現(xiàn)代生物科技-2021屆高三生物模擬試卷分類匯編（2月刊）

2021屆河北省衡水中學高三上學期22.2020年初，國內(nèi)牛奶制品因為牧草進口成本上漲而

漲價的現(xiàn)象引起了人們的關(guān)注。紫花苜蓿是一種重要的牧草。某研究團隊擬將耐鹽基因

HLA1導入紫花苜蓿中培育耐鹽牧草。具體實驗流程如圖甲。圖乙是載體pCHLAl中T-DNA

示意圖?；卮鹣铝袉栴}。

酵母菌@-HLA1基因

表達載體pCHLAl匈京朦國II

農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒BastaHLAl

抗性基因

圖甲實驗流程圖圖乙T-DNA示意圖

(1)過程①稱為一，過程②需要使用的工具是o過程③的轉(zhuǎn)化方法是

(2)已知Basta是--種除草劑，則為達到培養(yǎng)并篩選的目的，過程④的培養(yǎng)基應(yīng)有哪些成

分？?

(3)過程④得到的幼苗一(填“一定”“一定不”“不一定”)含有HLA1基因，為進

一步確認，可用PCR擴增的方法進行鑒定，則進行PCR反應(yīng)的引物應(yīng)根據(jù)—設(shè)計。

(4)判斷本實驗的目的是否達到，還應(yīng)進行—實驗。

【答案】(1).獲取目的基因(2).限制性核酸內(nèi)切醐和DNA連接酶⑶.脫分化

(4).除草劑和鹽(5).不一定(6).HLA1基因進行(7).抗原-抗體雜交

【解析】

【分析】

分析圖示可知，①過程是獲取目的基因，②過程是構(gòu)建基因表達載體。③過程是脫分化形成

愈傷組織，④過程是再分化形成幼苗的過程。

【詳解】(1)過程①是從酵母菌中獲取HLA1基因，這是獲取目的基因的過程。過程②是構(gòu)

建基因表達載體的過程，該過程需要的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。過程③

是形成了愈傷組織，是脫分化的過程。

(2)Basta是一種除草劑，而HLA1基因是一種耐鹽基因，所以培養(yǎng)基的成分中應(yīng)該有除草

劑和鹽。

(3)過程④是再分化過程，形成的幼苗不一定含有HLA1基因，需要進一步確認才可以，

可用PCR擴增的方法進行確認。PCR引物設(shè)計的目的是為了找到一對合適的核甘酸片段，使

其有效的擴增模板DNA序列。PCR反應(yīng)的引物應(yīng)該根據(jù)HLA1基因進行設(shè)計。

(4)判斷實驗?zāi)康氖欠襁_到，需要進行分子水平的檢測，可利用抗原抗體雜交原理來檢驗

產(chǎn)物的有無。

【點睛】本題考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的內(nèi)容，意在考查考生的識記能力。

2021屆四川省成都市石室中學高三一診模擬12.新一代基因編輯CRISPR/Cass技術(shù)的實質(zhì)

是用特殊的引導序列(sgRNA)將Cas9酶一一“基因剪刀精準定位到所需切割的基因上，然

后進行編輯。科研人員設(shè)想利用新一代基因編輯技術(shù)來預(yù)防艾滋病?；卮鹣铝袉栴}：

(1)動物細胞中沒有編碼Cas9酶基因，可通過構(gòu)建,用法將其導

入受體細胞，最終表達出Cas9酶。

(2)CCR5蛋白是HIV病毒入侵機體細胞的主要輔助受體之一，HIV通過識別膜通道蛋白CCR5

侵入宿主細胞。為有效阻止HW侵染新分化生成的T淋巴細胞，科研人員將SgRNA序列導入

骨髓細胞中，以構(gòu)建sgRNA-Cas9酶復合體。Cas9酶可以催化鍵斷

裂，以實現(xiàn)對DNA序列的定向切割。設(shè)計SgRNA序列需要根據(jù)的核甘酸序列，

原因是O

(3)為檢測T淋巴細胞的CCR5基因是否成功被編輯，采用技術(shù)檢測是否含有

CCR5基因，還需要對___________蛋白進行檢測。

【答案】(1).基因表達載體(2).顯微注射(3).造血干(4).磷酸二酯(5).

CCR5基因⑹.sgRNA序列需要與比后基因上部分堿基互補配對，從而精準定位到

基因進行編輯(7).DNA分子雜交⑻.CCR5

【解析】

【分析】

根據(jù)題意，新一代基因編輯CRISPR/Cass技術(shù)的實質(zhì)是用特殊的引導序列(sgRNA)將Cas9

酶-基因剪刀精準定位到所需切割的基因上，可知Cas9酶是一種核酸內(nèi)切酶，可斷開DNA

上的磷酸二酯鍵;如果T淋巴細胞的CCR5基因被成功編輯,則T細胞不能表達CCR5蛋白，

故可采用DNA分子雜交檢測是否含有CCR5基因。

【詳解】(1)動物細胞中沒有編碼Cas9酶的基因，可通過構(gòu)建基因表達載體，用顯微注射

法將其導入受體細胞，最終表達出Cas9酶。

(2)為有效阻止HIV侵染新分化生成的T淋巴細胞，科研人員將SgRNA序列導入骨髓造

血干細胞中，以構(gòu)建sgRNA-Cas9酶復合體。Cas9酶可以催化磷酸二酯鍵斷裂，以實現(xiàn)對

DNA序列的定向切割。HIV能通過識別膜通道蛋白CCR5侵入宿主細胞，為預(yù)防艾滋病，

根據(jù)題意，可利用Cas9酶對CCR5基因進行編輯，因此sgRNA序列需要與CCR5基因上部

分堿基互補配對，從而精準定位到CCR5基因進行編輯，故設(shè)計SgRNA序列時需要根據(jù)

CCR5基因的核甘酸序列。

（3）可采用DNA分子雜交技術(shù)檢測是否含有CCR5基因，為了檢測基因編輯是否成功，

還需要對CCR5蛋白進行檢測。

【點睛】本題考查基因工程的相關(guān)操作，以CRISPR/Cass基因編輯技術(shù)來預(yù)防艾滋病為背

景，考查學生對基因工程基本原理、基本工具和基本操作的掌握，要求學生能以教材知識為

基礎(chǔ)，結(jié)合題干信息進行發(fā)散和延伸，重在考查學生對知識的實際運用能力，有一定難度。

2021屆浙江省金麗衢十二校高三上學期第一次聯(lián)考25.新型冠狀病毒可通過表面的刺突蛋

白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細胞的ACE2受體結(jié)合，侵人人體，引起肺炎。單克隆抗

體可阻斷病毒融合的粘附或人侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療HAT篩選新冠肺炎的研究

熱點之一。圖為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。下列相關(guān)敘述，不正確的是（）

*二?-抗體

fx

——-ACE2受體

A.研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射刺突蛋白免疫小鼠以激活小鼠的免疫細胞抗體

B.雜交細胞經(jīng)抗體檢驗后即可用于單克隆抗體的生產(chǎn)

C.單克隆抗體可以制成診斷盒，用于疾病的診斷

D.單克隆抗體的制備采用了動物細胞融合技術(shù)和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)

【答案】B

【解析】

【分析】

1.單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細胞與漿細胞結(jié)合，經(jīng)過選擇培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細胞

并經(jīng)專一抗體檢測后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞即可得單克隆抗體，涉及動物細胞

培養(yǎng)和動物細胞融合技術(shù)；雜交瘤細胞集合了兩個細胞的遺傳物質(zhì)，但不一定全部表達；

2.單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑，具有準確、快速等優(yōu)點.

【詳解】A、研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射刺突蛋白免疫小鼠以激活小鼠的免疫細胞,

從而獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的效應(yīng)B細胞，A正確；

B、經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細胞還需進行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測，才可用于

單克隆抗體的生產(chǎn)，B錯誤

C、根據(jù)抗原-抗體特異性結(jié)合的原理，將單克隆抗體制成診斷盒，用于疾病的診斷，C正確；

D、結(jié)合分析可知，單克隆抗體的制備采用了動物細胞融合技術(shù)和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)，因為

動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是動物細胞工程的基本技術(shù)，D正確。

故選Bo

【點睛】

2021屆浙江省金麗衢十二校高三上學期第一次聯(lián)考（二）回答與基因工程及植物育種有關(guān)

的問題：

某研究小組為研究水稻B基因表達對其卵細胞的影響，設(shè)計了如下過程：（Luc基因表達的

熒光素酶能夠催化熒光素產(chǎn)生熒光;啟動子和終止子分別是重組質(zhì)粒中啟動和終止基因轉(zhuǎn)錄

的序列）。

水稻B基因

編碼蛋白的序列及屋因T-DNA

QT

-------②水稻鑒定

臼1T*B-Luc融合基因農(nóng)桿菌占水稻

啟動子*愈傷組織篩選4

潮霉素鑒定

止子

抗性基因

轉(zhuǎn)者

卡那霉素植7

抗性基因*啟動子可在水稻卵細胞中啟動轉(zhuǎn)錄

(1)若水稻B基因的核甘酸序列已知，可采用化學合成或(中文名稱)的方法。為

了提高目的基因和Ti質(zhì)粒重組的成功率，選擇使用對含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒

進行處理形成不同的黏性末端，然后用DNA連接酶連接構(gòu)建重組載體。酶切位點能否選在

潮霉素抗性基因中?理由是。

(2)過程①中，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入以篩選含有目的基因的農(nóng)桿菌。過程②中應(yīng)向培養(yǎng)

愈傷組織的培養(yǎng)基中加入,以初篩染色體上含有目的基因的愈傷組織。

(3)從轉(zhuǎn)基因植株未成熟種子中分離出胚，觀察到細胞內(nèi)僅含有一個染色體組，判定該胚

是由未受精的卵細胞發(fā)育形成的，而普通水稻的卵細胞是不進行發(fā)育的，這表明

【答案】(1).聚合酶鏈式反應(yīng)(2).不同的限制性核酸內(nèi)切酶(3).不能(4).由

于潮霉素抗性基因位于啟動子前面，若將酶切位點選在此處，則插入的融合基因不會表達

(5).卡那霉素或潮霉素(6).潮霉素(7).B基因表達能使卵細胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成

胚

【分析】

基因表達載體的構(gòu)建包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因。啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)

的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出

mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)；終止子也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾

端；標記基因的作用是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞

篩選出來，常用的標記基因是抗生素基因。

【詳解】(二)

(1)若已知核甘酸序列，則可以利用化學合成法或PCR技術(shù)(聚合酶鏈式反應(yīng))合成擴增

目的基因；不同的黏性末端可以有效防止目的基因之間的連接、質(zhì)粒之間的連接，故用不同

的限制性核酸內(nèi)切酶對含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒進行處理。不能將酶切位點選在潮霉

素抗性基因中，因為啟動子位于潮霉素抗性基因后邊，而轉(zhuǎn)錄是從啟動子開始，若插入到潮

霉素抗性基因中，則重組的目的基因不會表達。

(2)質(zhì)粒上有抗卡那霉素標記基因和抗潮霉素標記基因，如果選擇培養(yǎng)基中加入的是卡那

霉素，起作用的是抗卡那霉素標記基因，如果選擇培養(yǎng)基中加入的是潮霉素，起作用的是抗

潮霉素標記基因。過程②是農(nóng)桿菌侵染愈傷組織的過程，此時農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的

T-DNA(可轉(zhuǎn)移的DNA)可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。由

于T-DNA中含有潮霉素抗性基因，應(yīng)向培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中加入潮霉素來進行篩選。

(3)由于B基因在水稻卵細胞中不能表達，一般情況下卵細胞未受精時不能發(fā)育成胚，而

轉(zhuǎn)基因植株的卵細胞能發(fā)育成胚，說明B基因表達能使卵細胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚?

【點睛】目的基因的獲取方法：①從基因文庫中獲?。虎谌斯ず铣?反轉(zhuǎn)錄法和化學合成法);

③PCR技術(shù)擴增目的基因。

江西省上饒市民?？荚嚶?lián)盟2020-2021學年高三上學期12.HPV是一種雙鏈DNA病毒，該

病毒在人體內(nèi)持續(xù)感染是引起宮頸癌的主要原因。請回答：

(1)目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的HPV亞型超過200種，對不同HPV亞型的區(qū)分可采用—

的方法，對病毒的DNA進行鑒定，也可以采用的方法，對病毒的蛋白質(zhì)進行鑒

定。

(2)經(jīng)研究得知，該病毒DNA存在一個能控制轉(zhuǎn)錄過程的特殊區(qū)段，科學家通過PCR技

術(shù)獲得了大量該區(qū)段。該技術(shù)操作流程的三個重要步驟的溫度分別是:設(shè)計引物

的前提是;至少需經(jīng)過次循環(huán)才能分離，得到所需要的DNA區(qū)段。

(3)從理論上講，可以用單克隆抗體治療宮頸癌，制備單克隆抗體時，常用作

化學促融劑，誘導經(jīng)過免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合產(chǎn)生的雜交瘤細胞具有

_____________的特點。

【答案】(1).DNA分子雜交⑵.抗原一抗體雜交⑶.

90—95℃55—60℃70—75℃(4).需要知道該病毒DNA部分核甘酸序列⑸.三

(6).聚乙二醇(PEG)(7).既能無限增殖又能產(chǎn)生單一抗體

【解析】

【分析】

11、目基因的檢測和鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA

是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技

術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)-抗原-抗體雜交技術(shù)。（2）個體水平上的鑒定：抗

蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

2、PCR（聚合酶鏈式反應(yīng)）是利用DNA在體外攝氏95。高溫時變性會變成單鏈，低溫（經(jīng)常

是60℃左右）時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)

溫度（72。（2左右），DNA聚合酶沿著5,玲3,的方向合成互補鏈。

【詳解】（1）由于HPV是一種雙鏈DNA病毒，對不同HPV亞型的區(qū)分可采用DNA分子雜

交的方法，對病毒的DNA進行鑒定，也可以采用抗原-抗體雜交的方法，對病毒的蛋白質(zhì)進

行鑒定。

（2）PCR技術(shù)操作流程的三個重要步驟的溫度分別是90—95℃55—60℃70—75℃；設(shè)計引

物的前提是需要知道該病毒DNA部分核甘酸序列;根據(jù)PCR過程特點繪制PCR過程示意圖:

3/531

?B7

35—一53

早

物

弓

弓2

①②?1

T1

?533/1夕

I

353夕F4

.④.137

,35

基

X因

5%

⑤

圖

圖2

由圖分析可知：X基因第一次復制得到兩個兩種：①和②：X基因第二次復制得到四個四

種：①復制得①和③、②復制得②和④；X基因第三次復制得到八個五種：①復制得

①和③、③復制得③和⑤、②復制得②和④、④復制得④和⑤；X基因第四次復制

得到16個五種：①復制得①和③、兩個③復制得兩個③和兩個⑤、兩個④復制得兩個

④和兩個⑤、兩個⑤得到4個⑤。從上面的推測可知，第三輪循環(huán)產(chǎn)物中才能開始出現(xiàn)

獨立且完整的X基因。即至少需經(jīng)過三次循環(huán)才能分離，得到所需要的DNA區(qū)段。

（3）制備單克隆抗體時，常用聚乙二醇作化學促融劑或用滅活的病毒作生物促融劑，誘導

經(jīng)過免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合產(chǎn)生的雜交瘤細胞具有既能無限增殖又能產(chǎn)生單

一抗體的特點。

【點睛】本題考查基因工程、PCR技術(shù)和單克隆抗體制備的相關(guān)知識，解題關(guān)鍵是識記基因

工程的應(yīng)用，PCR技術(shù)的過程，識記單克隆抗體的特點及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學的知識準確

答題。

24.（2021屆湖北省“大課改大數(shù)據(jù)大測評”高三上學期聯(lián)合測評生物試題）某特殊病毒為

RNA病毒，易引起大規(guī)模流行?？茖W家發(fā)明了一種制備該病毒活疫苗的新方法。主要環(huán)節(jié)

如下。

請回答下列問題：

（1）環(huán)節(jié)1中，以病毒RNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄成對應(yīng)DNA后，利用技術(shù)擴增，

并將其中某些基因（不包括表面抗原基因）內(nèi)個別編碼氨基酸的序列替換成編碼終止密碼的

序列，與改造前的基因相比，改造后的基因表達時不能合成完整長度長度的，因

此不能產(chǎn)生子代病毒，將該改造基因，表面抗原基因等其他基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，并保存。

（2）環(huán)節(jié)2中，設(shè)計合成一種特殊的tRNA的基因，其產(chǎn)物的反密碼子能與環(huán)節(jié)1中的終

止密碼子配對結(jié)合，并可攜帶一個非天然氨基酸（Uaa）。將該基因與拼接后導

入宿主細胞，提取宿主細胞總的（填“DNA”或“RNA”）進行分子雜交鑒定，篩

選獲得表達上述tRNA的轉(zhuǎn)基因宿主細胞。

（3）將環(huán)節(jié)1中的重組質(zhì)粒倒入環(huán)節(jié)2中的轉(zhuǎn)基因宿主細胞，并在補加非天然氨基酸（Uaa）

的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，則該宿主細胞能利用上述特殊tRNA,翻譯出改造病毒基因的完整蛋白，

產(chǎn)生大量子代病毒，用于制備疫苗。特殊tRNA轉(zhuǎn)錄時，識別其啟動子的酶是宿主的

（填"病毒的RNA聚合酶”或“宿主的RNA聚合酶

（4）上述子代病毒不能再正常宿主細胞中增殖，沒有致病性，因此不經(jīng)滅活減毒即可制成

疫苗，與不具侵染性的滅活病毒疫苗相比，該病毒活疫苗的優(yōu)勢之一是還可引起

（填“體液”或“細胞”）免疫，增強免疫保護效果。

【答案】（1）.PCR⑵.多肽（或蛋白質(zhì)）⑶.載體（4）.RNA（5）.RNA聚

合酶缶）.細胞

【解析】

【分析】

1、本題以甲型流感病毒為素材，考查了基因工程、基因的表達、免疫調(diào)節(jié)的相關(guān)知識，意

在考查學生的理解能力，綜合運用所學知識解決問題的能力?？梢愿脑觳《镜牟糠只颍?/p>

其失去在正常宿主細胞內(nèi)的增殖能力，此過程中需要用到PCR技術(shù)，然后通過基因工程構(gòu)

建適合改造病毒增殖的轉(zhuǎn)基因宿主細胞。最后利用轉(zhuǎn)基因宿主細胞制備疫苗，以預(yù)防該病毒

再次侵染；

2、PCR技術(shù)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法，由高溫變性、低溫退火（復性）

及適溫延伸等反應(yīng)組成一個周期，循環(huán)進行，使目的DNA得以迅速擴增，具有特異性強、

靈敏度高、操作簡便、省時等特點。

【詳解】（I）以病毒RNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄成對應(yīng)DNA后，利用PCR技術(shù)擴增，由于將其

中某些基因（不包括表面抗原基因）內(nèi)個別編碼氨基酸的序列替換成編碼終止密碼子的序列,

因此肽鏈合成提前終止，這樣與改造前的基因相比，改造后的基因表達時不能合成完整長度

的多肽（或蛋白質(zhì)），因此不能產(chǎn)生子代病毒。

（2）基因工程的核心步驟為基因表達載體的構(gòu)建，將該基因與載體連接后才能導入宿主細

胞，檢測目的基因是否成功表達上述tRNA時，利用核酸分子雜交技術(shù)，即用相應(yīng)的DNA

探針與宿主細胞的總RNA分子進行雜交鑒定，進而篩選獲得成功表達上述tRNA的轉(zhuǎn)基因

宿主細胞。

（3）因為設(shè)計的宿主細胞具有能合成一種特殊tRNA的基因，其產(chǎn)物的反密碼子能與（1）

中的終止密碼子配對結(jié)合，并可攜帶一個非天然氨基酸（Uaa）,因此可在補加非天然氨基

酸（Uaa）的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，篩選出宿主細胞。進而利用該宿主細胞，翻譯出改造病毒

基因的完整蛋白，產(chǎn)生大量子代病毒，用于制備疫苗。因為轉(zhuǎn)錄在宿主細胞內(nèi)進行，且啟動

子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，因此需要使用宿主細胞的RNA聚合酶。

（4）不具侵染性的流感病毒滅活疫苗，不能侵入細胞內(nèi)部，只能引起體液免疫，產(chǎn)生相應(yīng)

的抗體與記憶細胞，而該疫苗能夠侵入細胞，引起的免疫屬于細胞免疫。

【點睛】解答本題需要考生掌握基因工程的原理、操作步驟及其一些細節(jié)問題，同時還要熟

練掌握有關(guān)基因的表達及免疫調(diào)節(jié)方面的問題。

11.（2021屆湖北省九師聯(lián)盟高三12月聯(lián)考?（新高考）生物試題）馬鈴薯四倍體栽培種沒有

青枯病的抗性基因，少數(shù)馬鈴薯野生種存在青枯病的抗性基因。由于核型等差異，野生種難

以與四倍體馬鈴薯栽培種直接雜交繁育，為獲得具有抗青枯病的馬鈴薯栽培種，研究人員進

行了植物體細胞雜交的實驗研究（已知雜種細胞會發(fā)生部分染色體缺失現(xiàn)象），過程如下圖

所示。下列分析正確的是（）

胚狀體（E）

A.在低滲溶液中，用酶解法或聚乙二醇處理A和B可以獲得兩種原生質(zhì)體

過程①體現(xiàn)了生物膜的流動性，可用顯微鏡觀察并篩選出雜種細胞C

C.過程②所配制的培養(yǎng)基中添加了等量的生長素類和赤霉素類植物生長調(diào)節(jié)劑

D.過程③為脫分化、再分化過程，可采用DNA分子雜交技術(shù)鑒定植株的抗病性狀

【答案】B

【解析】

【分析】

植物體細胞雜交技術(shù):

1、植物體細胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細

胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術(shù)。

2、過程:

（1）誘導融合的方法：物理法包括離心、振動、電刺激等?；瘜W法一般是用聚乙二醇（PEG）

作為誘導劑。

（2）細胞融合完成的標志是新的細胞壁的生成。

（3）植物體細胞雜交的終點是培育成雜種植株，而不是形成雜種細胞就結(jié)束。

（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳

物質(zhì)。

3、意義：克服了遠緣雜交不親和的障礙。

【詳解】A、酶解法可用于去除細胞壁獲得原生質(zhì)體，但不能在低滲溶液中進行，否則原生

質(zhì)體會吸水漲破，獲得原生質(zhì)體不能采用聚乙二醇，A錯誤;

B、過程①代表原生質(zhì)體的融合，利用了生物膜的流動性，由于一種細胞選用具有葉綠體的

葉肉細胞，?種選用不含葉綠體的胚軸細胞，所以可用顯微鏡觀察并篩選出雜種細胞C,B

正確；

C、過程②為脫分化，培養(yǎng)愈傷組織需要在培養(yǎng)基中添加等量的生長素類和細胞分裂素類植

物生長調(diào)節(jié)劑，C錯誤；

D、過程③表示再分化，由于雜種細胞發(fā)生部分染色體缺失現(xiàn)象，可能含抗性基因的染色體

缺失，所以可采用DNA分子雜交技術(shù)鑒定植株是否含有抗性基因，D錯誤。

故選Bo

15.（2021屆湖北省九師聯(lián)盟高三12月聯(lián)考（新高考）生物試題）嵌合體是指由兩個或兩個

以上具有不同遺傳物質(zhì)的細胞系形成的聚合胚胎發(fā)育而成的個體。嵌合體的制備是研究干細

胞體內(nèi)分化能力的有效方法之一，有望在未來為解決器官移植供體短缺等醫(yī)學難題開辟新的

方向。研究人員將小鼠誘導性多能干細胞（iPSCs）注入到豬孤雌激活后的囊胚期胚胎后獲

得豬一鼠嵌合體。已知孤雌生殖是指某些生物在進行有性生殖時不通過兩性生殖細胞的融

合，由卵子直接發(fā)育成子代個體的生殖現(xiàn)象。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.培育嵌合體與克隆動物的生物學原理相同，但操作方法有差別

B.iPSCs細胞的培養(yǎng)要置于滋養(yǎng)層細胞上，以維持其不分化的狀態(tài)

C.從豬卵巢抽取卵母細胞并培養(yǎng)成熟后，進行激活培養(yǎng)可獲得孤雌胚胎

D.將iPSCs細胞注入豬囊胚的內(nèi)細胞團處才能獲得豬-鼠嵌合體

【答案】AB

【解析】

【分析】

1、胚胎移植的基本程序主要包括：

①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁

殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體

母牛做超數(shù)排卵處理。

②配種或人工授精。

③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母

牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）。對胚胎進行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑根胚

或囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。

④對胚胎進行移植。

⑤移植后的檢查。對受體母牛進行是否妊娠的檢查。

2、胚胎移植的生理學基礎(chǔ)：

①動物發(fā)情排卵后，同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎

移入受體提供了相同的生理環(huán)境。

②早期胚胎在一定時間內(nèi)處于游離狀態(tài)。這就為胚胎的收集提供了可能。

③受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。

④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中

不受影響。

【詳解】A、培育嵌合體的生物學原理是細胞的增殖和分化，克隆動物的生物學原理是動物

細胞核具有全能性，兩者的原理不相同，操作方法有差別，A錯誤；

B、干細胞置于飼養(yǎng)層細胞上培養(yǎng)，可以維持不分化狀態(tài)，B錯誤；

C、獲得孤雌胚胎需要從豬卵巢抽取卵母細胞培養(yǎng)成熟后，進行激活，C正確；

D、由于內(nèi)細胞團的細胞會發(fā)育成胚胎的各組織，故將iPSCs細胞注入豬囊胚的內(nèi)細胞團處

才能獲得豬-鼠嵌合體，D正確。

故選AB?

20.（2021屆湖北省“大課改大數(shù)據(jù)大測評”高三上學期聯(lián)合測評生物試題）研究發(fā)現(xiàn)甘蔗

莖尖經(jīng)適當溫度處理后組織培養(yǎng)獲得的幼苗脫毒效果更好。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

接種到培養(yǎng)基

B中誘導生根

①②③④

A.甘蔗莖尖與其他成熟組織相比病毒含量更低

B.推測②過程的溫度導致部分病毒失去活性

C.過程③、④均屬于再分化，培養(yǎng)基A和B的激素比例不同

D.獲得的脫毒苗與原甘蔗苗相比細胞核遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變

【答案】D

【解析】

【分析】

植物的莖尖病毒極少，甚至無病毒，取芽培養(yǎng)可以利用其較強的分裂和分化能力培養(yǎng)脫毒苗,

經(jīng)過脫水處理脫毒效果好與阻礙病毒進入有一定的關(guān)系，圖中的③、④均屬于再分化。

【詳解】A、莖尖細胞含有的病毒含量極少或者沒有病毒，A正確：

B、經(jīng)過熱水處理脫毒效果好與阻礙病毒進入有關(guān)，其作用是使組織中的病毒在圖中處理溫

度下部分或全部失活，B正確：

C、過程③、④所用的培養(yǎng)基中生長素和細胞分裂素的含量和比例不同，C正確；

D、圖中獲得脫毒苗采用的是植物組織培養(yǎng)激素，該技術(shù)不改變生物的細胞核遺傳物質(zhì)，D

錯誤。

故選D。

21.（2021屆湖北省九師聯(lián)盟高三12月聯(lián)考（新高考）生物試題）新型冠狀病毒（2019-nCoV,

一種RNA病毒）的S蛋白和N蛋白都是誘發(fā)機體免疫反應(yīng)的主要抗原。病毒載體疫苗是研

制新冠病毒疫苗的技術(shù)路線之一，下圖是生產(chǎn)重組腺病毒疫苗的流程?；卮鹣铝袉栴}：

（1）制備新冠病毒疫苗時，需將獲得的目的基因轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)移載體pShuttle質(zhì)粒，圖中的目的

基因應(yīng)選川。不能直接從2019-nCoV的基因組中獲取目的基因，理由是

（2）pAdEasy質(zhì)?？杀磉_出腺病毒，除了啟動子、終止子、復制原點外，其相關(guān)基因序列

還包含（答兩種），過程①需要的酶是。

（3）若PacI酶在過程②中使用，該酶所作用的化學鍵是—。線性pAd需要轉(zhuǎn)入特定細

胞才能產(chǎn)生重組腺病毒，理由是。據(jù)圖分析，與重組pAd相比，線性pAd

對人體相對安全，理由是。

（4）通常將重組腺病毒進行,可使人獲得新冠病毒的免疫力。

【答案】⑴.編碼S蛋白的基因或N蛋白的基因（2）.2019-nCoV的基因組為RNA,

不能轉(zhuǎn)移至質(zhì)粒上⑶.病毒基因（組）、標記基因（4）.限制酶和DNA連接酶（5）.

磷酸二酯鍵（6）.基因的表達需要細胞提供場所、原料和酶等條件（7）.線性pAd缺失

復制原點，不會在宿主細胞內(nèi)復制（8）.肌肉注射

【解析】

【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、

終止子和標記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)?/p>

入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎?/p>

有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否

插入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；

③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)-抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、

抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】（1）制備新冠病毒疫苗時，需將獲得的目的基因轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)移載體pShuttle質(zhì)粒，新

型冠狀病毒的S蛋白和N蛋白都是誘發(fā)機體免疫反應(yīng)的主要抗原，所以圖中的目的基因應(yīng)

選用編碼S蛋白的基因或N蛋白的基因。不能直接從2019-nCoV的基因組中獲取目的基因，

理由是2019-nCoV的基因組為RNA,不能轉(zhuǎn)移至質(zhì)粒上。

（2）pAdEasy質(zhì)?？杀磉_出腺病毒，除了啟動子、終止子、復制原點外，其相關(guān)基因序列

還包含病毒基因（組人標記基因，過程①是基因表達載體的構(gòu)建，需要的酶是限制酶和DNA

連接酶。

（3）若PacI酶在過程②中使用，該酶所作用的化學鍵是磷酸二酯鍵。由于基因的表達需

要細胞提供場所、原料和酶等條件，所以線性pAd需要轉(zhuǎn)入特定細胞才能產(chǎn)生重組腺病毒。

據(jù)圖分析，與重組pAd相比，線性pAd對人體相對安全，理由是線性pAd缺失復制原點，

不會在宿主細胞內(nèi)復制。

（4）通常將重組腺病毒進行肌肉注射，可使人獲得新冠病毒的免疫力。

【點睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟，

掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合所學的知識準確答題。

11..（2021屆九師聯(lián)盟高三12月聯(lián)考（新高考）生物試題）馬鈴薯四倍體栽培種沒有青枯病

的抗性基因，少數(shù)馬鈴薯野生種存在青枯病的抗性基因。由于核型等差異，野生種難以與四

倍體馬鈴薯栽培種直接雜交繁育，為獲得具有抗青枯病的馬鈴薯栽培種，研究人員進行了植

物體細胞雜交的實驗研究（已知雜種細胞會發(fā)生部分染色體缺失現(xiàn)象），過程如下圖所示.

下列分析正確的是（）

A.在低滲溶液中，用酶解法或聚乙二醇處理A和B可以獲得兩種原生質(zhì)體

B.過程①體現(xiàn)了生物膜的流動性，可用顯微鏡觀察并篩選出雜種細胞C

C.過程②所配制的培養(yǎng)基中添加了等量的生長素類和赤霉素類植物生長調(diào)節(jié)劑

D.過程③為脫分化、再分化過程，可采用DNA分子雜交技術(shù)鑒定植株的抗病性狀

【答案】B

【解析】

【分析】

植物體細胞雜交技術(shù)：

1、植物體細胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細

胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術(shù)。

2、過程:

（1）誘導融合的方法：物理法包括離心、振動、電刺激等?；瘜W法一般是用聚乙二醇（PEG）

作為誘導劑。

（2）細胞融合完成的標志是新的細胞壁的生成。

（3）植物體細胞雜交的終點是培育成雜種植株，而不是形成雜種細胞就結(jié)束。

（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳

物質(zhì)。

3、意義：克服了遠緣雜交不親和的障礙。

【詳解】A、酶解法可用于去除細胞壁獲得原生質(zhì)體，但不能在低滲溶液中進行，否則原生

質(zhì)體會吸水漲破，獲得原生質(zhì)體不能采用聚乙二醇，A錯誤；

B、過程①代表原生質(zhì)體的融合，利用了生物膜的流動性，由于一種細胞選用具有葉綠體的

葉肉細胞，一種選用不含葉綠體的胚軸細胞，所以可用顯微鏡觀察并篩選出雜種細胞c,B

正確；

C、過程②為脫分化，培養(yǎng)愈傷組織需要在培養(yǎng)基中添加等量的生長素類和細胞分裂素類植

物生長調(diào)節(jié)劑，C錯誤；

D、過程③表示再分化，由于雜種細胞發(fā)生部分染色體缺失現(xiàn)象，可能含抗性基因的染色體

缺失，所以可采用DNA分子雜交技術(shù)鑒定植株是否含有抗性基因，D錯誤。

故選Bo

昆明市第一中學2021屆高中新課標高三第四次一輪復習檢

測理科綜合試卷生物部分

［生物一選修1：生物技術(shù)實踐］

［生物一選修3：現(xiàn)代生物科技專題］

12.（2021屆云南省昆明市一中高三第四次復習檢測理綜生物試題）農(nóng)業(yè)生態(tài)工程能增加農(nóng)民

收人、開發(fā)可以更新的資源、減少環(huán)境污染。下圖是某家庭農(nóng)場示意圖。回答人下列問題。

光飼料

（1）流經(jīng)該生態(tài)系統(tǒng)的總能量是。

（2）該生態(tài)農(nóng)業(yè)所遵循的生態(tài)學基本原理是（至少答兩點），其優(yōu)點是—

（3）果園中年年種植單一品種果樹往往會造成病蟲害增加，因此農(nóng)場主在果園內(nèi)間種甘薯、

油菜可提高果園的穩(wěn)定性，原理是,每種作物的種植量不宜超過其。

（4）為提高產(chǎn)量，農(nóng)場主不僅需要適量施加氮肥，還要進行除草和滅害蟲等工作，從物質(zhì)

循環(huán)的角度分析，適量施加氮肥的主要原因是。

（5）該生態(tài)系統(tǒng)中哪些途徑實現(xiàn)了能量的多級利用？（至少答兩

條）。

【答案】（1）.生產(chǎn)者通過光合作用固定的太陽能和飼料中含有的能量（2）.物質(zhì)循環(huán)

再生原理、物種多樣性原理、整體性原理（3）.使廢物資源化，以便提高能量利用率，減

少環(huán)境污染（4）.種植多種作物能提高果園的生物多樣性，為各類生物的生存提供多種機

會和條件，使果園的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)復雜化，提高生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力（5）.環(huán)境容納量（或

環(huán)境承載力）（6）.該生態(tài)系統(tǒng)中的氮元素不斷隨農(nóng)產(chǎn)品、畜產(chǎn)品大量輸出，需要不斷地

補充（7）.果樹、甘薯、油菜的廢棄物飼養(yǎng)動物；消費者的糞便等廢棄物作為沼氣發(fā)酵的

原料，產(chǎn)生供人利用的清潔能源

【解析】

【分析】

1,建立該人工生態(tài)系統(tǒng)的目的是實現(xiàn)對能量的多級利用，提高能量的利用率，減少環(huán)境污

染。

2、與種植單一作物的農(nóng)田相比，該生態(tài)系統(tǒng)生物種類多，自我調(diào)節(jié)能力強，建立該生態(tài)系

統(tǒng)遵循的原理主要是物質(zhì)循環(huán)再生原理和生物多樣性原理。

【詳解】（1）該系統(tǒng)為人工生態(tài)系統(tǒng)，故流經(jīng)該生態(tài)系統(tǒng)的總能量是生產(chǎn)者通過光合作用固

定的太陽能和飼料中含有的能量。

（2）該農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中有多種物種，遵循了物種多樣性原理，通過多層次分級利用有機廢

棄物中的物質(zhì)，既充分利用了有機物中的能量、又減少環(huán)境污染，同時兼顧了經(jīng)濟、社會和

環(huán)境效益，故遵循了整體性原理。即該生態(tài)農(nóng)業(yè)所遵循的生態(tài)學基本原理是物質(zhì)循環(huán)再生原

理、物種多樣性原理、整體性原理；其優(yōu)點是使廢物資源化，以便提高能量利用率，減少環(huán)

境污染。

（3）在農(nóng)業(yè)和林業(yè)生產(chǎn)中，連年種植單一品種會造成病蟲害增加，其主要原因是營養(yǎng)結(jié)構(gòu)

簡單，生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性降低，而農(nóng)場主在果園內(nèi)間種甘薯、油菜可提高果園的穩(wěn)定

性,是因為種植多種作物能提高果園的生物多樣性,為各類生物的生存提供多種機會和條件,

使果園的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)復雜化，提高牛態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力；但由于環(huán)境的承載能力是有一定

限度的，故每種作物的種植量不宜超過其環(huán)境容納量（或環(huán)境承載力）。

（4）從物質(zhì)循環(huán)的角度分析，該生態(tài)系統(tǒng)中仍需適量施加氮肥，主要原因是該生態(tài)系統(tǒng)中

的氮元素不斷隨農(nóng)產(chǎn)品、畜產(chǎn)品大量輸出，需要不斷補充適量氮源。

（5）該生態(tài)系統(tǒng)實現(xiàn)了能量的多級利用，主要表現(xiàn)在：果樹、甘薯、油菜的廢棄物飼養(yǎng)動

物；消費者的糞便等廢棄物作為沼氣發(fā)酵的原料，產(chǎn)生供人利用的清潔能源。

【點睛】本題考查生態(tài)農(nóng)業(yè)工程，要求考生識記生態(tài)農(nóng)業(yè)工程的原理及實例，掌握生態(tài)農(nóng)業(yè)

的優(yōu)點，能結(jié)合所學的知識準確答題。

［生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題］

12.（2021屆卓越聯(lián)盟高三12月聯(lián)考理綜生物試題）通過基因工程將抗生素基因轉(zhuǎn)入植物體

內(nèi)，可以增強植物抗病菌的能力。據(jù)此回答下列問題。

（1）抗生素能選擇性地作用于細菌的DNA、RNA和合成系統(tǒng)的特定環(huán)節(jié)，干擾細胞的

代謝作用，妨礙生命活動或使其停止生長，甚至死亡?？股匕l(fā)揮作用的主要場所都有

（2）基因工程中常需要使用的DNA連接酶有E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶兩種，這兩

種連接酶在作用底物方面的主要差別是o

（3）若要使目的基因在受體細胞中表達，需要構(gòu)建基因表達載體，基因表達載體包含目的基

因、啟動子、―復制原點。

（4）將目的基因?qū)胫参矬w細胞通常用。原理是利用其菌體中質(zhì)粒的T-DNA

片段可的特點。

（5）要確認抗生素基因是否在轉(zhuǎn)基因植株中正確表達，應(yīng)檢測轉(zhuǎn)基因植株中該基因的

是否呈陽性。

【答案】（1）.蛋白質(zhì)⑵.擬核（或細胞質(zhì)基質(zhì)）和核糖體⑶.E.coliDNA連接酶

只能將雙鏈DNA片段互補的粘性末端之間連接起來，TQNA連接酶既可以連接雙鏈DNA

片段互補的粘性末端，也可以連接雙鏈DNA片段的平末端（4）.標記基因（5）.終止

子（6）.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（7）.轉(zhuǎn)移并整合到染色體DNA上（8）.表達產(chǎn)物

【解析】

【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、

終止子和標記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)?/p>

入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎?/p>

有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插

入目的基因（DNA分子雜交技術(shù)）；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mR\A（分子雜交技術(shù)）；③

檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)（抗原-抗體雜交技術(shù)）。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗

病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】（1）抗生素能選擇性地作用于細菌體細胞DNA、RNA和蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)的特定環(huán)

節(jié)，干擾細胞的代謝作用，妨礙生命活動或使其停止生長，甚至死亡。DNA復制、RNA合成

的場所是擬核（或細胞質(zhì)基質(zhì)），蛋白質(zhì)場所是核糖體，故抗生素發(fā)揮作用的主要場所是擬

核（或細胞質(zhì)基質(zhì)）和核糖體。

（2）基因工程中常需要使用DNA連接酶，既能連接黏性末端，又能連接平末端的DNA連

接酶是TQNA連接酶，只能將雙鏈DNA片段互補的粘性末端之間連接起來的是E.coliDNA

連接酶。

（3）基因表達載體需要包含的結(jié)構(gòu)有目的基因、標記基因、啟動子、終止子、復制原點。

（4）菌體中質(zhì)粒的T-DNA片段可轉(zhuǎn)移并整合到染色體DNA上，因此常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目

的基因?qū)胫参矬w細胞。

（5）要確認抗生素基因是否在轉(zhuǎn)基因植株中正確表達，應(yīng)用抗原-抗體雜交的方法檢測轉(zhuǎn)基

因植株中該基因的表達產(chǎn)物是否呈陽性。

【點睛】掌握基因工程的相關(guān)知識，能運用所學知識解決相關(guān)的生物學問題是解題的關(guān)鍵。

［生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題］

12.（黑龍江省哈爾濱市六中2020-2021學年高三上學期期末理綜生物試題）某種植物甲能抗

真菌病，其抗性是由細胞內(nèi)的幾丁質(zhì)酶基因A決定的。利用基因工程將甲的A基因轉(zhuǎn)移到

乙植物體內(nèi)，可提高乙抗真菌病的能力。請回答下列問題：

（1）在獲取目的基因A時，可從甲的細胞中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA,然后合成cDNA。利用

mRNA合成cDNA的過程稱為—；也可以利用PCR技術(shù)擴增目的基因A,進行PCR擴增

時，反應(yīng)體系加熱到90?95℃時，DNA雙鏈間的鍵打開，延伸的過程中在熱穩(wěn)定DNA

聚合醐的作用下形成—鍵。

（2）在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法時，需將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA中，原因是「一；將

目的基因插入到T-DNA中用到的工具酶有—（答兩種）。

（3）在獲得轉(zhuǎn)基因植物乙后，可利用分子檢測來檢測乙的細胞中是否存在A基因的表達產(chǎn)

物蛋白質(zhì)，可采用一。

（4）實驗發(fā)現(xiàn)，將攜帶了A基因的乙植株體細胞進行離體培養(yǎng)，會獲得具有抗真菌病能力

的完整植株。植物細胞發(fā)育成完整植株的潛能稱作，其根本原因是o

【答案】⑴.逆轉(zhuǎn)錄（2）.氫鍵（3）.磷酸二酯鍵⑷.T-DNA可轉(zhuǎn)移到植物細

胞中，并能整合到染色體DNA上（5）.限制酶和DNA連接酶（6）.抗原一抗體雜交

（7）.細胞的全能性⑻.分化后的植物細胞中具有形成完整植株的全部基因

【解析】

【分析】基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學為理論基礎(chǔ)，以分

子生物學和微生物學的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計的藍圖，在體外構(gòu)建

雜種DNA分子，然后導入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品

的遺傳技術(shù)。

【詳解】（1）以DNA的一條鏈為模板合成RNA的過程稱為轉(zhuǎn)錄，而以RNA為模板合成DNA

的過程稱為逆轉(zhuǎn)錄。PCR是體外進行DNA的復制，復制以DNA的兩條鏈為模板，因此應(yīng)先

打開DNA的兩條鏈，即破壞氫鍵。然后在DNA聚合酶的作用下形成磷酸二酯鍵，使得小分

子脫氧核甘酸可以聚合形成大分子DNA。

（2）T-DNA可轉(zhuǎn)移到植物細胞中，并能整合到染色體DNA上，因此需將目的基因插入到Ti

質(zhì)粒的T-DNA中。將目的基因插入到T-DNA中用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶，先用

限制酶使得目的基因和T-DNA具有相同的粘性末端，再用DNA連接酶使其連成重組DNA分

子。

（3）利用分子檢測來檢測乙的細胞中是否存在A基因的表達產(chǎn)物蛋白質(zhì)，可以采用抗原一

抗體雜交的方法：把A基因的表達產(chǎn)物當成抗原，加入能與其特異性結(jié)合的抗體，若有產(chǎn)

物，則能形成抗原-抗體復合物。

（4）植物細胞具有全能性，具有發(fā)育成完整植株的潛能，原因是分化后的植物細胞中具有

形成完整植株的全部基因，可以控制該植株的性狀。

【點睛】本題主要考查轉(zhuǎn)基因技術(shù)的相關(guān)知識，要求學生有一定的理論聯(lián)系實際的能力。

36.（江西省南昌市十中2020-2021學年高三上學期第二次月考生物試題）溶菌酶具有強力殺

菌作用。人乳汁中溶菌酶的含量比牛、綿羊和山羊乳汁中溶菌酶的含量高出1500~4000倍，

破壞和溶解細菌的能力約為牛乳汁中溶菌酶的300倍。我國科學家設(shè)想通過構(gòu)建乳腺特異表

達載體等培育出人溶菌酶轉(zhuǎn)基因豬，從而增強仔豬的免疫力，提高其存活率?；卮鹣铝袉栴}:

（1）人乳汁中的溶菌酶具有殺菌作用，但其不屬于人體的第二道防線，原因是

（2）乳腺特異表達載體的組成中，位于人溶菌酶基因的首端的是。它能驅(qū)

動人溶菌酶基因在豬的乳腺中轉(zhuǎn)錄出。

（3）將轉(zhuǎn)人溶菌酶基因的細胞注入豬的卵母細胞，通過一定的方法構(gòu)建出

重組胚胎；利用胚胎分割技術(shù)可獲得多只轉(zhuǎn)基因豬，這體現(xiàn)了早期胚胎細胞具有

（4）檢測人溶菌酶基因?qū)胧欠癯晒?，可以采用技術(shù)，若要進行個體生物

學水平的鑒定，可以進行抑菌實驗檢測

【答案】（1）.體液中的殺菌物質(zhì)和吞噬細胞是保衛(wèi)人體的第二道防線，而乳汁不屬于體

液（2）.豬的乳腺蛋白基因的啟動子（3）.mRNA⑷.去核⑸.全能性⑹.

DNA分子雜交（7）.豬乳汁中溶菌酶的生物活性

【解析】

【分析】

抗原不都是外來物質(zhì)，體內(nèi)異常細胞也能被特異性免疫系統(tǒng)識別；吞噬細胞可以清除被抗體

結(jié)合后形成的沉淀物或細胞集團：漿細胞只能分泌抗體，沒有識別抗原的能力。

【詳解】（1）體液中的殺菌物質(zhì)和吞噬細胞是保衛(wèi)人體的第二道防線，而乳汁不屬于體液。

（2）要想讓人溶菌酶基因在豬的乳腺中特異表達，可在人溶菌酶基因的首端接入豬的乳腺

蛋白基因的啟動子，這樣人溶菌酶基因就能在豬的乳腺中轉(zhuǎn)錄出mRNA（信使RNA）。

（3）進行細胞核移植時，受體細胞應(yīng)選擇豬去核的卵母細胞；早期胚胎細胞具有全能性，

利用胚胎分制技術(shù)將重組胚胎分隔開，再通過一定的方法可獲得多只轉(zhuǎn)基因豬。

（4）檢測目的基因?qū)胧欠癯晒?，可以采用DNA分子雜交技術(shù)，若要進行個體生物學水

平的鑒定，可以進行抑菌實驗檢測豬乳汁中（重組人）溶菌酶的生物活性。

【點睛】本題主要考查基因工程和胚胎工程，考查學生的理解能力。

15.（（新高考）2020-2021學年高三上學期期末備考金卷生物試題（B卷））關(guān)于利用細胞

工程方法，以H7N9病毒的核衣殼蛋白為抗原制備單克隆抗體，下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.用純化的核衣殼蛋白反復注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體

B.體外培養(yǎng)單個已免疫的B淋巴細胞可以獲得大量抗H7N9病毒的單克隆抗體

C.將等量已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞混合，經(jīng)PEG誘導融合后的細胞均為雜交瘤細

胞

D.利用該單克隆抗體與H7N9病毒的核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出H7N9病毒感染

者

【答案】D

【解析】

【分析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細胞；將效應(yīng)

B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞；克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體

內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。誘導動物細胞融合的方法有：物理法（離心、

振動）、化學法（聚乙二醵）、生物法（滅活的病毒）。

【詳解】A、用純化的核衣殼蛋白反復注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體化學性質(zhì)不單一，

不是單克隆抗體，A錯誤；

B、體外培養(yǎng)單個已免疫的B淋巴細胞，由于該B淋巴細胞不能無限