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安徽省A10聯(lián)盟2025屆高考生物考前最后一卷預(yù)測(cè)卷注意事項(xiàng)1.考生要認(rèn)真填寫(xiě)考場(chǎng)號(hào)和座位序號(hào)。2.試題所有答案必須填涂或書(shū)寫(xiě)在答題卡上,在試卷上作答無(wú)效。第一部分必須用2B鉛筆作答;第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3.考試結(jié)束后,考生須將試卷和答題卡放在桌面上,待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.下列有關(guān)高等動(dòng)物細(xì)胞以葡萄糖為底物進(jìn)行細(xì)胞呼吸過(guò)程的敘述,錯(cuò)誤的是()A.細(xì)胞呼吸作用釋放的能量部分存儲(chǔ)在ATP中B.細(xì)胞有氧呼吸和無(wú)氧呼吸的第一階段都會(huì)產(chǎn)生[H]C.人在劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)可通過(guò)分解肌糖原釋放部分能量D.若細(xì)胞呼吸消耗的O2量等于生成的CO2量,則細(xì)胞只進(jìn)行有氧呼吸2.研究人員將含15N-DNA的大腸桿菌轉(zhuǎn)移到含14NH4Cl的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)x分鐘后提取子代大腸桿菌的DNA進(jìn)行熱變性處理,然后進(jìn)行密度梯度離心,離心管中出現(xiàn)的兩個(gè)條帶分別對(duì)應(yīng)圖中的兩個(gè)峰。下列分析正確的是()A.熱變性處理導(dǎo)致DNA分子中的磷酸二酯鍵斷裂B.根據(jù)條帶的位置和數(shù)目可以判斷DNA的復(fù)制方式C.根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測(cè)x分鐘內(nèi)大腸桿菌細(xì)胞最多分裂一次D.未經(jīng)熱變性處理的子代DNA進(jìn)行密度梯度離心后也能出現(xiàn)兩個(gè)條帶3.旱金蓮由三對(duì)等位基因控制花的長(zhǎng)度,這三對(duì)基因分別位于三對(duì)同源染色體上,作用相等且具疊加性。已知每個(gè)顯性基因控制花長(zhǎng)為5mm,每個(gè)隱性基因控制花長(zhǎng)為2mm。花長(zhǎng)為24mm的同種基因型個(gè)體相互授粉,后代出現(xiàn)性狀分離,其中與親本具有同等花長(zhǎng)的個(gè)體所占比例是()A.1/16 B.1/8 C.5/16 D.3/84.2019諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)?lì)C發(fā)給Kaelin、Ratclife及Semenza三位科學(xué)家。他們研究表明:缺氧環(huán)境下,細(xì)胞產(chǎn)生缺氧誘導(dǎo)因子HIF-1(蛋白質(zhì)),HIF-1會(huì)誘導(dǎo)相關(guān)基因的表達(dá),以適應(yīng)缺氧環(huán)境。下列描述不合理的是()A.HIF-1(蛋白質(zhì))具有信號(hào)分子的作用B.缺氧時(shí)肌肉細(xì)胞無(wú)氧呼吸酶增加,促進(jìn)丙酮酸轉(zhuǎn)化成酒精C.缺氧時(shí)細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生“促紅細(xì)胞生成素”,以誘導(dǎo)產(chǎn)生更多的紅細(xì)胞D.缺氧時(shí)機(jī)體會(huì)誘導(dǎo)新生血管生成,有利于氧氣的運(yùn)輸5.在一個(gè)種群中基因型為AA的個(gè)體占45%,aa的個(gè)體占15%。則A基因的基因頻率是A.70% B.65% C.62.5% D.35%6.下列關(guān)于“制作并觀察植物細(xì)胞有絲分裂的臨時(shí)裝片”活動(dòng)的敘述,正確的是()A.視野中根尖分生區(qū)細(xì)胞排列緊密呈棒狀或桿狀B.用清水漂洗可使細(xì)胞恢復(fù)活性以利于染色C.高倍鏡下無(wú)法觀察到著絲粒連續(xù)分裂的過(guò)程D.用蘇丹III等堿性染料使染色體著色以利于觀察7.將某成熟植物細(xì)胞放在一定濃度的A物質(zhì)溶液中,觀察發(fā)現(xiàn)其原生質(zhì)體(除細(xì)胞壁以外的部分)的體積隨時(shí)間的變化趨勢(shì)如圖所示。下列敘述正確的是()A.在0~1h內(nèi)水分子只能從細(xì)胞內(nèi)移動(dòng)到細(xì)胞外B.在1h后A物質(zhì)才開(kāi)始通過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)C.在1~3h內(nèi)A溶液的滲透壓小于細(xì)胞液滲透壓D.若3h后繼續(xù)觀察可能會(huì)看到該細(xì)胞吸水漲破8.(10分)哺乳動(dòng)物肝細(xì)胞膜上的某種葡萄糖載體是一種橫跨膜的蛋白質(zhì),能協(xié)助葡萄糖通過(guò)擴(kuò)散作用跨膜運(yùn)輸。該載體蛋白的葡萄糖結(jié)合點(diǎn)有兩種朝向,一種是面向細(xì)胞膜外側(cè),另一種是面向細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.載體蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)效率與物質(zhì)在膜兩側(cè)的濃度有關(guān)B.該載體蛋白能夠協(xié)助葡萄糖向細(xì)胞內(nèi)外雙向運(yùn)輸C.細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)都橫跨整個(gè)磷脂雙分子層D.葡萄糖借助該載體蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)與ATP的水解無(wú)關(guān)二、非選擇題9.(10分)轉(zhuǎn)染是指利用一定手段使外源基因進(jìn)入細(xì)胞中并穩(wěn)定表達(dá)的過(guò)程。腺病毒載體常用于外源基因的轉(zhuǎn)染,這在基因治療、疫苗研發(fā)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的可視化監(jiān)控方面有著廣闊的應(yīng)用前景?;卮鹣铝袉?wèn)題。(l)腺病毒營(yíng)____活,用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載體上具有____識(shí)別和結(jié)合的部位,是外源基因在受體細(xì)胞中啟動(dòng)表達(dá)的關(guān)鍵。(2)構(gòu)建腺病毒載體時(shí),先用同種限制酶對(duì)腺病毒DNA和外源基因進(jìn)行切割,可獲得相同的____,再用DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的___。(3)通過(guò)腺病毒載體將藍(lán)色熒光基因轉(zhuǎn)染山羊耳緣成纖維細(xì)胞,利用藍(lán)色熒光直觀監(jiān)控細(xì)胞的體外培養(yǎng)過(guò)程。首先將山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或_______處理得到單個(gè)成纖維細(xì)胞,培養(yǎng)至貼滿瓶壁時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為_(kāi)_______。這時(shí),重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續(xù)進(jìn)行_______培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)使用的合成培養(yǎng)基,通常需加入___等一些天然成分,以滿足細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的全面需求。10.(14分)下圖是制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過(guò)程(1)過(guò)程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割的優(yōu)點(diǎn)是_________,此外還要用到________酶。(2)過(guò)程②中首先需要用Ca2+處理大腸桿菌,使其處于感受態(tài),VP40基因進(jìn)入大腸桿菌后維持穩(wěn)定并表達(dá)的過(guò)程稱為_(kāi)_____。(3)與植物原生質(zhì)體融合相比,過(guò)程④特有的方法是用________處理。通常在選擇培養(yǎng)基中需加入抗生素,目的是________________________。選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體________(填“是”或“不是”)單克隆抗體。(4)圖示過(guò)程應(yīng)用的生物技術(shù)有______________________________________11.(14分)某種昆蟲(chóng)眼色的野生型和朱紅色、野生型和棕色分別由等位基因A,a和B,b控制,兩對(duì)基因分別于兩對(duì)同源染色體上。為研究其遺傳機(jī)制,進(jìn)行了雜交實(shí)驗(yàn),結(jié)果見(jiàn)下表;雜交組合PF1(單位:只)♀♂♀♂甲野生型野生型402(野生型)198(野生型)201(朱紅眼)乙野生型朱紅眼302(野生型)99(棕眼)300(野生型)101(棕眼)丙野生型野生型299(野生型)101(棕眼)150(野生型)149(朱紅眼)50(棕眼)49(白眼)回答下列問(wèn)題:(1)野生型和朱紅眼的遺傳方式為_(kāi)_____,判斷的依據(jù)是______。(2)雜交組合丙中親本的基因型分別為_(kāi)_____,F(xiàn)1中出現(xiàn)白眼雄性個(gè)體的原因是______。(3)以雜交組合丙F1中的白眼雄性個(gè)體與雜交組合乙中的雌性親本進(jìn)行雜交,用遺傳圖解表示該過(guò)程。______12.哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核和具膜的細(xì)胞器,是研究膜結(jié)構(gòu)功能的常用材料。當(dāng)成熟紅細(xì)胞破裂時(shí),仍然保持原本的基本形狀和大小,這種結(jié)構(gòu)稱為紅細(xì)胞影,其部分結(jié)構(gòu)如圖所示。研究人員用不同的試劑分別處理紅細(xì)胞影。結(jié)果如下表:(“+”表示有,“-”表示無(wú))實(shí)驗(yàn)處理蛋白質(zhì)種類處理后紅細(xì)胞影的形狀A(yù)BCDEF試劑甲處理后++++--變得不規(guī)則試劑乙處理后--++++還能保持(1)在制備細(xì)胞膜時(shí),將紅細(xì)胞置于____________中,使細(xì)胞膜破裂釋放出內(nèi)容物。由表中結(jié)果推測(cè),對(duì)維持紅細(xì)胞影的形狀起重要作用的蛋白質(zhì)是____________(填表中字母)。(2)構(gòu)成紅細(xì)胞膜的基本支架是__________________。膜上有多種蛋白質(zhì),其中B蛋白與多糖結(jié)合,主要與細(xì)胞膜的__________________功能有關(guān)。A和G蛋白均與跨膜運(yùn)輸有關(guān),G主要功能是利用成熟紅細(xì)胞____________呼吸產(chǎn)生的ATP供能,通過(guò)______________方式排出Na+吸收K+,從而維持紅細(xì)胞內(nèi)高K+低Na+的離子濃度梯度。(3)研究發(fā)現(xiàn),紅細(xì)胞膜上膽固醇含量與動(dòng)脈粥樣硬化(As)斑塊的形成密切相關(guān)。成熟紅細(xì)胞不具有合成脂質(zhì)的________________(填細(xì)胞器),其細(xì)胞膜上的脂類物質(zhì)可來(lái)自血漿。當(dāng)血漿中膽固醇濃度升高時(shí),會(huì)導(dǎo)致更多的膽固醇插入到紅細(xì)胞膜上,細(xì)胞膜的_______________性降低,變得剛硬易破,紅細(xì)胞破裂導(dǎo)致膽固醇沉積,加速了As斑塊的生長(zhǎng)。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】
有氧呼吸指細(xì)胞在氧氣的參與下,通過(guò)多種酶的催化作用,把葡萄糖等有機(jī)物徹底氧化分解,產(chǎn)生二氧化碳和水,生成大量能量的過(guò)程?!驹斀狻緼、細(xì)胞呼吸作用釋放的能量大部分以熱能的形式散失,少部分存儲(chǔ)在ATP中,A正確;B、細(xì)胞有氧呼吸和無(wú)氧呼吸的第一階段相同,都產(chǎn)生[H]和少量的能量,B正確;C、糖原是能源物質(zhì),人在劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)可通過(guò)分解肌糖原釋放部分能量,C正確;D、若細(xì)胞呼吸消耗的O2等于生成的CO2,細(xì)胞可能同時(shí)存在有氧呼吸和無(wú)氧呼吸,因?yàn)闊o(wú)氧呼吸不一定產(chǎn)生CO2,D錯(cuò)誤。故選D?!军c(diǎn)睛】對(duì)于人來(lái)說(shuō),只有有氧呼吸或有氧呼吸和無(wú)氧呼吸共存時(shí),氧氣的消耗量都等于二氧化碳的釋放量。2、C【解析】
DNA在復(fù)制時(shí),以親代DNA的每一個(gè)單鏈作模板,合成完全相同的兩個(gè)雙鏈子代DNA,每個(gè)子代DNA中都含有一個(gè)親代DNA鏈,這種現(xiàn)象稱為DNA的半保留復(fù)制?!疤骄緿NA復(fù)制過(guò)程”的活動(dòng)是利用放射性N原子標(biāo)記DNA,并通過(guò)密度梯度超速離心技術(shù)使放射性標(biāo)記不同的DNA分層觀察,從而分析DNA半保留復(fù)制過(guò)程。【詳解】A、熱變性處理導(dǎo)致DNA分子中的氫鍵斷裂,A錯(cuò)誤;B、試管中分別是15N-DNA單鏈、14N-DNA單鏈,不能看出子代DNA的結(jié)構(gòu),不能說(shuō)明DNA復(fù)制是半保留復(fù)制還是全保留復(fù)制,B錯(cuò)誤;C、從15N-DNA單鏈、14N-DNA單鏈的含量相等可知,DNA只復(fù)制了一次,DNA在細(xì)胞分裂的間期進(jìn)行復(fù)制,因此細(xì)胞最多分裂一次,C正確;D、未進(jìn)行熱變性處理的子代DNA分子兩條鏈由氫鍵相連,所以密度梯度離心后在離心管中只出現(xiàn)一個(gè)條帶(中帶),D錯(cuò)誤。故選C。3、D【解析】
根據(jù)題干信息,旱金蓮隱性純合子aabbcc的高度為12mm,顯性純合在AABBCC的高度為30mm,每增加一個(gè)顯性基因,高度增加3mm。所以花長(zhǎng)為24mm的個(gè)體中應(yīng)該有(24-12)÷3=4個(gè)顯性基因?!驹斀狻扛鶕?jù)題意花長(zhǎng)為24mm的個(gè)體中應(yīng)該有(24-12)÷3=4個(gè)顯性基因,且后代有性狀分離,不可能是純合子,所以基因型可能是AaBbCC、AaBBCc、AABbCc。以AaBbCC為例,其自交后代含有4個(gè)顯性基因的比例為1/4×1/4×1+1/4×1/4×1+1/2×1/2×1=6/16=3/8,D正確,ABC錯(cuò)誤,故選D?!军c(diǎn)睛】該題考查了多基因的累加效應(yīng),基因自由組合定律的實(shí)質(zhì)及應(yīng)用的相關(guān)知識(shí)點(diǎn),解題的關(guān)鍵是根據(jù)單個(gè)顯性基因、單個(gè)隱性基因分別控制的花長(zhǎng),確定相關(guān)個(gè)體基因組成,再根據(jù)基因自由組合定律解題。4、B【解析】
本題以細(xì)胞在分子水平上感受氧氣的基本原理的研究機(jī)制為背景考查學(xué)生獲取信息和解決問(wèn)題的能力,要求學(xué)生能夠正確分析獲取有效信息,結(jié)合題干的條件和所學(xué)的無(wú)氧呼吸的知識(shí)點(diǎn),解決問(wèn)題,這是突破該題的關(guān)鍵。【詳解】A、由題干“HIF-1會(huì)誘導(dǎo)相關(guān)基因的表達(dá)”可知,HIF-1會(huì)調(diào)節(jié)基因的表達(dá)的表達(dá),故HIF-1(蛋白質(zhì))具有信號(hào)分子的作用,A正確;B、肌肉細(xì)胞在缺氧時(shí)會(huì)無(wú)氧呼吸,無(wú)氧呼吸類型是乳酸型,無(wú)氧呼吸酶增加促進(jìn)丙酮酸轉(zhuǎn)化成乳酸,B錯(cuò)誤;C、由題干“缺氧時(shí)HIF-1會(huì)誘導(dǎo)相關(guān)基因的表達(dá),以適應(yīng)缺氧環(huán)境”分析可知,HIF1細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生“促紅細(xì)胞生成素”,促紅細(xì)胞生成素促進(jìn)人體產(chǎn)生紅細(xì)胞,以攜帶更多的氧氣供應(yīng)組織細(xì)胞,C正確;D、由以上分析可知,缺氧時(shí)細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生“促紅細(xì)胞生成素”,以誘導(dǎo)產(chǎn)生更多的紅細(xì)胞,也會(huì)誘導(dǎo)新生血管生成,有利于氧氣的運(yùn)輸,D正確。故選B。5、B【解析】
基因頻率、基因型頻率計(jì)相關(guān)計(jì)算:(1)基因頻率:指在一個(gè)種群基因庫(kù)中,某個(gè)基因占全部等位基因數(shù)的比率.①定義公式法:某基因頻率=(純合子個(gè)體數(shù)×2+雜合子個(gè)體數(shù))÷(個(gè)體總數(shù)×2)。②基因型比率法:某基因頻率=純合子基因型比率+1/2雜合子基因型比率。(2)基因型頻率:指在一個(gè)種群中某種基因型的所占的百分比?;蛐皖l率=該基因型的個(gè)體數(shù)目÷該種群個(gè)體總數(shù)?!驹斀狻吭谝粋€(gè)種群中,基因型為AA的個(gè)體占45%,基因型為aa的個(gè)體占15%,則基因型為Aa的個(gè)體占1-45%-15%=40%.因此,A的基因頻率=AA的基因型頻率+1/2Aa的基因型頻率=45%+1/2×40%=65%,故選:B。6、C【解析】
觀察植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)的步驟為:解離(目的是使組織細(xì)胞彼此分散開(kāi))→漂洗(洗去解離液,便于染色體著色)→染色(用龍膽紫或醋酸洋紅等堿性染料對(duì)染色體進(jìn)行染色)→制片→觀察,據(jù)此答題?!驹斀狻緼、根尖分生區(qū)的細(xì)胞排列緊密,呈正方形,A錯(cuò)誤;B、用清水漂洗是為了洗去解離液,防止影響染色的效果,細(xì)胞經(jīng)過(guò)解離步驟已經(jīng)死亡,B錯(cuò)誤;C、觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂時(shí),由于經(jīng)過(guò)解離步驟后細(xì)胞已經(jīng)死亡,因此不能觀察到著絲粒連續(xù)分裂的過(guò)程,C正確;D、染色體用龍膽紫和醋酸洋紅染色,蘇丹III用于脂肪的鑒定,D錯(cuò)誤。故選C。7、C【解析】
分析曲線圖:0~1h內(nèi),原生質(zhì)體的相對(duì)體積不斷縮小,說(shuō)明此時(shí)期細(xì)胞失水而發(fā)生質(zhì)壁分離;2~3h內(nèi),原生質(zhì)體的相對(duì)體積不斷增大,說(shuō)明此時(shí)期細(xì)胞吸水發(fā)生質(zhì)壁分離的自動(dòng)復(fù)原?!驹斀狻緼、在0~1h內(nèi)浸泡之初,外界溶液濃度>細(xì)胞液濃度,單位時(shí)間內(nèi)水分子通過(guò)原生質(zhì)層由細(xì)胞液滲透至外界溶液的數(shù)量,多于由外界溶液透過(guò)原生質(zhì)層滲透至細(xì)胞液的數(shù)量,細(xì)胞表現(xiàn)為失水,A錯(cuò)誤;B、由圖可知,該細(xì)胞中原生質(zhì)體的相對(duì)體積先減小后增大,這說(shuō)明該細(xì)胞先發(fā)生質(zhì)壁分離后發(fā)生質(zhì)壁分離的自動(dòng)復(fù)原,由此可推知物質(zhì)A一開(kāi)始就能通過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞,B錯(cuò)誤;C、1~3h內(nèi)原生質(zhì)體的相對(duì)體積逐漸增大,這說(shuō)明細(xì)胞吸水,由此可推知該時(shí)間段內(nèi)物質(zhì)A溶液的滲透壓小于細(xì)胞液的滲透壓,C正確;D、細(xì)胞壁位于細(xì)胞膜外側(cè),對(duì)細(xì)胞具有支持和保護(hù)作用,因此植物細(xì)胞吸水不容易漲破,D錯(cuò)誤。故選C?!军c(diǎn)睛】本題結(jié)合曲線圖,考查觀察質(zhì)壁分離及復(fù)原實(shí)驗(yàn),對(duì)于此類試題,需要考生注意的細(xì)節(jié)較多,如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的方法、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象等。解答本題的關(guān)鍵是正確分析曲線圖,并能從中獲取有效信息結(jié)合質(zhì)壁分離和質(zhì)壁分離復(fù)原的滿足的條件答題。8、C【解析】
據(jù)題干信息顯示“肝細(xì)胞膜上的某種葡萄糖載體是一種橫跨膜的蛋白質(zhì),能協(xié)助葡萄糖通過(guò)擴(kuò)散作用跨膜運(yùn)輸”,可知葡萄糖進(jìn)出肝細(xì)胞是協(xié)助擴(kuò)散,不需要消耗能量?!驹斀狻緼、協(xié)助擴(kuò)散需要載體蛋白的協(xié)助,與物質(zhì)在膜兩側(cè)的濃度梯度的大小有關(guān),A正確;B、該載體蛋白的葡萄糖結(jié)合點(diǎn)有面向膜外和膜內(nèi)兩種朝向,所以能夠協(xié)助葡萄糖向細(xì)胞內(nèi)、外兩個(gè)方向運(yùn)輸,B正確;C、細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)有的鑲嵌在膜上,有的橫跨膜,C錯(cuò)誤;D、葡萄糖借助該載體蛋白通過(guò)擴(kuò)散作用跨膜運(yùn)輸?shù)姆绞绞菂f(xié)助擴(kuò)散,不需要細(xì)胞代謝提供能量,與ATP的水解無(wú)關(guān),D正確。故選C。二、非選擇題9、寄生RNA聚合酶黏性末端或平末端磷酸二酯鍵膠原蛋白酶細(xì)胞的接觸抑制傳代血清、血漿【解析】
1、基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需要用同種限制酶切割目的基因和載體,以產(chǎn)生相同的末端,然后用DNA連接酶連接,恢復(fù)被切開(kāi)的核苷酸之間的磷酸二酯鍵,RNA聚合酶能夠與啟動(dòng)子識(shí)別并結(jié)合催化轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行,這是是外源基因在受體細(xì)胞中啟動(dòng)表達(dá)的關(guān)鍵。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織)→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)?!驹斀狻浚?)腺病毒屬于動(dòng)物病毒,其無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu),營(yíng)寄生生活,必須寄生于宿主的活細(xì)胞中才能繁殖;用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載體上應(yīng)具有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位啟動(dòng)子,這樣才能驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄形成mRNA,最終合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)。(2)構(gòu)建腺病毒載體時(shí),先用同種限制酶對(duì)腺病毒DNA和外源基因進(jìn)行切割,可以獲得相同的黏性末端或平末端,再用DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(3)對(duì)山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理得到單個(gè)成纖維細(xì)胞,便于細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸;培養(yǎng)至貼滿瓶壁時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為接觸抑制;這時(shí)重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續(xù)進(jìn)行傳代培養(yǎng);由于人們對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒(méi)有完全搞清楚,因此培養(yǎng)時(shí)使用的合成培養(yǎng)基,通常需加入血漿、血清等一些天然成分,以滿足細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的全面要求?!军c(diǎn)睛】本題考查基因工程和細(xì)胞工程的知識(shí)點(diǎn),要求學(xué)生掌握基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程以及啟動(dòng)子的作用,把握操作工具限制酶和DNA連接酶的應(yīng)用及其作用結(jié)果,理解動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程和特點(diǎn),把握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的概念,識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件,這是解決問(wèn)題的關(guān)鍵。10、防止自身環(huán)化DNA連接轉(zhuǎn)化滅活的病毒防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染不是基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合【解析】
制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過(guò)程,①是目的基因與運(yùn)載體結(jié)合,②是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,給老鼠注射特定的抗原蛋白:VP40蛋白引起小鼠的特異性免疫,產(chǎn)生特定B淋巴細(xì)胞,④過(guò)程是動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程,據(jù)此答題即可。【詳解】(1)過(guò)程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割可以使目的基因的兩端獲得不同的粘性末端,所以這樣處理的優(yōu)點(diǎn)是防止目的基因自身環(huán)化,此外目的基因與運(yùn)載體結(jié)合還需DNA連接酶。
(2)過(guò)程②是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,此過(guò)程首先需要用Ca2+處理大腸桿菌,使其處于感受態(tài),VP40基因進(jìn)入大腸桿菌后維持穩(wěn)定并表達(dá)的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)化。
(3)與植物原生質(zhì)體融合相比原理基本相同,植物原生質(zhì)體融合常用物理方法和化學(xué)方法,動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法是用滅活的病毒處理,通常在選擇培養(yǎng)基中需加入抗生素,目的是防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染.選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞,還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)過(guò)多次篩選才可以獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,所以選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體不是單克隆抗體。
(4)圖示過(guò)程應(yīng)用的生物技術(shù)有:基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合?!军c(diǎn)睛】本題考查基因工程和細(xì)胞工程,解題的關(guān)鍵是要能夠熟記基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)。11、伴X染色體隱性遺傳雜交組合甲的親本均為野生型,F(xiàn)1中雌性個(gè)體均為野生型,而雄性個(gè)體中出現(xiàn)了朱紅眼BbXAXaBbXAY兩對(duì)等位基因均為隱性時(shí)表現(xiàn)為白色【解析】
根據(jù)雜交組合甲分析可得,等位基因A、a位于X染色體上;根據(jù)雜交組合乙分析可得,等位基因B、b位于常染色體上;同時(shí)結(jié)合雜交組合甲、乙、丙分析可知,白眼雄性個(gè)體是由于兩對(duì)等位基因均呈隱性表達(dá)時(shí)出現(xiàn)?!驹斀狻浚?)分析雜交組合甲可得,野生型和朱紅眼的遺傳方式受到性別影響,兩個(gè)野生型親本雜交,得到全是野生型的雌性后代和既有野生型又有朱紅眼雄性后代,故野生型和朱紅眼的遺傳方式為伴X染色體隱性遺傳;
(2)分析可得A、a基因位于X染色體上,后代中雌性無(wú)朱紅眼,雄性有朱紅眼,所以親本基因型為XAXa和XAY,B、b基因位于常染色體上,后代中出現(xiàn)野生型:棕眼=3:1,故親本基因型為Bb和Bb,因此雜交組合丙中親本的基因型為BbXAXa和BbXAY;F1中出現(xiàn)白眼雄性個(gè)體的原因可以發(fā)現(xiàn)是由于A、a基因和B、b基因均呈隱性表達(dá)時(shí)出現(xiàn);
(3)由于雜交組合丙中親本的基因型為BbXAXa和BbXAY,故雜交組合丙F1中的白眼雄性個(gè)體的基因型為b
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