《DNA重組技術的基本工具》公開課預習案

3/3選修三第一章第一節(jié)DNA重組技術的基本工具—課前預習案編輯人：全維麗校對人：全維麗審核人：李延亭學習目標：①簡單描述基因工程的概念及目的。②說出DNA重組技術的三個工具及各工具的特點和用途。③利用DNA重組技術的工具解答有關題目。學習重點：DNA

重組技術所需要的三種基本工具的作用；學習難點：基因工程載體需要具備的條件【相關知識回顧】基因：（1）基因的本質（2）基因與DNA的關系（3）基因與染色體的關系（4）基因與性狀（蛋白質）的關系（5）相關概念：顯性基因、隱性基因、等位基因【課前預習案】1、基因工程的原理：基因工程是指按照人們的愿望，進行嚴格的設計，通過體外＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產品。由于基因工程是在＿＿＿＿＿＿＿＿水平上進行設計和施工的，因此又叫做＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。2、限制性核酸內切酶（1）切割DNA的工具是＿＿＿＿＿＿，又稱＿＿＿＿＿＿。（2）這類酶的主要來源是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。（3）這類酶在生物體內能將外來的DNA切斷，即能夠限制異源DNA的侵入并使之失去活力，但對自己的DNA卻無損害作用，這樣可以保持細胞原有的遺傳信息。（4）由于這種切割作用是在DNA分子內部進行的，故名限制性核酸內切酶（簡稱限制酶）。（5）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種＿＿＿＿的核苷酸序列，并且使每一條鏈中＿＿＿＿＿＿部位的兩個核苷酸之間的＿＿＿＿＿＿斷開，因此具有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿性。（6）結果：經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式：＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿。例1、下列關于限制酶的說法正確的是（）A、限制酶廣泛存在于各種生物中，但微生物中很少B、一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列C、不同的限制酶切割DNA后都會形成黏性末端D、限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氫鍵3、DNA連接酶——“分子縫合針”（1）根據(jù)DNA連接酶的來源不同，可以將它分為兩類：一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為DNA連接酶。DNA連接酶只能將＿＿＿＿＿連接起來，不能將雙鏈DNA片段平末端之間進行連接。另一類是從＿＿＿＿＿＿分離出來的，稱為T4DNA連接酶。T4DNA連接酶既可以“縫合”雙鏈DNA片段互補的＿＿＿＿＿＿＿＿，又可以“縫合”雙鏈DNA片段的＿＿＿＿＿＿＿＿，但連接＿＿＿＿＿＿＿＿之間的效率比較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將＿＿＿＿＿加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接＿＿＿＿＿＿＿＿＿的末端，形成磷酸二酯鍵。例2、下圖為DNA分子的切割和連接過程。(1)EcoRI是一種 ＿＿＿＿酶，其識別序列是＿＿＿＿＿＿＿＿，切割位點是＿＿＿＿＿＿＿＿與＿＿＿＿＿＿＿＿之間的＿＿＿＿＿＿＿＿鍵。切割結果產生的DNA片段末端形式為＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。(2)不同來源DNA片段結合，在這里需要的酶應是＿＿＿＿連接酶，此酶的作用是在＿＿＿＿與＿＿＿＿＿之間形成＿＿＿＿鍵，而起“縫合”作用的。還有一種連接平末端的連接酶是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。4、基因進入受體細胞的載體——“分子運輸車”（1）基因操作過程中使用載體兩個目的：一是用它作為運載工具，將目的基因轉移到宿主細胞中去；二是利用它在宿主細胞內對目的基因進行大量的復制。（2）現(xiàn)在通常使用的載體是＿＿＿＿＿＿＿＿，它是一種相對分子質量較小、獨立于擬核DNA之外的環(huán)狀DNA，有的細菌中有一個，有的細菌中有多個。（3）質粒通過細菌間的接合由一個細菌向另一個細菌轉移，可以＿＿＿＿復制，也可整合細菌擬核DNA中，隨著擬核DNA的復制而復制。（4）其他載體還有＿＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿等。（5）作為載體必須具備以下條件：能夠在宿主細胞中復制并穩(wěn)定地保存，具有多個限制酶切點，以便與外源基因連接；具有某些標記基因，便于進行篩選，如對抗菌素的抗性基因、產物具有顏色反應的基因等。例3、以下是兩種限制酶切割后形成的DNA片段，分析回答問題。(1)其中①和＿＿＿＿＿＿是由一種限制酶切割形成的＿＿＿＿＿＿末端，兩者要重組成一個DNA分子，所用DNA連接酶通常是＿＿