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2.2動(dòng)物細(xì)胞工程2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體年級(jí):高中二年級(jí)版本:人教版學(xué)科:生物課題名稱:動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體教師姓名:李書(shū)林職稱:中學(xué)一級(jí)單位:鞏義市第二高級(jí)中學(xué)東區(qū)分校學(xué)習(xí)目標(biāo):1、通過(guò)預(yù)習(xí)教材,教師引導(dǎo),學(xué)生能說(shuō)出動(dòng)物細(xì)胞融合的概念、原理、誘導(dǎo)融合的方法、融合后細(xì)胞的類型、細(xì)胞融合的作用;并能列表比較動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的異同。2、通過(guò)教師引導(dǎo)、合作學(xué)習(xí),學(xué)生能總結(jié)單克隆抗體制備的過(guò)程,說(shuō)出兩次篩選的方法和目的,單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)和應(yīng)用。3、通過(guò)搜集資料,了解單克隆藥物目前在世界和中國(guó)的發(fā)展、應(yīng)用情況,認(rèn)同生物科學(xué)發(fā)展的前景廣闊。
抗原
動(dòng)物體內(nèi)刺激漿細(xì)胞抗體抗原不純抗體不純篩選單一漿細(xì)胞不能增殖產(chǎn)生大量抗體特異性差、純度低,產(chǎn)量低、反應(yīng)不夠靈敏傳統(tǒng)方法生產(chǎn)的抗體從動(dòng)物的血清中分離抗體反復(fù)注射抗原一個(gè)漿細(xì)胞只分泌一種特異性抗體
骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)(克?。┰O(shè)計(jì)方案:動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)單克隆抗體1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實(shí)驗(yàn)
雜交瘤細(xì)胞(既能產(chǎn)生特異性抗體,又能大量增殖的細(xì)胞)動(dòng)物細(xì)胞融合是怎樣的過(guò)程呢??jī)?yōu)教提示:可打開(kāi)素材精品動(dòng)畫:動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng)性物理法、化學(xué)法、滅活的病毒問(wèn)題2:誘導(dǎo)融合的方法?問(wèn)題3:融合后細(xì)胞的類型?問(wèn)題4:AB雜交細(xì)胞遺傳物質(zhì)有什么特點(diǎn)?三種AA、AB、BB含兩種生物的遺傳物質(zhì)1.2動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程問(wèn)題1:融合的原理?注意:兩個(gè)核的融合是在雜交細(xì)胞第一次有絲分裂時(shí)進(jìn)行的1.1動(dòng)物細(xì)胞融合的概念?是指兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合形成一個(gè)單核細(xì)胞的過(guò)程。1.2動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程
問(wèn)題5:什么是滅活的病毒?為什么滅活的病毒能作誘導(dǎo)劑?滅活的病毒:指用物理學(xué)或化學(xué)手段使病毒失去感染能力,但并不破壞病毒的抗原結(jié)構(gòu).滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理:病毒表面含有糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞互相凝集,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開(kāi),細(xì)胞發(fā)生融合。1.3動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用打破生殖隔離,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能;研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。重要用途:制備單克隆抗體比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理促進(jìn)融合方法用途1.4植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性物理法(電刺激等)化學(xué)法(聚乙二醇)物理法(電刺激等)化學(xué)法(聚乙二醇)
生物法(滅活的病毒)獲得雜種植株制備單克隆抗體如何大量制備單克隆抗體?讀下面一段資料,概括出單克隆抗體的概念
人們發(fā)現(xiàn),在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中,體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上的特異性抗體,但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體,必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖,即克隆。2.1單克隆抗體的概念單克隆抗體:?jiǎn)蝹€(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。2.2單克隆抗體的制備優(yōu)教提示:可打開(kāi)素材精品動(dòng)畫:?jiǎn)慰寺】贵w的制備問(wèn)題1:為什么給小鼠注射特定的抗原蛋白?問(wèn)題2:促進(jìn)融合的方法有哪些?會(huì)有幾種融合細(xì)胞?問(wèn)題3:雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)?是如何篩選出來(lái)的?問(wèn)題4:是否所有的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生專一性抗體?如何篩選能產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細(xì)胞?問(wèn)題5:如何大規(guī)模進(jìn)行培養(yǎng)得到大量的單克隆抗體?漿漿、漿瘤、瘤瘤(漿、瘤)(一選)選擇性培養(yǎng)基:只有雜交瘤細(xì)胞才能存活獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的漿細(xì)胞(二選)專一抗體檢測(cè):選出能產(chǎn)生所需專一抗體的雜交瘤細(xì)胞并克隆?!腆w外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn):既能產(chǎn)生特異性抗體,又能大量增殖。單克隆抗體篩選雜交細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞體外或體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)篩選骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞融合特異性雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞系提取經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)單克隆抗體的制備過(guò)程:特點(diǎn):既能產(chǎn)生專一抗體又能大量繁殖特點(diǎn):特異性強(qiáng)靈敏度高可大量制備注射抗原免疫2.3單克隆抗體的應(yīng)用(1)體外診斷試劑——最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng),靈敏度高,并能大量制備?!吧飳?dǎo)彈”=單克隆抗體+藥物(2)治療疾病和運(yùn)載藥物主要用于癌癥治療,單克隆抗體作為載體,運(yùn)載抗癌藥物,形成“生物導(dǎo)彈”,準(zhǔn)確殺傷癌變細(xì)胞。導(dǎo)向--單克隆抗體彈頭--藥物兩個(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程三個(gè)“一”一種誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法--滅活病毒一種新細(xì)胞
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