TGXAS-毛發(fā)中氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法編制說(shuō)明

團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《毛發(fā)中氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（征求意見(jiàn)稿）編制說(shuō)明一、項(xiàng)目來(lái)源根據(jù)《廣西標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)關(guān)于下達(dá)2022年第八十二批團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)制修定項(xiàng)目計(jì)劃的通知》（桂標(biāo)協(xié)〔2022〕202號(hào)）文件精神，由廣西司法鑒定協(xié)會(huì)提出，由廣西警察學(xué)院刑事科學(xué)技術(shù)學(xué)院、廣西金桂司法鑒定中心、廣西公安廳禁毒情報(bào)技術(shù)中心、南寧市公安局禁毒支隊(duì)毒品檢驗(yàn)技術(shù)鑒定科、柳州市公安局禁毒支隊(duì)六大隊(duì)（技術(shù)大隊(duì)）、梧州市公安局物證鑒定所、賀州市公安局物證鑒定所、珀金埃爾默企業(yè)管理（上海）有限公司等單位共同起草的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《毛發(fā)中氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（項(xiàng)目編號(hào)：2022-8201）獲批立項(xiàng)。二、項(xiàng)目背景及目的意義《2019年中國(guó)毒品形勢(shì)報(bào)告》中指出，新類(lèi)型毒品增多，識(shí)別查處難。新類(lèi)型毒品不斷出現(xiàn)，如含LSD成分的“郵票”、向?qū)W生兜售的“聰明藥”以及逐漸蔓延的“0號(hào)膠囊”“G點(diǎn)液”“犀牛液”等色胺類(lèi)物質(zhì)，品種五花八門(mén)；號(hào)稱(chēng)“改良K粉”的氟胺酮，還有新精神活性物質(zhì)作為第三代毒品，在國(guó)內(nèi)迅速擴(kuò)張，且花樣不斷翻新。2020年6月，習(xí)近平對(duì)禁毒工作作出重要指示強(qiáng)調(diào)，習(xí)近平強(qiáng)調(diào)，當(dāng)前，境內(nèi)和境外毒品問(wèn)題、傳統(tǒng)和新型毒品危害、網(wǎng)上和網(wǎng)下毒品犯罪相互交織，對(duì)群眾生命安全和身體健康、對(duì)社會(huì)穩(wěn)定帶來(lái)嚴(yán)重危害，必須一如既往、堅(jiān)決徹底把禁毒工作深入進(jìn)行下去。各級(jí)黨委和政府要堅(jiān)持以人民為中心的發(fā)展思想，以對(duì)國(guó)家、對(duì)民族、對(duì)人民、對(duì)歷史高度負(fù)責(zé)的態(tài)度，堅(jiān)持厲行禁毒方針，打好禁毒人民戰(zhàn)爭(zhēng)，完善毒品治理體系，深化禁毒國(guó)際合作，推動(dòng)禁毒工作不斷取得新成效，為維護(hù)社會(huì)和諧穩(wěn)定、保障人民安居樂(lè)業(yè)作出新的更大貢獻(xiàn)。2021年7月1日，公安部、國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)和國(guó)家藥品監(jiān)督管理局聯(lián)合發(fā)布《關(guān)于將合成大麻素類(lèi)物質(zhì)和氟胺酮等18種物質(zhì)列入<非藥用類(lèi)麻醉藥品和精神藥品管制品種增補(bǔ)目錄>的公告》，決定正式整類(lèi)列管合成大麻素類(lèi)新精神活性物質(zhì)，并新增列管氟胺酮等18種新精神活性物質(zhì)。公告自施行，氟胺酮正式被認(rèn)定為毒品?！吨腥A人民共和國(guó)禁毒法》第一章第三條規(guī)定，禁毒是全社會(huì)的共同責(zé)任。國(guó)家機(jī)關(guān)、社會(huì)團(tuán)體、企業(yè)事業(yè)單位以及其他組織和公民，應(yīng)當(dāng)依照本法和有關(guān)法律的規(guī)定，履行禁毒職責(zé)或者義務(wù)。第四章規(guī)定，公安機(jī)關(guān)可以對(duì)涉嫌吸毒的人員進(jìn)行必要的檢測(cè)。氟胺酮，是以常見(jiàn)管制精神藥品氯胺酮為母體進(jìn)行化學(xué)修飾的新型毒藥物，而去甲氟胺酮主要是由氟胺酮經(jīng)肝微粒體酶轉(zhuǎn)而成，屬于氟胺酮的代謝物，但也具有藥理活性。隨著互聯(lián)網(wǎng)的飛速發(fā)展，管制類(lèi)藥品的制造技術(shù)在全球蔓延。違法犯罪集團(tuán)為了逃避公安機(jī)關(guān)的打擊處理，通過(guò)化學(xué)取代，在被管制毒藥物的分子結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上通過(guò)增加或改變?nèi)〈姆椒?，合成一系列與管制毒藥物結(jié)構(gòu)相似的新型毒藥物，例如合成大麻素類(lèi)、合成卡西酮類(lèi)、氟胺酮等。氟胺酮1987年首次人工合成，目前沒(méi)有合法用途。2019年下半年最早在廣西地區(qū)發(fā)現(xiàn)存在濫用，當(dāng)時(shí)國(guó)家沒(méi)有列入毒品進(jìn)行管制，在2019年底和2020年上半年迅速蔓延至全國(guó)，目前在華南、西南、華中、華東、華北的大部分地區(qū)均存在不同程度的濫用。特別是吸食氟胺酮后駕駛車(chē)輛發(fā)生事故越來(lái)越多。長(zhǎng)期濫用氟胺酮毒品會(huì)產(chǎn)生意識(shí)思維混亂、認(rèn)知功能障礙等一系列毒副作用，嚴(yán)重者甚至?xí)斐缮眢w機(jī)能和精神上的嚴(yán)重?fù)p傷，并對(duì)社會(huì)公共安全造成威脅。因此，開(kāi)展人體內(nèi)氟胺酮含量的檢測(cè)方法研究勢(shì)在必行。本文件旨在建立一種簡(jiǎn)單快速、靈敏度高的氟胺酮定性分析和定量檢測(cè)方法，為毒品濫用防控、吸毒者的認(rèn)定和監(jiān)測(cè)提供更加有利的科學(xué)依據(jù)。2021年7月將氟胺酮列管，氟胺酮被認(rèn)定為毒品。與傳統(tǒng)的生物檢材如尿液，血液等比較，毛發(fā)有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。發(fā)收集方便而且?guī)缀鯚o(wú)侵犯性，容易監(jiān)督防止作假；檢測(cè)時(shí)限可長(zhǎng)至幾周，幾個(gè)月甚至幾年；毛發(fā)檢材非常穩(wěn)定，易于保存。毛發(fā)中毒(藥)物的分析已廣泛地應(yīng)用于法庭科學(xué)領(lǐng)域，如判別是否長(zhǎng)期濫用，區(qū)分制毒者和吸毒者，尋找死亡原因，興奮劑控制等。通過(guò)對(duì)毛發(fā)中氟胺酮及去甲氟胺酮的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)的創(chuàng)新與提高，能夠彌補(bǔ)氟胺酮及去甲氟胺酮檢測(cè)的缺陷，提高司法鑒定行業(yè)整體技術(shù)水平。因此，制定團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《毛發(fā)中氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范毛發(fā)中氟胺酮及去甲氟胺酮的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)原理、試劑、儀器和材料、操作方法以及分析結(jié)果評(píng)價(jià)等檢測(cè)技術(shù)，并在全區(qū)、全國(guó)司法鑒定部門(mén)及檢測(cè)機(jī)構(gòu)間推廣，對(duì)提高廣西乃至全國(guó)毒品鑒定技術(shù)水平是十分有意義的。三、項(xiàng)目編制過(guò)程（一）成立標(biāo)準(zhǔn)編制工作組團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《毛發(fā)中氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》項(xiàng)目任務(wù)下達(dá)后，廣西警察學(xué)院刑事科學(xué)技術(shù)學(xué)院牽頭組織成立了標(biāo)準(zhǔn)編制工作組，制定了標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)方案，明確任務(wù)職責(zé)，確定工作技術(shù)路線(xiàn)，開(kāi)展標(biāo)準(zhǔn)研制工作，具體由廣西警察學(xué)院刑事科學(xué)技術(shù)學(xué)院、廣西金桂司法鑒定中心、廣西公安廳禁毒情報(bào)技術(shù)中心、南寧市公安局禁毒支隊(duì)毒品檢驗(yàn)技術(shù)鑒定科、柳州市公安局禁毒支隊(duì)六大隊(duì)（技術(shù)大隊(duì)）、梧州市公安局物證鑒定所、賀州市公安局物證鑒定所、珀金埃爾默企業(yè)管理（上海）有限公司相關(guān)人員配合。（二）收集整理文獻(xiàn)資料標(biāo)準(zhǔn)編制工作組收集了國(guó)內(nèi)有關(guān)氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定的相關(guān)技術(shù)文獻(xiàn)資料。主要有：SF/T0065-2020毛發(fā)中二甲基色胺等16種色胺類(lèi)新精神活性物質(zhì)及其代謝物的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢驗(yàn)方法SF/T0093-2021血液中卡西酮等37種卡西酮類(lèi)新精神活性物質(zhì)及其代謝物的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢驗(yàn)方法SF/T0094-2021毛發(fā)中5F-MDMB-PICA等7種合成大麻素類(lèi)新精神活性物質(zhì)的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢驗(yàn)方法SF/ZJD0107019-2018法醫(yī)毒物有機(jī)質(zhì)譜定性分析通則SF/ZJD0107025-2018毛發(fā)中15種毒品及代謝物的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢驗(yàn)方法（三）研討確定標(biāo)準(zhǔn)主體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)編制工作組在對(duì)收集的資料進(jìn)行整理研究之后，標(biāo)準(zhǔn)編制工作組召開(kāi)了標(biāo)準(zhǔn)編制會(huì)議，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的整體框架結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究，并對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)鍵性?xún)?nèi)容進(jìn)行了初步探討。經(jīng)過(guò)研究，標(biāo)準(zhǔn)的主體內(nèi)容確定為毛發(fā)中氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定的原理、試劑和材料、儀器設(shè)備、操作方法、分析結(jié)果評(píng)價(jià)。（四）調(diào)研及形成草案、征求意見(jiàn)稿2022年11月，在前期工作的基礎(chǔ)之上，通過(guò)理清邏輯脈絡(luò)，整合已有的參考資料中有關(guān)氟胺酮、去甲氟胺酮測(cè)定的要求，并結(jié)合氟胺酮、去甲氟胺酮測(cè)定實(shí)際要求的基礎(chǔ)上，按照簡(jiǎn)化、統(tǒng)一等原則編制完成團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《毛發(fā)中氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（草案）。2022年12月，標(biāo)準(zhǔn)編制工作組對(duì)前期的研究和數(shù)據(jù)進(jìn)了整理并結(jié)合前期技術(shù)咨詢(xún)會(huì)、征求意見(jiàn)會(huì)的內(nèi)容針對(duì)氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定進(jìn)行多次討論、研究，最終形成團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《毛發(fā)中氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（征求意見(jiàn)稿）和編制說(shuō)明。四、標(biāo)準(zhǔn)制定原則（一）實(shí)用性原則本文件是在充分收集相關(guān)資料和文獻(xiàn)，分析氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定當(dāng)前現(xiàn)狀，調(diào)研氟胺酮、去甲氟胺酮的分析方法情況，在現(xiàn)有國(guó)家、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)毒物測(cè)定方法要求的基礎(chǔ)上，結(jié)合多年經(jīng)驗(yàn)而總結(jié)起草的。符合當(dāng)前使用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定氟胺酮、去甲氟胺酮的方向與需求，有利于行業(yè)的長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展，具有較強(qiáng)的實(shí)用性和可操作性。（二）協(xié)調(diào)性原則本文件編寫(xiě)過(guò)程中注意了與氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定相關(guān)法律法規(guī)的協(xié)調(diào)問(wèn)題，在內(nèi)容上與現(xiàn)行法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)一致。（三）規(guī)范性原則本文件嚴(yán)格參照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的要求和規(guī)定編寫(xiě)本標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容，保證標(biāo)準(zhǔn)的編寫(xiě)質(zhì)量。（四）前瞻性原則本文件在兼顧當(dāng)前區(qū)內(nèi)采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定氟胺酮、去甲氟胺酮現(xiàn)實(shí)檢驗(yàn)情況的同時(shí)，還考慮到了氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定方法快速發(fā)展的趨勢(shì)和需要，在標(biāo)準(zhǔn)中體現(xiàn)了個(gè)別特色性、前瞻性和先進(jìn)性條款，作為對(duì)氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定的指導(dǎo)。五、標(biāo)準(zhǔn)主要章節(jié)內(nèi)容及確定依據(jù)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《毛發(fā)中氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》主要內(nèi)容包括原理、試劑和材料、儀器設(shè)備、操作方法、分析結(jié)果評(píng)價(jià)。南寧市公安局禁毒支隊(duì)毒品檢驗(yàn)技術(shù)鑒定科從事多年的刑事化驗(yàn)工作，在毒物、毒品檢驗(yàn)領(lǐng)域有經(jīng)驗(yàn)豐富的專(zhuān)家，也有多項(xiàng)檢驗(yàn)技術(shù)設(shè)備進(jìn)行多方面的檢驗(yàn)驗(yàn)證，是廣西區(qū)內(nèi)公安機(jī)關(guān)理化檢驗(yàn)的權(quán)威機(jī)構(gòu)。廣西警察學(xué)院有豐富的師資隊(duì)伍，技術(shù)能力強(qiáng)。廣西金桂司法鑒定中心有基礎(chǔ)技術(shù)設(shè)備，制訂標(biāo)準(zhǔn)的裝備齊全；技術(shù)人員眾多，有較多的實(shí)踐案例。經(jīng)過(guò)起草單位的前期合作，探索制定出采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定毛發(fā)中氟胺酮、去甲氟胺酮，該方法靈敏度高，重現(xiàn)性好；操作便捷，便于實(shí)際檢驗(yàn)。南寧市公安局禁毒支隊(duì)毒品檢驗(yàn)技術(shù)鑒定科、廣西金桂司法鑒定中心使用該方法在多起案件中檢出氟胺酮。原理主要依據(jù)司法部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SF/T0094-2021《毛發(fā)中5F-MDMB-PICA等7種合成大麻素類(lèi)新精神活性物質(zhì)的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢驗(yàn)方法》。毛發(fā)樣品經(jīng)清洗和冷凍研磨后，以甲醇超聲法提取，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行檢測(cè)，經(jīng)與平行操作的空白樣品和添加樣品作對(duì)照，以保留時(shí)間、特征離子對(duì)和離子對(duì)豐度比進(jìn)行定性分析。試劑和材料除另有說(shuō)明外，所用試劑均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T6682中一級(jí)水的要求。用到的試劑有甲醇：HPLC級(jí)；50%甲酸溶液；HPLC級(jí)；乙酸銨：HPLC級(jí)；丙酮；甲氧那明。試劑配制：含0.1％甲酸的5mmol/L乙酸銨水溶液（以配制500mL為例）：稱(chēng)取0.1925g乙酸銨，加水溶解后，再加入0.5mL甲酸，用水稀釋至500mL，混勻。100μg/mL氟胺酮、去甲氟胺酮標(biāo)準(zhǔn)液：市售氟胺酮、去甲氟胺酮標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液。密封，置于冰箱中冷凍保存，保存時(shí)間12個(gè)月。氟胺酮、去甲氟胺酮標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)工作溶液：試驗(yàn)中所用其他濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)工作溶液均由上述標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液用甲醇稀釋而得。密封，置于冰箱中冷藏保存，保存時(shí)間3個(gè)月。1.0mg/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：稱(chēng)取甲氧那明10mg于10mL容量瓶中，加入適量甲醇溶解并定容至刻度，配制成1.0mg/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。密封，置于冰箱中冷凍保存，保存時(shí)間12個(gè)月。1.0μg/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：移取1.0mg/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液10μL置于10mL容量瓶中，加入適量甲醇溶解并定容至刻度，配制成1.0μg/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。密封，置于冰箱中冷凍保存，保存時(shí)間3個(gè)月。2.0ng/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：移取1.0μg/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)工作溶液100μL置于50mL容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，配制成2.0ng/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。密封，置于冰箱中冷凍保存，保存時(shí)間3個(gè)月。材料有具蓋離心管、具蓋研磨管、容量瓶。儀器設(shè)備液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源(ESI)、電子天平：感量0.1mg、離心機(jī)、超聲波清洗儀、冷凍研磨儀、恒溫水浴鍋、微量移液器。操作方法樣品前處理案件樣品。毛發(fā)樣品依次用適量的水和丙酮振蕩洗滌兩次，晾干后剪成約1mm段，置于冷凍研磨儀中粉碎，呈粉末狀。稱(chēng)取毛發(fā)粉末20mg，加入1.0mL內(nèi)標(biāo)甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)工作液，超聲30min，離心，移取上清液，于60℃水浴空氣流下吹干。殘留物用200μL甲醇復(fù)溶，供儀器分析。空白樣品。取空白毛發(fā)樣品20mg，按案件樣品的要求處理，與案件樣品平行提取操作。添加樣品。取空白毛發(fā)樣品20mg，添加氟胺酮及去甲氟胺酮對(duì)照品，按案件樣品的要求處理，與案件樣品平行提取操作。儀器檢測(cè)分為儀器條件、進(jìn)樣、記錄、定性判斷依據(jù)。儀器條件：液相色譜條件，以下為參考條件，可根據(jù)不同儀器實(shí)際進(jìn)行調(diào)整：色譜柱：ZORBAXEclipsePlusC18(2.1cm×50mm，1.8μm)；流動(dòng)相：A為5mmol/L乙酸銨和0.1％甲酸緩沖液，B為甲醇，流動(dòng)相洗脫梯度見(jiàn)表1；色譜柱的選擇：1.根據(jù)SF/ZJD0107025-2018《毛發(fā)中15種毒品及代謝物的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢驗(yàn)方法》中6.2.1.1液相色譜條件中色譜柱的選擇：RestekAllurePFPPropyl液相色譜柱（或其它等效柱），實(shí)驗(yàn)室采用了等效柱ZORBAXEclipsePlusC18(2.1*50mm，1.8-Micron)，用氟胺酮、去甲氟胺酮及內(nèi)標(biāo)甲氧那明的混合標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)測(cè)試后，各組分色譜峰完全分開(kāi)，保留時(shí)間短，各個(gè)組分的保留時(shí)間經(jīng)多次測(cè)定誤差非常小2.流動(dòng)相的選擇表1SF/ZJD0107025-2018中流動(dòng)相梯度洗脫程序流動(dòng)相：A為乙腈，B為20mmol/L乙酸銨和0.1%甲酸緩沖液。時(shí)間（min）流速(mL/min)流動(dòng)相A%流動(dòng)相B%0.000.3580201.000.3580204.000.359558.000.359558.100.35802014.000.358020表2實(shí)驗(yàn)室的流動(dòng)相梯度洗脫程序流動(dòng)相：A為甲醇，B為5mmol/L乙酸銨和0.1%甲酸緩沖液。時(shí)間流速(mL/min)%A%B0.000.309550.500.3070303.500.3070305.000.3030706.000.3030706.500.305958.000.305958.100.3095510.000.30955經(jīng)氟胺酮、去甲氟胺酮及內(nèi)標(biāo)甲氧那明的混合標(biāo)準(zhǔn)品反復(fù)測(cè)試后，用本實(shí)驗(yàn)室的流動(dòng)相能很好地得到分離結(jié)果，色譜峰形狀好，基線(xiàn)不漂移。質(zhì)譜條件。根據(jù)SF/ZJD0107025-2018中6.2.1.2中的質(zhì)譜條件，根據(jù)實(shí)際情況，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的儀器進(jìn)行了調(diào)整，實(shí)驗(yàn)室的儀器：QSightLX50UHPLC液相色譜儀；通過(guò)實(shí)驗(yàn)找到最佳的質(zhì)譜條件。以下條件作為參考，可根據(jù)不同儀器實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整：離子源：電噴霧電離-正離子模式(ESI+)；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)；離子源電壓(IS)：4800V；碰撞氣(CAD)、氣簾氣(CUR)、霧化氣(GS1)、輔助氣(GS2)均為高純氮?dú)?，使用前調(diào)節(jié)各氣流流量以使質(zhì)譜靈敏度達(dá)到檢測(cè)要求；噴霧電壓(IS)、去簇電壓(DP)、碰撞能量(CE)等電壓值應(yīng)優(yōu)化至最佳靈敏度。通過(guò)逐級(jí)稀釋?zhuān)謩e添加0.1ng、0.2ng和1.0ng的氟胺酮、去甲氟胺酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用含內(nèi)標(biāo)甲氧那明的甲醇進(jìn)行提取，通過(guò)信噪比法[根據(jù)儀器自動(dòng)計(jì)算選定色譜峰的信噪比（S/N），以S/N≥3時(shí)且符合定性要求的添加樣品最低濃度]為檢出限。通過(guò)圖譜分析，得出添加樣品0.2ng符合作為檢出限的相關(guān)要求。在以上色譜、質(zhì)譜條件下，氟胺酮、去甲氟胺酮和內(nèi)標(biāo)物的定性離子對(duì)和保留時(shí)間見(jiàn)表3。氟胺酮、去甲氟胺酮的MRM色譜圖見(jiàn)圖1、圖2、圖3。表3氟胺酮、去甲氟胺酮和內(nèi)標(biāo)物的定性離子對(duì)和保留時(shí)間化合物母離子(m/z)子離子(m/z)去簇電壓(V)碰撞能量(V)保留時(shí)間(min)氟胺酮(F-Ketamin)222.30109.1024471.60163.002621去甲氟胺酮(Nor-F-Ketamin)208.20191.1026141.58109.102438甲氧那明(Orthoxine)180.20121.0810242.01148.801016圖1氟胺酮的MRM色譜圖圖2去甲氟胺酮的MRM色譜圖圖3甲氧那明的MRM色譜圖進(jìn)樣。分別吸取案件樣品、空白樣品和添加樣品提取液，按選定的條件進(jìn)樣分析。記錄。記錄案件樣品、空白樣品和添加樣品中氟胺酮和去甲氟胺酮可疑色譜峰的保留時(shí)間、特征離子和離子對(duì)豐度比。定性判斷依據(jù)。以保留時(shí)間、質(zhì)譜特征碎片離子峰和離子對(duì)相對(duì)豐度比作為定性判斷依據(jù)。如果案件樣品中出現(xiàn)氟胺酮和去甲氟胺酮的兩對(duì)定性離子對(duì)的特征色譜峰，保留時(shí)間與添加樣品中相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的色譜峰保留時(shí)間比較，相對(duì)誤差在±2.5％內(nèi)，且定性離子對(duì)豐度比與濃度相近添加樣品的離子對(duì)豐度比的相對(duì)誤差不超過(guò)表3規(guī)定的范圍，則可判斷案件樣品中存在該種目標(biāo)物。相對(duì)離子對(duì)豐度比的最大允許相對(duì)誤差相對(duì)離子對(duì)豐度比/（％）5021～5011～2010允許的相對(duì)誤差/（％）20253050（五）分析結(jié)果評(píng)價(jià)。陰性結(jié)果評(píng)價(jià)：如果案件樣品中僅檢出內(nèi)標(biāo)甲氧那明，未檢出氟胺酮和去甲氟胺酮，則陰性結(jié)果可靠。如果案件樣品中未檢出內(nèi)標(biāo)，則陰性結(jié)果不可靠，應(yīng)重新提取檢驗(yàn)。陽(yáng)性結(jié)果評(píng)價(jià)：如果案件樣品中檢出氟胺酮、去甲氟胺酮且空白樣品無(wú)干擾，則陽(yáng)性結(jié)果可靠。如果案件樣品中檢出氟胺酮、去甲氟胺酮且空白樣品亦呈陽(yáng)性，則陽(yáng)性結(jié)果不可靠，應(yīng)重新提取檢驗(yàn)。（六）精密度定性分析的精密度通常表現(xiàn)為假陽(yáng)性或假陰性。依據(jù)本文件方法進(jìn)行測(cè)定，判斷案件樣品的測(cè)定結(jié)果為陰性或陽(yáng)性。樣品甲氧那明（是否檢出）氟胺酮（是否檢出）去氟胺酮（是否檢出）結(jié)果判定1-1（空白樣品）是否否陰性1-2（案件樣品）是否否1-3（加標(biāo)樣品）是是是2-1（空白樣品）是否否陽(yáng)性2-2（案件樣品）是是是2-3（加標(biāo)樣品）是是是3-1（空白樣品）是否否陰性3-2（案件樣品）是否否3-3（加標(biāo)樣品）是是是4-1（空白樣品）是否否陽(yáng)性4-2（案件樣品）是是是4-3（加標(biāo)樣品）是是是5-1（空白樣品）是否否陰性5-2（案件樣品）是否否5-3（加標(biāo)樣品）是是是6-1（空白樣品）是否否陽(yáng)性6-2（案件樣品）是是是6-3（加標(biāo)樣品）是是是7-1（空白樣品）是否否陽(yáng)性7-2（案件樣品）是是是7-3（加標(biāo)樣品）是是是（七）實(shí)驗(yàn)室間方法確認(rèn)根據(jù)方法標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證要求，選擇3家實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室間方法確認(rèn)，確認(rèn)方法的“選擇性”、“檢出限”和“精密度”。1、確定3家實(shí)驗(yàn)室參加。分別是廣西金桂司法鑒定中心、南寧市公安局禁毒支隊(duì)毒品檢驗(yàn)技術(shù)鑒定科、賀州市公安局物證鑒定所。2、實(shí)驗(yàn)室方法確認(rèn)的樣本毛發(fā)共7份（每家實(shí)驗(yàn)室的檢材相同），檢材編號(hào)為BDY-01至BDY-07，每份檢材毛發(fā)重量大于等于80毫克。3、通過(guò)三家實(shí)驗(yàn)室的數(shù)據(jù)比對(duì)（原始記錄和結(jié)果詳見(jiàn)附頁(yè)），7份毛發(fā)樣本中：其中5份判定結(jié)果為陽(yáng)性，2份判定結(jié)果為陰性。三家實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果一致。通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，三家實(shí)驗(yàn)室都對(duì)方法的“選擇性”、“檢出限”、“精密度”都進(jìn)行了確認(rèn)，說(shuō)明團(tuán)標(biāo)《毛發(fā)中氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定液相-色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》的可行性和穩(wěn)定性，滿(mǎn)足毛發(fā)中氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定。六、國(guó)內(nèi)外同類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)制修訂情況及與法律法規(guī)、強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)關(guān)系經(jīng)查閱，國(guó)內(nèi)尚未制定與毛發(fā)中氟胺酮及去甲氟胺酮檢測(cè)有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容與現(xiàn)行的法律、法規(guī)及強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)無(wú)沖突，標(biāo)準(zhǔn)的編寫(xiě)符合GB/T1.1-2020的要求。九、重大分歧意見(jiàn)的處理經(jīng)過(guò)和依據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)研制過(guò)程中無(wú)重大分歧意見(jiàn)。十、自我承諾本標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容與各項(xiàng)指標(biāo)不低于強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)要求。團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《毛發(fā)中氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》標(biāo)準(zhǔn)編制工作組2022年11月28日附件1氟胺酮、去甲氟胺酮的母離子和兩個(gè)子離子去甲氟胺酮兩對(duì)離子對(duì)的碰撞能量氟胺酮兩對(duì)離子對(duì)的碰撞能量添加1ng,進(jìn)樣體積1μL去甲氟胺酮的色譜圖S/N

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(counts)Description[1.58-1.61][1.43-1.54]2.151E+003F-K-A-LOD-0.2ng-2_123846+MRM222.30/163.00添加0.2ng到20mg毛發(fā)中氟胺酮的色譜圖和信噪比S/N

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