實(shí)驗(yàn)：《現(xiàn)代化妝品科學(xué)與技術(shù)實(shí)驗(yàn)》學(xué)習(xí)通超星期末考試答案章節(jié)答案2024年

實(shí)驗(yàn)：《現(xiàn)代化妝品科學(xué)與技術(shù)實(shí)驗(yàn)》學(xué)習(xí)通超星期末考試章節(jié)答案2024年制備平板時(shí)，怎樣處理已經(jīng)凝固好的固體培養(yǎng)基？手持法倒平板的時(shí)候應(yīng)該怎樣操作？

答案:將三角瓶中已滅菌的培養(yǎng)基置于電爐上或微波爐中加熱使其熔化，加熱時(shí)必須不時(shí)搖動(dòng)三角瓶，以免受熱不均而引起爆裂。待培養(yǎng)基完全熔化后，置一旁冷卻至55-60℃。揭下瓶塞，右手持三角瓶于火焰旁邊，瓶口要保持對(duì)著火焰，左手拿將皿蓋打開，迅速倒入培養(yǎng)基，以液體剛好蓋滿平皿底部為宜（25ml左右的培養(yǎng)基制成的9cm平板厚度約4mm），合上皿蓋后，置于水平桌面上略加轉(zhuǎn)動(dòng)，等待其凝固。簡(jiǎn)述培養(yǎng)基制備的完整步驟（按工作順序）。

答案:天秤調(diào)節(jié)、稱量、溶化、調(diào)pH、分裝、加塞和標(biāo)記，滅菌如果菌種污染了，可以采用怎樣的方法純化它？怎樣知道你的純化成功了？

答案:菌種在分離、保藏和生產(chǎn)過程中，極易遭致雜菌污染，因此必須對(duì)染有雜菌的菌種進(jìn)行提純，方能用于生產(chǎn)。根據(jù)污染的類型和程度，需采用不同的純化措施。（1）排除細(xì)菌或酵母菌污染在菌種培養(yǎng)中，用肉眼仔細(xì)觀察培養(yǎng)基表面，不難發(fā)現(xiàn)被細(xì)菌或酵母菌污染的分離物常出現(xiàn)黏稠狀的菌落。取被純化物接種在無冷凝水、硬度較高（瓊脂用量2.3%～2.5%）的斜面上，再降低培養(yǎng)溫度至15～20℃，利用某些大型真菌在較低的溫度下，菌絲生長(zhǎng)速度比細(xì)菌蔓延速度快的特點(diǎn)，用尖細(xì)的接種針切割菌絲的前端，轉(zhuǎn)接到新的試管斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng)，連續(xù)2～3次就能獲得所要的純菌絲。也可打破試管，挑取內(nèi)部長(zhǎng)有基內(nèi)菌絲的瓊脂塊，移入無冷凝水的培養(yǎng)基上，該法適于被好氣性細(xì)菌污染的母種。（2）排除霉菌污染霉菌和細(xì)菌不同，它和食用菌菌絲很相似，也有氣生菌絲和基內(nèi)菌絲。分離的方法主要是抑制雜菌生長(zhǎng)，拉大食用菌菌絲生長(zhǎng)和雜菌菌絲生長(zhǎng)的范圍差，從食用菌菌落前端切割，移植入新培養(yǎng)基。雜菌發(fā)現(xiàn)越早，分離的成功率越大。嚴(yán)格地說，在斜面培養(yǎng)基上的非接種部位發(fā)現(xiàn)的白色菌絲，應(yīng)認(rèn)為是雜菌菌落，應(yīng)馬上提純。若有色孢子已出現(xiàn)，一方面易使分生孢子飄散，另一方面其基內(nèi)菌絲早已蔓延，可能和食用菌菌絲混生一起。如霉菌剛出現(xiàn)孢子且尚未成熟、變色，則可采用前端菌絲切割法提純。轉(zhuǎn)管時(shí)先將菌絲接種在斜面尖端，當(dāng)長(zhǎng)滿斜面后，及時(shí)將原接種點(diǎn)連同培養(yǎng)基一起挖掉；如霉菌菌落顏色已深，說明孢子已成熟，稍一振動(dòng)孢子就會(huì)飄滿培養(yǎng)基，若再行上法意義不大。如菌絲蔓延范圍較大，可將0.2%升汞溶液或1%多菌靈處理過的濕濾紙塊覆蓋在霉菌的菌落上，可抑制霉菌生長(zhǎng)，防止孢子擴(kuò)散，后用滅菌接種鏟將表層鏟掉，隨之用接種針鉤取基內(nèi)菌絲移入新的培養(yǎng)基，如此2～3次。（3）限制培養(yǎng)取直徑7～10毫米、高4～6毫米的玻璃環(huán)或不銹鋼環(huán)，經(jīng)酒精燈火焰灼燒后趁熱放到斜面培養(yǎng)基中央，將環(huán)的一半嵌入培養(yǎng)基內(nèi)，然后將染有細(xì)菌的接種塊放入環(huán)內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。細(xì)菌生長(zhǎng)會(huì)被限制在環(huán)內(nèi)，而食用菌菌絲則可越過環(huán)而長(zhǎng)到環(huán)外的培養(yǎng)基上，轉(zhuǎn)管后即可得到純化。（4）覆蓋培養(yǎng)在污染了細(xì)菌的食用菌菌絲斜面上傾注一層厚約2毫米的培養(yǎng)基，培養(yǎng)一段時(shí)間，當(dāng)食用菌菌絲透過培養(yǎng)基形成新的菌落時(shí)，即可切割轉(zhuǎn)管。最好進(jìn)行二次覆蓋。（5）基質(zhì)菌絲純化培養(yǎng)對(duì)棉塞長(zhǎng)有霉菌的試管斜面，可將試管打碎，取出培養(yǎng)基，用0.1%升汞浸泡2分鐘，用無菌水淋洗，再用無菌濾紙吸干。取一段2厘米的培養(yǎng)基從中部切開，在斷面上用無菌刀片切成米粒大小的塊，移入新的斜面上進(jìn)行培養(yǎng)。（6）藥物處理菌種提純時(shí)，可向培養(yǎng)基中注入選擇性強(qiáng)的抗菌制劑，如加入5～10毫克/升的多菌靈（MBC）、涕必靈（TBZ）或托布津等，可有效地防止菌霉混生；在每毫升培養(yǎng)基中加入30～40毫克鏈霉素、20～30毫克四環(huán)素、金霉素，或50毫克高錳酸鉀，可以有效地防止細(xì)菌混生；加入灰黃霉素（20單位/毫升），可抑制真菌生長(zhǎng)。（7）破碎菌絲從試管中取出已污染的培養(yǎng)基，放在0.1%升汞水中處理2分鐘，用無菌水沖洗，無菌紙吸干，再放入有玻璃珠的無菌水內(nèi)，經(jīng)組織破碎，稀釋后注入平板培養(yǎng)，取其單個(gè)菌落純化培養(yǎng)。為什么微生物在液體振蕩條件下比平板培養(yǎng)基生長(zhǎng)快？

答案:液體培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分多，傳質(zhì)效率高。接種環(huán)(針)接種前后灼燒的目的是什么?為什么在接種前一定要將其冷卻?如何判斷接種環(huán)火焰灼燒后已冷卻可用于接種?

答案:接種前灼燒的目的是為了徹底的殺滅環(huán)上得細(xì)菌、芽孢等，可能引起污染的一切生物體。接種后再灼燒是防止菌種飄出,污染接種室或者超凈臺(tái),影響整體接種環(huán)境,也是降低污染率的一種措施。接種的時(shí)候一定要冷卻，因?yàn)椴焕鋮s的話，你接的目標(biāo)菌可能就直接殺死了（被熱的環(huán)燙死），如何判斷已經(jīng)冷卻了：一般是用接種環(huán)在玻璃平皿上劃線，培養(yǎng)基不融化為冷卻好，一般為1~3min。平板培養(yǎng)微生物為什么要倒置？

答案:主要原因：皿蓋向上培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基蒸發(fā)的水分會(huì)凝結(jié)在皿蓋上，并可能掉落到培養(yǎng)基表面，影響培養(yǎng)結(jié)果。而培養(yǎng)皿倒置，水分蒸發(fā)會(huì)在培養(yǎng)基表面均勻凝結(jié)，并且蒸發(fā)與凝結(jié)會(huì)形成平衡，不會(huì)影響培養(yǎng)結(jié)果。其次是倒置不會(huì)在拿起時(shí)只拿起皿蓋。而正置時(shí)拿培養(yǎng)皿，可以只把皿蓋拿起來，讓培養(yǎng)基暴露在空氣中。高壓蒸汽滅菌后，取出試管培養(yǎng)基擺制斜面，待凝固后，則可以使用。

答案:錯(cuò)高壓蒸汽滅菌時(shí)一般要求120℃滅菌20min，這里的計(jì)時(shí)是從蓋上滅菌鍋的蓋子開始計(jì)時(shí)20min。

答案:錯(cuò)在配制培養(yǎng)基過程中，調(diào)節(jié)pH時(shí)，如果調(diào)過頭，就可以用另一種溶解調(diào)回來就可以。

答案:錯(cuò)瓊脂在培養(yǎng)基制備過程中主要起到凝固的作用，也是制備固體培養(yǎng)基必須要的原料之一。

答案:對(duì)一般固體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物的速度大于液體培養(yǎng)基的生長(zhǎng)速度，因?yàn)?，固體培養(yǎng)基不流動(dòng)，有利于微生物的生長(zhǎng)。

答案:錯(cuò)液體培養(yǎng)轉(zhuǎn)接液體培養(yǎng)中，轉(zhuǎn)接菌群可以用接種環(huán)挑取一些加入待接種的培養(yǎng)液來完成。（）

答案:錯(cuò)連續(xù)劃線培養(yǎng)中的劃線是隨意在培養(yǎng)皿上輕輕劃線就可。（）

答案:錯(cuò)固體培養(yǎng)皿在接種時(shí)打開皿蓋的方向是向左的。（）

答案:錯(cuò)金屬接種環(huán)需要用前、用后都火焰灼燒滅菌，可多次使用。

答案:對(duì)一次性塑料無菌接種環(huán)科直接使用，僅能使用一次。

答案:對(duì)在接種操作時(shí)，一般是左手持接種環(huán)，右手持培養(yǎng)平皿或者其他被接種的器皿。

答案:錯(cuò)分區(qū)劃線只挑取一次微生物（

）

答案:對(duì)干熱滅菌法是指在干燥環(huán)境（如火焰或干熱空氣）進(jìn)行滅菌的技術(shù)。一般有（

）和（

）。

答案:火焰滅菌法;干熱空氣滅菌法待滅菌后的試管培養(yǎng)基冷至（

）左右(以防斜面上冷凝水太多)，將試管口端擱在玻棒或其他合適高度的器具上，擱置的斜面長(zhǎng)度以不超過試管總長(zhǎng)的（

）為宜。

答案:60℃;一半利用分裝器將配制好的培養(yǎng)基分裝入試管內(nèi)。以其高度的（

）左右為宜。以量筒或燒杯向錐形瓶分裝培養(yǎng)基，以其高度的（

）左右為宜。

答案:1/4;1/4--1/3在配制培養(yǎng)基時(shí)，在未調(diào)pH前，先測(cè)量培養(yǎng)基的原始pH，如果偏酸，用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入（

），邊加邊攪拌，并隨時(shí)用pH試紙測(cè)其pH，直至pH達(dá)本實(shí)驗(yàn)所需；反之，用（

）進(jìn)行調(diào)節(jié)。

答案:1mol/LNaOH;1mol/LHCl瓊脂的特點(diǎn)是（

）℃融化，（）℃凝固，一般加入的量是液體培養(yǎng)基的（）。

答案:95;40;1%-2%培養(yǎng)基的成分包括（

）、（

）、（

）、（

）、（

）、（

）。

答案:水分;碳源;氮源;能源;無機(jī)鹽;生長(zhǎng)因素液體培養(yǎng)基一般使用（

）培養(yǎng)。一般細(xì)菌需要的振蕩速度為（

）r/min，放線菌需要的振蕩速度為（

）r/min。

答案:搖床振蕩;200-300;130-180各種微生物培養(yǎng)條件如下：放線菌在（

）℃培養(yǎng)（

）天；霉菌在（

）℃培養(yǎng)（

）天；酵母菌在（

）℃培養(yǎng)（

）天；細(xì)菌在（

）℃培養(yǎng)（

）即可。

答案:25-28;5-7;25-28;3-5;28-30;1-2;37;過夜從平板向斜面接種培養(yǎng)中，鋸齒形劃線培養(yǎng)適應(yīng)于（

），直線形劃線培養(yǎng)適應(yīng)于（

）。（與視屏資料相同描述）

答案:用于微生物菌種繁殖保存;用于微生物生長(zhǎng)形態(tài)觀察劃線插片培養(yǎng)中蓋玻片的插入角度是（

），（

）劃線方向，每個(gè)9cm培養(yǎng)皿中載玻片數(shù)量是（

）片。

答案:45°;垂直;5-10平板劃線一般使用（）和（）兩種劃線方法。

答案:連續(xù)劃線;分區(qū)劃線/star3/origin/38ed22f9d39f6283c687571585ff7116.png

答案:提供碳源、氮源、生長(zhǎng)因子;瓊脂(或凝固劑;所培養(yǎng)微生物對(duì)各營(yíng)養(yǎng)成分的需要量;調(diào)pH;高壓蒸汽滅菌、灼燒接種環(huán)、酒精棉球擦手、棉塞塞試管口、在火焰旁接種;擴(kuò)大接種面積培養(yǎng)基分裝完畢后，在試管口或三角燒瓶口上塞住，以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)而造成污染，并保證有良好的通氣性能?？勺鳛槿拥氖牵?/p>

）

答案:硅膠塞;

雙層鋁箔紙;8層紗布或棉塞等，外面需要包防潮紙牛肉膏或者酵母粉能為微生物培養(yǎng)提供（

）

答案:碳源;能源;維生素;磷酸鹽熒光顯微鏡保護(hù)眼睛不被紫外線損傷的裝置是（）

答案:B.紫外線防護(hù)板在干熱狀態(tài)下，由于熱穿透力較差，微生物的耐熱性較強(qiáng)，必須長(zhǎng)時(shí)間受高溫的作用才能達(dá)到滅菌的目的。因此，干熱空氣滅菌法采用的溫度一般比濕熱滅菌法高。為了保證滅菌效果，選用了180-200oC滅菌，滅菌時(shí)間為（

）。

答案:1-2h下列哪種材料不適于火焰滅菌法。（

）

答案:培養(yǎng)基LB培養(yǎng)基的配制中,瓊脂可以在什么時(shí)候加入?

答案:營(yíng)養(yǎng)成分溶解后,調(diào)節(jié)pH,按照分裝的量稱取相應(yīng)瓊脂粉，加入瓊脂后煮沸后分裝超凈工作臺(tái)正確使用的步驟是（）

答案:開紫外燈30min，然后關(guān)紫外燈，開照明燈，開風(fēng)機(jī)，拉起擋風(fēng)板至適當(dāng)高度3-5min，才可開始使用。接種前無菌操作的準(zhǔn)備步