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文檔簡介

第一章概論

1.實驗診斷:醫(yī)生的醫(yī)囑通過臨床實驗室分析所得到的信息為預(yù)防、診斷、治療疾病和預(yù)后評價所用的

醫(yī)學(xué)臨床活動。

2.危急值:某些檢驗結(jié)果出現(xiàn)異常超過一定界值時,可能危及患者的生命,醫(yī)生必須緊急處理,這些檢

測界值稱之危急值。

實驗診斷的基本概念:指醫(yī)師的醫(yī)囑通過臨床實驗室分析所得到的信息為預(yù)防、治療和預(yù)

后評價所用的醫(yī)學(xué)臨床活動。包括實驗室前、臨床實驗室和實驗室后3個部分。

實驗診斷學(xué)的主要內(nèi)容:L臨床血液學(xué)檢驗2?體液與排泄物的檢驗3?生化檢驗4?免

疫學(xué)檢驗5?病原體檢查

實驗診斷學(xué)發(fā)展的五方面變化:自動化標(biāo)準(zhǔn)化分子化個體化床旁化

個體化診斷:是指被檢個體的基因背景及病理生理狀態(tài)的綜合分析的結(jié)果,應(yīng)用于個體的預(yù)

防.診斷.治療上。

驗診斷質(zhì)量體系和影響因素

1)完善質(zhì)量保證體系:①室內(nèi)質(zhì)量控制②室間質(zhì)量控制③實驗室質(zhì)量控制

2)影響實驗診斷的因素:①實驗室前因素②實驗室因素③實驗室后因素

3)

標(biāo)本的采集與處理★(重點?。。?/p>

基本要求:完整-保持標(biāo)本與剛離開人體時的質(zhì)量和數(shù)量、新鮮-及時檢測才能“完整

1)血液標(biāo)本

種類:全血血漿血清

采血部位:毛細(xì)血管(嬰兒,指端/耳垂/足跟)靜脈(大部分)動脈(血氣分析儀)

嚴(yán)禁從輸液管中采血-

采血時間:空腹采血(禁食8小時,臨床生化)特定時間采血(激素、藥物)

隨時采血(急診)

采集后處理:真空采血管

(①抗凝劑草酸鹽:與鈣離子結(jié)合2mg/ml血液;

枸檬酸鈉:與鈣離子結(jié)合5mg/ml;

<肝素:抑制凝血酶原一凝血酶0.1-0.2mg/ml

|EDTA-Naz:l-2mg/ml與鈣絡(luò)合

②及時送檢和檢查

I③微生物檢驗的血標(biāo)本:盡可能在使用抗生素前采樣并立即注入血培養(yǎng)皿

保存:4°C,血清分離后凍存,-30°C,3-6個月,-80°C,2-3年。(不可全血凍存)

■冰浴標(biāo)本-血氨保溫標(biāo)本-冷凝集素避光標(biāo)本-B12

2)骨髓標(biāo)本:形態(tài)學(xué)檢查(立即制片-干燥)培養(yǎng)(無菌操作,立即送檢)

3)排泄物體液標(biāo)本

中段尿標(biāo)本(女性尤為重要)糞便標(biāo)本痰標(biāo)本

5.實驗診斷的應(yīng)用和評價

1)正確選擇檢查項目確定診斷輔助診斷鑒別診斷

遵循四個原則:針對性有效性經(jīng)濟(jì)性及時性

2)常用的診斷性實驗的評價指標(biāo):診斷靈敏度、診斷特異性、診斷準(zhǔn)確度、連續(xù)定量數(shù)據(jù)

分析

敏感性=a/(a+c)與金標(biāo)準(zhǔn)一致的%

特異性=d/(b+d)真陽性

準(zhǔn)確性=(a+d)/N真陰性

■陽性預(yù)測值=a/(a+b)檢測結(jié)果中真陽性

■陰性預(yù)測值=d/(c+d)檢測結(jié)果中真陰性

抽血時試管的順序無菌培養(yǎng)管的采集

1、紅帽管(普通管)2、黃帽管(凝膠管)3、藍(lán)帽管(枸椽酸鈉)

4、黑帽管(肝素)5、紫帽管(EDTAK2)。

抽血管的選用

■凝血四項——藍(lán)帽專用管(枸檬酸鈉、血1.8ml)

■血沉測定一一藍(lán)帽專用管(枸檬酸鈉、血1.6mL)

■糖化血紅蛋白——紫帽管(EDTAK2、血量2mL)

■血常規(guī)——紫帽管紫DTAK2、血量2mL)

生化全套的項目一黃帽管(分離膠真空采血管、血量4mL、顛倒混勻十次)

其它均用普通管一一紅帽管

實驗診斷的參考范圍與醫(yī)學(xué)決定水平

■正常值-正常范圍

■參考值、參考值范圍(平均值加減兩個標(biāo)準(zhǔn)差)、臨界值CK194.0、3.39

確定:95%、99%可信度(單側(cè)、雙側(cè))X±2SDROC

醫(yī)學(xué)決定水平:是指不同于參考值的另一些限值,通過觀察測定值是否高于或低于這職限值,

可在疾病診斷中起排除或確認(rèn)的作用,或?qū)δ承┘膊∵M(jìn)行分級或分類,或?qū)︻A(yù)后作出估

計,以提示醫(yī)師在診斷上應(yīng)該采取何種處理方式或決定采取某種治療措施。包括臨界值

和危機(jī)值。

危機(jī)值--是指某些檢驗結(jié)果出現(xiàn)異常超過一定界值時,可能危及患者的生命,醫(yī)師必須立

即處理,稱之為危機(jī)值(超生命警戒線)

循證檢驗醫(yī)學(xué)(EBLM)就是在大量可靠的臨床應(yīng)用資料和經(jīng)驗的基礎(chǔ)上(證據(jù)),研究檢驗項目

臨床應(yīng)用的效果。為臨床診斷、療效觀察、病情轉(zhuǎn)歸等方面提供最有效、最實用、最經(jīng)

濟(jì)的檢驗項目及其組合。

上述的證據(jù)應(yīng)該是新的、良好的、可靠的、有說服力的。

實驗室質(zhì)量體系:對臨床實驗室質(zhì)量要求是:檢驗結(jié)果可靠(可重復(fù)),準(zhǔn)確并迅速.

質(zhì)量(管理)體系Q(M)S:五個過程:質(zhì)量規(guī)劃-質(zhì)量團(tuán)隊-質(zhì)量監(jiān)測-質(zhì)量改進(jìn)-質(zhì)量審核

第二章臨床血液學(xué)檢測

3.網(wǎng)織紅細(xì)胞:胞體直徑7-8阿,活體染色后,胞質(zhì)中出現(xiàn)藍(lán)綠色或深藍(lán)色網(wǎng)點狀結(jié)構(gòu)

4.溶血性貧血:是由于各種原因使紅細(xì)胞生存時間縮短,破壞增多或加速,而骨髓的代償造血功能不足

以補償損耗時所發(fā)生的一類貧血。

5.紅細(xì)胞酶病:紅細(xì)胞酶缺陷所致溶血性貧血又稱紅細(xì)胞酶病,指參與紅細(xì)胞代謝的酶由于基因缺陷,

導(dǎo)致活性改變而發(fā)生溶血的?組疾病

6.自身免疫性溶血性貧血AIHA:系統(tǒng)內(nèi)免疫發(fā)生異常,產(chǎn)生自身抗體或補體,結(jié)合在紅細(xì)胞膜上,紅細(xì)

胞破壞加速而引起的?組溶血性貧血。

7.血型:血型是人類血液的一種遺傳性狀,各種曲液成分包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板及某些血漿蛋白

在個體之間均具有抗原成分的差異,受獨立的遺傳基因控制。

8.Rh血型:將恒河猴(Rhesusmonkey)的紅細(xì)胞注入家兔體內(nèi),產(chǎn)生了抗恒河猴紅細(xì)胞的抗體。用含

有這種抗體的血清與人的紅細(xì)胞混合,發(fā)現(xiàn)許多人的紅細(xì)胞被凝集,說明人類紅細(xì)胞上具有與恒河猴

紅細(xì)胞同樣的抗原

第一節(jié)血液一般檢測

掌握要點

1.紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞總數(shù)及其分類計數(shù)的參考值和常見臨床意義;

2.概念:貧血、核左(右)移、網(wǎng)織紅細(xì)胞、類白血病反應(yīng)、ESR、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW、溶血

性貧血;

3.溶血性貧血檢驗項目的選擇

血液學(xué)的一般檢測包括血液細(xì)胞成分的常規(guī)檢測(簡稱為血液常規(guī)檢測)、網(wǎng)織紅細(xì)胞檢

測和紅細(xì)胞沉降率檢測。

血常規(guī)包括:血紅蛋白測定、紅細(xì)胞計數(shù)、紅細(xì)胞平均值測定和紅細(xì)胞形態(tài)檢測;白細(xì)胞

計數(shù)及分類計數(shù);血小板計數(shù)、血小板平均值測定和血小板形態(tài)檢測。

一、紅細(xì)胞的檢測和血紅蛋白測定

「參考值」?。。。。。ㄕ莆眨?/p>

成人(4-10)*1()9/L新生兒(15-20)*1()9/L6個月-2歲(11T2)*10'/L

「分類計數(shù)及臨床意義」?。。?

百分?jǐn)?shù)(%)絕對值(XIO7D

中性粒細(xì)桿0~50.04~0.0

胞5

分口-卜核50~702~7

嗜酸性粒細(xì)胞0.5~50.05P.5

嗜堿性粒細(xì)胞0~10~0.1

淋巴細(xì)胞20~400.8~4單核細(xì)胞3~80.12~0.8

①粒細(xì)胞

中性粒細(xì)胞

臨床意義!?。。ㄕ莆眨?/p>

1、【中性粒細(xì)胞增多工

生理情況下,下午較早晨高。妊娠后期及分娩時,劇烈運動后,飽餐或淋浴后高溫或嚴(yán)

寒可有短暫性升高。

病理性增高:

1)急性感染:特別是化膿性球菌.在某些急重度感染時,白細(xì)胞不但不高反而下降。

2)嚴(yán)重的組織損傷及大量血細(xì)胞破壞

3)急性大出血

4)急性中毒

5)白血病、骨髓增生性疾病及惡性腫瘤

2、【中性粒細(xì)胞減少】中性粒細(xì)胞<1.5*10"稱為粒細(xì)胞減少癥

<0.5*109稱為粒細(xì)胞缺乏癥

原因p)感染:特別是革蘭陰性桿菌感染

2)血液系統(tǒng)疾?。贺氀?/p>

<3)物理、化學(xué)因素?fù)p傷:X線放射性核素等物理因素等

4)單核一吞噬細(xì)胞系統(tǒng)功能亢進(jìn)

I)自身免疫性疾病

3、【中性粒細(xì)胞核相變化】

核左移:周圍血中出現(xiàn)不分葉核粒細(xì)胞(包括桿狀核粒細(xì)胞、晚幼粒、中幼?;蛟缬琢<?xì)

胞等)的百分率增高(超過5%)時,稱為核左移。見于感染,特別是急性化膿性感

染、急性失血、急性中毒及急性溶血反應(yīng)。類白血病也可以出現(xiàn)。

核右移:周圍血中若中性粒細(xì)胞核出現(xiàn)5葉或更多分葉,其百分率超過3%者,稱為核右

移。主要見于巨幼細(xì)胞貧血及造血功能衰退,也可見于應(yīng)用抗代謝藥物如阿糖胞普

6-疏基喋吟等。在疾病進(jìn)展期出現(xiàn)核右移的現(xiàn)象提示預(yù)后不良。

4、【中性粒細(xì)胞形態(tài)異?!?/p>

1)中性粒細(xì)胞中毒性改變:在嚴(yán)重傳染性疾病、化膿性感染、敗血癥、惡性腫瘤、中

毒及大面積燒傷等病理情況下。可出現(xiàn):

細(xì)胞大小不均

中毒顆粒:中性粒細(xì)胞胞質(zhì)中出現(xiàn)粗大顆粒,大小不均,分布不均,染色呈深紫

紅或紫黑色。

空泡形成:胞質(zhì)或胞核可見單個或多個大小不等的空泡,可能是細(xì)胞質(zhì)發(fā)生脂

肪變性所致。

杜勒小體:是中性粒細(xì)胞胞質(zhì)中毒性變化而保留的局部嗜堿性區(qū)域。圓形或梨形

呈云霧狀天藍(lán)色或藍(lán)黑色,直徑l-2um

核變性:中性粒細(xì)胞胞核出現(xiàn)固縮,溶解及碎裂的現(xiàn)象。

2)巨多分葉核中性粒細(xì)胞:胞體較大,核分葉過多,常超過5葉甚至在10葉以上。多

見于巨幼細(xì)胞貧血或應(yīng)用抗代謝藥物后。

3)棒狀小體:為白細(xì)胞胞質(zhì)中出現(xiàn)的紅色細(xì)桿狀物質(zhì),一個或數(shù)個,長約l-6um,故

稱為此。棒狀小體一旦出現(xiàn)在細(xì)胞中,就可擬診為急性白血病。急性淋巴細(xì)胞白

血病無此種小體,而急性粒細(xì)胞白血病和急性單核細(xì)胞白血病可見。

4)其他:Pelger-Huet畸形、Chediak-Higashi畸形、Alder-Reilly畸形、May-Hegglin

畸形

嗜酸性粒細(xì)胞

臨床意義:增多:過敏性疾病、寄生蟲病、皮膚病、血液病、某些惡性腫瘤、傳染病

減少:傷寒、副傷寒初期、大手術(shù)、燒傷

嗜堿性粒細(xì)胞

臨床意義:增多:過敏性疾病、血液病(慢性粒細(xì)胞白血病嗜酸嗜堿都增高)、惡性腫

瘤、其他如糖尿病等

減少:無意義

淋巴細(xì)胞?。。。嚎煞譃榇罅馨图?xì)胞(10-15um10%)和小淋巴細(xì)胞(6T0um90%)

『參考值J

「臨床意義」?。。。。ㄕ莆眨?/p>

【淋巴細(xì)胞增多】兒童期淋巴細(xì)胞會生理性增多。

病理性增多見于:

1)感染性疾病:主要為病毒感染

2)腫瘤性疾?。杭毙院吐粤馨图?xì)胞白血病、淋巴瘤

3)急性傳染性疾病的恢復(fù)期

4)移植排斥反應(yīng):移植物抗宿主反應(yīng)(GVI1R)或移植物抗宿主?。℅VHD)

再生障礙性貧血、粒細(xì)胞減少癥和粒細(xì)胞缺乏癥時中性粒細(xì)胞減少,故淋巴細(xì)胞比

例相對增高,但淋巴細(xì)胞的絕對值不高。

【淋巴細(xì)胞減少】主要見于應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素、烷化劑、抗淋巴細(xì)胞球蛋白等治療以及放

射線損傷、免疫缺陷性疾病、丙種球蛋白缺乏癥等。

【異形淋巴細(xì)胞】分為3型,在正常人體中可見,但不超過2%

1)I型(泡沫型)胞體較大,呈橢圓形或者圓形,核偏位,呈圓形腎形或不規(guī)則形,

核染質(zhì)呈粗網(wǎng)狀或小塊狀、無核仁。胞質(zhì)豐富,呈深藍(lán)色,含有大小不等的空泡,

使胞質(zhì)呈泡沫狀。

2)II型(不規(guī)則型)胞體較I大,細(xì)胞外形常不規(guī)則,似單核細(xì)胞,故也成為單核

細(xì)胞型。胞質(zhì)豐富,呈淡藍(lán)色或淡藍(lán)灰色,可有少量嗜天青顆粒,一般無空泡。

3)III型(幼稚型)胞體大,直徑15T8um圓形或橢圓形,胞質(zhì)量多,藍(lán)色或深藍(lán)色,

一般無顆粒,有時有少許小空泡。

異型淋巴細(xì)胞增多常見于「感染性疾病

I藥物過敏

I輸血、血液透析或體外循環(huán)術(shù)后

〔其他疾病如免疫性疾病、粒細(xì)胞缺乏癥、放射治療

單核細(xì)胞

臨床意義:增多:生理性增多見于嬰幼兒或兒童

病理性增多見于某些感染和某些血液病

減少:(1)急性緊張疾?。?)糖皮質(zhì)激素治療(3)再生障礙性貧血

(4)白血?。?)化學(xué)治療和免疫抑制劑

類白血病反應(yīng):指機(jī)體對某些刺激因素所產(chǎn)生的類似白血病表現(xiàn)的血象反應(yīng)。分為白細(xì)胞增

多型(中性粒細(xì)胞型、嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞型、單核細(xì)胞型)和白細(xì)胞不增多型

三.網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測

網(wǎng)織紅細(xì)胞:是晚幼紅細(xì)胞脫核后的細(xì)胞。由于胞質(zhì)內(nèi)還殘存核糖體等嗜堿性物質(zhì),煌焦油

藍(lán)或新亞甲藍(lán)染色,呈現(xiàn)淺藍(lán)或深藍(lán)色的網(wǎng)織狀細(xì)胞而得名。

一、網(wǎng)織紅細(xì)胞測定

臨床意義:增多:表示骨髓紅細(xì)胞系增生旺盛

減少:骨髓造血功能減低。

二、網(wǎng)織紅細(xì)胞生成指數(shù)RPI:

RPI(網(wǎng)織紅細(xì)胞生產(chǎn)指數(shù),網(wǎng)織紅細(xì)胞生成指數(shù))

參考值:RPI=2

臨床意義:RPI>3溶血性貧血或急性失血性貧血

RPK2骨髓增生低下或貧血造成的紅細(xì)胞系統(tǒng)成熟障礙

四.血小板檢測

參考值:(100^300)X109/LO

血小板減少(<100Xl()9/L):生成障礙、破壞或消耗增多、分布異常。

血小板增多0400X109/L):原發(fā)性增多、繼發(fā)性增多。

血小板平均容積(MPV):代表單個血小板的平均容積,參考值7~11門。

血小板分布寬度(PDW):反映血小板容積大小的離散度,用所測單個血小板容積大小的變異

系數(shù)(CV%)表示,參考值15%~17%。

五.紅細(xì)胞沉降率的測定

紅細(xì)胞沉降率(ESR或血沉率)是指紅細(xì)胞在一定條件下沉降的速率,它受血漿中各種蛋白

的比例改變以及紅細(xì)胞數(shù)量和形狀的影響(紅細(xì)胞減少時血沉加快,球形紅細(xì)胞增多血

沉減慢)

臨床意義:

血沉加快:

生理性加快:12歲以下兒童60歲以上高齡者婦女月經(jīng)期妊娠3個月以上者

病理性加快:各種炎癥性疾病、損傷及壞死、惡性腫瘤、各種原因?qū)е卵獫{球蛋白相對或

絕對增高、其他如部分貧血患者

血沉減慢:一般臨床意義較小。嚴(yán)重貧血

7.紅細(xì)胞有關(guān)指標(biāo)

(1)紅細(xì)胞壓積:紅細(xì)胞比容(HCT)又稱血細(xì)胞壓積(PCV),是指紅細(xì)胞在血液中

所占容積的比值。用抗凝血在一定條件下離心沉淀即可測得。

臨床意義:增高:各種原因所致的血液濃縮,血細(xì)胞比容常在0.5以上

各種原因所致的紅細(xì)胞絕對性增多

減少:各種貧血。

(2)平均紅細(xì)胞比容(MCV)指每個紅細(xì)胞的平均體積

MCV=每升血液中的血細(xì)胞比容/每升血液中紅細(xì)胞數(shù)

(3)平均紅細(xì)胞血紅蛋白量(MCH)指每個紅細(xì)胞內(nèi)所含血紅蛋白的平均量,以皮克(pg)

為單位

MCH=每升血液中血紅蛋白量/每升血液中紅細(xì)胞數(shù)

(4)平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)每升血液(紅細(xì)胞?)中平均所含血紅蛋白濃

度(克數(shù))以g/L表示

卜口仄=每升血液(紅細(xì)胞?)中血紅蛋白量/每升血液(紅細(xì)胞?)中血細(xì)胞比容(?)

(5)紅細(xì)胞體枳分布寬度RDW:是反映外周血紅細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù),用于貧血診

斷。

小細(xì)胞低色素性貧血:MCV<80fl,MCH<27pg,MCHC<32%

白細(xì)胞體積分布直方圖:

第一群是小細(xì)胞區(qū):單核細(xì)胞

第二群是中間細(xì)胞區(qū):單核細(xì)胞,原始細(xì)胞,幼稚細(xì)胞,嗜酸性粒細(xì)胞,嗜堿性粒細(xì)胞

第三群是大細(xì)胞區(qū):中性分葉核粒細(xì)胞、桿狀核、晚幼粒細(xì)胞。

第二節(jié)溶血性貧血的實驗室檢測

1.溶血性貧血的概念:是指各種原因?qū)е录t細(xì)胞生存時間縮短,破壞增多或加速而骨髓造

血功能不能相應(yīng)代償而發(fā)生的一類貧血。紅細(xì)胞在血管內(nèi)破壞者為血管內(nèi)溶血,在血管

外破壞者為血管外溶血。

2.溶血性貧血的分類

(1)根據(jù)溶血場所

-血管內(nèi)溶血:RBC在血管內(nèi)破壞,見于DIC、機(jī)械性微血管病變、燒傷、輸血

?血管外溶血:RBC在單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬或破壞

〔原位溶血:幼RBC在骨髓中溶血,如AL、巨幼貧

急性溶血慢性溶血

溶血類型血管內(nèi)血管外

起病緩慢

全身癥狀重,周身疼痛,發(fā)熱,輕微

貧血有有

黃疸有有

肝脾腫大不明顯明顯

尿色醬油樣尿不明顯

并發(fā)癥嚴(yán)重者心衰、休克、急腎衰、腦水膽結(jié)石,肝功損害

月中

(2)根據(jù)發(fā)生機(jī)制

紅細(xì)胞內(nèi)在缺陷(遺傳因素)、紅細(xì)胞外在因素

Hb的分解代謝:在單核-吞噬系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行

RBC破壞釋放出Hb,游離Hb-未結(jié)合膽紅素一結(jié)合膽紅素一尿(糞)膽原一尿(糞)膽素

溶血后發(fā)生的病生變化

血紅蛋白大量分解變化、紅細(xì)胞異常反應(yīng)、紅細(xì)胞代償性增生

臨床表現(xiàn)

?急性:發(fā)熱、畏寒,可出現(xiàn)Hb尿,腎功能改變

?慢性:貧血、黃疸、脾腫大免疫指標(biāo)異常,膽紅素代謝異常

3.常用溶血性貧血的實驗室檢查

(1)溶血性貧血的篩查檢測

1)血漿游離血紅蛋白測定意義:見于血管內(nèi)溶血t

2)血清結(jié)合珠蛋白檢測意義:見于血管內(nèi)溶血及嚴(yán)重的血管外溶血I

3)血漿高鐵血紅素清蛋白檢測:

正常結(jié)果:陰性意義:陽性見于嚴(yán)重血管內(nèi)溶血

4)含鐵血黃素尿試驗(Rous試驗)

血紅蛋白在腎小管上皮細(xì)胞代謝為含鐵血黃素,脫落后鐵染色法查出

正常結(jié)果:陰性

意義:陽性見于慢性血管內(nèi)溶血,常見陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿

5)紅細(xì)胞壽命測定

正常紅細(xì)胞半衰期為25?32天.溶血性貧血疇常<15天.是確定溶血性貧血

的可靠方法。

(2)紅細(xì)胞膜缺陷的檢測

1)紅細(xì)胞滲透脆性試驗

檢測紅細(xì)胞在不同濃度低滲NaCl溶液中的抵抗力,即檢測紅細(xì)胞滲透脆性。結(jié)果以被檢紅

細(xì)胞最小抵抗力(開始溶血時氯化鈉的濃度)和最大抵抗力(完全溶血時氯化鈉的濃度)

表示。

參考值:開始溶血:0.42^0.46%(4.2"4.6g/L)NaCl溶液

完全溶血0.28飛.34%(2.8~3.4g/L)NaCl溶液

臨床意義:脆性增高:開始溶血或完全溶血時氯化鈉的濃度較正常對照高。遺傳性球形細(xì)胞

增多癥等。

脆性減低:海洋性貧血等。

2)紅細(xì)胞孵育滲透脆性試驗

臨床意義:常用于輕型遺傳性球形細(xì)胞增多癥、遺傳性非球形細(xì)胞溶貧的診斷和鑒別診斷

3)自身溶血試驗及糾正試驗

臨床意義用于遺傳球、遺傳性非球形細(xì)胞溶血的鑒別診斷

(3)紅細(xì)胞酶缺陷檢測

紅細(xì)胞酶缺陷所致溶血性貧血又稱紅細(xì)胞酶病,是指參與紅細(xì)胞代謝(主要是糖代謝)的酶由

于基因缺陷,導(dǎo)致活性改變而發(fā)生溶血的一組疾病.

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Ma.iMccscMU.

1)高鐵血紅蛋白還原試驗

臨床意義:減低一一蠶豆病和伯氨喳型藥物溶血性貧血者(G6PD缺陷)

2)氟化物一一抗壞血酸試驗

臨床意義:1.正常血液要在幾小時之后才變暗色2.純合子G6PD缺乏的血液變成棕色(巧克

力色),在2小時內(nèi)即變色,雜合子要3-4h變色。

3)變性珠蛋白小體生成試驗

臨床意義:G6P缺陷癥、不穩(wěn)定Hb、HbH病等常高于45%

4)G6PD熒光斑點試驗和活性測定

5)丙酮酸激酶熒光篩選試驗和活性測定

(4)珠蛋白生成異常的檢測

1)血紅蛋白電泳

臨床意義:曲肌增高:是診斷B輕型地中海貧血的重要依據(jù)。

HbA2減低:缺鐵性貧血及鐵粒幼細(xì)胞貧血。

2)胎兒血紅蛋白酸洗脫試驗

臨床意義:臍帶血、新生兒、嬰兒陽性成人小于1%

地中海貧血輕者少數(shù)紅細(xì)胞陽性:地中海貧血重癥陽性細(xì)胞增多

3)胎兒血紅蛋白測定或HbF堿變性試驗

4)UbAz定量測定診斷輕型B地貧的重要依據(jù)

5)限制性內(nèi)切酶譜分析

Hb病基因診斷

(5)自身免疫性溶血性貧血檢測

1)Coombs試驗(抗人球蛋白試3僉)

檢查紅細(xì)胞表面的或血清中游離的不完全抗體,用于診斷AlHAo

直接試驗:測定吸附于紅細(xì)胞表面的不完全抗體

1.正常人:陰性

2.直接反應(yīng)陽性,最常見于AIHA(其他有藥物誘發(fā)的溶貧、陣發(fā)性冷性Hb尿、新生

兒同種免疫溶血病、SLE、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、惡性淋巴瘤等)。

間接試驗:測定血清中游離的不完全抗體。間接陽性,見于AIHA,正常人為陰性

2)冷凝集試驗

臨床意義:陽性見于冷凝集素綜合癥

3)冷熱雙相溶血試驗

臨床意義:陽性見于陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿PCH患者

(6)陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥PNH有關(guān)檢測

是一種獲得性紅細(xì)胞膜缺陷引起的慢性血管內(nèi)溶血,常在睡眠時加重,伴有發(fā)作性血

紅蛋白尿和全血細(xì)胞減少癥

1)酸化溶血試驗(Ham試驗)

2)蔗糖溶血試驗

是PNH的篩選試驗。陰性常可排除PNH,陽性需再做Ham試驗。陽性率90-91%。

3)蛇毒因子溶血試驗

臨床意義:是特異性PNH試驗,敏感性優(yōu)于Ham試驗

第三節(jié)骨髓細(xì)胞學(xué)檢測

】骨髓細(xì)胞學(xué)檢測的臨床應(yīng)用?。。。。ㄕ莆眨?/p>

1)診斷造血系統(tǒng)疾病

2)診斷某些非造血系統(tǒng)疾病

3)查找某教感染性疾病的病原體

4)提高某些疾病的診斷率

適應(yīng)癥?。。。ㄕ莆眨?/p>

各種血細(xì)胞的數(shù)量異常。

原因不明的肝、脾、淋巴結(jié)腫大。

原因不明的發(fā)熱、惡病質(zhì)。

協(xié)助查找某些病原體或特殊細(xì)胞。

再障、白血病等的療效觀察。

r解淋巴瘤的病變范圍,協(xié)助分期。

禁忌癥!?。。ㄕ莆眨?/p>

血友病是唯一的絕對禁忌癥。

穿刺部位有感染灶。

孕婦及生命體征不穩(wěn)定,生命垂?;颊?/p>

2.骨髓細(xì)胞學(xué)檢測的方法和內(nèi)容?。。。ㄕ莆眨?/p>

估計骨髓有核細(xì)胞增生程度:在低倍鏡下(10X)下觀察,骨髓中成熟紅細(xì)胞與所有有核細(xì)

胞的大致比例,即為骨髓增生程度。

方法:肉眼觀:涂片情況,骨髓小粒、脂肪滴

染色:瑞氏染色,特殊染色

低倍鏡觀察:有核細(xì)胞增生情況,巨核細(xì)胞計數(shù),尋找特殊細(xì)胞或病原體,造血島數(shù)

量及分布情況

油鏡觀察:細(xì)胞形態(tài)及分類,造血島細(xì)胞成分,特殊細(xì)胞的辨認(rèn),巨核細(xì)胞分類計數(shù),

提出形態(tài)學(xué)診斷意見:肯定診斷,符合診斷,提示診斷,無診斷

3血細(xì)胞發(fā)育過程中形態(tài)演變的一般規(guī)律?。。。ㄕ莆眨?/p>

星凝磐遨田

4

1,1先f有.

整W必筋麗i葬[*際紅

少—多-*?少

細(xì)胞消失

染色質(zhì)疏松一緊密是判斷骨髓細(xì)胞是否

處于原始和幼稚

纖細(xì)f粗糙

階段的重要標(biāo)志

核仁明顯一模糊一消失

細(xì)胞核/細(xì)胞質(zhì)比例:由大變小,即由核大質(zhì)少變?yōu)楹诵≠|(zhì)多,巨核細(xì)胞相反

4.血細(xì)胞的正常形態(tài)學(xué)特征

1)紅細(xì)胞系統(tǒng)原紅細(xì)胞、早幼紅細(xì)胞、中幼紅細(xì)胞、晚幼紅細(xì)胞。

2)粒細(xì)胞系統(tǒng)原粒細(xì)胞、早幼粒細(xì)胞、中幼粒細(xì)胞、晚幼粒細(xì)胞、桿狀核粒細(xì)胞、

分葉核粒細(xì)胞。

3)淋巴細(xì)胞系統(tǒng)原淋巴細(xì)胞、幼淋巴細(xì)胞、淋巴細(xì)胞(大、小淋巴細(xì)胞)。

4)漿細(xì)胞系統(tǒng)原漿細(xì)胞、幼漿細(xì)胞、漿細(xì)胞。

5)單核細(xì)胞系統(tǒng)原單核細(xì)胞、幼單核細(xì)胞、單核細(xì)胞、吞噬細(xì)胞

6)巨核細(xì)胞系統(tǒng)原巨噬細(xì)胞、幼巨核細(xì)胞、顆粒型巨核細(xì)胞、

產(chǎn)血小板型巨核細(xì)胞、巨核細(xì)胞裸核

5.血細(xì)胞化學(xué)染色

常用的方法有:

(-)過氧化物酶(POX)染色

臨床意義:區(qū)分急淋或急性髓性;急淋陰性,急粒陽性,急單弱陽性

最具鑒別價值:急淋和急粒、急單

(二)中性粒細(xì)胞磴性磷酸酶染色感

臨床意義:

1.慢性粒細(xì)胞白血病活性減低,積分常為0;類白血病反應(yīng)活性極度增高;骨纖活性中等度

增高。

2.感染性疾病,化膿菌感染活性增高,病毒感染活性減低或正常。

3.急?;钚詼p低,急單活性正?;驕p低,急淋活性增高。

4.再障活性增高,陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿活性減低

5.惡性組織細(xì)胞病活性減低,淋巴瘤、真紅、慢淋,原發(fā)性血小板增多癥活性中等度增

6.腺垂體或腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn),應(yīng)用皮質(zhì)激素,激素等可出現(xiàn)活性增高

(三)非特異性脂酶染色NSE

臨床意義:鑒別急性單核細(xì)胞白血病與急性粒細(xì)胞白血病

(四)糖原染色PAS

結(jié)果:胞質(zhì)中出現(xiàn)紅色物質(zhì)為陽性反應(yīng)。反應(yīng)物可為紅色顆粒裝、小塊狀、或彌漫均勻紅色;

反應(yīng)程度分四個等級,陰性、弱陽性、陽性、強(qiáng)陽性,常用陽性百分率和積分值表示。

臨床意義:

1.紅血病或紅白血病呈強(qiáng)陽性反應(yīng),積分值明顯升高,巨幼貧嚴(yán)重缺鐵貧嚴(yán)重海洋性貧

血,部分病例的個別幼紅細(xì)胞可呈陽性反應(yīng)

2.不典型巨核細(xì)胞的識別,和MDS中的小巨核細(xì)胞,Gaucher細(xì)胞強(qiáng)陽性,Niemann-Pick

陰性,腺癌細(xì)胞強(qiáng)陽性,骨髓轉(zhuǎn)移癌與白血病的鑒別

3.急性白血病類型的鑒別.

急性粒細(xì)胞白血病,原粒細(xì)胞陰性或弱陽性,陽性反應(yīng)物質(zhì)呈彌漫性淡紅色或細(xì)顆粒狀;

急性單核細(xì)胞白血病,白血病性原單核細(xì)胞大多呈陽性反應(yīng),反應(yīng)物質(zhì)彌漫紅色或細(xì)顆粒狀,

部分在胞質(zhì)邊緣處顆粒粗大;

急性淋巴細(xì)胞白血病,白血病性原幼林細(xì)胞陽性反應(yīng),粗顆粒狀或塊狀

(五)鐵染色

結(jié)果:1細(xì)胞外鐵觀察骨髓小粒,存在于單核吞噬系統(tǒng)內(nèi)的儲存鐵(幼紅細(xì)胞之外的鐵)。

陽性反應(yīng)程度分5級,正常為1+—2+,多為2+

2.細(xì)胞內(nèi)鐵觀察幼紅細(xì)胞內(nèi)的鐵。

鐵粒幼紅細(xì)胞:細(xì)小的鐵粒正常情況下幼紅細(xì)胞的細(xì)胞核周圍可有1一5個藍(lán)色細(xì)小的鐵

粒,此鐵粒幼紅胞比例20%—90%;

環(huán)狀鐵粒幼:粗大深染的鐵粒在10個以上,且環(huán)繞幼紅細(xì)胞核排列超過核周徑2/3以上。

臨床意義:

缺鐵性貧血早期外鐵即為陰性,鐵粒幼細(xì)胞百分率減低,常<15%,鐵劑治療后數(shù)天,鐵

粒幼細(xì)胞百分率即上升,外鐵恢復(fù)較慢。

鐵粒幼細(xì)胞性貧血鐵粒幼細(xì)胞增多,環(huán)狀鐵粒幼比例>15%。

非缺鐵性貧血細(xì)胞外鐵增多,常為3+—4+,如巨幼貧、溶血性貧血、再障、骨髓病性貧

第四節(jié)血型鑒定與交叉配血試驗

由若干個相互關(guān)聯(lián)的抗原抗體組成的血型體系稱為血型系統(tǒng)。

AB0血型系統(tǒng)的臨床意義

交叉配血試驗通常包括:

(1)受血者血清對供血者紅細(xì)胞的主側(cè)配血。

(2)受血者的紅細(xì)胞對供血者血清的次側(cè)配血。

(3)受血者的紅細(xì)胞對受血者血清的自身對照。

臨床意義:

Rh血型系統(tǒng)

鑒定方法:酶介質(zhì)法、低離子強(qiáng)度試驗法、聚凝胺試驗法

臨床意義:

第三章血栓與止血檢測

9.血液凝固作用(凝血系統(tǒng)):血液由流動狀態(tài)變?yōu)槟z狀態(tài)稱血液凝固,是有一系列凝血因子參加的、

復(fù)雜的酶促反應(yīng)和分子聚合過程。

10.彌散性血管內(nèi)凝血DIC:是指在某些嚴(yán)重疾病基礎(chǔ)上,發(fā)生微循環(huán)內(nèi)廣泛性纖維蛋白沉積和血小板聚

集,并伴有繼發(fā)性纖維蛋白溶解亢進(jìn)的一種臨床綜合征。

*血管止血作用(小結(jié))

⑴血管的收縮:導(dǎo)致局部血粘度的增高

⑵vWF介導(dǎo)血小板的粘附

⑶血小板的激活

“)TF、膠原導(dǎo)致凝血系統(tǒng)的激活

*血小板止血功能(小結(jié))

①維持血管壁的完整性,毛細(xì)血管的通透性

②粘附、聚集在血管破損處,形成白色血栓

③釋放活性物質(zhì),促進(jìn)血小板聚集,增強(qiáng)血管收縮

②進(jìn)凝血過程

③塊收縮,形成穩(wěn)固血栓

內(nèi)源性凝血途徑是指從因子刈激活,到因子X激活的過程。

外源性凝血途徑是從組織因子暴露于血液而啟動,到因子X被激活的過程。

從因子X被激活至纖維蛋白形成,是內(nèi)源、外源凝tfll的共同凝業(yè)途徑。主要包括凝血酶生成和纖維蛋白形

成兩個階段。

第一節(jié)血管壁檢查

(1)篩檢試驗-干擾因素多,臨床價值有限

1)出血時間(BT)測定毛細(xì)血管被刺破后至自然止血所需時間

參考值:6.9±2.1分鐘超過9分鐘為異常

臨床意義:

BT延長

①血小板明顯減少:原發(fā)性或繼發(fā)性血小板減少性紫瘢;

②血小板功能異常:血小板無力癥、巨血小板綜合征;

③嚴(yán)重缺乏血漿某些凝血因子:vWD、DIC;

④血管異常:遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥;

⑤藥物干擾:抗凝藥(肝素)、抗血小板藥(阿司匹林)、溶栓藥(rt-PA)?

2)毛細(xì)血管脆性試驗(CFT)又稱束臂試驗或毛細(xì)血管抵抗力試驗一一干擾因素多臨床價值

有限

參考值:5cm直徑的圓圈內(nèi)8分鐘時間新的出血點,成年男性低于5個,兒童和女性低于10

臨床意義:

陽性見于①血管壁的結(jié)構(gòu)和(或)功能缺陷:遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥、過敏性紫瘢;

②PLT數(shù)量和功能異常:原發(fā)性和繼發(fā)性血小板減少癥、血小板增多癥、遺傳性和獲得性血

小板功能缺陷癥;

③血管性血友病(vonWillebranddisease,vWD)等;

④其他:維生素C缺乏癥;高血壓、尿毒癥、DM等;

(2)診斷試驗

1、血管性血友病因子抗原(vWF:Ag)測定

臨床意義:vWF:Ag是血管內(nèi)皮細(xì)胞的促凝指標(biāo)之一

①減低見于:血管性血友?。╲WD),是診斷vWD及其分型的指標(biāo)之一。

②增高見于:血栓性疾?。盒募」K?、心絞痛、腦血管病變;

腎臟疾?。杭毙阅I炎、腎病綜合征、慢性腎炎等;

其他:妊娠高血壓綜合征、糖尿病、大手術(shù)后、骨髓增生癥等。

2、血管性血友病因子活性(vWF:A)測定

[臨床意義]結(jié)合vWF:Ag、FVkC檢測,用于vWD的分型診斷

3、6-酮-前列腺素測定

[臨床意義]表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞表面,抗凝指標(biāo)之一;

減低:血栓性疾病,如心肌梗死、心絞痛、腦血管病變;糖尿病、動脈粥樣硬化、周圍血管

血栓形成及血栓性血小板減少性紫瘢(TTP)等。

4、血漿凝血酶調(diào)節(jié)蛋白抗原(TM:Ag)測定

[臨床意義]表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞表面,抗凝指標(biāo)之一.

增高:血栓性疾病,如DIC、TTP、SLE、MI、腦血栓、深靜脈血栓、肺栓塞、DM等。

第二節(jié)血小板檢測

(1)篩選試驗

1)血小板計數(shù)?。。。ɡ蠋熣f要記)(PLT)測定單位體積血液中血小板的數(shù)量。

[注意事項]

避免服用阿司匹林等抗血小板藥物;

使用塑料試管或硅化玻璃試管一一避免PLT粘附、聚集;

避免組織液混入一一防止標(biāo)本溶血或血塊形成。

[參考范圍]成人:lOOROOXIO'/L

[臨床意義]

1.生理性變化:正常人血小板計數(shù)一天內(nèi)可有6-10%變化;

2.病理性:

(1)血小板減少(血小板數(shù)小于100X107L)

①血小板生成障礙:急性白血病、再生障礙性貧血、骨髓纖維化、惡性腫瘤化療等

②血小板破壞過多:如ITP、脾功能亢進(jìn)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等;

③血小板消耗增多:如D1C、血栓性血小板減少紫瘢

④血小板分布異常:如肝硬化、血液被稀釋(輸入大量庫存血或血漿)

⑤感染:細(xì)菌、病毒、立克次體感染,尤其是患者處于免疫受損狀態(tài)如艾滋病時。

(2)血小板增多(血小板數(shù)大于4OOXIO'/L)

①骨髓增生性疾病和惡性腫瘤:慢性粒細(xì)胞白血病、真性紅細(xì)胞增多癥、淋巴瘤、結(jié)腸

癌等;

②原發(fā)性血小板增多癥(ET);

③反應(yīng)性增多:急性大出血、急性感染、急性溶血、RA^IDA;

④脾切除手術(shù)后

2)血塊收縮試驗CRT

[注意事項]禁用阿司匹林和非類固醇抗炎藥;避免溶血;溫度37℃;lh內(nèi)送檢。

(2)診斷試驗

(-)單克隆抗體血小板抗原固定試驗(MAIPA)

(-)血小板相關(guān)免疫球蛋白測定

(三)血漿血栓烷Bz(TXB2)測定

[臨床意義]TXB?具有促進(jìn)血管收縮、促進(jìn)血小板聚集的作用,與PGL具有平衡作用。

1.增高血栓前狀態(tài)、血栓性疾?。篈MI、心絞痛、妊高癥、DM、深靜脈血栓形成、肺梗死、

大手術(shù)后等;

2.減低環(huán)氧酶或TXA?合成酶缺乏,服用抑制環(huán)氧酶或TXA2合成酶的藥物如阿司匹林。

第三節(jié)凝血因子檢測

(1)篩選試驗

1)活化部分凝血活酶時間APTT!!!!!(要記),較CT更敏感

原理:在受檢血漿中加入部分凝血活酶時間(APTT)試劑(接觸因子激活劑和部分磷脂)和

Ca”后,觀察血漿凝固所需要的時間。內(nèi)源凝血系統(tǒng)檢測

注意:間歇性使用肝素的患者應(yīng)在下一次肝素劑量前30-60min采血。

參考值:31-43S,較正常對照值延長10s以上為異常。

臨床意義:監(jiān)測肝素治療和診斷狼瘡抗凝物質(zhì)的首選指標(biāo)。

(1)APTT延長

1.見于因子W、IX、XI明顯減少(血友病A、血友病B和第XI因子缺乏癥);

2.嚴(yán)重的凝血酶原、因子V、因子X等重度減少,如嚴(yán)重肝損傷等;

3.纖維蛋白原嚴(yán)重減少,如FIB減少癥、DIC、重癥肝病等;纖溶亢進(jìn)使FIB降解增加時

4.血循環(huán)中抗凝物質(zhì)增加,如肝素(類)物質(zhì)、狼瘡抗凝物質(zhì)增多等:

⑵APTT縮短血栓前狀態(tài)、血栓性疾病,靈敏度、特異度差。

2)凝血時間(CT)內(nèi)源凝血系統(tǒng)檢測

[原理]靜脈血離體發(fā)生凝固所需要的時間。本實驗反映因子刈被負(fù)電荷表面(玻璃)激活

到纖維蛋白形成,即反應(yīng)內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的功能狀態(tài)。

參考值:4-12min(試管法)15-32min(硅管法)10-19min(塑料管法)

臨床意義:

延長:(靈敏度差)

①因子VIII、IX、XI嚴(yán)重減少,如血友病

②凝血酶原嚴(yán)重減少,如嚴(yán)重肝病,阻塞性黃疸

③纖維蛋白原嚴(yán)重減少,如DIC、纖溶亢進(jìn)、先天性缺乏

④應(yīng)用肝素、口服抗凝藥時:

⑤纖溶亢進(jìn)使纖維蛋白原講解增加

⑥循環(huán)抗凝物質(zhì)增加

⑦DIC

縮短:高凝狀態(tài)(hypercoagulationstate)如血栓性疾病和血栓前狀態(tài)

3)血漿凝血酶原時間測定(PT)!!!!!(要記)外源凝血系統(tǒng)檢測

原理:在被檢血漿中加入C『和組織因子或組織凝血活酶,觀測血漿凝固的時間,

[注意事項]口服抗凝劑華法令患者應(yīng)在口服日劑量前采血。

參考值:①PT正常為11-13S,測定值超過對照值3s以上為異常。

②PTR(凝血酶原時間比值)即被檢血漿的凝血前原時間(s)/正常血漿的凝血

酶原時間(s),參考值為1±0.05PTR=病人PT值/參比血漿PT值

③INR(國際標(biāo)準(zhǔn)化比值)參考值:1.0±0.1INR=PTR

ISI為國際敏感度指數(shù)ISI越小(V2)組織凝血活酶的敏感性越高。

臨床意義:

LPT延長見于先天性凝血因子H、V、皿、X及纖維蛋白原缺乏;獲得性凝血因子缺

乏主要見于維生素K缺乏、嚴(yán)重肝病、纖溶亢進(jìn)、DIC、口服抗凝劑、血循環(huán)中有抗凝

物質(zhì)如肝素和FDP等。

2.PT縮短見于血液高凝狀態(tài)和血栓性疾病如DIC早期、心肌梗死、腦血栓形成、深靜

脈血栓形成(DVT)、多發(fā)性骨髓瘤、長期口服避孕藥等。(敏感性和特異性差)

3.口服抗凝劑的監(jiān)測首選PTR及INR。患者在用藥過程中需進(jìn)行實驗室監(jiān)測以防出血。

4.WHO推薦應(yīng)用國際標(biāo)準(zhǔn)化比值(INR)作為監(jiān)測口服抗凝劑可靠指標(biāo),抗凝治療的合適范

圍以INR維持在2.0-2.5為宜。

(2)診斷試帶

1)血漿凝血因子VIII、ix、xi、xn促凝活性測定

[臨床意義]

1.增高血栓前狀態(tài)和血栓性疾病,如靜脈血栓形成、肺栓塞、妊高癥、肝臟疾病等。

2.減低

①刖:C減低血友病A、血管性血友病、血中存在VIII抗體、DIC等;

②FIX:C減低血友病B、VitK缺乏癥、DIC、口服抗凝藥等;

③FXI:C減低XI因子缺乏癥、肝病、DIC等;

④F刈:C減低先天性XD因子缺乏癥、肝病、DIC等。

2)血漿凝血因子H、V、VII、X促凝活性測定

3)血漿纖維蛋白原(fibrinogen,Fg)測定?。。。。ㄒ洠?/p>

原理:在受檢血漿中加入一定量凝血酶,后者使血漿中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白,通過

比濁原理計算纖維蛋白原的含量。

[臨床意義]

1.增高:急性心梗、糖尿病、急性腎小球腎炎、腎綜、風(fēng)濕病、MM、感染、妊高癥、灼傷、

休克、大手術(shù)后、急性感染、惡性腫瘤等;

2.減低:DIC、重癥肝炎、肝硬化、原發(fā)性纖溶和低(無)纖維蛋白原血癥等。

4)血漿因子XIII定性試驗

可溶性纖維蛋白凝塊易溶于尿素溶液中:缺乏XIII

24h內(nèi)凝塊完全溶解:因子XIH缺乏(先天性或獲得性,如肝病、DIC、淋巴瘤、惡性貧血、

溶血性貧血、SLE等)。

第四節(jié)抗凝系統(tǒng)檢測

(1)病理性抗凝物篩檢試驗

(一)血漿凝血酶時間(thrombintime,TT)!!!!(要記)

[原理]受檢血漿中加入標(biāo)準(zhǔn)化的凝血醐溶液后,在凝血酶的作用下,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維

蛋白,使血漿凝固所需的時間為凝血酶時間。

[參考值]正常對照為16T8s,比正常對照延長3s以上為異常。

[臨床意義]

1.TT延長:

⑴.DIC纖溶亢進(jìn)期、低(無)纖維蛋白原血癥及異常纖維蛋白原血癥;

⑵.血中纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物(FDPs)增高;

⑶.血中有肝素或類肝素物質(zhì)存在,如肝素治療中、肝臟疾病、SLE等;

(4).鏈激酶、尿激酶溶栓治療的監(jiān)測的良好指標(biāo)。

2.TT縮短:無臨床意義。

(-)甲苯胺藍(lán)糾正試驗或血漿游離肝素時間

[原理]甲苯胺藍(lán)具有中和肝素的作用。

[臨床意義]血中類肝素樣物質(zhì)增多見于嚴(yán)重肝病、DIC、使用氮芥類藥物、放療后、肝葉切

除后、肝移植后、過敏性休克等。

臨床應(yīng)用肝素時,延長的TT也被甲苯胺藍(lán)糾正。

(三)APTT交叉試驗

[原理]用于鑒別凝血因子缺乏或是否存在抗凝物質(zhì)。

[臨床意義]

可被正常新鮮血漿糾正:可能缺乏凝血因子

不可被正常新鮮血漿糾正:可能存在抗凝物質(zhì)

(2)病理性抗凝物診斷試驗

1.狼瘡抗凝物(LA)測定一免疫比濁法

[原理]LA可以使以來磷脂的凝固時間(如APTT)延長。

[臨床意義]

陽性見于:有狼瘡抗凝物質(zhì)存在的患者,如SLE、自發(fā)性流產(chǎn)、某些血栓性疾病以及抗磷

脂抗體綜合征等。

2.抗心磷脂抗體(ACA)測定一ELISA法

[臨床意義]陽性見于:

a.原發(fā)性抗磷脂抗體綜合征(APS)

b.繼發(fā)性APS,如SLE、RA、ITP、TTP等。

(3)生理性抗凝物診斷試驗

血漿抗凝血酶(AT)活性測定

[臨床意義]

1、增高:見于血友病、白血病、AA等的急性出血期:也見于口服抗凝劑、應(yīng)用黃體酮等。

2、減低:見于先天性和獲得性AT-川缺乏癥,后者見于血栓前狀態(tài)、血栓性疾病、肝臟

疾病、DIC,外科手術(shù)后。

第五節(jié)纖溶活性檢測

一、篩檢試驗

(一)優(yōu)球蛋白溶解時間(ELT)

[臨床意義]

1.纖維蛋白凝塊在70min內(nèi)完全溶解,表明纖溶活性增強(qiáng),見于原發(fā)性纖溶和繼發(fā)性纖溶,

如手術(shù)、應(yīng)激狀態(tài)、創(chuàng)傷、休克、變態(tài)反應(yīng)、胎盤早剝、羊水栓塞、急性白血病等。

2.纖維蛋白凝塊完全溶解時間延長,表明纖溶活性減低,見于血栓前狀態(tài)、血栓性疾病和應(yīng)

用抗纖溶藥等。

。D-二聚體定性試驗!?。。。ㄒ洠?/p>

[原理]D-二聚體(D-dimer,DT))是交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物之一,為繼發(fā)性纖溶特有的代

謝物。乳膠凝集法

[參考值]陰性

[臨床意義]凡有血塊形成的出血均陽性:敏感性高,特異性低。

1.D-D是纖溶酶作用于交聯(lián)纖維蛋白的特異性分子標(biāo)記物,

繼發(fā)性纖溶時呈陽性或增高,而原發(fā)性纖溶時不增高。

2.D-D陰性可排除深靜脈血栓(DVT)、肺栓塞(PE)(DVT、PE顯著升高)。

3.DIC、溶栓治療時:陽性。

4.陳舊性血塊:陰性。

繼發(fā)性纖溶:陽性

原發(fā)性纖溶:陰性

(三)血漿纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物測定(FDPs)!!!!(要記)

[原理]乳膠凝集法

[參考值]陰性(<5mg/L);危機(jī)值:>40mg/L

[臨床意義]

陽性或增高見于原發(fā)性纖溶和繼發(fā)性纖溶(DIC、DVT、PE、惡性腫瘤、急性早幼粒細(xì)胞

白血病、深靜脈血栓形成、肝臟疾病、腎臟疾病、肺梗死、溶栓治療、器官移植的排斥

反應(yīng)等)。

原發(fā)性纖溶、繼發(fā)性纖溶均陽性

二、診斷試驗

(-)血漿硫酸魚精蛋白副凝固(3P)試驗!?。。。ㄒ洠?/p>

[原理]受檢血漿中加入硫酸魚精蛋白溶液,如果血漿中存在可溶性纖維蛋白單體(sFM)與

纖維蛋白降解產(chǎn)物(FbDP)復(fù)合物,則魚精蛋白使其析出纖維蛋白單體,纖維蛋白單體

自行聚合成肉眼可見的纖維狀物,此為陽性反應(yīng)結(jié)果。

[臨床意義]特異性強(qiáng),敏感性低已被D-二聚體替代

1.陽性DIC的早、中期。但在惡性腫瘤、分娩、上消化道大出血、大手術(shù)后、敗血癥、

腎小球疾病、嚴(yán)重貧血可出現(xiàn)假陽性;

2.陰性正常人、晚期DIC、原發(fā)性纖溶。

鑒別原發(fā)性纖溶與繼發(fā)性纖溶(DIC)

(二)D-二聚體定量試驗

[臨床意義]

1.深靜脈血栓(DVT)、肺栓塞(PE)顯著升高。

2.DIC、溶栓治療時:升高。

3.動脈血栓栓塞癥、鐮狀細(xì)胞貧血危象、妊娠、惡性腫瘤、外科手術(shù):升高。

4.陳舊性血塊:陰性。

繼發(fā)性纖溶:陽性

原發(fā)性纖溶:陰性

(三)血漿纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物定量測定(FDPs)

[原理]ELISA法

[參考值]<5mg/L

[臨床意義]

增高見于原發(fā)性纖溶和繼發(fā)性纖溶(DIC、DVT、PE、惡性腫瘤、急性早幼粒細(xì)胞白血病、

肝臟疾病、腎臟疾病、肺梗死、溶栓治療、器官移植的排斥反應(yīng)等)。

原發(fā)性纖溶、繼發(fā)性纖溶均升高

第八節(jié)檢測項目的選擇和應(yīng)用(看看)

一、篩檢試驗的選擇與應(yīng)用

(一)一期止血缺陷篩檢試驗的選擇與應(yīng)用

一期止血缺陷是指血管壁和血小板缺陷所致出血性疾病。

選用血小板計數(shù)(PLT)和出血時間(BT)篩檢:

1、BT和PLT都正常除正常人外,多數(shù)是由于單純血管壁通透性和(或)脆性增加所

致的血管性紫瘢:過敏性紫瘢、單純性紫瘢和其他血管性紫瘢等。

2、BT延長、PLT減少多數(shù)是由于血小板數(shù)量減少所致:原發(fā)性和繼發(fā)性血小板減少性

紫瘢。

3、BT延長、PLT增多多數(shù)是由于血小板數(shù)量增多所致:原發(fā)性和反應(yīng)性血小板增多

癥。

4、BT延長、PLT正常多數(shù)是由于血小板功能異?;蚰承┠蜃尤狈λ碌某鲅?/p>

疾?。喝缪“鍩o力癥、貯存池病以及低(無)纖維蛋白原血癥、血管性血友?。╲WD)

等。

(二)二期止血缺陷篩檢試驗的選擇與應(yīng)用

二期止血缺陷是指凝血因子缺陷或病理性抗凝物質(zhì)存在所致的出血性疾病。

選用APTT和PT作為篩選試驗:

1、APTT和PT都正常除正常人外,僅見于遺傳性和獲得性因子XIII缺乏癥。獲得性者常

由于嚴(yán)重肝病、肝腫瘤、惡性淋巴瘤、白血病、抗因子xm抗體、自身免疫性溶血性貧

血和惡性貧血等引起。

2、APTT延長、PT正常多數(shù)是由于內(nèi)源性凝血途徑缺陷所引起的出血性疾病,如血友病

A、血友病B、因子XI缺乏癥、血循環(huán)中有凝血因子抗體存在,臨床應(yīng)用肝素。

3、APTT正常、PT延長多數(shù)是由于外源性凝血途徑缺陷所引起的出血性疾病,如遺傳性

和獲得性因子VII缺乏癥;口服抗凝藥(華法令);

4、APTT和PT都延長多數(shù)是由于共同凝血途徑缺陷所引起的出血疾病,如遺傳性和獲

得性因子X、V、凝血酶原(因子H)和纖維蛋白原(因子I)缺乏癥;纖溶亢進(jìn)。以

及同時應(yīng)用肝素、華法令以及纖溶綜合征、抗磷脂抗體等。

(三)纖溶亢進(jìn)篩檢試驗的選擇與應(yīng)用

纖溶亢進(jìn)性出血指纖維蛋白(原)和某些凝血因子被纖溶酶降解引起的出血(原發(fā)性纖溶和

繼發(fā)性纖溶)。

可選用FDPs和D-D作為篩選試驗:

1、FDPs和DD均正常表示纖溶活性正常,臨床的出血癥狀可能與纖溶無關(guān)(ELT陰性)。

2、FDPs升高、D-D正常理論上只見于纖維蛋白原被降解,而纖維蛋白未被降解,即原發(fā)

性纖溶。實際上多為FDPs的假陽性,見于肝病、術(shù)后大出血、重型DIC、纖溶初期、

劇烈運動后、RA、抗Rh(D)抗體存在等。

3、FDPs正常、D-D升高理論上只見纖維蛋白被降解,而纖維蛋白原未被降解,即繼發(fā)

性纖溶。實際上多為FDPs的假陰性,見于DIC、靜脈血栓、動脈血栓和溶栓治療等。

4、FDPs和D-D均升高表示纖維蛋白原和纖維蛋白同時被降解,見于繼發(fā)性纖溶,如DIC

和溶栓治療(ELT陽性)。臨床最常見

四、DIC項目的選擇與應(yīng)用

彌散性血管內(nèi)凝血唯定義:由多種致病因素導(dǎo)致全身微血管內(nèi)微血栓的形成,和多臟器功

能衰竭(MOF),消耗大量的血小板和凝血因子,并引起繼發(fā)性纖溶亢進(jìn),造成臨床血栓

一出血綜合征。

誘發(fā)DIC的因素:嚴(yán)重感染、創(chuàng)傷及手術(shù)、妊娠并發(fā)癥、惡性腫瘤、休克

重癥肝病、溶血反應(yīng)、其他

五、抗血栓和溶栓治療監(jiān)測項目的選擇和應(yīng)用

(-)普通肝素和低分子量肝素的監(jiān)測

1.普通肝素(uFH):

①首選APTT

②體

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