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文檔簡介
2025屆河北省遵化市堡子店中學(xué)生物高三第一學(xué)期期末學(xué)業(yè)水平測試模擬試題注意事項(xiàng):1.答卷前,考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在答題卡上。2.回答選擇題時(shí),選出每小題答案后,用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑,如需改動,用橡皮擦干凈后,再選涂其它答案標(biāo)號?;卮鸱沁x擇題時(shí),將答案寫在答題卡上,寫在本試卷上無效。3.考試結(jié)束后,將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求)1.下列有關(guān)種群和群落的說法,正確的是()A.群落的物種組成是區(qū)別不同群落的重要特征B.種群的數(shù)量變化就是“J”型和“S”型增長C.群落演替總是由低等到高等,由簡單到復(fù)雜方向發(fā)展D.噴灑農(nóng)藥來防治害蟲,可以達(dá)到從根本上消滅害蟲的目的2.關(guān)于蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與功能的敘述,正確的是()A.細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)發(fā)生水解時(shí),通常需要酶的參與B.某種環(huán)狀八肽分子含有7個肽鍵C.細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的載體都是蛋白質(zhì)D.蛋白質(zhì)高溫變性后不能與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)3.下列有關(guān)“檢測生物組織中的油脂、糖類和蛋白質(zhì)”活動的敘述,正確的是()A.在制作花生種子徒手切片時(shí),需先將花生子葉的一端切出一個平面B.檢測還原糖時(shí),用100℃比80℃的熱水浴更快出現(xiàn)橙黃色沉淀C.檢測蛋白質(zhì)時(shí),先加2ml雙縮脲試劑A,再加2ml雙縮脲試劑BD.活動均未設(shè)置對照組4.下圖表示某遺傳病患者體細(xì)胞內(nèi)第21號染色體的組成及來源,下列敘述正確的是A.該遺傳病的遺傳遵循孟德爾遺傳定律B.母方由于減數(shù)第一次分裂異常產(chǎn)生了異常的卵細(xì)胞C.父方由于減數(shù)第二次分裂異常產(chǎn)生了異常的精子D.該患者減數(shù)分裂產(chǎn)生的配子中,正常配子約占1/25.如圖為肺炎雙球菌活體轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖,下列相關(guān)敘述錯誤的是()A.若A組處理改為S型菌與DNA酶混合,則實(shí)驗(yàn)結(jié)果為小鼠死亡B.若B組處理改為用射線照射過的活R型菌,則實(shí)驗(yàn)結(jié)果為小鼠存活C.若C組小鼠處理后一段時(shí)間再施加A組處理,則實(shí)驗(yàn)結(jié)果為小鼠存活D.若D組處理改為S型菌的DNA與活的R型菌混合,則小鼠死亡的時(shí)間可能提前6.下列關(guān)于DNA聚合酶和DNA連接酶敘述正確的是()A.兩種酶都能催化磷酸二酯鍵形成,不具有專一性B.兩種酶均在細(xì)胞內(nèi)合成,且僅在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮催化作用C.兩種酶的化學(xué)本質(zhì)都是蛋白質(zhì),能降低化學(xué)反應(yīng)活化能D.PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段過程,反應(yīng)體系中需要加入兩種酶二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)山楂果漿黏度大,含有豐富的果膠。為提高山楂果汁的產(chǎn)量,某興趣小組從土壤中分離產(chǎn)果膠酶的微生物,并探究溫度對果膠酶活性的影響,進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)?;卮鹣铝袉栴}:(1)若要分離產(chǎn)果膠酶菌株,需配制以_______________為唯一碳源的培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基能分離目的菌株的原因是____________________________________________。(2)將從果園采集的土壤放入適量的無菌水中,振蕩混勻制成土壤懸液,備用。①為獲得均勻分布的單菌落,先將土壤懸液進(jìn)行____________處理,然后將處理后的土壤懸液接種于______________(物理狀態(tài))培養(yǎng)基上。該方法也可用于測定產(chǎn)果膠酶菌的數(shù)量,但測定的菌體數(shù)量通常比實(shí)際值______________________。②若增加對照組可提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性,對照組的設(shè)置為__________________________。(3)為探究不同溫度對果膠酶活性的影響,某興趣小組進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)步驟①在甲、乙兩支試管中分別加入5mL山楂泥?2mL果膠酶,并置于10℃恒溫水浴鍋中保溫5分鐘;②將步驟①處理后的果膠酶倒入山楂泥中,混勻后10℃保溫20分鐘;③過濾混合物,收集濾液,測定果汁量;④將實(shí)驗(yàn)溫度分別設(shè)置為20℃?30℃?40℃?50℃?60℃?70℃?80℃的條件下,重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟①②③,并測定、記錄果汁量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(略)上述實(shí)驗(yàn)步驟①②中先分別保溫、再混合的目的是____________________,該實(shí)驗(yàn)通過______________來判斷果膠酶活性的大小。8.(10分)為使水稻獲得抗除草劑性狀,科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)入水稻植株,獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻。(1)將草甘膦抗性基因作為_____,與Ti質(zhì)粒用相同的_____和DNA連接酶處理構(gòu)建基因表達(dá)載體。(2)用_____處理農(nóng)桿菌后獲得感受態(tài)細(xì)胞,將其與基因表達(dá)載體混合完成轉(zhuǎn)化后,在添加_____的培養(yǎng)基中,經(jīng)篩選1得到含基因表達(dá)載體的農(nóng)桿菌。(3)利用PCR技術(shù),可以鑒定被侵染的愈傷組織中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下:5'﹣﹣﹣ATGGCT………AGGAAC﹣﹣﹣3'3'﹣﹣﹣TACCGA………TCCTTG﹣﹣﹣5'根據(jù)上述序列應(yīng)選擇引物_____(填字母)進(jìn)行PCR。A.引物:5'﹣TACCGA﹣3'B.引物:5'﹣GTTCCT﹣3'C.引物:5'﹣AUGGCU﹣3'D.引物:5'﹣ATGGCT﹣3'(4)PCR擴(kuò)增時(shí)需要根據(jù)草甘膦抗性基因序列設(shè)計(jì)_____種引物,其原因是_____。(5)除了鑒定愈傷組織中是否含有目的基因以外,還可以利用GUS基因表達(dá)產(chǎn)物的鑒定進(jìn)行圖中的篩選2,以確定目的基因是否_____。兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過細(xì)胞的_____過程,獲得轉(zhuǎn)基因水稻。9.(10分)鴯鹋油提取自澳洲動物鴯鹋(一種當(dāng)?shù)爻R婙B類)的背部脂肪,具有很多用途,如促進(jìn)傷口愈合,緩解關(guān)節(jié)炎等,也常與一些抗菌成分混合制成抗菌藥物,近年來受到研究人員的關(guān)注。(1)隨著抗菌藥物被廣泛使用,病原菌的抗藥性基因頻率發(fā)生___________(填“定向”或“不定向”)改變,人們迫切希望發(fā)現(xiàn)新結(jié)構(gòu)的抗菌化合物。(2)前期研究發(fā)現(xiàn)鴯鹋油的水溶性較差,所以不能在___________培養(yǎng)基上出現(xiàn)清晰的抑菌圈,故將醇鵲油與乙醇和Tween81(一種乳化劑)混合均勻制成乳液。為確定鴯鹋油的最小抑菌濃度(MIC),研究人員進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn):①將大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌分別___________到LB培養(yǎng)基中,在37℃搖床條件下培養(yǎng)。搖床振蕩培養(yǎng)的原因是___________。②一段時(shí)間后將上述培養(yǎng)基稀釋為一定濃度的菌懸液,加入不同稀釋濃度的鴯鹋油乳液并振蕩混勻,培養(yǎng)21h后測定菌體的存活狀況,結(jié)果如下表。鴯鹋油濃度/%菌體生長情況大腸桿菌金黃色葡萄球菌沙門氏菌1+++1.11156+++1.11313+++1.11625-++1.1125--+1.125--+1.15--+注:“+”表示有菌生長;“-”表示無菌生長。上述結(jié)果顯示:_______________。(3)常見抗菌藥物青霉素的抗菌機(jī)理是抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成。有人提出鴯鹋油可增大菌體細(xì)胞膜的通透性。已知多數(shù)細(xì)菌體內(nèi)存在β—半乳糖苷酶,可催化乳糖水解生成_________________和半乳糖,鄰硝基酚-β半乳糖苷(ONPG)是一種乳糖類似物,可進(jìn)入菌體,被β-半乳糖苷酶水解為鄰硝基苯酚(一種黃色物質(zhì))。分光光度計(jì)可定量檢測溶液中某種物質(zhì)的含量。為確定鵲油能否增大菌體細(xì)胞膜通透性,請你根據(jù)上述原理寫出實(shí)驗(yàn)思路____________。10.(10分)酵母菌是單細(xì)胞真菌,在自然界中分布廣泛,在人類的生活和生產(chǎn)中應(yīng)用也很多?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題:(1)傳統(tǒng)做米酒的操作中沒有進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理,但米酒井沒有被雜菌污染而腐敗,原因是在____________環(huán)境條件下酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物因無法適應(yīng)而受抑制;米酒開封后一段時(shí)間會變酸,可能的原因是____________________________________。(2)為實(shí)現(xiàn)啤酒發(fā)酵連續(xù)生產(chǎn),酵母細(xì)胞固定化技術(shù)已在啤酒工業(yè)中廣泛應(yīng)用,例如,將啤酒酵母和_____________混合均勻,經(jīng)處理形成凝膠顆粒,而酵母細(xì)胞則被固定在其內(nèi)部。這種固定化方法稱為_____________。(3)土壤是酵母菌的大本營,人們想從土壤中分離得到純凈的酵母菌,操作過程中要特別注意防止________________。如果還需要統(tǒng)計(jì)土壤中酵母菌的含量,應(yīng)該采用的接種方法是_____________。(4)科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)酵母菌R能合成胡蘿卜素。若要從酵母菌R中萃取出胡蘿卜素,可以用石油醚作萃取劑,理由是__________________________________(需答兩點(diǎn)理由)。萃取胡蘿卜素時(shí)的溫度不能太高,否則會導(dǎo)致_____________。11.(15分)果蠅的眼色中有白色(不含色素)、紅色和紫色三種,細(xì)胞中紅色色素的合成必需有基因A控制合成的酶催化。若細(xì)胞中基因D控制合成的酶存在時(shí),紅色色素會轉(zhuǎn)化為紫色色素,使眼色呈紫色。當(dāng)細(xì)胞中不能形成紅色色素時(shí),眼色為白色?,F(xiàn)以兩個純系果蠅進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn),結(jié)果如下圖。請回答下列問題:(1)根據(jù)F2代表現(xiàn)型,可以推測果蠅的眼色性狀由_______對等位基因控制,且果蠅眼色性狀遺傳遵循________定律。(2)F1中紅眼雄果蠅產(chǎn)生的精子的基因組成有___________。F2中紫眼雌果蠅的基因型有____________。(3)若讓F2中全部紅眼雌果蠅測交,則后代表現(xiàn)型及比例為____________。(4)若讓F2中全部紫眼雄果蠅與白眼雌果蠅隨機(jī)交配,則后代中白眼雄果蠅所占比例為_________。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求)1、A【解析】
種群是指生活在一定區(qū)域的同種生物的全部個體,種群特征包括種群的數(shù)量特征(種群密度)、年齡結(jié)構(gòu)、性別比例、遷入率和遷出率、出生率和死亡率、空間特征等。群落的概念:在一定空間內(nèi)所有生物種群的集合體,它具有一定的結(jié)構(gòu)、一定的種類構(gòu)成和一定的種間相互關(guān)系。群落演替是指隨著時(shí)間的推移一個群落被另一個群落代替的過程?!驹斀狻緼、群落的物種組成是區(qū)別不同群落的重要特征,A正確;B、種群的數(shù)量變化是一個復(fù)雜的動態(tài)變化過程,常見的數(shù)量變化有“J”型和“S”型增長,也有其他增長形式,B錯誤;C、群落演替一般來說,由低等到高等,由簡單到復(fù)雜方向發(fā)展,但在自然災(zāi)害或人為干預(yù)下,可能會朝著反方向發(fā)展,C錯誤;D、噴灑農(nóng)藥來防治害蟲,可以殺滅大部分害蟲,但仍有少部分帶抗性的個體存活,D錯誤。故選A。2、A【解析】
1.蛋白質(zhì)或多肽中含有肽鍵,可與雙縮脲試劑作用產(chǎn)生紫色反應(yīng)。2.蛋白質(zhì)的功能-生命活動的主要承擔(dān)者:①構(gòu)成細(xì)胞和生物體的重要物質(zhì),即結(jié)構(gòu)蛋白,如羽毛、頭發(fā)、蛛絲、肌動蛋白;②催化作用:如絕大多數(shù)酶;③傳遞信息,即調(diào)節(jié)作用:如胰島素、生長激素;④免疫作用:如免疫球蛋白(抗體);⑤運(yùn)輸作用:如紅細(xì)胞中的血紅蛋白?!驹斀狻緼、細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)發(fā)生水解時(shí),通常需要蛋白酶的參與,蛋白酶也是一種蛋白質(zhì),A正確;B、某種環(huán)狀八肽分子含有8個肽鍵,B錯誤;C、細(xì)胞質(zhì)中tRNA負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸,tRNA不是蛋白質(zhì),C錯誤;D、變性蛋白質(zhì)中的空間結(jié)構(gòu)被破壞,肽鍵沒有斷裂,仍能與雙縮脲試劑作用發(fā)生紫色反應(yīng),D錯誤。故選A。3、A【解析】
本尼迪特試劑是由甲液(質(zhì)量濃度為0.1g/mL氫氧化鈉溶液)和乙液(質(zhì)量濃度為0.05g/mL硫酸銅溶液)組成,用于鑒定還原糖,使用時(shí)要將甲液和乙液混合均勻后再加入含樣品的試管中,且需水浴加熱;雙縮脲試劑由A液(質(zhì)量濃度為0.1g/mL氫氧化鈉溶液)和B液(質(zhì)量濃度為0.01g/mL硫酸銅溶液)組成,用于鑒定蛋白質(zhì),使用時(shí)要先加A液后再加入B液?!驹斀狻緼、在制作花生種子徒手切片時(shí),為便于后續(xù)的操作,需先將花生子葉的一端切出一個平面,A正確;B、本尼迪試劑在水浴條件下與還原糖產(chǎn)生紅黃色沉淀,B錯誤;C、檢測蛋白質(zhì)時(shí),應(yīng)取2mL樣本上清液加入2mL雙縮脲試劑A,振蕩試管,使樣本與試劑A混合均勻,再加入5滴雙縮脲試劑B,C錯誤;D、活動中實(shí)驗(yàn)前后的現(xiàn)象形成了前后(自身)對照,D錯誤。故選A?!军c(diǎn)睛】本題考查生物組織中化合物的鑒定,對于此類試題,需要考生注意的細(xì)節(jié)較多,如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的使用方法、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象等,需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中注意積累。4、D【解析】
根據(jù)圖示中染色體的形態(tài)可知多出的一條21號染色體應(yīng)該來自母方,且是母方減數(shù)第二次分裂異常形成的異常卵細(xì)胞與正常精子結(jié)合形成的受精卵發(fā)育而來?!驹斀狻吭撨z傳病屬于染色體數(shù)目異常導(dǎo)致的遺傳病,不遵循孟德爾遺傳定律,A錯誤;根據(jù)圖示中染色體的形態(tài)可知該患者是由于母方減數(shù)第二次分裂時(shí)姐妹染色體沒有分離,導(dǎo)致形成了異常的卵細(xì)胞,BC錯誤;該患者減數(shù)分裂時(shí)三條21號染色體隨機(jī)分,產(chǎn)生的配子中含兩條21號染色體和含1條21號染色體的概率相同,故正常配子約占1/2
,D正確。
故選D?!军c(diǎn)睛】本題依托21號三體患者染色體數(shù)目變化示意圖,考查致病原因,意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn),把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系,形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。5、B【解析】
由肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)可知,只有S型菌有毒,會導(dǎo)致小鼠死亡,S型菌的DNA才會使R型菌轉(zhuǎn)化為S型菌。肺炎雙球菌體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn):R型細(xì)菌→小鼠→存活;S型細(xì)菌→小鼠→死亡;加熱殺死的S型細(xì)菌→小鼠→存活;加熱殺死的S型細(xì)菌+R型細(xì)菌→小鼠→死亡。肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)包括格里菲思的體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn),其中格里菲思的體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明加熱殺死的S型細(xì)菌中存在某種“轉(zhuǎn)化因子”,能將R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌,但并不知道該“轉(zhuǎn)化因子”是什么,而體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì)?!驹斀狻緼、S型菌的DNA在細(xì)胞內(nèi),DNA酶無法發(fā)揮作用,所以實(shí)驗(yàn)結(jié)果為小鼠死亡,A正確;B、若B組處理改為用射線照射過的活R型菌,有些R型菌可能發(fā)生基因突變,突變菌可能使小鼠死亡,也可能不影響小鼠存活,B錯誤;C、若C組小鼠處理后一段時(shí)間再施加A組處理,小鼠通過二次免疫可將S型菌及時(shí)消滅,所以實(shí)驗(yàn)結(jié)果為小鼠存活,C正確;D、若D組處理改為S型菌的DNA與活的R型菌混合,則R型菌轉(zhuǎn)化為S型菌的效率提高,所以小鼠死亡的時(shí)間可能提前,D正確。故選B。6、C【解析】
DNA連接酶和DNA聚合酶的區(qū)別:
①DNA連接酶是在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵,而DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上,形成磷酸二酯鍵;
②DNA連接酶是同時(shí)連接雙鏈的切口,而DNA聚合酶只是在單鏈上將一個個脫氧核苷酸連接起來;
③DNA連接酶不需要模板,而DNA聚合酶需要模板。【詳解】A、DNA連接酶和DNA聚合酶都是催化形成磷酸二酯鍵,DNA連接酶只能連接相同的黏性末端,具有專一性,DNA聚合酶只能催化脫氧核苷酸連接,不能催化核糖核苷酸,也具有專一性,A錯誤;
B、兩種酶均在細(xì)胞內(nèi)合成,在細(xì)胞內(nèi)、外均能發(fā)揮催化作用,B錯誤;
C、兩種酶的化學(xué)本質(zhì)都是蛋白質(zhì),兩種酶的作用實(shí)質(zhì)是降低化學(xué)反應(yīng)活化能,C正確;
D、PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段過程,反應(yīng)體系中需要加入耐高溫的DNA聚合酶,D錯誤。
故選C。【點(diǎn)睛】本題主要考查了學(xué)生的記憶和理解能力,限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,DNA連接酶作用的位點(diǎn)是磷酸二酯鍵,與限制酶的作用相反。二、綜合題:本大題共4小題7、果膠只有能產(chǎn)生果膠酶的微生物才能利用果膠生長繁殖梯度稀釋固體小在無菌的條件下,將未接種的培養(yǎng)基置于適宜溫度的恒溫箱中培養(yǎng),觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生使果膠酶和山楂泥處于實(shí)驗(yàn)設(shè)置的同一溫度條件下,進(jìn)行酶促反應(yīng)單位時(shí)間、單位體積產(chǎn)生的果汁量【解析】
選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長,促進(jìn)所需要的微生物的生長,欲分離產(chǎn)果膠酶菌株時(shí),應(yīng)以果膠作為唯一的碳源,只有能產(chǎn)生果膠酶的微生物才能在此培養(yǎng)基上生長繁殖。【詳解】(1)要分離出產(chǎn)果膠酶的菌株,需配制以果膠為唯一碳源的培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基之所以能分離目的菌株是因?yàn)槌摼晖馄渌瓴缓泄z酶,無法利用果膠,故無法在該培養(yǎng)基上生長。(2)①為獲得較均勻分布的單菌落,還需要將土壤懸液進(jìn)行梯度稀釋,使土壤懸液的細(xì)菌密度降低,并用稀釋涂布法接種于固體培養(yǎng)基上。由于當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起生長時(shí),平板上觀察到的只是一個菌落,所以用上述方法測定的菌體數(shù)量通常比實(shí)際值少。②若要提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性,需排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性,故應(yīng)該設(shè)置培養(yǎng)基中未接種(或接種等量無菌水)的培養(yǎng)皿作為空白對照。(3)將果膠酶作用的底物與果膠酶先分別保溫,再混合的目的是確保在反應(yīng)時(shí)山楂泥和果膠酶是處于同一溫度的,避免為實(shí)驗(yàn)增加其他影響因素。酶的活性大小可用一定時(shí)間內(nèi)生成物的量來表示,該實(shí)驗(yàn)是通過單位時(shí)間、單位體積產(chǎn)生的果汁量的多少來判斷果膠酶活性的大小。【點(diǎn)睛】本題考查微生物的培養(yǎng)和選擇以及不同溫度對酶活性影響的實(shí)驗(yàn),意在考查考生對所學(xué)知識的綜合運(yùn)用能力。8、目的基因限制性核酸內(nèi)切酶CaCl2潮霉素BD2保證基因的兩條反向平行的鏈都做模板,且其上堿基序列不同表達(dá)再分化【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成;(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等;(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法;(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA﹣﹣分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)用相同的限制性內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒后露出相同的黏性末端再用DNA連接酶連接,從而構(gòu)建基因表達(dá)載體,題中以草甘膦抗性基因作為目的基因。(2)依據(jù)圖中信息,農(nóng)桿菌用CaCl2處理后變成感受態(tài)細(xì)胞,將其與基因表達(dá)載體混合完成轉(zhuǎn)化后,在含有標(biāo)記基因表達(dá)的潮霉素培養(yǎng)基中篩選,從而獲得含目的基因表達(dá)載體的農(nóng)桿菌。(3)根據(jù)已知草甘膦抗性基因的部分序列以及雙鏈DNA分子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)(反向平行),再結(jié)合DNA復(fù)制(PCR中)的特點(diǎn),即子鏈合成的方向是從5’到3’,應(yīng)選擇引物B、D進(jìn)行PCR擴(kuò)增。(4)為使基因的兩條反向平行的鏈都做模板,而且其堿基序列不同,所以,PCR擴(kuò)增時(shí)需要根據(jù)草甘膦抗性基因序列設(shè)計(jì)2種引物。(5)除了鑒定愈傷組織中是否含有目的基因以外,還可以利用GUS基因表達(dá)產(chǎn)物的鑒定進(jìn)行圖中的篩選2,以確定目的基因是否表達(dá)。兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過再分化過程,獲得轉(zhuǎn)基因水稻?!军c(diǎn)睛】本題主要考查基因工程的應(yīng)用相關(guān)知識,識記和理解目的基因的獲取、表達(dá)載體的構(gòu)建以及目的基因的檢測等知識是解答本題的關(guān)鍵。9、定向固體接種供氧、目的菌與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸大腸桿菌對鴯鹋油較為敏感,最小抑菌濃度約為1.11625%,對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度約為1.1125%,并且鴯鹋油對沙門氏菌沒有表現(xiàn)出抑菌性葡萄糖將大腸桿菌(或其他細(xì)菌)置于培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間,再加入ONPG和一定濃度(≥MIC)的鴯鹋油,對照組不加鴯鹋油。一段時(shí)間后利用分光光度計(jì)測量鄰硝基苯酚的量,記錄并比較?!窘馕觥?/p>
微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng),常用到培養(yǎng)基,培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。抑菌圈法又叫擴(kuò)散法,是利用待測藥物在瓊脂平板中擴(kuò)散使其周圍的細(xì)菌生長受到抑制而形成透明圈,即抑菌圈,根據(jù)抑菌圈大小判定待測藥物抑菌效價(jià)的一種方法?!驹斀狻浚?)隨著抗菌藥物被廣泛使用,抗藥性強(qiáng)的病原菌存活,病原菌的抗藥性基因頻率提高,發(fā)生定向改變。(2)鴯鹋油的水溶性較差,所以不能在固體培養(yǎng)基上出現(xiàn)清晰的抑菌圈。①將大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌分別接種到LB培養(yǎng)基中。搖床振蕩培養(yǎng)可以提高溶氧量、增加目的菌與營養(yǎng)物質(zhì)的接觸。②從表中可知,不同稀釋濃度的鴯鹋油乳液中沙門氏菌均有生長,說明鴯鹋油對沙門氏菌沒有表現(xiàn)出抑菌性。1.11625濃度下,大腸桿菌停止生長,1.1125濃度下,金黃色葡萄球菌停止生長,說明大腸桿菌對鴯鹋油較為敏感,最小抑菌濃度約為1.11625%,對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度約為1.1125%。(3)乳糖由一分子半乳糖和一分子葡萄糖組成。鄰硝基酚-β半乳糖苷(ONPG)是一種乳糖類似物,可進(jìn)入菌體,被β-半乳糖苷酶水解為鄰硝基苯酚(一種黃色物質(zhì))。分光光度計(jì)可定量檢測溶液中某種物質(zhì)的含量。為確定鵲油能否增大菌體細(xì)胞膜通透性,自變量是鵲油的有無,因變量是菌體細(xì)胞膜的通透性。觀測指標(biāo)為鄰硝基苯酚的量。因此,實(shí)驗(yàn)可設(shè)計(jì)為:將大腸桿菌(或其他細(xì)菌)置于培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間,再加入ONPG和一定濃度(≥MIC)的鴯鹋油,對照組不加鴯鹋油。一段時(shí)間后利用分光光度計(jì)測量鄰硝基苯酚的量,記錄并比較?!军c(diǎn)睛】本題以實(shí)驗(yàn)的形式考查微生物的培養(yǎng)與篩選,要求學(xué)生對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有一定的分析處理能力。10、缺氧和酸性醋酸菌在有氧條件下,將酒和糖轉(zhuǎn)化為醋酸所致海藻酸鈉包埋法外來雜菌的入侵稀釋涂布平板法沸點(diǎn)高,與水不混溶,能夠充分溶解胡蘿卜素等胡蘿卜素分解【解析】
1.酵母菌在有氧和無氧的條件下都能生活:在有氧時(shí),酵母菌大量繁殖,但是不起到發(fā)酵效果,在無氧時(shí),繁殖速度減慢,但是此時(shí)可以進(jìn)行發(fā)酵。在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖,再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵。20℃左右最適合酵母菌繁殖,酒精發(fā)酵的好溫度是在18℃~25℃,pH最好是弱酸性。2.測定培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目,可采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)(或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù))法對培養(yǎng)液中的微生物直接計(jì)數(shù),也可用稀釋涂布平板法將微生物接種于滅菌后的固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時(shí)間后,通過計(jì)數(shù)菌落數(shù)目計(jì)算培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目。由于采用第一種方法計(jì)數(shù)時(shí)不能剔除死菌,采用第二種方法計(jì)數(shù)時(shí),當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個菌落,所以第一種方法統(tǒng)計(jì)的數(shù)目比實(shí)際活菌數(shù)目高,第二種方法統(tǒng)計(jì)的數(shù)目比實(shí)際活菌數(shù)目低?!驹斀狻浚?)在缺氧和酸性環(huán)境條件下酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物因無法適應(yīng)而受抑制,因此傳統(tǒng)做米酒的操作中不需要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理,而且米酒也不會被雜菌污染而腐敗,米酒開封后一段時(shí)間會變酸,是因?yàn)樵谟醒鯒l件下,醋酸菌將酒和糖轉(zhuǎn)化為醋酸引起的。(2)酵母細(xì)胞固定化技術(shù)通常的做法是,將啤酒酵母和海藻酸鈉混合均勻,然后用注射器將混合溶液以恒定的速度滴加到適宜濃度的溶液中,經(jīng)過處理形成凝膠顆粒,而酵母細(xì)胞則被包埋其中,這種方法叫做包埋法。(3)要想從土壤中分離得到純凈的酵母菌,嚴(yán)格的無菌技術(shù)是成功的保證,即在操作過程中要特別注意防止外來雜菌的入侵。為了統(tǒng)計(jì)土壤中酵母菌的含量,需要采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種,然后統(tǒng)計(jì)平板中的菌落數(shù)。(4)石油醚沸點(diǎn)高,與水不混溶,能夠充分溶解胡蘿卜素,因此,選用石油醚作萃取劑從酵母菌R中萃取胡蘿卜素。萃取胡蘿卜素時(shí)的溫度不能太高,否則會導(dǎo)致胡蘿卜素分解?!军c(diǎn)睛】熟知果酒、果醋發(fā)酵過程的操作要點(diǎn)時(shí)解答本題的關(guān)鍵,酵母細(xì)胞的固定
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