糞便檢驗(yàn)-糞便OBT檢查（臨床檢驗(yàn)技術(shù)）

糞便檢查檢查目的、標(biāo)本采集1糞便化學(xué)檢查2CONTENTS

學(xué)習(xí)要點(diǎn)血試驗(yàn)原理方法學(xué)評(píng)價(jià)及臨床意義質(zhì)量控制檢查目的、標(biāo)本采集01檢查目的（一）協(xié)助消化道感染性疾病的診斷01腹瀉糞便的外觀和性狀有助于腹瀉的診斷02細(xì)菌性痢疾膿血粘液便，以膿和粘液為主。呈鮮紅粘胨狀，無(wú)臭味，03溶組織阿米巴痢疾膿血粘液便，以血為主，常與糞便并存而不混合。呈果醬色，有腐臭。04細(xì)菌性食物中毒（二）腸道寄生蟲感染的診斷和鑒別診斷（三）糞便檢查可用于消化道出血的診斷：

⑴上消化道出血、下消化道出血鑒別

⑵

消化道潰瘍、消化道腫瘤出血的鑒別

消化道潰瘍隱血試驗(yàn)呈間斷性陽(yáng)性

消化道惡性腫瘤隱血試驗(yàn)呈持續(xù)性陽(yáng)性

（四）其他根據(jù)糞便的性狀和組成，可間接地判斷胃腸、胰腺、肝膽系統(tǒng)的功能狀況。02標(biāo)本采集（一）容器要求最好用一次性使用的塑料盒。(二）標(biāo)本采集要求

1．常規(guī)標(biāo)本檢查(1)應(yīng)采集新鮮標(biāo)本，外觀異常取含膿血、粘液等異常部分；外觀無(wú)異常糞便應(yīng)從淺、深處糞便多處取材；標(biāo)本應(yīng)無(wú)尿液、藥物的污染。(2)及時(shí)檢查，1h內(nèi)檢查完畢

2、化學(xué)隱血試驗(yàn)試驗(yàn)前三日禁食肉類、含動(dòng)物血和某些蔬菜等食物，并禁服鐵劑和VitC等藥物。糞便化學(xué)檢查01隱血試驗(yàn)

消化道出血量少時(shí)，肉眼及顯微鏡下均不能證實(shí)出血，稱為隱血。

隱血試驗(yàn)（occultbloodtest，OBT）是指用化學(xué)或免疫學(xué)的方法證實(shí)微量血液的試驗(yàn)。檢測(cè)原理血紅蛋白中的含鐵血紅素有類似過(guò)氧化物酶的作用，可催化分解過(guò)氧化氫，釋放出新生態(tài)氧，氧化色原使之呈色?；瘜W(xué)法抗人血紅蛋白抗體或抗人紅細(xì)胞基質(zhì)抗體與人血紅蛋白或紅細(xì)胞結(jié)合免疫法1．化學(xué)法

根據(jù)色原物質(zhì)鄰聯(lián)甲苯胺法、鄰甲苯胺法、聯(lián)苯胺法

根據(jù)反應(yīng)試劑狀態(tài)或試劑載體濕化學(xué)、干化學(xué)試紙法。①靈敏度：鄰聯(lián)甲苯胺、鄰甲苯胺、還原酚酞法最靈敏，可檢出0.2～1.0mg/L的血紅蛋白;中度敏感的試驗(yàn)有聯(lián)苯胺法(淘汰)、匹拉抗米酮法及無(wú)色孔雀綠法，可檢出1～5mg/L的血紅蛋白,臨床上多采用中度靈敏方法。方法學(xué)評(píng)價(jià)②特異性和準(zhǔn)確性：受食物、藥物、試劑等多種因素影響，容易出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性。假陽(yáng)性

外源性動(dòng)物食品生食蔬菜（蘿卜、甘藍(lán)）、藥物（鐵劑、鉍劑）

假陰性

血紅蛋白被分解

大劑量服用VitC

試劑過(guò)期①試驗(yàn)器具潔凈、不得含有鐵離子，更不能沾污血跡或膿液，否則導(dǎo)致假陽(yáng)性。②H2O2不穩(wěn)定，每次試驗(yàn)前必須鑒定。③試驗(yàn)前3d應(yīng)禁食影響試驗(yàn)的食品和藥物，④嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，控制反應(yīng)時(shí)間，統(tǒng)一結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)。⑤每天制備陽(yáng)性和陰性質(zhì)控標(biāo)本，進(jìn)行對(duì)照。

質(zhì)量控制

優(yōu)點(diǎn)：

靈敏度高（一般血紅蛋白為0.2mg/L即可獲陽(yáng)性結(jié)果）、特異性強(qiáng)，目前被認(rèn)為是大腸癌普查最適用試驗(yàn)。缺點(diǎn)：①假陽(yáng)性：靈敏度過(guò)高，引起假陽(yáng)性②假陰性：當(dāng)上消化道出血，血液在腸道停留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)消化道大量出血時(shí)，出現(xiàn)前帶現(xiàn)象

2．免疫學(xué)法

ELISA、膠體金

質(zhì)量控制

①試劑檢出線要寬，防止反應(yīng)體系中抗原過(guò)剩出現(xiàn)后帶現(xiàn)象。必要時(shí)將糞便再稀釋，重做試驗(yàn)或用化學(xué)法復(fù)檢。②因靈敏度高，要注意假陽(yáng)性。③上消化道出血Hb被分解不具備原來(lái)免疫原性或抗原與單克隆抗體不匹配現(xiàn)象，應(yīng)密切結(jié)合臨床，正確判斷。④膠體金法質(zhì)控線沒(méi)有色帶出現(xiàn)說(shuō)明試驗(yàn)無(wú)效，應(yīng)檢查試劑帶是否失效。⑤對(duì)商品化的試劑盒應(yīng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書的要求操作。

3．血紅蛋白熒光定量法

采用卟啉熒光定量血紅蛋白試驗(yàn)（hemoquanttest，HOT），該試驗(yàn)用熱草酸溶液使血紅素轉(zhuǎn)變?yōu)樵策M(jìn)行熒光檢測(cè)。除可測(cè)定糞便中血紅蛋白外，還可測(cè)定血紅蛋白衍生物卟啉，對(duì)上、下消化道出血同樣敏感，但仍受外源性動(dòng)物血紅蛋白、肌紅蛋白和卟啉類物質(zhì)干擾，且方法復(fù)雜，推廣使用受到限制。4．消化道出血新的標(biāo)記物用于糞便隱血試驗(yàn)

①轉(zhuǎn)鐵蛋白（Tf）：Tf具有腸道出血的特異性和對(duì)細(xì)菌分解的穩(wěn)定性，是消化道出血的良好標(biāo)志物。聯(lián)合檢測(cè)Tf和Hb能提高對(duì)早期大腸癌的檢出率，可用抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體膠體金法測(cè)定。②血紅蛋白-珠蛋白復(fù)合物（Hb-Hp）

③血清白蛋白（albumin，ALB）

【參考值】陰性【臨床意義】（1）對(duì)消化道出血有診斷價(jià)值（2）為消化道潰瘍與腫瘤出血的鑒別提供依據(jù)：消化道腫瘤患者，隱血試驗(yàn)呈持續(xù)性陽(yáng)性；胃腸道潰瘍患者隱血試驗(yàn)結(jié)果呈間斷性陽(yáng)性。（3）可作為消化道惡性腫瘤普查的1個(gè)篩選指標(biāo)02糞膽色素檢查

糞膽色素檢查包括糞膽紅素、糞膽原、糞膽素檢驗(yàn)，多用于黃疸的鑒別診斷。03脂肪檢查

糞膽色素檢查包括糞膽紅素、糞膽原、糞膽素檢驗(yàn)，多用于黃疸的鑒別診斷。

【方法學(xué)評(píng)價(jià)】顯微鏡檢查法、稱量法、滴定法。

【臨床意義】脂肪測(cè)定主要了解人體的消化或吸收功能，間接為消化道疾病的診斷提供依據(jù)。隱血試驗(yàn)?zāi)康囊笤噭┘皟x器實(shí)驗(yàn)原理試驗(yàn)步驟目

錄CONTENTS質(zhì)量控制結(jié)果判斷方法學(xué)評(píng)價(jià)1掌握鄰甲苯胺法隱血試驗(yàn)操作方法及結(jié)果判斷。2

熟悉鄰甲苯胺法隱血試驗(yàn)的原理目的要求試劑10g/L鄰甲苯胺冰醋酸溶液、3%過(guò)氧化氫器材糞便標(biāo)本、竹簽、載玻片試劑及器材實(shí)驗(yàn)原理血紅蛋白中的亞鐵血紅素有類似過(guò)氧化物酶的活性，能借助受體（鄰甲苯胺）催化過(guò)氧化氫，放出新生態(tài)氧，將受體腸氧化成鄰甲偶氮苯而顯藍(lán)色操作步驟1用竹簽將糞便標(biāo)本涂于載玻片上。2滴加10g/L鄰甲苯胺冰醋酸溶液及3%過(guò)氧化氫溶液2-3滴。3立即觀察結(jié)果，在2分鐘內(nèi)顯藍(lán)褐色為陽(yáng)性，根據(jù)顏色的深淺和出現(xiàn)的時(shí)間判斷結(jié)果結(jié)果判斷

結(jié)果判斷判斷標(biāo)準(zhǔn)-++++++++++加入試劑2分鐘后仍不顯色加入試劑10秒后初顯淺藍(lán)色，漸變藍(lán)色加入試劑初顯藍(lán)褐色且逐漸加深加入試劑后立即呈藍(lán)褐色加入試劑后立即呈藍(lán)黑褐色方法學(xué)評(píng)價(jià)靈敏度：鄰甲苯胺法最靈敏，可檢出0.2～1.0mg/L的血紅蛋白。特異性和準(zhǔn)確性：受食物、藥物、試劑等多種因素影響，容易出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性。假陽(yáng)性外源性動(dòng)物食品生食蔬菜（蘿卜、甘藍(lán)）藥物（鐵劑、鉍劑）假陰性血紅蛋白被分解大劑量服用VitC