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題型4圍繞選修1、3展開的命題

題組特訓一

3年選考真題

1.(2017?浙江4月選考,32)(加試題)回答下列(一)、(二)小題:

(一)回答與泡菜腌制和亞硝酸鹽測定有關的問題:

(1)制作泡菜時,為縮短發(fā)酵周期,腌制前可加入乳酸菌。取少量酸奶,用無菌蒸微水稀釋

后,再用________蘸取少量的稀釋液,在MRS乳酸菌專用培養(yǎng)基的平板上劃線,以獲得乳酸

菌單菌落。下圖所示的劃線分離操作,正確的是O

(2)泡菜腌制過程中,會產(chǎn)生有機酸、醇類和亞硝酸鹽,其中醇類是由進行厭

氧呼吸產(chǎn)生。亞硝酸鹽對人體有害,為測定泡菜中亞硝酸鹽含量,從泡菜中提取亞硝酸鹽,

與發(fā)生重氮化反應,再與N-1—蔡基乙二胺偶聯(lián),形成紫紅色產(chǎn)物。

然后用光程為1cm的,在550nm光波下測定光密度值,與由已知濃度梯度亞硝酸

鈉制作的比對,計算樣品中亞硝酸鹽的含量。

(3)已知乳酸菌中的亞硝酸還原酶能降解亞硝酸鹽。在一定的腌制時間內(nèi),隨著腌制時間的

延長,泡菜中亞硝酸鹽含量逐漸降低,是由于在厭氧和環(huán)境下亞硝酸鹽被亞硝酸還

原酶降解。

(-)回答與生態(tài)工程有關的問題:

⑴對農(nóng)作物秸稈多途徑利用的基本過程示意圖如下,貫穿全過程的核心技術是

—技術。其中“過腹還田”的具體途徑是

將秸稈和動物糞便等通過微生物發(fā)酵

產(chǎn)生沼氣,這是利用了農(nóng)業(yè)生態(tài)工程中的技術。

太陽輻射

(2)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上,畜牧業(yè)依賴和受制于種植業(yè),可以通過種植業(yè)和畜牧業(yè)的技術

提高經(jīng)濟和社會效益。“退耕還林”后,林地的增加可以減少,更有利于受損

生態(tài)系統(tǒng)的恢復。使用農(nóng)藥能有效控制農(nóng)業(yè)害蟲,但也使生態(tài)系統(tǒng)的減少,因

此利用生物的進行生物防治是今后的發(fā)展方向。

2.(2016?浙江4月選考,32)(加試題)回答下列(一)、(二)小題:

(一)請回答與“果汁中的果膠和果膠酶”實驗有關的問題:

(1)果膠是細胞壁的重要組成成分,其化學本質是(A.蛋白質B.脂質C.核酸D.多

糖)。它在細胞壁的形成過程中的主要作用是將相鄰的細胞在一起。

(2)制取果汁時,先用果膠酶將果膠分解成和半乳糖醛酸甲酯等物質,再用

酶處理,可得到比較澄清的果汁。用適量且濃度適宜的上述兩種酶處理時,果汁的出汁率、

澄清度與酶的_______高低成正相關.

(3)由于果膠不溶于乙醇,故可用乙醇對果膠粗提物(經(jīng)前處理后的混合物)進行處

理,從而得到干制品。

(-)兔肝細胞中的基因E編碼代謝甲醛的酶,擬利用基因工程技術將基因E轉入矮牽牛中,

以提高矮牽牛對甲醛的代謝能力,請回答:

(1)從兔肝細胞中提取mRNA,在酶的作用下形成互補DNA,然后以此DNA為模板擴

增得到基因E。在相關酶的作用下,將基因E與Ti質粒連接在一起,形成,再導

入用氯化鈣處理的,侵染矮牽牛葉片。將被侵染的葉片除菌后進行培養(yǎng),最終得到

轉基因矮牽牛。其中培養(yǎng)過程正確的是()

A.葉片在含適宜濃度生長素的培養(yǎng)基上分化形成愈傷組織

B.愈傷組織在含細胞分裂素和生長素配比較高的培養(yǎng)基上形成芽

C.再生的芽在細胞分裂素含量較高的培養(yǎng)基上生根

D.愈傷組織在含適宜濃度植物生長調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上脫分化形成再生植株

(2)取轉基因矮牽牛葉片,放入含MS液體培養(yǎng)基和適宜濃度甲醛且密封的試管中。將試管置

于________上,進行液體懸浮培養(yǎng)液。一段時間后測定培養(yǎng)基中甲醛的含量,以判斷基因E

是否在轉基因矮牽牛中正常表達。培養(yǎng)過程中液體培養(yǎng)基的作用:一是提供營養(yǎng);二是

,從而使葉片保持正常的形態(tài)。

1年名校模擬

3.(2017?溫州市聯(lián)考)(加試題)卡那霉素和頭抱霉素都有抗菌作用,此外,卡那霉素還對

葡萄細胞有抑制作用。研究人員將Barnase基因(雄性不育基因)轉入葡萄細胞,利用卡那霉

素和頭狗霉素,通過植物克隆方法成功培育出大粒、無核的葡萄新品種。請回答:

(D構建含Barnase基因、B一葡糖甘酸酶基因和卡那霉素抗性基因的重組質粒,導入農(nóng)桿

菌,在固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)形成以便鑒定是否混有雜菌,再用—

將農(nóng)桿菌轉移至LB培養(yǎng)基中進行擴大培養(yǎng)。構建重組質粒需要用到的工具酶是

(2)將經(jīng)過________的幼嫩葡萄葉片切成小塊,浸入農(nóng)桿菌懸浮液中,4分鐘后取出(此時已

有較多農(nóng)桿菌附著在葉片小塊上)并接種到固體培養(yǎng)基中。培養(yǎng)至第3天時,可以看到在葉

片小塊周圍出現(xiàn)和大量菌落。這時再用頭抱霉素處理葉片小塊,其目的是(A.

抑制葡萄細胞脫分化B.促進葡萄細胞再分化C.殺滅農(nóng)桿菌D.促進農(nóng)桿菌生長)。

(3)將葉片小塊放入卡那霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間后,轉移至生芽培養(yǎng)基中,待其長出

后,再轉移至生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)形成試管苗??敲顾嘏囵B(yǎng)基起著

作用,植物克隆的技術基礎是。

(4)在卡那霉素培養(yǎng)基中,由于轉化細胞對周圍的非轉化細胞有保護作用,獲得的試管苗中

可能存在假的轉基因試管苗,因此還需對試管苗的__________________基因的表達產(chǎn)物進行

生化檢測,才能鑒別出真正的轉基因試管苗。

(5)最后,對轉基因試管苗還需進行逐漸濕度的鍛煉,使之適應自然環(huán)境。

4.(2017?杭州建人高復學校月考)(加試題)回答下列(一)、(二)小題:

(一)如圖為果酒和果醋的制作流程,回答下列問題:

I挑選葡萄I一麗1一[W]一]酒精發(fā)酵|一|甜酸發(fā)酵|

,I,,I,

|果酒||果醋|

⑴從自然菌樣中篩選較理想的醋化醋桿菌進行純化培養(yǎng),通常采用

法接種,接種之前要對接種工具進行

,避免接種工具上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基。

(2)由果酒轉變成果醋的制作時,需要改變的環(huán)境條件是和溫度

控制住30?35C。寫出由果酒釀制成果醋過程的總反應式:

(3)若在果汁中含有醋化醋桿菌,在果酒發(fā)酵旺盛時,醋化醋桿菌(填“能”或

“不能”)將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸,理由是

(4)在用果汁制作果酒的過程中,發(fā)酵瓶溶液中pH的變化是一

A.增大B.不變

C.減小D.先減小后增大

(-)回答下列關于生物工程的有關問題:

(1)基因工程的核心是;將目的基因導入植物細胞采用最多的方法是

,將目的基因導入動物細胞最有效的方法是

(2)植物體細胞雜交技術中,誘導原生質體融合的化學方法一般是用作

為誘導劑來誘導細胞融合:動物細胞工程中技術是其他動物細胞工程技術

的基礎,動物細胞工程的一項重要應用是單克隆抗體的制備,與普通抗體相比單克隆抗體的

最主要優(yōu)點是。

(3)若對囊胚進行胚胎分割,要注意,否則會影響分割后

胚胎的恢復和進一步發(fā)育。

5.(2017?教育綠評聯(lián)盟3月)(加試題)回答下列(一)、(二)小題:

(一)已知某細菌的兩種突變類型細菌【和細菌II的營養(yǎng)條件和菌落特征都相同,但細菌I能

分解有機物A而不能分解有機物B,細菌H能分解有機物B而不能分解有機物A。現(xiàn)有這兩

種類型細菌的混合液樣品,要將其分離,有人設計了一種方案,部分操作步驟如下圖。

步驟一:從混合樣品中取樣和

接種到多個平板培養(yǎng)基中,餅

在適宜溫度F培養(yǎng)若干天\\

\平

\

步驟二:從平板培養(yǎng)基中蛇柩

形線末端的單個菌落中取菌-:格

種接種到含A、B有機物的H

培養(yǎng)液中(A.B有機物的起

始濃度已知),在適宜溫度下

含A

培養(yǎng)若干天。

::砌

J培11

步驟三:測定各瓶中A、BH養(yǎng)

兩種化合物的含量,再根據(jù)

測試結果采取不同措施

(1)步驟一使用的是培養(yǎng)基,其中含有細菌生長所需的水、無機鹽、碳源和氮源等

營養(yǎng)物質,此外還必須加入________,以利于對不同菌種進行分離操作。

(2)步驟一采用法接種,此接種法可使接種細菌逐漸稀釋,經(jīng)適宜條件培養(yǎng),可形

成單個、獨立的,最終可能得到純種的細菌;要進行上述接種操作,必須在一

及酒精燈火焰附近進行,以避免雜菌污染。

(3)步驟三中,若對其中某瓶培養(yǎng)液中A、B兩種有機物含量進行測定,當培養(yǎng)液中檢測出如

下的實驗結果,其中能說明培養(yǎng)液只有細菌I的是__。

A.化合物A與B含量都明顯下降

B.化合物A含量明顯下降,B含量基本不變

C.化合物A含量基本不變,B含量明顯下降

D.化合物A、B含量都基本不變

(二)綠色城市的重要標志之一是實現(xiàn)垃圾的“減量化、資源化和無害化”。下圖是垃圾資源

化、無害化處理的一種方案:

⑴該生態(tài)系統(tǒng)中屬于分解者的生物有。該生態(tài)工程主要利用了

________________的原理。

(2)從資源與環(huán)境的角度來看,④、⑤途徑優(yōu)于③途徑的主要原因是和

減少環(huán)境污染等。

(3)該生態(tài)系統(tǒng)中能利用發(fā)酵技術產(chǎn)生沼氣開發(fā)生物能,從該角度看,應屬于的生

態(tài)工程。

A.物質循環(huán)利用

B.清潔及可再生能源系統(tǒng)組合利用

C.山區(qū)小流域綜合治理與開發(fā)

D.節(jié)水和廢水處理與利用

(4)種植業(yè)和是人類食物生產(chǎn)系統(tǒng)的兩大支柱,兩者結合的優(yōu)化設計需要按照

—規(guī)律進行綜合優(yōu)化,使系統(tǒng)從總體上獲得最佳的經(jīng)濟效益、生態(tài)效益和

社會效益。

6.(2017?杭州學軍中學9月)(加試題)回答下列生物科技及其實踐的相關問題:

(1)培育轉基因抗蟲棉時為構建重組DNA分子通常需要用同種限制性核酸內(nèi)切酶分別切割

和。將重組DNA轉入農(nóng)桿菌時,可以用

處理農(nóng)桿菌,使重組DNA易于導入。

(2)科學家利用番茄葉細胞和馬鈴薯葉細胞雜交培育“番茄一馬鈴薯”植株的過程中,首先

用酶解除去掉植物細胞的細胞壁,以使植物原生質體相互分離;在動物細

胞培養(yǎng)技術中,使細胞分離開來的酶是。

(3)進行早期胚胎的體外培養(yǎng)時,培養(yǎng)液中除了含有各種有機鹽類、維生素、氨基酸、核昔

酸等營養(yǎng)成分外,還要添加激素和o

(4)分離細菌時通常用固體培養(yǎng)基,原因是_________________________________________

與微生物培養(yǎng)基相比,植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和,這

些植物激素一般需要事先單獨配制成保存?zhèn)溆?。使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過

處理后才能丟掉,以防止培養(yǎng)物的擴散。

⑸一定濃度的淀粉溶液經(jīng)過固定化酶柱后,可使淀粉水解成糊精,若用

一測試,流出物呈_______色,表明水解產(chǎn)物糊精生成。

7.(2017?十校聯(lián)盟高三3月)(加試題)回答下列(一)(二)小題:

(一)請回答果醋制作和醋化醋桿菌擴大培養(yǎng)及篩選的相關問題:

(1)醋化醋桿菌在_______條件下才能將乙醇轉化為醋酸,因此需要持續(xù)往發(fā)酵瓶中通入足

量的.

(2)底物充足條件下,醋酸發(fā)酵液pH值變化是(A.持續(xù)變大B.先變大后穩(wěn)定

C.持續(xù)變小D,先變小后穩(wěn)定)。

(3)對醋化醋桿菌進行擴大培養(yǎng)所需的液體培養(yǎng)基(1L)配方為:蛋白陳3g、酵母提取物5g、

_25g和蒸饋水,并調(diào)pH至_再用——法進行滅菌。若要

分離醋化醋桿菌,還需在上述的培養(yǎng)基中加入適量的。

(二)請回答利用基因工程生產(chǎn)人胰島素的相關問題:

(1)先從人體細胞中獲取控制人胰島素合成的mRNA,然后在酶催化下合成

人胰島素基因。

(2)構建重組DNA分子通常需要的限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的基因和載體,然

后用DNA連接酶使兩者連接在一起。

(3)大腸桿菌的會阻礙重組DNA進入細胞,通常使用氯化鈣處理大腸桿菌。

(4)為檢測目的基因是否在大腸桿菌中高效穩(wěn)定表達,最簡單有效的方法是(A.檢測

大腸桿菌中有無人胰島素基因B.檢測培養(yǎng)基中葡萄糖濃度C.檢測大腸桿菌中人胰島素

基因mRNA含量D.檢測培養(yǎng)基中胰島素含量)。人胰島素基因能在大腸桿菌中表達是因為

人和大腸桿菌共用?

(5)胰島素除了用于治療糖尿病之外,還可以用來提高動物_______形成率。

8.(2017?稽陽聯(lián)誼學校3月)(加試題)回答下列(一)、(二)小題:

(一)炭疽桿菌能引起人畜患炭疽病。對炭疽病疑似患者,可通過甲圖所示鑒定炭疽桿菌的實

驗進行確診,其中實驗組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌。

對照組加入等量

制片、檢查.生理鹽水.

Zg35。6/附日

翳*/接種/>。24仲八/

疑菌洛-----&、

實驗組加入生理鹽水配制

液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)生

的澄清噬菌體液R

(澄清)(渾濁)

U35匕6小時U

@?《⑥?

ABCD

(1)若要從炭疽病疑似患者體內(nèi)分離出炭疽桿菌,可將患者皮膚膿胞滲出物稀釋后滴于培養(yǎng)

基表面,用無菌玻璃刮刀涂勻,該接種方法稱為。乙圖所示的四種菌落分布圖中,

該接種方法不能得到的是。

(2)制備甲圖中的液體培養(yǎng)基時需采取法滅菌。接種可疑菌后,需將三

角瓶置于35℃下的搖床上_____培養(yǎng)24小時,可疑菌會大量繁殖,液體培養(yǎng)基變渾濁。

(3)甲圖中,對照組與實驗組試管同時培養(yǎng)6小時后,若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照

組.(高/低),則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染;反之則排除。此判斷的依據(jù)是

(二)印度沙漠貓是一種珍稀貓科動物,通過胚胎工程技術,可以讓家貓代孕而繁育,主要步

驟如下圖所示。

超數(shù)

對印度沙

排卵

漠貓進行

催情處理收集

精液

(1)步驟甲、乙分別是指、。

(2)卵巢經(jīng)超數(shù)排卵處理后,要使用超聲監(jiān)視器確定的位置,插入穿刺針吸取其液體,

取出________,在體外進行人工培養(yǎng)得到成熟的卵細胞。

(3)若在早期細胞培養(yǎng)過程中,發(fā)現(xiàn)某個細胞出現(xiàn)變異性狀,科研人員提取這個細胞進行單

獨培養(yǎng),此種培養(yǎng)方法稱為o培養(yǎng)過程中,下列哪種細胞比較難以克???

A.有限細胞系B.無限細胞系

C.轉化細胞系D.腫瘤細胞系

|題組特訓二-----------------------------

3年選考真題

1.(2016?浙江10月選考,32)(加試題)回答下列(一)(二)小題:

(一)請回答從土壤中分離產(chǎn)胭酶細菌和酥酶固定化實驗的有關問題:

(DLB固體培養(yǎng)基:取適量的蛋白陳、酵母提取物、NaCl,加入一定量的蒸儲水溶解,再加

,滅菌備用。

(2)尿素固體培養(yǎng)基:先將適宜濃度的尿素溶液用滅菌過的G6玻璃砂漏斗過濾,因為

G6玻璃砂漏斗,故用于過濾細菌。然后將尿素溶液加入到已經(jīng)滅菌的

含有酚紅的培養(yǎng)基中,備用。

⑶取適量含產(chǎn)服酶細菌的10一」、10一5兩種土壤稀釋液,分別涂布接種到LB固體培養(yǎng)基和尿

素固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)48h,推測固體培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)最少的是—(九10一5稀釋液

+尿素固體培養(yǎng)基B.10-5稀釋液+LB固體培養(yǎng)基C.10,稀釋液+尿素固體培養(yǎng)基

D.10-'稀釋液+LB固體培養(yǎng)基)。

在尿素固體培養(yǎng)基上產(chǎn)胭酶細菌菌落周圍出現(xiàn),其原因是細菌產(chǎn)生的胭酶催化尿素分

解產(chǎn)生所致。

(4)制備固定化胭酶時,用石英砂吸附腺酶,裝柱。再用蒸儲水洗滌固定化酶柱,其作用是

(二)某小組欲進行煙草原生質體分離與培養(yǎng)的研究。請回答:

(1)原生質體的分離:在無菌條件下,取煙草無菌苗的葉片,放入含有0.5mol/L甘露醛(維

持較高滲透壓)的混合液處理,經(jīng)過離心純化后獲得原生質體。

(2)原生質體的培養(yǎng):將原生質體進行培養(yǎng),重新長出細胞壁,形成胚性細胞。此時,應該

一培養(yǎng)基中甘露醇濃度,以利于胚性細胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細胞團,然后經(jīng)兩條途徑形成

再生植株。途徑一:細胞團經(jīng)球形胚、和胚狀體,最后發(fā)育成植株。途徑二:細胞團

增殖為愈傷組織,然后在發(fā)芽培養(yǎng)基上誘導出芽,切割芽經(jīng)過生根后形成完整植株。上述發(fā)

芽培養(yǎng)基中含量相對較高的激素是________,胚性細胞的主要特點是:________(A.液泡小、

細胞核小B.液泡大,細胞核大C.液泡大,細胞核小D.液泡小、細胞核大)。

⑶為了對煙草的某些性狀進行改良,分離得到兩種煙草的原生質體后,通過

方法將它們的遺傳物質組合在一起,經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。

提取再生植株的DNA,采用擴增相關基因,來鑒定遺傳物質是否成功重組。

2.(2015?浙江10月選考,32)(加試題)科研人員擬將已知的花色基因(目的基因)轉入矮牽

牛的核基因組中,培育新花色的矮牽牛。請回答:

(1)為了獲得大量的目的基因,將其與含有抗生素抗性基因的質粒DNA形成重組DNA,再與

經(jīng)(A.氯化鈣B.氯化鈉C.蔗糖D.葡萄糖)處理的大腸桿菌液混合,使重組

DNA進入大腸桿菌。用的玻璃刮刀將稀釋后的大腸桿菌液接種到含有抗生素的

固體培養(yǎng)基上,經(jīng)培養(yǎng)形成,再進行鑒定和擴大培養(yǎng)。

(2)從擴大培養(yǎng)的大腸桿菌中提取含有目的基因的DNA,用分別切割含

目的基因的DNA和農(nóng)桿菌的Ti質粒,然后用DNA連接酶連接,形成重組DNA并導入農(nóng)桿菌。

(3)取田間矮牽牛的幼嫩葉片,經(jīng)自來水沖洗,先用70%浸泡,再用5%次氯酸鈉浸泡,

最后用清洗,作為轉基因的受體材料”

(4)將消毒后的矮牽牛葉片剪成小片,在含有目的基因的農(nóng)桿菌溶液中浸泡后,取出并轉移

至加有適當配比生長調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基(含蔗糖、瓊脂和抗生素,下同)上,使葉小片先脫

分化形成。再將其轉移至另一培養(yǎng)基誘導形成芽,芽切割后轉移至

(A.LB培養(yǎng)基B.MS培養(yǎng)基+適宜濃度NAAC.MS培養(yǎng)基+適宜濃度BA

D.NAA/BA小于1的MS培養(yǎng)基)上生根,形成完整植株。

(5)取出試管苗,在適宜的光照、溫度和80%以上的_等條件下進行煉苗。提取葉片

組織的DNA,采用PCR技術目的基因,鑒定目的基因是否成功導入。

(6)為判斷本研究是否達到預期目的,可比較轉基因植株和非轉基因植株的性狀。

1年名校模擬

3.(2017?寧波市十校9月聯(lián)考)(加試題)如下表是4組生物學實驗培養(yǎng)基。請回答下列問

題:

組別培養(yǎng)基

a無機鹽、蔗糖、維生素和甘氨酸等有機物、瓊脂

b葡萄糖、NaCl、K2HpCh、尿素、酚紅、水、瓊脂糖

c蛋白陳、酵母提取物、NaCK水、瓊脂

d葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等

(1)進行動物細胞培養(yǎng)應選用—培養(yǎng)基(填組別)。在進行細胞培養(yǎng)時,首先,將動物體內(nèi)

的一部分組織取出,經(jīng)過機械消化或消化,使其分散成單個的細胞。如果是培

養(yǎng)胚胎干細胞,則首先需要在培養(yǎng)皿底部制備一層細胞,稱為,這層細胞

具有的特點。胚胎干細胞是一種未分化細胞,具有性和

__________核型。

(2)分離以尿素為氮源的細菌應選用培養(yǎng)基b?在含有酶的細菌菌落周圍會出現(xiàn)

這是由于尿素被分解產(chǎn)生的使pH升高,酚紅指示劑產(chǎn)生顏

色變化。變色區(qū)域越大,表明該菌株利用尿素的能力o該實驗用的分離方法是

(3)用培養(yǎng)基a進行植物組織培養(yǎng),則培養(yǎng)基還需要加入一

(4)下表對應關系中,錯誤的是。

選項對象方法

A培養(yǎng)基CG6玻璃砂漏斗

B培養(yǎng)皿高壓蒸汽滅菌

C超凈臺紫外燈照射

D自然生長的莖段70%乙醇和5%次氯酸鈉

4.(2017?杭州市建人高復學校月考)(加試題)回答下列(一)、(二)小題:

(一)為了增強秸稈發(fā)酵效果,提高秸稈的營養(yǎng)價值,研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌

株,并對其降解纖維素能力進行了研究。請回答有關的問題:

(1)纖維素是植物多糖,它在植物細胞中的作用是(A.能源物質B.貯能物質C.結

構組成成分D.將不同的細胞粘連在一起)。該菌株在生態(tài)系統(tǒng)中能促進循環(huán)。

(2)用.培養(yǎng)基來鑒定和分離纖維素酶高產(chǎn)菌株,在將培養(yǎng)基轉移到三角瓶或試管中

時必須用,以防止培養(yǎng)基沾到三角瓶壁或試管壁上。為了測定纖維素酶高產(chǎn)菌株的

數(shù)量可以用法在培養(yǎng)基上進行測定。

(3)剛果紅與纖維素形成紅色復合物,但并不與纖維素降解產(chǎn)物發(fā)生這種反應。研究人員在

剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩選到了幾株有透明圈的菌落。透明圈的大小與纖維素酶的

____________有關。

(二)利用基因工程技術將突變的IPA1基因轉入水稻細胞中從而獲得某水稻新品利1

⑴培育該轉基因水稻新品種的核心是構建,該過程需要用到的工具酶有

o本實驗中常用CaCL處理土壤農(nóng)桿菌,其目的是增加

其的通透性,便于重組質粒的導入。

(2)在含目的基因的水稻細胞培育成植株過程中可以將含有愈傷組織的培養(yǎng)物放在搖床上,

通過培養(yǎng)分散成單細胞。在該水稻的培養(yǎng)過程中,相關敘述正確的是。

A.配制只含有適當營養(yǎng)物質的培養(yǎng)基,倒在滅菌試管中凝固成半固體

B.從滅菌的根、莖或葉上切取一些小組織塊,進行培養(yǎng)

C.這種單細胞具有細胞質豐富、液泡大、細胞核大的特征

D.水稻體細胞與這種單細胞的全能性表達程度大不相同

(3)利用水稻細胞制備原生質體時,需在0.5?0.6mol/L的甘露醇溶液中進行處理,該溶液

濃度與水稻細胞中的濃度相當。

5.(2017?“七彩陽光”新高考研究聯(lián)盟)(加試題)回答下列(一)、(二)小題:

(一)為從養(yǎng)豬場周圍土壤中分離產(chǎn)胭酶的微生物,進行了如下實驗。

土壤稀釋液

⑴培養(yǎng)基的制備:本實驗需在LB固體培養(yǎng)基和尿素固體培養(yǎng)基上進行接種,因尿素

只能用________過濾。下列對本實驗選用的尿素固體培養(yǎng)基和LB固體培養(yǎng)基的

敘述,錯誤的是()

A.都要進行高壓蒸汽滅菌

B.都含有N源

C.都要添加瓊脂糖

D.都要添加酚紅指示劑

(2)制備細菌懸液:在無菌條件下,將土樣加到含有適量________的三角瓶中,振蕩搖勻,

并以此方法制備不同濃度的土壤稀釋液。

(3)接種:本實驗采用的接種方法是。

(二)某研究小組利用下圖所示的現(xiàn)代生物科學技術生產(chǎn)藥用蛋白一一人組織纖溶酶原激活

物(4用)。請回答:

hlPA

鬻一◎一?2二^今案一日

J重組受精卵早期條尸四北羊乳

MJDNA分子胚胎母羊基因母羊

⑴構建重組DNA分子時,通常用切割htP\基因與載體,形成

,再通過DNA連接前連接。

(2)為獲取更多的實驗用受精卵,要對供卵母羊注射相應激素,使其,獲得較多的

卵母細胞。采集的精子需要經(jīng)過處理,才具備受精能力。

(3)若想獲得更多轉從陽基因母羊,還可以對含有至必基因的胚胎進行。

然后再通過技術可獲得較多后代。

(4)下列有關基因工程的敘述,正確的是()

A.載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細胞和促進目的基因的表達

B.大腸桿菌質粒是基因工程最常用的載體

C.若目的基因的序列是未知的,可選用PCR技術擴增目的基因

D.DNA連接酶催化形成氫鍵和磷酸二酯鍵的形成

6.(2017?寧波九校高三上期末聯(lián)考)(加試題)回答下列(一)、(二)小題:

(一)利用紫甘薯制酒可以提高其經(jīng)濟附加值。請回答:

(1)在工廠化生產(chǎn)時,為提高紫甘薯的利用率,可加入果膠酶和淀粉酶,其中果膠酶可來自

等微生物。由于酶在水溶液中不穩(wěn)定,因此常將酶固定在某種介質上制成

(2)果膠酶可將紫甘薯勻漿中的果膠水解為o

A.半乳糖醛酸和葡萄糖

B.半乳糖和果糖

C.麥芽糖

D.半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯

(3)紫甘薯勻漿流經(jīng)a—淀粉酶柱后,取適量流出的液體,經(jīng)脫色后加入KI—L溶液,結果

液體呈紅色。表明該液體中含有________。

(4)在發(fā)酵前,為使醵母菌迅速發(fā)生作用,取適量的干酵母,加入溫水和o

(5)下圖表示發(fā)酵液溫度對酒精濃度的影響。據(jù)圖判斷,最佳溫度是。

2345678910時間(d)

(二)科學家將魚抗凍蛋白基因轉入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高,可以在相對寒冷的環(huán)

境中生長。質粒上有尸StI、I、HinAIILAluI等四種限制性核酸內(nèi)切酶切害U位點,

下圖是轉基因抗凍番茄培育過程的示意圖(a即'為抗氨茉青霉素基因),其中①?④是轉基因

抗凍番茄培育過程中的相關步驟,I、II表示相關結構或細胞。請據(jù)圖作答:

PxtISmalAlu\Pxt\

11II

(1)在構建重組DNA時,可用一種或多種限制性核酸內(nèi)切酶進行切割,為了避免目的基因和

載體在醐切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接,在此實驗中應該選用限制性核酸內(nèi)切酶

分別對、__進行切割,切割后產(chǎn)生

的DNA片段分別為、種。

(2)培養(yǎng)基中的氨芳青霉素會抑制番茄愈傷組織細胞的生長,要利用該培養(yǎng)基篩選已導入魚

的抗凍蛋白基因的番茄細胞,應使I重組DNA中含有作為標記基因。

(3)研究人員通常采用法將魚抗凍蛋白基因導入番茄細胞內(nèi)。

7.(2017?臺州市期末)(加試題)回答下列(-)(-)小題:

(一)在農(nóng)村,泡菜的制作方法是:先對新鮮的蔬菜進行整理、清潔,然后放入徹底清洗并用

白酒擦過的泡菜壇中,再向壇中加入鹽水、香辛料及一些“陳泡菜水”。密封后置于陰涼處,

適宜環(huán)境溫度為28?30請回答:

(1)用白酒擦拭泡菜壇的目的是。

(2)此過程中起主要作用的微生物是(A.乳酸菌+假絲酵母B.乳酸菌+醋化醋桿

菌C.酵母菌+霉菌D.酵母菌+醋化醋桿菌),這些微生物利用蔬菜中的糖類和其他物

質進行發(fā)酵,產(chǎn)物有等,其中也包括亞硝酸。

⑶某同學想測定制作的泡菜中亞硝酸鹽的含量,需要先用亞硝酸鈉標準溶液繪制

,再通過測定泡菜勻漿的進行計算。

⑷若要獲得優(yōu)良乳酸菌菌種,純化菌種時,更易分離得到單菌落的接種方法是

,培養(yǎng)時還需提供條件。

(二)干擾素是抗病毒的特效藥,干擾素基因缺失的個體,免疫力嚴重下降??茖W家設計了以

下流程,利用胚胎干細胞(ES細胞)對干擾素基因缺失的患者進行基因治療。請回答:

分離上皮細胞

干擾素基因培養(yǎng)一①

缺失患者

0-.細胞重組細胞|分離、培養(yǎng)

ES細胞

基因導入

(1)上圖中進行的是(填“體內(nèi)”或“體外”)基因治療,①過程中利用的生物工程

技術手段稱為。若導入的干擾素基因序列為已知,則可通過獲取。

(2)ES細胞是由囊胚中的分離出來的一類細胞,具有性,可以將

其培養(yǎng)成人體各種組織器官。在培養(yǎng)過程中常被用作飼養(yǎng)層細胞的一般是

(3)下列關于上述操作中的敘述,正確的是o

A.①②操作體現(xiàn)了上皮細胞具有全能性

B.③過程可以用農(nóng)桿菌轉化法進行基因導入

C.完成基因導入的細胞就具有了合成并分泌干擾素的能力

D.基因治療依據(jù)的變異原理是基因重組

8.(2017?嘉興市3月)(加試題)回答下列(一)、(二)小題:

(一)泡菜是人們喜愛的食品,但在腌制的過程中會產(chǎn)生一定量的亞硝酸鹽,危害人們的健康。

研究人員檢測了不同濃度的食鹽、不同發(fā)酵階段的泡菜中的亞硝酸鹽含量,結果如下圖所示。

請回答:

(1)制作泡菜時如希望發(fā)酵快一些,可將蔬菜放在中浸泡1分鐘后入壇。發(fā)酵壇中還

可加一些白酒,加白酒的目的是增加醛香感和。

(2)據(jù)圖分析,下列敘述錯誤的是()

A.腌制泡菜的最佳食鹽用量約為5%

B.過多的食鹽可能會抑制發(fā)酵作用

C.腌制初期泡菜的亞硝酸鹽含量上升

D.食用泡菜最安全的是腌制后3~9天

(3)在利用光電比色法測定泡菜亞硝酸鹽含量時,在樣品溶液中加入顯色劑會生成—

色產(chǎn)物。繪制標準曲線時,可以亞硝酸鈉的質量為橫坐標,以為縱坐標。對

樣品和標準溶液的測定中,要用光程相同的.

(-)我國目前臨床使用的乙肝疫苗大多為基因工程疫苗,其有效成分是一種叫做乙肝表面抗

原的蛋白質(S蛋白),對應的基因為s基因。請回答:

(1)在構建重組DNA分子時,要用限制性核酸內(nèi)切酶處理,并用—

酶使兩者結合。將重組DNA分子導入到哺乳動物細胞,經(jīng)篩選得到工程細胞。

(2)在細胞培養(yǎng)過程中,工程細胞在生長過程中有現(xiàn)象,需要定期使用酶處

理,以便于分瓶培養(yǎng)。

(3)為提高工程細胞培養(yǎng)的成功率,下列措施中不能采用的是()

A.取單個細胞進行培養(yǎng)

B.加入胰島素

C.二氧化碳培養(yǎng)箱

D.加入動物血清

(4)由于哺乳動物細胞培養(yǎng)較難,成本較高,近些年科學家們又發(fā)明了“乳腺生物發(fā)生器”,

進而從轉基因動物的乳汁中提取所需產(chǎn)品。在這種技術中,作為重組DNA分子受體細胞的一

般是o

答案精析

題組特訓一

1.(一)(1)接種環(huán)B(2)假絲酵母對氨基苯磺酸比色杯標準曲線(3)酸性

(二)(1)物質的良性循環(huán)秸稈一家畜一糞便一農(nóng)作物潔凈可再生的新能源開發(fā)(2)合

理優(yōu)化水土流失生物多樣性種間關系

2.(-)(1)D粘合(2)半乳糖醛酸果膠甲脂活性(3)沉淀

(二)(1)逆轉錄重組DNA分子農(nóng)桿菌B(2)搖床維持滲透壓

解析(一)(1)果膠是由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成,其化學本質屬于多糖。果膠起

著將植物細胞粘合在一起的作用。(2)果膠酶能將果膠分解成半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯

等物質,要使果汁更澄清,應同時使用果膠酶和果膠甲酯酶。用適量且濃度適宜的上述兩種

酶處理時,果汁的出汁率、澄清度與酶的活性高低成正相關。(3)由于果膠不溶于乙爵,故

可用乙醇對果膠粗提取物(經(jīng)酶處理后的混合物)進行沉淀處理,從而得到干制品。

(二)(1)以mRNA為模板合成DNA的過程為逆轉錄過程,這一過程需要在逆轉錄酶的催化下進

行。獲得目的基因后,需在限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的作用下,將目的基因與載體(Ti

質粒)連接形成重組DNA分子,再將其導入受體細胞。將目的基因導入植物細胞常用農(nóng)桿菌

轉化法,先將重組DNA導入經(jīng)氯化鈣處理的農(nóng)桿菌,再用導入目的基因的農(nóng)桿菌感染植物細

胞,最終將目的基因導入植物細胞內(nèi)。導入目的基因的植物細胞經(jīng)組織培養(yǎng)過程形成轉基因

植物。組織培養(yǎng)過程中,葉片在含適宜濃度的生長素的培養(yǎng)基上脫分化形成愈傷組織,然后

在含細胞分裂素和生長素配比較高的培養(yǎng)基上形成芽,繼而在生長素含量高的培養(yǎng)基上生

根,最后形成完整的植株,愈傷組織形成植株的過程中發(fā)生細胞的分化。(2)植物組織培養(yǎng)

過程中,將愈傷組織等細胞置于搖床上,進行液體懸浮培養(yǎng),形成多個分散的細胞。培養(yǎng)過

程中培養(yǎng)液一方面為植物細胞提供營養(yǎng),另一方面維持一定的滲透壓,從而使葉片保持正常

的形態(tài)。

3.(1)單菌落接種環(huán)液體限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶

(2)消毒愈傷組織C(3)叢狀苗篩選植物組織培養(yǎng)

(4)6—葡糖甘酸酶(5)降低

解析(1)構建含Barnase基因、B—葡糖甘酸酶基因和卡那霉素抗性基因的重組質粒,抗

性基因是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。構

建重組質粒時需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。將菌種接種在液體培養(yǎng)基中需要用接種

環(huán)接種。(2)幼嫩葡萄葉片需要經(jīng)過消毒后切成小塊,以防雜菌污染,離體植物組織或細胞

在培養(yǎng)基中脫分化成愈傷組織。頭抱霉素都有抗菌作用,用頭抱霉素處理葉片小塊,目的是

殺滅附著在葉片上的農(nóng)桿菌。(3)植物組織培養(yǎng)過程中包括脫分化成愈傷組織,再分化成胚

狀體,轉移到生芽培養(yǎng)基中,待其長出叢壯苗再轉移至生根培養(yǎng)基上。卡那霉素和頭抱霉素

都有抗菌作用,卡那霉素培養(yǎng)基起著篩選作用。

(4)重組質粒含有Barnase基因、B—葡糖甘酸酶基因和卡那霉素抗性基因,因此對試管苗

的B—葡糖甘酸酶基因的表達產(chǎn)物進行生化檢測,就能鑒別出真正的轉基因試管苗。

(5)對轉基因試管苗還需進行逐漸降低濕度的鍛煉,防止根部細胞厭氧呼吸產(chǎn)生大量酒精,

引起酒精中毒現(xiàn)象,出現(xiàn)爛根。

4.(一)(1)劃線分離法或涂布分離灼燒(滅菌)處理(2)有氧(通入無菌空氣或通入氧氣)

C2H50H+02—?CHJCOOH+HzO

(3)不能在果酒發(fā)酵旺盛時,發(fā)酹環(huán)境中無氧(4)C

(二)(1)基因表達載體的構建農(nóng)桿菌轉化法顯微注射法(2)聚乙二醇(PEG)動物細胞

培養(yǎng)特異性強、靈敏度高,并可大量制備(3)將內(nèi)細胞團均等進行分割

解析(一)(1)純化培養(yǎng)微生物時常采用劃線分離法或涂布分離法接種;對接種工具常采用

灼燒滅菌處理。

(2)醋化醋桿菌是嗜氧菌和嗜溫菌,因此由果酒轉變成果醋的制作時,需要改變的環(huán)境條件

是通入氧氣和溫度控制在30?35由果酒釀制成果醋過程的總反應式為:C2H5OH+

02—?CH;!C00H+H20O

(3)果酒發(fā)酵旺盛時為無氧環(huán)境,而醋化醋桿菌是嗜氧菌,因此若在果汁中含有醋化醋桿菌,

在果酒發(fā)酵旺盛時,醋化醋桿菌不能將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸。

(4)在用果汁制作果酒的過程中,酵母菌除了產(chǎn)生酒精外,還會產(chǎn)生二氧化碳,二氧化碳會

與水反應生成弱酸,因此發(fā)酵瓶溶液中pH減小。

(二)(1)基因工程的核心是基因表達載體的構建;將目的基因導入植物細胞采用最多的方法

是農(nóng)桿菌轉化法;將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法.

(2)植物體細胞雜交技術中,誘導原生質體融合的化學方法一般是聚乙二醇(PEG)作為誘導劑

來誘導細胞融合;動物細胞工程中動物細胞培養(yǎng)技術是其他動物細胞工程技術的基礎;動物

細胞工程的一項重要應用是單克隆抗體的制備,與普通抗體相比,單克隆抗體的最主要優(yōu)點

是特異性強、靈敏度高,并可大量制備。

(3)若對囊胚進行胚胎分割,要注意將內(nèi)細胞團均等進行分割,否則影響分割后胚胎的恢復

和進一步發(fā)育。

5.(一)(1)LB固體瓊脂(2)劃線分離(單)菌落超凈臺(3)B

(二)(1)蚯蚓、蒼蠅、細菌(微生物)物質循環(huán)利用(2)可以充分地利用垃圾中的物質(或

對物質的良性循環(huán)和多途徑利用)(3)B(4)畜牧業(yè)生態(tài)和經(jīng)濟

6.(1)含目的基因的DNA片段Ti質粒CaCk(2)纖維素能和果膠胰蛋白酶(3)血清

(4)固體培養(yǎng)基容易形成固定的菌落,便于進行篩選細胞分裂素母液滅菌(5)淀粉指

示劑溶液紅

解析(1)基因工程中,構建基因表達載體需要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶對目的基因(含目

的基因的DNA片段)和載體(Ti質粒)進行切割,然后用DNA連接酶進行連接。將重組DNA轉

入農(nóng)桿菌時,需要對大腸桿菌用氯化鈣處理,使其成為感受態(tài),便于導入。(2)植物體細胞

雜交過程中,先用纖維素酶和果膠酶將植物細胞壁去掉,獲得原生質體;動物細胞培養(yǎng)過程

中,用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,將細胞分散開來。(3)早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分有:

無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核甘酸等營養(yǎng)成分,以及血清等物質。(4)固體

培養(yǎng)基容易形成固定的菌落,便于進行篩選,所以分離細菌時通常用固體培養(yǎng)基:植物組織

培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和細胞分裂素,由于不同的過程兩種激素的比例不同,所以這

些植物激素一般需要事先單獨配制成母液保存?zhèn)溆谩J褂眠^的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅

菌處理后才能丟掉,以防止培養(yǎng)物的擴散。(5)淀粉水解后,用淀粉指示劑溶液測試,流出

物呈紅色,表明水解產(chǎn)物糊精生成。

7.(一)(1)有氧經(jīng)過濾的空氣(2)0(3)甘露醇7.0高壓蒸汽滅菌瓊脂

(二)(1)胰島B逆轉錄(2)相同(3)細胞壁(4)D一套遺傳密碼(5)細胞克隆

解析(一)(1)醋化醋桿菌是需氧型細菌,所以只有在有氧條件下才能將乙醇轉化為醋酸,

因此需要持續(xù)往發(fā)酵瓶中通入足量的經(jīng)過濾的空氣。

(2)底物充足條件下,醋酸發(fā)酵液在有氧條件下不斷產(chǎn)生醋酸,使pH值不斷減小,但減小到

一定程度之后,會導致醋化醋桿菌無法繼續(xù)產(chǎn)生醋酸,所以最后穩(wěn)定,綜上所述,選D。

(3)對醋化醋桿菌進行擴大培養(yǎng)所需的液體培養(yǎng)基(1L)配方為:蛋白腺3g、酵母提取物5g、

甘露醇25g和蒸儲水,并調(diào)pH至7.0,再用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。若要分離細菌,必

需用固體培養(yǎng)基,所以應在上述的培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑一一瓊脂。

(二)(1)由于胰島素只能在胰島B細胞內(nèi)表達,胰島素基因才會轉錄出相應的mRNA。為了

通過基因工程制取胰島素,若采用逆轉錄法獲得目的基因,必須先從人體胰島B細胞中獲

取控制人胰島素合成的mRNA,然后在逆轉錄酶催化下合成人胰島素基因。

(2)構建重組DNA分子時,為了保證目的基因能與載體連接,通常需要相同的限制性核酸內(nèi)

切醐分別切割目的基因和載體,然后用DNA連接酶使兩者連接在一起。

(3)為了增大大腸桿菌的細胞壁的通透性,通常使用氯化鈣處理大腸桿菌。

(4)如果目的基因在大腸桿菌中高效穩(wěn)定表達,最簡單有效的檢測方法是檢測培養(yǎng)基中胰島

素含量,所以選D。人胰島素基因能在大腸桿菌中表達是因為人和大腸桿菌共用一套遺傳密

碼。

(5)胰島素除了用于治療糖尿病之外,還可以用來提高動物細胞克隆形成率。

8.(一)(1)涂布分離法D(2)高壓蒸汽滅菌振蕩(3)低噬菌體侵染炭疽桿菌,炭疽

桿菌數(shù)量下降

(二)(1)受精或受精作用胚胎移植(2)卵泡卵母細胞(或次級卵母細胞)(3)克隆培養(yǎng)

法或細胞克隆A

解析(一)(1)涂布分離法是將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別

涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進行培養(yǎng)。由圖中四種菌落分布情況可知,A、B和C是采

用涂布分離法得到的,而D是采用劃線分離法得到的。

(2)制備圖甲中的液體培養(yǎng)基時應該用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌,以殺死微生物及芽胞。接

種可疑菌后,35℃培養(yǎng)24小時,細菌大量繁殖,液體培養(yǎng)基變渾濁。

(3)對照組試管中應加入等量生理鹽水,與實驗組同時培養(yǎng)6小時后,若實驗組液體培養(yǎng)基

的渾濁度比對照組低,則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染;反之則排除。此實

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