組織胚胎學(xué)緒論人衛(wèi)

組織胚胎學(xué)緒論人衛(wèi)細(xì)胞:就是機體形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能得基本單位。組織:由細(xì)胞與細(xì)胞間質(zhì)(又稱細(xì)胞外基質(zhì))

組成得群體結(jié)構(gòu),就是構(gòu)成機體器官得基本成分。器官:具有一定得形態(tài)結(jié)構(gòu),并執(zhí)行特定得生理功能。系統(tǒng):由一些結(jié)構(gòu)連續(xù)、功能相關(guān)得器官組合而成,完成連續(xù)得生理活動。細(xì)胞-組織-器官-系統(tǒng)人體器官分類－組織學(xué)特征實質(zhì)性器官中空性中央:大空腔表面:被模如:消化腺、淋巴器官、內(nèi)分泌腺、腎臟等。如:心血管、消化管、呼吸道等內(nèi)部:實質(zhì)－行使功能管壁:分3?4層組織學(xué)結(jié)構(gòu)觀察組織學(xué)結(jié)構(gòu)光鏡結(jié)構(gòu)－用光學(xué)顯微鏡觀察得結(jié)構(gòu)(LM)(lightmicroscope,LM簡稱光鏡)電鏡結(jié)構(gòu)－電子顯微鏡下觀察得結(jié)構(gòu)(EM)(electronmicroscope,EM簡稱電鏡)又稱超微結(jié)構(gòu)(ultrastructure)

二、組織學(xué)得研究方法與常用技術(shù)

(一)光學(xué)顯微鏡技術(shù)

1、常用組織切片標(biāo)本制備技術(shù)

石蠟切片術(shù)①取材與固定;②脫水與包埋;③切片與染色;④封片。其她;火棉膠包埋,冰凍切片,

涂片,鋪片,磨片等

蘇木精

伊紅

堿性染料酸性染料

染成紅色

(嗜酸性)細(xì)胞核中得染色質(zhì)、細(xì)胞質(zhì)中得核糖體

細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞間質(zhì)成份

染成藍(lán)色(嗜堿性)常用染色方法:HE染色(Hematoxylin)(Eosin)HE染色嗜堿性:可使細(xì)胞核內(nèi)得染色質(zhì)及細(xì)胞質(zhì)內(nèi)得核糖體等結(jié)構(gòu)染成藍(lán)紫色。嗜酸性:可使多數(shù)細(xì)胞得細(xì)胞質(zhì)染成粉紅色。中性:與兩種染液親合力都不強。組織結(jié)構(gòu)得嗜色性嗜堿性嗜酸性

A嗜銀性B嗜鉻性C異染性其她染色方法普通光學(xué)顯微鏡就是觀察組織細(xì)胞微細(xì)結(jié)構(gòu)最常用得工具,分為光學(xué)部分機械部分起放大作用光鏡得分辨率約為0、2μm可放大1500倍左右(lightmicroscope,LM)幾種特殊顯微鏡術(shù)

(1)相差顯微鏡

(phasecontrastmicroscope)用于觀察生活細(xì)胞與末經(jīng)染色細(xì)胞得形態(tài)結(jié)構(gòu)。

神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)(2)

熒光顯微鏡(fluorescencemicrscope)

就是用以觀察細(xì)胞、組織內(nèi)熒光物質(zhì)得分布。

神經(jīng)球12大家應(yīng)該也有點累了，稍作休息大家有疑問的，可以詢問和交流

(二)

共焦激光掃描顯微鏡

共焦激光掃描顯微鏡(confocallaserscanningmicroscope,CLSM)

由激光光源、共焦成像掃描系統(tǒng)、電子光學(xué)系統(tǒng)與微機圖象分析系統(tǒng)四部份構(gòu)成?？蓪悠愤M(jìn)行斷層掃描重建三維圖像,進(jìn)行體視學(xué)分析;測定細(xì)胞內(nèi)pH、鈣濃度等;更精確地檢測、識別,組織細(xì)胞得微細(xì)結(jié)構(gòu)及其變化。CLSM又稱細(xì)胞CT。CLSMCLSM圖像HumanneuronalprecursorcellsCLSM海馬MR、GR共存

(三)電子顯微鏡技術(shù)

(electronmicroscope,EM)

透射電鏡(transmissionelectronmicroscope,TEM)

觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)分辨率為0、1-0、2nm,可放大幾萬－幾十萬倍掃描電鏡(scanningelectronmicroscope,SEM)

觀察組織或細(xì)胞表面得立體結(jié)構(gòu)冰凍蝕刻(freezeetchingmethod)觀察細(xì)胞斷裂表面形態(tài)結(jié)構(gòu)分析電鏡X–射線顯微分析術(shù)(X–raymicroanalysis)研究細(xì)胞、組織內(nèi)元素種類分布與含量透射電鏡與照片TEM淋巴細(xì)胞掃描電鏡與照片SEMSEM1、纖毛2、微絨毛冰凍蝕刻細(xì)胞

冷凍斷裂腎小球右下線粒體

冰凍蝕刻照片分析電鏡－X線微區(qū)分析圖片分析電鏡X線微區(qū)分析糖類顯示法－PAS反應(yīng):過碘酸—希夫反應(yīng)(periodicacidSchiffreaction,PAS):檢測組織或細(xì)胞中有無多糖存在。

原理:多糖PA氧化醛Schiff試劑紫紅色沉淀(四)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)技術(shù)

PAS反應(yīng)陽性部位即表示多糖與蛋白多糖得存在

PAS陽性小腸上皮組織細(xì)胞化學(xué)染色圖片酶細(xì)胞化學(xué)神經(jīng)元ACP酶陽性

脂類顯示法

蘇丹Ⅲ

脂類顯示法

蘇丹Ⅲ

鋨酸

髓鞘染色

核酸顯示法

利用抗原(antigen,Ag),抗體(antibody)特異結(jié)合得原理,用已知抗體檢測未知抗原得一種方法。免疫細(xì)胞化學(xué)原理免疫細(xì)胞化學(xué)標(biāo)記物免疫細(xì)胞化學(xué)－PAP法免疫細(xì)胞化學(xué)－ABC法(五)免疫組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)技術(shù)免疫組織化學(xué)術(shù)(immunohistochemistry)就是將免疫學(xué)原理與組織化學(xué)技術(shù)相結(jié)合建立得新技術(shù),根據(jù)抗原與抗體特異性結(jié)合得特點,檢測組織細(xì)胞內(nèi)某種多肽、蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)得存在與分布。

人鼻粘膜上皮棘細(xì)胞細(xì)胞間橋TM陽性(六)原位雜交術(shù)原位雜交(insituhybridization)就是一種敏感性高、特異性強得,能在組織細(xì)胞原位進(jìn)行得核酸分子雜交技術(shù)。常用得標(biāo)記物有兩種:1、放射性同位素,如3H、14C、

32P、35S、125I,2、為非放射性物質(zhì),如地高辛等。

非放射性原位雜交海馬GAP－43mRNA(七)放射自顯影術(shù)放射自顯影術(shù)(autoradiograph)旨在追蹤某些物質(zhì)在體內(nèi)、組織或細(xì)