2023-2024學(xué)年江蘇省南京市秦淮區(qū)高二下學(xué)期期中考試生物試題（解析版）

高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE2江蘇省南京市秦淮區(qū)2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期期中考試試題注意事項考生在答題前請認真閱讀本注意事項及各題答題要求：1．本試卷包含單項選擇題、多項選擇題、非選擇題共三部分?？忌痤}全部答在答卷紙上，答在本試卷上無效。本次考試時間為75分鐘?？荚嚱Y(jié)束后，請將答卷紙交回。2．答題前，請務(wù)必將自己的學(xué)校、姓名、班級、考號用書寫黑色字跡的0.5毫米簽字筆填寫在答卷紙的密封線內(nèi)。3．答選擇題必須用2B鉛筆將答題紙上對應(yīng)題目的〖答案〗標(biāo)號涂黑。如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其它〖答案〗。一、單項選擇題：共14題，每題2分，共計28分。每題只有一個選項最符合題意。1.陳醋以黃米、高粱為主要原料，經(jīng)蒸煮、拌大曲、酒精發(fā)酵、醋酸發(fā)酵、熏醅、淋醋、陳釀等工藝流程制作而成。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.從制酒到制醋的發(fā)酵過程，應(yīng)適當(dāng)降低溫度B.在酒精發(fā)酵階段需要多次補充氧氣利于酵母菌的繁殖C.接種醋酸菌后的發(fā)酵需要不斷攪拌，主要目的是抑制雜菌D.糖源不足且氧氣充足時，醋酸菌可利用酒精進行發(fā)酵〖答案〗D〖祥解〗酒精發(fā)酵起主要作用的是酵母菌，通常前期通氣使酵母菌進行有氧呼吸，以便大量繁殖，后期密封使酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精，醋酸發(fā)酵起主要作用的菌種是醋酸菌，在有氧的條件下發(fā)酵形成醋酸。【詳析】A、酒精發(fā)酵溫度為18-30℃，醋酸發(fā)酵溫度為30-35℃，A錯誤；B、酒精發(fā)酵起主要作用的是酵母菌，通常前期通氣使酵母菌進行有氧呼吸，以便大量繁殖，后期密封使酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精，所以不需要多次補充氧氣，B錯誤；C、接種醋酸菌后發(fā)酵需要不斷攪拌，主要目的是增加醋酸菌與反應(yīng)物的接觸面積，C錯誤；D、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，當(dāng)缺少糖源時，但氧氣要充足，此時醋酸菌可將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿幔珼正確。故選D。2.篩選高產(chǎn)纖維素酶菌株的流程如圖所示。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.I和Ⅲ均通過稀釋涂布平板法接種B.②號培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源C.④號為選擇培養(yǎng)基，其中加入剛果紅染料D.篩選菌種時只需要測量透明圈直徑〖答案〗D〖祥解〗1、選擇培養(yǎng)基在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基；2、篩選產(chǎn)纖維素酶的菌株應(yīng)以纖維素為唯一碳源，可以保證平板上長出的菌株均能分解利用纖維素；3、微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、分析題圖可知，I和Ⅲ均屬于接種，稀釋涂布平板法是將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落；題圖可知，I和Ⅲ均為稀釋涂布平板法接種，A正確；B、以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，B正確；C、鑒別培養(yǎng)使用固體培養(yǎng)基，其中可加入剛果紅，剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物，而纖維素分解產(chǎn)生的單糖和二糖不會與剛果紅發(fā)生上述反應(yīng)，從而使纖維素分解菌菌落周圍出現(xiàn)透明圈，C正確；D、篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，應(yīng)選擇剛果紅培養(yǎng)基上透明圈直徑與菌落直徑比值最大的菌落，D錯誤。故選D3.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)過程的敘述，正確的是（）A.在酒精燈火焰附近將冷卻至室溫的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿B.篩選可分解尿素的菌種時，培養(yǎng)基中還需加入適量的碳源C.獲得次生代謝物時，要用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物D.配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶后，可采用干熱滅菌法滅菌〖答案〗B〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、在酒精燈火焰附近將冷卻至50℃左右的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，A正確；B、篩選可分解尿素的菌種時，尿素可作為唯一氮源，還需要添加碳源，B正確；C、獲得次生代謝物時，要用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物，C錯誤；D、配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶后，采用高壓蒸汽滅菌，D錯誤。故選B。4.如圖是“番茄—馬鈴薯”雜種植株的培育過程，其中①～⑤表示過程，字母表示細胞、組織或植株。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.過程①表示在低滲溶液中用酶解法處理植物細胞獲得原生質(zhì)體B.過程②誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合依據(jù)的原理是細胞膜具有選擇透過性C.④過程通常需要避光培養(yǎng)，e的培養(yǎng)需要為其提供有機碳源D.該育種方法的突出優(yōu)點是極大地縮短了育種年限〖答案〗C〖祥解〗分析題圖：圖示為植物體細胞雜交過程示意圖，其中①表示去壁獲取原生質(zhì)體的過程；②表示人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；③表示再生出新細胞壁的過程；④表示脫分化過程；⑤表示再分化過程?！驹斘觥緼、獲得植物的原生質(zhì)體，操作一般在等滲溶液中進行，若在低滲溶液中進行，則去掉細胞壁的原生質(zhì)體會因吸水而漲破，A錯誤；B、過程②誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，主要依據(jù)細胞膜具有流動性的原理，B錯誤；C、④為植物組織培養(yǎng)的脫分化過程，脫分化是植物組織培養(yǎng)的起始階段，通常在避光條件下進行。e為愈傷組織，培養(yǎng)愈傷組織利用的營養(yǎng)成分是水、礦質(zhì)營養(yǎng)、有機小分子和激素，C正確；D、番茄和馬鈴薯在自然狀態(tài)下具有生殖隔離，不能通過有性生殖進行雜交，而通過植物體細胞雜交就可以培育雜種植株，體現(xiàn)植物體細胞雜交能打破物種生殖隔離，克服遠緣雜交不親和的障礙，D錯誤。故選C。5.科研人員嘗試利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)從紅豆杉的愈傷組織中提取紫杉醇，流程圖如下。下列相關(guān)敘述錯誤的是

（）

A.紫杉醇不是紅豆杉生長發(fā)育所必需的物質(zhì)B.細胞懸浮培養(yǎng)與繼代是為了快速獲得更多的薄壁細胞C.該途徑依據(jù)的原理是植物細胞具有全能性D.①過程需控制好培養(yǎng)基中植物激素的比例〖答案〗C〖祥解〗1、植物組織培養(yǎng)的過程：離體的植物組織。器官或細胞(外植體)脫分化形成愈傷組織愈傷組織再分化形成胚狀體，進一步發(fā)育植株(新植體)。2、植物組織培養(yǎng)技術(shù)具有廣泛的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑(快繁技術(shù)、作物脫毒、人工種子)、作物新品種的培育(單倍體育種、突變體的利用)、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、紫杉醇是紅豆杉細胞代謝產(chǎn)生的，屬于次生代謝產(chǎn)物，不是紅豆杉生長發(fā)育所必需的物質(zhì)，A正確；B、愈傷組織經(jīng)過懸浮培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)，可獲得大量細胞，B正確；C、全能性是指已經(jīng)分裂分化的細胞還能發(fā)育成完整個體或者其他各種細胞的潛能，所以圖示無法體現(xiàn)植物細胞具有全能性，C錯誤；D、①過程為脫分化過程，需控制好培養(yǎng)基中植物激素的比例，D正確。故選C。6.甲胎蛋白（AFP）是原發(fā)性肝癌的腫瘤標(biāo)記物，在腫瘤患者體內(nèi)的含量遠大于正常人?？蒲腥藛T制備出了抗AFP單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.可用滅活的仙臺病毒促進B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合B.向小鼠體內(nèi)注射AFP抗原，目的是獲得更多的特異性抗體C.雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)時，會表現(xiàn)出貼壁生長和接觸抑制現(xiàn)象D.患者肝部細胞癌變后，AFP和細胞膜上的糖蛋白數(shù)量均增多〖答案〗A〖祥解〗1、免疫的B細胞能夠分泌抗體，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤細胞具有無限增殖的能力，因此利用動物細胞融合技術(shù)將免疫的B（漿）細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞，利用該細胞制備單克隆抗體。2、該雜交瘤細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體，并且單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高、可大量制備等特點?！驹斘觥緼、B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合過程，可選用滅活的仙臺病毒，A正確；B、AFP多次注射小鼠的目的是使其體內(nèi)產(chǎn)生所需B淋巴細胞數(shù)量增加，B錯誤；C、雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)時，不會表現(xiàn)出貼壁生長和接觸抑制現(xiàn)象，C錯誤；D、患者肝部細胞癌變后，AFP增加，細胞膜上的糖蛋白數(shù)量減少，D錯誤。故選A。7.科研人員利用種間體細胞核移植技術(shù)培育小郊狼的流程如下圖。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.圖中①是雄原核，②是透明帶B.③可以發(fā)育到原腸胚，對其內(nèi)胚層進行切割移植C.去核的實質(zhì)是去除紡錘體-染色體復(fù)合物D.代孕家犬對移植的胚胎無免疫排斥，因此移植后無需檢查〖答案〗C〖祥解〗動物細胞核移植技術(shù)指的是將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體；用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物，原理是動物細胞核的全能性；動物細胞核移植可分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植。【詳析】A、圖中①是第一極體，②是透明帶，A錯誤；B、③可以發(fā)育到桑葚胚或囊胚，對其進行切割移植，B錯誤；C、減數(shù)分裂Ⅱ中期（MⅡ期）卵母細胞中的“核”其實是紡錘體-染色體復(fù)合物，圖中“卵母細胞去核”中的“去核”指的是去除紡錘體-染色體復(fù)合物，C正確；D、代孕家犬對移植的胚胎無免疫排斥，移植后仍需進行妊娠檢查，D錯誤。故選C。8.如圖為豬輸卵管上皮細胞培養(yǎng)過程示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.甲→乙和丙→丁過程需要用胃蛋白酶處理B.丙為原代培養(yǎng)，丁為傳代培養(yǎng)，都需要在添加血清的合成培養(yǎng)基中進行C.為保證無菌的環(huán)境，需要定期更換培養(yǎng)液，清除代謝物D.為避免培養(yǎng)過程中的雜菌污染，丙、丁過程中培養(yǎng)瓶蓋必須始終旋緊〖答案〗B〖祥解〗動物細胞培養(yǎng)過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)?！驹斘觥緼、由于動物細胞間存在粘連蛋白，故甲→乙和丙→丁過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，分散成單個細胞，該過程中不能用胃蛋白酶處理，A錯誤；B、由圖可知，丙為原代培養(yǎng)，丁為分瓶之后的傳代培養(yǎng)，因為對動物細胞培養(yǎng)所需要的營養(yǎng)尚不明確，二者都需在添加血清的合成培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，B正確；C、為保證無菌環(huán)境，需要對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理以及在無菌環(huán)境下進行操作，C錯誤；D、為避免培養(yǎng)過程中的雜菌污染，保證其氣體需要，丙、丁過程中需松動培養(yǎng)瓶蓋，將其置于含95%空氣和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，D錯誤。故選B。9.下列關(guān)于細胞工程技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯誤的是（）A.改變誘導(dǎo)因素能使iPS細胞分化形成更多類型的細胞B.用莖尖培育脫毒草莓，因為細胞分裂旺盛，易誘發(fā)突變C.制備產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細胞必須進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測D.燒傷患者選擇自體皮膚生發(fā)層細胞進行培養(yǎng)移植，不會引起免疫排斥〖答案〗B〖祥解〗細胞工程是生物工程的一個重要方面?？偟膩碚f，它是應(yīng)用細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的理論和方法，按照人們的設(shè)計藍圖，進行在細胞水平上的遺傳操作及進行大規(guī)模的細胞和組織培養(yǎng)。當(dāng)前細胞工程所涉及的主要技術(shù)領(lǐng)域有細胞培養(yǎng)、細胞融合、染色體操作及基因轉(zhuǎn)移等方面。通過細胞工程可以生產(chǎn)有用的生物產(chǎn)品或培養(yǎng)有價值的植株，并可以產(chǎn)生新的物種或品系?！驹斘觥緼、誘導(dǎo)因素能誘導(dǎo)iPS細胞分化，所以改變誘導(dǎo)因素能使iPS細胞分化形成更多類型的細胞，A正確；B、用莖尖培育脫毒草莓，因為莖尖細胞幾乎不含病毒，B錯誤；C、制備產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細胞必須進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，C正確；D、自身細胞不會引起免疫排斥，D正確。故選B。10.如圖為4種黏性末端及2種限制酶的識別序列和切割位點。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.限制性內(nèi)切核酸酶都是從原核生物中分離出來的B.黏性末端①與②，③與④能連接在一起C.a酶和b酶切割后連接形成的序列能再一次被它們切割D.獲取一個目的基因需限制酶切割2次，共產(chǎn)生2個游離的磷酸基團〖答案〗B〖祥解〗關(guān)于限制酶，可以從以下幾方面把握：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來；（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、限制酶主要是從原核生物中分離純化出來的，A錯誤；B、黏性末端①與②相同能互補配對，③與④黏性末端相同能互補配對，故黏性末端①與②，③與④能連接在一起，B正確；C、a酶和b酶切割后產(chǎn)生的黏性末端相同可以連接在一起，但是連接之后的堿基序列與原來均不同，由于限制酶具有專一性（識別特定的序列從特定的位點切割），故a酶和b酶切割后連接形成的序列不能再一次被它們切割，C錯誤；D、獲取一個目的基因需限制酶切割2次，水解4個磷酸二酯鍵，共產(chǎn)生4個游離的磷酸基團，D錯誤。故選B。11.用三種限制酶處理大腸桿菌質(zhì)粒并進行電泳，結(jié)果如圖。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.質(zhì)粒是獨立于原核細胞擬核或真核細胞染色體以外的DNA分子B.將提取的質(zhì)粒溶于2mol/L的NaCl溶液后，可用二苯胺試劑進行鑒定C.質(zhì)粒上沒有限制酶1和2的切割位點，而有限制酶3的切割位點D.在電場的作用下，DNA分子會向著與它所帶電荷相反的電極移動〖答案〗C〖祥解〗DNA的粗提取和鑒定：利用DNA不溶于酒精，某些蛋白質(zhì)溶于酒精，以及DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，可以將DNA與蛋白質(zhì)分離開；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑?！驹斘觥緼、質(zhì)粒是獨立于真核細胞細胞核或原核細胞擬核DNA之外具有自我復(fù)制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子，A正確；B、由于DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度較大，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色，所以將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺試劑在沸水條件進行鑒定，B正確；C、因為質(zhì)粒的本質(zhì)是環(huán)狀的DNA，限制酶Ⅰ和Ⅱ處理后電泳只有一條條帶，可能是該質(zhì)粒上有一個切割位點，也可能沒有切割位點，C錯誤；D、DNA帶負電，電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理，D正確。故選C。12.下列關(guān)于哺乳動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，錯誤的是（）A.受精時，防止多精入卵的兩道屏障是透明帶反應(yīng)和卵細胞膜反應(yīng)B.卵裂期每個細胞的核質(zhì)比逐漸增大，胚胎中DNA總量逐漸增加C.可用發(fā)育至桑葚胚或囊胚階段的胚胎進行胚胎移植D.可根據(jù)滋養(yǎng)層細胞減數(shù)分裂I中期染色體的形態(tài)鑒定性別〖答案〗D〖祥解〗哺乳動物胚胎發(fā)育的重要階段（1）卵裂期：在透明帶內(nèi)進行的，特點是細胞分裂方式為有絲分裂，細胞的數(shù)量不斷增加，但胚胎的總體積并不增加，或略有縮小；（2）桑椹胚：32個細胞左右的胚胎[之前所有細胞都有發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細胞]；（3）囊胚：細胞開始分化，其中個體較大的細胞叫內(nèi)細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔[注：囊胚的擴大會導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化]；（4）原腸胚：內(nèi)細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。[細胞分化在胚胎期達到最大限度【詳析】A、受精時，阻止多精入卵的第一道道屏障是透明帶反應(yīng)，第二道屏障是卵細胞膜反應(yīng)，A正確；B、從受精卵到囊胚的發(fā)育為卵裂期，卵裂期因細胞有絲分裂導(dǎo)致細胞數(shù)量增加，但胚胎總體積并不增大，所以每個細胞的核質(zhì)比增大，胚胎中DNA因細胞數(shù)量的增加而增加，B正確；C、在胚胎移植中，選擇桑葚胚或囊胚期的胚胎進行移植較易成功，因為此時的胚胎處于游離狀態(tài)，同時此時的胚胎全能性較高，C正確；D、囊胚分為內(nèi)細胞團和滋養(yǎng)層，其中滋養(yǎng)層將來發(fā)育為胎膜和胎盤，但這發(fā)生在囊胚期之后，可用于性別鑒定，而內(nèi)細胞團將會發(fā)育成完整的胚胎，但滋養(yǎng)層細胞不會進行減數(shù)分裂，D錯誤。故選D。13.天然熒光素酶不能高效催化人工合成的熒光素（DTZ）發(fā)光。研究人員采用蛋白質(zhì)工程解決該問題。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.通過化學(xué)誘變劑可定向改造天然熒光素酶的基因序列B.蛋白質(zhì)工程的實質(zhì)是通過改變氨基酸的結(jié)構(gòu)來改變熒光素酶的功能C.改造后的熒光素酶在一定條件下催化DTZ發(fā)光是將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能D.可用PCR方法檢測突變的熒光素酶基因是否翻譯成蛋白質(zhì)〖答案〗C〖祥解〗蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）?！驹斘觥緼、通過化學(xué)誘變劑可以讓天然熒光素酶的基因序列進行隨機突變，但化學(xué)誘變通常是不定向的，A錯誤；B、蛋白質(zhì)工程的實質(zhì)是通過改造基因結(jié)構(gòu)來改造或制造新的蛋白質(zhì)，B錯誤；C、改造后的熒光素酶在一定條件下催化DTZ發(fā)光是將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能，C正確；D、PCR

方法主要用于檢測DNA的存在或者染色體DNA上是否插入目的基因，檢測目的基因是否翻譯為蛋白質(zhì)的方法為抗原﹣抗體雜交，D錯誤。故選C。14.下列關(guān)于生物技術(shù)安全性和倫理的敘述，正確的是（）A.生物技術(shù)可廣泛應(yīng)用在人類自身基因組改造和新物種創(chuàng)造中B.生殖性克隆人破壞了人類遺傳多樣性的天然屬性，不利于人類的生存和進化C.鼓勵發(fā)展基因編輯技術(shù)來設(shè)計試管嬰兒解決不孕問題D.轉(zhuǎn)基因食品中的外源基因經(jīng)過食用后會進入人體細胞并整合到人體的基因組中〖答案〗B〖祥解〗1、生殖性克隆指將克隆技術(shù)用于生育目的，即用于產(chǎn)生人類個體。治療性克隆指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞和組織(皮膚、神經(jīng)或肌肉等)用于治療性移植。2、中國政府:禁止生殖性克隆人，堅持四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗，不反對治療性克隆人。3、轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全(滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變)、生物安全(對生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)?！驹斘觥緼、人類自身基因組改造和新物種創(chuàng)造中，要嚴防濫用，A錯誤；B、生殖性克隆人破壞了人類遺傳（基因）多樣性的天然屬性，不利于人類的生存和進化，B正確；C、基因編輯技術(shù)存在安全風(fēng)險，不可濫用設(shè)計試管嬰兒技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒，C錯誤；D、轉(zhuǎn)基因食品中的外源基因經(jīng)過食用后會被消化分解，不會進入人體細胞并整合到人體的基因組中，D錯誤。故選:B。二、多項選擇題：本部分包括4題，每題3分，共計12分。每題有不止一個選項符合題意。每題全選對者得3分，選對但不全的得1分，錯選或不答的得0分。15.科研人員進行了土壤中自生固氮菌的分離，部分實驗流程如下圖。下列相關(guān)敘述錯誤的有（）A.步驟①取土壤用的小鐵鏟在使用前需要滅菌B.該實驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目高C.④培養(yǎng)基中應(yīng)有碳源、氮源、水和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)D.④培養(yǎng)結(jié)果表明每克土壤中自生固氮菌的數(shù)量為1.7×107個〖答案〗BC〖祥解〗1、在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。2、微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。3、培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)；分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對特殊營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求?！驹斘觥緼、取土壤用的小鐵鏟和取樣紙袋在使用前都需要滅菌，A正確；B、由圖分析知該實驗用的是稀釋涂布平板法接種并統(tǒng)計菌落數(shù)，由于當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只有一個菌落，所以該實驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要少，B錯誤；C、本實驗需要分離自生固氮菌，自生固氮菌可以利用空氣中的氮氣作為氮源，故所用培養(yǎng)基中不需要加入氮源，C錯誤；D、由圖可知，共稀釋了104倍，再從取0.1mL培養(yǎng)，因此每克土壤中自生固氮菌的數(shù)量為(168+175+167)30.1104÷=1.7×107個，D正確。故選BC。16.T-DM1是一種治療乳腺癌的抗體-藥物偶聯(lián)物，由曲妥珠單抗、細胞毒性藥物DM1偶聯(lián)形成，作用機制如下圖。下列有關(guān)敘述正確的有（）A.連接物和藥物的結(jié)合在內(nèi)環(huán)境中較穩(wěn)定，在溶酶體中的穩(wěn)定性較低B.T-DM1通過胞吞進入細胞，隨后釋放DM1，導(dǎo)致細胞壞死C.T-DM1可實現(xiàn)對腫瘤細胞的選擇性殺傷，減少對健康細胞的傷害D.曲妥珠單抗具有化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強的特點〖答案〗ACD〖祥解〗1、抗體—藥物偶聯(lián)物通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷，抗體—藥物偶聯(lián)物通常由抗體、接頭和藥物（如細胞毒素）三部分組成。2、單克隆抗體能準(zhǔn)確地識別抗原的細微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備?！驹斘觥緼、抗體-藥物偶聯(lián)物經(jīng)過內(nèi)環(huán)境靶向運輸至癌細胞處，要求在內(nèi)環(huán)境中比較穩(wěn)定，到達癌細胞處時結(jié)構(gòu)完成，在細胞內(nèi)，經(jīng)溶酶體水解后發(fā)揮藥效，抑制微管聚合，A正確；B、T-DM1屬于生物大分子，經(jīng)胞吞進入細胞，隨后經(jīng)溶酶體水解釋放藥物DM1抑制微管聚合，導(dǎo)致細胞凋亡，B錯誤；C、T-DM1中的曲妥珠單抗能利用抗原-抗體特異性結(jié)合的原理，精準(zhǔn)識別腫瘤細胞，減少對健康細胞的傷害，C正確；D、曲妥珠單抗屬于單克隆抗體，具有純度（化學(xué)性質(zhì)單一）高、靈敏度高、特異性強的優(yōu)點，D正確。故選ACD。17.下圖是顯微注射法制備轉(zhuǎn)基因小鼠的過程。下列相關(guān)敘述正確的有（）A.對親代雌鼠進行激素處理的目的是使其超數(shù)排卵B.讓受體小鼠處于假孕狀態(tài)，目的是讓受體鼠與供體鼠子宮處于相同生理狀態(tài)C.將目的基因注入雄原核，可能是此時雄原核較雌原核更大，操作更容易D.雄原核發(fā)育一段時間后染色體螺旋化程度更高，有利于目的基因的整合〖答案〗ABC〖祥解〗胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查?！驹斘觥緼、對親代雌鼠進行激素處理的目的是超數(shù)排卵，注射的激素通常是促性腺激素，A正確；B、在受精卵注入前，需要讓受體小鼠處于假孕狀態(tài)，原因是讓受體鼠與供體鼠子宮處于相同生理狀態(tài)，便于受精卵在新環(huán)境下的正常發(fā)育，B正確；C、由于雄原核發(fā)育一段時間后體積較雌原核更大，操作更容易，且雄原核發(fā)育一段時間后染色體解螺旋化程度更高，注射DNA整合到精子染色體DNA上更容易、或雌原核附近常有極體干擾，影響目的基因注射，故顯微操作時一般將目的基因注入發(fā)育了一段時間的雄原核而不注入雌原核，C正確；D、雄原核發(fā)育一段時間后染色質(zhì)解螺旋化程度更高，有利于目的基因的整合，D錯誤。故選ABC。18.GDNF是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子，對損傷的神經(jīng)細胞具有營養(yǎng)和保護作用。研究人員構(gòu)建含GDNF基因的重組載體，并導(dǎo)入到大鼠中用于干細胞基因治療的研究。下列相關(guān)敘述正確的有（）A.切割目的基因和載體時，可以選用限制酶XhoⅠ和EcoRⅠ切割B.過程②應(yīng)選擇約為1200bp的重組載體導(dǎo)入受體細胞C.a為內(nèi)細胞團，將來發(fā)育成胎盤和胎膜D.過程⑥產(chǎn)生的小鼠并不都是轉(zhuǎn)基因小鼠〖答案〗BD〖祥解〗1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲??；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細胞；④目的基因的檢測與表達。2、囊胚期，聚集在胚胎一端的細胞形成內(nèi)細胞團，將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而沿透明帶內(nèi)壁擴展和排列的細胞，稱為滋養(yǎng)層細胞，它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤?！驹斘觥緼、形成圖中重組載體所用的限制酶只能選擇限制酶XhoⅠ，如果使用限制酶XhoⅠ和EcoRⅠ同時切割目的基因和載體，那么重組質(zhì)粒中將丟失啟動子，A錯誤；B、由圖可知，限制酶XhoⅠ可將切割載體切割為100bp和500bp的片段，選擇500bp的片段與長度為700bp的目的基因構(gòu)建為基因表達載體，即基因表達載體長度為1200bp，B正確；C、圖中a為囊胚中的內(nèi)細胞團，將來發(fā)育為胎兒的各種組織，b為滋養(yǎng)層細胞，將來發(fā)育成胎盤和胎膜，C錯誤；D、因轉(zhuǎn)基因生物的成功率并不是百分之百，如轉(zhuǎn)基因小鼠的染色體的DNA上沒有插入目的基因或目的基因不能穩(wěn)定的表達等，導(dǎo)致過程⑥產(chǎn)生的小鼠并不都是轉(zhuǎn)基因小鼠，D正確。故選BD。三、非選擇題：本部分包括5題，共計60分。除特別說明外，每空1分。19.紅酸湯是一種很有特色的火鍋底料，制作流程如圖1所示。某研究小組從紅酸湯中篩選出高產(chǎn)細菌素的乳酸菌株，并用打孔法測定乳酸菌分泌的細菌素對指示菌的抑菌效果，流程如圖2所示。圖3為打孔法示意圖。請回答下列問題：（1）密封發(fā)酵時，常在壇中加入成品紅酸湯，其目的是增加_____。乳酸發(fā)酵的過程即為乳酸菌進行_____的過程，該過程發(fā)生在乳酸菌的_____中。（2）紅酸湯腌制過程的初期會有氣泡冒出，原因是_____。后期氣泡的產(chǎn)生逐漸停止，原因是_____。（3）在進行圖2操作前要對操作的空間和操作者的衣著和手進行清潔和_____處理。培養(yǎng)基需要滿足微生物生長的要求，在培養(yǎng)乳酸菌時，一般需要將培養(yǎng)基pH調(diào)至_____。（4）圖2過程Ⅰ用的接種方法是_____。在該過程中共需灼燒接種環(huán)_____次。（5）MRS培養(yǎng)基屬于加富培養(yǎng)基，其目的是_____，用打孔法測定乳酸菌分泌的細菌素對指示菌的抑菌效果時，應(yīng)該先吸取稀釋的指示菌菌液涂布到平板中，再使用5mm直徑的打孔器打孔，每孔分別注入離心后的50μL的MRS液體培養(yǎng)基的_____（從“上清液”“沉淀物”中選填）。培養(yǎng)24h后測定抑菌圈的直徑，當(dāng)抑菌圈的直徑至少大于_____mm才能判斷為具有抑菌活性?！即鸢浮剑?）①.乳酸菌株含量②.無氧呼吸③.細胞質(zhì)基質(zhì)（2）①.雜菌呼吸產(chǎn)生二氧化碳②.乳酸積累抑制了雜菌的生長（3）①.消毒②.中性或弱堿性（4）①.平板劃線法②.5（5）①.擴大培養(yǎng)②.上清液③.5〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。（1）成品紅酸湯含有大量的乳酸菌，密封發(fā)酵時，常在壇中加入成品紅酸湯，其目的是增加乳酸菌株含量。乳酸菌發(fā)酵指的是它進行無氧呼吸產(chǎn)生乳酸的過程，該過程發(fā)生在乳酸菌的細胞質(zhì)基質(zhì)中。（2）紅酸湯腌制過程的初期會有氣泡冒出，乳酸菌無氧呼吸不會產(chǎn)生氣體，該氣體可能是其他雜菌呼吸產(chǎn)生二氧化碳形成的，后期乳酸積累抑制了雜菌的生長，氣泡就逐漸停止。（3）為防止雜菌污染，需要無菌操作，操作前要對操作的空間和操作者的衣著和手進行清潔和消毒，培養(yǎng)基需要滿足微生物生長的要求，在培養(yǎng)乳酸菌時，乳酸菌屬于細菌，一般需要將培養(yǎng)基pH調(diào)至中性或弱堿性。（4）圖2過程Ⅰ通過連續(xù)劃線達到分離的目的，接種方法是平板劃線法，第一次劃線時需要灼燒一次接種環(huán)，之后每劃線一次都要灼燒一次，圖中劃了4次，因此需要灼燒5次。（5）MRS培養(yǎng)基屬于加富培養(yǎng)基，其目的是擴大培養(yǎng)增加乳酸菌的數(shù)量。在提取抑菌有效成分時，只需要獲取細菌素這一物質(zhì)即可，乳酸菌菌體主要分布在離心后的液體培養(yǎng)基的沉淀物中，其分泌物細菌素位于上清液，故需要吸取離心后液體培養(yǎng)基的上清液菌液涂布到平板中；抑菌圈是指固體培養(yǎng)基表面與試樣接觸的邊界處無菌繁殖的環(huán)帶區(qū)域，利用待測次生代謝產(chǎn)物在瓊脂平板擴散使其周圍的細菌生長受到抑制形成的抑菌圈大小，而本實驗用的是5mm直徑的打孔器打孔，故注入相應(yīng)物質(zhì)后，培養(yǎng)24h后測定抑菌圈的直徑，當(dāng)抑菌圈的直徑至少大于5mm才能判斷為具有抑菌活性。20.免疫療法在癌癥治療方法中取得越來越突出的地位，科研人員在不斷研究中發(fā)現(xiàn)多種免疫治療方法的結(jié)合是提高治療效果的途徑之一。某些種類癌細胞表面高表達膜蛋白PSMA和PD-L1，如圖1。請回答下列問題：（1）PD-L1能抑制T細胞的活化，使癌細胞發(fā)生免疫逃逸。臨床上可利用抗PD-1的單克隆抗體進行癌癥治療，據(jù)圖1推測，其原因是抗PD-1的單克隆抗體與PD-1的結(jié)合，阻斷了_____的結(jié)合，避免抑制T細胞活化。（2）獲得抗PD-1的單克隆抗體的方法：將純化的PD-1蛋白注射到小鼠體內(nèi)，提取小鼠的脾臟細胞，常用化學(xué)試劑_____誘導(dǎo)其與骨髓瘤細胞融合，篩選后將所得細胞接種到多孔培養(yǎng)板上，進行抗體陽性檢測，檢測原理如圖2。①在檢測時需要將_____固定于固相載體表面制成固相抗原，并加入待測樣本。②加入酶標(biāo)抗體后一段時間，需要用洗滌劑將未與_____結(jié)合的酶標(biāo)抗體洗去，該檢測方法中，酶標(biāo)抗體的作用是_____。③加入相應(yīng)酶促反應(yīng)底物顯色后，顏色的深淺可代表_____。（3）抗PD-1的單克隆抗體對一些腫瘤無效。CD28是T細胞表面受體，T細胞的有效激活依賴于CD28在癌細胞與T細胞結(jié)合部位的聚集。因此，科研人員嘗試構(gòu)建既能結(jié)合PSMA，還能結(jié)合CD28的雙特異性抗體PSMA×CD28，誘導(dǎo)T細胞定向殺傷癌細胞，如圖3。制備過程為：先將_____分別注射到小鼠體內(nèi)，分離出B淋巴細胞，誘導(dǎo)其與小鼠的骨髓瘤細胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細胞，再誘導(dǎo)其融合，并置于含有_____混合氣體的_____（儀器）中培養(yǎng)，以獲得更多雙雜交瘤細胞。通過進一步篩選，獲得所需的雙特異性抗體?！即鸢浮剑?）PD-1和PD-L1（2）①.聚乙二醇（PEG）②.PD-1③.抗PD-1的單克隆抗體④.抗體與待測抗原結(jié)合，酶催化特定底物反應(yīng)⑤.抗PD-1的單克隆抗體的量（3）①.PSMA、CD28②.95%空氣和5%CO2③.CO2培養(yǎng)箱〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。（1）癌細胞是由于原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變導(dǎo)致遺傳物質(zhì)改變。圖1中癌細胞表面的PD-L1和T細胞表面的PD-1結(jié)合，抑制T細胞的活化。PD-1的單克隆抗體與PD-1特異性結(jié)合，阻斷了PD-L1和PD-1的結(jié)合，避免抑制T細胞活化。（2）誘導(dǎo)動物細胞融合的常用方法有聚乙二醇（PEG）融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等，所以可用化學(xué)試劑聚乙二醇（PEG）誘導(dǎo)其與骨髓瘤細胞融合；①在檢測時需要將PD-1蛋白固定于固相載體表面制成固相抗原；②加入酶標(biāo)抗體后一段時間，為了排除干擾，則需要用洗滌劑將未與抗PD-1抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗體洗去，該檢測方法中，酶標(biāo)抗體的作用是抗PD-1的單克隆抗體的量；③PD-1蛋白與抗PD-1抗體的結(jié)合量越多顏色越深，所以加入相應(yīng)酶促反應(yīng)底物顯色后，顏色的深淺可代表與抗PD-1抗體的量。（3）抗體具有特異性，所以為了獲取既能結(jié)合PSMA，還能結(jié)合CD28的雙特異性抗體PSMA×CD28，則需要先將PSMA、CD28（相當(dāng)于抗原）分別注射到小鼠體內(nèi)對小鼠進行免疫，并從該小鼠的脾臟中再分離出能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞，再誘導(dǎo)其與小鼠的骨髓瘤細胞融合，用特定選擇培養(yǎng)基篩選得到兩種雜交瘤細胞，再誘導(dǎo)兩種細胞融合，為獲得更多雙雜交瘤細胞，需將雙雜交瘤細胞置于動物細胞培養(yǎng)的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，其中含有95%空氣和5%CO2，再通過進一步篩選，獲得所需的雙特異性抗體。21.不對稱體細胞雜交是指利用射線破壞供體細胞的染色質(zhì)，與未經(jīng)射線照射的受體細胞融合，所得融合細胞含受體全部遺傳物質(zhì)及供體部分遺傳物質(zhì)。研究人員嘗試運用不對稱體細胞雜交將紅豆杉（2n=24）與柴胡（2n=12）進行了融合，培育能產(chǎn)生紫杉醇的柴胡，過程如下圖。請回答下列問題：（1）為獲得紅豆杉和柴胡的原生質(zhì)體，可將流水沖洗后的外植體用酒精消毒30s，然后立即用_____沖洗，隨后再用_____溶液處理30min，再次沖洗后將外植體接種于MS培養(yǎng)基上誘導(dǎo)_____過程，形成愈傷組織。（2）已知X射線處理能隨機破壞染色體結(jié)構(gòu)，使其發(fā)生斷裂、易位、染色體消除等，使細胞不再持續(xù)分裂；碘乙酰胺處理使細胞質(zhì)中的某些酶失活，抑制細胞分裂。對紅豆杉和柴胡原生質(zhì)體進行的A、B處理分別為_____。（3）過程③經(jīng)化學(xué)試劑誘導(dǎo)融合后，只有異源融合的原生質(zhì)體可持續(xù)分裂形成再生細胞團，原因是雜種細胞由于融合后在_____和_____（填細胞結(jié)構(gòu)）的功能上實現(xiàn)了互補，使細胞恢復(fù)正常。融合完成的標(biāo)志是_____。（4）過程④中，所用培養(yǎng)基需含有激素類物質(zhì)X和Y，當(dāng)X與Y的濃度比例大于1時，誘導(dǎo)未分化細胞群分化出芽，則X屬于_____類似物。（5）觀察再生植株細胞中的染色體，發(fā)現(xiàn)數(shù)目_____（從“小于等于”“等于”“小于”中選填）36條，說明初步獲得了不對稱雜種植株。（6）研究人員以紅豆杉幼苗莖形成層為外植體進行相關(guān)研究，得到如圖2所示實驗結(jié)果。下列相關(guān)敘述正確的有（）。A.愈傷組織細胞和胚狀體細胞都已經(jīng)出現(xiàn)了脫分化B.暗處理時間對脫分化率的影響小于對再分化率的影響C.暗處理時間的延長不利于紅豆杉胚狀體的形成D.紅豆杉幼苗莖形成層誘導(dǎo)形成胚狀體的最適暗處理時間是1周〖答案〗（1）①.無菌水②.次氯酸鈉③.脫分化（2）X射線、碘乙酰胺（3）①.細胞核②.細胞質(zhì)③.雜種細胞再生出細胞壁（4）細胞分裂素（5）小于（6）BC〖祥解〗植物的體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術(shù)形成雜種細胞，進而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細胞雜交依據(jù)的原理是細胞膜的流動性和植物細胞的全能性。（1）植物組織培養(yǎng)應(yīng)注意無菌操作，故操作之前需要用無菌水和次氯酸鈉對外植體進行消毒，之后誘導(dǎo)脫分化形成愈傷組織。所以為獲得紅豆杉和柴胡的原生質(zhì)體，可將流水沖洗后的外植體用酒精消毒30s，然后立即用無菌水沖洗，隨后再用次氯酸鈉溶液處理30min，再次沖洗后將外植體接種于MS培養(yǎng)基上誘導(dǎo)脫分化過程，形成愈傷組織。（2）X射線處理能隨機破壞染色體結(jié)構(gòu)，使其發(fā)生斷裂、易位、染色體消除等，使細胞不再持續(xù)分裂，碘乙酰胺處理使細胞質(zhì)中的某些酶失活，抑制細胞分裂，單獨的紅豆杉和柴胡細胞都不能分裂，要培育能產(chǎn)生紫杉醇的柴胡，紅豆杉是供體需要X射線照射，柴胡是受體需要碘乙酰胺處理。（3）X射線處理能隨機破壞染色體結(jié)構(gòu)，使其發(fā)生斷裂、易位、染色體消除等，使細胞不再持續(xù)分裂，碘乙酰胺處理使細胞質(zhì)中的某些酶失活，抑制細胞分裂，單獨的紅豆杉和柴胡細胞都不能分裂，雜種細胞由于融合后在細胞核和細胞質(zhì)的功能上實現(xiàn)了互補，使細胞恢復(fù)正常分裂，因此只有異源融合的原生質(zhì)體可持續(xù)分裂形成再生細胞團。原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志是雜種細胞再生出細胞壁。（4）在植物組織培養(yǎng)中，生長素/細胞分裂素比例高時有利于根的分化，比例低時有利于芽的分化，比例適中促進愈傷組織的形成，因此植物激素X的名稱是細胞分裂素類似物。（5）不對稱體細胞雜交是指利用射線破壞供體細胞的染色質(zhì)，與未經(jīng)射線照射的受體細胞融合，所得融合細胞含受體全部遺傳物質(zhì)及供體部分遺傳物質(zhì)。據(jù)小題（2）中已知X射線處理能隨機破壞染色體結(jié)構(gòu)，使其發(fā)生斷裂、易位、染色體消除等，所以再生植株細胞中的染色體數(shù)目在顯微鏡下觀察應(yīng)該是小于36條。（6）A、愈傷組織細胞出現(xiàn)了脫分化，胚狀體細胞已經(jīng)出現(xiàn)了再分化，A錯誤；B、據(jù)圖分析可知，暗處理時間對愈傷組織誘導(dǎo)率明顯高于胚狀體誘導(dǎo)率，說明暗處理時間對脫分化率的影響小于對再分化率的影響，B正確；C、據(jù)圖中柱形圖分析可知，隨著暗處理事件的延長，胚狀體誘導(dǎo)率逐漸降低，不利于紅豆杉胚狀體的形成，C正確；D、暗處理時間2周時，紅豆杉幼苗莖形成層誘導(dǎo)形成胚狀體的數(shù)量最多，但不一定是最適時間，最適時間還需要設(shè)置更長的暗處理時間進行實驗驗證，D錯誤。故選BC。22.某研究小組計劃通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴增獲得目的基因，構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌，用于合成胰島素。請回答下列問題：（1）從_____細胞中提取mRNA，通過_____過程獲得cDNA（2）PCR反應(yīng)由變性→復(fù)性→_____三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成，在變性之前需要進行_____處理，其目的是增加大分子模板DNA徹底變性的概率。在PCR反應(yīng)體系中除了加入模板DNA、引物以外，還需要加入_____（至少寫2個）。若引物位于各自模板鏈的中段，經(jīng)過4次循環(huán)得到_____個等長的DNA。（3）設(shè)計引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計的兩組引物（圖1只標(biāo)注了部分堿基序列）都不合理，請分別說明理由。第一組：_____，第二組：_____。（4）如果PCR反應(yīng)得不到任何擴增產(chǎn)物，則可以采取的改進措施有_____（填序號）。①升高退火溫度②降低退火溫度③重新設(shè)計引物（5）融合PCR技術(shù)采用具有互補末端的引物，形成具有重疊鏈的PCR產(chǎn)物，通過PCR產(chǎn)物重疊鏈的延伸，將不同來源的DNA片段連接起來。其原理如圖2。上述過程中使用的引物P2和P3的堿基_____（從“需要”“不需要”中選填）完全互補配對。融合PCR的第二步使用的引物是_____，若最終獲得128個融合基因，則融合PCR第二步消耗了_____個引物?！即鸢浮剑?）①.胰島B②.逆轉(zhuǎn)錄（2）①.延伸②.預(yù)變性③.4種脫氧核苷酸（dNTP）、耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）、緩沖液（Mg2+）④.8（3）①.引物Ⅰ和引物Ⅱ會因局部發(fā)生堿基互補配對而失效②.引物Ⅰ'自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補配對而失效（4）②③（5）①.不需要②.P1、P4③.254〖祥解〗PCR技術(shù)：（1）定義：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；（2）原理：DNA復(fù)制；（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物；（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶、能量；（5）過程：高溫變性，DNA雙鏈解旋；低溫復(fù)性，引物與互補鏈DNA結(jié)合；中溫延伸，在耐高溫的DNA聚合酶作用下合成子鏈。（1）通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴增獲得目的基因，首先要有目的基因作為模板，從胰島B細胞中提取mRNA，通過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得cDNA，從而用于PCR擴增；（2）PCR反應(yīng)由變性→復(fù)性→延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成，在變性之前需要進行預(yù)變性處理，其目的是增加大分子模板DNA徹底變性的概率。在PCR反應(yīng)體系中除了加入模板DNA、引物以外，還需要加入四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶、緩沖液（Mg2+）等；若引物位于各自模板鏈的中段，經(jīng)過4次循環(huán)得到8個等長的DNA；（3）第一組兩種引物間堿基能互補配對，導(dǎo)致兩種引物失去作用；第二組引物中引物Ⅰ自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補配對而失效；（4）根據(jù)上述題的分析，如果PCR反應(yīng)得不到任何擴增產(chǎn)物，有可能是引物間自連，也可能是退火溫度過高造成的，因此要采?、诮档屯嘶饻囟娶壑匦略O(shè)計引物的改進措施，故選②③；（5）過程中使用的引物P2和P3的堿基不需要完全互補配對；由圖2可知，融合PCR的第二步使用的引物是P1、P4，一個DNA分子經(jīng)n次循環(huán)，DNA分子數(shù)增加2n-1，每增加一個DNA，需要兩個引物，故一個DNA分子經(jīng)n次循環(huán)，理論上需要2×（2n-1）=2n+1-2個引物，因此獲得128個融合基因意味著經(jīng)過了7次循環(huán)，則共消耗了（28-2）=254個引物。23.人的血清蛋白（HSA）具有重要的醫(yī)用價值，研究人員欲用乳腺生物反應(yīng)器來大量生產(chǎn)HSA。圖1為HSA基因片段和人工構(gòu)建的大腸桿菌質(zhì)粒pBR322，其中AmpR表示氨芐青霉素抗性基因，NeoR表示新霉素抗性基因，箭頭表示切割形成末端完全不同的4種限制酶的切割位點。HSA只能從血漿中制備，以基因工程技術(shù)獲取重組HSA（rHSA）的三條途徑如圖2所示。請回答下列問題：（1）人工構(gòu)建pBR322質(zhì)粒除了含特定限制酶切割位點、標(biāo)記基因、復(fù)制原點外，還必須有_____（答出兩點）等。（2）據(jù)圖1分析，在構(gòu)建基因表達載體時，選擇限制酶_____切割質(zhì)粒和目的基因，可提高目的基因和載體的正確連接率。雙酶切法的優(yōu)點之一是避免質(zhì)粒與目的基因之間的_____。（3）為了排除普通受體細胞（未導(dǎo)入質(zhì)粒）、空質(zhì)粒受體細胞（導(dǎo)入pBR322質(zhì)粒而非重組質(zhì)粒）的干擾，目的基因?qū)牒筮M行了進一步篩選：制備甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲培養(yǎng)基中有新霉素，乙培養(yǎng)基中有氨芐青霉素，含重組質(zhì)粒的受體細胞在甲培養(yǎng)基上_____（從“能”“不能”中選填）生存，在乙培養(yǎng)基上_____（從“能”“不能”中選填）生存。（4）將農(nóng)桿菌與水稻受體細胞混合后共同培養(yǎng)，旨在讓Ti質(zhì)粒的_____進入水稻受體細胞。常用_____標(biāo)記的目的基因片段作為探針檢測目的基因是否整合到受體細胞的染色體DNA上。為檢測目的基因的表達情況，可提取受體細胞的蛋白質(zhì)，用_____進行雜交實驗。（5）人體合成的初始HSA多肽，需要經(jīng)過加工形成正確的空間結(jié)構(gòu)才能有活性。與圖2中途徑Ⅱ相比，選擇途徑I獲取rHSA的優(yōu)勢是水稻具有_____系統(tǒng)，能對初始HSA進行高效加工。為證明rHSA具有醫(yī)用價值，須確認rHSA與_____的生物學(xué)功能一致。（6）科學(xué)家培養(yǎng)出一種轉(zhuǎn)基因羊，其膀胱上皮細胞可以合成人血清白蛋白并分泌到尿液中。其培育方法中將重組質(zhì)粒通過_____法導(dǎo)入山羊的_____細胞。與乳腺生物反應(yīng)器相比，膀胱生物反應(yīng)器不受_____限制，受體來源更廣泛?！即鸢浮剑?）啟動子、終止子（2）①EcoRⅠ和PstⅠ②.反向連接（3）①.能②.不能（4）①.T-DNA②.熒光標(biāo)記（或放射性同位素標(biāo)記）③.抗人血清蛋白（HSA）的抗體（5）①.生物膜②.HSA（6）①.顯微注射②.受精卵③.性別和年齡〖祥解〗1、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定。2、目的基因的獲取需要采用限制酶。培育轉(zhuǎn)基因動物時，往往采用受精卵作為受體細胞，因為受精卵的全能性最高。3、自然界所有生物共用一套遺傳密碼子，所以一種生物的基因能在另一種生物體內(nèi)表達。（1）基因工程的關(guān)鍵步驟是構(gòu)建基因表達載體，基因表達載體主要由啟動子、目的基因、標(biāo)記基因和終止子組成，因此人工構(gòu)建pBR322質(zhì)粒除了含特定限制酶切割位點、標(biāo)記基因、復(fù)制原點外，還必須有啟動子、終止子等。（2）據(jù)圖1可知，BamHⅠ會切割目的基因，TthⅢ1會切割質(zhì)粒中的復(fù)制原點，而EcoRⅠ和PstⅠ這兩種酶能切割質(zhì)粒和目的基因，不破壞抗性基因和復(fù)制原點等，且能得到不同的黏性末端，避免質(zhì)粒和目的基因自連及反向連接，因此在構(gòu)建基因表達載體時，選擇EcoRⅠ和PstⅠ作為切割質(zhì)粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和載體的正確連接效率。（3）分析題圖1可知，PstI破壞了氨芐青霉素抗性基因（Ampr），構(gòu)建的重組質(zhì)粒無氨芐青霉素抗性，但具有新霉素抗性基因，而甲培養(yǎng)基中含有新霉素，因此，含重組質(zhì)粒的受體細胞能在甲培養(yǎng)基上能生存；乙培養(yǎng)基中含有氨芐青霉素，能殺死含有目的基因的受體細胞，不能在乙培養(yǎng)基中生存。（4）農(nóng)桿菌細胞內(nèi)含有Ti質(zhì)粒，當(dāng)它侵染植物細胞后，能將Ti質(zhì)粒上的T-DNA(可轉(zhuǎn)移的DNA)轉(zhuǎn)移到被侵染的細胞，并且將其整合到該細胞的染色體DNA上，所以將農(nóng)桿菌與水稻受體細胞混合后共同培養(yǎng)，旨在讓Ti質(zhì)粒的T-DNA進入水稻受體細胞；目的基因片段作為探針檢測目的基因是否整合到受體細胞的染色體DNA上，常用熒光標(biāo)記（或放射性同位素標(biāo)記）標(biāo)記；為檢測目的基因的表達情況，可提取受體細胞的蛋白質(zhì)，利用原理是抗原—抗體特異性結(jié)合，所以用抗人血清蛋白（HSA）的抗體進行雜交實驗來檢測血清蛋白（HSA）。（5）由于大腸桿菌為原核生物，無生物膜系統(tǒng)，而水稻為真核生物，具有生物膜系統(tǒng)，而人體合成的初始HSA多肽，需要經(jīng)過生物膜膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結(jié)構(gòu)才能有活性，因此與途徑II相比，選擇途徑I獲取rHSA的優(yōu)勢是水稻是真核生物，具有生物膜膜系統(tǒng)，能對初始rHSA多肽進行高效加工；為證明rHSA具有醫(yī)用價值，須確認rHSA生物活性和功能與人的血清蛋白（HSA）是否一致。（6）將重組質(zhì)粒通過顯微注射法導(dǎo)入動物的受體細胞時，常選用受精卵作為受體細胞，主要原因是動物受精卵具有發(fā)育的全能性，由于生物界共用一套遺傳密碼子，所以人血清白蛋白基因能在山羊膀胱上皮細胞中表達出相應(yīng)的蛋白質(zhì)；“乳腺細胞生物反應(yīng)器”只能從哺乳期雌性奶牛的乳汁中獲取產(chǎn)物，與“乳腺細胞生物反應(yīng)器”相比，“膀胱生物反應(yīng)器”的優(yōu)點是雌性和雄性奶牛的尿液中都可提取到產(chǎn)物，且不受性別、年齡等限制，因而受體來源更廣泛。江蘇省南京市秦淮區(qū)2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期期中考試試題注意事項考生在答題前請認真閱讀本注意事項及各題答題要求：1．本試卷包含單項選擇題、多項選擇題、非選擇題共三部分?？忌痤}全部答在答卷紙上，答在本試卷上無效。本次考試時間為75分鐘?？荚嚱Y(jié)束后，請將答卷紙交回。2．答題前，請務(wù)必將自己的學(xué)校、姓名、班級、考號用書寫黑色字跡的0.5毫米簽字筆填寫在答卷紙的密封線內(nèi)。3．答選擇題必須用2B鉛筆將答題紙上對應(yīng)題目的〖答案〗標(biāo)號涂黑。如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其它〖答案〗。一、單項選擇題：共14題，每題2分，共計28分。每題只有一個選項最符合題意。1.陳醋以黃米、高粱為主要原料，經(jīng)蒸煮、拌大曲、酒精發(fā)酵、醋酸發(fā)酵、熏醅、淋醋、陳釀等工藝流程制作而成。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.從制酒到制醋的發(fā)酵過程，應(yīng)適當(dāng)降低溫度B.在酒精發(fā)酵階段需要多次補充氧氣利于酵母菌的繁殖C.接種醋酸菌后的發(fā)酵需要不斷攪拌，主要目的是抑制雜菌D.糖源不足且氧氣充足時，醋酸菌可利用酒精進行發(fā)酵〖答案〗D〖祥解〗酒精發(fā)酵起主要作用的是酵母菌，通常前期通氣使酵母菌進行有氧呼吸，以便大量繁殖，后期密封使酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精，醋酸發(fā)酵起主要作用的菌種是醋酸菌，在有氧的條件下發(fā)酵形成醋酸?！驹斘觥緼、酒精發(fā)酵溫度為18-30℃，醋酸發(fā)酵溫度為30-35℃，A錯誤；B、酒精發(fā)酵起主要作用的是酵母菌，通常前期通氣使酵母菌進行有氧呼吸，以便大量繁殖，后期密封使酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精，所以不需要多次補充氧氣，B錯誤；C、接種醋酸菌后發(fā)酵需要不斷攪拌，主要目的是增加醋酸菌與反應(yīng)物的接觸面積，C錯誤；D、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，當(dāng)缺少糖源時，但氧氣要充足，此時醋酸菌可將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿幔珼正確。故選D。2.篩選高產(chǎn)纖維素酶菌株的流程如圖所示。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.I和Ⅲ均通過稀釋涂布平板法接種B.②號培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源C.④號為選擇培養(yǎng)基，其中加入剛果紅染料D.篩選菌種時只需要測量透明圈直徑〖答案〗D〖祥解〗1、選擇培養(yǎng)基在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基；2、篩選產(chǎn)纖維素酶的菌株應(yīng)以纖維素為唯一碳源，可以保證平板上長出的菌株均能分解利用纖維素；3、微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、分析題圖可知，I和Ⅲ均屬于接種，稀釋涂布平板法是將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落；題圖可知，I和Ⅲ均為稀釋涂布平板法接種，A正確；B、以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，B正確；C、鑒別培養(yǎng)使用固體培養(yǎng)基，其中可加入剛果紅，剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物，而纖維素分解產(chǎn)生的單糖和二糖不會與剛果紅發(fā)生上述反應(yīng)，從而使纖維素分解菌菌落周圍出現(xiàn)透明圈，C正確；D、篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，應(yīng)選擇剛果紅培養(yǎng)基上透明圈直徑與菌落直徑比值最大的菌落，D錯誤。故選D3.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)過程的敘述，正確的是（）A.在酒精燈火焰附近將冷卻至室溫的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿B.篩選可分解尿素的菌種時，培養(yǎng)基中還需加入適量的碳源C.獲得次生代謝物時，要用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物D.配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶后，可采用干熱滅菌法滅菌〖答案〗B〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、在酒精燈火焰附近將冷卻至50℃左右的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，A正確；B、篩選可分解尿素的菌種時，尿素可作為唯一氮源，還需要添加碳源，B正確；C、獲得次生代謝物時，要用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物，C錯誤；D、配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶后，采用高壓蒸汽滅菌，D錯誤。故選B。4.如圖是“番茄—馬鈴薯”雜種植株的培育過程，其中①～⑤表示過程，字母表示細胞、組織或植株。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.過程①表示在低滲溶液中用酶解法處理植物細胞獲得原生質(zhì)體B.過程②誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合依據(jù)的原理是細胞膜具有選擇透過性C.④過程通常需要避光培養(yǎng)，e的培養(yǎng)需要為其提供有機碳源D.該育種方法的突出優(yōu)點是極大地縮短了育種年限〖答案〗C〖祥解〗分析題圖：圖示為植物體細胞雜交過程示意圖，其中①表示去壁獲取原生質(zhì)體的過程；②表示人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；③表示再生出新細胞壁的過程；④表示脫分化過程；⑤表示再分化過程?！驹斘觥緼、獲得植物的原生質(zhì)體，操作一般在等滲溶液中進行，若在低滲溶液中進行，則去掉細胞壁的原生質(zhì)體會因吸水而漲破，A錯誤；B、過程②誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，主要依據(jù)細胞膜具有流動性的原理，B錯誤；C、④為植物組織培養(yǎng)的脫分化過程，脫分化是植物組織培養(yǎng)的起始階段，通常在避光條件下進行。e為愈傷組織，培養(yǎng)愈傷組織利用的營養(yǎng)成分是水、礦質(zhì)營養(yǎng)、有機小分子和激素，C正確；D、番茄和馬鈴薯在自然狀態(tài)下具有生殖隔離，不能通過有性生殖進行雜交，而通過植物體細胞雜交就可以培育雜種植株，體現(xiàn)植物體細胞雜交能打破物種生殖隔離，克服遠緣雜交不親和的障礙，D錯誤。故選C。5.科研人員嘗試利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)從紅豆杉的愈傷組織中提取紫杉醇，流程圖如下。下列相關(guān)敘述錯誤的是

（）

A.紫杉醇不是紅豆杉生長發(fā)育所必需的物質(zhì)B.細胞懸浮培養(yǎng)與繼代是為了快速獲得更多的薄壁細胞C.該途徑依據(jù)的原理是植物細胞具有全能性D.①過程需控制好培養(yǎng)基中植物激素的比例〖答案〗C〖祥解〗1、植物組織培養(yǎng)的過程：離體的植物組織。器官或細胞(外植體)脫分化形成愈傷組織愈傷組織再分化形成胚狀體，進一步發(fā)育植株(新植體)。2、植物組織培養(yǎng)技術(shù)具有廣泛的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑(快繁技術(shù)、作物脫毒、人工種子)、作物新品種的培育(單倍體育種、突變體的利用)、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、紫杉醇是紅豆杉細胞代謝產(chǎn)生的，屬于次生代謝產(chǎn)物，不是紅豆杉生長發(fā)育所必需的物質(zhì)，A正確；B、愈傷組織經(jīng)過懸浮培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)，可獲得大量細胞，B正確；C、全能性是指已經(jīng)分裂分化的細胞還能發(fā)育成完整個體或者其他各種細胞的潛能，所以圖示無法體現(xiàn)植物細胞具有全能性，C錯誤；D、①過程為脫分化過程，需控制好培養(yǎng)基中植物激素的比例，D正確。故選C。6.甲胎蛋白（AFP）是原發(fā)性肝癌的腫瘤標(biāo)記物，在腫瘤患者體內(nèi)的含量遠大于正常人?？蒲腥藛T制備出了抗AFP單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.可用滅活的仙臺病毒促進B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合B.向小鼠體內(nèi)注射AFP抗原，目的是獲得更多的特異性抗體C.雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)時，會表現(xiàn)出貼壁生長和接觸抑制現(xiàn)象D.患者肝部細胞癌變后，AFP和細胞膜上的糖蛋白數(shù)量均增多〖答案〗A〖祥解〗1、免疫的B細胞能夠分泌抗體，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤細胞具有無限增殖的能力，因此利用動物細胞融合技術(shù)將免疫的B（漿）細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞，利用該細胞制備單克隆抗體。2、該雜交瘤細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體，并且單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高、可大量制備等特點?！驹斘觥緼、B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合過程，可選用滅活的仙臺病毒，A正確；B、AFP多次注射小鼠的目的是使其體內(nèi)產(chǎn)生所需B淋巴細胞數(shù)量增加，B錯誤；C、雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)時，不會表現(xiàn)出貼壁生長和接觸抑制現(xiàn)象，C錯誤；D、患者肝部細胞癌變后，AFP增加，細胞膜上的糖蛋白數(shù)量減少，D錯誤。故選A。7.科研人員利用種間體細胞核移植技術(shù)培育小郊狼的流程如下圖。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.圖中①是雄原核，②是透明帶B.③可以發(fā)育到原腸胚，對其內(nèi)胚層進行切割移植C.去核的實質(zhì)是去除紡錘體-染色體復(fù)合物D.代孕家犬對移植的胚胎無免疫排斥，因此移植后無需檢查〖答案〗C〖祥解〗動物細胞核移植技術(shù)指的是將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體；用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物，原理是動物細胞核的全能性；動物細胞核移植可分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植?！驹斘觥緼、圖中①是第一極體，②是透明帶，A錯誤；B、③可以發(fā)育到桑葚胚或囊胚，對其進行切割移植，B錯誤；C、減數(shù)分裂Ⅱ中期（MⅡ期）卵母細胞中的“核”其實是紡錘體-染色體復(fù)合物，圖中“卵母細胞去核”中的“去核”指的是去除紡錘體-染色體復(fù)合物，C正確；D、代孕家犬對移植的胚胎無免疫排斥，移植后仍需進行妊娠檢查，D錯誤。故選C。8.如圖為豬輸卵管上皮細胞培養(yǎng)過程示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.甲→乙和丙→丁過程需要用胃蛋白酶處理B.丙為原代培養(yǎng)，丁為傳代培養(yǎng)，都需要在添加血清的合成培養(yǎng)基中進行C.為保證無菌的環(huán)境，需要定期更換培養(yǎng)液，清除代謝物D.為避免培養(yǎng)過程中的雜菌污染，丙、丁過程中培養(yǎng)瓶蓋必須始終旋緊〖答案〗B〖祥解〗動物細胞培養(yǎng)過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。【詳析】A、由于動物細胞間存在粘連蛋白，故甲→乙和丙→丁過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，分散成單個細胞，該過程中不能用胃蛋白酶處理，A錯誤；B、由圖可知，丙為原代培養(yǎng)，丁為分瓶之后的傳代培養(yǎng)，因為對動物細胞培養(yǎng)所需要的營養(yǎng)尚不明確，二者都需在添加血清的合成培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，B正確；C、為保證無菌環(huán)境，需要對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理以及在無菌環(huán)境下進行操作，C錯誤；D、為避免培養(yǎng)過程中的雜菌污染，保證其氣體需要，丙、丁過程中需松動培養(yǎng)瓶蓋，將其置于含95%空氣和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，D錯誤。故選B。9.下列關(guān)于細胞工程技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯誤的是（）A.改變誘導(dǎo)因素能使iPS細胞分化形成更多類型的細胞B.用莖尖培育脫毒草莓，因為細胞分裂旺盛，易誘發(fā)突變C.制備產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細胞必須進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測D.燒傷患者選擇自體皮膚生發(fā)層細胞進行培養(yǎng)移植，不會引起免疫排斥〖答案〗B〖祥解〗細胞工程是生物工程的一個重要方面?？偟膩碚f，它是應(yīng)用細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的理論和方法，按照人們的設(shè)計藍圖，進行在細胞水平上的遺傳操作及進行大規(guī)模的細胞和組織培養(yǎng)。當(dāng)前細胞工程所涉及的主要技術(shù)領(lǐng)域有細胞培養(yǎng)、細胞融合、染色體操作及基因轉(zhuǎn)移等方面。通過細胞工程可以生產(chǎn)有用的生物產(chǎn)品或培養(yǎng)有價值的植株，并可以產(chǎn)生新的物種或品系。【詳析】A、誘導(dǎo)因素能誘導(dǎo)iPS細胞分化，所以改變誘導(dǎo)因素能使iPS細胞分化形成更多類型的細胞，A正確；B、用莖尖培育脫毒草莓，因為莖尖細胞幾乎不含病毒，B錯誤；C、制備產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細胞必須進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，C正確；D、自身細胞不會引起免疫排斥，D正確。故選B。10.如圖為4種黏性末端及2種限制酶的識別序列和切割位點。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.限制性內(nèi)切核酸酶都是從原核生物中分離出來的B.黏性末端①與②，③與④能連接在一起C.a酶和b酶切割后連接形成的序列能再一次被它們切割D.獲取一個目的基因需限制酶切割2次，共產(chǎn)生2個游離的磷酸基團〖答案〗B〖祥解〗關(guān)于限制酶，可以從以下幾方面把握：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來；（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、限制酶主要是從原核生物中分離純化出來的，A錯誤；B、黏性末端①與②相同能互補配對，③與④黏性末端相同能互補配對，故黏性末端①與②，③與④能連接在一起，B正確；C、a酶和b酶切割后產(chǎn)生的黏性末端相同可以連接在一起，但是連接之后的堿基序列與原來均不同，由于限制酶具有專一性（識別特定的序列從特定的位點切割），故a酶和b酶切割后連接形成的序列不能再一次被它們切割，C錯誤；D、獲取一個目的基因需限制酶切割2次，水解4個磷酸二酯鍵，共產(chǎn)生4個游離的磷酸基團，D錯誤。故選B。11.用三種限制酶處理大腸桿菌質(zhì)粒并進行電泳，結(jié)果如圖。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.質(zhì)粒是獨立于原核細胞擬核或真核細胞染色體以外的DNA分子B.將提取的質(zhì)粒溶于2mol/L的NaCl溶液后，可用二苯胺試劑進行鑒定C.質(zhì)粒上沒有限制酶1和2的切割位點，而有限制酶3的切割位點D.在電場的作用下，DNA分子會向著與它所帶電荷相反的電極移動〖答案〗C〖祥解〗DNA的粗提取和鑒定：利用DNA不溶于酒精，某些蛋白質(zhì)溶于酒精，以及DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，可以將DNA與蛋白質(zhì)分離開；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑?！驹斘觥緼、質(zhì)粒是獨立于真核細胞細胞核或原核細胞擬核DNA之外具有自我復(fù)制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子，A正確；B、由于DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度較大，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色，所以將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺試劑在沸水條件進行鑒定，B正確；C、因為質(zhì)粒的本質(zhì)是環(huán)狀的DNA，限制酶Ⅰ和Ⅱ處理后電泳只有一條條帶，可能是該質(zhì)粒上有一個切割位點，也可能沒有切割位點，C錯誤；D、DNA帶負電，電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理，D正確。故選C。12.下列關(guān)于哺乳動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，錯誤的是（）A.受精時，防止多精入卵的兩道屏障是透明帶反應(yīng)和卵細胞膜反應(yīng)B.卵裂期每個細胞的核質(zhì)比逐漸增大，胚胎中DNA總量逐漸增加C.可用發(fā)育至桑葚胚或囊胚階段的胚胎進行胚胎移植D.可根據(jù)滋養(yǎng)層細胞減數(shù)分裂I中期染色體的形態(tài)鑒定性別〖答案〗D〖祥解〗哺乳動物胚胎發(fā)育的重要階段（1）卵裂期：在透明帶內(nèi)進行的，特點是細胞分裂方式為有絲分裂，細胞的數(shù)量不斷增加，但胚胎的總體積并不增加，或略有縮小；（2）桑椹胚：32個細胞左右的胚胎[之前所有細胞都有發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細胞]；（3）囊胚：細胞開始分化，其中個體較大的細胞叫內(nèi)細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔[注：囊胚的擴大會導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化]；（4）原腸胚：內(nèi)細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。[細胞分化在胚胎期達到最大限度【詳析】A、受精時，阻止多精入卵的第一道道屏障是透明帶反應(yīng)，第二道屏障是卵細胞膜反應(yīng)，A正確；B、從受精卵到囊胚的發(fā)育為卵裂期，卵裂期因細胞有絲分裂導(dǎo)致細胞數(shù)量增加，但胚胎總體積并不增大，所以每個細胞的核質(zhì)比增大，胚胎中DNA因細胞數(shù)量的增加而增加，B正確；C、在胚胎移植中，選擇桑葚胚或囊胚期的胚胎進行移植較易成功，因為此時的胚胎處于游離狀態(tài)，同時此時的胚胎全能性較高，C正確；D、囊胚分為內(nèi)細胞團和滋養(yǎng)層，其中滋養(yǎng)層將來發(fā)育為胎膜和胎盤，但這發(fā)生在囊胚期之后，可用于性別鑒定，而內(nèi)細胞團將會發(fā)育成完整的胚胎，但滋養(yǎng)層細胞不會進行減數(shù)分裂，D錯誤。故選D。13.天然熒光素酶不能高效催化人工合成的熒光素（DTZ）發(fā)光。研究人員采用蛋白質(zhì)工程解決該問題。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.通過化學(xué)誘變劑可定向改造天然熒光素酶的基因序列B.蛋白質(zhì)工程的實質(zhì)是通過改變氨基酸的結(jié)構(gòu)來改變熒光素酶的功能C.改造后的熒光素酶在一定條件下催化DTZ發(fā)光是將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能D.可用PCR方法檢測突變的熒光素酶基因是否翻譯成蛋白質(zhì)〖答案〗C〖祥解〗蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）。【詳析】A、通過化學(xué)誘變劑可以讓天然熒光素酶的基因序列進行隨機突變，但化學(xué)誘變通常是不定向的，A錯誤；B、蛋白質(zhì)工程的實質(zhì)是通過改造基因結(jié)構(gòu)來改造或制造新的蛋白質(zhì)，B錯誤；C、改造后的熒光素酶在一定條件下催化DTZ發(fā)光是將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能，C正確；D、PCR

方法主要用于檢測DNA的存在或者染色體DNA上是否插入目的基因，檢測目的基因是否翻譯為蛋白質(zhì)的方法為抗原﹣抗體雜交，D錯誤。故選C。14.下列關(guān)于生物技術(shù)安全性和倫理的敘述，正確的是（）A.生物技術(shù)可廣泛應(yīng)用在人類自身基因組改造和新物種創(chuàng)造中B.生殖性克隆人破壞了人類遺傳多樣性的天然屬性，不利于人類的生存和進化C.鼓勵發(fā)展基因編輯技術(shù)來設(shè)計試管嬰兒解決不孕問題D.轉(zhuǎn)基因食品中的外源基因經(jīng)過食用后會進入人體細胞并整合到人體的基因組中〖答案〗B〖祥解〗1、生殖性克隆指將克隆技術(shù)用于生育目的，即用于產(chǎn)生人類個體。治療性克隆指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞和組織(皮膚、神經(jīng)或肌肉等)用于治療性移植。2、中國政府:禁止生殖性克隆人，堅持四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗，不反對治療性克隆人。3、轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全(滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變)、生物安全(對生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)?！驹斘觥緼、人類自身基因組改造和新物種創(chuàng)造中，要嚴防濫用，A錯誤；B、生殖性克隆人破壞了人類遺傳（基因）多樣性的天然屬性，不利于人類的生存和進化，B正確；C、基因編輯技術(shù)存在安全風(fēng)險，不可濫用設(shè)計試管嬰兒技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒，C錯誤；D、轉(zhuǎn)基因食品中的外源基因經(jīng)過食用后會被消化分解，不會進入人體細胞并整合到人體的基因組中，D錯誤。故選:B。二、多項選擇題：本部分包括4題，每題3分，共計12分。每題有不止一個選項符合題意。每題全選對者得3分，選對但不全的得1分，錯選或不答的得0分。15.科研人員進行了土壤中自生固氮菌的分離，部分實驗