2023-2024學(xué)年福建省福州市高二下學(xué)期期末聯(lián)考生物試題（解析版）

高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1福建省福州市2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期期末聯(lián)考試題第Ⅰ卷（選擇題）一、選擇題（每小題只有一個正確的選項，1—12題每題2分，13—16每題4分，共40分）1.人類利用微生物發(fā)酵制作食品已經(jīng)有幾千年的歷史。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.釀造米酒的過程中，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸和無氧呼吸B.酸奶制作過程中先通氣后密封，可以促進(jìn)乳酸菌繁殖C.果醋發(fā)酵過程中打開發(fā)酵瓶主要是為了排出產(chǎn)生的CO2D.泡菜制作過程中，發(fā)酵罐和蔬菜洗凈后用酒精消毒30秒〖答案〗A【詳析】A、釀造米酒的過程中，酵母菌先進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，后進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精，A正確；B、酸奶制作過程中用到的菌種是乳酸菌，乳酸菌是厭氧菌，因此，酸奶制作過程中不需要通氣，而需要密封，B錯誤；C、醋酸菌是好氧菌，果醋發(fā)酵過程中打開發(fā)酵瓶主要是為醋酸菌提供O2，C錯誤；D、泡菜腌制過程中，發(fā)酵罐可以用70%的酒精消毒，但蔬菜洗凈后不需要用酒精消毒，只需要晾干即可，D錯誤。故選A。2.青霉菌的部分代謝途徑如圖所示。青霉素的發(fā)酵生產(chǎn)過程中遇到兩個問題，首先青霉素發(fā)酵需要大量氧氣，其次發(fā)酵過程中總會產(chǎn)生頭孢霉素、下列敘述不正確的是（）A.將血紅蛋白基因轉(zhuǎn)入青霉菌中有可能提高菌體對氧的吸收和利用率B.發(fā)酵過程中，環(huán)境條件變化會影響微生物的生長繁殖和代謝過程C.菌種選育時，敲除青霉菌中控制酶B合成的基因可使其只產(chǎn)青霉素D.由于青霉素、頭孢霉素具有抗菌作用，通入發(fā)酵罐中的空氣無需滅菌〖答案〗D〖祥解〗發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)?；a(chǎn)對人類有用的產(chǎn)品，主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身。發(fā)酵工程一般包括菌種的選育，擴大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配置、滅菌，接種，發(fā)酵、產(chǎn)品的分離、提純等方面。發(fā)酵過程一般來說都是在常溫常壓下進(jìn)行，條件溫和、反應(yīng)安全，原料簡單、污染小，反應(yīng)專一性強，因而可以得到較為專一的產(chǎn)物?！驹斘觥緼、青霉菌是需氧型微生物，血紅蛋白能運輸氧氣，將血紅蛋白基因轉(zhuǎn)入青霉菌中有可能提高菌體對氧的吸收和利用率，A正確；B、微生物的生長繁殖需要適宜的溫度、pH和溶解氧等培養(yǎng)條件，發(fā)酵過程中，環(huán)境條件變化會影響微生物的生長繁殖和代謝過程，B正確；C、結(jié)合圖示可以看出，若能將控制酶B合成的基因敲除，則青霉菌能大量生產(chǎn)青霉素，因此選育菌種時，可對青霉菌株中控制酶B合成的基因進(jìn)行敲除，使其只產(chǎn)青霉素，C正確；D、青霉素、頭孢霉素本身具有殺菌作用，但不能殺滅所有的微生物，故發(fā)酵罐需要嚴(yán)格滅菌，D錯誤。故選D。3.“太空玫瑰”直徑與大拇指寬度相當(dāng)，花期長，最初的種子搭載神舟四號飛船進(jìn)入太空，返回地球后經(jīng)過多年的選育，利用植物組織培養(yǎng)等技術(shù)培育而成。下列敘述正確的是（）A.太空中的宇宙射線輻射，微重力和弱地磁等因素，可誘發(fā)種子發(fā)生基因重組B.接種外植體→誘導(dǎo)愈傷組織→誘導(dǎo)生芽→生成試管苗，在同一個錐形瓶內(nèi)完成C.外植體脫分化和再分化時均存在基因的選擇性表達(dá)D.以同一植物的葉片或花藥為外植體培育的植株基因型相同〖答案〗C【詳析】A、太空中的宇宙射線輻射、微重力和弱地磁等因素，可誘發(fā)種子發(fā)生基因突變，A錯誤；B、接種外植體→誘導(dǎo)愈傷組織→誘導(dǎo)生芽→生成試管苗，該過程中所需要的培養(yǎng)基中的成分和激素等含量不同，故不能在同一個錐形瓶內(nèi)完成，B錯誤；C、外植體的脫分化和再分化過程均存在基因的選擇性表達(dá)過程，C正確；D、葉片是體細(xì)胞，花藥里的花粉是生殖細(xì)胞，故以同一植物的葉片或花藥為外植體培育的植株基因型一般不同，D錯誤。故選C。4.有限稀釋法是克隆化培養(yǎng)動物細(xì)胞的一種方法。將細(xì)胞懸液進(jìn)行連續(xù)倍數(shù)稀釋，最終調(diào)整密度為5個/mL：將稀釋好的細(xì)胞懸液接種于96孔板，每孔加0.1mL；24h后在顯微鏡下挑選符合要求的孔，補加培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)獲得細(xì)胞克隆。相關(guān)說法錯誤的是（）A.培養(yǎng)液中需含有蔗糖、血清等物質(zhì)B.96孔板需置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)C.貼附型細(xì)胞獲得懸液需用胰蛋白酶處理D.24h后觀察，只含有一個細(xì)胞的孔符合要求〖答案〗A〖祥解〗單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細(xì)胞與漿細(xì)胞結(jié)合，經(jīng)過選擇培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)專一抗體檢測后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，即可得單克隆抗體?！驹斘觥緼、動物細(xì)胞培養(yǎng)添加的有機碳源是葡萄糖，A錯誤；B、動物細(xì)胞培養(yǎng)需要置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，以維持培養(yǎng)液pH的穩(wěn)定，B正確；C、貼附型細(xì)胞獲得懸液需用胰蛋白酶處理以獲得單個細(xì)胞，C正確；D、24h后觀察，只含有一個細(xì)胞的孔符合要求，因為只有這樣才能獲得單個細(xì)胞產(chǎn)生的抗體，進(jìn)而可以篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。故選A。5.“篩選”是生物技術(shù)與工程中常用的技術(shù)手段。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時，觀察是否再生細(xì)胞壁可篩選異種融合細(xì)胞B.制備單克隆抗體時，可利用選擇培養(yǎng)基篩選出能產(chǎn)所需抗體的雜交瘤細(xì)胞C.培育耐鹽植株時，檢測耐鹽基因表達(dá)的蛋白質(zhì)活性，即可篩選耐鹽植株D.在臨床試管嬰兒技術(shù)中，取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行遺傳學(xué)診斷篩選出所需的胚胎〖答案〗D〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：（1）制備產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取?！驹斘觥緼、誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時，觀察是否再生細(xì)胞壁不能用于篩選異種融合細(xì)胞，因為同種融合細(xì)胞也會再生出細(xì)胞壁，A錯誤；B、制備單克隆抗體時，可利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，用抗體篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，B錯誤；C、培育耐鹽植株時，需要先將試管苗移植到含有一定鹽分的培養(yǎng)基中，逐漸適應(yīng)鹽分環(huán)境，再逐步增加鹽分濃度，最終篩選出耐鹽植株，C錯誤；D、胚胎植入前篩查能夠避免嚴(yán)重遺傳疾病的患兒出生，在臨床試管嬰兒術(shù)中，需利用遺傳學(xué)診斷的方法篩選出所需的胚胎進(jìn)行移植，該過程中通常用囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞作為遺傳學(xué)診斷篩選的材料，D正確。故選D。6.卡鉑能夠抑制DNA復(fù)制，為廣譜抗腫瘤藥，通過靜脈注射給藥。卡鉑溶于水，溶液中的Cl-會促進(jìn)其分解。相關(guān)實驗的設(shè)計思路如下圖所示，下列說法正確的是（）A.本實驗的自變量是卡鉑試劑有無、DNA復(fù)制抑制劑的有無B.癌癥患者注射的卡鉑試劑溶于生理鹽水，以維持內(nèi)環(huán)境滲透壓C.本實驗預(yù)期結(jié)果為①與④組數(shù)據(jù)接近，②與③組數(shù)據(jù)接近D.培養(yǎng)液中的宮頸癌細(xì)胞表面相互接觸時，細(xì)胞會停止分裂增殖〖答案〗A〖祥解〗題意分析，本實驗的目的是研究卡鉑引發(fā)癌細(xì)胞數(shù)量減少的具體機理；在實驗思路中，用DNA復(fù)制抑制劑和卡鉑甘露醇溶液添加到宮頸癌細(xì)胞懸液中，研究它們單獨和共同作用下宮頸癌細(xì)胞數(shù)量變化，因此該實驗的自變量是卡鉑試劑和DNA復(fù)制抑制劑的有無，因變量是宮頸癌細(xì)胞數(shù)量變化，藥劑濃度、Cl-和其他影響細(xì)胞代謝的因素為無關(guān)變。【詳析】A、結(jié)合實驗設(shè)計可知，本實驗的自變量是卡鉑、DNA復(fù)制抑制劑的有無，A正確；B、卡鉑溶于水，溶液中的Cl-會促進(jìn)其分解，因此，癌癥患者注射的卡鉑試劑不能溶于生理鹽水，否則會影響效果，B錯誤；C、①組不會抑制DNA的復(fù)制，④組會抑制DNA的復(fù)制，所以預(yù)期實驗結(jié)果不相近，C錯誤；D、培養(yǎng)液中的宮頸癌細(xì)胞具有無限增殖的特征，不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，D錯誤。故選A。7.以洋蔥為實驗材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定實驗，以下敘述正確的是（）A.實驗必須在無菌條件下進(jìn)行B.DNA可溶于冷酒精溶液C.DNA在2mol/L的NaCl溶液中析出D.DNA經(jīng)沸水浴與二苯胺反應(yīng)后呈現(xiàn)藍(lán)色〖答案〗D【詳析】A、細(xì)胞生物中都含有DNA，DNA的粗提取不需要在無菌條件下進(jìn)行，A錯誤；B、DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精，B錯誤；C、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，能溶于2mol/L的NaCl溶液，故DNA不能在2mol/L的NaCl溶液中析出，C錯誤；D、在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色，D正確。故選D。8.限制酶A與限制酶B識別的序列分別為：—CATG↓—和—G↓GATCC—（箭頭表示切割位點）。下列敘述正確的是（）A.用限制酶切割DNA，被水解的磷酸二酯鍵有1個B.微生物中的限制酶可破壞入侵的RNA病毒核酸C.限制酶A、B切割DNA產(chǎn)生的末端之間不能連接D.DNA連接酶催化黏性末端間形成氫鍵〖答案〗C〖祥解〗限制酶：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來；（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、DNA是雙鏈，限制酶能識別DNA分子特定序列并在特定位點切割，用限制酶切割DNA，被水解的磷酸二酯鍵有2個，A錯誤；B、微生物中的限制酶可破壞入侵的DNA病毒核酸，B錯誤；C、限制酶A、B切割DNA產(chǎn)生的末端不同，不能連接，C正確；D、DNA連接酶催化黏性末端間形成磷酸二酯鍵，D錯誤。故選C。9.在重組DNA技術(shù)中，將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞，通常是利用質(zhì)粒作為載體。下列關(guān)于質(zhì)粒的說法錯誤的是（）A.質(zhì)粒是獨立于真核細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外的雙鏈DNA分子B.質(zhì)粒上必須具有一個至多個限制酶位點，否則無法自我復(fù)制C.有的質(zhì)?？梢哉系绞荏wDNA中，隨受體DNA同步復(fù)制D.質(zhì)粒上常有特殊的標(biāo)記基因，便于重組DNA的篩選〖答案〗B〖祥解〗作為運載體必須具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存；②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入；③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇；④是安全的，對受體細(xì)胞無害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來?！驹斘觥緼、質(zhì)粒是獨立于真核細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外的雙鏈DNA分子，天然的質(zhì)粒不能直接作為載體，基因工程中用到的質(zhì)粒都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過人工改造的，A正確；B、質(zhì)粒一般有一至多個限制酶的切割位點，以便于目的基因插入，B錯誤；C、有的質(zhì)粒可以整合到受體DNA中，隨受體DNA同步復(fù)制，正因為如此質(zhì)?？梢宰鳛槟康幕虻倪\載工具，便于目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定保存，C正確；D、載體上需要具有某些標(biāo)記基因，以便于重組DNA分子的篩選，常見的標(biāo)記基因有抗生素抗性基因等，D正確。故選B。10.抗蟲作物對害蟲的生存產(chǎn)生壓力，會使害蟲種群抗性基因頻率迅速提高，導(dǎo)致作物的抗蟲效果逐漸減弱。為使轉(zhuǎn)基因抗蟲棉保持抗蟲效果，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上會采取一系列措施。以下措施不能實現(xiàn)上述目標(biāo)的是（）A.在轉(zhuǎn)基因抗蟲棉種子中混入少量常規(guī)種子B.制備抗蟲棉時將兩種抗蟲基因?qū)朊藁ㄖ蠧.轉(zhuǎn)基因抗蟲棉與小面積的常規(guī)棉間隔種植D.單獨種植抗蟲棉，并擴大抗蟲棉種植面積〖答案〗D〖祥解〗轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響），對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。【詳析】A、在轉(zhuǎn)基因抗蟲棉種子中混入少量常規(guī)種子，則常規(guī)種子長成的普通植株能敏感性（不抗蟲）個體提供生存空間，增加與抗蟲個體的競爭，避免抗性基因頻率升高過快，提高了抗蟲棉的抗蟲持久性，A不符合題意；B、制備抗蟲棉時將兩種抗蟲基因?qū)朊藁ㄖ校瑒t兩種抗蟲基因相互作用，能在一定程度上減緩害蟲種群抗性基因頻率迅速提高的趨勢，B不符合題意；C、將轉(zhuǎn)基因抗蟲棉與小面積的常規(guī)棉間隔種植可以使敏感型個體存活，敏感性個體能與抗性強的棉鈴蟲進(jìn)行競爭，不會導(dǎo)致抗性基因頻率升高過快，提高了抗蟲棉的抗蟲持久性，C不符合題意；D、單獨種植抗蟲棉，并擴大抗蟲棉種植面積會進(jìn)一步選擇并保存抗性強的個體，導(dǎo)致敏感性個體死亡，從而加快害蟲種群抗性基因頻率提高，不利于抗蟲棉的抗蟲持久性，D符合題意。故選D。11.我國科研人員將寒帶地區(qū)海魚中的抗凍基因轉(zhuǎn)入千禧果（番茄品種）細(xì)胞中，成功培育出抗凍千禧果。下圖為培育過程使用的Ti質(zhì)粒示意圖，Vir區(qū)的基因活化能促進(jìn)T-DNA的加工和轉(zhuǎn)移。下列敘述錯誤的是（）A.選擇圖示Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，應(yīng)選擇限制酶ⅢB.利用PCR從海魚基因組中擴增抗凍基因需要添加一對特異性引物C.用含卡那霉素的選擇培養(yǎng)基篩選成功導(dǎo)入抗凍基因的受體細(xì)胞D.可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測抗凍基因在轉(zhuǎn)基因千禧果中的表達(dá)量〖答案〗C〖祥解〗PCR原理：利用熱變性的原理，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈?！驹斘觥緼、限制酶Ⅰ會破壞四環(huán)素抗性基因影響后續(xù)的篩選，限制酶Ⅱ有兩個識別位點，會影響目的基因連接在正確的位置，因此選擇圖示Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，應(yīng)選擇限制酶Ⅲ，A正確；B、利用PCR從海魚基因組中擴增抗凍基因需要添加一對特異性引物，目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸，B正確；C、由于四環(huán)素基因在T-DNA片段中，該基因會隨著目的基因進(jìn)入到受體細(xì)胞中，因此，要用含四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基篩選含抗凍基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，C錯誤；D、基因的表達(dá)產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，故可用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測抗凍基因在轉(zhuǎn)基因千禧果中的表達(dá)量，D正確。故選C。12.美國科學(xué)家將螢火蟲的熒光素基因轉(zhuǎn)入煙草植物細(xì)胞，獲得高水平的表達(dá)，長成的植物通體光亮，堪稱自然界的奇跡。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.基因工程的三大工具是限制性內(nèi)切核酸酶、DNA聚合酶、運載體B.基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等C.熒光素基因?qū)霟煵葜参锛?xì)胞時可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D.該項成果說明螢火蟲與煙草植物共用一套密碼子，體現(xiàn)了生物具有共同的起源〖答案〗A〖祥解〗構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的關(guān)鍵步驟，基因工程中，一個完整的表達(dá)載體包含復(fù)制原點、啟動子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因。啟動子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始。終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束。標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選?！驹斘觥緼、基因工程的原理是基因重組，基因工程需要用到限制酶、DNA連接酶和運載體等工具，A錯誤；B、基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，一個完整的表達(dá)載體包含復(fù)制原點、啟動子及目的基因、終止子和標(biāo)記基因，B正確；C、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法，故熒光素基因?qū)霟煵葜参锛?xì)胞時可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，C正確；D、將螢火蟲的熒光素基因轉(zhuǎn)入煙草植物細(xì)胞，獲得高水平的表達(dá)，說明螢火蟲與煙草植物共用一套密碼子，體現(xiàn)了生物具有共同的起源，D正確。故選A。13.草甘膦殺死雜草的同時也能殺死農(nóng)作物。草甘膦可與植物體內(nèi)的PEP競爭EPSP合酶，阻止PEP轉(zhuǎn)化，影響細(xì)胞正常代謝。科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了抗草甘膦的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物。下列說法錯誤的是（）A.可通過轉(zhuǎn)入外源EPSP基因以提高EPSP合酶的相對含量來起作用B.PCR擴增基因時每一輪循環(huán)中均需經(jīng)歷兩次升溫處理C.基因表達(dá)載體中的終止子位于目的基因下游，是翻譯停止的信號D.將外源基因?qū)朕r(nóng)作物的葉綠體基因組中可避免基因向近緣雜草擴散〖答案〗C〖祥解〗題意分析，草甘膦是一種非選擇性除草劑，殺死雜草的同時也殺死農(nóng)作物。它與植物體內(nèi)的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）結(jié)構(gòu)相似，可與PEP競爭結(jié)合EPSP合酶，阻止PEP轉(zhuǎn)化，影響植物細(xì)胞正常代謝?！驹斘觥緼、外源EPSP基因可以指導(dǎo)EPSP合酶的合成，所以可通過轉(zhuǎn)入外源EPSP基因以提高EPSP合酶的相對含量來起作用，A正確；B、體外擴增GR79基因時每一輪循環(huán)包括高溫變性、低溫復(fù)性和中溫延伸過程，可見每一個循環(huán)中均需經(jīng)歷兩次目的不同的升溫處理，B正確；C、基因表達(dá)載體中的終止子是轉(zhuǎn)錄停止的信號，C錯誤；D、將外源基因?qū)朕r(nóng)作物的葉綠體基因組中可有效避免GR79基因向近緣雜草擴散，這是因為擴散是通過花粉傳播，而花粉的精子中幾乎不攜帶質(zhì)基因，D正確。故選C。14.我國科學(xué)家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，利用富集培養(yǎng)基獲得含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，經(jīng)純培養(yǎng)后進(jìn)一步研究了其生物學(xué)特性，結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是（）A.制備富集培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法，滅菌后調(diào)整培養(yǎng)基pHB.對擬桿菌的純培養(yǎng)物采用平板劃線法可獲得如圖的實驗結(jié)果C.據(jù)圖分析，擬桿菌菌株在以纖維素為氮源時生長狀況最好D.分離獲得的擬桿菌所分泌的酶可能具有耐低溫、耐鹽的特性〖答案〗D【詳析】A、為實現(xiàn)無菌操作，制備富集培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法，配制培養(yǎng)基時應(yīng)先調(diào)pH再滅菌，防止調(diào)pH時造成雜菌污染，A錯誤；B、平板劃線法可分離菌種但不能用于計數(shù)，圖示接種方法能夠?qū)ξ⑸镞M(jìn)行計數(shù)，屬于稀釋涂布平板法，B錯誤；C、分析圖中曲線可知，在以纖維素為碳源的培養(yǎng)基中，細(xì)胞數(shù)量最多，可推知擬桿菌新菌株在以纖維素為碳源（纖維素的元素組成是CHO，不能作為氮源）時生長狀況最好，C錯誤；D、深海冷泉中存在的某些微生物，只有利用冷泉中的特有物質(zhì)才能生存，或者只能在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活，故在沉積物樣品中分離獲得的擬桿菌所分泌的酶可能具有耐低溫、耐鹽的特性，D正確。故選D。15.CRISPR/Cas9基因組編輯系統(tǒng)由向?qū)NA識別并結(jié)合目標(biāo)DNA，Cas9蛋白切斷雙鏈DNA使其形成兩個末端，如圖所示。這兩個末端通過“斷裂修復(fù)”重新連接時，在細(xì)胞中加入大量用于修復(fù)的模板，可以將需要改變的堿基序列引入到基因組中，但該技術(shù)有時也存在編輯出錯而造成脫靶。下列敘述正確的是（）A.Cas9蛋白能作用于脫氧核糖和堿基之間的化學(xué)鍵B.對不同目標(biāo)DNA進(jìn)行編輯時，要使用不同的Cas9蛋白C.若只替換基因的一個堿基對，基因表達(dá)產(chǎn)物最多改變一個氨基酸D.若目標(biāo)DNA存在多個與向?qū)NA互補配對的序列，可能導(dǎo)致基因編輯脫靶〖答案〗D〖祥解〗題意分析，CRISPR-Cas9體系是由靶基因的向?qū)NA和Cas9蛋白構(gòu)成的復(fù)合體。向?qū)NA在基因組中負(fù)責(zé)尋找靶基因并與其結(jié)合；Cas9蛋白在向?qū)NA的引導(dǎo)下切割靶基因，使DNA雙鏈斷裂產(chǎn)生平末端。在隨后DNA自我修復(fù)的過程中容易隨機引起一些堿基對的插入或缺失，導(dǎo)致基因功能改變。【詳析】A、Cas9蛋白識別并切斷雙鏈DNA形成兩個末端，相當(dāng)于限制酶，能作用于脫氧核糖和磷酸之間的化學(xué)鍵--磷酸二酯鍵，A錯誤；B、在對不同目標(biāo)DNA進(jìn)行編輯時，應(yīng)使用Cas9蛋白和不同的sgRNA結(jié)合進(jìn)而實現(xiàn)對不同基因的編輯，B錯誤；C、若只替換基因的一個堿基對，一般情況下基因表達(dá)產(chǎn)物只改變一個氨基酸，也可能堿基的替換引起終止密碼提前出現(xiàn)，則會導(dǎo)致蛋白質(zhì)中更多的氨基酸缺失，C錯誤；D、若目標(biāo)DNA存在多個與向?qū)NA互補配對的序列，可能導(dǎo)致基因編輯脫靶，且能夠與向?qū)NA配對的序列越多，脫靶的幾率越高，D正確。故選D。16.中國科學(xué)院團隊對雌性獼猴進(jìn)行克隆，成功獲得“中中”和“華華”兩姐妹，突破了現(xiàn)有技術(shù)無法用體細(xì)胞克隆非人靈長類動物的世界難題。如圖為“中中”和“華華”培育的流程，相關(guān)敘述錯誤的是（）A.圖中的卵子實際上是發(fā)育到MⅡ期的卵母細(xì)胞B.②過程是動物胚胎的體外培養(yǎng)過程，需無菌、無毒環(huán)境C.③過程的胚胎受體需要用促性腺激素超數(shù)排卵處理D.中中、華華的性別由纖維細(xì)胞的遺傳物質(zhì)決定〖答案〗C〖祥解〗題圖分析：圖示為“中中”和“華華”培育的流程，其中①為核移植過程，②表示早期胚胎培養(yǎng)過程，③表示胚胎移植過程?！驹斘觥緼、圖中的卵子實際上是發(fā)育到MⅡ期的卵母細(xì)胞，因為去核的卵細(xì)胞內(nèi)存在激活細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì)，A正確；B、②過程是動物胚胎的早期培養(yǎng)過程，需無菌、無毒環(huán)境，B正確；C、③過程的胚胎受體需要用雌激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，使其處于相同的生理狀態(tài)，C錯誤；D、中中、華華的細(xì)胞核基因來自成纖維細(xì)胞，因此它們的性別由纖維細(xì)胞的遺傳物質(zhì)決定，D正確。故選C。第Ⅱ卷（非選擇題）二、非選擇題（6大題，共60分）17.魚茶味酸而微咸，甘香可口，是海南黎族的一種傳統(tǒng)發(fā)酵食品。其制作方法是：將生魚開膛洗凈，去頭去尾，加鹽、姜、蒜等處理后，拌入煮熟的米飯，在特定條件下發(fā)酵一段時間。已知魚茶的發(fā)酵菌群主要是乳酸菌?；卮鹣铝杏嘘P(guān)問題：（1）寫出乳酸菌分解葡萄糖產(chǎn)生乳酸的反應(yīng)簡式：__________________。根據(jù)乳酸菌的代謝特點，制作魚茶時發(fā)酵裝置的充氣口應(yīng)______（填“打開”或“關(guān)閉”）。（2）不能將煮熟的米飯立即與處理后的生魚混合并攪拌，原因是__________________。（3）圖1是某生物科研小組繪制的魚茶發(fā)酵過程中各菌種數(shù)量及發(fā)酵液pH的變化曲線。①魚茶發(fā)酵初期，發(fā)酵液pH下降與溶液中______（寫出兩種）等物質(zhì)增多有關(guān)。發(fā)酵3天后醋酸菌逐漸減少，原因是圖1中__________________等微生物進(jìn)行有氧呼吸消耗了發(fā)酵裝置中的氧氣。②用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌種數(shù)量時，發(fā)現(xiàn)其中1個平板的菌落分布如圖2所示。該平板不能用于計數(shù)，原因是________________________。與該平板相同稀釋倍數(shù)的其他平板未出現(xiàn)該現(xiàn)象，推測該平板接種時可能的操作失誤是____________?！即鸢浮剑?）①.②.關(guān)閉（2）溫度過高會殺死乳酸菌，造成發(fā)酵失?。?）①.乳酸、醋酸、二氧化碳②.醋酸菌、酵母菌③.部分菌落過于密集，菌落相互連接，無法準(zhǔn)確計數(shù)④.涂布不均勻〖祥解〗乳酸菌，代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑵咸烟茄趸癁槿樗??！拘?詳析】乳酸菌在無氧條件下能將葡萄糖分解成乳酸，其反應(yīng)簡式為：C6H12O62C3H6O3（乳酸）+能量。乳酸菌是厭氧菌，制作魚茶時發(fā)酵裝置的充氣口應(yīng)關(guān)閉?！拘?詳析】高溫會殺死乳酸菌，造成發(fā)酵失敗，故不能將煮熟的米飯立即與處理后的生魚混合并攪拌，應(yīng)自然冷卻后再混勻裝入壇中?！拘?詳析】①魚茶發(fā)酵初期，發(fā)酵液pH下降，說明酸性物質(zhì)增多，這主要與發(fā)酵所產(chǎn)生的乳酸、醋酸、二氧化碳等物質(zhì)增多有關(guān)。發(fā)酵3天后醋酸菌逐漸減少，這主要與其生存所需要的氧氣含量有關(guān)，該時期醋酸菌、酵母菌等微生物進(jìn)行有氧呼吸消耗了發(fā)酵裝置中的氧氣。②圖2所示平板不能用于計數(shù)，這是由于部分菌落過于密集，菌落相互連接，無法準(zhǔn)確計數(shù)，而與該平板相同稀釋倍數(shù)的其他平板未出現(xiàn)該現(xiàn)象，據(jù)此可推知該平板接種時涂布不均勻，導(dǎo)致菌落分布不均勻。18.油菜是重要的經(jīng)濟作物，用黑芥和蕓薹為材料培育芥菜型油菜的方法如圖所示，不考慮發(fā)生其他變異?；卮鹣铝袉栴}：注：A、B分別表示不同植物的一個染色體組，兩者的染色體數(shù)目分別為10、8。（1）方法1中F1體細(xì)胞的染色體數(shù)目為______，可通過物理方法______人工誘導(dǎo)______，得到芥菜型油菜。（2）由于黑芥和蕓薹間的生殖限制，方法1中產(chǎn)生的F1代幼苗數(shù)量有限。如果要提高育種效率，可用F1的葉片為材料培育芥菜型油菜，寫出實驗思路：__________________。（3）方法2應(yīng)用______技術(shù)，打破了黑芥與蕓薹之間的生殖隔離。步驟①需要用______處理以去除細(xì)胞壁，獲得的甲為______。（4）步驟②可通過______法（寫出一種），促進(jìn)甲、乙融合。該過程獲得雜種細(xì)胞的概率較低，因為步驟②的產(chǎn)物除雜種細(xì)胞外還可能有未融合的細(xì)胞、融合的具有相同核的細(xì)胞?？赏ㄟ^流式細(xì)胞儀對細(xì)胞中的染色體數(shù)量進(jìn)行檢測，從而篩選出雜種細(xì)胞，理由是______?！即鸢浮剑?）①.18②.低溫處理③.染色體加倍（2）用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，以F1葉片為外植體，脫分化形成愈傷組織，用秋水仙素處理（或者低溫誘導(dǎo)）愈傷組織，之后再分化形成植株，即有可能獲得芥菜型油菜（3）①.植物體細(xì)胞雜交②.纖維素酶、果膠酶③.黑芥原生質(zhì)體（4）①.電融合/離心/PEG融合/高Ca2+-高pH等②.未融合細(xì)胞中的染色體數(shù)量為20或者16，融合的具有相同核的細(xì)胞中染色體數(shù)量為40或者32，而雜種細(xì)胞的染色體數(shù)量為36，不同類型細(xì)胞的染色體數(shù)量存在差異〖祥解〗秋水仙素作用的機理：人工誘導(dǎo)多倍體的方法很多，如低溫處理，目前最常用且最有效的方法是用秋水仙素來處理萌發(fā)的種子或幼苗，當(dāng)秋水仙素作用于正在分裂的細(xì)胞時，能夠抑制紡錘體的形成，導(dǎo)致染色體不能移向細(xì)胞兩極，從而引起細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍，染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行有絲分裂，將來可能發(fā)育成多倍體植株?！拘?詳析】A、B分別表示不同植物的一個染色體組，兩者的染色體數(shù)目分別為10、8。因此，方法1中F1體細(xì)胞的染色體數(shù)目為18，可通過物理方法如低溫人工誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，得到芥菜型油菜，這是因為低溫條件下會抑制紡錘體的形成，因而會導(dǎo)致細(xì)胞中染色體數(shù)目加倍，進(jìn)而獲得芥菜型油菜，其中染色體數(shù)目為36?！拘?詳析】由于黑芥和蕓薹間的生殖限制，方法1中產(chǎn)生的F1代幼苗數(shù)量有限。如果要提高育種效率，可用F1的葉片為材料培育芥菜型油菜，該過程的原理是植物細(xì)胞的全能性，所用得勁激素是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。具體實驗思路為：以F1葉片為外植體，脫分化形成愈傷組織，用秋水仙素處理（或者低溫誘導(dǎo)）愈傷組織，之后再分化形成植株，即有可能獲得芥菜型油菜?！拘?詳析】方法2應(yīng)用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，該技術(shù)的原理是植物細(xì)胞的全能性和細(xì)胞膜的流動性，該方法打破了黑芥與蕓薹之間的生殖隔離。步驟①需要用纖維素酶、果膠酶處理以去除細(xì)胞壁，獲得的甲為黑芥原生質(zhì)體，乙為蕓薹體細(xì)胞原生質(zhì)體?！拘?詳析】步驟②可通過電融合/離心/PEG融合/高Ca2+-高pH等法促進(jìn)甲、乙融合獲得雜種細(xì)胞，雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁是融合成功的關(guān)鍵。該過程獲得雜種細(xì)胞的概率較低，因為步驟②的產(chǎn)物除雜種細(xì)胞外還可能有未融合的細(xì)胞、融合的具有相同核的細(xì)胞?？赏ㄟ^流式細(xì)胞儀對細(xì)胞中的染色體數(shù)量進(jìn)行檢測，從而篩選出雜種細(xì)胞，該方法的原理是利用不同融合細(xì)胞中染色體不同實現(xiàn)的，即未融合細(xì)胞中的染色體數(shù)量為20或者16，融合的具有相同核的細(xì)胞中染色體數(shù)量為40或者32，而雜種細(xì)胞的染色體數(shù)量為36，據(jù)此做出判斷。19.為降低人乳腺癌治療藥物的副作用，科研人員嘗試在單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)上，構(gòu)建抗體藥物偶聯(lián)物（ADC），過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）實驗時，向小鼠注射取自______的特定抗原，其目的是____________。（2）步驟①是指______，實現(xiàn)該過程依賴于細(xì)胞膜具有______的結(jié)構(gòu)特點。（3）經(jīng)過步驟②、③篩選得到的雜交瘤細(xì)胞具有的特點是__________________。（4）步驟④將獲得的a單克隆抗體和b治療乳腺癌的藥物這2部分，通過接頭結(jié)合在一起，形成____________，實現(xiàn)對乳腺癌的治療。與常規(guī)化療方法相比，該治療方法具有的明顯優(yōu)點是________________________。〖答案〗（1）①.人乳腺癌細(xì)胞②.獲得能產(chǎn)生特定（治療乳腺癌的/與乳腺癌細(xì)胞特異性結(jié)合的）抗體的B淋巴細(xì)胞（2）①.（動物）細(xì)胞的融合②.一定的流動性（3）能大量增殖，又能產(chǎn)生特定抗體（4）①.生物導(dǎo)彈/抗體藥物偶聯(lián)物/ADC②.單克隆抗體能使藥物精準(zhǔn)地作用于乳腺癌（靶）細(xì)胞，避免其他細(xì)胞受損〖祥解〗由于單克隆抗體的特異性強，能特異性識別抗原，因此可以把抗癌細(xì)胞的單克隆抗體跟放射性同位素、藥物等相結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”。借助單克隆抗體的定位導(dǎo)向作用將藥物定向帶到癌細(xì)胞，在原位殺死癌細(xì)胞。療效高，副作用小，位置準(zhǔn)確?！拘?詳析】向小鼠注射特定的抗原應(yīng)取自人的乳腺癌細(xì)胞，目的是使小鼠體內(nèi)能產(chǎn)生獲得能產(chǎn)生特定（治療乳腺癌的）抗體的B淋巴細(xì)胞?！拘?詳析】步驟①是指動物細(xì)胞的融合，其依據(jù)的原理是細(xì)胞膜具有一定的流動性的結(jié)構(gòu)特點?！拘?詳析】步驟②是指篩選雜交瘤細(xì)胞，步驟③是進(jìn)行第二次篩選——抗體檢測，篩選得到的雜交瘤細(xì)胞具有的特點是能大量增殖，又能產(chǎn)生特定抗體?！拘?詳析】步驟④是指將獲得的a單克隆抗體和b治療乳腺癌的藥物這2部分，通過接頭結(jié)合在一起，從而形成ADC，從而實現(xiàn)對乳腺癌的治療。與常規(guī)化療方法相比較，ADC能降低乳腺癌治療藥物的副作用，原因是單克隆抗體能使藥物精準(zhǔn)地作用于乳腺癌（靶）細(xì)胞，避免對其他細(xì)胞造成受損。20.番茄黃化曲葉病毒（TYLCV）是一類單鏈環(huán)狀DNA病毒，能引發(fā)番茄黃化曲葉病。檢測某番茄幼苗是否感染該病毒，實驗人員操作過程如圖所示。完成下列問題：（1）PCR反應(yīng)中每次循環(huán)可分為______退火、延伸三步。（2）步驟③中使用的酶是______，步驟②中的樣本DNA在步驟③中作為______。步驟③需加入根據(jù)______的堿基序列設(shè)計的引物。（3）PCR擴增得到的產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳后的結(jié)果如下：①實驗中，DNAmarker是一組已知長度和含量的標(biāo)準(zhǔn)DNA片段的混合物，DNAmarker的作用是作為______的參照物。已知在該緩沖液中DNA帶負(fù)電，圖中代表正極的電極是______。②健康番茄幼苗的DNA是陰性對照組，______是陽性對照組。由電泳圖中條帶情況可知：該樣品植株______（填“感染”或“未感染”）病毒。〖答案〗（1）變性（2）①.Taq酶（耐高溫的DNA聚合酶）②.PCR的模板③.TYLCV（番茄黃化曲葉病毒）的DNA（3）①.指示DNA分子大?、?電極2③.TYLCV（番茄黃化曲葉病毒）的DNA④.感染〖祥解〗PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制?！拘?詳析】PCR反應(yīng)中每次循環(huán)可分為變性、退火和延伸三步?！拘?詳析】步驟③是指利用PCR擴增DNA片段，需要使用耐高溫的DNA聚合酶，步驟②中的樣本DNA在PCR擴增中充當(dāng)模板。結(jié)合題干信息，在步驟③中需加入引物，該引物應(yīng)是根據(jù)TYLCV（番茄黃化曲葉病毒）的DNA設(shè)計的?！拘?詳析】①DNAmarker是一組已知長度和含量的標(biāo)準(zhǔn)DNA片段的混合物，起參照作用，能大致估算目的DNA片段的大小。依據(jù)條帶位置，已知在該緩沖液中DNA帶負(fù)電，則圖中代表正極的電極是電極2。②健康番茄幼苗的DNA中不會含有黃化曲葉病毒（TYLCV）的DNA，以此作為陰性對照組，則含有TYLCV的DNA作為陽性對照。依據(jù)電泳條帶比對可知，該樣品植株含有含有TYLCV的DNA，故該樣品植株感染了病毒。21.金屬硫蛋白（MT）是一類廣泛存在于動植物中具有金屬結(jié)合能力的蛋白質(zhì)，決定該蛋白質(zhì)合成的基因結(jié)構(gòu)如圖1所示?？蒲腥藛T利用圖2所示質(zhì)粒構(gòu)建棗樹的MT基因重組DNA分子并導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞，獲得對重金屬鎘（Cd）具有吸附能力和耐受能力的MT工程菌?；卮鹣铝袉栴}：啟動子（注：XhoⅠ、KpnⅠ、PstⅠ為不同限制酶的識別位點：LacZ基因編碼產(chǎn)生的β-半乳糖苷酶可以催化無色物質(zhì)X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色：amp基因為氨芐青霉素抗性基因。）（1）利用PCR技術(shù)擴增MT基因時應(yīng)選擇的引物組合是______，并在其5′末端分別添加限制酶______和______的識別序列。（2）構(gòu)建重組DNA分子：啟動子是_________________識別并結(jié)合的部位。（3）導(dǎo)入、篩選和鑒定MT工程菌。①將得到的混合物導(dǎo)入到用______處理的大腸桿菌完成轉(zhuǎn)化實驗。②將菌液稀釋并涂布在含____________的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)后，隨機挑取______色的單菌落可獲得MT工程菌。③欲進(jìn)一步對MT工程菌進(jìn)行鑒定，可將挑取出的MT工程菌與普通大腸桿菌分別接種至含一定濃度的重金屬鎘的LB液體培養(yǎng)基中，置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，適宜時間后檢測菌種數(shù)量和培養(yǎng)基中的鎘濃度，預(yù)期結(jié)果為________________________?！即鸢浮剑?）①.引物Ⅲ和引物Ⅱ②.XhoⅠ③.KpnⅠ（2）RNA聚合酶（3）①.①Ca2+②.X-gal和氨芐青霉素③.白④.與接種普通大腸桿菌相比，接種MT工程菌的培養(yǎng)基中，菌種數(shù)量更高，培養(yǎng)基中的鎘濃度更低【小問1詳析】PCR過程中，引物與模板鏈的3'端結(jié)合，因此應(yīng)當(dāng)選擇引物Ⅱ和引物Ⅲ，這樣才能使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。構(gòu)建目的基因表達(dá)載體時，應(yīng)將MT基因的插入到啟動子和終止子之間，由于目的基因中含有PstⅠ的識別序列，若在基因兩側(cè)添加PstⅠ識別序列，將來對MT基因進(jìn)行切割時會破壞目的基因，同時為了保證MT基因正向連接到質(zhì)粒上，應(yīng)當(dāng)在MT基因兩側(cè)連上不同的限制酶識別序列，故添加的限制酶序列分別是XhoⅠ和KpnⅠ限制酶序列，并且應(yīng)添加在基因的外側(cè)，才能不影響基因的序列，故添加在引物的5'端?！拘?詳析】啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達(dá)出人類需要的蛋白質(zhì)?！拘?詳析】①大腸桿菌是原核生物，需要Ca2+處理，使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，完成將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，即轉(zhuǎn)化過程。②在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，導(dǎo)入了空白質(zhì)粒和重組質(zhì)粒的大腸桿菌都可以形成菌落，但導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌LacZ基因被破壞，不能催化無色物質(zhì)X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，是白色菌落，故應(yīng)挑取白色單菌落進(jìn)行培養(yǎng)，即篩選受體菌時需要在培養(yǎng)基中加入X-gal和氨芐青霉素這兩種物質(zhì)。③操作獲得的是對重金屬鎘（Cd)具有吸附能力和耐受能力的MT工程菌，因此欲進(jìn)一步對MT工程菌進(jìn)行鑒定，可將挑取出的MT工程菌與普通大腸桿菌分別接種到含有(一定濃度的重金屬)鎘的LB液體培養(yǎng)基中，工程菌符合要求的實驗結(jié)果應(yīng)為：與接種普通大腸桿菌相比，接種MT工程菌的培養(yǎng)基中，菌種數(shù)量更高，培養(yǎng)基中的鎘濃度更低。22.水蛭是我國傳統(tǒng)中藥材，主要藥理成分水蛭素為水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。擬通過蛋白質(zhì)工程改造水蛭素結(jié)構(gòu)，提高其抗凝血活性，蛋白質(zhì)工程流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸，區(qū)別在于基因工程原則上只能生產(chǎn)______的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)工程可以通過改造或合成______來改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白。（2）圖中物質(zhì)a是______物質(zhì)b是______，在生產(chǎn)過程中，物質(zhì)b可能不同，合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同，原因是________________________。（3）研究者運用蛋白質(zhì)工程技術(shù)，構(gòu)建水蛭肽嵌合蛋白（TNHH），以大鼠為材料研究發(fā)現(xiàn)TNHH對腦出血后腦水腫具有一定的治療效果。完善以下實驗設(shè)計。實驗處理A組B組C組只進(jìn)針，不在腦中注入血液________________________靜脈注射生理鹽水________實驗結(jié)果00001.752.752.371.371.251.621.650.87處理后時間（h）624721686247216862472168注：實驗結(jié)果為大鼠神經(jīng)功能缺損評分，缺損評分越高，神經(jīng)功能損傷越嚴(yán)重〖答案〗（1）①.自然界已經(jīng)存在的②.基因（2）①.（具有一定氨基酸序列的）多肽鏈②.mRNA##信使RNA③.密碼子的簡并性（或一種氨基酸可能有多種密碼子與之對應(yīng)）（3）①.在腦中注入血液②.在腦中注入血液③.靜脈注射生理鹽水④.靜脈注射TNHH溶液【小問1詳析】基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界已經(jīng)存在的的蛋白質(zhì)，而蛋白質(zhì)工程可通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。【小問2詳析】蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列，據(jù)圖可知，物質(zhì)a是具有一定氨基酸序列的多肽鏈，物質(zhì)b是mRNA。在生產(chǎn)過程中，物質(zhì)b可能不同，合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同，原因是密碼子的簡并性，即一種氨基酸可能有幾個密碼子?！拘?詳析】據(jù)表可知，該實驗是研究TNHH對腦出血的治療效果，實驗前先制備腦出血模擬鼠，所以①②均在腦中注入血液（適量且等量）。該實驗的自變量是是否使用TNHH和處理時間，因變量是大鼠神經(jīng)功能缺損評分，結(jié)合實驗結(jié)果可知，③為靜脈注射生理鹽水，A組為空白對照組，B組為對照組，④為靜脈注射TNHH溶液，C組為實驗組。福建省福州市2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期期末聯(lián)考試題第Ⅰ卷（選擇題）一、選擇題（每小題只有一個正確的選項，1—12題每題2分，13—16每題4分，共40分）1.人類利用微生物發(fā)酵制作食品已經(jīng)有幾千年的歷史。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.釀造米酒的過程中，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸和無氧呼吸B.酸奶制作過程中先通氣后密封，可以促進(jìn)乳酸菌繁殖C.果醋發(fā)酵過程中打開發(fā)酵瓶主要是為了排出產(chǎn)生的CO2D.泡菜制作過程中，發(fā)酵罐和蔬菜洗凈后用酒精消毒30秒〖答案〗A【詳析】A、釀造米酒的過程中，酵母菌先進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，后進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精，A正確；B、酸奶制作過程中用到的菌種是乳酸菌，乳酸菌是厭氧菌，因此，酸奶制作過程中不需要通氣，而需要密封，B錯誤；C、醋酸菌是好氧菌，果醋發(fā)酵過程中打開發(fā)酵瓶主要是為醋酸菌提供O2，C錯誤；D、泡菜腌制過程中，發(fā)酵罐可以用70%的酒精消毒，但蔬菜洗凈后不需要用酒精消毒，只需要晾干即可，D錯誤。故選A。2.青霉菌的部分代謝途徑如圖所示。青霉素的發(fā)酵生產(chǎn)過程中遇到兩個問題，首先青霉素發(fā)酵需要大量氧氣，其次發(fā)酵過程中總會產(chǎn)生頭孢霉素、下列敘述不正確的是（）A.將血紅蛋白基因轉(zhuǎn)入青霉菌中有可能提高菌體對氧的吸收和利用率B.發(fā)酵過程中，環(huán)境條件變化會影響微生物的生長繁殖和代謝過程C.菌種選育時，敲除青霉菌中控制酶B合成的基因可使其只產(chǎn)青霉素D.由于青霉素、頭孢霉素具有抗菌作用，通入發(fā)酵罐中的空氣無需滅菌〖答案〗D〖祥解〗發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)模化生產(chǎn)對人類有用的產(chǎn)品，主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身。發(fā)酵工程一般包括菌種的選育，擴大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配置、滅菌，接種，發(fā)酵、產(chǎn)品的分離、提純等方面。發(fā)酵過程一般來說都是在常溫常壓下進(jìn)行，條件溫和、反應(yīng)安全，原料簡單、污染小，反應(yīng)專一性強，因而可以得到較為專一的產(chǎn)物?！驹斘觥緼、青霉菌是需氧型微生物，血紅蛋白能運輸氧氣，將血紅蛋白基因轉(zhuǎn)入青霉菌中有可能提高菌體對氧的吸收和利用率，A正確；B、微生物的生長繁殖需要適宜的溫度、pH和溶解氧等培養(yǎng)條件，發(fā)酵過程中，環(huán)境條件變化會影響微生物的生長繁殖和代謝過程，B正確；C、結(jié)合圖示可以看出，若能將控制酶B合成的基因敲除，則青霉菌能大量生產(chǎn)青霉素，因此選育菌種時，可對青霉菌株中控制酶B合成的基因進(jìn)行敲除，使其只產(chǎn)青霉素，C正確；D、青霉素、頭孢霉素本身具有殺菌作用，但不能殺滅所有的微生物，故發(fā)酵罐需要嚴(yán)格滅菌，D錯誤。故選D。3.“太空玫瑰”直徑與大拇指寬度相當(dāng)，花期長，最初的種子搭載神舟四號飛船進(jìn)入太空，返回地球后經(jīng)過多年的選育，利用植物組織培養(yǎng)等技術(shù)培育而成。下列敘述正確的是（）A.太空中的宇宙射線輻射，微重力和弱地磁等因素，可誘發(fā)種子發(fā)生基因重組B.接種外植體→誘導(dǎo)愈傷組織→誘導(dǎo)生芽→生成試管苗，在同一個錐形瓶內(nèi)完成C.外植體脫分化和再分化時均存在基因的選擇性表達(dá)D.以同一植物的葉片或花藥為外植體培育的植株基因型相同〖答案〗C【詳析】A、太空中的宇宙射線輻射、微重力和弱地磁等因素，可誘發(fā)種子發(fā)生基因突變，A錯誤；B、接種外植體→誘導(dǎo)愈傷組織→誘導(dǎo)生芽→生成試管苗，該過程中所需要的培養(yǎng)基中的成分和激素等含量不同，故不能在同一個錐形瓶內(nèi)完成，B錯誤；C、外植體的脫分化和再分化過程均存在基因的選擇性表達(dá)過程，C正確；D、葉片是體細(xì)胞，花藥里的花粉是生殖細(xì)胞，故以同一植物的葉片或花藥為外植體培育的植株基因型一般不同，D錯誤。故選C。4.有限稀釋法是克隆化培養(yǎng)動物細(xì)胞的一種方法。將細(xì)胞懸液進(jìn)行連續(xù)倍數(shù)稀釋，最終調(diào)整密度為5個/mL：將稀釋好的細(xì)胞懸液接種于96孔板，每孔加0.1mL；24h后在顯微鏡下挑選符合要求的孔，補加培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)獲得細(xì)胞克隆。相關(guān)說法錯誤的是（）A.培養(yǎng)液中需含有蔗糖、血清等物質(zhì)B.96孔板需置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)C.貼附型細(xì)胞獲得懸液需用胰蛋白酶處理D.24h后觀察，只含有一個細(xì)胞的孔符合要求〖答案〗A〖祥解〗單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細(xì)胞與漿細(xì)胞結(jié)合，經(jīng)過選擇培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)專一抗體檢測后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，即可得單克隆抗體?！驹斘觥緼、動物細(xì)胞培養(yǎng)添加的有機碳源是葡萄糖，A錯誤；B、動物細(xì)胞培養(yǎng)需要置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，以維持培養(yǎng)液pH的穩(wěn)定，B正確；C、貼附型細(xì)胞獲得懸液需用胰蛋白酶處理以獲得單個細(xì)胞，C正確；D、24h后觀察，只含有一個細(xì)胞的孔符合要求，因為只有這樣才能獲得單個細(xì)胞產(chǎn)生的抗體，進(jìn)而可以篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。故選A。5.“篩選”是生物技術(shù)與工程中常用的技術(shù)手段。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時，觀察是否再生細(xì)胞壁可篩選異種融合細(xì)胞B.制備單克隆抗體時，可利用選擇培養(yǎng)基篩選出能產(chǎn)所需抗體的雜交瘤細(xì)胞C.培育耐鹽植株時，檢測耐鹽基因表達(dá)的蛋白質(zhì)活性，即可篩選耐鹽植株D.在臨床試管嬰兒技術(shù)中，取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行遺傳學(xué)診斷篩選出所需的胚胎〖答案〗D〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：（1）制備產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取?！驹斘觥緼、誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時，觀察是否再生細(xì)胞壁不能用于篩選異種融合細(xì)胞，因為同種融合細(xì)胞也會再生出細(xì)胞壁，A錯誤；B、制備單克隆抗體時，可利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，用抗體篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，B錯誤；C、培育耐鹽植株時，需要先將試管苗移植到含有一定鹽分的培養(yǎng)基中，逐漸適應(yīng)鹽分環(huán)境，再逐步增加鹽分濃度，最終篩選出耐鹽植株，C錯誤；D、胚胎植入前篩查能夠避免嚴(yán)重遺傳疾病的患兒出生，在臨床試管嬰兒術(shù)中，需利用遺傳學(xué)診斷的方法篩選出所需的胚胎進(jìn)行移植，該過程中通常用囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞作為遺傳學(xué)診斷篩選的材料，D正確。故選D。6.卡鉑能夠抑制DNA復(fù)制，為廣譜抗腫瘤藥，通過靜脈注射給藥?？ㄣK溶于水，溶液中的Cl-會促進(jìn)其分解。相關(guān)實驗的設(shè)計思路如下圖所示，下列說法正確的是（）A.本實驗的自變量是卡鉑試劑有無、DNA復(fù)制抑制劑的有無B.癌癥患者注射的卡鉑試劑溶于生理鹽水，以維持內(nèi)環(huán)境滲透壓C.本實驗預(yù)期結(jié)果為①與④組數(shù)據(jù)接近，②與③組數(shù)據(jù)接近D.培養(yǎng)液中的宮頸癌細(xì)胞表面相互接觸時，細(xì)胞會停止分裂增殖〖答案〗A〖祥解〗題意分析，本實驗的目的是研究卡鉑引發(fā)癌細(xì)胞數(shù)量減少的具體機理；在實驗思路中，用DNA復(fù)制抑制劑和卡鉑甘露醇溶液添加到宮頸癌細(xì)胞懸液中，研究它們單獨和共同作用下宮頸癌細(xì)胞數(shù)量變化，因此該實驗的自變量是卡鉑試劑和DNA復(fù)制抑制劑的有無，因變量是宮頸癌細(xì)胞數(shù)量變化，藥劑濃度、Cl-和其他影響細(xì)胞代謝的因素為無關(guān)變?！驹斘觥緼、結(jié)合實驗設(shè)計可知，本實驗的自變量是卡鉑、DNA復(fù)制抑制劑的有無，A正確；B、卡鉑溶于水，溶液中的Cl-會促進(jìn)其分解，因此，癌癥患者注射的卡鉑試劑不能溶于生理鹽水，否則會影響效果，B錯誤；C、①組不會抑制DNA的復(fù)制，④組會抑制DNA的復(fù)制，所以預(yù)期實驗結(jié)果不相近，C錯誤；D、培養(yǎng)液中的宮頸癌細(xì)胞具有無限增殖的特征，不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，D錯誤。故選A。7.以洋蔥為實驗材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定實驗，以下敘述正確的是（）A.實驗必須在無菌條件下進(jìn)行B.DNA可溶于冷酒精溶液C.DNA在2mol/L的NaCl溶液中析出D.DNA經(jīng)沸水浴與二苯胺反應(yīng)后呈現(xiàn)藍(lán)色〖答案〗D【詳析】A、細(xì)胞生物中都含有DNA，DNA的粗提取不需要在無菌條件下進(jìn)行，A錯誤；B、DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精，B錯誤；C、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，能溶于2mol/L的NaCl溶液，故DNA不能在2mol/L的NaCl溶液中析出，C錯誤；D、在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色，D正確。故選D。8.限制酶A與限制酶B識別的序列分別為：—CATG↓—和—G↓GATCC—（箭頭表示切割位點）。下列敘述正確的是（）A.用限制酶切割DNA，被水解的磷酸二酯鍵有1個B.微生物中的限制酶可破壞入侵的RNA病毒核酸C.限制酶A、B切割DNA產(chǎn)生的末端之間不能連接D.DNA連接酶催化黏性末端間形成氫鍵〖答案〗C〖祥解〗限制酶：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來；（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、DNA是雙鏈，限制酶能識別DNA分子特定序列并在特定位點切割，用限制酶切割DNA，被水解的磷酸二酯鍵有2個，A錯誤；B、微生物中的限制酶可破壞入侵的DNA病毒核酸，B錯誤；C、限制酶A、B切割DNA產(chǎn)生的末端不同，不能連接，C正確；D、DNA連接酶催化黏性末端間形成磷酸二酯鍵，D錯誤。故選C。9.在重組DNA技術(shù)中，將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞，通常是利用質(zhì)粒作為載體。下列關(guān)于質(zhì)粒的說法錯誤的是（）A.質(zhì)粒是獨立于真核細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外的雙鏈DNA分子B.質(zhì)粒上必須具有一個至多個限制酶位點，否則無法自我復(fù)制C.有的質(zhì)?？梢哉系绞荏wDNA中，隨受體DNA同步復(fù)制D.質(zhì)粒上常有特殊的標(biāo)記基因，便于重組DNA的篩選〖答案〗B〖祥解〗作為運載體必須具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存；②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入；③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇；④是安全的，對受體細(xì)胞無害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來?！驹斘觥緼、質(zhì)粒是獨立于真核細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外的雙鏈DNA分子，天然的質(zhì)粒不能直接作為載體，基因工程中用到的質(zhì)粒都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過人工改造的，A正確；B、質(zhì)粒一般有一至多個限制酶的切割位點，以便于目的基因插入，B錯誤；C、有的質(zhì)?？梢哉系绞荏wDNA中，隨受體DNA同步復(fù)制，正因為如此質(zhì)?？梢宰鳛槟康幕虻倪\載工具，便于目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定保存，C正確；D、載體上需要具有某些標(biāo)記基因，以便于重組DNA分子的篩選，常見的標(biāo)記基因有抗生素抗性基因等，D正確。故選B。10.抗蟲作物對害蟲的生存產(chǎn)生壓力，會使害蟲種群抗性基因頻率迅速提高，導(dǎo)致作物的抗蟲效果逐漸減弱。為使轉(zhuǎn)基因抗蟲棉保持抗蟲效果，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上會采取一系列措施。以下措施不能實現(xiàn)上述目標(biāo)的是（）A.在轉(zhuǎn)基因抗蟲棉種子中混入少量常規(guī)種子B.制備抗蟲棉時將兩種抗蟲基因?qū)朊藁ㄖ蠧.轉(zhuǎn)基因抗蟲棉與小面積的常規(guī)棉間隔種植D.單獨種植抗蟲棉，并擴大抗蟲棉種植面積〖答案〗D〖祥解〗轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響），對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食?！驹斘觥緼、在轉(zhuǎn)基因抗蟲棉種子中混入少量常規(guī)種子，則常規(guī)種子長成的普通植株能敏感性（不抗蟲）個體提供生存空間，增加與抗蟲個體的競爭，避免抗性基因頻率升高過快，提高了抗蟲棉的抗蟲持久性，A不符合題意；B、制備抗蟲棉時將兩種抗蟲基因?qū)朊藁ㄖ?，則兩種抗蟲基因相互作用，能在一定程度上減緩害蟲種群抗性基因頻率迅速提高的趨勢，B不符合題意；C、將轉(zhuǎn)基因抗蟲棉與小面積的常規(guī)棉間隔種植可以使敏感型個體存活，敏感性個體能與抗性強的棉鈴蟲進(jìn)行競爭，不會導(dǎo)致抗性基因頻率升高過快，提高了抗蟲棉的抗蟲持久性，C不符合題意；D、單獨種植抗蟲棉，并擴大抗蟲棉種植面積會進(jìn)一步選擇并保存抗性強的個體，導(dǎo)致敏感性個體死亡，從而加快害蟲種群抗性基因頻率提高，不利于抗蟲棉的抗蟲持久性，D符合題意。故選D。11.我國科研人員將寒帶地區(qū)海魚中的抗凍基因轉(zhuǎn)入千禧果（番茄品種）細(xì)胞中，成功培育出抗凍千禧果。下圖為培育過程使用的Ti質(zhì)粒示意圖，Vir區(qū)的基因活化能促進(jìn)T-DNA的加工和轉(zhuǎn)移。下列敘述錯誤的是（）A.選擇圖示Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，應(yīng)選擇限制酶ⅢB.利用PCR從海魚基因組中擴增抗凍基因需要添加一對特異性引物C.用含卡那霉素的選擇培養(yǎng)基篩選成功導(dǎo)入抗凍基因的受體細(xì)胞D.可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測抗凍基因在轉(zhuǎn)基因千禧果中的表達(dá)量〖答案〗C〖祥解〗PCR原理：利用熱變性的原理，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈。【詳析】A、限制酶Ⅰ會破壞四環(huán)素抗性基因影響后續(xù)的篩選，限制酶Ⅱ有兩個識別位點，會影響目的基因連接在正確的位置，因此選擇圖示Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，應(yīng)選擇限制酶Ⅲ，A正確；B、利用PCR從海魚基因組中擴增抗凍基因需要添加一對特異性引物，目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸，B正確；C、由于四環(huán)素基因在T-DNA片段中，該基因會隨著目的基因進(jìn)入到受體細(xì)胞中，因此，要用含四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基篩選含抗凍基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，C錯誤；D、基因的表達(dá)產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，故可用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測抗凍基因在轉(zhuǎn)基因千禧果中的表達(dá)量，D正確。故選C。12.美國科學(xué)家將螢火蟲的熒光素基因轉(zhuǎn)入煙草植物細(xì)胞，獲得高水平的表達(dá)，長成的植物通體光亮，堪稱自然界的奇跡。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.基因工程的三大工具是限制性內(nèi)切核酸酶、DNA聚合酶、運載體B.基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等C.熒光素基因?qū)霟煵葜参锛?xì)胞時可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D.該項成果說明螢火蟲與煙草植物共用一套密碼子，體現(xiàn)了生物具有共同的起源〖答案〗A〖祥解〗構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的關(guān)鍵步驟，基因工程中，一個完整的表達(dá)載體包含復(fù)制原點、啟動子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因。啟動子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始。終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束。標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選。【詳析】A、基因工程的原理是基因重組，基因工程需要用到限制酶、DNA連接酶和運載體等工具，A錯誤；B、基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，一個完整的表達(dá)載體包含復(fù)制原點、啟動子及目的基因、終止子和標(biāo)記基因，B正確；C、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法，故熒光素基因?qū)霟煵葜参锛?xì)胞時可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，C正確；D、將螢火蟲的熒光素基因轉(zhuǎn)入煙草植物細(xì)胞，獲得高水平的表達(dá)，說明螢火蟲與煙草植物共用一套密碼子，體現(xiàn)了生物具有共同的起源，D正確。故選A。13.草甘膦殺死雜草的同時也能殺死農(nóng)作物。草甘膦可與植物體內(nèi)的PEP競爭EPSP合酶，阻止PEP轉(zhuǎn)化，影響細(xì)胞正常代謝?？茖W(xué)家通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了抗草甘膦的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物。下列說法錯誤的是（）A.可通過轉(zhuǎn)入外源EPSP基因以提高EPSP合酶的相對含量來起作用B.PCR擴增基因時每一輪循環(huán)中均需經(jīng)歷兩次升溫處理C.基因表達(dá)載體中的終止子位于目的基因下游，是翻譯停止的信號D.將外源基因?qū)朕r(nóng)作物的葉綠體基因組中可避免基因向近緣雜草擴散〖答案〗C〖祥解〗題意分析，草甘膦是一種非選擇性除草劑，殺死雜草的同時也殺死農(nóng)作物。它與植物體內(nèi)的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）結(jié)構(gòu)相似，可與PEP競爭結(jié)合EPSP合酶，阻止PEP轉(zhuǎn)化，影響植物細(xì)胞正常代謝。【詳析】A、外源EPSP基因可以指導(dǎo)EPSP合酶的合成，所以可通過轉(zhuǎn)入外源EPSP基因以提高EPSP合酶的相對含量來起作用，A正確；B、體外擴增GR79基因時每一輪循環(huán)包括高溫變性、低溫復(fù)性和中溫延伸過程，可見每一個循環(huán)中均需經(jīng)歷兩次目的不同的升溫處理，B正確；C、基因表達(dá)載體中的終止子是轉(zhuǎn)錄停止的信號，C錯誤；D、將外源基因?qū)朕r(nóng)作物的葉綠體基因組中可有效避免GR79基因向近緣雜草擴散，這是因為擴散是通過花粉傳播，而花粉的精子中幾乎不攜帶質(zhì)基因，D正確。故選C。14.我國科學(xué)家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，利用富集培養(yǎng)基獲得含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，經(jīng)純培養(yǎng)后進(jìn)一步研究了其生物學(xué)特性，結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是（）A.制備富集培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法，滅菌后調(diào)整培養(yǎng)基pHB.對擬桿菌的純培養(yǎng)物采用平板劃線法可獲得如圖的實驗結(jié)果C.據(jù)圖分析，擬桿菌菌株在以纖維素為氮源時生長狀況最好D.分離獲得的擬桿菌所分泌的酶可能具有耐低溫、耐鹽的特性〖答案〗D【詳析】A、為實現(xiàn)無菌操作，制備富集培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法，配制培養(yǎng)基時應(yīng)先調(diào)pH再滅菌，防止調(diào)pH時造成雜菌污染，A錯誤；B、平板劃線法可分離菌種但不能用于計數(shù)，圖示接種方法能夠?qū)ξ⑸镞M(jìn)行計數(shù)，屬于稀釋涂布平板法，B錯誤；C、分析圖中曲線可知，在以纖維素為碳源的培養(yǎng)基中，細(xì)胞數(shù)量最多，可推知擬桿菌新菌株在以纖維素為碳源（纖維素的元素組成是CHO，不能作為氮源）時生長狀況最好，C錯誤；D、深海冷泉中存在的某些微生物，只有利用冷泉中的特有物質(zhì)才能生存，或者只能在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活，故在沉積物樣品中分離獲得的擬桿菌所分泌的酶可能具有耐低溫、耐鹽的特性，D正確。故選D。15.CRISPR/Cas9基因組編輯系統(tǒng)由向?qū)NA識別并結(jié)合目標(biāo)DNA，Cas9蛋白切斷雙鏈DNA使其形成兩個末端，如圖所示。這兩個末端通過“斷裂修復(fù)”重新連接時，在細(xì)胞中加入大量用于修復(fù)的模板，可以將需要改變的堿基序列引入到基因組中，但該技術(shù)有時也存在編輯出錯而造成脫靶。下列敘述正確的是（）A.Cas9蛋白能作用于脫氧核糖和堿基之間的化學(xué)鍵B.對不同目標(biāo)DNA進(jìn)行編輯時，要使用不同的Cas9蛋白C.若只替換基因的一個堿基對，基因表達(dá)產(chǎn)物最多改變一個氨基酸D.若目標(biāo)DNA存在多個與向?qū)NA互補配對的序列，可能導(dǎo)致基因編輯脫靶〖答案〗D〖祥解〗題意分析，CRISPR-Cas9體系是由靶基因的向?qū)NA和Cas9蛋白構(gòu)成的復(fù)合體。向?qū)NA在基因組中負(fù)責(zé)尋找靶基因并與其結(jié)合；Cas9蛋白在向?qū)NA的引導(dǎo)下切割靶基因，使DNA雙鏈斷裂產(chǎn)生平末端。在隨后DNA自我修復(fù)的過程中容易隨機引起一些堿基對的插入或缺失，導(dǎo)致基因功能改變?！驹斘觥緼、Cas9蛋白識別并切斷雙鏈DNA形成兩個末端，相當(dāng)于限制酶，能作用于脫氧核糖和磷酸之間的化學(xué)鍵--磷酸二酯鍵，A錯誤；B、在對不同目標(biāo)DNA進(jìn)行編輯時，應(yīng)使用Cas9蛋白和不同的sgRNA結(jié)合進(jìn)而實現(xiàn)對不同基因的編輯，B錯誤；C、若只替換基因的一個堿基對，一般情況下基因表達(dá)產(chǎn)物只改變一個氨基酸，也可能堿基的替換引起終止密碼提前出現(xiàn)，則會導(dǎo)致蛋白質(zhì)中更多的氨基酸缺失，C錯誤；D、若目標(biāo)DNA存在多個與向?qū)NA互補配對的序列，可能導(dǎo)致基因編輯脫靶，且能夠與向?qū)NA配對的序列越多，脫靶的幾率越高，D正確。故選D。16.中國科學(xué)院團隊對雌性獼猴進(jìn)行克隆，成功獲得“中中”和“華華”兩姐妹，突破了現(xiàn)有技術(shù)無法用體細(xì)胞克隆非人靈長類動物的世界難題。如圖為“中中”和“華華”培育的流程，相關(guān)敘述錯誤的是（）A.圖中的卵子實際上是發(fā)育到MⅡ期的卵母細(xì)胞B.②過程是動物胚胎的體外培養(yǎng)過程，需無菌、無毒環(huán)境C.③過程的胚胎受體需要用促性腺激素超數(shù)排卵處理D.中中、華華的性別由纖維細(xì)胞的遺傳物質(zhì)決定〖答案〗C〖祥解〗題圖分析：圖示為“中中”和“華華”培育的流程，其中①為核移植過程，②表示早期胚胎培養(yǎng)過程，③表示胚胎移植過程?！驹斘觥緼、圖中的卵子實際上是發(fā)育到MⅡ期的卵母細(xì)胞，因為去核的卵細(xì)胞內(nèi)存在激活細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì)，A正確；B、②過程是動物胚胎的早期培養(yǎng)過程，需無菌、無毒環(huán)境，B正確；C、③過程的胚胎受體需要用雌激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，使其處于相同的生理狀態(tài)，C錯誤；D、中中、華華的細(xì)胞核基因來自成纖維細(xì)胞，因此它們的性別由纖維細(xì)胞的遺傳物質(zhì)決定，D正確。故選C。第Ⅱ卷（非選擇題）二、非選擇題（6大題，共60分）17.魚茶味酸而微咸，甘香可口，是海南黎族的一種傳統(tǒng)發(fā)酵食品。其制作方法是：將生魚開膛洗凈，去頭去尾，加鹽、姜、蒜等處理后，拌入煮熟的米飯，在特定條件下發(fā)酵一段時間。已知魚茶的發(fā)酵菌群主要是乳酸菌?；卮鹣铝杏嘘P(guān)問題：（1）寫出乳酸菌分解葡萄糖產(chǎn)生乳酸的反應(yīng)簡式：__________________。根據(jù)乳酸菌的代謝特點，制作魚茶時發(fā)酵裝置的充氣口應(yīng)______（填“打開”或“關(guān)閉”）。（2）不能將煮熟的米飯立即與處理后的生魚混合并攪拌，原因是__________________。（3）圖1是某生物科研小組繪制的魚茶發(fā)酵過程中各菌種數(shù)量及發(fā)酵液pH的變化曲線。①魚茶發(fā)酵初期，發(fā)酵液pH下降與溶液中______（寫出兩種）等物質(zhì)增多有關(guān)。發(fā)酵3天后醋酸菌逐漸減少，原因是圖1中__________________等微生物進(jìn)行有氧呼吸消耗了發(fā)酵裝置中的氧氣。②用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌種數(shù)量時，發(fā)現(xiàn)其中1個平板的菌落分布如圖2所示。該平板不能用于計數(shù)，原因是________________________。與該平板相同稀釋倍數(shù)的其他平板未出現(xiàn)該現(xiàn)象，推測該平板接種時可能的操作失誤是____________。〖答案〗（1）①.②.關(guān)閉（2）溫度過高會殺死乳酸菌，造成發(fā)酵失?。?）①.乳酸、醋酸、二氧化碳②.醋酸菌、酵母菌③.部分菌落過于密集，菌落相互連接，無法準(zhǔn)確計數(shù)④.涂布不均勻〖祥解〗乳酸菌，代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑵咸烟茄趸癁槿樗帷！拘?詳析】乳酸菌在無氧條件下能將葡萄糖分解成乳酸，其反應(yīng)簡式為：C6H12O62C3H6O3（乳酸）+能量。乳酸菌是厭氧菌，制作魚茶時發(fā)酵裝置的充氣口應(yīng)關(guān)閉。【小問2詳析】高溫會殺死乳酸菌，造成發(fā)酵失敗，故不能將煮熟的米飯立即與處理后的生魚混合并攪拌，應(yīng)自然冷卻后再混勻裝入壇中?！拘?詳析】①魚茶發(fā)酵初期，發(fā)酵液pH下降，說明酸性物質(zhì)增多，這主要與發(fā)酵所產(chǎn)生的乳酸、醋酸、二氧化碳等物質(zhì)增多有關(guān)。發(fā)酵3天后醋酸菌逐漸減少，這主要與其生存所需要的氧氣含量有關(guān)，該時期醋酸菌、酵母菌等微生物進(jìn)行有氧呼吸消耗了發(fā)酵裝置中的氧氣。②圖2所示平板不能用于計數(shù)，這是由于部分菌落過于密集，菌落相互連接，無法準(zhǔn)確計數(shù)，而與該平板相同稀釋倍數(shù)的其他平板未出現(xiàn)該現(xiàn)象，據(jù)此可推知該平板接種時涂布不均勻，導(dǎo)致菌落分布不均勻。18.油菜是重要的經(jīng)濟作物，用黑芥和蕓薹為材料培育芥菜型油菜的方法如圖所示，不考慮發(fā)生其他變異。回答下列問題：注：A、B分別表示不同植物的一個染色體組，兩者的染色體數(shù)目分別為10、8。（1）方法1中F1體細(xì)胞的染色體數(shù)目為______，可通過物理方法______人工誘導(dǎo)______，得到芥菜型油菜。（2）由于黑芥和蕓薹間的生殖限制，方法1中產(chǎn)生的F1代幼苗數(shù)量有限。如果要提高育種效率，可用F1的葉片為材料培育芥菜型油菜，寫出實驗思路：__________________。（3）方法2應(yīng)用______技術(shù)，打破了黑芥與蕓薹之間的生殖隔離。步驟①需要用______處理以去除細(xì)胞壁，獲得的甲為______。（4）步驟②可通過______法（寫出一種），促進(jìn)甲、乙融合。該過程獲得雜種細(xì)胞的概率較低，因為步驟②的產(chǎn)物除雜種細(xì)胞外還可能有未融合的細(xì)胞、融合的具有相同核的細(xì)胞。可通過流式細(xì)胞儀對細(xì)胞中的染色體數(shù)量進(jìn)行檢測，從而篩選出雜種細(xì)胞，理由是______。〖答案〗（1）①.18②.低溫處理③.染色體加倍（2）用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，以F1葉片為外植體，脫分化形成愈傷組織，用秋水仙素處理（或者低溫誘導(dǎo)）愈傷組織，之后再分化形成植株，即有可能獲得芥菜型油菜（3）①.植物體細(xì)胞雜交②.纖維素酶、果膠酶③.黑芥原生質(zhì)體（4）①.電融合/離心/PEG融合/高Ca2+-高pH等②.未融合細(xì)胞中的染色體數(shù)量為20或者16，融合的具有相同核的細(xì)胞中染色體數(shù)量為40或者32，而雜種細(xì)胞的染色體數(shù)量為36，不同類型細(xì)胞的染色體數(shù)量存在差異〖祥解〗秋水仙素作用的機理：人工誘導(dǎo)多倍體的方法很多，如低溫處理，目前最常用且最有效的方法是用秋水仙素來處理萌發(fā)的種子或幼苗，當(dāng)秋水仙素作用于正在分裂的細(xì)胞時，能夠抑制紡錘體的形成，導(dǎo)致染色體不能移向細(xì)胞兩極，從而引起細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍，染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行有絲分裂，將來可能發(fā)育成多倍體植株?！拘?詳析】A、B分別表示不同植物的一個染色體組，兩者的染色體數(shù)目分別為10、8。因此，方法1中F1體細(xì)胞的染色體數(shù)目為18，可通過物理方法如低溫人工誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，得到芥菜型油菜，這是因為低溫條件下會抑制紡錘體的形成，因而會導(dǎo)致細(xì)胞中染色體數(shù)目加倍，進(jìn)而獲得芥菜型油菜，其中染色體數(shù)目為36?！拘?詳析】由于黑芥和蕓薹間的生殖限制，方法1中產(chǎn)生的F1代幼苗數(shù)量有限。如果要提高育種效率，可用F1的葉片為材料培育芥菜型油菜，該過程的原理是植物細(xì)胞的全能性，所用得勁激素是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。具體實驗思路為：以F1葉片為外植體，脫分化形成愈傷組織，用秋水仙素處理（或者低溫誘導(dǎo)）愈傷組織，之后再分化形成植株，即有可能獲得芥菜型油菜。【小問3詳析】方法2應(yīng)用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，該技術(shù)的原理是植物細(xì)胞的全能性和細(xì)胞膜的流動性，該方法打破了黑芥與蕓薹之間的生殖隔離。步驟①需要用纖維素酶、果膠酶處理以去除細(xì)胞壁，獲得的甲為黑芥原生質(zhì)體，乙為蕓薹體細(xì)胞原生質(zhì)體?！拘?詳析】步驟②可通過電融合/離心/PEG融合/高Ca2+-高pH等法促進(jìn)甲、乙融合獲得雜種細(xì)胞，雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁是融合成功的關(guān)鍵。該過程獲得雜種細(xì)胞的概率較低，因為步驟②的產(chǎn)物除雜種細(xì)胞外還可能有未融合的細(xì)胞、融合的具有相同核的細(xì)胞?？赏ㄟ^流式細(xì)胞儀對細(xì)胞中的染色體數(shù)量進(jìn)行檢測，從而篩選出雜種細(xì)胞，該方法的原理是利用不同融合細(xì)胞中染色體不同實現(xiàn)的，即未融合細(xì)胞中的染色體數(shù)量為20或者16，融合的具有相同核的細(xì)胞中染色體數(shù)量為40或者32，而雜種細(xì)胞的染色體數(shù)量為36，據(jù)此做出判斷。19.為降低人乳腺癌治療藥物的副作用，科研人員嘗試在單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)上，構(gòu)建抗體藥物偶聯(lián)物（ADC），過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）實驗時，向小鼠注射取自______的特定抗原，其目的是____________。（2）步驟①是指______，實現(xiàn)該過程依賴于細(xì)胞膜具有______的結(jié)構(gòu)特點。（3）經(jīng)過步驟②、③篩選得到的雜交瘤細(xì)胞具有的特點是__________________。（4）步驟④將獲得的a單克隆抗體和b治療乳腺癌的藥物這2部分，通過接頭結(jié)合在一起，形成____________，實現(xiàn)對乳腺癌的治療。與常規(guī)化療方法相比，該治療方法具有的明顯優(yōu)點是________________________?！即鸢浮剑?）①.人乳腺癌細(xì)胞②.獲得能產(chǎn)生特定（治療乳腺癌的/與乳腺癌細(xì)胞特異性結(jié)合的）抗體的B淋巴細(xì)胞（2）①.（動物）細(xì)胞的融合②.一定的流動性（3）能大量增殖，又能產(chǎn)生特定抗體（4）①