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文檔簡介
2025屆安徽省亳州市第三十二中學高考仿真模擬生物試卷注意事項1.考試結(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回.2.答題前,請務必將自己的姓名、準考證號用0.5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置.3.請認真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準考證號與本人是否相符.4.作答選擇題,必須用2B鉛筆將答題卡上對應選項的方框涂滿、涂黑;如需改動,請用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案.作答非選擇題,必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答,在其他位置作答一律無效.5.如需作圖,須用2B鉛筆繪、寫清楚,線條、符號等須加黑、加粗.一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.下列利用菜花進行“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述,正確的是()A.粗提取DNA時觀察到絲狀物偏少,可能是向2mol·L-1NaCl溶液中加入蒸餾水過多B.在切碎的菜花中加入一定量的洗滌劑和食鹽,充分研磨,過濾后棄去濾液C.用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至1.14mol·L-1,用單層濾紙過濾獲取析出物D.將白色絲狀物溶解在NaCl溶液中,加入二苯胺試劑后振蕩,觀察顏色變化2.已知某條肽鏈由88個氨基酸縮合而成,其中共有氨基6個,甲硫氨酸5個且在肽鏈中的位置為3、25、56、78、82,甲硫氨酸的分子式為C5H11O2NS,以下敘述錯誤的是()①合成該多肽的氨基酸一定共有N原子94個②若去掉該多肽中的甲硫氨酸,生成的若干肽鏈中的肽鍵數(shù)目會減少10個③若去掉該多肽中的甲硫氨酸,生成的若干肽鏈中的氨基和羧基均分別增加5個④若去掉該多肽中的甲硫氨酸,生成的若干肽鏈中的O原子數(shù)目減少1個A.① B.①②④ C.①④ D.②③3.PI是一種核酸染料,能夠?qū)乃阑虻蛲黾毎旧珹nnexinV能夠高親和力結(jié)合磷脂酰絲氨酸(PS),研究人員利用兩種試劑對三組細胞進行檢測,結(jié)果如下:以下相關(guān)敘述中,錯誤的是()A.B4象限內(nèi)出現(xiàn)細胞的原因是因為細胞正處于凋亡早期B.AnnexinV能夠檢測細胞凋亡的原因是因為PS在細胞膜上分布的不對稱性C.實驗結(jié)果顯示,b組細胞的凋亡率最高D.需要對實驗中B2象限內(nèi)細胞進行鏡檢,出現(xiàn)炎癥反應則確認為細胞凋亡4.下列有關(guān)生態(tài)系統(tǒng)能量流動的敘述,錯誤的是()A.通過物質(zhì)多級利用可以提高能量的利用率B.處于穩(wěn)定狀態(tài)的生態(tài)系統(tǒng)能量輸入與輸出相對穩(wěn)定C.太陽能只有通過生產(chǎn)者才能輸入流動渠道D.通過兔子的糞便流入分解者體內(nèi)的能量屬于兔子通過同化作用獲得的能量的一部分5.“細胞學說”被認為是顯微鏡下的重大發(fā)現(xiàn)。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A.英國科學家虎克是細胞的發(fā)現(xiàn)者和命名者B.列文虎克在自制的顯微鏡下觀察到了紅細胞C.“細胞學說”的建立者主要是施萊登和施旺D.魏爾肖認為一切生物都由細胞發(fā)育而來6.薇甘菊是世界上最具危險性的有害植物之一,在適生地能攀援、纏繞于喬木、灌木,重壓于其冠層頂部,阻礙附主植物的光合作用,繼而導致附主死亡。科研人員研究了薇甘菊不同入侵程度對深圳灣紅樹林生態(tài)系統(tǒng)有機碳儲量的影響,結(jié)果如下表。下列分析錯誤的是有機碳儲量未入侵區(qū)域輕度入侵區(qū)域重度入侵區(qū)域植被碳庫51.8550.8643.54凋落物碳庫2.013.525.42土壤碳庫161.87143.18117.74總計215.73197.56166.70A.植被碳庫中的碳主要以有機物的形式存在,其主要去路是以食物的形式流向下一營養(yǎng)級B.土壤碳儲量減少可能是因為薇甘菊根系密集,增加了土壤氧含量,使土壤中需氧型微生物的分解作用增強C.與薇甘菊未入侵區(qū)域相比,薇甘菊重度入侵區(qū)域的總有機碳儲量約減少了22.7%D.隨著薇甘菊入侵程度的加劇,凋落物碳儲量顯著增加,原因是薇甘菊的入侵導致附主死亡7.下圖是測定某發(fā)芽種子的呼吸類型所用裝置(假設呼吸底物只有葡萄糖,不考慮外界條件的影響且種子始終保持活性),下列有關(guān)說法錯誤的是甲裝置乙裝置結(jié)論A液滴左移液滴不動只進行有氧呼吸B液滴不動液滴右移只進行無氧呼吸且產(chǎn)物有酒精C液滴不動液滴不動只進行無氧呼吸且產(chǎn)物有乳酸D液滴左移液滴右移既進行有氧呼吸又進行無氧呼吸A.A B.B C.C D.D8.(10分)如圖表示某體外培養(yǎng)的癌細胞細胞周期及各階段的時間(G0期細胞表示一次分裂完成后暫停分裂的細胞)。下列敘述正確的是()A.癌細胞完整的細胞周期包括G0、G1、S、G2和M期B.細胞分裂間期核糖核苷酸、氨基酸將被大量消耗C.在M期全過程幾乎都可看到高爾基體解體形成的小泡D.一次分裂完成所形成的細胞經(jīng)1.3h后均存在4個中心粒二、非選擇題9.(10分)菠菜是雌雄異株植物,其性別決定方式為XY型。菠菜耐寒和不耐寒是一對相堆性狀,受一對等位基因A/a控制,另一對相對性狀圓葉和尖葉由等位基因B/b控制。雜交發(fā)生在兩株不耐寒圓葉植株之間,子一代(F1)表現(xiàn)型及株數(shù)如下表。F1表現(xiàn)型及株數(shù)不耐寒圓葉不耐寒尖葉耐寒圓葉耐寒尖葉雌株1220410雄株61591921回答下列問題:(1)在雜交試驗過程中,下列處理波菜的方法正確的是______________。A.去雄,套袋B.不去雄,套袋C.去雄,不套袋D.不去雄,不套袋(2)控制耐寒和不耐寒這對相對性狀的基因位于______________(填“?!被颉癤”)染色體上,且______________為顯性??刂茍A葉和尖葉這對相對性狀的基因位于______________(填“常”或“X”)染色體上,且為______________顯性。(3)不耐寒圓葉雌雄親本的基因型分別為______________。如果讓F1中的不耐寒圓葉植株與不耐寒尖葉植株雜交,F(xiàn)2雌性個體中純合子所占的比例為______________。10.(14分)人們從土壤中分離得到以纖維素為唯一碳源和能源的細菌用于生產(chǎn)。將等量同濃度的細菌樣液滴在同等大小的卷煙紙(只含纖維素)上,保持足夠的濕度。一段時間后,比較各組實驗中卷煙紙的降解程度,選出降解能力大的細菌?;卮鹣铝袉栴}:(1)實驗中微生物的篩選所利用的原理是_______。(2)由于纖維素的________作用,長期只以纖維素作碳源的土壤中可能含有目的菌。(3)為什么只有分解纖維素的微生物生長在卷煙紙上?________(4)在純化分解纖維素的細菌時,常用的接種方法有________和________。為了保證結(jié)果準確,一般選擇菌落數(shù)在________進行計數(shù)。11.(14分)在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以放出熒光。熒光素酶及其合成基因在生物研究中有著廣泛的應用。請回答下列問題:(1)熒光素酶基因可以從基因文庫中獲取,也可以通過________方法得到,再利用PCR技術(shù)擴增即可,擴增熒光素酶基因利用的原理是__________________。(2)在基因工程操作過程中,需要用________酶和________酶構(gòu)建基因表達載體,基因表達載體要有________,以便篩選出含有目的基因的受體細胞。(3)熒光素酶基因也可以作為目的基因轉(zhuǎn)入某些動植物細胞中表達產(chǎn)生熒光素酶。將目的基因?qū)胫参锛毎?,目前常用的目的基因載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒,目的基因需插入到該基因載體的________上,然后再轉(zhuǎn)移至受體細胞中。將目的基因?qū)雱游锛毎募夹g(shù)中,應用最多的是_______。12.豌豆(2n=14)的生長發(fā)育受赤霉素(GA)的影響,赤霉素能夠促進豌豆莖伸長,缺乏赤霉素能導致豌豆植株矮化。赤霉素的生成受兩對獨立遺傳的基因A、a和B、b控制(如下圖),研究人員在連續(xù)多年種植的高莖豌豆田中,偶然發(fā)現(xiàn)了兩株矮莖的單基因突變植株。請回答下列問題:(1)豌豆的葉形有SⅠ、SⅡ、SⅢ等不同類型,它們是通過基因突變形成的,這說明基因突變具有________________的特點,基因突變的方向和生物生存的溫度、水分等環(huán)境條件________________(填“有”或“沒有”)明確的因果關(guān)系。(2)為了確定這兩株矮莖豌豆發(fā)生突變的基因是否相同,可將_____________________________________進行雜交。若F1表現(xiàn)為________________時,可確定這兩株矮莖豌豆發(fā)生突變的基因不同,進一步將F1自交得F2,后代表現(xiàn)型及其比例為________________。(3)當體細胞缺失一對同源染色體中的一條染色體時,稱為單體(存活可育,染色體數(shù)為2n-1),這種變異屬于______________________變異,可用于基因的染色體定位。豌豆的子葉黃色對綠色為顯性,受一對等位基因控制,人為建立豌豆黃色子葉的單體系(染色體數(shù)為2n-1的全部類型),將正常的綠色子葉豌豆與純合黃色子葉豌豆單體系的全部個體分別雜交,并將每對雜交組合所結(jié)的種子分別種植,當某對雜交組合的后代出現(xiàn)___________________色子葉時,可將控制子葉顏色的基因定位于該組合黃色子葉親本所缺失的染色體上。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】
DNA的粗提取與鑒定的實驗原理:①DNA在NaCl溶液中的溶解度,是隨著NaCl的濃度變化而改變的,當NaCl的濃度為1.14mol·L-1時,DNA的溶解度最低,利用這一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出;②DNA不溶于酒精溶液,但是細胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液,利用這一原理,可以進一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA;③DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同:洗滌劑能瓦解細胞膜,但是對DNA沒有影響,蛋白質(zhì)不能耐受較高溫度,在81℃條件下會變性,而DNA對溫度的耐受性較高;⑤DNA的鑒定:DNA遇二苯胺(沸水?。境伤{色,因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑?!驹斀狻緼、2mol·L-1NaCl溶液溶解DNA,緩緩加入蒸餾水使得NaCl溶液濃度降低,則DNA不斷析出,DNA絲狀物不再增加時,此時NaCl溶液的濃度為1.14mol·L-1;如繼續(xù)加蒸餾水,DNA的溶解度增加,DNA絲狀物量減少,故粗提取DNA時觀察到絲狀物偏少,可能是蒸餾水加多了,A正確;B、在切碎的菜花中加入一定量的洗滌劑和食鹽,充分研磨,DNA溶解在濾液中,過濾后不能丟棄濾液,B錯誤;C、用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至1.14mol·L-1的濃度,此時DNA溶解度最低,DNA大量析出,過濾時應該用紗布,不能用濾紙,C錯誤;D、將白色絲狀物溶解在NaCl溶液中,加人二苯胺試劑,需要水浴加熱觀察染色變化,D錯誤。故選A。2、C【解析】
該多肽含有88個氨基酸,故含有88-1=87個肽鍵,R基中氨基的數(shù)目為6-1=5個?!驹斀狻竣儆缮戏治隹芍琑基中含有的氨基的數(shù)目為5個,故該多肽中N原子的數(shù)目為88+5=93個,①錯誤;②根據(jù)甲硫氨酸的位置可知,去除5個甲硫氨酸需要破壞5×2=10個肽鍵,②正確;③若去掉該多肽中的5個甲硫氨酸,會形成6條短肽和5個甲硫氨酸,這些短肽與原來的多肽相比,氨基和羧基均分別增加6-1=5個,③正確;④若去掉該多肽中的甲硫氨酸,需要破壞10個肽鍵,即需要10個水分子參與,故會增加10個氧原子,又因為5個甲硫氨酸帶走了5×2=10個氧原子,故生成的若干肽鏈中的O原子數(shù)目與原來的多肽相比不變,④錯誤。綜上所述,ABD不符合題意,C符合題意。故選C。3、D【解析】
PI是一種核酸染料,它不能穿透完整細胞膜,但對凋亡晚期細胞和壞死細胞的破損細胞膜能夠穿透;磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),細胞發(fā)生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。AnnexinV作為一種磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,它通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。因此AnnexinV是檢測細胞早期凋亡的靈敏指標?!驹斀狻緼、B4象限內(nèi)出現(xiàn)細胞AnnexinV染色的細胞數(shù)目很多,但PI染色的細胞數(shù)目較少,說明處于凋亡早期,A正確;B、磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),細胞發(fā)生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè),所以AnnexinV能夠檢測細胞凋亡的原因是因為PS在細胞膜上分布的不對稱性,B正確;C、b組細胞處于B2象限的比例最高,說明AnnexinV和PI染色的細胞最多,因此凋亡率最高,C正確;D、炎癥的出現(xiàn)是細胞壞死,不是細胞凋亡,細胞凋亡是出現(xiàn)凋亡小體,D錯誤。故選D?!军c睛】本題需要考生充分理解PI和AnnexinV染色的基本原理,分析好圖中各象限的含義。4、D【解析】
生態(tài)系統(tǒng)能量流動:
1、起點:從生產(chǎn)者固定太陽能開始。
2、總能量:生產(chǎn)者固定的全部太陽能。
3、能量的來源:①生產(chǎn)者的能量主要來自太陽能;②其余各營養(yǎng)級的能量來自上一營養(yǎng)級所同化的能量。
4、能量去路:①自身呼吸消耗、轉(zhuǎn)化為其他形式的能量和熱能;②流向下一營養(yǎng)級;③遺體、殘骸、糞便等被分解者分解。
5、能量流動的特點是單向流動,逐級遞減?!驹斀狻緼、通過物質(zhì)多級利用可以提高能量的利用率,A正確;
B、處于穩(wěn)態(tài)時生態(tài)系統(tǒng)能量輸入與輸出相對穩(wěn)定,保持動態(tài)平衡,B正確;
C、能量流動的起點是從生產(chǎn)者固定太陽能開始,太陽能只有通過生產(chǎn)者才能輸入到生態(tài)系統(tǒng)之中,C正確;
D、兔子的糞便中的能量不屬于兔子同化的能量,而是屬于生產(chǎn)者同化的能量,D錯誤。
故選D。【點睛】本題考查種群、群落和生態(tài)系統(tǒng)的相關(guān)知識,意在考查考生的理解能量流動的起點和去路。5、D【解析】
細胞學說的建立過程:時間科學家重要發(fā)展1543年比利時的維薩里,法國的比夏揭示了人體在組織和器官水平的結(jié)構(gòu)1665年英國的虎克用顯微鏡觀察植物的木栓組織,發(fā)現(xiàn)許多規(guī)則的“小室”并命名為細胞17世紀列文虎克用顯微鏡發(fā)現(xiàn)了活細胞19世紀德國的施萊登、施旺細胞是構(gòu)成動植物提的基本單位1858年德國的魏爾肖個體的所有細胞都是由原有細胞分裂產(chǎn)生的【詳解】A、英國科學家虎克是細胞的發(fā)現(xiàn)者和命名者,A正確;B、列文虎克用自制的顯微鏡觀察到不同形態(tài)的細菌、紅細胞和精子等,B正確;C、“細胞學說”的建立者主要是施萊登和施旺,C正確;D、魏爾肖認為個體的所有細胞都是由原有細胞分裂產(chǎn)生的,D錯誤。故選D。【點睛】本題考查細胞學說的相關(guān)知識,只要考生識記細胞學說的建立者即可正確答題,需要考生了解課本中所列舉的一些科學家及其成就。6、A【解析】植被碳庫中的碳主要以有機物的形式存在,其主要去路之一是以食物的形式流向下一營養(yǎng)級,A錯誤;薇甘菊根系密集,增加了土壤孔隙度,使得土壤氧含量增加,從而使土壤中需氧型微生物的分解作用增強,使得土壤碳儲量減少,B正確;與薇甘菊未入侵區(qū)域相比,薇甘菊重度入侵區(qū)域的總有機碳儲量約減少了(215.73-166.70)/215.73=22.7%,正確;隨著薇甘菊入侵程度的加劇,凋落物碳儲量顯著增加,原因是薇甘菊的入侵導致附主死亡,D正確。7、A【解析】
本題是對有氧呼吸與無氧呼吸的過程和產(chǎn)物的考查,發(fā)芽種子有氧呼吸過程吸收氧氣釋放二氧化碳,且氧氣的吸收量與二氧化碳的釋放量相等,無氧呼吸過程不吸收氧氣。甲裝置細胞呼吸產(chǎn)生的二氧化碳被氫氧化鈉吸收,因此液滴移動的距離代表氧氣的吸收量,乙裝置沒有氫氧化鈉,液滴移動的距離是細胞呼吸吸收的二氧化碳和產(chǎn)生氧氣的差值?!驹斀狻緼、甲裝置液滴左移,說明細胞呼吸消耗氧氣,乙裝置液滴不動,說明細胞呼吸吸收的氧氣與產(chǎn)生的二氧化碳相等或還進行乳酸的無氧呼吸,此時細胞進行有氧呼吸或有氧呼吸和無氧呼吸都有,A錯誤;
B、甲裝置液滴不動,說明細胞呼吸不消耗氧氣,進行了無氧呼吸,乙裝置液滴右移,說明二氧化碳釋放量多樣氧氣吸收量,此時細胞只進行無氧呼吸,且無氧呼吸方式是產(chǎn)生酒精和二氧化碳的,B正確;
C、甲裝置液滴不動,說明細胞呼吸不消耗氧氣,乙裝置液滴不動,說明細胞呼吸吸收沒有消耗氧氣也沒有產(chǎn)生二氧化碳,說明此時細胞只進行無氧呼吸且產(chǎn)物為乳酸,C正確;
D、甲裝置液滴左移,說明細胞呼吸消耗氧氣,乙裝置液滴右移說明二氧化碳的釋放量大于氧氣的吸收量,此時既進行有氧呼吸又進行無氧呼吸,D正確。
故選A。
8、B【解析】
分析圖形:圖中數(shù)據(jù)為實驗測得體外培養(yǎng)的某種細胞的細胞周期各階段時間。細胞周期包括分裂間期和分裂期(M期),其中分裂間期又分為G1、S和G2期,所占時間為2.8+7.9+3.4+1.2=15.3h,而分裂期所占時間為1.2h?!驹斀狻緼、癌細胞完整的細胞周期包括G1、S、G2和M期,A錯誤;B、細胞分裂間期進行蛋白質(zhì)的合成,有遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程,因此核糖核苷酸、氨基酸將被大量消耗,B正確;C、在M期全過程幾乎都可看到核膜解體形成的小泡,C錯誤;D、在G2時期細胞中已有一對中心體,因此需要經(jīng)歷的時間是14.1h,D錯誤。故選B。二、非選擇題9、B常不耐寒X圓葉AaXBXb和AaXBY5/36【解析】
分析題表:不耐寒圓葉雌雄各一株雜交,所得F1無論雌雄不耐寒:耐寒≈3:1,可見控制耐寒和不耐寒這對相對性狀的基因位于常染色體上,且不耐寒為顯性;F1雌性全為圓葉,雄性圓葉:尖葉=1:1,可見控制園葉和尖葉這對相對性狀的基因位于X染色體上,且圓葉為顯性?!驹斀狻浚?)由題意可知,波菜是一種雌雄異株的植物,所以不需要去雄,只需套袋防止外來花粉的干擾即可,B正確。故選B。(2)親本都是不耐寒圓葉,子代雌性個體中,不耐寒:耐寒=3:1,只有圓葉;子代雄性個體中,不耐寒:耐寒=3:1,圓葉:尖葉=1:1。所以控制耐寒和不耐寒這對相對性狀的基因位于常染色體上,不耐寒為顯性。圓葉和尖葉與性別有關(guān),所以控制圓葉和尖葉這對相對性狀的基因位于X染色體上,圓葉為顯性。(3)據(jù)分析可推斷,不耐寒圓葉雌雄親本的基因型分別為AaXBXb和AaXBY。F1中的不耐寒圓葉植株與不耐寒尖葉植株雜交,兩對基因控制的兩對性狀分開計算,F(xiàn)1中不耐寒雌雄基因型均為AA:Aa=1:2,可看作是自由交配,可得A、a基因頻率分別為2/3、1/3,即F2代雌性個體中不耐寒和耐寒純合子所占概率為(2/3)2+(1/3)2=5/9;F1中圓葉基因型為XBXB、XBXb、XBY,尖葉個體基因型只能為XbY,雌雄交配即XBXB×XbY、XBXb×XbY,F(xiàn)2代雌性個體中純合子XbXb占1/4。綜合兩對基因,F(xiàn)2雌性個體中純合子所占的比例=5/9×1/4=5/36?!军c睛】本題主要考查基因的自由組合定律,伴性遺傳及配子致死情況的綜合應用,意在考查考生對表格數(shù)據(jù)的分析與理解,難度稍大。10、人為提供有利于目的菌株生長的條件,同時抑制其它微生物的生長選擇卷煙紙只含纖維素而不含其它物質(zhì)。纖維素是這種微生物可利用的唯一碳源和能源。因此,只有能分泌纖維素酶并以纖維素為碳源和能源的微生物才能生長在卷煙紙上平板劃線法稀釋涂布平板法30~300【解析】
由題干可知,用選擇培養(yǎng)基對土壤中的纖維素分解菌進行粗篩,可得到以纖維素為唯一碳源和能源的細菌,再用卷煙紙進行細篩,當纖維素被分泌的纖維素酶分解后,卷煙紙被降解,得到降解能力大的細菌?!驹斀狻浚?)篩選微生物的原理是人為提供有利于目的菌株生長的條件,同時抑制其它微生物的生長。(2)長期只以纖維素作碳源的土壤中可能含有目的菌,為自然選擇的結(jié)果,是由于纖維素的選擇作用。(3)卷煙紙只含纖維素而不含其它物質(zhì),纖維素是這種微生物可利用的唯一碳源和能源。因此,只有能分泌纖維素酶并以纖維素為碳源和能源的微生物才能生長在卷煙紙上。(4)在純化分解纖維素的細菌時,常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。為了保證結(jié)果準確,一般選擇菌落數(shù)在30~300進行計數(shù)?!军c睛】本題考查知識點比較簡單,答題關(guān)鍵在于掌握纖維素分解菌分離的相關(guān)知識。11、人工合成DNA(雙鏈)復制限制DNA連接標記基因T-DNA顯微注射技術(shù)【解析】
1、基因工程的工具:(1)限制酶:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。(2)DNA連接酶:連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(3)運載體:常用的運載體:質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒2、基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導入的方法也不一樣,將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù).個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)熒光素酶基因?qū)儆谀康幕?。目的基因可以從基因文庫中獲取,也可以通過人工合成方法得到,再利用PCR技術(shù)擴增即可。利用PCR技術(shù)擴增目的基因的原理是DNA雙鏈復制。(2)構(gòu)建基因表達載體時,需要用限制酶分別切割目的基因和載體,然后用DNA連接酶進行連接,基因表達載體要有標記基因,以便篩選
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