洗操作）

2．白細胞計數(shù)（手工法）

（1）準備稀釋液：取小試管1支，加入白細胞稀釋液0.38ml。

（2）取血：用微量吸管準確吸取EDTA-K2抗凝全血20μl。

（3）稀釋：擦去管外余血，將其插入小試管中稀釋液底部，輕

輕將血放出，并吸取上清液漱洗吸管2～3次，注意不能沖渾稀釋液，

最后輕搖試管，使之均勻。

（4）充池：檢查計數(shù)板和血蓋片，必要時用擦鏡紙擦拭干凈，

將血蓋片蓋在計數(shù)板上，待紅細胞完全破壞，用微量吸管吸取混勻的

白細胞懸液，充入計數(shù)池中，靜置2～3min，待血細胞下沉。

（5）計數(shù)：用低倍鏡計數(shù)四角4個大方格內(nèi)的白細胞數(shù)，對壓

線的白細胞，按“數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右”的原則計數(shù)。（此處顯

微鏡已連電腦屏幕，選手需按評委指令把相應(yīng)的計數(shù)區(qū)域調(diào)到視野中

央便于評委核對）

3．血涂片制備及觀察

（1）血涂片制備：選擇載玻片，正確編號，左手拇指、示指和

中指持載玻片的兩端，右手拇指、示指和中指握住推片的兩邊，將推

片的前端下緣放于血滴的前方，然后從血滴前方向后慢慢移動，接觸

血滴后左右輕輕擺動，使血液沿推片下緣散開，以30°～45°快速、平

穩(wěn)地將推片向前推進至載玻片的另一端，則血液在載玻片上形成一厚

薄適宜，頭、體、尾分明，兩端和兩側(cè)留有空隙的舌型血膜。

（2）瑞氏染色：

①加Ⅰ液：制備好的血涂片充分干燥后，用蠟筆在血膜兩端畫線，

以防染色時染液外溢。然后將血涂片平放于染色架上，滴加適量Ⅰ液，

以覆蓋整個血膜為度，靜置0.5～1min。

21

②加Ⅱ液：按比例滴加Ⅱ液，輕輕搖動血涂片或用吸耳球?qū)恃?/p>

涂片吹氣，使Ⅰ液和Ⅱ液充分混合并完全覆蓋血膜，室溫下染色5～

10min。

③沖洗：平持血涂片，用流水緩緩沖去染液，直至沖洗干凈。

④干燥（可用吸水紙）。

（3）白細胞分類觀察：

①用10×物鏡觀察血涂片全片，觀察染色及細胞分布情況。（顯

微鏡連電腦屏幕）

②在體尾交界處、100×物鏡下選擇血涂片細胞分布均勻、著色良

好的區(qū)域，按一定的方向順序找到不少于3種白細胞，如：中性粒細

胞、淋巴細胞、單核細胞，請評委復(fù)核。

全國職業(yè)院校檢驗檢疫技術(shù)技能競賽

臨床基本檢驗-白細胞計數(shù)和分類答題卷（高職組、本科組）

一、血細胞分析儀檢測結(jié)果

1.書寫標本編號、粘貼檢測結(jié)果

檢驗者簽名（寫選手工位號）

報告日期

得分

裁判簽名

二、手工法白細胞計數(shù)

1．數(shù)據(jù)記錄：在下列空格中寫上與計數(shù)板位置（以免與裁判計

22

數(shù)不對應(yīng)）相應(yīng)大方格的白細胞數(shù)。并計算出白細胞總數(shù)。（裁判抽

查對角2個大方格WBC數(shù),與選手相應(yīng)大方格內(nèi)WBC結(jié)果進行比較，

根據(jù)誤差進行扣分）

12

43

2．計算白細胞濃度（寫出計算公式及計算過程）（取小數(shù)點后

2位）

WBC=

三、血涂片制備及觀察

在體尾交界處，用100×鏡下，按一定方向順序?qū)λ姷降拿恳?/p>

個完整白細胞進行觀察，找到不少于3種白細胞。

四、結(jié)果報告

1.儀器法白細胞計數(shù)：

2.手工法白細胞計數(shù)：

3.鏡下找到不少于3種白細胞：

23

得分

裁判簽名

全國職業(yè)院校檢驗檢疫技術(shù)技能競賽

微生物學(xué)檢驗-革蘭染色及細菌分區(qū)（四區(qū)）劃線試卷（高職組、

本科組）

一、競賽說明

1.主要考核醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)、衛(wèi)生檢驗與檢疫技術(shù)專業(yè)學(xué)生對

革蘭染色、分區(qū)劃線的熟練程度，在規(guī)定時間內(nèi)完成革蘭染色和細菌

分區(qū)（四區(qū)）劃線的操作。

2.本題滿分100分，完成時間22分鐘，其中細菌分區(qū)劃線6分

鐘，革蘭染色16分鐘，準備時間各2分鐘。

3.獨立完成，不得相互詢問或討論。

4.考核成績?yōu)椴僮鬟^程、操作結(jié)果、操作時間和職業(yè)素養(yǎng)評分之

和。

5.全部操作過程時間和操作后處理時間計入時間限額，超過規(guī)定

時間將終止操作。

二、實驗原理

（一）細菌分區(qū)（四區(qū)）劃線

是將微生物樣品在固體培養(yǎng)基表面多次作“由點到線”稀釋而達

到分離的目的。

（二）革蘭染色

G＋菌：細胞壁結(jié)構(gòu)較致密，肽聚糖層厚，脂質(zhì)少，乙醇脫色時

不易滲入菌體，并能使細胞壁脫水，間隙縮小，通透性下降，阻止結(jié)

晶紫-碘復(fù)合物從胞內(nèi)滲出，保留紫色。

24

G－菌：細胞壁結(jié)構(gòu)較疏松，肽聚糖層薄，脂質(zhì)多，易被乙醇溶

解，使細胞壁通透性增高，菌體內(nèi)的結(jié)晶紫-碘復(fù)合物易被乙醇溶解

逸出而脫掉紫色，經(jīng)沙黃或稀釋石碳酸復(fù)紅復(fù)染后呈紅色。

三、實驗器材

（一）分區(qū)（四區(qū)）劃線法

標本（7cm血平板培養(yǎng)物）、9cm血平板、記號筆、不干膠標簽

（約2cm×3cm方形）、生物安全柜、酒精棉球、酒精缸、鑷子、接

種環(huán)、試管架、計時器、恒溫培養(yǎng)箱等。

（二）革蘭染色

載玻片、試管架、紅藍鉛筆、接種環(huán)、記號筆、酒精燈、打火機、

生理鹽水、吸水紙、沖洗瓶、計時器、紗布（可用于拭擦玻片）、顯

微鏡、鏡油、鏡頭清潔液、擦鏡紙、染色盤、染色架、消毒洗手液、

洗面盆、抹布、銳器盒、普通污物缸、廢液缸、標本盒等。

四、實驗試劑

革蘭染液、結(jié)晶紫染液、碘液、脫色液（95%乙醇）、復(fù)染液。

五、實驗標本

7cm血平板細菌培養(yǎng)物。

六、操作步驟

（一）細菌分區(qū)（四區(qū)）劃線法

1.標記：在9cm平板底部粘貼上不干膠標簽，并用簽字筆在標簽

上正確標記。

2.取菌：右手持接種環(huán)（執(zhí)筆式）伸入紅外線滅菌器腔內(nèi)6～8

秒，外移接種環(huán)，離開紅外線滅菌器內(nèi)腔，待冷卻后挑取少許標本。

3.劃線：左手持瓊脂平板適當傾斜，用拇指打開皿蓋，使其與皿

底間分開2cm～3cm寬的縫隙，右手持取標本的接種環(huán)深入皿內(nèi)，先

將細菌標本在培養(yǎng)基一角涂成直徑約一厘米薄膜，并以此為起點，使

25

接種環(huán)與接種平板面呈30°～40°角，以腕力在平板表面進行，連續(xù)不

重疊劃線，作為第一區(qū)，其范圍不能超過平板的1/4；滅菌接種環(huán)，

待冷卻后，轉(zhuǎn)動平皿至適合操作的位置（各區(qū)的交角應(yīng)為120°左右，

即平板轉(zhuǎn)動一定角度約60°，以便充分利用整個平板的面積），將接

種環(huán)通過第一區(qū)3～4次，連續(xù)不重疊劃線，作為第二區(qū)。同法依次

劃完第三、四區(qū)，第四區(qū)切勿重新接觸第一、二區(qū)。注意每區(qū)的劃線

須有數(shù)條線與上區(qū)交叉接觸，每區(qū)線間需保持一定距離，線條要密而

不重復(fù)；劃第三至第四區(qū)間可不滅菌接種環(huán)。

4.培養(yǎng)：劃線完畢，蓋好皿蓋，倒置放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

18h～24h。

5.觀察結(jié)果：培養(yǎng)18～24h后，從恒溫培養(yǎng)箱中取出，觀察菌落

生長情況并計數(shù)單個菌落數(shù)量。

（二）革蘭染色

1.標記：選擇玻片并正確編號。

2.涂片：用滅菌接種環(huán)挑取菌落與載玻片上預(yù)先滴加的生理鹽水

涂布成1cm2或蠶豆大小的均勻半透明菌膜。

3.干燥：涂片制成后，在空氣中使其迅速干燥，以免菌體皺縮變

形（若需加快干燥速度，將涂布面朝上，置于火焰上方，不燙手的位

置，慢慢烘干，切勿緊貼火焰）。

4.固定：玻片干燥后用火焰加熱法固定，即玻片（菌膜面向上）

以中速（鐘擺速度）來回通過火焰外焰3次進行固定，以玻片反面接

觸手背皮膚，熱而不燙為宜。

5.初染：加結(jié)晶紫染液，染60s，細流水沖洗，并倒去玻片上積

水。

6.媒染：加碘液，染60s，細流水沖洗，倒去玻片上積水。

7.脫色：加脫色液，脫色10～30s，不時搖動至無紫色逸出為止，

26

細流水沖洗，倒去玻片上積水。

8.復(fù)染：加復(fù)染液，染30～60s，細流水沖洗，倒去玻片上積水。

9.鏡檢：待已染色的細菌標本片自然干燥或用吸水紙吸干后，再

用顯微鏡進行觀察。

27

全國職業(yè)院校檢驗檢疫技術(shù)技能競賽

微生物學(xué)檢驗-革蘭染色和細菌（四區(qū)）分區(qū)劃線答題卷（高職

組、本科組）

一、革蘭染色結(jié)果

（一）繪出鏡下形態(tài)

（二）鏡下結(jié)果描述

參賽選手填寫復(fù)核裁判填寫

菌體顏色

菌體形態(tài)

染色性

染色色彩是否清晰選手不填

三、初步報告

（如：找到革蘭陽性球（桿）菌或找到革蘭陰性桿菌）

得分

裁判簽名

28

四、分區(qū)（四區(qū)）劃線結(jié)果

得分

裁判簽名

全國職業(yè)院校檢驗檢疫技術(shù)競賽

生化檢驗和免疫學(xué)技術(shù)及檢驗-血清總蛋白測定+乙肝病毒表面

抗體檢測試卷（高職組、本科組）

一、競賽說明

1.主要考核醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)、衛(wèi)生檢驗與檢疫技術(shù)專業(yè)學(xué)生對

生化檢驗和免疫學(xué)檢驗基本操作技術(shù)的熟練程度和對半自動生化分

析儀、酶標儀等常規(guī)設(shè)備的規(guī)范操作能力。

2.本題滿分100分，完成時間55分鐘。

3.獨立完成，不得相互詢問或討論。

4.考核成績?yōu)椴僮鬟^程評分、操作結(jié)果、操作時間和職業(yè)素養(yǎng)評

分之和。

5.全部操作過程時間和操作后處理時間計入時間限額，超過規(guī)定

時間將終止操作。

6.設(shè)定項目：血清總蛋白（TP）測定（雙縮脲法）+乙肝病毒表

面抗體檢測項目（雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸附法）。

二、實驗原理

29

1.血清總蛋白測定原理：血清蛋白質(zhì)分子中的肽鍵(-CO-NH-)在

堿性溶液中能與試劑中的Cu2+作用生成穩(wěn)定的紫紅色的絡(luò)合物，此絡(luò)

合物在540nm處有明顯的吸收峰，其溶液吸光度在一定濃度范圍內(nèi)

與血清（漿）蛋白質(zhì)（TP）含量成正比，經(jīng)與同樣處理的蛋白標準

液比較，即可求得血清（漿）TP含量。

2.乙肝表面抗體測定原理（雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸附法）：在微

孔板條上預(yù)包被HBsAg，加入待測樣本及酶標抗原（HBsAg-HRP）

試劑進行孵育；樣本中的HBsAb與包被抗原和酶標抗原形成“包被

抗原-抗體-酶標抗原”復(fù)合物；洗板后加入酶底物顯色溶液，復(fù)合物

上連接的HRP催化色原底物發(fā)生顯色反應(yīng)。若樣品中無HBsAb時，

不發(fā)生顯色反應(yīng)。

三、實驗器材和試劑

1.血清總蛋白測定：試管4只（使用3只，備用1只），試管架，

移液槍1支（規(guī)格5～50μl）及配套槍頭、槍頭盒，1ml、2ml刻度吸

管各1支，洗耳球2個，計時器1個，托盤1個。半自動生化分析儀、

恒溫水浴箱、銳器盒、廢液缸、膠水、簽字筆、記號筆等。

2.乙肝病毒表面抗體檢測：微孔板（已用純化HBsAg包被，96

孔），洗耳球1個、試管架1個，手動可調(diào)式移液器（已校正，10~100μl）

1把及配套槍頭、槍頭盒、濾紙、醫(yī)用紗布塊、洗瓶（內(nèi)裝已經(jīng)稀釋

的洗滌液）、標記筆、計算器、簽字筆、計時器、恒溫水浴箱、計時

器（孵育專用）、酶標儀、消毒洗手液、面盆、抹布、廢液缸、銳器

盒，濾紙，移液槍架、振蕩器、廢液中轉(zhuǎn)箱，醫(yī)療廢物桶。

3.實驗試劑：雙縮脲法總蛋白測定試劑盒、乙肝病毒表面抗體檢

測試劑盒（含酶標記、酶底物顯色溶液、陰性對照、陽性對照）。

四、實驗標本

血清總蛋白測定建議購買質(zhì)控血清作為標本。乙肝病毒表面抗體

30

檢測使用不同濃度無溶血血清標本。

五、操作步驟

（一）血清總蛋白測定

取3支潔凈的試管，按表1操作如下：

TP的操作

加入物空白管(B)標準管(S)測定管(U)

生理鹽水（μl）2500

蛋白標準液（μl）0250

血清標本（μl）0025

雙縮脲試劑（ml）2.02.02.0

混勻，37℃水浴10分鐘，波長540nm，用半自動化生化分析儀

讀其測定值并打印結(jié)果（以上各加液量及參數(shù)以選用的試劑盒使用要

求為準）。

（二）乙肝病毒表面抗體檢測

1.實驗準備：核對實驗儀器和材料，檢查試劑和標本。

2.反應(yīng)板標記：選取所需反應(yīng)板并做好標記。（設(shè)立空白對照孔

1孔，陰性對照2孔，陽性對照2孔。陽性對照用紅色記號筆，陰性

對照用黑色記號筆）。

3.稀釋濃縮洗液：按照說明書要求稀釋濃縮液，混勻備用。（已

配置好待用）

4.加待測標本：按照既定順序依次加入陰性對照（2孔）、陽性

對照（2孔）、待測標本（7孔）各50μl，待測?？瞻讓φ眨?孔）

不加。（3min內(nèi)完成）

5.加酶結(jié)合物：每孔用滴瓶滴加1滴（空白孔不加），通過振蕩

器充分混勻（時間30s），封板，置37℃水浴箱中孵育30min。（孵

育期間同時進行血清總蛋白測定操作）

6.洗板：取出反應(yīng)板，棄液、拍干，每孔注滿洗滌液，靜置5秒

31

后棄液、甩干，重復(fù)洗滌5次，在干凈的濾紙上拍干。

7.加顯色劑：每孔先后加顯色劑A、B各1滴，通過振蕩器充分

混勻（時間30s），封板，放置37℃水浴箱中避光孵育10min。

8.終止反應(yīng)：每孔加入終止液1滴，混勻。

9.測定：打開酶標儀進行布板、選擇酶標儀雙波長（450nm/630nm）

比色、選用空白孔校零，點擊開始，讀取各孔OD值，打印并粘貼結(jié)

果。

全國職業(yè)院校檢驗檢疫技術(shù)競賽

生化檢驗和免疫學(xué)技術(shù)及檢驗-血清總蛋白測定+乙肝病毒表面

抗體檢測答題卷（高職組、本科組）

一、血清總蛋白測定數(shù)據(jù)記錄

血清總蛋白結(jié)果書寫（小數(shù)點后兩

打印結(jié)果報告粘貼處

測定結(jié)果位）：

說明：打印報告單上選手（只寫場次、組號和工位號，不得寫選

手姓名）、現(xiàn)場裁判都需簽字確認。

裁判簽名

裁判簽名

二、乙肝表面抗體檢測數(shù)據(jù)記錄與計算

32

1．數(shù)據(jù)記錄與結(jié)果計算（將酶標儀測試結(jié)果打印并粘貼此處）

結(jié)果粘貼處

裁判簽名

裁判簽名

2.計算陽性判定閾值(cut-off)（寫出計算公式及過程，結(jié)果取3

位小數(shù)點）

裁判簽名

裁判簽名

3.報告

陽性標本有：

陰性標本有：