DB41T 2067-2020 奶牛場布魯氏菌病凈化技術(shù)規(guī)范

41I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件起草單位：新鄉(xiāng)市動物疫病預(yù)防控制中心、孫照霞、王超、胡元春、郝曉鵬、姜金慶、劉長忠、常衛(wèi)波、趙智燦1奶牛場布魯氏菌病凈化技術(shù)規(guī)范本文件適用于獨立封閉飼養(yǎng)規(guī)模100頭以上奶牛場布魯氏菌GB/T18646—2018動物布魯氏菌病診斷對奶牛場采取一系列防控措施，用血清學(xué)檢測血清均為陰性，奶牛場連續(xù)2年無個體發(fā)病和無感染4.1.1流行特點病多。在母畜中，第一次妊娠母畜發(fā)病較多。消化道、呼吸道、生殖道是主要的感染途徑，也可通過損傷的皮膚4.1.2臨床癥狀潛伏期一般為14d～180d。最顯著癥狀是懷孕母畜發(fā)生流產(chǎn)，流產(chǎn)后可能發(fā)生胎衣滯留和子宮內(nèi)24.1.3剖檢病變4.2.1血清學(xué)診斷）（4.2.1.5間接酶聯(lián)免疫吸附試驗（iELISA按GB/T18646—2018規(guī)定）4.2.1.6競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗（cELISA按GB/T18646—2018規(guī)定）4.2.2病原學(xué)診斷警示——以下病原學(xué)操作包括但不僅限于涂片染色鏡檢、分離培養(yǎng)、聚合酶鏈中涉及細(xì)菌活菌操作等，均應(yīng)在BSL-3級生物安全實驗室4.2.2.1涂片染色鏡檢按《布魯氏菌病防治技術(shù)規(guī)范淋巴結(jié)、胎兒胃內(nèi)容物等組織，按GB/T18646—201面、肝湯瓊脂斜面、3%甘油0.5%葡萄糖肝湯瓊脂斜面等培養(yǎng)基培養(yǎng)；若為陳舊病料或污染病料，可用選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)。組織樣品、陰道沖洗液、精液、關(guān)節(jié)液、胃內(nèi)容物、乳樣按GB/T18646—2018第4章13節(jié)布魯氏菌Bruce-Ladder檢測方法操作，熒光定量PCR可按商品化試劑盒操作。4.3結(jié)果判定b)免疫場奶牛最后一次布病疫苗免疫后間隔二年后，按照4.3.3進35.1凈化要求5.2技術(shù)路線為陽性者進行撲殺，同時加強消毒和提高綜合飼養(yǎng)管理水平等措施，提高布病凈化工5.3凈化過程進行第一次普檢，100～120日齡時，進行第二次普檢。對檢出陽性牛隔離并采用4.2.1.3試管凝集試驗(SAT)或4.2.1.6競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗（cELISA）進行復(fù)核，對確診陽性畜進行撲殺；間隔3個月再次采用4.2.1.1琥紅平板凝集試驗（RBT）或4.2.1.5間接酶聯(lián)免疫吸附試驗（iELISA）對污染牛群進競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗（cELISA）進行復(fù)核，對確診陽性牛進行撲殺，每年春、秋兩季各進行一次普檢，采用4.2.1.1琥紅平板凝集試驗（RBT）或4.2.1.5間接酶聯(lián)免疫5.3.4.4按照《跨省調(diào)運乳用種用動物產(chǎn)地檢疫規(guī)程》進行檢疫，奶牛引入必須來自于非疫區(qū)，調(diào)入4對采樣器械進行消毒。采樣結(jié)束后，收集采樣物品進行消毒處理，并更換衣服清洗消毒。應(yīng)在符合相應(yīng)級別生物安全實驗室中操作，病原分離培養(yǎng)需在BSL-3級實驗室操作，未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料和滅活性實驗在BSL-2級實驗室操作。檢測人員需佩戴一次性醫(yī)用乳膠手套、口罩、帽子、鞋套和長袖橡膠手套，備有接羔袋和消毒液，禁止赤手接觸對運輸病畜的車輛和其它工具選用過氧乙酸、次氯酸、二氧化氯等消毒劑進行噴灑消毒。6.3.1家畜的流產(chǎn)胎兒、胎盤、胎衣或死胎等，采取深埋或焚燒等方法進行無害化處理；流