廣東省廣州市番禺區(qū)廣東第二師范學(xué)院番禺附中2025屆高三3月份第一次模擬考試生物試卷含解析

廣東省廣州市番禺區(qū)廣東第二師范學(xué)院番禺附中2025屆高三3月份第一次模擬考試生物試卷注意事項1．考生要認真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．基因型為AaBb(兩對基因自由組合)的某種動物，可以產(chǎn)生如圖中各種基因型的子細胞，下列說法錯誤的是（）A．在動物的卵巢和睪丸中能同時找到AaBb、AB、Ab、aB和ab五種基因型的細胞B．經(jīng)過程④產(chǎn)生的性狀一定能傳遞給子代C．導(dǎo)致過程③的根本原因是堿基對的替換、增添和缺失D．與過程①、②、④相比，過程③特有的現(xiàn)象是可以產(chǎn)生新基因2．旱金蓮由三對等位基因控制花的長度，這三對基因分別位于三對同源染色體上，作用相等且具疊加性。已知每個顯性基因控制花長為5mm，每個隱性基因控制花長為2mm?；ㄩL為24mm的同種基因型個體相互授粉，后代出現(xiàn)性狀分離，其中與親本具有同等花長的個體所占比例是（）A．1/16 B．1/8 C．5/16 D．3/83．下列有關(guān)使用高壓蒸汽滅菌鍋的操作，錯誤的是()A．加水時，水面應(yīng)與三角擱架平齊B．加蓋時，將排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)C．加熱時，待冷空氣完全排盡后關(guān)上排氣閥D．切斷電源后，打開排氣閥使壓力表降到零后開蓋4．下列有關(guān)生物育性的敘述正確的是（）A．兩種綠色開花植物雜交所得到的后代植株一定可育B．綠色開花植物的任一細胞離體培養(yǎng)得到的植株一定可育C．同一綠色開花植物的兩個細胞進行植物細胞雜交得到的植株一定可育D．某一植物經(jīng)一定濃度秋水仙素處理后得到染色體加倍的植株一定可育5．研究發(fā)現(xiàn)，與正常女性相比，Turner綜合征患者(女性)易患血友病(伴Ⅹ染色體隱性遺傳病)，據(jù)此可推測Turner綜合征患者體內(nèi)可能（）A．多一條X染色體B．少一條X染色體C．血小板凝集成團D．紅細胞凝集成團6．下列敘述正確的是（）A．細胞不能無限長大，所以細胞生長到一定程度就會分裂產(chǎn)生新細胞B．細胞分裂和分化是多細胞生物體正常發(fā)育的基礎(chǔ)，細胞衰老和凋亡則不是C．細胞癌變細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，細胞衰老細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)也發(fā)生變化D．一個細胞的原癌基因和抑癌基因中發(fā)生5-6個基因突變，人就會患癌癥7．已知抗維生素D佝僂病為伴X染色體顯性遺傳病，血友病為伴X染色體隱性遺傳病。下列有關(guān)人類遺傳病的說法正確的是A．—對患有抗維生素D佝僂病的夫婦，所生的女兒不一定患病B．鐮刀形細胞貧血癥的根本病因是血紅蛋白中一個氨基酸被替換C．某家庭中母親患血友病，父親正常，生了一個凝血正常且性染色體組成為XXY的孩子，則其形成原因最可能是卵細胞異常D．人群中某常染色體顯性遺傳病的發(fā)的發(fā)病率為19%，一對夫婦中妻子患病，丈夫正常，則所生子女不患該病的概率是9/198．（10分）下列關(guān)于生長素及其作用的敘述，正確的是（）A．植物的生長是由單側(cè)光引起的B．植物不同器官對生長素的敏感程度不相同C．生長素由苗尖端產(chǎn)生并促進尖端的伸長D．不同濃度的生長素對植物同一器官的作用效果一定不同二、非選擇題9．（10分）家蠶的性別決定方式為ZW型，家蠶體色正常與油質(zhì)透明為一對相對性狀，油質(zhì)透明由Z染色體上的隱性基因b控制，且在W染色體上沒有其等位基因?；卮鹣铝袉栴}：（1）用正常雄性與油質(zhì)透明雌性雜交得到F1，F(xiàn)1只有一種表現(xiàn)型，則雜交親本的基因型為_____，F(xiàn)1個體自由交配，F(xiàn)2會出現(xiàn)油質(zhì)透明的家蠶，其性別是____性。（2）為了給飼養(yǎng)場提供產(chǎn)絲能力強的雄蠶，科研人員選擇基因型為_________的親本進行雜交，使其子代中雌性均為油質(zhì)透明，雄性均為正常。（3）位于常染色體上的D/d基因，當(dāng)d基因純合時可使雄蠶性反轉(zhuǎn)成不育的雌蠶，但對雌蠶沒有影響。在考慮D/d基因的情況下，若一只純合正常雄蠶與一只純合油質(zhì)透明雌蠶雜交，所得F1代的雌雄蠶隨機交配，F(xiàn)2代雌雄比例為5︰3，則親本雌蠶的基因型為_____，F(xiàn)2代雌蠶中共有______種基因型，其中不含W染色體的個體所占比例為______。10．（14分）下圖是綠色植物光合作用過程示意圖(字母代表物質(zhì))。請分析回答下列問題：（1）圖中A物質(zhì)最終被細胞利用的場所是_____________。（2）當(dāng)CO2供應(yīng)充足時，突然停止光照，C3的含量將會______（填“上升”、“下降”或“不變”）。（3）若要分析該植物葉綠體中的色素種類，提取色素時常用到的提取液是_______。將裝有提取濾液的試管密封并置于適當(dāng)光照條件下幾分鐘后，試管內(nèi)氧氣的含量______(填“增加”、“減少”或“不變”)。11．（14分）蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對人體沒有影響。我國科學(xué)家欲獲得高效表達蛋白A的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌作為微生物農(nóng)藥，做了相關(guān)研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒，再將重組質(zhì)粒置于經(jīng)_________處理的大腸桿菌細胞懸液中，獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。（2）檢測發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)入的蛋白A基因在大腸桿菌細胞中表達效率很低，研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），并按圖2方式依次進行4次PCR擴增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點的_________技術(shù)。②圖2所示的4次PCR應(yīng)該分別如何選擇圖1中所示的引物？請?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進一步將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和_________分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。為檢測表達產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較_________的大小，以確定表達產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，其優(yōu)點是_________。12．熱性驚厥（FC）是指當(dāng)患兒上呼吸道感染或其他感染性疾病導(dǎo)致體溫在38～40℃時發(fā)生的驚厥。與小兒腦發(fā)育不成熟、神經(jīng)細胞結(jié)構(gòu)簡單、興奮性神經(jīng)遞質(zhì)和抑制性神經(jīng)遞質(zhì)不平衡等有關(guān)。分析回答問題。（1）幼兒由于_______（體溫調(diào)節(jié)中樞）發(fā)育不成熟，對體溫的控制力不強。當(dāng)機體發(fā)熱時，神經(jīng)細胞的代謝增強，中樞神經(jīng)系統(tǒng)處于過度興奮狀態(tài)，使高級神經(jīng)中樞_______產(chǎn)生強烈的放電，患兒全身或局部的骨骼肌不自主收縮，即出現(xiàn)肢體抽搐等現(xiàn)象。（2）腦中約60%～70%的突觸利用谷氨酸作為主要的神經(jīng)遞質(zhì)，患兒高熱時神經(jīng)細胞會釋放大量的谷氨酸，圖為其部分調(diào)節(jié)過程示意圖。①大量的谷氨酸以________的運輸方式從突觸前膜釋放，與突觸后膜上的A受體結(jié)合，促進大量進入細胞內(nèi)，激活________進而產(chǎn)生過量的NO，引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)麻痹或痙攣；同時使神經(jīng)與肌膜對鈉離子通透性增高引發(fā)_________（靜息電位/動作電位），導(dǎo)致驚厥發(fā)作。②正常生理狀態(tài)下，當(dāng)細胞內(nèi)過多時，通過________（結(jié)構(gòu)）逆濃度將過多的排出，以避免可能引起的神經(jīng)細胞衰老或死亡。（3）長期的反復(fù)發(fā)生的FC可移行為癲癇（EP），通過對156例FC患兒的腦電圖（EEG）進行分析，得到FC的臨床與EEG分析如下表所示。有關(guān)分析不正確的是_______。體溫/℃FC發(fā)作EEG檢查年齡/歲≤38.5＞38.5首次反復(fù)二周內(nèi)二周后≤3＞3EEG正常例數(shù)101017427456510011EEG異常例數(shù)1530243134112817合計251319858797712828①首次發(fā)作體溫越低，EEG異常率越高②FC患兒年齡越大，EEG異常檢出率越低③若二周后EEG檢查仍然異常，則需進一步治療以避免FC可能移行為EP④減少長期的反復(fù)發(fā)生的FC對EP的預(yù)防有一定的價值

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

分析題圖：①表示減數(shù)分裂形成配子，該過程中能發(fā)生基因重組；②表示有絲分裂形成子細胞；③過程后基因發(fā)生改變，說明該過程中發(fā)生了基因突變，能產(chǎn)生新基因；④過程后，基因數(shù)目減少，應(yīng)該發(fā)生了染色體變異?！驹斀狻緼、動物的卵原細胞和精原細胞都可以進行有絲分裂和減數(shù)分裂，因此在動物的卵巢和睪丸中能同時找到AaBb、AB、Ab、aB和ab五種基因型的細胞，A正確；B、根據(jù)以上分析已知，過程④可能發(fā)生了染色體變異，若該變異發(fā)生在體細胞，則一般不會遺傳給后代，B錯誤；C、根據(jù)以上分析已知，過程③發(fā)生了基因突變，而基因突變指的是基因中堿基對的增添、缺失或改變，C正確；D、只有基因突變能產(chǎn)生新基因，圖中只有③過程發(fā)生了基因突變，因此與過程①、②、④相比，過程③特有的現(xiàn)象是可以產(chǎn)生新基因，D正確。故選B。2、D【解析】

根據(jù)題干信息，旱金蓮隱性純合子aabbcc的高度為12mm，顯性純合在AABBCC的高度為30mm，每增加一個顯性基因，高度增加3mm。所以花長為24mm的個體中應(yīng)該有（24-12）÷3=4個顯性基因?！驹斀狻扛鶕?jù)題意花長為24mm的個體中應(yīng)該有（24-12）÷3=4個顯性基因，且后代有性狀分離，不可能是純合子，所以基因型可能是AaBbCC、AaBBCc、AABbCc。以AaBbCC為例，其自交后代含有4個顯性基因的比例為1/4×1/4×1+1/4×1/4×1+1/2×1/2×1=6/16=3/8，D正確，ABC錯誤，故選D?！军c睛】該題考查了多基因的累加效應(yīng)，基因自由組合定律的實質(zhì)及應(yīng)用的相關(guān)知識點，解題的關(guān)鍵是根據(jù)單個顯性基因、單個隱性基因分別控制的花長，確定相關(guān)個體基因組成，再根據(jù)基因自由組合定律解題。3、D【解析】

高壓滅菌的原理是在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加；在0.1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達121℃，在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。注意：完全排除鍋內(nèi)空氣，使鍋內(nèi)全部是水蒸氣，滅菌才能徹底．高壓滅菌放氣有幾種不同的做法，但目的都是要排凈空氣，使鍋內(nèi)均勻升溫，保證滅菌徹底?！驹斀狻吭谑褂酶邏赫羝麥缇仠缇鷷r，加水時的水面應(yīng)與三角擱架平齊，A正確；加蓋時，應(yīng)該將排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)，B正確；加熱時，應(yīng)該等冷空氣完全排盡后再關(guān)上排氣閥，C正確；切斷電源后，應(yīng)該等壓力表降到零后再打開排氣閥并開蓋，D錯誤。4、D【解析】

1、染色體數(shù)目變異可以分為兩類：一類是細胞內(nèi)個別染色體的增加或減少，另一類是細胞內(nèi)染色體數(shù)目以染色體組的形式成倍地增加或減少。2、植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。3、植物的體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術(shù)形成雜種細胞，進而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細胞雜交依據(jù)的原理是細胞膜的流動性和植物細胞的全能性?！驹斀狻緼、兩種綠色開花植物之間具有生殖隔離，不能雜交或者雜交所得到的后代植株不育，A錯誤；B、二倍體綠色開花植物的花粉細胞離體培養(yǎng)得到的單倍體植株不可育，B錯誤；C、同一綠色開花植物的兩個細胞，如根細胞和花粉細胞進行植物細胞雜交得到的植株含有三個染色體組，由于減數(shù)分裂時聯(lián)會紊亂不可育，C錯誤；D、某一植物經(jīng)一定濃度秋水仙素處理后得到染色體加倍的植株一定可育，D正確。故選D?！军c睛】本題考查有關(guān)生物育性的知識，要求考生識記植物組織培養(yǎng)，理解植物體細胞雜交，理解染色體數(shù)目變異，能結(jié)合所學(xué)的知識準確判斷各敘說。5、B【解析】

染色體數(shù)目變異的基本類型：（1）細胞內(nèi)的個別染色體增加或減少，如21三體綜合征，患者比正常人多了一條21號染色體。（2）細胞內(nèi)的染色體數(shù)目以染色體組的形式增加或減少?！驹斀狻垦巡榘閄隱性遺傳病，正常情況下，女性患者需要滿足兩條X染色體上都是隱性基因時才患病，而Turner綜合征的女性患者更容易患血友病，說明很有可能是少一條X染色體，B正確，故選B。6、C【解析】

1、細胞分化是指在個體發(fā)育中，由一個或一種細胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)，結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。2、細胞凋亡是由基因決定的細胞編程序死亡的過程，在成熟的生物體內(nèi)，細胞的自然更新、被病原體感染的細胞的清除，是通過細胞凋亡完成的。細胞壞死是由外界環(huán)境因素引起的，是不正常的細胞死亡，對生物體有害。3、衰老細胞的特征：（1）細胞內(nèi)水分減少，細胞萎縮，體積變小，但細胞核體積增大，染色質(zhì)固縮，染色加深；（2）細胞膜通透性功能改變，物質(zhì)運輸功能降低；（3）細胞色素隨著細胞衰老逐漸累積；（4）有些酶的活性降低；（5）呼吸速度減慢，新陳代謝減慢。4、細胞癌變的根本原因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變，其中原癌基因負責(zé)調(diào)節(jié)細胞周期，控制細胞生長和分裂的過程，抑癌基因主要是阻止細胞不正常的增殖?！驹斀狻緼、細胞開始生長，長到一定程度后，除一小部分保持分裂能力，大部分喪失了分裂能力，A錯誤；B、細胞衰老和凋亡也有利于多細胞生物體正常發(fā)育，也是多細胞生物體正常發(fā)育的必要條件，B錯誤；C、癌變細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，細胞膜上的糖蛋白減少，細胞衰老也會表現(xiàn)為細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變，C正確；D、癌癥的發(fā)生并不是單一基因突變的結(jié)果，至少在一個細胞中發(fā)生5-6個基因突變，才能賦予癌細胞所有的特征，這是一種累積效應(yīng)，D錯誤。故選C。7、D【解析】一對患有抗維生素D佝僂病的夫婦，該病為伴X染色體顯性遺傳病，由于父親患病，因此所生女兒一定患病，A錯誤；鐮刀型細胞貧血癥的根本原因是血紅蛋白基因中一個堿基對被替換，B錯誤；血友病是伴X染色體隱性遺傳?。ㄓ肏、h表示），父親正常，母親患血友病，生了一個性染色體為XXY的凝血正常的兒子，則這對夫婦的基因型為XHY×XhXh，兒子的基因型為XHXhY。根據(jù)兒子的基因型可知，他是由含XHY的精子和含Xh的卵細胞結(jié)合形成的受精卵發(fā)育而來的，即其形成原因可能是精子異常，C錯誤；假設(shè)控制該遺傳病的基因為A、a，已知該病的發(fā)病率為19%，則正常（aa）的概率為81%，根據(jù)哈迪-溫伯格定律，a的基因頻率為90%，A的基因頻率為10%，由此人群中AA的基因型概率為=10%×10%=1%，Aa的基因型頻率=2×10%×90%=18%，所以患病妻子的基因型為Aa的概率為18%/（18%+1%）=18/19，其后代不患該病的概率為18/19×1/2=9/19，D正確?！军c睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握基因頻率和基因型頻率的關(guān)系，能夠利用基因型頻率計算基因頻率，進而計算出正常個體中雜合子的概率，最后計算后代不患病的概率。8、B【解析】

生長素是植物產(chǎn)生的、對植物有調(diào)節(jié)作用的激素之一。生長素的作用與濃度有關(guān)，低濃度起促進作用，高濃度起抑制作用，這稱為生長素的兩重性，而且生長素的作用往往與發(fā)生作用的器官有密切關(guān)系。植物的不同部位對同樣濃度的生長素有不一樣的反應(yīng)，如禾本科植物的向光生長，即為單側(cè)光引起尖端生長素的橫向運輸，導(dǎo)致背光側(cè)的生長素濃度高于向光側(cè)，因此植物彎向光源生長；又如植物根的向地性，由于重力作用，近地側(cè)的生長素濃度比遠地側(cè)的生長素濃度高，而根對生長素比較敏感，所以根向地生長，而莖對生長素濃度沒有根敏感，所以莖向上（背地）生長?！驹斀狻緼、植物的向光生長是由單側(cè)光引起的，而生長與植物激素、環(huán)境、植物自身條件等有關(guān)，A錯誤；B、植物不同器官對生長素的敏感程度不相同，如根對生長素比莖對生長素更敏感，B正確；C、生長素由苗尖端產(chǎn)生并促進尖端以下的伸長，C錯誤；D、不同濃度的生長素對植物同一器官的作用效果有可能相同，如處于最適濃度的兩側(cè)的效果可能相同，D錯誤。故選B。二、非選擇題9、ZBZB，ZbW雌ZbZb×ZBWddZbW81/5【解析】

某種家蠶的性別決定是ZW型，雄蠶和雌蠶的性染色體組成分別是ZZ和ZW，由題目中的信息可知，油質(zhì)透明雄性的基因型為ZbZb，正常雄性的基因型為ZBZB和ZBZb，油質(zhì)透明雌性基因型為ZbW，正常雌性基因型為ZBW，根據(jù)題目中的問題進行分析判斷才能做出準確回答?！驹斀狻浚?）用正常雄性與油質(zhì)透明雌性雜交得到F1，F(xiàn)1只有一種表現(xiàn)型，說明親本雄性的基因型為ZBZB，雌性為ZbW；F1個體的基因型為ZBZb和ZBW，表現(xiàn)型為雌雄都為正常，F(xiàn)1個體隨機交配得F2中出現(xiàn)油質(zhì)透明的基因型為ZbW，其性別為雌性。（2）為了給飼養(yǎng)場提供產(chǎn)絲能力強的雄蠶，則應(yīng)該通過雜交獲得油質(zhì)透明的雌蠶（ZbW），選擇油質(zhì)透明的雄蠶（ZbZb）和正常雌蠶（ZBW）雜交，這樣后代雄蠶都是正常（ZBZb），雌蠶都是油質(zhì)透明（ZbW）。（3）由題意知，D（d）、B（b）分別位于2對同源染色體上，因此遵循自由組合定律，讓一只純合正常雄蠶與一只純合油質(zhì)透明雌蠶雜交，所得F1代的雌雄蠶隨機交配，如果不考慮D/d，F(xiàn)2代雌雄比例為1︰1，而考慮D/d基因，F(xiàn)2代雌雄比例為5︰3，說明有1/8雄蠶發(fā)生性逆轉(zhuǎn)，dd的概率是1/4，子一代的基因型是Dd×Dd，親代雄蠶基因型是DDZBZB，雌蠶基因型是ddZbW；子一代的基因型是DdZBZb、DdZBW，子二代雌蠶基因型是D_ZBW、D_ZbW、ddZBW、ddZbW、ddZBZ-，8種；不含W染色體的雌蠶個體是ddZBZ-，占2/10=1/5?！军c睛】本題旨在考查學(xué)生理解基因分離定律和自由組合定律的實質(zhì)，ZW型的性別決定和伴性遺傳，基因?qū)π誀畹挠绊?，把握知識的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)，并應(yīng)用相關(guān)知識結(jié)合題干信息進行推理、綜合解答問題。10、線粒體內(nèi)膜上升無水乙醇不變【解析】

分析題圖：反應(yīng)Ⅰ為光反應(yīng)，反應(yīng)Ⅱ為暗反應(yīng)，A為氧氣，B為[H]，C為ADP，D為ATP?！驹斀狻浚?）圖中A物質(zhì)為水光解產(chǎn)生的O2，在有氧呼吸第三階段與還原氫結(jié)合生成水，場所是線粒體內(nèi)膜。

（2）當(dāng)CO2供應(yīng)充足時，突然停止光照，導(dǎo)致光反應(yīng)產(chǎn)生的[H]和ATP減少，C3被還原的量減少，而短時間內(nèi)二氧化碳的固定速率不變，所以C3的含量將會上升。（3）提取植物葉綠體中色素常用到的提取液是無水乙醇。將裝有提取濾液的試管密封并置于適當(dāng)光照條件下幾分鐘后，由于色素提取液中的光合色素不能獨立進行光合作用，因此試管中的O2含量不變?！军c睛】本題考查了光合作用的有關(guān)知識，意在考查考生理解色素的提取和分離，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力，屬于中檔題。11、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）抗原-抗體雜交抑菌圈對人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質(zhì)粒，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。3、PCR技術(shù)擴增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步：基因表達載體的構(gòu)建1、目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。2、組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因（1）啟動子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。（2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．常用的標記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞1、轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。2、常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ秋@微注射技術(shù)．此方法的受體細胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少，最常用的原核細胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca2+處理細胞，使其成為感受態(tài)細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。3、重組細胞導(dǎo)入受體細胞后，篩選含有基因表達載體受體細胞的依據(jù)是標記基因是否表達。第四步：目的基因的檢測和表達1、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。2、其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用用標記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進行抗原——抗體雜交。4、有時還需進行個體生物學(xué)水平的鑒定，如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀?！驹斀狻浚?）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒；大腸桿菌作為受體細胞，需要用氯化鈣處理，以便重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。（2）①根據(jù)題意和圖示分析，經(jīng)過4次PCR技術(shù)后獲得了新的基因，這是一種定點的基因突變技術(shù)。②與研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），因此4次PCR應(yīng)該分別選擇如圖所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根據(jù)實驗中的對照原則，若要比較新蛋白A的表達效率是否提高，則需設(shè)置三組實驗實驗變量的處理分別為：僅含新蛋白質(zhì)A的重組質(zhì)粒，僅含蛋白A的重組質(zhì)粒和空白對照（僅含空質(zhì)粒，以排除空質(zhì)?？赡墚a(chǎn)生的影響）。因此，將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用抗原——抗體雜交方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。由于蛋白A（或新蛋白A）具有抗菌作用，所以為檢測表達產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較抑菌圈的大小，以確定表達產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)