乳與乳制品金黃色葡萄球菌定性檢測(cè)petrifilm測(cè)試片法

團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《乳與乳制品金黃色葡萄球菌定性檢測(cè)Petrifilm測(cè)試片法》編制說明（征求意見稿）一、工作簡(jiǎn)況任務(wù)來源本文件由中國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫協(xié)會(huì)提出并歸口，中國(guó)海關(guān)科學(xué)技術(shù)研究中心作為本文件組織協(xié)調(diào)單位。根據(jù)中國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫協(xié)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)化工作委員會(huì)2022年第一批團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)制修訂計(jì)劃，由中國(guó)海關(guān)科學(xué)技術(shù)研究中心、內(nèi)蒙古伊利實(shí)業(yè)集團(tuán)股份有限公司、內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團(tuán)）股份有限公司、北京三元食品股份有限公司、河北三元食品有限公司、新希望乳業(yè)股份有限公司、紐勤生物科技（上海）有限公司等單位共同參與起草，計(jì)劃于2024年11底前完成該標(biāo)準(zhǔn)的制定工作。主要工作過程與工作計(jì)劃2024年3-4月：提出制定標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目，并進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)征求意見和論證工作；2024年5月：中國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫協(xié)會(huì)公布計(jì)劃項(xiàng)目；2024年6-8月：進(jìn)行前期調(diào)研、存在問題分析和相關(guān)資料收集整理等準(zhǔn)備工作，擬定了標(biāo)準(zhǔn)“編制說明”編寫大綱，并起草了“標(biāo)準(zhǔn)草案”；2024年8月：召開標(biāo)準(zhǔn)啟動(dòng)會(huì)，圍繞標(biāo)準(zhǔn)草案進(jìn)行討論2024年9月：按照啟動(dòng)會(huì)專家意見和建議修改標(biāo)準(zhǔn)草案，形成標(biāo)準(zhǔn)“征求意見稿”；2024年9-10月：公開征求意見，對(duì)征求到的意見進(jìn)行分類采納處理，形成“標(biāo)準(zhǔn)送審稿”；2024年10月：召開標(biāo)準(zhǔn)審定會(huì)，根據(jù)與會(huì)專家的意見，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)送審稿進(jìn)行修改完善，形成標(biāo)準(zhǔn)報(bào)批稿，將標(biāo)準(zhǔn)報(bào)批稿和標(biāo)準(zhǔn)說明一并上報(bào)中國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫協(xié)會(huì)審批；2024年11月：標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布。3、主要參加單位和工作組成員及其所做的工作等項(xiàng)目責(zé)任單位：紐勤生物科技（上海）有限公司。項(xiàng)目參與單位：中國(guó)海關(guān)科學(xué)技術(shù)研究中心、內(nèi)蒙古伊利實(shí)業(yè)集團(tuán)股份有限公司、內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團(tuán)）股份有限公司、北京三元食品股份有限公司、河北三元食品有限公司、新希望乳業(yè)股份有限公司、紐勤生物科技（上海）有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：趙曉娟、王易、李志君、孫英麗、逯剛、喻東威、張雙、楊宇、趙珊、孫煒、夏忠悅、宋艷梅、王航、于寶軍、張洪沂。二、標(biāo)準(zhǔn)編制原則和主要研究?jī)?nèi)容1、編制原則全國(guó)人大常委會(huì)在2017年11月4日審議通過新修訂的《標(biāo)準(zhǔn)化法》，該法第二條規(guī)定：“標(biāo)準(zhǔn)包括國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)和團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)、企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)?！睆姆缮线M(jìn)一步明確了團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)地位。我國(guó)現(xiàn)行的法規(guī)體系中，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)屬于政府標(biāo)準(zhǔn)，由政府主導(dǎo)制定；團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)和企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)屬于市場(chǎng)標(biāo)準(zhǔn)，由市場(chǎng)自主制定。政府標(biāo)準(zhǔn)與市場(chǎng)標(biāo)準(zhǔn)協(xié)同發(fā)展、協(xié)調(diào)配套。市場(chǎng)標(biāo)準(zhǔn)除了快速反應(yīng)市場(chǎng)需求外，其承載的一個(gè)重要功能就是創(chuàng)新。本標(biāo)準(zhǔn)立足國(guó)內(nèi)食品安全發(fā)展實(shí)際，在符合國(guó)家食品安全相關(guān)法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)要求的前提下，引入國(guó)際上最新的微生物檢測(cè)方法，完成本土吸收轉(zhuǎn)化后，制定出具有較大行業(yè)影響力的、規(guī)范嚴(yán)謹(jǐn)、可行性強(qiáng)的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法文件。同時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)制定工作還遵循“面向市場(chǎng)、服務(wù)產(chǎn)業(yè)、自主制定、適時(shí)推出”的原則，將標(biāo)準(zhǔn)制定、試驗(yàn)驗(yàn)證、應(yīng)用推廣相結(jié)合，統(tǒng)籌推進(jìn)。標(biāo)準(zhǔn)的編寫結(jié)構(gòu)和內(nèi)容編排等方面依據(jù)GB/T1.1《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則》、GB/T20000《標(biāo)準(zhǔn)化工作指南》等系列標(biāo)準(zhǔn)的要求，重點(diǎn)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)適用范圍、檢驗(yàn)步驟等關(guān)鍵要素進(jìn)行了明確，以突出標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)性、可靠性和合理性的特點(diǎn)。根據(jù)我國(guó)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB29921-2021預(yù)包裝食品中致病菌限量,對(duì)于巴氏殺菌乳、調(diào)制乳、發(fā)酵乳、加糖煉乳（甜煉乳）、調(diào)制加糖煉乳要求采用比較嚴(yán)格的二級(jí)采樣方案，金黃色葡萄球菌的限量為：n=5，c=2，m=0/25g（mL）。檢驗(yàn)方法按GB4789.10第一法金黃色葡萄球菌定性檢驗(yàn)執(zhí)行?；趪?guó)家標(biāo)準(zhǔn)的要求，本標(biāo)準(zhǔn)在制定的過程中，結(jié)合相關(guān)使用單位的生產(chǎn)現(xiàn)狀，綜合研究了金黃色葡萄球菌定性檢驗(yàn)的各類快速檢驗(yàn)方法，其中Petrifilm?測(cè)試片法以其良好的靈敏度、特異性、排他性等技術(shù)優(yōu)勢(shì)在各乳制品生產(chǎn)企業(yè)具有廣泛的應(yīng)用，可以幫助企業(yè)提高檢測(cè)效率、縮短檢測(cè)時(shí)間、加快產(chǎn)品放行，同時(shí)操作更為簡(jiǎn)便、更加節(jié)省空間，從而減少誤差和降低能耗。此外，Petrifilm測(cè)試片法作為國(guó)內(nèi)外廣泛應(yīng)用的檢驗(yàn)方法，已經(jīng)被AOAC定為官方方法，同時(shí)也納入了我國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，但是均為定量檢驗(yàn)方法。因此金黃色葡萄球菌Petrifilm測(cè)試片法定性檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的提出和制定，填補(bǔ)了方法空白，同時(shí)有利于協(xié)調(diào)統(tǒng)一該標(biāo)準(zhǔn)在技術(shù)上的先進(jìn)性、經(jīng)濟(jì)上的合理性以及應(yīng)用中的適用性。2、主要研究?jī)?nèi)容Petrifilm金黃色葡萄球菌測(cè)試系統(tǒng)由測(cè)試片和確認(rèn)片兩部分組成，是基于預(yù)制的選擇性培養(yǎng)基和陽性結(jié)果確認(rèn)技術(shù)對(duì)金黃色葡萄球菌進(jìn)行檢測(cè)，其檢測(cè)原理為：Petrifilm金黃色葡萄球菌測(cè)試片含改良Baird-Parker培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基配方具有一定的選擇性，可以抑制非目標(biāo)菌的生長(zhǎng)；同時(shí)測(cè)試片培養(yǎng)基配方含有特異性指示劑，金黃色葡萄球菌是唯一能將指示劑轉(zhuǎn)化成紫紅色色素的細(xì)菌，可區(qū)分目標(biāo)菌金黃色葡萄球菌和非目標(biāo)菌，當(dāng)樣品中背景菌較高時(shí)，測(cè)試片中的抑制成分不能完全抑制背景菌，可能會(huì)使菌落顯示非紫紅色（例如，菌落呈現(xiàn)黑色等），故需要用確認(rèn)反應(yīng)片進(jìn)行確認(rèn)。確認(rèn)反應(yīng)片含脫氧核糖核酸（DNA）和指示劑（甲苯胺藍(lán)，藍(lán)色染料），可以確認(rèn)非紫紅色菌落是否為金黃色葡萄球菌。金黃色葡萄球菌產(chǎn)生脫氧核糖核酸酶(DNase)，該酶會(huì)分解確認(rèn)反應(yīng)片中的DNA，分解的DNA與確認(rèn)反應(yīng)片中的藍(lán)色染料發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生粉紅色暈圈。金黃色葡萄球菌確認(rèn)反應(yīng)片是可選的步驟，當(dāng)出現(xiàn)紫紅色以外的其他顏色的菌落時(shí)，需使用確認(rèn)反應(yīng)片。本標(biāo)準(zhǔn)的研制根據(jù)GB4789.45-2023《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)微生物檢驗(yàn)方法驗(yàn)證通則》,以GB4789.10第一法作為參考方法，對(duì)Petrifilm金黃色葡萄球菌測(cè)試片法的包容性、排他行、方法靈敏度等方面進(jìn)行了研究。金黃色葡萄球菌定性檢測(cè)Petrifilm測(cè)試片法與GB4789.10第一法相比，在檢測(cè)時(shí)間上大約只需45h，而GB4789.10第一法最少需要77h左右。金黃色葡萄球菌定性檢測(cè)Petrifilm測(cè)試片法在檢測(cè)時(shí)間上可以縮短32h。兩種方法的檢測(cè)流程見圖1。兩種方法在其他方面的比較見表1。A.Petrifilm金黃色葡萄球菌測(cè)試片法檢測(cè)流程B.GB4789.10-2016第一法檢測(cè)流程圖1.兩種方法的檢測(cè)流程表1金黃色葡萄球菌定性檢測(cè)Petrifilm測(cè)試片法與GB4789.10-2016第一法的比較培養(yǎng)基和試劑種類工作量結(jié)果觀察G染色金黃色葡萄球菌定性檢測(cè)Petrifilm測(cè)試片2小簡(jiǎn)單不需要GB4789.10-2016第一法4大復(fù)雜需要根據(jù)GB29921-2021預(yù)包裝食品致病菌限量中對(duì)于金黃色葡萄球菌的規(guī)定，本標(biāo)準(zhǔn)的制定旨在協(xié)助乳制品企業(yè)建立金黃色葡萄球菌的快速定性檢測(cè)方法，因此本標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法適用于巴氏殺菌乳、調(diào)制乳、發(fā)酵乳、加糖煉乳（甜煉乳）、調(diào)制加糖煉乳等乳制品中金黃色葡萄球菌的快速、定性檢驗(yàn)。三、主要試驗(yàn)（或驗(yàn)證）情況根據(jù)《GB4789.45-2023食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)微生物檢驗(yàn)方法驗(yàn)證通則》對(duì)于“定性方法”的驗(yàn)證，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部驗(yàn)證指標(biāo)（參見GB4789.45-2023表1）包括：靈敏度、包容性和排他性共計(jì)3個(gè)指標(biāo)的驗(yàn)證，實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證（參見GB4789.45-2023表1）進(jìn)行方法靈敏度的驗(yàn)證。首先確定兩種檢驗(yàn)方法是“配對(duì)還是非配對(duì)分析”。依據(jù)GB4789.45-2023對(duì)“配對(duì)/非配對(duì)檢驗(yàn)”的解釋即“2種定性方法同時(shí)檢驗(yàn)?zāi)骋粯悠窌r(shí)，若第一步增菌方法相同，可使用該樣品的同一試樣進(jìn)行分析，該分析稱為‘配對(duì)分析’，若第一步增菌方法不同，則使用該樣品的不同試樣分別進(jìn)行分析，該分析稱為‘非配對(duì)分析’”。本研究的Petrifilm金黃色葡萄球菌測(cè)試片方法與GB4789.10-2016的第一法采用同一個(gè)“檢樣”，既使用同一個(gè)“25g（mL）”的樣品，用同一種增菌液即“7.5%氯化鈉肉湯”，從同一增菌液中取增菌液按照GB4789.10-2016的第一法接種BP（Baird-Parker）平板和血平板，Petrifilm金黃色葡萄球菌測(cè)試片方法接種Petrifilm金黃色葡萄球菌測(cè)試片。因此，本方法驗(yàn)證屬于“配對(duì)分析”。1.驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室的選擇選擇具CNAS和CMA資質(zhì)，菌株資源豐富，具有方法驗(yàn)證和制定標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)驗(yàn)的政府實(shí)驗(yàn)室或第三方實(shí)驗(yàn)室；驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)組建方法驗(yàn)證團(tuán)隊(duì)，驗(yàn)證團(tuán)隊(duì)?wèi)?yīng)由2-3名成員組成，其中一人為本研究的負(fù)責(zé)人。本次驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證選擇“中國(guó)海關(guān)科學(xué)技術(shù)研究中心食品安全研究所”簡(jiǎn)稱“食品安全所”。食品安全所具CNAS和CMA資質(zhì)，長(zhǎng)期從事微生物檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)工作，曾制定20余項(xiàng)“試劑盒”類檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，在海關(guān)系統(tǒng)具有非常大的影響力。實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證選擇具CNAS和CMA資質(zhì)的廣州海關(guān)技術(shù)中心、杭州海關(guān)技術(shù)中心和中檢科（北京）測(cè)試技術(shù)有限公司。驗(yàn)證依據(jù)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)微生物檢驗(yàn)方法驗(yàn)證通則》GB4789.45-2023。參比方法GB4789.10-2016的第一法驗(yàn)證參數(shù)4.1檢測(cè)靈敏度驗(yàn)證靈敏度研究是指參考方法或Petrifilm金黃色葡萄球菌測(cè)試片方法檢出目標(biāo)微生物的能力。4.1.1代表性食品的選擇：依據(jù)GB4789.45-2023的3.2條款，即“適用范圍少于5種食品種類，應(yīng)全部選擇。每種食品種類至少選擇1種食品子類”，本團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)適用于“乳及乳制品”，根據(jù)GB4789.45的“表A.1食品種類和食品子類”，選擇一個(gè)子類進(jìn)行方法驗(yàn)證。室內(nèi)驗(yàn)證選用“巴氏殺菌乳”樣品進(jìn)行方法驗(yàn)證。樣品由伊利集團(tuán)提供，為了驗(yàn)證的公平性掩蓋了樣品基本信息。4.1.2低水平陽性樣本的添加實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證檢測(cè)靈敏度：低水平菌體添加的量為：0.7CFU/mL，結(jié)果陽性率為60%；將1mL低濃度添加水平菌液添加到25mL巴氏殺菌乳樣品中，制備20個(gè)平行樣品；陰性對(duì)照取25mL巴氏殺菌乳樣品，加入1mL無菌生理鹽水，制備5個(gè)陰性平行樣品；陽性對(duì)照取25mL巴氏殺菌乳樣品，加入7CFU/mL濃度的陽性菌懸液1mL，制備5個(gè)陽性平行樣品；充分混勻。質(zhì)量控制：5個(gè)陰性樣品均為陰性、5個(gè)陽性樣品均為陽性，結(jié)果成立。檢測(cè)靈敏度結(jié)果見表2。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證圖片見圖2。表2低水平陽性添加的（檢測(cè)靈敏度）實(shí)驗(yàn)結(jié)果序號(hào)參比方法測(cè)試片方法備注1＋＋/2－－/3＋＋/4＋＋/5－－/6－－/7＋＋/8＋＋/9＋＋/10－－/11＋＋/12＋＋/13－－/14－－/15＋＋/16＋＋/17－－/18＋＋/19－－/20＋＋/陰性樣品1－－/陰性樣品2－－/陰性樣品3－－/陰性樣品4－－/陰性樣品5－－/陽性樣品1＋＋/陽性樣品2＋＋/陽性樣品3＋＋/陽性樣品4＋＋/陽性樣品5＋＋/注：+：表示陽性結(jié)果；-：表示陰性結(jié)果A實(shí)驗(yàn)過程B.GB4789.10第一法血平板結(jié)果C.GB4789.10第一法BP平板結(jié)果D.Petrifilm金黃色葡萄球菌測(cè)試片E.陰性和陽性對(duì)照?qǐng)D2.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證檢測(cè)靈敏度實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖方法靈敏度RLOD的計(jì)算（GB4789.45附錄B的公式B.2）：根據(jù)上述公式計(jì)算金黃色葡萄球菌Petrifilm測(cè)試片實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證相對(duì)方法檢出限（RLOD）為1，符合GB4789.45中4.1.2中對(duì)配對(duì)檢驗(yàn)檢測(cè)靈敏度的要求。實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證檢測(cè)靈敏度：低水平菌體添加的量為：0.7CFU/mL，結(jié)果陽性率為50-60%；將1mL低濃度添加水平菌液添加到25mL巴氏殺菌乳樣品中。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室制備8個(gè)陽性添加平行樣品；陽性樣品取25mL巴氏殺菌乳樣品，加入7CFU/mL濃度的陽性菌懸液1mL，制備2個(gè)陽性平行樣品；陰性樣品取25mL巴氏殺菌乳樣品，加入1mL無菌生理鹽水，制備2個(gè)陰性平行樣品。充分混勻。質(zhì)量控制：2個(gè)陰性樣品均為陰性、2個(gè)陽性樣品均為陽性，結(jié)果成立。匯總3家協(xié)同驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)于表3。實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證圖片見圖3、圖4。表3實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證結(jié)果數(shù)據(jù)匯總實(shí)驗(yàn)室序號(hào)參比方法結(jié)果測(cè)試片方法結(jié)果備注中檢科（北京）測(cè)試技術(shù)有限公司1＋＋/2＋＋/3＋＋/4--/5＋＋/6--/7＋＋/8--/陰性樣品1--/陰性樣品2--/陽性樣品1＋＋/陽性樣品2＋＋/杭州海關(guān)技術(shù)中心1＋＋/2＋＋/3＋＋/4＋＋/5--/6--/7＋＋/8＋＋/陰性樣品1--/陰性樣品2--/陽性樣品1＋＋/陽性樣品2＋＋/廣州海關(guān)技術(shù)中心1＋＋/2＋＋/3--/4＋＋/5--/6＋＋/7＋＋/8--/陰性樣品1--/陰性樣品2--/陽性樣品1＋＋/陽性樣品2＋＋/注：+：表示陽性結(jié)果；-：表示陰性結(jié)果A.Petrifilm金黃色葡萄球菌測(cè)試片B.BP平板結(jié)果C.血平板結(jié)果圖3.杭州海關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果A.Petrifilm金黃色葡萄球菌測(cè)試片B.血平板結(jié)果C.陽性對(duì)照?qǐng)D4.中檢科（北京）測(cè)試技術(shù)有限公司實(shí)驗(yàn)室間協(xié)同驗(yàn)證的RLOD值的計(jì)算：根據(jù)GB4789.45附錄B的公式B.2計(jì)算RLOD，實(shí)驗(yàn)室間協(xié)同驗(yàn)證的RLOD=1。4.1.3檢測(cè)靈敏度驗(yàn)證結(jié)論綜合實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證的RLOD為1，說明金黃色葡萄球菌Petrifilm測(cè)試片法定性檢驗(yàn)乳及乳制品中的金黃色葡萄球菌的檢測(cè)靈敏度與GB4789.10-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)》的第一法的檢測(cè)靈敏度相當(dāng)。根據(jù)GB4789.45-2023的“4.1.2驗(yàn)證要求”，針對(duì)配對(duì)分析，RLOD的可接受限為1.5，RLOD低于1.5是可以接受的。本次協(xié)同驗(yàn)證RLOD為1，符合GB4789.45-2023對(duì)檢測(cè)靈敏度的驗(yàn)證要求。包容性驗(yàn)證采用30株金黃色葡萄球菌分離株對(duì)金黃色葡萄球菌Petrifilm測(cè)試片進(jìn)行包容性驗(yàn)證。結(jié)果記錄于表4。30株金黃色葡萄球菌分離株，在金黃色葡萄球菌Petrifilm測(cè)試片上呈現(xiàn)典型的紫紅色菌落，結(jié)果均為陽性。表4包容性驗(yàn)證用金黃色葡萄球菌菌株列表和驗(yàn)證結(jié)果序號(hào)菌株編號(hào)來源驗(yàn)證結(jié)果1BJ-Sa-5金章牌大孔芝士碎＋2BJ-Sa-10安佳馬蘇里拉乳酪＋3BJ-Sa-12航食＋4BJ-Sa-13航食＋5BJ-Sa-14奶酪＋6BJ-Sa-15巨浪大切經(jīng)典原味薯片＋7BJ-Sa-16脫脂奶粉＋8BJ-Sa-17安佳車達(dá)乳酪（紅）10.9.8-11.9.8＋9BJ-Sa-18安佳車達(dá)乳酪（紅）10.10.6-11.10.6＋10BJ-Sa-19速凍熟玉米＋11BJ-Sa-22魚子醬＋12BJ-Sa-23冷凍薯格＋13BJ-Sa-33貝塞斯冰淇淋＋14BJ-Sa-47小小三鮮水餃＋15BJ-Sa-48紫玉板栗玉湯圓＋16BJ-Sa-49黑芝麻核桃湯圓＋17BJ-Sa-50玫瑰花湯圓＋18BJ-Sta-72保利微酸奶油-3＋19BJ-Sta-73九日牌炒年糕條（膨化食品）-2＋20BJ-Sta-74瘋丫頭爆米花-5＋21BJ-Sta-77旺旺仙貝（含油型膨化食品）-2＋22BJ-Sta-78吉利火星奶油味爆米花＋23BJ-Sta-79河北稻香村老面包＋24BJ-Sta-80張君雅小妹妹甜甜圈（巧克力味）力味）-4＋25BJ-Sta-81枕純牛奶-2＋26BJ-Sta-83冰鮮三文魚＋27BJ-Sta-84油炸小龍蝦3＋28BJ-Sta-89水解乳清蛋白粉H1412014＋29BJ-Sta-90凱瑞原味奶油奶酪樣品三＋30BJ-Sta-91萬通牌新西蘭凍蝦(G2)5＋注：+：表示陽性結(jié)果；-：表示陰性結(jié)果4.3排他性實(shí)驗(yàn)采用30株非金黃色葡萄球菌菌株，包括親緣關(guān)系近的菌株，例如表皮葡萄球菌，以及親緣關(guān)系遠(yuǎn)的菌株，例如植物乳桿菌等等對(duì)金黃色葡萄球菌Petrifilm測(cè)試片進(jìn)行排他性驗(yàn)證。結(jié)果記錄于表5。所測(cè)試的30株非金黃色葡萄球菌菌株，均呈現(xiàn)陰性反應(yīng)。表5排他性驗(yàn)證用菌株列表和驗(yàn)證結(jié)果序號(hào)菌株名稱菌株號(hào)驗(yàn)證結(jié)果1大腸埃希氏菌ATCC25922－2大腸桿菌O157:H7CICC21530－3腸炎沙門氏菌CMCC50041－4甲型副傷寒沙門氏菌CMCC50001－5阪崎腸桿菌ATCC29544－6肺炎克雷伯氏菌CGMCC1.1736－7副溶血性弧菌ATCC17802－8創(chuàng)傷弧菌ATCC27562－9福氏志賀氏菌CMCC51571－10宋氏志賀氏菌CMCC51334－11陰溝腸桿菌CGMCC1.57－12馬紅球菌ATCC6939－13表皮葡萄球菌ATCC12228－14糞鏈球菌ATCC32223－15糞腸球菌CICC25019－16單增李斯特氏菌ATCC13932－17英諾克李斯特ATCC33090－18威氏李斯特ATCC35897－19格氏李斯特ATCC700545－20銅綠假單胞菌ATCC15442－21施氏假單胞菌ATCC17588－22白色念珠菌ATCC10231－23藤黃微球菌CMCC(B)28001－24蠟樣芽孢桿菌ATCC11778－25產(chǎn)氣莢膜梭菌ATCC13124－26短小芽孢桿菌CMCC(B)63202－27植物乳桿菌ATCC8014－28洋蔥伯克霍爾德菌CICC10857－29嗜熱鏈球菌CICC20248－30德氏乳桿菌CICC6077－驗(yàn)證結(jié)論靈敏度、包容性和