微生物的應(yīng)用與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)

第第頁專題28微生物的應(yīng)用與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)10年高考考點(diǎn)一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與發(fā)酵工程1.(2021浙江1月選考,10,2分)用白蘿卜制作泡菜的過程中,采用適當(dāng)方法可縮短腌制時(shí)間。下列方法中錯(cuò)誤的是()A.將白蘿卜切成小塊B.向容器中通入無菌空氣C.添加已經(jīng)腌制過的泡菜汁D.用沸水短時(shí)處理白蘿卜塊答案B用白蘿卜制作泡菜的過程中,將白蘿卜切成小塊、用沸水短時(shí)處理白蘿卜塊、添加已經(jīng)腌制過的泡菜汁,都有利于縮短腌制時(shí)間。該過程中需要將壇口用水封好,以便形成無氧環(huán)境,因此不能向容器中通入無菌空氣,B錯(cuò)誤。2.(2021遼寧,8,2分)利用菠蘿蜜制作果醋的大致流程為:先在滅菌的果肉勻漿中接種酵母菌,發(fā)酵6天后,再接入活化的醋酸桿菌,發(fā)酵5天。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.乙醇既是醋酸發(fā)酵的底物,又可以抑制雜菌繁殖B.酵母菌和醋酸桿菌均以有絲分裂的方式進(jìn)行增殖C.酵母菌和醋酸桿菌發(fā)酵過程中控制通氣的情況不同D.接入醋酸桿菌后,應(yīng)適當(dāng)升高發(fā)酵溫度答案B當(dāng)缺少糖源時(shí),醋酸桿菌將乙醇變?yōu)橐胰?再將乙醛變?yōu)榇姿?酒精具有抑制雜菌繁殖的作用,A正確;酵母菌是真核生物,可以進(jìn)行有絲分裂,但醋酸桿菌是原核生物,以二分裂的方式進(jìn)行增殖,B錯(cuò)誤;酵母菌是兼性厭氧微生物,醋酸桿菌是一種好氧細(xì)菌,所以酵母菌和醋酸桿菌發(fā)酵過程中控制通氣的情況不同,C正確;酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18~30℃,大多數(shù)醋酸桿菌最適生長(zhǎng)溫度為30~35℃,所以接入醋酸桿菌后,應(yīng)適當(dāng)升高發(fā)酵溫度,D正確。3.(2021湖北,3,2分)中國(guó)的許多傳統(tǒng)美食制作過程蘊(yùn)含了生物發(fā)酵技術(shù)。下列敘述正確的是()A.泡菜制作過程中,酵母菌將葡萄糖分解成乳酸B.饅頭制作過程中,酵母菌進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生CO2C.米酒制作過程中,將容器密封可以促進(jìn)酵母菌生長(zhǎng)D.酸奶制作過程中,后期低溫處理可產(chǎn)生大量乳酸桿菌答案B泡菜制作的原理是乳酸菌無氧呼吸分解葡萄糖并產(chǎn)生乳酸,A錯(cuò)誤;饅頭制作過程中,酵母菌呼吸作用產(chǎn)生CO2,B正確;密封容器中酵母菌無氧呼吸產(chǎn)能較少,不利于其生長(zhǎng)繁殖,但其進(jìn)行無氧呼吸可產(chǎn)生酒精,C錯(cuò)誤;低溫可抑制酶的活性,酸奶制作過程中的低溫處理,不利于乳酸桿菌繁殖,D錯(cuò)誤。4.(2021山東,12,2分)葡萄酒的制作離不開酵母菌。下列說法錯(cuò)誤的是()A.無氧條件下酵母菌能存活但不能大量繁殖B.自然發(fā)酵制作葡萄酒時(shí)起主要作用的菌是野生型酵母菌C.葡萄酒的顏色是葡萄皮中的色素進(jìn)入發(fā)酵液形成的D.制作過程中隨著發(fā)酵的進(jìn)行發(fā)酵液中糖含量增加答案D無氧條件下酵母菌進(jìn)行無氧呼吸,產(chǎn)生酒精和二氧化碳及少量能量,繁殖能力弱,能存活但不能大量繁殖,A正確。自然發(fā)酵制作葡萄酒時(shí),起主要作用的是葡萄表面存留的野生型酵母菌,B正確。葡萄皮中含有豐富的色素,發(fā)酵過程中,這些色素釋放出來使葡萄酒顯示相應(yīng)的顏色,C正確。釀酒過程中,酵母菌進(jìn)行呼吸作用的底物是葡萄糖,發(fā)酵液中的糖由于不斷消耗而不斷減少,D錯(cuò)誤。5.(2020山東,12,2分)我國(guó)的釀酒技術(shù)歷史悠久,古人在實(shí)際生產(chǎn)中積累了很多經(jīng)驗(yàn)?！洱R民要術(shù)》記載:將蒸熟的米和酒曲混合前需“浸曲發(fā),如魚眼湯,凈淘米八斗,炊作飯,舒令極冷”。意思是將酒曲浸到活化,冒出魚眼大小的氣泡,把八斗米淘凈,蒸熟,攤開冷透。下列說法錯(cuò)誤的是()A.“浸曲發(fā)”過程中酒曲中的微生物代謝加快B.“魚眼湯”現(xiàn)象是微生物呼吸作用產(chǎn)生的CO2釋放形成的C.“凈淘米”是為消除雜菌對(duì)釀酒過程的影響而采取的主要措施D.“舒令極冷”的目的是防止蒸熟的米溫度過高導(dǎo)致酒曲中的微生物死亡答案C長(zhǎng)期干燥的酒曲中微生物處于休眠狀態(tài),可長(zhǎng)時(shí)間保存,使用前使其活化,可加快微生物的代謝,A正確;“魚眼湯”說明酒曲中的微生物進(jìn)行細(xì)胞呼吸產(chǎn)生了二氧化碳,B正確;“凈淘米”是為了去除雜質(zhì),而“蒸熟”是為了消除雜菌對(duì)釀酒過程的影響,C錯(cuò)誤;如果將酒曲放入剛剛蒸好的米中則過高的溫度會(huì)導(dǎo)致酒曲中的微生物死亡,而“舒令極冷”則可防止此問題的發(fā)生,D正確。閱讀下列材料,回答6、7題。甜瓣子是豆瓣醬的重要成分,風(fēng)味受蠶豆蛋白分解產(chǎn)生的氨基酸影響,也受發(fā)酵過程中不同微生物的多種代謝產(chǎn)物影響。其生產(chǎn)工藝如圖所示。蠶豆瓣豆瓣曲醬醅甜瓣子某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)加鹽水后的發(fā)酵階段的傳統(tǒng)工藝(鹽度15%,溫度37℃,發(fā)酵30天)進(jìn)行了改良,改良后甜瓣子風(fēng)味得以提升。新工藝參數(shù)如下表所示。時(shí)期時(shí)段(天)鹽度(%)溫度(℃)前期0~12612中期12~16637后期16~301537兩種工藝的結(jié)果比較見圖。6.(2020江蘇單科,18,2分)某同學(xué)在線提交了在家用帶蓋玻璃瓶制作果酒和果醋的實(shí)驗(yàn)報(bào)告,他的做法錯(cuò)誤的是()A.選擇新鮮的葡萄略加沖洗,除去枝梗后榨汁B.將玻璃瓶用酒精消毒后,裝滿葡萄汁C.酒精發(fā)酵期間,根據(jù)發(fā)酵進(jìn)程適時(shí)擰松瓶蓋放氣D.酒精發(fā)酵后去除瓶蓋,蓋一層紗布,再進(jìn)行醋酸發(fā)酵答案B新鮮葡萄應(yīng)先清洗后去枝梗,A正確;將玻璃瓶用酒精消毒后,將葡萄汁裝入玻璃瓶,要留大約1/3的空間,B錯(cuò)誤;酒精發(fā)酵期間有CO2產(chǎn)生,需根據(jù)發(fā)酵進(jìn)程適時(shí)擰松瓶蓋放氣,C正確;用于果醋發(fā)酵的醋酸菌為好氧細(xì)菌,需在氧氣充足的環(huán)境中進(jìn)行醋酸發(fā)酵,D正確。7.(2019江蘇單科,9,2分)下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述,正確的是()A.利用乳酸菌制作酸奶過程中,先通氣培養(yǎng),后密封發(fā)酵B.家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵C.果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低,果酒制作過程中情況相反D.毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶和纖維素酶參與腐乳發(fā)酵答案B乳酸菌為嚴(yán)格厭氧型細(xì)菌,通氣會(huì)造成乳酸菌死亡,A錯(cuò)誤;家庭釀制葡萄酒利用的主要是附著在葡萄果皮上的野生酵母菌,果醋發(fā)酵需要的醋酸桿菌常從變酸的酒的表面菌膜中獲取,腐乳的制作主要利用空氣中的毛霉孢子,三者都不是純種發(fā)酵,B正確;果醋發(fā)酵中隨著醋酸的產(chǎn)生,pH逐漸降低,果酒發(fā)酵中會(huì)產(chǎn)生較多的CO2,使發(fā)酵液pH降低,C錯(cuò)誤;毛霉產(chǎn)生的酶有蛋白酶和脂肪酶等,但毛霉不產(chǎn)生纖維素酶,D錯(cuò)誤。易錯(cuò)警示在傳統(tǒng)的葡萄酒制作中起主要作用的是附著在葡萄果皮上的野生型酵母菌。8.(2018江蘇單科,16,2分)某高校采用如圖所示的發(fā)酵罐進(jìn)行葡萄酒主發(fā)酵過程的研究,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.夏季生產(chǎn)果酒時(shí),常需對(duì)罐體進(jìn)行降溫處理B.乙醇為揮發(fā)性物質(zhì),故發(fā)酵過程中空氣的進(jìn)氣量不宜太大C.正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會(huì)低于大氣壓D.可以通過監(jiān)測(cè)發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時(shí)終止發(fā)酵答案B生產(chǎn)果酒是利用酵母菌的無氧呼吸產(chǎn)生酒精的過程,酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18~25℃,夏季溫度高,且發(fā)酵過程有熱量產(chǎn)生,故夏季生產(chǎn)果酒時(shí),常需對(duì)罐體進(jìn)行降溫處理,A項(xiàng)正確;在發(fā)酵產(chǎn)酒精過程中需保持無氧狀態(tài),B項(xiàng)錯(cuò)誤;酵母菌的呼吸過程會(huì)產(chǎn)生CO2,故正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會(huì)低于大氣壓,C項(xiàng)正確;可以通過監(jiān)測(cè)發(fā)酵過程中殘余糖的濃度決定何時(shí)終止發(fā)酵,D項(xiàng)正確。9.(2017江蘇單科,10,2分)下列關(guān)于“腐乳的制作”實(shí)驗(yàn),敘述正確的是()A.控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味B.腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用C.毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉D.成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由細(xì)菌產(chǎn)生答案B本題考查腐乳制作的相關(guān)知識(shí)?？刂瓢l(fā)酵溫度的主要目的是使毛霉等微生物正常生長(zhǎng)增殖,A錯(cuò)誤;腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐和調(diào)味作用,B正確;毛霉等微生物可分泌蛋白酶和脂肪酶,催化豆腐中的蛋白質(zhì)水解為小分子肽和氨基酸,催化脂肪水解為脂肪酸和甘油,C錯(cuò)誤;成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由毛霉產(chǎn)生,D錯(cuò)誤。10.(2018江蘇單科,16,2分)某高校采用如圖所示的發(fā)酵罐進(jìn)行葡萄酒主發(fā)酵過程的研究,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.夏季生產(chǎn)果酒時(shí),常需對(duì)罐體進(jìn)行降溫處理B.乙醇為揮發(fā)性物質(zhì),故發(fā)酵過程中空氣的進(jìn)氣量不宜太大C.正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會(huì)低于大氣壓D.可以通過監(jiān)測(cè)發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時(shí)終止發(fā)酵答案B通過對(duì)發(fā)酵條件、設(shè)備配置等內(nèi)容的分析,體現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)探究中方案實(shí)施、結(jié)果分析等要素。生產(chǎn)果酒是利用酵母菌的無氧呼吸產(chǎn)生酒精的過程,酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18~25℃,夏季溫度高,且發(fā)酵過程有熱量產(chǎn)生,故夏季生產(chǎn)果酒時(shí),常需對(duì)罐體進(jìn)行降溫處理,A項(xiàng)正確;在發(fā)酵產(chǎn)酒精過程中需保持無氧狀態(tài),B項(xiàng)錯(cuò)誤;酵母菌的呼吸過程會(huì)產(chǎn)生CO2,故正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會(huì)低于大氣壓,C項(xiàng)正確;可以通過監(jiān)測(cè)發(fā)酵過程中殘余糖的濃度決定何時(shí)終止發(fā)酵,D項(xiàng)正確。11.(2017江蘇單科,10,2分)下列關(guān)于“腐乳的制作”實(shí)驗(yàn),敘述正確的是()A.控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味B.腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用C.毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉D.成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由細(xì)菌產(chǎn)生答案B本題考查腐乳制作的相關(guān)知識(shí)?？刂瓢l(fā)酵溫度的主要目的是使毛霉等微生物正常生長(zhǎng)增殖,A錯(cuò)誤;腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐和調(diào)味作用,B正確;毛霉等微生物可分泌蛋白酶和脂肪酶,催化豆腐中的蛋白質(zhì)水解為小分子肽和氨基酸,催化脂肪水解為脂肪酸和甘油,C錯(cuò)誤;成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由毛霉產(chǎn)生,D錯(cuò)誤。12.(2017江蘇單科,25,3分)如圖是探究果酒與果醋發(fā)酵的裝置示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是()A.改變通入氣體種類,可以研究呼吸作用類型對(duì)發(fā)酵的影響B(tài).果酒發(fā)酵中期通入氮?dú)?酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸C.果醋的發(fā)酵周期與實(shí)驗(yàn)設(shè)定的溫度密切相關(guān)D.氣體入口與氣體出口可以交換使用答案ABC本題主要考查果酒和果醋制作的相關(guān)知識(shí)。果酒和果醋發(fā)酵所利用的菌種分別是酵母菌、醋酸菌,其中酵母菌屬于兼性厭氧菌,而醋酸菌為需氧菌,因此改變通入氣體種類,可研究呼吸作用類型對(duì)發(fā)酵的影響,A正確;果酒發(fā)酵中期通入氮?dú)夂?酵母菌可從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸,B正確;醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為30~35℃,溫度過低會(huì)抑制酶活性,從而抑制果醋的發(fā)酵周期,C正確;圖中的氣體入口與氣體出口不可以交換使用,因?yàn)榕c氣體入口相連的導(dǎo)管需要插入發(fā)酵瓶的底部,D錯(cuò)誤。易錯(cuò)提醒①果酒與果醋的制作利用的是微生物發(fā)酵,微生物需要一定的溫度才能正常生長(zhǎng)。②氣體入口可為培養(yǎng)液中微生物提供氣體環(huán)境,故應(yīng)將與氣體入口相連的導(dǎo)管插入發(fā)酵瓶底部。13.(2016江蘇單科,7,2分)下列關(guān)于中學(xué)“腐乳的制作”實(shí)驗(yàn),敘述正確的是()A.加鹽主要是為了調(diào)節(jié)水分,利于毛霉生長(zhǎng)B.加料酒主要是為了滅菌,避免腐敗變質(zhì)C.發(fā)酵過程中起主要作用的是乳酸桿菌D.實(shí)驗(yàn)室制作的腐乳不宜直接食用答案D加鹽主要是為了調(diào)節(jié)水分,同時(shí)也能抑制微生物的生長(zhǎng),A錯(cuò)誤;加料酒可以抑制微生物的生長(zhǎng),同時(shí)能使腐乳具有獨(dú)特的香味,并非滅菌,B錯(cuò)誤;發(fā)酵過程中起主要作用的是毛霉,C錯(cuò)誤;實(shí)驗(yàn)室制作的腐乳,未經(jīng)嚴(yán)格檢測(cè),不宜直接食用,D正確。名師點(diǎn)睛解答本題的關(guān)鍵在于理解腐乳制作的過程:前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。理解后期發(fā)酵過程中加鹽、加料酒、加香辛料的作用。14.(2013江蘇單科,14,2分)某研究性學(xué)習(xí)小組以櫻桃番茄為材料進(jìn)行果酒、果醋發(fā)酵實(shí)驗(yàn)。下列相關(guān)敘述正確的是()A.酵母菌是嗜溫菌,所以果酒發(fā)酵所需的最適溫度較高B.先供氧進(jìn)行果醋發(fā)酵,然后隔絕空氣進(jìn)行果酒發(fā)酵C.與人工接種的發(fā)酵相比,自然發(fā)酵獲得的產(chǎn)品品質(zhì)更好D.適當(dāng)加大接種量可以提高發(fā)酵速率、抑制雜菌生長(zhǎng)繁殖答案D本題考查果酒和果醋的制作的相關(guān)知識(shí)。果酒發(fā)酵一般將溫度控制在18~25℃,而果醋發(fā)酵的適宜溫度為30~35℃,因此果醋發(fā)酵所需的最適溫度較高;應(yīng)該先隔絕空氣進(jìn)行果酒發(fā)酵,然后植入醋酸桿菌,通入空氣,進(jìn)行果醋發(fā)酵,因?yàn)榇姿釛U菌可以將酒精轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿?與人工接種的發(fā)酵相比,自然發(fā)酵過程中菌種量比較少,且菌種本身品質(zhì)不好,因此,自然發(fā)酵獲得的產(chǎn)品品質(zhì)較差;適當(dāng)加大接種量,能提高發(fā)酵速率、抑制雜菌生長(zhǎng)繁殖。解題思路①確定菌種,并比較兩菌種的代謝類型及溫度范圍;②聯(lián)系已學(xué)的相關(guān)知識(shí),確定培養(yǎng)的先后順序;③接種量大,有利于菌種快速達(dá)到一定數(shù)量,且可抑制其他雜菌的生長(zhǎng)。15.(2011江蘇單科,3,2分)下列與果酒、果醋和腐乳制作相關(guān)的敘述,正確的是()A.腐乳制作所需要的適宜溫度最高B.果醋發(fā)酵包括無氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵C.使用的菌種分別是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌D.使用的菌種都具有細(xì)胞壁、核糖體、DNA和RNA答案D果酒制作用的是酵母菌,酵母菌發(fā)酵時(shí),最適溫度在18~25℃;制果醋時(shí)用到的醋酸菌是一種好氧菌,最適生長(zhǎng)溫度為30~35℃;制腐乳時(shí)主要用的菌種是毛霉,其最適溫度在15~18℃;酵母菌、醋酸菌和毛霉都具有細(xì)胞壁、核糖體、DNA和RNA,故D正確。37.(2021全國(guó)乙,37,15分)工業(yè)上所說的發(fā)酵是指微生物在有氧或無氧條件下通過分解與合成代謝將某些原料物質(zhì)轉(zhuǎn)化為特定產(chǎn)品的過程。利用微生物發(fā)酵制作醬油在我國(guó)具有悠久的歷史。某企業(yè)通過發(fā)酵制作醬油的流程示意圖如圖?；卮鹣铝袉栴}:(1)米曲霉發(fā)酵過程中,加入大豆、小麥和麥麩可以為米曲霉的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),大豆中的可為米曲霉的生長(zhǎng)提供氮源,小麥中的淀粉可為米曲霉的生長(zhǎng)提供。

(2)米曲霉發(fā)酵過程的主要目的是使米曲霉充分生長(zhǎng)繁殖,大量分泌制作醬油過程所需的酶類,這些酶中的、能分別將發(fā)酵池中的蛋白質(zhì)和脂肪分解成易于吸收、風(fēng)味獨(dú)特的成分,如將蛋白質(zhì)分解為小分子的肽和。米曲霉發(fā)酵過程需要提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、通入空氣并攪拌,由此可以判斷米曲霉屬于(填“自養(yǎng)厭氧”“異養(yǎng)厭氧”或“異養(yǎng)好氧”)微生物。

(3)在發(fā)酵池發(fā)酵階段添加的乳酸菌屬于(填“真核生物”或“原核生物”);添加的酵母菌在無氧條件下分解葡萄糖的產(chǎn)物是。在該階段抑制雜菌污染和繁殖是保證醬油質(zhì)量的重要因素,據(jù)圖分析該階段中可以抑制雜菌生長(zhǎng)的物質(zhì)是(答出1點(diǎn)即可)。

答案(1)蛋白質(zhì)碳源(2)蛋白酶脂肪酶氨基酸異養(yǎng)好氧(3)原核生物乙醇和CO2食鹽解析(1)微生物培養(yǎng)基成分一般包括碳源、氮源、無機(jī)鹽、水、生長(zhǎng)因子等。含有氮元素且能被微生物利用的物質(zhì)稱為氮源,大豆中的蛋白質(zhì)可為米曲霉的生長(zhǎng)提供氮源,含有碳元素且能被微生物所利用的物質(zhì)稱為碳源,小麥中的淀粉屬于多糖,含有C、H、O,可為米曲霉的生長(zhǎng)提供碳源。(2)蛋白酶可將大分子的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。米曲霉發(fā)酵過程需提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),需要通入空氣并攪拌,故米曲霉的代謝類型為異養(yǎng)好氧型。(3)乳酸菌屬于細(xì)菌,為原核生物。酵母菌為異養(yǎng)兼性厭氧型生物,在無氧條件下分解葡萄糖可生成乙醇和CO2。發(fā)酵過程中加入的食鹽可以抑制雜菌的生長(zhǎng)。17.(2018課標(biāo)全國(guó)Ⅲ,37,15分)回答下列與酵母菌有關(guān)的問題:(1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基應(yīng)采用滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上,培養(yǎng)一段時(shí)間后可觀察到菌落,菌落的含義是。

(2)酵母菌液體培養(yǎng)時(shí),若通入氧氣,可促進(jìn)(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”);若進(jìn)行厭氧培養(yǎng),可促進(jìn)(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。

(3)制作面包時(shí),為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的原因是。

答案(1)麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體(2)菌體快速增殖乙醇產(chǎn)生(3)酵母菌分解葡萄糖會(huì)產(chǎn)生CO2,CO2使面包松軟解析本題通過問題并列的命題方式考查酵母菌的培養(yǎng)與應(yīng)用,屬于對(duì)科學(xué)探究素養(yǎng)的考查。(1)常用含葡萄糖較多的麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基分離培養(yǎng)酵母菌。培養(yǎng)基常采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。菌落是由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體。(2)有氧氣存在時(shí),酵母菌有氧呼吸產(chǎn)生的大量能量可用于快速增殖;無氧氣存在時(shí),酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生乙醇和CO2。(3)酵母菌進(jìn)行細(xì)胞呼吸可產(chǎn)生CO2,故用酵母菌制作的面包會(huì)變得松軟。易錯(cuò)警示不同培養(yǎng)基的用途牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)細(xì)菌,MS培養(yǎng)基常用于植物組織培養(yǎng),麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)酵母菌。18.(2017課標(biāo)全國(guó)Ⅱ,37,15分)豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素,某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻,再將兩者置于適宜條件下進(jìn)行發(fā)酵,并在32h內(nèi)定期取樣觀測(cè)發(fā)酵效果。回答下列問題:(1)該實(shí)驗(yàn)的自變量是、。

(2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好,說明該發(fā)酵菌是。

(3)如果在實(shí)驗(yàn)后,發(fā)現(xiàn)32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好,且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線上升關(guān)系,則無法確定發(fā)酵的最佳時(shí)間;若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間,還需要做的事情是。

(4)從大豆到豆豉,大豆中的成分會(huì)發(fā)生一定的變化,其中,蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)?脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)椤?/p>

答案(1)菌種發(fā)酵時(shí)間(2)好氧菌(3)延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間,觀測(cè)發(fā)酵效果,最好的發(fā)酵效果所對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為最佳發(fā)酵時(shí)間(4)氨基酸和肽脂肪酸和甘油解析本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識(shí)。(1)根據(jù)題中“甲、乙兩菌種”和“32h內(nèi)定期取樣觀測(cè)發(fā)酵效果”可確定該實(shí)驗(yàn)的自變量是菌種類型和發(fā)酵時(shí)間。(2)發(fā)酵容器底層缺氧,上層氧氣相對(duì)充足,上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好,說明該發(fā)酵菌屬于好氧菌。(3)由于32h內(nèi)發(fā)酵效果隨發(fā)酵時(shí)間呈直線上升,所以若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間,應(yīng)該繼續(xù)延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間,觀測(cè)發(fā)酵效果,最好發(fā)酵效果所對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為最佳發(fā)酵時(shí)間。(4)發(fā)酵過程中微生物會(huì)產(chǎn)生多種蛋白酶和脂肪酶,蛋白酶可使蛋白質(zhì)分解為小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可使脂肪分解為甘油和脂肪酸。知識(shí)歸納關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的3個(gè)誤區(qū)(1)誤認(rèn)為微生物培養(yǎng)基中都需有機(jī)碳源、氮源,自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)不需加有機(jī)碳源、固氮菌的培養(yǎng)不需加氮源。(2)誤認(rèn)為泡菜制作過程中乳酸和亞硝酸鹽的含量都是先增加后減少,在泡菜制作過程中乳酸含量先增加后保持穩(wěn)定。(3)誤認(rèn)為果酒、果醋制作過程中都需要無氧條件,果醋制作過程中利用的是醋酸菌的有氧呼吸,因此需要有氧條件。19.(2016課標(biāo)全國(guó)Ⅱ,39,15分)蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的?；卮鹣铝袉栴}:(1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程①和②是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段,在酵母菌細(xì)胞的中進(jìn)行,其產(chǎn)物乙醇與試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色,這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗(yàn);過程③在酵母菌細(xì)胞的中進(jìn)行。與無氧條件相比,在有氧條件下,酵母菌的增殖速度。

(2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程,根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型,該過程需要在條件下才能完成。

(3)在生產(chǎn)過程中,第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同,第一階段的溫度(填“低于”或“高于”)第二階段的。

(4)醋酸桿菌屬于核生物,其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中(填“含有”或“不含有”)線粒體。

答案(1)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)重鉻酸鉀線粒體快(2)有氧(3)低于(4)原不含有解析(1)圖中過程①和②表示酵母菌厭氧呼吸的第一、二階段,發(fā)生場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì);乙醇可在酸性條件下與重鉻酸鉀試劑發(fā)生顏色反應(yīng);過程③表示有氧呼吸的第二、三階段,發(fā)生在線粒體中;與無氧呼吸相比,有氧呼吸過程釋放的能量多,所以在有氧條件下酵母菌的繁殖速度較快。(2)醋酸桿菌是好氧菌,所以乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程需要在有氧條件下才能完成。(3)酵母菌和醋酸桿菌的最適生長(zhǎng)溫度分別是18℃~25℃和30℃~35℃。(4)醋酸桿菌屬于細(xì)菌,是原核生物,原核細(xì)胞中不含有線粒體。20.(2016天津理綜,10,12分)天津獨(dú)流老醋歷史悠久、獨(dú)具風(fēng)味,其生產(chǎn)工藝流程如圖。淀粉類

原料成熟

酒醅成熟

醋醅(1)在糖化階段添加酶制劑需要控制反應(yīng)溫度,這是因?yàn)槊浮?/p>

(2)在酒精發(fā)酵階段,需添加酵母菌。在操作過程中,發(fā)酵罐先通氣,后密閉。通氣能提高的數(shù)量,有利于密閉時(shí)獲得更多的酒精產(chǎn)物。

(3)在醋酸發(fā)酵階段,獨(dú)流老醋采用獨(dú)特的分層固體發(fā)酵法,發(fā)酵30天。工藝如下。①發(fā)酵過程中,定期取樣測(cè)定醋酸桿菌密度變化,趨勢(shì)如圖。據(jù)圖分析,與顛倒前相比,B層醋酸桿菌在顛倒后密度變化的特點(diǎn)是,由此推測(cè),影響醋酸桿菌密度變化的主要環(huán)境因素是。

②乳酸含量高是獨(dú)流老醋風(fēng)味獨(dú)特的重要成因。發(fā)酵過程中,發(fā)酵缸中層的醋醅有利于乳酸菌繁殖,積累乳酸。

③成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少,主要原因是發(fā)酵后期營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗等環(huán)境因素的改變,加劇了不同種類乳酸菌的,淘汰了部分乳酸菌種類。

答案(12分)(1)在最適溫度條件下催化能力最強(qiáng)(2)酵母菌(3)①先快速增長(zhǎng)后趨于穩(wěn)定氧氣、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、pH②顛倒前的B層和顛倒后的A(或不翻動(dòng)或下)③種間競(jìng)爭(zhēng)(或競(jìng)爭(zhēng))解析(1)因酶在最適溫度下的催化能力最強(qiáng),故發(fā)酵過程中需控制好反應(yīng)溫度。(2)酵母菌是兼性厭氧型微生物,在有氧條件下分解有機(jī)物釋放的能量多,繁殖快。(3)曲線圖顯示,與翻動(dòng)前相比,B層在翻動(dòng)后醋酸桿菌密度先快速增加而后趨于穩(wěn)定,對(duì)比翻動(dòng)前后B層醋酸桿菌所處環(huán)境條件知,影響醋酸桿菌密度變化的主要環(huán)境因素有氧氣濃度、pH及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量等。乳酸菌是厭氧型微生物,處于發(fā)酵缸下層的醋醅有利于乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸。隨著發(fā)酵時(shí)間的推移,環(huán)境中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少,代謝廢物增多,微生物生存條件惡劣,不同種乳酸菌間的競(jìng)爭(zhēng)加劇,部分菌種因不適應(yīng)環(huán)境而被淘汰。21.(2015廣東理綜,29,16分)泡菜是我國(guó)的傳統(tǒng)食品之一,但制作過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽對(duì)人體健康有潛在危害。某興趣小組準(zhǔn)備參加“科技創(chuàng)新大賽”,查閱資料得到圖。(1)制作泡菜時(shí),泡菜壇一般用水密封,目的是。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有。

(2)據(jù)圖,與第3天相比,第8天后的泡菜更適于食用,因?yàn)楹笳?pH呈下降趨勢(shì),原因是。

(3)該小組得到一株“優(yōu)選”乳酸菌(亞硝酸鹽還原酶活力比普通乳酸菌高5倍),擬參照資料的實(shí)驗(yàn)方案和食鹽濃度(4%~10%),探究與普通乳酸菌相比用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量的高低,并確定其最適條件。請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表,并推測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)論。答案(16分)(1)創(chuàng)造無氧環(huán)境(1分)丙酮酸、[H]、ATP(3分)(2)亞硝酸鹽含量已接近最低水平(1分)乳酸積累(2分)(3)結(jié)果記錄表(6分)亞硝酸鹽含量(單位:mg/kg)食鹽濃度(%)乳酸菌發(fā)酵時(shí)間(d)123456789104普通優(yōu)選7普通優(yōu)選10普通優(yōu)選注:其他合理答案酌情給分。推測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)論:①用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜,亞硝酸鹽含量更低(1分)②最適條件是亞硝酸鹽含量最低時(shí)的食鹽濃度和發(fā)酵時(shí)間(2分)解析(1)由于乳酸菌是厭氧細(xì)菌,制作泡菜時(shí),泡菜壇一般用水密封,目的是隔絕空氣,創(chuàng)造無氧環(huán)境。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物是丙酮酸、[H]和ATP。(2)析圖可知,8天后的泡菜中亞硝酸鹽含量低,更適于食用。制作泡菜過程中,由于乳酸的積累,pH呈下降趨勢(shì)。(3)該實(shí)驗(yàn)的目的是比較“優(yōu)選”乳酸菌和普通乳酸菌在制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量的高低,并確定最適條件,故表格的設(shè)計(jì)要體現(xiàn)不同時(shí)間不同食鹽濃度下兩種乳酸菌的亞硝酸鹽含量的差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)論應(yīng)是優(yōu)選乳酸菌制作的泡菜中亞硝酸鹽含量更低,并確定亞硝酸鹽含量最低時(shí)的食鹽濃度和發(fā)酵時(shí)間。方法技巧設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表時(shí)注意將自變量、實(shí)驗(yàn)對(duì)象和發(fā)酵時(shí)間三個(gè)維度設(shè)計(jì)在一個(gè)表格中。22.回答下列有關(guān)泡菜制作及釀酒的問題:(1)制作泡菜時(shí),所用鹽水需煮沸,其目的是。為了縮短制作時(shí)間,有人還會(huì)在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液,加入陳泡菜液的目的是。從開始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時(shí)間內(nèi),泡菜液逐漸變酸,這段時(shí)間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長(zhǎng)規(guī)律是,原因是。

(2)釀制葡萄酒開始時(shí)一般要先通氣,其目的是

。

若檢測(cè)酵母菌的代謝產(chǎn)物中是否含有酒精,可以使用酸性的溶液進(jìn)行檢測(cè)。

(3)若將上述培養(yǎng)液中的酵母菌接種到固體培養(yǎng)基表面,常用的方法有。

答案(1)殺滅雜菌增加乳酸菌數(shù)量乳酸菌數(shù)量增多,雜菌數(shù)量減少乳酸菌比雜菌更耐酸(2)讓酵母菌在有氧條件下大量繁殖重鉻酸鉀(3)平板劃線法或稀釋涂布平板法解析本題主要考查科學(xué)探究中的方案實(shí)施要素。(1)制作泡菜時(shí),所用鹽水需煮沸,其目的是通過煮沸殺滅鹽水中的雜菌,陳泡菜液中含有大量乳酸菌,因此加入陳泡菜液的目的是增加乳酸菌的數(shù)量。在制作泡菜的過程中,泡菜液逐漸變酸,乳酸菌耐酸,而其他雜菌不耐酸,因此隨著發(fā)酵的進(jìn)行,乳酸菌的數(shù)量增多,雜菌的數(shù)量減少。(2)釀造葡萄酒所用的菌種是酵母菌,釀制葡萄酒開始時(shí)一般要先通氣,其目的是讓酵母菌在有氧條件下大量繁殖。發(fā)酵產(chǎn)生的酒精可以用酸性重鉻酸鉀溶液檢測(cè),其原理是酒精和酸性重鉻酸鉀溶液反應(yīng)顯灰綠色。(3)將酵母菌接種到固體培養(yǎng)基的常用方法是平板劃線法或稀釋涂布平板法。23.(2012海南單科,30,15分)回答下列關(guān)于腐乳制作的問題:(1)腐乳是豆腐經(jīng)微生物發(fā)酵后制成的食品。多種微生物參與了該發(fā)酵過程,其中起主要作用的微生物是,其產(chǎn)生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質(zhì)水解為和;其產(chǎn)生的能將豆腐中的脂肪水解為和。

(2)發(fā)酵完成后需加鹽腌制,加鹽還可以抑制生長(zhǎng)。

(3)腐乳制作的后期可加入由酒和多種香辛料配制而成的鹵湯。鹵湯除具有一定的防腐作用外,還能使腐乳具有獨(dú)特的。

答案(1)毛霉肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸(每空2分,共12分)(2)微生物(2分)(3)風(fēng)味(1分,其他合理答案也給分)解析本題考查腐乳制作過程的相關(guān)知識(shí)。(1)腐乳制作時(shí)是以豆腐為原料,在毛霉以及多種微生物參與下發(fā)酵而制成的食品,富含易被人體吸收的多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如多肽、氨基酸等。腐乳制作過程中,豆腐中的蛋白質(zhì)在蛋白酶的作用下被水解為多肽,進(jìn)而在肽酶的作用下被水解為各種氨基酸;脂肪在脂肪酶的作用下被分解為甘油和脂肪酸。(2)在發(fā)酵完成后的腌制過程中,鹽能抑制微生物的生長(zhǎng),防止豆腐塊腐敗變質(zhì)。(3)鹵湯除能防腐外,還可使腐乳具有獨(dú)特的風(fēng)味?？键c(diǎn)二微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用1.(2021浙江6月選考,17,2分)下列關(guān)于原生質(zhì)體和細(xì)胞計(jì)數(shù)的敘述,錯(cuò)誤的是()A.測(cè)定植物原生質(zhì)體的密度時(shí),可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板B.紅墨水不能進(jìn)入活細(xì)胞,可用于檢測(cè)細(xì)胞的存活狀態(tài)并計(jì)數(shù)C.涂布分離法和劃線分離法均能得到單菌落,都可用于細(xì)菌計(jì)數(shù)D.酵母菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間后,可用比濁計(jì)測(cè)定其密度答案C測(cè)定植物原生質(zhì)體的密度時(shí),可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,A正確;紅墨水不能進(jìn)入活細(xì)胞,其可用于檢測(cè)細(xì)胞的存活狀態(tài)并計(jì)數(shù),若細(xì)胞被紅墨水染色,則說明細(xì)胞死亡,B正確;劃線分離法只能用于細(xì)菌分離,不能用于細(xì)菌計(jì)數(shù),C錯(cuò)誤;酵母菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間后,可用比濁計(jì)測(cè)定其密度,D正確。2.(2021天津,1,4分)下列操作能達(dá)到滅菌目的的是()A.用免洗酒精凝膠擦手B.制作泡菜前用開水燙洗容器C.在火焰上灼燒接種環(huán)D.防疫期間用石炭酸噴灑教室答案C用免洗酒精凝膠擦手只能起到消毒的作用,無法達(dá)到滅菌的目的,A錯(cuò)誤;開水燙洗容器只能起到消毒的作用,B錯(cuò)誤;在火焰上灼燒接種環(huán)可以達(dá)到滅菌的目的,C正確;用石炭酸噴灑教室只能起到消毒的作用,D錯(cuò)誤。3.(2021北京,12,2分)人體皮膚表面存在著多種微生物,某同學(xué)擬從中分離出葡萄球菌。下述操作不正確的是()A.對(duì)配制的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B.使用無菌棉拭子從皮膚表面取樣C.用取樣后的棉拭子在固體培養(yǎng)基上涂布D.觀察菌落的形態(tài)和顏色等進(jìn)行初步判斷答案C對(duì)培養(yǎng)基一般進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,A正確;從皮膚表面取樣時(shí)可用無菌棉拭子擦拭皮膚,B正確;將取樣后的棉拭子浸入無菌水中制備菌液(必要時(shí)需富集培養(yǎng)),取0.1mL菌液滴加到培養(yǎng)基表面,再用灼燒滅菌過的且冷卻的涂布器涂布,C錯(cuò)誤;不同的微生物一般有不同的菌落特征,可通過觀察菌落的形態(tài)和顏色等進(jìn)行初步判斷,D正確。4.(2021山東,14,2分)解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能直接吸收脂肪的甲、乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色,乙菌菌落周圍不變色。下列說法錯(cuò)誤的是()A.甲菌屬于解脂菌B.實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對(duì)比D.該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力答案B甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色說明甲菌能分泌脂肪酶分解脂肪產(chǎn)生脂肪酸,故甲菌屬于解脂菌,A正確;乙菌菌落周圍不變色,說明乙菌不能分泌脂肪酶分解脂肪,但其能在此培養(yǎng)基中存活并形成菌落,表明實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基中脂肪不是唯一碳源,B錯(cuò)誤;若兩種菌的接種區(qū)域之間距離足夠大,不容易相互干擾,則可以將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對(duì)比,C正確;由于解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸,而脂肪酸能使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色,因此可根據(jù)平板中菌落周圍深藍(lán)色的面積大小來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力,D正確。5.(2021山東,20,3分)含硫蛋白質(zhì)在某些微生物的作用下產(chǎn)生硫化氫導(dǎo)致生活污水發(fā)臭,硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結(jié)合形成黑色沉淀。為探究發(fā)臭水體中甲、乙菌是否產(chǎn)生硫化氫及兩種菌的運(yùn)動(dòng)能力,用穿刺接種的方法分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),如圖所示。若兩種菌繁殖速度相等,下列說法錯(cuò)誤的是()A.乙菌的運(yùn)動(dòng)能力比甲菌強(qiáng)B.為不影響菌的運(yùn)動(dòng)需選用液體培養(yǎng)基C.該實(shí)驗(yàn)不能比較出兩種菌產(chǎn)生硫化氫的量D.穿刺接種等接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染答案B硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結(jié)合形成黑色沉淀,甲、乙菌的穿刺路徑相同,但乙菌在試管中形成的黑色范圍大,這說明乙菌的運(yùn)動(dòng)能力比甲菌強(qiáng),A正確;穿刺培養(yǎng)是將接種針深插至半固體培養(yǎng)基中進(jìn)行接種以培養(yǎng)微生物的一種方法,常用于厭氧或兼性厭氧微生物的培養(yǎng),B錯(cuò)誤;在瓊脂層中進(jìn)行穿刺培養(yǎng),可根據(jù)細(xì)菌自穿刺部位的擴(kuò)散狀況來了解細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性能,但不能比較兩種菌產(chǎn)生硫化氫的量,C正確;穿刺接種等接種技術(shù)的核心是防止雜菌污染,D正確。6.(2020天津,9,4分)下列關(guān)于本研究的實(shí)驗(yàn)方法與原理的描述,錯(cuò)誤的是()A.發(fā)酵開始階段的微生物主要來源于制曲過程的積累B.蠶豆瓣可提供微生物生長(zhǎng)繁殖所需的碳源和氮源C.溫度與鹽度都影響微生物的生長(zhǎng)繁殖D.定期取樣,使用平板劃線法統(tǒng)計(jì)活細(xì)菌總數(shù)答案D制曲是發(fā)酵的重要工序,實(shí)質(zhì)是創(chuàng)造曲霉等相應(yīng)微生物生長(zhǎng)的適宜條件,保證相應(yīng)微生物得以充分生長(zhǎng)繁殖,用于發(fā)酵開始階段,A正確;蠶豆瓣中含有糖類、蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),可為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供碳源、氮源,B正確;微生物生長(zhǎng)繁殖需要適宜的溫度和鹽度,溫度過高和過低都會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)繁殖,鹽度過高會(huì)抑制微生物的生長(zhǎng)繁殖,C正確;統(tǒng)計(jì)活細(xì)菌總數(shù)常用的方法是稀釋涂布平板法,D錯(cuò)誤。7.(2020天津,10,4分)下列對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析,錯(cuò)誤的是()A.新工藝中期活霉菌總數(shù)下降由溫度升高導(dǎo)致B.新工藝后期活細(xì)菌總數(shù)下降由溫度、鹽度均升高導(dǎo)致C.新工藝中期氨基酸產(chǎn)生速率較前期末加快,是因?yàn)闇囟壬咛岣吡说鞍酌富钚訢.新工藝中甜瓣子風(fēng)味提升,與前、中期活微生物總數(shù)高和氨基酸終產(chǎn)量高均有關(guān)答案B據(jù)圖可知,新工藝中期活霉菌總數(shù)下降,相對(duì)新工藝前期比較,鹽度不變,溫度升高到37℃,可推知活霉菌總數(shù)下降是由溫度升高導(dǎo)致的,A正確;對(duì)比新工藝前期和中期,鹽度不變,溫度升高,對(duì)活細(xì)菌總數(shù)影響不大,對(duì)比新工藝中期和后期,溫度不變,鹽度升高,活細(xì)菌總數(shù)下降,說明活細(xì)菌總數(shù)下降是由鹽度升高導(dǎo)致的,B錯(cuò)誤;對(duì)比新工藝前期末和中期,鹽度不變,溫度升高,會(huì)影響酶的活性,可推知新工藝中期溫度升高提高了蛋白酶的活性,使分解蠶豆蛋白產(chǎn)生氨基酸的速率加快,C正確;據(jù)題意可知,甜瓣子風(fēng)味受蠶豆蛋白分解產(chǎn)生的氨基酸影響,也受發(fā)酵過程中不同微生物的多種代謝產(chǎn)物影響,據(jù)圖可知新工藝中甜瓣子風(fēng)味提升,與前、中期活微生物總數(shù)和氨基酸終產(chǎn)量高均有關(guān),D正確。8.(2020浙江7月選考,19,2分)下列關(guān)于微生物培養(yǎng)及利用的敘述,錯(cuò)誤的是()A.利用尿素固體培養(yǎng)基可迅速殺死其他微生物,而保留利用尿素的微生物B.配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)根據(jù)微生物的種類調(diào)整培養(yǎng)基的pHC.酵母菌不能直接利用糯米淀粉發(fā)酵得到糯米酒D.適宜濃度的酒精可使醋化醋桿菌活化答案A尿素固體培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,尿素是唯一氮源,不能利用尿素的微生物因缺乏可利用的氮源而不能在此培養(yǎng)基上生存,故尿素固體培養(yǎng)基的作用并不是迅速殺死這些微生物,A錯(cuò)誤;微生物的種類不同,需要的培養(yǎng)條件(如溫度和pH)可能不同,B正確;酵母菌沒有分解糯米淀粉的酶,故酵母菌不能直接利用糯米淀粉發(fā)酵得到糯米酒,C正確;醋化醋桿菌可以利用酒精產(chǎn)生醋酸,故適宜濃度的酒精能活化該菌,D正確。9.(2021浙江6月選考,29,15分)回答與甘蔗醋制作有關(guān)的問題:(1)為了獲得釀造甘蔗醋的高產(chǎn)菌株,以自然發(fā)酵的甘蔗渣為材料進(jìn)行篩選。首先配制醋酸菌選擇培養(yǎng)基:將適量的葡萄糖、KH2PO4、MgSO4溶解并定容,調(diào)節(jié)pH,再高壓蒸汽滅菌,經(jīng)后加入3%體積的無水乙醇。然后將10g自然發(fā)酵的甘蔗渣加入選擇培養(yǎng)基,振蕩培養(yǎng)24h。用將少量上述培養(yǎng)液涂布到含CaCO3的分離培養(yǎng)基上,在30℃培養(yǎng)48h。再挑取分離培養(yǎng)基上具有的單菌落若干,分別接種到與分離培養(yǎng)基成分相同的培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h后,置于4℃冰箱中保存。

(2)優(yōu)良產(chǎn)酸菌種篩選。將冰箱保存的菌種分別接入選擇培養(yǎng)基,培養(yǎng)一段時(shí)間后,取合適接種量的菌液在30℃、150r/min條件下振蕩培養(yǎng)。持續(xù)培養(yǎng)至培養(yǎng)液中醋酸濃度不再上升,或者培養(yǎng)液中含量達(dá)到最低時(shí),發(fā)酵結(jié)束。篩選得到的優(yōu)良菌種除了產(chǎn)酸量高外,還應(yīng)有(答出2點(diǎn)即可)等特點(diǎn)。

(3)制醋過程中,可將甘蔗渣制作成固定化介質(zhì),經(jīng)后用于發(fā)酵。其固定化方法為。

答案(1)冷卻玻璃刮刀較大透明圈斜面(2)乙醇耐酒精度高、耐酸高(3)滅菌吸附法解析(1)用來釀制甘蔗醋的微生物能夠利用乙醇來產(chǎn)醋酸,可在培養(yǎng)基中加入無水乙醇,用來篩選該微生物。培養(yǎng)基經(jīng)高壓蒸汽滅菌后溫度較高,經(jīng)冷卻后再加入無水乙醇,可防止乙醇揮發(fā)。涂布的工具是玻璃刮刀。能夠利用乙醇產(chǎn)醋酸的細(xì)菌在含有碳酸鈣(CaCO3)的培養(yǎng)基中能夠?qū)е戮渲車霈F(xiàn)透明圈,透明圈越大,其產(chǎn)醋酸能力越強(qiáng),因此選取透明圈較大的菌落進(jìn)行菌種保存。在4℃冰箱中,菌種保存時(shí)選用的培養(yǎng)基是斜面培養(yǎng)基。(2)篩選得到的細(xì)菌能夠?qū)⑴囵B(yǎng)基中的乙醇轉(zhuǎn)化為醋酸,因此發(fā)酵結(jié)束的標(biāo)志是乙醇含量達(dá)到最低或醋酸濃度不再上升。篩選得到的產(chǎn)酸菌進(jìn)行醋酸發(fā)酵時(shí),以乙醇為發(fā)酵底物,以醋酸為發(fā)酵產(chǎn)物,發(fā)酵初期乙醇濃度高,發(fā)酵后期醋酸濃度高,因此篩選得到的優(yōu)良菌種耐酒精度和耐酸的能力都應(yīng)很強(qiáng)。(3)為了避免雜菌污染,影響產(chǎn)酸量,固定化介質(zhì)用于發(fā)酵前需先滅菌。制醋過程中所用的固定化方法是吸附法,即將產(chǎn)酸菌吸附在介質(zhì)上。10.(2021廣東,21,12分)中國(guó)科學(xué)家運(yùn)用合成生物學(xué)方法構(gòu)建了一株嗜鹽單胞菌H,以糖蜜(甘蔗榨糖后的廢棄液,含較多蔗糖)為原料,在實(shí)驗(yàn)室發(fā)酵生產(chǎn)PHA等新型高附加值可降解材料,期望提高甘蔗的整體利用價(jià)值。工藝流程如圖12。圖12回答下列問題:(1)為提高菌株H對(duì)蔗糖的耐受能力和利用效率,可在液體培養(yǎng)基中將蔗糖作為,并不斷提高其濃度,經(jīng)多次傳代培養(yǎng)(指培養(yǎng)一段時(shí)間后,將部分培養(yǎng)物轉(zhuǎn)入新配的培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng))以獲得目標(biāo)菌株。培養(yǎng)過程中定期取樣并用的方法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù),評(píng)估菌株增殖狀況。此外,選育優(yōu)良菌株的方法還有等。(答出兩種方法即可)

(2)基于菌株H嗜鹽、酸堿耐受能力強(qiáng)等特性,研究人員設(shè)計(jì)了一種不需要滅菌的發(fā)酵系統(tǒng),其培養(yǎng)基鹽濃度設(shè)為60g/L,pH為10,菌株H可正常持續(xù)發(fā)酵60d以上。該系統(tǒng)不需要滅菌的原因是

。(答出兩點(diǎn)即可)

(3)研究人員在工廠進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),在適宜的營(yíng)養(yǎng)物濃度、溫度、pH條件下發(fā)酵,結(jié)果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵液中菌株H細(xì)胞增殖和PHA產(chǎn)量均未達(dá)到預(yù)期,并產(chǎn)生了少量乙醇等物質(zhì),說明發(fā)酵條件中可能是高密度培養(yǎng)的限制因素。

(4)菌株H還能通過分解餐廚垃圾(主要含蛋白質(zhì)、淀粉、油脂等)來生產(chǎn)PHA,說明其能分泌。

答案(1)唯一碳源稀釋涂布平板誘變育種、基因工程育種(2)在高鹽和較高pH的發(fā)酵液中,菌株H可以生長(zhǎng)繁殖,而大多數(shù)其他微生物因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制(3)氧氣(4)蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶解析(1)為提高菌株H對(duì)蔗糖的耐受能力和利用效率,可將蔗糖作為唯一碳源,并不斷提高其濃度,經(jīng)多次傳代培養(yǎng)以獲得目標(biāo)菌株。在培養(yǎng)過程中定期取樣進(jìn)行菌落計(jì)數(shù),評(píng)估菌株增殖狀況,可用稀釋涂布平板法。此外,還可以通過誘變育種、基因工程育種方法選育優(yōu)良菌株。(2)菌株H嗜鹽、酸堿耐受能力強(qiáng),在高鹽和較高pH環(huán)境中,菌株H可以生長(zhǎng)繁殖,但其他大多數(shù)微生物不能生長(zhǎng)繁殖,所以題述系統(tǒng)不需要滅菌。(3)根據(jù)菌株H發(fā)酵系統(tǒng)是開放式的系統(tǒng)及圖示信息中有空氣、攪拌器,可推知發(fā)酵需要氧氣,再依據(jù)發(fā)酵液中菌株H細(xì)胞增殖和PHA產(chǎn)量均未達(dá)到預(yù)期并有少量乙醇產(chǎn)生,可知氧氣可能是高密度培養(yǎng)的限制因素。(4)菌株H可以分解餐廚垃圾,而餐廚垃圾主要含蛋白質(zhì)、淀粉、油脂,由此可推知菌株H可分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶。11.(2021河北,23,15分)葡萄酒生產(chǎn)過程中會(huì)產(chǎn)生大量的釀酒殘?jiān)?皮渣)。目前這些皮渣主要用作飼料或肥料,同時(shí)研究者也采取多種措施拓展其利用價(jià)值。回答下列問題:(1)皮渣中含有較多的天然食用色素花色苷,可用萃取法提取。萃取前將原料干燥、粉碎的目的分別是,萃取效率主要取決于萃取劑的。萃取過程需要在適宜溫度下進(jìn)行,溫度過高會(huì)導(dǎo)致花色苷。研究發(fā)現(xiàn),萃取時(shí)輔以纖維素酶、果膠酶處理可提高花色苷的提取率,原因是。

(2)為了解皮渣中微生物的數(shù)量,取10g皮渣加入90mL無菌水,混勻、靜置后取上清液,用稀釋涂布平板法將0.1mL稀釋液接種于培養(yǎng)基上。104倍稀釋對(duì)應(yīng)的三個(gè)平板中菌落數(shù)量分別為78、91和95,則每克皮渣中微生物數(shù)量為個(gè)。

(3)皮渣堆積會(huì)積累醋酸菌,可從中篩選優(yōu)良菌株。制備醋酸菌初篩平板時(shí),需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至性,滅菌后須在未凝固的培養(yǎng)基中加入無菌碳酸鈣粉末、充分混勻后倒平板,加入碳酸鈣的目的是。培養(yǎng)篩選得到的醋酸菌時(shí),在缺少糖源的液體培養(yǎng)基中可加入乙醇作為。

(4)皮渣堆積過程中也會(huì)積累某些兼性厭氧型乳酸菌。初篩醋酸菌時(shí),乳酸菌有可能混入其中,且兩者菌落形態(tài)相似。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)簡(jiǎn)單實(shí)驗(yàn),區(qū)分篩選平板上的醋酸菌和乳酸菌。(簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)步驟和預(yù)期結(jié)果)答案(1)去除水分、減小原料顆粒性質(zhì)和使用量分解兩種酶可以水解植物細(xì)胞細(xì)胞壁,加速植物細(xì)胞破碎,使花色苷充分釋放(2)8.8×107(3)中性或微堿醋酸菌產(chǎn)生的醋酸分解碳酸鈣可在培養(yǎng)基上形成透明圈,形成的透明圈的大小可作為篩選優(yōu)良菌株的依據(jù)碳源(合成醋酸的原料)(4)挑取單菌落,分別將其接種于盛有液體培養(yǎng)基的試管中,并添加石蠟油隔絕空氣,在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),一段時(shí)間后檢測(cè)菌種是否增殖,能進(jìn)行增殖的菌即為乳酸菌,不能增殖的菌為醋酸菌。解析(1)萃取的效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量,同時(shí)還受到原料顆粒的大小、緊密程度、含水量等條件的影響。萃取前原料應(yīng)充分干燥,去除水分,以降低水分對(duì)萃取效率的影響,同時(shí)對(duì)材料進(jìn)行粉碎,使原料顆粒變小,便于原料與萃取劑充分接觸,提高萃取效率。溫度變化能顯著影響花色苷的熱降解速率,溫度越高會(huì)導(dǎo)致花色苷的熱降解越快,分解越多。纖維素酶和果膠酶可水解植物細(xì)胞的細(xì)胞壁,失去細(xì)胞壁的保護(hù),原生質(zhì)體易破碎,便于釋放內(nèi)部的花色苷,提高花色苷的提取率。(2)10g皮渣加入90mL無菌水后,制成100mL溶液,取其混勻、靜置后的上清液進(jìn)行稀釋,從104倍稀釋液中各取0.1mL涂布到三個(gè)平板中,得到的菌落數(shù)分別為78、91和95,則平均每個(gè)平板上有88個(gè)菌落,即每毫升上清液中含有的微生物數(shù)量為88÷0.1×104=8.8×106;而10g皮渣制成了100mL溶液,則1g皮渣相當(dāng)于10mL溶液,則1g皮渣含有的微生物數(shù)量為8.8×107。(3)培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將培養(yǎng)基調(diào)至中性或微堿性。由于添加碳酸鈣的培養(yǎng)基是白色不透明的,醋酸菌合成并釋放的醋酸會(huì)分解培養(yǎng)基中的碳酸鈣而形成透明圈,故可通過菌落周圍透明圈的大小來篩選優(yōu)良菌株。在氧氣充足的條件下,若糖源不足時(shí),醋酸菌可將乙醇變?yōu)橐胰?再將乙醛變?yōu)榇姿帷?4)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的目的是區(qū)分兼性厭氧型的乳酸菌和好氧型的醋酸菌,二者的本質(zhì)區(qū)別在于在無氧條件下是否能生存繁殖,故可在無氧環(huán)境中培養(yǎng)待檢菌種,可以增殖的菌種為乳酸菌,否則為醋酸菌。12.(2021湖南,21,15分)大熊貓是我國(guó)特有的珍稀野生動(dòng)物,每只成年大熊貓每日進(jìn)食竹子量可達(dá)12~38kg。大熊貓可利用竹子中8%的纖維素和27%的半纖維素。研究人員從大熊貓糞便和土壤中篩選纖維素分解菌?；卮鹣铝袉栴}:(1)纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即。為篩選纖維素分解菌,將大熊貓新鮮糞便樣品稀釋液接種至以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),該培養(yǎng)基從功能上分類屬于培養(yǎng)基。

(2)配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理,目的是。檢測(cè)固體培養(yǎng)基滅菌效果的常用方法是。

(3)簡(jiǎn)要寫出測(cè)定大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌活菌數(shù)的實(shí)驗(yàn)思路

。

(4)為高效降解農(nóng)業(yè)秸稈廢棄物,研究人員利用從土壤中篩選獲得的3株纖維素分解菌,在37℃條件下進(jìn)行玉米秸稈降解實(shí)驗(yàn),結(jié)果如表所示。在該條件下纖維素酶活力最高的是菌株,理由是。

菌株秸稈總重(g)秸稈殘重(g)秸稈失重(%)纖維素降解率(%)A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.32答案(1)C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶纖維素選擇(2)防止雜菌污染將未接種的培養(yǎng)基放在適宜條件下培養(yǎng),觀察平板上有無菌落形成(3)將0.1mL稀釋度足夠高的大熊貓新鮮糞便樣品稀釋液涂布到若干個(gè)固體培養(yǎng)基表面,放在適宜條件下培養(yǎng),統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)在30~300的各平板菌落數(shù)并取平均值,可根據(jù)公式推測(cè)大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌活菌數(shù)(4)C菌株C組秸稈殘重最低,秸稈失重率最大,纖維素降解率最高解析(1)纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為其至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三種組分。常使用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基篩選獲得纖維素分解菌。(2)為防止雜菌污染,配制的培養(yǎng)基需要用高壓蒸汽滅菌法滅菌。常用空白對(duì)照平板檢測(cè)滅菌是否合格,即將未接種的培養(yǎng)基放在適宜條件下培養(yǎng),觀察平板上有無菌落形成。(3)常用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)活菌的數(shù)量,即將0.1mL稀釋度足夠高的大熊貓新鮮糞便樣品稀釋液涂布到若干個(gè)固體培養(yǎng)基表面,放在適宜條件下培養(yǎng),統(tǒng)計(jì)各平板菌落數(shù)并取平均值,再將其代入公式,即可估算出每克大熊貓樣品中纖維素分解菌的活菌數(shù)。(4)相同質(zhì)量的秸稈分別接種A、B、C三種菌株后,菌株C組秸稈殘重最低,秸稈失重率最大,纖維素降解率最高,所以在37℃條件下,菌株C的纖維素酶活力最高。13.(2020課標(biāo)全國(guó)Ⅰ,37,15分)某種物質(zhì)S(一種含有C、H、N的有機(jī)物)難以降解,會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染,只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照如圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基,甲的組分為無機(jī)鹽、水和S,乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y?；卮鹣铝袉栴}:(1)實(shí)驗(yàn)時(shí),盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用的方法進(jìn)行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是。甲、乙培養(yǎng)基均屬于培養(yǎng)基。

(2)實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL,若要在每個(gè)平板上涂布100μL稀釋后的菌液,且保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過200個(gè),則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋倍。

(3)在步驟⑤的篩選過程中,發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時(shí),某菌株對(duì)S的降解量反而下降,其原因可能是(答出1點(diǎn)即可)。

(4)若要測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù),請(qǐng)寫出主要實(shí)驗(yàn)步驟:

。

(5)上述實(shí)驗(yàn)中,甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同,但都能為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供4類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),即。

答案(1)高壓蒸汽滅菌瓊脂選擇(2)104(3)S的濃度超過某一值時(shí)會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng)(4)取淤泥加入無菌水中,涂布(或稀釋涂布)到乙培養(yǎng)基上,培養(yǎng)后計(jì)數(shù)(5)水、碳源、氮源和無機(jī)鹽解析(1)實(shí)驗(yàn)時(shí),盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。題圖中搖瓶M內(nèi)裝有液體培養(yǎng)基甲,培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基乙為固體培養(yǎng)基,相比甲需添加凝固劑Y瓊脂。依據(jù)題干信息,甲、乙培養(yǎng)基均為以S(一種含有C、H、N的有機(jī)物)為唯一氮源和碳源的培養(yǎng)基,可抑制或阻止其他微生物繁殖,僅使能夠降解和利用S的菌株生長(zhǎng)和繁殖,故屬于選擇培養(yǎng)基。(2)若使平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過200個(gè),則接種液中的菌體濃度至多為200個(gè)/0.1mL=2×103個(gè)/mL,已知搖瓶M中的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL,則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋104倍。(3)S作為一種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),在培養(yǎng)基中濃度過高,可導(dǎo)致培養(yǎng)液滲透壓升高,細(xì)菌細(xì)胞滲透失水,使其代謝速率下降;另一方面S作為污染物,其濃度過高可能抑制菌體生長(zhǎng)、代謝和繁殖。(4)若要測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù),需進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)步驟如下:稱取一定質(zhì)量(10g)的淤泥溶于一定體積的(90mL)無菌水中,制備土壤浸出液,經(jīng)梯度稀釋(對(duì)于細(xì)菌,一般選用104、105、106倍的稀釋液)后,采用稀釋涂布平板法接種于以S為唯一碳源和氮源的固體培養(yǎng)基(即乙培養(yǎng)基)中,每個(gè)稀釋倍數(shù)下設(shè)置三組重復(fù)實(shí)驗(yàn);在適宜條件下培養(yǎng),待長(zhǎng)出菌落且菌落數(shù)目達(dá)到穩(wěn)定后,選取菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),統(tǒng)計(jì)并計(jì)算平均值。(5)在甲、乙兩種培養(yǎng)基中,S既作為碳源,又作為氮源,同時(shí)培養(yǎng)基中還含有水、無機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。14.(2020江蘇單科,31,9分)產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株,科研人員開展了相關(guān)研究。請(qǐng)回答下列問題:(1)常規(guī)微生物實(shí)驗(yàn)中,下列物品及其滅菌方法錯(cuò)誤的是(填編號(hào))。

編號(hào)①②③④物品培養(yǎng)基接種環(huán)培養(yǎng)皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧(2)稱取1.0g某土壤樣品,轉(zhuǎn)入99mL無菌水中,制備成菌懸液,經(jīng)后,獲得細(xì)胞密度不同的菌懸液。分別取0.1mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上,其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長(zhǎng)出了46個(gè)酵母菌落,則該樣本中每克土壤約含酵母菌個(gè)。

(3)為了進(jìn)一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力,對(duì)分離所得的菌株,采用射線輻照進(jìn)行育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時(shí)間后,按照菌落直徑大小進(jìn)行初篩,選擇直徑的菌落,純化后獲得A、B兩突變菌株。

(4)在處理含油廢水的同時(shí),可獲得單細(xì)胞蛋白,實(shí)現(xiàn)污染物資源化。為評(píng)價(jià)A、B兩菌株的相關(guān)性能,進(jìn)行了培養(yǎng)研究,結(jié)果如圖。據(jù)圖分析,應(yīng)選擇菌株進(jìn)行后續(xù)相關(guān)研究,理由是。

答案(1)④(2)梯度稀釋4.6×105(或460000)(3)誘變脂肪(或油脂)較大(4)B該菌株增殖速度快,單細(xì)胞蛋白產(chǎn)量高;降解脂肪能力強(qiáng),凈化效果好解析(1)涂布器應(yīng)該用酒精引燃滅菌。(2)將制備的菌懸液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌懸液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌懸液里,聚集在一起的酵母菌將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。根據(jù)每克樣品中的菌株數(shù)=(C÷V)×M可知,該樣本中每克土壤約含酵母菌數(shù)量為46÷0.1×103=4.6×105。(3)射線輻照可導(dǎo)致菌株發(fā)生基因突變,屬于誘變育種。因要篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株,故培養(yǎng)基要以脂肪(或油脂)為唯一碳源。培養(yǎng)基上形成的菌落直徑越大,說明產(chǎn)脂肪酶越多,酵母菌產(chǎn)酶能力越強(qiáng)。(4)由圖可知,菌株B增殖速度快,單細(xì)胞蛋白產(chǎn)量高;降解脂肪能力強(qiáng),凈化效果好,所以應(yīng)選擇菌株B。15.(2019課標(biāo)全國(guó)Ⅱ,37,15分)物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物,會(huì)污染土壤。W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時(shí)培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌(目標(biāo)菌)?；卮鹣铝袉栴}。(1)要從土壤中分離目標(biāo)菌,所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是。

(2)在從土壤中分離目標(biāo)菌的過程中,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長(zhǎng)并形成菌落(如圖所示)。如果要得到目標(biāo)菌,應(yīng)該選擇菌落進(jìn)一步純化,選擇的依據(jù)是。

(3)土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈础Ｈ粢O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?請(qǐng)簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論,即。

(4)該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶(酶E)。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異,該小組擬進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn),請(qǐng)完善相關(guān)內(nèi)容。①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上,A處滴加含有酶E的緩沖液,B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液,C處滴加,三處滴加量相同。

②一段時(shí)間后,測(cè)量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈,說明;若A、B處形成的透明圈直徑大小相近,說明。

答案(1)W(2)乙乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈,說明乙菌能降解W(3)將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上,若細(xì)菌能生長(zhǎng),則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?4)①緩沖液②緩沖液不能降解W酶E與天然酶降解W的能力相近解析(1)要從土壤中分離能降解W的細(xì)菌,培養(yǎng)基中應(yīng)以W為唯一氮源。(2)乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈,說明乙菌能降解W。(3)要判斷甲、乙能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?應(yīng)將甲、乙菌分別接種在無氮源的培養(yǎng)基上,觀察細(xì)菌能否生長(zhǎng),若細(xì)菌能生長(zhǎng),則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?否則不能。(4)①實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循單一變量原則,C處應(yīng)滴加等量不含酶的緩沖液。②C處只滴加等量緩沖液,若C處沒有出現(xiàn)透明圈,說明緩沖液不能降解W,若A、B處形成的透明圈直徑大小相近,說明酶E與天然酶降解W的能力相近。16.(2018課標(biāo)全國(guó)Ⅰ,37,15分)將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時(shí)間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基。回答下列問題:(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選,則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制的生長(zhǎng),加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。

(2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長(zhǎng)提供了多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有(答出兩點(diǎn)即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后,可參與合成的生物大分子有(答出兩點(diǎn)即可)。

(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養(yǎng),平板上長(zhǎng)出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是,該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是

。

(4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果:甲同學(xué)涂布了3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133;乙同學(xué)涂布了3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中,乙同學(xué)的結(jié)果可信度低,其原因是

。

答案(1)細(xì)菌選擇(2)碳源、無機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍(lán)色,產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解,形成透明圈(4)乙同學(xué)的結(jié)果中,1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊,結(jié)果的重復(fù)性差解析(1)鏈霉素可抑制細(xì)菌生長(zhǎng),從功能上看,添加鏈霉素的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)微生物正常生長(zhǎng)需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有無機(jī)鹽、氮源、碳源等。氮源進(jìn)入細(xì)胞后,可以用于合成含氮大分子物質(zhì),如核酸、蛋白質(zhì)等。(3)淀粉遇碘液顯藍(lán)色,若淀粉被水解,則產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍的淀粉被水解,形成以菌落為中心的透明圈。(4)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí),為保證統(tǒng)計(jì)結(jié)果的準(zhǔn)確性,一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),取結(jié)果差別不大組別的平均值,進(jìn)而得出計(jì)數(shù)結(jié)果。而乙同學(xué)的結(jié)果中,1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊,即乙同學(xué)的結(jié)果可信度低。知識(shí)歸納微生物的計(jì)數(shù)方法(1)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法:利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。缺點(diǎn):因不能區(qū)分死菌與活菌而使計(jì)數(shù)結(jié)果偏大。(2)活菌計(jì)數(shù)法:利用稀釋涂布平板法接種,通過統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目計(jì)算樣品中的活菌數(shù)。缺點(diǎn):當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,因此統(tǒng)計(jì)結(jié)果偏小。17.(2018江蘇單科,31,8分)酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半,可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進(jìn)行培養(yǎng),這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母,并進(jìn)行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程,請(qǐng)回答下列問題:(1)配制培養(yǎng)基時(shí),按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各組分,將其溶解、定容后,調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的,及時(shí)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行分裝,并進(jìn)行滅菌。

(2)取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無菌培養(yǎng)皿中,在步驟③中將溫度約(在25℃、50℃或80℃中選擇)的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻,冷凝后倒置培養(yǎng)。

(3)挑取分離平板中長(zhǎng)出的單菌落,按步驟④所示進(jìn)行劃線。下列敘述合理的有。

a.為保證無菌操作,接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b.劃線時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落時(shí),應(yīng)挑取多個(gè)菌落,分別測(cè)定酵母細(xì)胞中甲醇的含量d.可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度,獲得甲醇高耐受株(4)步驟⑤中,為使酵母數(shù)量迅速增加,培養(yǎng)過程中需保證充足的營(yíng)養(yǎng)和供應(yīng)。為監(jiān)測(cè)酵母的活細(xì)胞密度,將發(fā)酵液稀釋1000倍后,經(jīng)等體積臺(tái)盼藍(lán)染液染色,用25×16型血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)5個(gè)中格中的細(xì)胞數(shù),理論上色細(xì)胞的個(gè)數(shù)應(yīng)不少于,才能達(dá)到每毫升3×109個(gè)活細(xì)胞的預(yù)期密度。

答案(8分)(1)pH高壓蒸汽(濕熱)(2)50℃(3)a、b、d(4)氧氣無30解析本題主要考查微生物的培養(yǎng)與計(jì)數(shù)的相關(guān)知識(shí)。(1)培養(yǎng)基在定容后、分裝前需要調(diào)節(jié)pH;分裝后還需要進(jìn)行高壓蒸汽(濕熱)滅菌。(2)倒平板時(shí)溫度不宜過高,以防燙傷;同時(shí)溫度也不能太低,以防培養(yǎng)基凝固而無法形成平板,因此倒平板時(shí)溫度應(yīng)選擇50℃左右。(3)平板劃線時(shí),需保證無菌操作,以防混入雜菌而影響分離結(jié)果。因此操作過程中所用的接種針、接種環(huán)在使用之前都必須滅菌;劃線時(shí)不能劃破培養(yǎng)基表面,以免影響菌落的正常形態(tài)進(jìn)而影響后期觀察;挑取菌落時(shí),應(yīng)挑取單個(gè)菌落;通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度,可獲得利用甲醇能力強(qiáng)的菌株,即甲醇高耐受株。(4)⑤為擴(kuò)大培養(yǎng)過程,欲使酵母數(shù)量迅速增加,應(yīng)為酵母菌提供充足的營(yíng)養(yǎng)和O2。臺(tái)盼藍(lán)染液能將死的酵母菌染成藍(lán)色,而活的酵母菌不能被染色。假設(shè)5個(gè)中方格中有x個(gè)活酵母菌,由題意可知:[(x×5)÷10-4]×1000×2=3×109,由此解得x=30。方法技巧酵母菌計(jì)數(shù)的常用方法——血細(xì)胞計(jì)數(shù)板(1)以25格×16格的計(jì)數(shù)板為例,計(jì)數(shù)時(shí)除了4個(gè)角上的中方格外,還要加上中央的一個(gè)中方格,共計(jì)數(shù)5個(gè)中方格(共80個(gè)小方格)內(nèi)的酵母菌。(2)計(jì)數(shù)公式:1mL懸液中的酵母菌數(shù)量=(80個(gè)小方格內(nèi)酵母菌數(shù)量/80)×400×104×稀釋倍數(shù)。18.(2017課標(biāo)全國(guó)Ⅰ,37,15分)某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}:(1)有些細(xì)菌能分解尿素,有些細(xì)菌則不能,原因是前者能產(chǎn)生。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源,原因是。但可用葡萄糖作為碳源,進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是(答出兩點(diǎn)即可)。

(2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌,在配制培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)選擇(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作為氮源,不選擇其他兩組的原因是。

(3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有(答出兩點(diǎn)即可)。

答案(1)脲酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物,不能利用CO2來合成有機(jī)物為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量,為其他有機(jī)物的合成提供原料(2)尿素其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用(3)為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無機(jī)營(yíng)養(yǎng),作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過程中pH穩(wěn)定解析本題借助分解尿素的細(xì)菌的分離實(shí)驗(yàn),通過實(shí)例分析的形式考查科學(xué)探究素養(yǎng)中的方案實(shí)施要素。(1)尿素不能直接被植物吸收,但土壤中某些細(xì)菌可以產(chǎn)生脲酶并將尿素分解成氨和CO2,進(jìn)而被植物吸收。土壤中能分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)型細(xì)菌,它們不能直接利用CO2合成有機(jī)物,只能以現(xiàn)成的葡萄糖等有機(jī)物為碳源。構(gòu)成微生物培養(yǎng)基的成分主要是水、無機(jī)鹽、碳源和氮源,葡萄糖在微生物培養(yǎng)基中既可作為碳源,也可作為能源。(2)不同微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求不同,在培養(yǎng)基中加入特定的某種化學(xué)物質(zhì)以抑制其他微生物的生長(zhǎng)或促進(jìn)所需微生物的生長(zhǎng),這樣的培養(yǎng)基就可以起選擇作用。為獲得分解尿素的細(xì)菌,可以把尿素作為唯一氮源。(3)微生物培養(yǎng)基中應(yīng)包括水、無機(jī)鹽、碳源和氮源等,另外,不同的微生物對(duì)pH的要求不同。培養(yǎng)基中的KH2PO4和Na2HPO4既可為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無機(jī)營(yíng)養(yǎng),又可保持培養(yǎng)基的特定pH。19.(2017江蘇單科,31,7分)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中,對(duì)環(huán)境有嚴(yán)重危害。小明同學(xué)準(zhǔn)備依據(jù)下圖操作步驟,從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請(qǐng)回答下列問題:(1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳源的有。

(2)將采集到的樣品接種培養(yǎng),苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸,以達(dá)到富集酚降解菌的目的。若如圖平板中菌落過于密集,應(yīng)進(jìn)一步,以便于菌落計(jì)數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時(shí)除了需要水、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,還必須添加。

(3)如圖為連續(xù)劃線法示意圖,在圖中(填圖中序號(hào))區(qū)域更易獲得單菌落。

(4)采用比色測(cè)定法(使用苯酚顯色劑)檢測(cè)降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進(jìn)行顯色反應(yīng),下表中1~5號(hào)比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為。

管號(hào)123456苯酚濃度(mg/L)1如果廢水為50mg/L苯酚溶液,降解后約有21%的苯酚殘留,則需將殘留液稀釋(填序號(hào):①5②10③20)倍后,再進(jìn)行比色。

答案(7分)(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀釋涂布凝固劑(3)③(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8③解析本題考查微生物分離的相關(guān)知識(shí)。(1)酚降解菌培養(yǎng)基中的蛋白胨和苯酚為酚降解菌生長(zhǎng)提供碳源。(2)轉(zhuǎn)接的目的之一是富集降解苯酚能力強(qiáng)的酚降解菌,隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增多,培養(yǎng)基中的苯酚含量應(yīng)逐漸增加。若平板中菌落過于密集,則需進(jìn)一步稀釋,降低菌體密度后再涂布培養(yǎng),以便于菌落分離與計(jì)數(shù)。制備平板培養(yǎng)基時(shí),需添加瓊脂等凝固劑。(3)連續(xù)劃線時(shí),在劃線的末端菌體密度最低,即在劃線的末端最易獲得單菌落。(4)1號(hào)比色管應(yīng)為空白對(duì)照組,由6號(hào)比色管中苯酚濃度知,1~5號(hào)比色管苯酚濃度應(yīng)為0mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L。廢水為50mg/L苯酚溶液,降解后殘留的苯酚濃度約為50×21%=10.5(mg/L),則需對(duì)殘留液進(jìn)行20倍稀釋后[10.5÷20=0.525(mg/L)],才可以進(jìn)行比色。20.(2016課標(biāo)全國(guó)Ⅰ,39,15分)空氣中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物,以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下:①配制培養(yǎng)基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);②制作無菌平板;③設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組,進(jìn)行相關(guān)操作;④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間,統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)?；卮鹣铝袉栴}:(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于。若要完成步驟②,該培養(yǎng)基中的成分X通常是。

(2)步驟③中,實(shí)驗(yàn)組的操作是。

(3)若在某次調(diào)查中,某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板,而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落,這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了現(xiàn)象。若將30(即36-6)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值,該做法(填“正確”或“不正確”)。

答案(1)牛肉膏、蛋白胨瓊脂(2)將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上,開蓋暴露一段時(shí)間(3)污染不正確解析(1)培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨可為培養(yǎng)基中的微生物提供氮源;制備固體培養(yǎng)基需加入瓊脂。(2)該實(shí)驗(yàn)的目的是了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況,所以需在教室不同高度的位置分別用平板收集微生物即開蓋暴露一段時(shí)間。(3)該實(shí)驗(yàn)中空白對(duì)照組不應(yīng)出現(xiàn)菌落,若空白對(duì)照組出現(xiàn)了菌落,則說明此次調(diào)查中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象,實(shí)驗(yàn)組的污染情況不能確定,故不能用實(shí)驗(yàn)組與空白對(duì)照組菌落數(shù)的差值作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果,而應(yīng)重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。21.(2016課標(biāo)全國(guó)Ⅲ,39,15分)某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明,乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉栴}:(1)分離純化乳酸菌時(shí),首先需要用對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋,進(jìn)行梯度稀釋的理由是

。

(2)推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有和。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出的菌落作為候選菌。

(3)乳酸菌在-20℃長(zhǎng)期保存時(shí),菌液中常需要加入一定量的(填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”)。

答案(1)無菌水(2分)泡菜濾液中菌的濃度高,直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落(3分)(2)鑒別乳酸菌中和產(chǎn)生的乳酸(或酸)(每空3分,共6分)具有透明圈(2分)(3)甘油(2分)解析(1)分離純化乳酸菌時(shí),由于泡菜濾液中菌的濃度高,因此需要用無菌水對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋,其目的是將聚集在一起的乳酸菌分散成單個(gè)細(xì)胞,以便在培養(yǎng)基表面形成單菌落。(2)乳酸菌代謝過程中可產(chǎn)生乳酸,若在培養(yǎng)基中加入碳酸鈣,則碳酸鈣既可以中和乳酸,又可以在乳酸菌菌落的周圍出現(xiàn)明顯透明圈,據(jù)此可以用于乳酸菌的鑒別。(3)乳酸菌在-20℃長(zhǎng)期保存時(shí),為了避免水結(jié)冰產(chǎn)生冰晶損傷細(xì)胞,在菌液中常需要加入一定量的甘油。22.(2015課標(biāo)全國(guó)Ⅰ,39,15分)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂,微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)。回答有關(guān)問題:(1)顯微觀察時(shí),微生物A菌體中的油脂通?？捎萌旧Ｎ⑸顰產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā),可選用(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。

(2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落,可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣,并應(yīng)選用以