第六章中藥新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

第六章中藥新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究第一節(jié)中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定要求第二節(jié)中藥新制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定第三節(jié)舉例第一節(jié)中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定要求名稱(chēng)、漢語(yǔ)拼音、藥材拉丁名來(lái)源性狀鑒別檢查浸出物測(cè)定含量測(cè)定加工炮制功能與主治、用量與用法、禁忌注意及貯藏等第二節(jié)中藥新制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定一、藥品標(biāo)準(zhǔn)的定義與要求二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的分類(lèi)三、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的特性四、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定的前提五、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)原則與研究程序六、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容七、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草說(shuō)明八、舉例一、藥品標(biāo)準(zhǔn)的定義與要求在《藥品標(biāo)準(zhǔn)工作管理辦法》總則中規(guī)定：1、藥品標(biāo)準(zhǔn)是國(guó)家對(duì)藥品質(zhì)量及檢驗(yàn)方法所作的技術(shù)規(guī)定，是藥品生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)、使用、檢驗(yàn)和監(jiān)督管理部門(mén)共同遵循的法定依據(jù)。2、制定藥品標(biāo)準(zhǔn)必須堅(jiān)持質(zhì)量第一，充分體現(xiàn)“安全有效，技術(shù)先進(jìn)，經(jīng)濟(jì)合理”的原則，擇優(yōu)發(fā)展的作用。3、凡正式生產(chǎn)的藥品、輔料和基質(zhì)都要制定標(biāo)準(zhǔn)。二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的分類(lèi)1、法定標(biāo)準(zhǔn)2、企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)1、法定標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)過(guò)國(guó)家藥監(jiān)局批準(zhǔn)的藥典、局頒標(biāo)準(zhǔn)。法定標(biāo)準(zhǔn)對(duì)產(chǎn)品的質(zhì)量指標(biāo)僅是一些基本要求，是企業(yè)應(yīng)達(dá)到的起碼合格要求。新藥被批準(zhǔn)后其生產(chǎn)用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)再經(jīng)過(guò)二年試行期即轉(zhuǎn)為局（部）頒標(biāo)準(zhǔn)。2、企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)分兩種一為檢驗(yàn)方法尚不夠成熟，但能達(dá)到某種程度的質(zhì)量控制。一為高于法定標(biāo)準(zhǔn)要求，主要指多增加了檢驗(yàn)項(xiàng)目或提高了限度標(biāo)準(zhǔn)，作為創(chuàng)優(yōu)，企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)，特別是對(duì)保護(hù)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品本身，嚴(yán)防假冒等的重要措施。三、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的特性藥品應(yīng)具有哪些性質(zhì)？安全性、有效性、穩(wěn)定性、可控性質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)在保證藥品的上述性質(zhì)的同時(shí)，本身應(yīng)具有：權(quán)威性科學(xué)性進(jìn)展性進(jìn)展性實(shí)例血竭的質(zhì)量評(píng)價(jià)根據(jù)血竭在270nm處有最大吸收，制訂其一定濃度在270nm吸收度不少于一定值。問(wèn)題：貨源不穩(wěn)定，牌號(hào)多，質(zhì)量差異大；摻入色素更難以判定其質(zhì)量改用TLC、HPLC法，效果滿意。四、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定的前提處方組成固定原料穩(wěn)定對(duì)貴重藥材及常用緊缺藥材，要加強(qiáng)真?zhèn)蔚臋z驗(yàn)，最好備有標(biāo)準(zhǔn)藥材對(duì)照品。地區(qū)習(xí)慣用藥應(yīng)注意區(qū)分，確保藥材品種來(lái)源正確。制備工藝穩(wěn)定穿心蓮提取工藝與含量的關(guān)系五、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)原則（一）同步進(jìn)行原則（二）樣品要有代表性（三）對(duì)照原則（四）重復(fù)性原則（一）同步進(jìn)行原則質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的各項(xiàng)試驗(yàn)，應(yīng)在處方確定后與制劑工藝研究同步進(jìn)行；制劑原料研究與質(zhì)量控制同步；制備工藝研究與質(zhì)量控制同步。（二）樣品要有代表性原料的代表性品種的影響（野葛2.4%；甘葛藤0.3%）產(chǎn)地（梔子海南5.5%；貴州4.7%；四川3.5%）藥材部位、采收季節(jié)等其他方面質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)所制訂的指標(biāo)應(yīng)具有代表性所選擇的制劑質(zhì)量指標(biāo)、項(xiàng)目、限量皆與功能主治相符。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)具有可控性質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)所采用的對(duì)照物要有可靠性（三）對(duì)照原則設(shè)立對(duì)照陰性對(duì)照處方中僅缺一味藥物并嚴(yán)格按照制備工藝所得到的陰性樣品。雙陰性陽(yáng)性對(duì)照有效成分對(duì)照品單味藥材對(duì)照的等量性取樣量、制備條件復(fù)方制劑中陳皮、荊芥鑒別（四）重復(fù)性原則研究過(guò)程中質(zhì)量控制內(nèi)容需要有良好的重復(fù)性；生產(chǎn)過(guò)程中質(zhì)量控制內(nèi)容需要有良好的重復(fù)性；流通過(guò)程中質(zhì)量控制內(nèi)容需要有良好的重復(fù)性。六、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容（一）名稱(chēng)、漢語(yǔ)拼音（二）處方（三）制法（四）性狀（五）鑒別（六）檢查（七）含量測(cè)定（八）浸出物或總固體（九）功能與主治（十）用法與用量（十一）注意（十二）規(guī)格（十三）貯藏（二）處方1、處方藥味應(yīng)用三級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的名稱(chēng)。2、處方藥味排序應(yīng)按君、臣、佐、使排列。3、處方中有炮制或特殊處理的應(yīng)注明。4、處方藥味的法定計(jì)量單位為?°g?±、?°ml?±，并根據(jù)劑型不同，折算成1000個(gè)單位。5、處方原輔料均應(yīng)附標(biāo)準(zhǔn)。6、處方原料為藥材，而制劑有浸膏等制成，浸膏制法及要求在制備工藝中記述，不必另附標(biāo)準(zhǔn)。（三）制法要求：簡(jiǎn)要概括記述工藝全過(guò)程，對(duì)質(zhì)量有影響的關(guān)鍵工藝，應(yīng)列出控制的技術(shù)條件。(四)性狀對(duì)中藥制劑的顏色、外觀、氣味依次描述。一柱天膠囊本品為膠囊劑，內(nèi)容物為灰棕色至黃棕色粉末，氣微腥，味微甜苦。十滴水軟膠囊本品為棕色的軟膠囊，內(nèi)容物為含有少量懸浮固體浸膏的黃色油狀液體；氣芳香，味辛辣。（五）鑒別鑒別藥味的選擇：要求對(duì)方中君藥、貴重藥、毒藥首選，若因特征不明顯，或處方中用量較少而不能檢出者，可選其他藥材加以鑒別。要求對(duì)所有藥材進(jìn)行鑒別研究，不能檢出的說(shuō)明原因，總收入正文藥味數(shù)不少于50％。常用的鑒別方法：1、經(jīng)驗(yàn)鑒別2、顯微鑒別3、理化鑒別4、色譜鑒別1、經(jīng)驗(yàn)鑒別包括形狀、表面、顏色、質(zhì)地、斷面、氣、味、水試、火試、水火共試等。取麝香仁少量，撒于熾熱的坩堝中灼燒，初則迸裂，隨即融化膨脹起泡似珠，香氣濃烈四溢，應(yīng)無(wú)毛、肉焦臭，無(wú)火焰或火星出現(xiàn)。灰化后，殘?jiān)拾咨蚧野咨?、顯微鑒別通過(guò)動(dòng)植物組織細(xì)胞或內(nèi)含物的形態(tài)鑒別的方法，適用于含有生藥或部分生藥粉末的制劑。具有快速、簡(jiǎn)便覆蓋面大的特點(diǎn)。中藥新制劑顯微鑒別分析步驟：（1）處方組分的分析及其資料的查閱直接取樣法亂取法研磨取樣法離心取樣法（3）制片臨時(shí)制片固定制片（4）觀察與檢定要求：應(yīng)有三個(gè)批次的樣品，每批次應(yīng)不少于5張片。（5）正文描述先主要，后次要，先植物，次動(dòng)物，最后礦物。（6）繪圖3、理化鑒別是反映中藥新制劑所含的有效成分或有效部位及其特征成分的理化性質(zhì)，來(lái)鑒別真?zhèn)巍⒓兌然虼嬖?。一般情況下不宜作為標(biāo)準(zhǔn)中的最終鑒別項(xiàng)目，所作的理化鑒別工作寫(xiě)入說(shuō)明中。包括熒光法、顯色法、沉淀法、升華法、結(jié)晶法等。4、色譜鑒別采用薄層色譜、氣相色譜和液相色譜對(duì)中藥進(jìn)行真?zhèn)舞b別。（1）TLC鑒別的作用（2）TLC鑒別的要求（3）儀器與材料（4）操作步驟（5）影響薄層色譜法分析的主要因素（6）其他色譜法（1）TLC鑒別的作用①可以特征成分鑒別藥材，如以黨參苷Ⅰ為對(duì)照品鑒別黨參。②可區(qū)別異構(gòu)體，如冰片中的龍腦與異龍腦。③可鑒別真?zhèn)?，如有人?duì)西洋參的薄層鑒別檢出?°洋參丸?±中摻有人參。④可以區(qū)別不同藥用部位，如人參的主根與須根。⑤可鑒別未知成分。⑥可同時(shí)鑒別多個(gè)藥材的多種成分。（2）TLC鑒別的要求①薄層板的選用，多用硅膠G板，亦可用硅膠H，硅膠G、F254，氧化鋁，聚酰胺等。②要設(shè)陰性對(duì)照，試驗(yàn)條件要經(jīng)過(guò)優(yōu)選，薄層色譜圖通過(guò)三批以上樣品均有重視。③實(shí)驗(yàn)條件的展開(kāi)劑應(yīng)選擇三種以上，均能證明被鑒別成分與對(duì)照品的層析行為一致，再?gòu)闹羞x取較好的一個(gè)條件列入正文中，其余展開(kāi)方法寫(xiě)入說(shuō)明中。常用吸附劑性能表④使用的對(duì)照品和對(duì)照藥材應(yīng)來(lái)源于中國(guó)藥品生物制品檢定所。⑤樣品、對(duì)照品和陰性對(duì)照應(yīng)在同一板上展開(kāi)，顯色，并拍攝彩照，以反映真實(shí)情況，尚附相應(yīng)的文字資料說(shuō)明。（3）儀器與材料①薄層板預(yù)制板與手工板硅膠G板、硅膠GF254，硅膠H、氧化鋁、聚酰胺等。②涂布器③點(diǎn)樣器材④層析缸（展開(kāi)箱）⑤顯色與檢測(cè)儀器（4）操作步驟①鋪板②供試液制備溶劑：要求溶解度不宜太大、粘度不宜太高、沸點(diǎn)適中。分離：液液萃取法、分段萃取法、固液萃取法③點(diǎn)樣（活化1小時(shí)）④展開(kāi)（飽和）⑤檢測(cè)（5）影響薄層色譜法分析的主要因素①供試液制備應(yīng)盡可能地分離純化，除去多數(shù)雜質(zhì)或有干擾成分。如：一捻金中人參稀酸水解直接氯仿萃取與經(jīng)堿性氧化鋁柱吸附凈化比較，前者人參二醇與三醇難以辨認(rèn)。②點(diǎn)樣a.點(diǎn)樣圓正，直徑<3mm，高效薄層直徑2mm。b.點(diǎn)樣量控制在10ul以下，高效不超過(guò)2ul。c.原點(diǎn)忌點(diǎn)成空心，盡可能一次點(diǎn)樣成功，防止損傷薄層板面。d.可點(diǎn)成線形。③相對(duì)濕度對(duì)吸附劑的活性影響硅膠的硅醇親水性基團(tuán)，容易吸附水分而成為水合硅醇基，從而降低活性。因此，展開(kāi)時(shí)環(huán)境的相對(duì)濕度對(duì)色譜質(zhì)量影響較大。如：蒼術(shù)、赤白芍鑒別控制方法：a.采用雙槽展開(kāi)箱，控制相對(duì)濕度。b.點(diǎn)樣后放置一定相對(duì)濕度環(huán)境中一定時(shí)間。取出，迅速放入展開(kāi)箱中展開(kāi)。④溫度的影響如：人參的薄層鑒別⑤溶劑蒸汽在薄層色譜中的作用展開(kāi)前有無(wú)預(yù)平衡、平衡時(shí)間對(duì)色譜質(zhì)量有較大的影響。如：人參的薄層鑒別⑥溶劑質(zhì)量如：大黃薄層鑒別中的乙酸乙酯。（6）其他色譜法。（六）檢查指控制藥材或制劑中可能引入的雜質(zhì)或與藥品質(zhì)量有關(guān)的項(xiàng)目。可歸納為三類(lèi)：1.質(zhì)量參數(shù)類(lèi)型;2.劑型的要求類(lèi)型;3.污染的控制類(lèi)型。1.質(zhì)量參數(shù)類(lèi)型與質(zhì)量直接有關(guān)的專(zhuān)定檢查項(xiàng)目如川烏、草烏炮制后烏頭堿的限量;藥物純度及安全性等。2.劑型的要求類(lèi)型不同的劑型有不同的質(zhì)量要求，如固體制劑要求測(cè)水份;酊劑要求測(cè)含醇量、總固體量、相對(duì)密度、pH值等。常見(jiàn)劑型要求檢查項(xiàng)目3.污染的控制類(lèi)型

異物污染化學(xué)污染——有機(jī)磷殘留、有機(jī)溶劑殘留、農(nóng)藥殘留昆蟲(chóng)及微生物污染（七）含量測(cè)定1.含量測(cè)定選定原則2.含量測(cè)定方法3.方法學(xué)考察4.樣品測(cè)定5.含量限度的制定6.含量測(cè)定對(duì)照品的要求1.含量測(cè)定選定原則（1）項(xiàng)目與藥味的選定①至少要建立一項(xiàng)較為完善的含量測(cè)定方法，包括準(zhǔn)確、靈敏、考核實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)齊全，累積相當(dāng)數(shù)量，限度制定合理等。②單方制劑及中藥注射劑所含成分必須基本清楚。③復(fù)方制劑處方原則有君、臣、佐、使之分，應(yīng)首先選其君藥、貴重藥及毒劇藥或微量藥建立含量測(cè)定項(xiàng)。④對(duì)前述藥味基礎(chǔ)研究薄弱或在測(cè)定中干擾成分多，也可依次選定臣藥等其他藥味進(jìn)行含量測(cè)定。（2）測(cè)定成分的選定①有效成分或指標(biāo)成分清楚的可針對(duì)性定量。②成分類(lèi)別清楚的可對(duì)總成分進(jìn)行定量，但必須無(wú)干擾，且有針對(duì)性和控制質(zhì)量的意義。③所測(cè)成分應(yīng)歸屬于某一單味藥。④對(duì)于因藥材原料產(chǎn)地和等級(jí)不同而含量差異較大的成分，需注意檢測(cè)選擇指標(biāo)的選定產(chǎn)地的限定。⑤含量過(guò)低的成分較難真正反映成藥的內(nèi)在質(zhì)量。含量低于萬(wàn)分之一者，應(yīng)增加一個(gè)含量測(cè)定指標(biāo)或浸出物測(cè)定。⑥檢測(cè)成分應(yīng)盡可能與中醫(yī)用藥的功能相近。⑦中西藥結(jié)合的藥，不僅要測(cè)中藥君藥含量，而且所含西藥必須建立含量測(cè)定項(xiàng)目。⑧復(fù)方制劑無(wú)法建立含量測(cè)定指標(biāo)時(shí)，也可考慮建立生物測(cè)定等其他方法。2.含量測(cè)定方法（1）常用方法容量法、重量法、比色法、可見(jiàn)－紫外分光光度法（二、三波長(zhǎng)等）、導(dǎo)數(shù)光譜法、氣相色譜法（GC）、高效液相色譜法（HPLC）、薄層掃描法（TLC）、GC－MS、高效毛細(xì)管電泳、薄層－分光光度法或比色法及生物測(cè)定法等。（2）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（3）供試品溶液的制備（4）色譜條件及測(cè)定法（5）結(jié)果與討論3.方法學(xué)考察（1）提取條件的測(cè)定a.常用的提取方法：冷浸、熱浸回流、索氏提取器提取、超聲波提取等。b.提取液的取舍取全量取一定量（2）分離純化（3）測(cè)定條件的選擇分光光度法：λmax、藥液的濃度氣相液相色譜法：固定相、流動(dòng)相、檢測(cè)波長(zhǎng)、柱溫、流速、理論塔板數(shù)等。薄層掃描法：內(nèi)標(biāo)法，內(nèi)標(biāo)物的選擇外標(biāo)法，一點(diǎn)法或二點(diǎn)法延胡索乙素含量測(cè)定延胡索乙素含量測(cè)定用色譜條件：色譜柱：InertsilODS-3C18柱，5μm,4.6(i.d)×250mm;流動(dòng)相：甲醇－水－三乙胺（55:45:0.1）;檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm;柱溫：室溫;流速：1ml/min(柱壓約1300psi);理論塔板數(shù)按延胡索乙素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000，延胡索乙素與其它組分的分離度應(yīng)不低于1.5。（4）空白試驗(yàn)用除去被測(cè)成分或藥材的模擬制劑作對(duì)照，以考察是否有干擾，確定測(cè)定指標(biāo)是否僅為被測(cè)成分的響應(yīng)。（5）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備目的：a.確定樣品濃度與峰面積或峰高是否呈線性關(guān)系;相關(guān)系數(shù)應(yīng)在0.999以上，薄層掃描法可在0.995以上。b.確定線性范圍（適用的樣品點(diǎn)樣或進(jìn)樣量的確定）;c.直線是否通過(guò)原點(diǎn)，以確定是用一點(diǎn)法或二點(diǎn)法測(cè)定計(jì)算。（6）測(cè)定方法穩(wěn)定性試驗(yàn)?zāi)康模菏沁x定最佳的測(cè)定時(shí)間范圍。操作：制備好樣品后，分別2、4、6、8、12、24h進(jìn)樣，測(cè)定，計(jì)算峰面積RSD（%）一般小于2%（7）精密度試驗(yàn)要求：測(cè)定5個(gè)數(shù)據(jù)，分光光度法、氣相色譜和液相色譜法RSD<3％;而薄層掃描法RSD<5％。目的：考察儀器的精密度。（8）重復(fù)性試驗(yàn)（重現(xiàn)性）按含量測(cè)定方法，對(duì)同一樣品5份，分別按樣品測(cè)定方法測(cè)定（至少5次），RSD低于5％。同一人測(cè)定多次稱(chēng)為重復(fù)性不同人或?qū)嶒?yàn)室測(cè)定稱(chēng)為再現(xiàn)性目的：考察測(cè)定方法的可靠性（9）檢測(cè)靈敏度或檢測(cè)下限的測(cè)定一般以工作曲線的斜率表示。如：色譜法常用峰高/對(duì)照品量表示，最小檢出量即檢出下限。（10）回收率試驗(yàn)以回收率估計(jì)分析的誤差和操作過(guò)程的損失，以評(píng)估方法的可靠性。方法：①加樣回收②以成藥空白，精密加入被測(cè)化學(xué)成分純品，依法測(cè)定。③取成藥空白，精密加入已知被測(cè)成分含量的藥材，依法測(cè)定。要求：一般要求在95～105％。至少進(jìn)行5次試驗(yàn)或三組平行試驗(yàn)。①加樣回收此法不用制備空白對(duì)照，模擬真實(shí)性好。注意：a.純品的加入量與取樣量中被測(cè)定成分之和必須在標(biāo)準(zhǔn)線