遺傳學(xué)第六章 病毒的遺傳分析課件

遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析

第六章病毒的遺傳分析一、病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)與基因組P184二、噬菌體的增殖與突變型（一）噬菌體的增殖P186（二）噬菌體的突變型1、條件致死突變?cè)谀承l件下，導(dǎo)致某些突變型致死，而另外一些條件下仍能增殖。致死條件為限制條件（restrictivecondition)。增殖條件為許可條件（permissivecondition)。遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析（1）溫度敏感突變熱敏感突變冷敏感突變（2）抑制因子敏感突變（sus突變）

sus突變

su+突變：宿主菌含有抑制基因su+，sus突變噬菌體感染此類菌時(shí)能產(chǎn)生后代。遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析2、噬菌斑形態(tài)突變（1）T4噬菌體簡(jiǎn)介

T4噬菌體為T-偶列噬菌體之一，基因組為165Kb的雙鏈DNA分子，包括160個(gè)基因，宿主為E.coli。形態(tài)特征環(huán)狀遺傳學(xué)圖遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析（2）T4野生型和突變型侵染E.coliB

和E.coliK(λ）噬菌斑的變化◆快速裂解（rapidlysis，r）突變：r-，形成大噬菌斑；r+，緩慢裂解，形成小噬菌斑。

P191表8-4T4野生型和突變型的區(qū)別類型表型

BK(λ）

野生型小噬菌斑小噬菌斑

rⅡ大噬菌斑無(wú)噬菌斑遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析3、宿主范圍突變型◆宿主范圍(hostrange，h)：h-表示可同時(shí)感染兩種不同的E.coli菌株B，B-2，噬菌斑透明。h+表示只感染菌株B，噬菌斑半透明。遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析三、噬菌體突變型的重組測(cè)驗(yàn)（一）Benzer的重組測(cè)驗(yàn)和基因的精細(xì)結(jié)構(gòu)分析實(shí)驗(yàn)：T4rⅡ區(qū)兩種突變型rⅡ63，rⅡ12同時(shí)侵

染E.coliB和E.coliK(λ），結(jié)果如下：遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析重組率=2×野生型噬菌斑數(shù)×100%

噬菌斑總數(shù)重組測(cè)驗(yàn)：確定突變基因間的空間關(guān)系。遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析（二）T2突變型的兩點(diǎn)測(cè)交與作圖遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析（三）λ噬菌體的基因重組與作圖（四）T4突變型的三點(diǎn)測(cè)交與作圖遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析四、噬菌體突變型的互補(bǔ)測(cè)驗(yàn)（一）互補(bǔ)測(cè)驗(yàn)與順反子互補(bǔ)測(cè)驗(yàn)：確定突變基因間的功能關(guān)系。判斷兩個(gè)突變是位于同一個(gè)基因內(nèi)的突變，還是兩個(gè)基因間的突變?；パa(bǔ)：一種突變型能彌補(bǔ)另一種突變型不具有的功能。這兩種突變就稱為彼此互補(bǔ)。順式排列，反式排列。遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析斑點(diǎn)測(cè)試法（spottest)P196

用一種rⅡ突變型以0.1的感染比（噬菌體1:細(xì)菌10）感染大腸桿菌K(λ），噬菌體和細(xì)菌在溫?zé)岬沫傊谢旌?，涂布在營(yíng)養(yǎng)平板上，瓊脂凝固后，在平板上劃出一定位置，再在上面滴加含另一種rⅡ突變型的培養(yǎng)基。在這一滴培養(yǎng)基范圍內(nèi)，一些菌被兩種噬菌體感染，如這范圍內(nèi)形成噬菌斑，就證明這兩種突變型互補(bǔ)，相反則不互補(bǔ)。在一個(gè)培養(yǎng)基上可做6—8個(gè)斑點(diǎn)試驗(yàn)。遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析

在反式測(cè)驗(yàn)中，如兩個(gè)突變之間能互補(bǔ)，則表明兩個(gè)突變是位于兩個(gè)基因（順反子）內(nèi)的突變。如兩個(gè)突變之間不能互補(bǔ)，則表明兩個(gè)突變是位于同一個(gè)基因內(nèi)的突變。遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析順反子：一個(gè)不同突變之間沒有互補(bǔ)的功能區(qū)稱為順反子（cistron)。遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析（二）基因內(nèi)互補(bǔ)例外情況。如：沙門氏桿菌甘油磷酸脫氫酶基因；大腸桿菌和脈孢菌色氨酸合成酶基因；脈孢菌谷氨酸脫氫酶基因。1、基因內(nèi)互補(bǔ)和基因間互補(bǔ)的區(qū)別P2002、基因內(nèi)互補(bǔ)的作用機(jī)制P202圖8-14遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析五、噬菌體T4rⅡ缺失突變與作圖（一）缺失作圖的原理

缺失突變（deletionmutation）：一個(gè)順反子內(nèi)缺失一段核苷酸的突變。

點(diǎn)突變（pointmutation）：一個(gè)順反子內(nèi)單個(gè)核苷酸發(fā)生的改變。

當(dāng)同一順反子內(nèi)的缺失突變和點(diǎn)突變重疊時(shí)，不能產(chǎn)生基因內(nèi)重組,因此無(wú)野生型噬菌體。遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析（二）缺失作圖的方法

利用重疊缺失定位未知的rⅡ突變：

根據(jù)是否產(chǎn)生野生型噬菌體，系列Ⅰ將rⅡ突變定于A5片段；系列Ⅱ?qū)Ⅱ突變定于A5c區(qū)；系列Ⅲ將其定于A5c3區(qū)。

遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析rⅡ基因座A、B順反子的部分突變圖，每個(gè)正方形代表一個(gè)獨(dú)立分離的突變遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析六、λ噬菌體的基因組與位點(diǎn)專一性重組（一）λ噬菌體的基因組遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析(二）位點(diǎn)專一性重組的分子機(jī)制遺傳學(xué)第六章病毒的遺傳分析遺傳學(xué)第六章病毒