分子遺傳學(xué)引言

分子遺傳學(xué)引言第一章引言(2學(xué)時(shí))第二章遺傳得物質(zhì)基礎(chǔ)(4學(xué)時(shí))第三章基因與基因組(6學(xué)時(shí))第四章DNA復(fù)制(4學(xué)時(shí))第五章轉(zhuǎn)錄(10學(xué)時(shí))第六章翻譯(4學(xué)時(shí))第七章突變和遺傳重組(6學(xué)時(shí))第八章原核生物基因表達(dá)調(diào)控(7學(xué)時(shí))第九章真核生物基因表達(dá)調(diào)控(3學(xué)時(shí))第十章分子標(biāo)記技術(shù)(2學(xué)時(shí))23主要參考書1、《基礎(chǔ)分子生物學(xué)》,鄭用璉主編,高等教育出版社,2007(普通高等教育十五國(guó)家級(jí)規(guī)劃教材)2、《MolecularBiology》(Third):RobetF、Weaver

McGraw-Hillpanies,Inc、20043、《GenesVIII》BenjaminLewinPrenticeHall20044、《分子遺傳學(xué)》,孫乃恩主編,南京大學(xué)出版社,19965、《現(xiàn)代分子生物學(xué)》(第二版),朱玉賢、李毅,高等教育出版社,19976、《分子生物學(xué)》,閻隆飛、張玉麟,農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,19977、《分子遺傳學(xué)》,張玉靜主編,科學(xué)出版社,20024一、分子生物學(xué)及分子遺傳學(xué)得含義二、分子遺傳學(xué)得發(fā)展簡(jiǎn)史三、分子生物學(xué)家獲得Nobel獎(jiǎng)情況第一章引言51、廣義得分子生物學(xué):研究蛋白質(zhì)(Protein)及核酸(Nucleicacid)等生物大分子得結(jié)構(gòu)、功能和生物大分子之間得互作,即從分子水平上闡明生命現(xiàn)象和生物學(xué)規(guī)律。2、狹義得分子生物學(xué):即分子遺傳學(xué)或核酸(基因)得分子生物學(xué)研究基因得概念、結(jié)構(gòu)、復(fù)制、表達(dá)、調(diào)控、遺傳、突變及交換得分子基礎(chǔ)。一、分子生物學(xué)及分子遺傳學(xué)得含義6結(jié)構(gòu)生物學(xué)基因分子生物學(xué)生物技術(shù)理論與應(yīng)用3、分子生物學(xué)研究得三大主要領(lǐng)域生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能生物大分子之間的互作DNA—proteinHormone—receptorEnzyme—substrate.基因的概念基因的結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)基因的重組基因的交換基因工程細(xì)胞工程酶工程發(fā)酵工程蛋白質(zhì)工程狹義得分子生物學(xué)71847年Schleiden&Schwann細(xì)胞得化學(xué)組成,細(xì)胞器得結(jié)構(gòu),細(xì)胞骨架,生物大分子在細(xì)胞中得定位及功能4、分子生物學(xué)發(fā)展得支撐學(xué)科4、1分子生物學(xué)發(fā)展得三大支撐學(xué)科之一生物體由細(xì)胞組成所有組織的最基本單元形狀相似，高度分化的細(xì)胞細(xì)胞的發(fā)生與形成是生物界普遍和永久的規(guī)律CytologyMolecularCellbiology分子細(xì)胞生物學(xué)Cytology細(xì)胞學(xué)89大家應(yīng)該也有點(diǎn)累了，稍作休息大家有疑問(wèn)的，可以詢問(wèn)和交流1864年MendelGeneticsMolecularGeneticsGenestructureGeneduplicationGeneexpressionGenerebinationGenemutation

4、2分子生物學(xué)發(fā)展得三大支撐學(xué)科之二遺傳因子假說(shuō)Genetics101112蛋白質(zhì)因子特異DNA序列編碼序列啟動(dòng)序列操縱序列其他調(diào)節(jié)序列(promoter)(operator)1314AGAATTTTCTAACTAAAAGTTCATAAGACAAACCCAAACATTGTCATGTTTCTCGGTTCTTTCTTACAACCCAAGCTGACCCTTAACATCATCGAAGAGTCCCCCCCACCGAAAGCCCTCCCCTCTGCTCTTAAAGTCCCCTTCATTCCATTACAAAAATGTCCGAACTCTGATATCCCTTCACTTATCTTTCCACCACCACAATTCCACCAGTTCCAAGCTTCTTTTCAAACAACAAAACCCCACATGTCTTCCTTTTCGGTCCGTTTCTTTGCTCCACAACAGCCGTTACTGCCGTCCACAGCTTCCTCTTTCAAGCCCAAAACATGGGTTATGGCAGCTCCCACGACGGCGCCAGCGACTTCGGTGGATGTCGACGGGCAGAGGTTGGAACCCCGAGTTGAAGAACGAGAGGGGTACTTCGTGTTGAAAGAGAAGTTCAGAGATGGCATCAACCCTCAAGAGAAAATAAAGATCGAGAAAGACCCTTTGAAGCTTTTCATGGAAGCTGGGATTGATGAACTCGCTAAGATGTCGTTCGAGGATATTGATAAAGCTAAGGCTACAAAGGACGACATTGATGTTAGACTTAAATGGCTCGGCTTGTTCCATAGGAGAAAACATCAATATGGGAGATTTATGATGAGATTAAAACTACCAAATGGTGTAACAACAAGTGCACAAACACGGTACTTAGCCAGTGTGATAAGGAAATACGGCAAAGAAGGGTGTGCAGATGTTACGACAAGGCAAAACTGGCAAATCCGTGGAGTGGTGTTGCCTGATGTGCCTGAAATACTTAAGGGTCTCGACGAAGTAGGCTTGACGAGCCTACAGAGTGGCATGGACAATGTGAGGAACCCTGTTGGTAATCCTCTTGCCGGCATCGACCCCGAAGAGATTGTCGATACTCGACCTTATACCAACTTGTTATCTCAGTTCATCACCGCCAATTCCCGCGGCAATCCGGCTTTTGCCAACTTGCCTAGGAAATGGAATGTCTGTGTCGTGGGGTCTCATGATCTTTACGAACATCCCCATATCAATGATCTCGCTTATATGCCGGCGACGAAAAACGGACGATTTGGGTTTAATTTGCTGGTTGGTGGGTTCTTTAGTGCCAAGAGATGTGATGAGGCCATTCCTCTTGATGCTTGGGTCTCAGCTGATGATGTGATTCCATTGTGCAAAGCTGTGTTAGAAGCCTATAGGGATCTTGGATACAGGGGCAATAGGCAAAAGACTAGAATGATGTGGCTGATTGATGAACTGGGTATTGAAGTGTTCAGATCAGAAGTAGCCAAAAGAATGCCTCAGAAAGAGTTGGAGAGAGCATCTGATGAAGATTTGGTTCAAAAGCAATGGGAAAGGAGAGACTACCTTGGTGTCCATCCGCAAAAGCAAGAAGGTTTCAGCTACATCGGCATTCACATCCCAGTCGGTCGAGTCCAAGCCGACGACATGGACGAACTAGCCCGGTTAGCCGACACGTATGGCTCGGGCGAATTCAGACTCACTGTGGAGCAAAACATCATAATCCCCAACGTTGAGAACTCGAAACTAGAAGCATTACTAAACGAGCCTCTATTGAAAGACCGGTTTTCACCCCAACCAAGTATTCTCATGAAAGGGCTAGTAGCTTGTACTGGTAACCAGTTTTGCGGACAAGCCATTATTGAAACAAAAGCTAGAGCCTTGAAGGTGACGGAAGAGGTTGAAAGGCTAGTGTCGGTGAGCCGGCCGGTGAGGATGCATTGGACCGGTTGCCCCAACACGTGTGGTCAAGTCCAAGTGGCGGATATAGGTTTCATGGGGTGCATGGCAAGGGATGAGAATGGGAAACCATGTGAAGGGGCAGACATATTTTTGGGAGGGAGAATTGGGAGTGACTCCCATTTAGGAGAGCTTTATAAGAAGGGTGTCCCTTGTAAGAACTTGGTACCTGTAGTTGCTGACATTTTGGTGGAACCCTTTGGAGCTGTCCCTAGGCAAAGGGAAGAAGGGGAAGATTGATTCAAAATCAACTTCATTTCATTCCATTACTTTTATATTTGTTTTATTTTTTTTTTTTAATAACCAAGAAAAA151617BiochemistryNucleicAcidChemistryProteinChemistry(1936年Sumner)4、3分子生物學(xué)發(fā)展得三大支撐學(xué)科之三Enzyme→ProteinBiochemistry18(一)分子遺傳學(xué)得先驅(qū)者及其貢獻(xiàn)(1935~1953)圍繞基因得化學(xué)組成和功能兩個(gè)重大問(wèn)題1、遺傳物質(zhì)得化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)方面1944年Avery肺炎鏈球菌得轉(zhuǎn)化試驗(yàn)首次證明遺傳信息得載體就是DNA,而不就是蛋白質(zhì)1949年Hotchkiss證明極純得DNA制劑(蛋白質(zhì)含量0、02％)對(duì)細(xì)菌得轉(zhuǎn)化仍然有效,而且DNA得純度愈高,轉(zhuǎn)化效率也越高二、分子遺傳學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史19TheAveryexperiment

肺炎球菌有兩種不同得品系:*光滑型(S型):有莢膜、致病*粗糙型(R型):無(wú)莢膜、不致病201952年Hershey和Chase用放射性同位素35S和32P雙標(biāo)記法標(biāo)記T2噬菌體,也得出遺傳信息得載體就是DNA,而不就是蛋白質(zhì)1950～1953年Chargaff發(fā)現(xiàn)DNA中堿基得等量關(guān)系并提出堿基配對(duì)原則,對(duì)以后DNA空間結(jié)構(gòu)模型得確立具有很大得啟發(fā)作用211952A、DHershey和M、Chase

噬菌體感染實(shí)驗(yàn)32P標(biāo)記DNA,感染后放射標(biāo)記進(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞35S標(biāo)記外殼蛋白質(zhì),感染后放射標(biāo)記不進(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞22

1940Beadle和Tatum提出“一個(gè)基因一種酶”得關(guān)系科學(xué)得發(fā)展有些酶由兩條或多條肽鏈組成,每條肽鏈由一個(gè)獨(dú)立基因支配,如大腸桿菌色氨酸合成酶

多肽鏈－－TrpA

多肽鏈－－TrpB有得一條多肽鏈由幾個(gè)基因所決定1949年Stein和Moor測(cè)定了

-乳球蛋白得全部氨基酸組分1952年Zamecnik發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)就是在核糖體中合成得免疫學(xué)得發(fā)展2、基因得功能方面23對(duì)基因控制蛋白質(zhì)得合成有很大啟發(fā),促進(jìn)了基因和蛋白質(zhì)線性對(duì)應(yīng)關(guān)系得研究,從而促進(jìn)了遺傳密碼得破譯以及遺傳信息通過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯決定蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)過(guò)程得研究。24(二)分子遺傳學(xué)得誕生和確立(1953～1970)1953年Watson和CrickX射線的衍射結(jié)合Chargaff的堿基配對(duì)原則標(biāo)志分子遺傳學(xué)的誕生發(fā)現(xiàn)了DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)提出了半保留復(fù)制的設(shè)想25遺傳密碼得破譯;從分子水平上定義基因就是具有一定遺傳效應(yīng)得一個(gè)DNA片段;概括了遺傳信息傳遞和表達(dá)得中心法則;操縱子調(diào)控規(guī)律得發(fā)現(xiàn);半保留復(fù)制得論證;奠定了分子遺傳學(xué)得基礎(chǔ)26豐富了人們對(duì)基因結(jié)構(gòu)和功能得多樣性得認(rèn)識(shí),誕生了一個(gè)嶄新得應(yīng)用領(lǐng)域－－遺傳工程對(duì)基因得本質(zhì)、基因得非孟德爾遺傳、基因得相互影響和基因得表達(dá)過(guò)程、基因復(fù)制形式得多樣性有了更全面而深入得了解(三)分子遺傳學(xué)得充實(shí)和發(fā)展(1968年～至今)DNA得半不連續(xù)復(fù)制;反轉(zhuǎn)錄和反轉(zhuǎn)錄酶得發(fā)現(xiàn);左旋DNA(Z-DNA)和突變熱點(diǎn)(hotspot);基因重疊現(xiàn)象;重復(fù)序列和插入序列;轉(zhuǎn)錄后和翻譯后得加工;致癌基因和抑癌基因;新得遺傳密碼;跳躍基因;核酶得發(fā)現(xiàn)(Ribozyme)……27(四)分子遺傳學(xué)發(fā)展得方向1、真核生物得分子遺傳學(xué)正在蓬勃發(fā)展遺傳物質(zhì)的驗(yàn)證;遺傳密碼、mRNA、核糖體和tRNA的發(fā)現(xiàn)；基因轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程的闡明；基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制的探索等原核生物細(xì)菌和噬菌體真核生物人類基因組作圖和測(cè)序計(jì)劃(HGP)(HumanGenomeProject1989年美國(guó))水稻基因組作圖和測(cè)序計(jì)劃(RGP)(RiceGenomeProject1992年中國(guó))28基因組(genome):1920年德國(guó)遺傳學(xué)家H、Winkler將gene和chromosome兩個(gè)詞縮合而創(chuàng)造得一個(gè)新詞,指染色體上得全部基因隨著分子生物學(xué)得發(fā)展,其含義擴(kuò)展為在個(gè)體水平代表一個(gè)個(gè)體所有遺傳性狀得總和;在細(xì)胞水平代表一個(gè)細(xì)胞所有不同染色體(單倍體)得總和;在分子水平代表一個(gè)物種所有DNA分子得總和29基因組學(xué)(genomics)就是發(fā)展和應(yīng)用DNA制圖、測(cè)序新技術(shù)以及計(jì)算機(jī)程序,分析生命體(包括人類)全部基因組結(jié)構(gòu)及功能得科學(xué)30基因組學(xué)包括3個(gè)不同得亞領(lǐng)域:結(jié)構(gòu)基因組學(xué)(structuralgenomics)功能基因組學(xué)(functionalgenomics)比較基因組學(xué)(parativegenomics)基因組學(xué)31序列圖譜物理圖譜遺傳圖譜基因圖譜“人類基因組計(jì)劃”(HGP)含義:闡明30億個(gè)堿基對(duì)得序列;發(fā)現(xiàn)所有人類基因;搞清其在染色體上得位置;破譯人類全部遺傳信息;32HGP主要任務(wù)及內(nèi)容33人類基因組計(jì)劃發(fā)展史1989年美國(guó)成立“國(guó)家人類基因組研究中心”。DNA分子雙螺旋模型提出者J、Waston出任第一任主任1990年10月美國(guó)國(guó)會(huì)批準(zhǔn)美國(guó)得“人類基因組計(jì)劃”于10月1日正式啟動(dòng),預(yù)計(jì)需耗資30億美元,在2005年完成。被譽(yù)為生命科學(xué)“阿波羅登月計(jì)劃”、曼哈頓“原子彈計(jì)劃”341992年人類基因組低分辨率遺傳連鎖圖構(gòu)建完成1995年人類第3,11,12,和22染色體中等分辨率物理圖,第16,和19染色體高分辨率物理圖構(gòu)建完成1996年含有30000多STS標(biāo)記位點(diǎn)得整個(gè)人類基因組物理圖構(gòu)建完成1997年人類基因組大規(guī)模測(cè)序開始;第7和X染色體高分辨率物理圖構(gòu)建完成351998年5月Celera遺傳公司成立,目標(biāo)就是投入3億美元,到2001年繪制出完整得人體基因圖譜,與國(guó)際人類基因組計(jì)劃展開競(jìng)爭(zhēng)1998年12月小線蟲完整基因組序列得測(cè)定工作宣告完成,這就是科學(xué)家第一次繪出多細(xì)胞動(dòng)物得基因組圖譜1999年9月中國(guó)獲準(zhǔn)加入HGP,負(fù)責(zé)測(cè)定1％,即3號(hào)染色體上得3000萬(wàn)個(gè)堿基對(duì)。中國(guó)就是繼美、英、日、德、法之后第6個(gè)國(guó)際人類基因組計(jì)劃參與國(guó),也就是唯一發(fā)展中國(guó)家361999年12月1日國(guó)際HGP聯(lián)合研究小組宣布,完整破譯出人體第22對(duì)染色體得遺傳密碼2000年3月14日美國(guó)總統(tǒng)克林頓和英國(guó)首相布萊爾發(fā)表聯(lián)合聲明,呼吁將人類基因組研究成果公開,以便世界各國(guó)得科學(xué)家都能自由地使用這些成果2000年4月底中國(guó)科學(xué)家完成了1％人類基因組得工作框架圖2000年5月8日德、日等國(guó)科學(xué)家宣布,已基本完成了人體第21對(duì)染色體得測(cè)序工作372000年6月26日各國(guó)科學(xué)家公布了人類基因組工作草圖,標(biāo)志著人類在解讀自身“生命之書”得路上邁出了重要一步2000、6、26克林頓宣布人類基因組草圖繪制完成382000年12月14日美英等國(guó)科學(xué)家宣布繪出擬南芥基因組得完整圖譜,這就是人類首次全部破譯出一種植物得基因序列392001年2月12日中、美、日、德、法、英等6國(guó)科學(xué)家和美國(guó)Celera公司聯(lián)合公布人類基因組圖譜及初步分析結(jié)果2003年4月14日美國(guó)聯(lián)邦國(guó)家人類基因組研究項(xiàng)目負(fù)責(zé)人弗朗西斯·柯林斯博士在華盛頓隆重宣布,人類基因組序列圖繪制成功,人類基因組計(jì)劃得所有目標(biāo)全部實(shí)現(xiàn)。由美、英、日、法、德和中國(guó)科學(xué)家經(jīng)過(guò)13年努力共同繪制完成了人類基因組序列圖,在人類揭示生命奧秘、認(rèn)識(shí)自我得漫漫長(zhǎng)路上又邁出了重要得一步。40人類基因組草圖基本信息由31、65億bp組成含3-3、5萬(wàn)基因與蛋白質(zhì)合成有關(guān)得基因占2%人類基因組人類蛋白質(zhì)61%與果蠅同源43%與線蟲同源46%與酵母同源41人類基因組研究成果表明基因數(shù)量少得驚人人類基因組中存在“熱點(diǎn)”和大片“荒漠”1/3為“垃圾”DNA種族歧視毫無(wú)根據(jù)男性基因突變比例更高42人類基因組序列測(cè)完后

(“后基因組時(shí)代”)得工作分析所有基因及其編碼產(chǎn)物(主要就是蛋白質(zhì))就是如何單獨(dú)和共同在生命過(guò)程中發(fā)揮作用得在目前階段研究蛋白比研究基因難得多,而成千上萬(wàn)得結(jié)構(gòu)和功能都復(fù)雜多樣得蛋白分子才就是生命過(guò)程得最后執(zhí)行者現(xiàn)在還沒有有效得研究手段去揭示蛋白分子在生物體內(nèi)究竟完成什么功能、又就是通過(guò)何種機(jī)制去完成其生物功能等43RiceGenomesequencing1997JapanUSAChinaTaiwanKoreaIndiaFrance1,2,4,6,7,8,944RiceGenomesequencinginChina

《Science》雜志用封面和前14頁(yè)得版面刊登中國(guó)科學(xué)家關(guān)于水稻基因組研究得結(jié)果

經(jīng)過(guò)一年多得艱苦努力,中國(guó)科學(xué)家完成了秈稻基因組測(cè)序,與此同時(shí)瑞士Syngenta公司也完成了粳稻基因組測(cè)序。2002年4月5日國(guó)際自然科學(xué)權(quán)威性雜志《Science

》同時(shí)發(fā)表了這兩種水稻基因組測(cè)序結(jié)果。45中科院遺傳發(fā)育所、生物物理所、基因組中心、計(jì)算所、理論物理所及中國(guó)雜交水稻中心等12個(gè)機(jī)構(gòu)百余位科學(xué)家得論文"Adrartsequenceofthericegenome(OryzasativaL、sspindica)"2002年在《SCIENCE》雜志296(556):79～92發(fā)表之后,在國(guó)際學(xué)術(shù)界產(chǎn)生較大影響。至2004年9月,該論文已被國(guó)際同行在139種國(guó)際期刊上引用432次,高居1998～2002年發(fā)表得論文累計(jì)被引用次數(shù)最多得前10篇論文之首?！端?秈稻)基因組得工作框架序列圖》國(guó)際影響高

46完成得框架圖覆蓋整個(gè)秈稻基因組92%,草圖顯示:秈稻基因組共包466x106個(gè)堿基對(duì),基因數(shù)目在4、6-5、6萬(wàn)個(gè),約就是人類基因組基因數(shù)目得2倍,并已基本確定了其中一萬(wàn)多個(gè)基因得功能打破了過(guò)去公眾潛意識(shí)中存在得“生命越高級(jí),基因數(shù)越多”得認(rèn)識(shí)誤區(qū)。美國(guó)華盛頓大學(xué)得王剛博士說(shuō):“當(dāng)我們津津樂(lè)道于人類自己基因組得優(yōu)越時(shí),但至少在基因數(shù)目上已輸給了養(yǎng)活人類得水稻”秈稻基因組約70%以上得基因出現(xiàn)重復(fù)。較小基因得大量重復(fù),可能就是植物適應(yīng)性進(jìn)化所需蛋白質(zhì)多樣性得原因,這也許可以解釋水稻基因?yàn)楹芜@么多Acplishment47《家蠶基因組框架圖》在《Science》上發(fā)表48Nature457,551-556(29January2009)|doi:10、1038/nature07723;TheSorghumbicolorgenomeandthediversificationofgrasses1PlantGenomeMappingLaboratory,UniversityofGeorgia,Athens,Georgia30602,USA2WaksmanInstituteforMicrobiology,RutgersUniversity,Piscataway,NewJersey08854,USA3DOEJointGenomeInstitute,WalnutCreek,California94598,USA4StanfordHumanGenomeCenter,StanfordUniversity,PaloAlto,California94304,USA5MIPS/IBIS,HelmholtzZentrumMünchen,InglostaedterLandstrasse1,85764Neuherberg,Germany6CenterforIntegrativeGenomics,UniversityofCalifornia,Berkeley,California94720,USA7CollegeofSciences,HebeiPolytechnicUniversity,Tangshan,Hebei063000,China49ThedraftgenomeofadiploidcottonGossypiumraimondiiKunboWang1,6,ZhiwenWang2,6,FuguangLi1,6,WuweiYe1,6,JunyiWang2,6,GuoliSong1,6,ZhenYue2,LinCong2,HaihongShang1,ShilinZhu2,ChangsongZou1,QinLi3,YouluYuan1,CairuiLu1,HenglingWei1,CaiyunGou2,ZequnZheng2,YeYin2,XueyanZhang1,KunLiu1,BoWang2,ChiSong2,NanShi2,RussellJKohel4,RichardGPercy4,JohnZYu4,Yu-XianZhu3,JunWang2,5&ShuxunYu1Received11January;accepted5July;publishedonline26August2012;doi:10、1038/ng、2371NaturegeneticsIF3450◆第一代DNA測(cè)序技術(shù)第一代測(cè)序技術(shù)就是雙脫氧鏈末端終止法——根據(jù)核苷酸在某一固定得點(diǎn)開始,隨機(jī)在某一個(gè)特定得堿基處終止,產(chǎn)生A,T,C,G四組不同長(zhǎng)度得一系列核苷酸,然后在尿素變性得PAGE膠上電泳進(jìn)行檢測(cè),從而獲得DNA序列。在每一輪測(cè)序反應(yīng)得引物延伸步驟中,會(huì)隨機(jī)引入已被四種不同顏色熒光分別標(biāo)記得ddNTP(ddATP、ddTTP、ddGTP、ddCTP)以終止延伸反應(yīng)。這樣就形成了大量末端被熒光標(biāo)記得、長(zhǎng)短不一(終止位點(diǎn)不同)得延伸產(chǎn)物。接著,再用高分辨率得毛細(xì)管凝膠電泳分離這些延伸產(chǎn)物,通過(guò)對(duì)延伸產(chǎn)物末端四種不同熒光顏色得區(qū)分,計(jì)算機(jī)軟件會(huì)自動(dòng)“讀出”DNA序列。51第二代測(cè)序技術(shù):第二代測(cè)序技術(shù)就是焦磷酸測(cè)序法——由4種酶催化得同一反應(yīng)體系中得酶級(jí)聯(lián)化學(xué)發(fā)光反應(yīng),適于對(duì)已知得短序列得測(cè)序分析。就是邊合成邊測(cè)序。在Sanger等測(cè)序方法得基礎(chǔ)上,通過(guò)技術(shù)創(chuàng)新,用不同顏色得熒光標(biāo)記四種不同得dNTP,當(dāng)DNA聚合酶合成互補(bǔ)鏈時(shí),每添加一種dNTP就會(huì)釋放出不同得熒光,根據(jù)捕捉得熒光信號(hào)并經(jīng)過(guò)特定得計(jì)算機(jī)軟件處理,從而獲得待測(cè)DNA得序列信息。52第三代測(cè)序技術(shù):第三代測(cè)序技術(shù)則就是基于納米孔得單分子讀取技術(shù),基本原理就是新型納米孔測(cè)序法(nanoporesequencing),她采用電泳技術(shù),借助電泳驅(qū)動(dòng)單個(gè)分子逐一通過(guò)納米孔來(lái)實(shí)現(xiàn)測(cè)序得。由于納米孔得直徑非常細(xì)小,僅允許單個(gè)核酸聚合物通過(guò),因而可以在此基礎(chǔ)上使用多種方法來(lái)進(jìn)行高通量檢測(cè)。此外,納米級(jí)別得孔徑保證了檢測(cè)具有良好得持續(xù)性,所以測(cè)序得準(zhǔn)確度非常高。對(duì)于長(zhǎng)達(dá)1,000個(gè)堿基得單鏈DNA分子、RNA分子或者更短得核酸分子而言,根本無(wú)需進(jìn)行擴(kuò)增或標(biāo)記就可以使用納米孔測(cè)序法進(jìn)行檢測(cè),這使得便宜、快速地進(jìn)行DNA測(cè)序成為可能。532、從比較簡(jiǎn)單得代謝作用和途徑得分子遺傳學(xué)研究,逐漸轉(zhuǎn)向復(fù)雜得個(gè)體發(fā)育得分子遺傳學(xué)研究個(gè)體發(fā)育和細(xì)胞分化過(guò)程中一般不發(fā)生基因型得變化,變化得就是不同基因得表達(dá)目前,積極探討個(gè)體發(fā)生和細(xì)胞分化得動(dòng)態(tài)過(guò)程中基因表達(dá)調(diào)控問(wèn)題《真核基因表達(dá)調(diào)控》沈栩非,方福德1994TranscriptionalRegulationinEukaryotes:Concepts,Strategies,andTechniques清華大學(xué)出版社,冷泉港實(shí)驗(yàn)室出版社543、遺傳工程得興起基因工程就是在分子遺傳學(xué)得理論基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)得,使人類可以直接從DNA分子入手改良生物、創(chuàng)造新物種、生產(chǎn)各種貴重得生物制品、治療疾病、消除環(huán)境污染等如:轉(zhuǎn)基因抗蟲棉;利用反義RNA技術(shù)延長(zhǎng)水果、蔬菜得保鮮期改變花卉顏色等;55近半個(gè)世紀(jì)以來(lái)（19世紀(jì)50年代)分子生物學(xué)中重大突破與成就者

NobelPrize生物學(xué)發(fā)展的里程碑與主要內(nèi)容1958JoshuaLederberg(33y)PhagetransductionBeadle&TatumOnegene--oneenzyme有關(guān)基因重組和細(xì)菌遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)得發(fā)現(xiàn)三、分子生物學(xué)家獲得Nobel獎(jiǎng)情況56RichphosphatebondsofATPEnergy195941yDNAreplicationIsolationDNApolymeraseI實(shí)現(xiàn)了DNA分子在細(xì)菌細(xì)胞和試管內(nèi)得復(fù)制54y57JamesWatson(34y)FrancisCrick(46y)MauriceWilkins(46y)DNADoubleHelixmodel1962

FrancisCrick(1916-2004)58FrancoisJacob(44y)JacquesMonod(55y)(French)Lac、OperonTheory提出并證實(shí)了operon作為調(diào)節(jié)細(xì)菌代謝得分子機(jī)制1965591968R、HolleyH、G、KhoranaM、Nirenberg

PakistanH.GobindKhorana(46y)第一個(gè)合成了核酸分子并且人工復(fù)制了酵母基因MarshallNirenberg(41y)破譯遺傳密碼RobertHolley(46y)闡明了酵母丙氨酸t(yī)RNA的核苷酸序列，并證實(shí)所有tRNA結(jié)構(gòu)上的相似性6061發(fā)現(xiàn)Reversetranscription62WalterGilbert(48y)蛋白質(zhì)合成的機(jī)制乳糖操縱子阻遏蛋白的分離1980FredenickSangerDNA雙脫氧測(cè)序法

λDNA+SV40（simianvirus40)→