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文檔簡介

α-氨基酸含量的測定（非水滴定法）064黃磊α-氨基酸的α位碳原子上連有氨基和羧基，為兩性物質(zhì)，在水溶液中的Ka和Kb很小，溶液的酸堿性均不明顯（羧基Ka＝2.5×10－10，氨基Kb＝2.2×10－12），而且會互相干擾，在水溶液中無法被準確滴定，設計一個滴定α-氨基酸含量的方法。α-氨基酸在水中的形式為：

方法一：

在無水冰醋酸中用HClO4滴定α-氨基酸中的氨基:冰醋酸酸性比水和氨基酸上的羧基都強，給出質(zhì)子的能力強，相當于α-氨基酸中的氨基堿性增強：在水中：在HAc中：醋酸的酸性比水強，易給出質(zhì)子使弱堿質(zhì)子化，滴定終點突躍較大。測定過程：（1）HClO4－HAc滴定劑的配制：冷至25°C的冰醋酸中緩慢加入72％的HClO4溶液，搖勻，再滴加一定量的醋酸酐，搖勻，冷至室溫，可用冰醋酸稀釋。（2）HClO4－HAc滴定劑的標定：準確稱取定量的基準物KHC8H4O4，溶于冰醋酸中，以0.2%結(jié)晶紫的冰醋酸溶液為指示劑，從紫色滴定至藍色。取同樣量的同一溶劑作空白滴定。（3）α-氨基酸的滴定：將試樣溶于冰醋酸、醋酸酐中，以結(jié)晶紫為指示劑，用上述標定好的滴定劑滴定至出現(xiàn)穩(wěn)定的藍色。取同樣量的同一溶劑作空白滴定。氨基酸的含量＝方法二：在苯－甲醇混合液中用甲醇鈉滴定α-氨基酸中的羧基：在水中：

在苯－甲醇中：

CH3O－堿性比OH－強，和－NH3＋反應比OH－完全，平衡常數(shù)大，滴定較完全，滴定突躍明顯。

測定過程：（1）CH3ONa的苯－甲醇標準液的配制：稱取定量的純金屬鈉，切片用無水甲醇洗凈，分別多次加入冷卻的無水甲醇中，溶解后，加入苯稀釋。（2）CH3ONa的苯－甲醇標準液的標定：準確稱取苯甲酸基準物，溶于二甲基甲酰銨中，用百里酚藍為指示劑從黃色滴定至藍色。（3）α-氨基酸的滴定：試樣溶于苯－甲醇中，用百里酚藍為指示劑，用標準液滴定至黃色變?yōu)樗{色。氨基酸含量＝參考書目：杭州大學化學系分析化學教研室，分析化學手冊（第二版）:第二分冊：分

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