中藥鑒定學課件中藥安全性評價

中藥鑒定學課件中藥安全性評價據(jù)統(tǒng)計,自1915~1994年間得110種醫(yī)藥學期刊上關于中藥不良反應得報道累計達6061例。這些不良反應主要集中在肝、腎、肺、心以及內(nèi)分泌系統(tǒng)、造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等諸多方面。近期在國外發(fā)生得中藥不良反應,如日本得小柴胡事件、歐洲得馬兜鈴事件、新加坡、馬來西亞得黃連事件等,更加深了人們對中藥安全性得擔憂。然而,中醫(yī)藥體系具有自身得特殊性,影響中藥安全性得因素也較為復雜,除劑量問題外,還涉及到品種、炮制、配伍、煎服方法等諸多因素,而且可變因素多,檢測難度大。因此,如何科學正確地評價中藥得安全性給中藥研究者提出了更高得要求。因為她既關系到臨床得用藥安全,又關系到中醫(yī)藥事業(yè)得順利發(fā)展,就是一項具有戰(zhàn)略意義得重大研究課題。第一節(jié)影響中藥安全性得物質(zhì)分類第一節(jié)影響中藥安全性得物質(zhì)分類一、內(nèi)源性具有毒副作用得物質(zhì)這些化學成分大多就是生物體得次生代謝產(chǎn)物(secondarymetabolites),包括生物堿、萜類、揮發(fā)油類、酚類、醌類、內(nèi)酯類、苷類等。這些成分很早就作為藥物在臨床應用,但隨著研究得不斷深入,逐漸地發(fā)現(xiàn)這些產(chǎn)生藥效得物質(zhì)也常伴有不同程度得毒副作用。通常按其毒害得部位分類。

1、具有消化系統(tǒng)毒性得中藥常表現(xiàn)為胃腸道反應,如惡心、嘔吐、上腹不適、腹痛、腹瀉等。同時,還有可能引起肝臟毒性反應,如黃疸、肝腫大、肝炎、膽汁淤積、肝硬化、肝細胞壞死等。根據(jù)臨床報道和動物實驗結(jié)果表明,常引起胃腸道反應得中藥有:鴉膽子Bruceajavanica(L、)Merr、、了哥王Wikstroemiaindica(L、)C、A、Mey、、常山DichroafebrifugaLour、、苦楝子MeliaazedarachL、、巴豆CrotontigliumL、等。具有肝臟毒性得中藥有:姜半夏Pinelliaternate(Thunb、)Breit、、桑寄生Taxilluschinensis(DC、)Danser、蒲黃TyphaangustifoliaL、等。天花粉TrichosantheskirilowiiMaxim、或其注射劑可引起肝功能異常;千里光SenecioargunensisTurcz、可造成肝內(nèi)血管閉塞;野百合CrotalariasessilifloraL、提取物可引起急性肝炎。川楝子MeliatoosendanSieb、etZucc、、蒼耳子XanthiumsibiricumPatr、、草烏AconitumkusnezoffiiReichb、、蓖麻子RicinusmunisL、、雷公藤TripterygiumwilfordiiHook、f、等中藥得煎劑可導致肝損害;大黃RheumpalmatumL、、澤瀉Alismaorientalis(Sam、)Juzep、或其靜脈注射液會引起膽紅素代謝障礙導致黃疸。

2、具有泌尿系統(tǒng)毒性得中藥

毒性癥狀有尿少、尿閉、尿頻、尿急、浮腫、血尿、蛋白尿、尿毒癥、腎功能衰竭等。關木通AristolochiamanshuriensisKom、、廣防己AristolochiafangchiY、C、WuexL、D、chouetS、M、Hwang。另據(jù)報道,具有腎臟毒性得常用中藥還有草烏AconitumkusnezoffiiReichb、、巴豆CrotontigliumL、、天花粉TrichosantheskirilowiiMaxim、、蜈蚣ScolopendrasubspinipesmutilansL、Koch、斑蝥MylabrisphalerataPallas、光慈菇Tulipaedulis(Miq、)Baker、益母草LeonurusheterophyllusSweet、厚樸MagnoliaofficinalisRehd、etWils、等。3、具有中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性得中藥

癥狀為口唇麻木、嗜睡、抽搐、驚厥、牙關緊閉、眩暈、意識模糊、煩躁不安、昏迷、瞳孔縮小或放大、嚴重者死亡。臨床常用得中藥:馬錢子Strychnosnux-vomicaL、所含士得寧(strychnine);顛茄屬Hyoscyamus植物含有得阿托品(atropine)、天仙子胺(hyoscyamine);西紅花CrocussativusL、所含得藏紅花素(crocetin);罌粟PapaversomniferumL、所含得嗎啡(morphine)都被動物實驗證實具有不同程度得中樞神經(jīng)毒性。4、具有造血系統(tǒng)毒性得中藥

癥狀就是溶血性貧血、缺血性貧血、白細胞減少、粒細胞缺乏、再生障礙性貧血、嚴重者導致死亡。可引起造血系統(tǒng)毒性反應得中藥有:雷公藤TripterygiumwilfordiiHook、f、、光慈菇Tulipaedulis(Miq、)Baker、八角蓮Dysosmaversipellis(Hance)M、Cheng、青風藤Sinomeniumacutum(Thumb、)Rehd、etWils、以及正清風痛寧、蝮蛇抗栓酶、穿琥寧注射液、小檗堿(berberine)、枯痔寧、感冒清、感冒通等中成藥制劑。5、具有心血管系統(tǒng)毒性得中藥

常見得心血管毒性得癥狀就是心律失常、心悸、胸悶、循環(huán)衰竭、嚴重者死亡。烏頭AconitiumcarmichaeliDebx、、附子及其炮制品均為臨床常用中藥,具有鎮(zhèn)靜、強心、抗腫瘤等作用,常用于多種痛癥得治療。其主要藥效成分烏頭堿(aconitine)、中烏頭堿(mesaconitine)、次烏頭堿(hypaconitine)等可引起心血管毒性,并可損害外周脊髓。其她具有心血管毒性反應得中藥還有蟾酥VenenumBufonis、藜蘆VeratumnigrumL、、黃花夾竹桃Thevetiaperuviana(Pers、)、K、Schum、等。6、具有呼吸系統(tǒng)毒性得中藥

癥狀有咳嗽、呼吸困難、肺水腫、呼吸麻痹、呼吸衰竭、甚至窒息死亡。常見產(chǎn)生呼吸系統(tǒng)毒性得中藥有:苦杏仁SemenArmeniacaeAmarum和桃仁SemenPersicae所含苦杏仁苷(amygdalin)、鬧羊花RhododendronmolleG、Don所含毒性成分八厘麻毒素(andromedotoxin)、烏頭AconitiumcarmichaeliDebx、和附子中所含成分烏頭堿(aconitine)、細辛AsarumheterotropoidesFr、Schmidtvar、mandshuricum(Maxim、)Kitag、所含成分甲基丁香酚(methyleugenol)等,這些成分主要就是通過影響延髓呼吸中樞引起呼吸困難乃至呼吸衰竭。大家學習辛苦了，還是要堅持繼續(xù)保持安靜7、具有免疫系統(tǒng)毒性得中藥

最常見得免疫系統(tǒng)得毒性就就是過敏反應。通常表現(xiàn)為皮疹、蕁麻疹、哮喘、發(fā)熱、黏膜水腫等癥狀,有時甚至會導致過敏性休克等嚴重后果。常引起過敏反應得大多就是中藥注射劑。造成這種毒性作用得原因之一就就是中藥注射劑中所含得大分子動、植物蛋白,以及具有抗原或半抗原性質(zhì)得物質(zhì),如綠原酸、酶、皂苷和角質(zhì)蛋白等。有些中藥如雷公藤TripterygiumwilfordiiHook、f、、防己StephaniatetrandraS、Moore等,還存在不同程度得免疫抑制作用。8、具有致畸胎、致突變及致癌作用得中藥

有些中藥可干擾胚胎得正常發(fā)育而引起畸胎。具有這種生殖毒性得中藥有雷公藤TripterygiumwilfordiiHook、f、、棉酚(gossypol)、昆明山海棠Tripterygiumhypoglaucum(Lévl、)Hutch、、苦瓜MomordicacharantiaL、、川楝子MeliatoosendanSieb、etZucc、、天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)有些中藥可引起基因突變和癌變,如檳榔ArecacatechuL、、款冬花TussilagofarfaraL、、千里光SenecioargunensisTurcz、、廣防己AristolochiafangchiY、C、WuexL、D、chouetS、M、Hwang、關木通AristolochiamanshuriensisKom、、細辛AsarumheterotropoidesFr、Schmidtvar、mandshuricum(Maxim、)Kitag、、土荊芥ChenopodiumambrosioidesL、、雄黃(Realgar)、砒霜(Arsenouseoxide)、土貝母Bolbostemmapaniculatum(Maxim、)Franq、、野百合CrotalariasessilifloraL、等。如果長期過量使用這類中藥,可增加基因突變和引發(fā)癌癥得概率。此外,石菖蒲AcorustatarinowiiSchott、花椒ZanthoxylumbungeanumMaxim、、八角茴香IlliciumverumHook、f、等植物所含得黃樟醚(safrole)和青木香AristolochiadebilisSieb、etZucc、等所含得N-硝基化合物等,現(xiàn)已證實可誘發(fā)動物產(chǎn)生肝癌。9、具有內(nèi)分泌系統(tǒng)毒性得中藥

中藥引起內(nèi)分泌毒性得研究報道不多,但較為明確地就是含重金屬中藥對內(nèi)分泌具有較大得毒性,例如砒霜和朱砂。砷元素破壞人和動物得內(nèi)分泌系統(tǒng),通常就是以阻斷或模仿激素得方式來干擾正常激素得作用。二、外源性具有毒害作用得物質(zhì)外源性具有毒害作用得物質(zhì)主要來自中藥材得栽培或養(yǎng)殖、采收加工、包裝、運輸和貯藏等環(huán)節(jié)。此外,中藥制劑生產(chǎn)中所涉及到得輔料、提取溶劑、工藝設備、接觸器皿等也都就是外源性有毒副作用物質(zhì)污染得重要途徑。1、農(nóng)藥類有害物質(zhì)

目前我國生產(chǎn)和使用得農(nóng)藥主要分為5類:第一類為有機磷農(nóng)藥,屬磷酸酯類或硫代磷酸酯類化合物,就是應用最廣泛得農(nóng)藥。長期少量接觸有機磷農(nóng)藥會出現(xiàn)慢性中毒癥狀,表現(xiàn)為神經(jīng)衰弱綜合征——頭痛、頭昏、乏力、惡心、食欲不振、視物模糊。第二類為氨基甲酸酯類農(nóng)藥,屬中低毒性農(nóng)藥?？山?jīng)呼吸道、消化道侵入人體,也可經(jīng)皮膚、黏膜緩慢吸收,中毒癥狀與輕度有機磷農(nóng)藥中毒相似。第三類為殺蟲脒,皮膚吸收或消化道侵入人體,可直接對心肌和血管平滑肌引起損害以及嚴重得高鐵血紅蛋白癥造成缺氧,最終導致組織或器官得損害。第四類為溴氰菊酯(凱嗪靈),毒癥狀主要表現(xiàn)為皮膚刺激,有燒灼感、紅斑、丘疹;神經(jīng)系統(tǒng)癥狀表現(xiàn)為:惡心、嘔吐、腹痛、頭痛、頭昏、乏力、肌肉跳動、流涎、視物模糊。第五類為百草枯,毒性非常強,不但損害腎小管,導致蛋白尿、血尿,引起腎功能損害,而且極易引起進行性呼吸困難,最終導致呼吸衰竭而死亡,還會造成心、肝、腎上腺中毒,引起相應癥狀和體征。由于中藥得需求量日漸增多,藥農(nóng)們不得不頻繁地使用各種農(nóng)藥,預防病蟲害,以達到提高中藥栽培品得產(chǎn)量得目得。因此,造成了中藥中農(nóng)藥得污染嚴重。目前,中藥常見得農(nóng)藥殘留(pesticideresidues)種類主要有三大類:①有機氯農(nóng)藥,如六六六(BHC)、滴滴涕(DDT)、及五氯硝基苯(PCNB)等。②有機磷農(nóng)藥,如敵敵畏、對硫磷、甲基對硫磷、樂果、氧化樂果、甲胺磷、久效磷、二嗪農(nóng)、乙硫磷、馬拉硫磷、殺撲磷、乙酰甲胺磷等。③擬除蟲菊酯類農(nóng)藥,如氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯等。2、重金屬類有害物質(zhì)

在常見得重金屬元素中,鉛(Pb)、鎘(Cd)、汞(Hg)、砷(As)就是目前被公認得對人體最有害得4種元素。這些物質(zhì)得毒性作用主要就是通過與體內(nèi)一系列蛋白質(zhì)、酶和氨基酸內(nèi)得官能團上得巰基(-SH)和雙硫鍵(-S-S-)牢固地結(jié)合在一起,從而使蛋白質(zhì)變性,酶失去活性,組織細胞出現(xiàn)結(jié)構(gòu)和功能上得改變。鉛主要損害造血、消化、神經(jīng)、血液、心血管和泌尿系統(tǒng)。鎘可抑制各種氨基酸脫羧酶、組氨酸酶、淀粉酶、過氧化物酶得活性,從而使肝、腎等組織中得酶系統(tǒng)正常功能受損。此外,鎘還有致癌、致畸、導致基因突變得作用。汞主要就是損害腎臟,造成腎功能衰竭。汞中毒還嚴重影響人得中樞神經(jīng)系統(tǒng)、使聽力減弱、語言失控、四肢麻痹甚至造成癡呆。砷主要就是擴張毛細血管,麻痹血管舒張中樞,使腹腔臟器嚴重充血,引起肝、腎、心等實質(zhì)臟器得損害。長期吸收砷化合物會誘發(fā)肺癌和呼吸道腫瘤。3、黃曲霉毒素

黃曲霉菌(aspergillusflavus)含多種黃曲霉毒素(aflatoxins),有強烈得致肝損害和致癌作用。4、其她外來雜質(zhì)

中藥在采收、加工和貯藏等過程中有可能混入其她有毒有害物質(zhì),如某些中藥在產(chǎn)地加工時,為了使藥材色澤潔白,防止霉爛,常在干燥前后用硫黃熏制,造成藥材中二氧化硫(SO2)殘留。除此之外,砂石、泥塊、塵土、明礬、鹽等無機化合物以及其她非藥用部位得雜質(zhì)都直接影響著中藥得安全性。因此,中藥得質(zhì)量標準中常設置有專項檢查。第二節(jié)中藥安全性評價方法中藥安全性評價方法也分為二大類:一類就是屬于中藥毒理學方面得實驗方法。主要分為三個階段:臨床前得中藥毒理學研究、臨床中藥毒理學以及中藥上市后得不良反應監(jiān)測。另一類就是物理和化學分析實驗方法。此類方法主要就是利用經(jīng)典得或現(xiàn)代得物理和化學手段,針對產(chǎn)生毒副作用得中藥成分和有害物質(zhì)進行定性和定量得分析和測定。一、農(nóng)藥殘留量得檢查方法及限量指標(一)農(nóng)藥殘留量檢測樣品得處理

1、取樣原則

2、樣品得前處理

常規(guī)得提取純化方法先進得提取方法:固相萃取、固相微萃取、超臨界流體萃取、微波輔助萃取、凝膠滲透色譜和免疫親和色譜等先進方法(二)農(nóng)藥殘留量得測定方法1、毛細管氣相色譜測定法采用高效能得毛細管氣相色譜柱(CGC)和火焰光度檢測器或高靈敏度得電子捕獲器(ECD)分離和檢測常見得農(nóng)藥得殘留量。具有靈敏度高、選擇性強等特點。應用于中藥中得有機磷、有機氯和擬蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量得測定。2、氣相-紅外光譜測定法可將多種微量得混合農(nóng)藥成分分離又可給出明確得結(jié)構(gòu)信息。缺點:①靈敏度較低,檢測限每組約100ng。②光管得溫度不能高于30℃,否則會影響色譜柱得溫度,使信號強度降低,噪聲急劇增長,造成聯(lián)機檢測困難。③譜庫檢索就是GC-FTIR定性得主要方法,而農(nóng)藥得氣相紅外光譜庫存量很小,嚴重地影響了檢測結(jié)果得分析。(三)農(nóng)藥殘留量得其她測定方法填充柱氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、超臨界流體色譜法、薄層色譜法、毛細管電泳色譜法、酶聯(lián)免疫吸附法、流動注射化學發(fā)光法、共振光散射比濁法以及基于酶抑制原理得分光光度法等。(四)限量指標《中國藥典》(2005年版)在甘草和黃芪項下規(guī)定了每2克藥材所含有機氯類農(nóng)藥限量為:六六六(總BHC)不得過千萬分之二;滴滴涕(總DDT)不得過千萬分之二;五氯硝基苯(PCNB)不得過千萬分之一。二、重金屬及有害元素得檢查方法及限量指標(一)重金屬及有害元素檢測樣品得前處理傳統(tǒng)得方法:濕法消化干法灰化

先進得方法:微波消解技術梯度升壓微波消解技術(二)重金屬及有害元素檢測方法

1、比色法

目前《中國藥典》(2005年版)中收載得重金屬總量得測定就是比色法。2、原子熒光光度法

砷、銻、硒、鍺、錫、鉛、鋅、汞3、原子吸收分光光度法

分為冷原子吸收法、石墨爐原子吸收法和火焰原子吸收法(1)冷原子吸收法:冷原子吸收法較適合測定汞得含量。其主要原理就是利用汞在常溫下蒸氣壓較高和在空氣中不易氧化得特點,用還原劑將高價汞還原成汞蒸氣,汞蒸氣對其特征譜線(253、7nm)具有強烈吸收作用,用載氣將汞蒸氣吹出,通過石英吸收池,汞蒸氣對汞空心陰極燈得輻射產(chǎn)生吸收,從而達到定量分析得目得。(2)石墨爐原子吸收法:較適合于鉛、鎘等重金屬元素。其主要原理就是利用電能加熱盛放試樣得石墨容器,使之達到高溫,以實現(xiàn)試樣得蒸發(fā)和原子化,達到原子化得樣品通過爐內(nèi)光路產(chǎn)生吸收得目得。(3)火焰原子吸收法:銅?；鹧嬖游辗ǖ迷砭褪抢没瘜W火焰實現(xiàn)原子化,使被測元素由試樣中轉(zhuǎn)入氣相,并解離為基態(tài)原子。原子化器由霧化器、霧化室和燃燒器三分部分組成,霧化器將試液霧滴均勻化,然后再噴入火焰中,使進入火焰得微粒原子化。通過測定被測元素得吸收度,計算出被測元素得含量。4、電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(ICP-MS)

原理:將樣品經(jīng)由高頻等離子炬激發(fā)電離后,在電磁場中離子按照質(zhì)荷比進行定性和定量,具有譜線簡單,干擾少、檢出限極低,適應范圍寬達8個數(shù)