現(xiàn)代實驗動物科學與比較醫(yī)學研究

現(xiàn)代實驗動物科學與

比較醫(yī)學

第一章導論南方醫(yī)科大學實驗動物中心＆比較醫(yī)學研究所顧為望主要內(nèi)容:

一、前言二、實驗動物在醫(yī)藥研究中的歷史、現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢三、基本概念四、實驗動物標準化五、實驗動物在醫(yī)學研究中的應用與選擇六、國外實驗動物管理狀況及發(fā)展趨勢七、我國實驗動物工作現(xiàn)狀八、我省實驗動物工作的特點九、我校實驗動物工作的現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢前言01眾所周知：二十一世紀是生命科學的世紀，隨著科學技術的發(fā)展，經(jīng)濟的繁榮，人們越來越渴望揭示遺傳奧秘，攻克各種頑癥，延長人類壽命。因此世界各國特別是發(fā)達國家投入了巨額經(jīng)費用于生命科學研究和衛(wèi)生保健事業(yè)。02美國：投入生命科學研究和衛(wèi)生保健事業(yè)費用占國民生產(chǎn)總值的比例逐年增高，超過了航天和原子能事業(yè)的投入。生命科學研究離不開實驗動物。在美國,60%以上生命科學研究課題需要實驗動物。NIH（美國國立衛(wèi)生研究院）每年科研經(jīng)費的50%用于動物實驗有關的項目。國家科技部在《科研發(fā)展“九五”計劃和2010年遠景目標綱要》中明確提出：實驗動物（LaboratoryAnimal）、設備（Equipment）、信息（Information）和試劑（Reagent），簡稱AEIR，是科學研究的四大基本條件。01在當今，我們要獲得精密的儀器，高純度02的試劑、最新信息是輕而易舉的。但獲得理想03的實驗動物卻不那麼容易，一方面是人們重視04程度不夠；二是我國實驗動物學科起步晚，比05較落后，即使有錢也不一定獲得理想的實驗動06物。即使獲得了所需的實驗動物，若動物實驗07環(huán)境和動物飼養(yǎng)條件達不到標準，也不可能獲08得理想的實驗結果。由于我國實驗動物學科發(fā)09展滯后，嚴重制約了醫(yī)學、藥學及生命科學研究的發(fā)展。因此國家科委和有關部門高度重視,頒布了一系列的管理條例和實施細則，來促進我國實驗動物事業(yè)的發(fā)展。1997年國家四部委（國家科委、衛(wèi)生部、農(nóng)業(yè)部、國家醫(yī)藥管理局）聯(lián)合發(fā)文規(guī)定2000年科研和藥檢的大、小鼠必需達到清潔級以上標準。2001年國家最近頒布的實驗動物標準已取消普通級大、小鼠.實驗動物在醫(yī)藥研究中的

歷史、現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢（一）歷史

歷史上許多重大發(fā)現(xiàn)是通過動物實驗得到的。年份 發(fā)現(xiàn)人 發(fā)現(xiàn)所用動物

1628 哈維（英國） 血液循環(huán) 蛙.蛇.魚.其它1829Jerner牛痘免疫預防天花牛、馬、豬 1846 瑪?shù)牵ǖ聡?乙醚麻醉 鳥類，其它 1878 科赫（德國） 結核桿菌，細菌牛，羊與疾病的關系 1885 巴斯德（法國）狂犬病免疫 狗 1921 馮·梅林（德國）胰島素 狗1932 Domagk(德國)磺胺藥的發(fā)現(xiàn)小鼠1936 巴甫洛夫（俄國）條件反射、消化生理 狗 低溫麻醉、體外循環(huán)、器官移植、斷肢再植 現(xiàn)狀雖然用動物做實驗有上千年的歷史但作為一門學科僅有50年的時間。隨著生命科學的發(fā)展進一步深入，三項重大突破即：近交系小鼠（1909）、無菌動物（1915）和免疫缺陷動物（1966）的發(fā)現(xiàn)和培育成功，為創(chuàng)建實驗動物科學奠定了基礎。近交系小鼠對研究遺傳規(guī)律和各種遺傳病的診斷和防治起到了重要作用。免疫缺陷動物裸小鼠為腫瘤免疫學的研究提供了很好的實驗材料。用無菌動物可了解各種病原體對機體的影響。隨著克隆動物的出現(xiàn)，各種轉基因動物的培育成功和應用，把實驗動物學科帶到了全新的境地。大大促進了生命科學的研究和發(fā)展。美國哈佛大學醫(yī)學研究院96年統(tǒng)計報導：在1991--1996年全世界人類健康研究中有51項突破性重大研究成果，其中22項是通過實驗動物模型遺傳研究得到的，占43%。01南京軍區(qū)總醫(yī)院1987--1997年，十年中獲得全國，全軍科技進步及醫(yī)療成果二等以上的獎項共52項。其中通過動物實驗取得的有38項，占73%。(腎小球腎炎的診斷治療，系列腸漏的外科治療，腦垂體移植，小腸移植等成果都是通過動物實驗取得的）。022002年廣東省申報醫(yī)藥類科技進步獎277項，其中使用實驗動物獲得的成果177項，占63.9％。03實驗動物的發(fā)展趨勢：模型動物的大量發(fā)展和使用，正在逐漸取代常規(guī)實驗動物。（高血壓大鼠、肥胖癥小鼠和腫瘤的動物模型等）。整個實驗動物的供應，趨向于社會化、商品化。實驗動物的管理標準化、法制化。高等級動物（清潔級、SPF級）被大量使用。轉基因動物的大量使用（AIDS病毒、乙肝病毒和人白血病I型病毒的小鼠轉基因模型）。實驗動物的福利、保護和“3R”運動呈現(xiàn)全球化趨勢?！?R”即：替代（Replacement）、減少（Reduction）和優(yōu)化（Refinement），其核心是對作為人的替身或“替難者”善待、減少痛苦、降低用量，更重要的是通過“3R”研究進一步開拓人們進行科研的思路，使研究手段更加完善?；靖拍顚嶒瀯游锟茖W（LaboratoryanimalscienceLAS）：是研究實驗動物及其應用的一門科學，包括實驗動物和動物實驗。實驗動物（laboratoryanimalLA）：指經(jīng)人工培育，對其攜帶的微生物進行控制，遺傳背景明確，可用于科學實驗、藥品、生物制品的生產(chǎn)和檢定及其它科學研究的動物。人們運用現(xiàn)代手段和方法培育的具有新的生物學特性的動物品種（系）用于科學研究。遺傳控制不同01微生物控制等級不同02培育的形質和目標不同03實驗動物與實驗用動物的區(qū)別：為科研、教學、藥品檢定等目的，對動物進行物理、化學和生物因素處理，觀察其反應，獲得實驗數(shù)據(jù)，解決科研中的問題。動物實驗（animalexperiment）：是指醫(yī)學研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物實驗對象和相關材料。人類疾病的動物模型：實驗動物標準化實驗動物標準化定義：對動物的質量，繁育條件，實驗條件等方面規(guī)定的統(tǒng)一技術標準。內(nèi)容：實驗動物遺傳學質量控制實驗動物微生物學質量控制實驗動物設施環(huán)境標準化實驗動物飼料營養(yǎng)標準化實驗動物遺傳學質量控制：按遺傳學控制標準即基因的純合成度,實驗動物分為:近交系（inbredstrain）C3H（300多種）突變系（mutantstrain）裸鼠雜交群（hybridcolony）F1封閉群（closecolony）昆明小鼠、wister大鼠近交系：連續(xù)全同胞交配20代以上的動物稱為近交系。特點:其基因純合度達到98.6%,個體差異小,似同卵雙生反應一致重復性好，用少量動物即可獲得精確度很高的實驗結果，個體相互之間可以接受皮膚、器官移植。隱性基因純合使許多病態(tài)性狀得以暴露,可獲得大量先天性畸形及先天性疾病的動物模型.如高血壓、白內(nèi)障、糖尿病.動物模型.缺點:出現(xiàn)近交衰退.F1代動物：兩個無關近交系雜交形成的后代.特點：雖然基因雜合，但個體之間基因雜合的一致,個體差異小。除具有近交系的優(yōu)點,還具有生命力強耐受性強,可長期進行觀察，個體相互之間可以接受皮膚、器官移植。封閉群動物：以非近親交配方式繁殖生產(chǎn)的一個實驗動物種群。在人類遺傳研究、藥物篩選、毒物實驗等方面起著不可代替的作用等。突變系動物：指正常染色體的基因發(fā)生了變異，動物具有一種或多種遺傳缺陷。例如：無胸腺裸鼠、嚴重聯(lián)合免疫缺陷動物SCID小鼠。為腫瘤、免疫疾病的研究提供了理想的材料。01實驗動物微生物學質量控制.02通過微生物學的檢測手段,根據(jù)微生物凈化程度03我國把實驗動物分為四個等級:04一級：普通級動物05二級:清潔級動物06三級：SPF級動物(無特定病原體動物)07四級:無菌動物01實驗動物生產(chǎn)與動物實驗環(huán)境02標準化03普通級環(huán)境：一級動物（普通級）04屏障系統(tǒng)：SPF級05亞屏障系統(tǒng)：二級動物（清潔級）（亞屏障系統(tǒng)現(xiàn)已取消）06隔離系統(tǒng)：無菌動物表1實驗動物繁育、生產(chǎn)設施環(huán)境指標（靜態(tài)）表2動物實驗設施（設備3））環(huán)境指標（靜態(tài)）實驗動物在醫(yī)藥研究中的

選擇與應用PART1動物和人有共同的進化起源，共用一套遺傳密碼系統(tǒng)。因此把動物和人的各種生理病理現(xiàn)象加以比較分析有助于揭示生命的本質、遺傳的奧秘同樣可以依據(jù)這種進化上的同源性和遺傳上的同質性在實驗動物體復制具有人類疾病模擬表現(xiàn)的模型，進而采取有效的防治措施。藥物是人類戰(zhàn)勝疾病的重要手段，應用藥物在一定程度上保障了人類的生存和繁衍，促進了社會的繁榮昌盛、社會進步、科學的昌明。人們?nèi)找嬷v究生活質量，對藥物的需求也不斷增加。有病當治病，無病需防病。人們在激烈的競爭中迫切需要提高智能和體能，延年益壽，延緩衰老，保持青春常駐和旺盛的精力，所有這一切藥物是不可缺少的。但是任何事物均具有兩面性?！笆撬幦侄尽?，藥品如使用不當對人體都會產(chǎn)生毒性作用?！八幆熓鹿省薄ⅰ八幵葱约膊　被颉八幒κ录苯逃柡芏唷Ｋ孕滤幵谶M入臨床使用前均需經(jīng)過安全性評價。歷史上重大的藥害事件舉例(1)藥品時間國家藥害作用亮菌甲素注射液2006年中國廣州市急性腎功能衰竭龍膽瀉肝丸2000-2002年中國腎損害四咪唑20世紀70、80年代中國溫州市遲發(fā)性腦病氨基甙類抗生素20世紀90年代中國藥物致聾、致啞磺胺酏劑1937年美國腎功能衰竭氨基比林1922～1934年歐洲、美國白細胞減少癥二硝基酚1937年美國、歐洲部分國家、巴西白內(nèi)障、骨髓損害三苯乙醇20世紀50年代后期美國脫發(fā)、皮膚干燥、男性乳房增大、陽痿、視力下降、白內(nèi)障非那西丁1953年后瑞士、西德、捷克等國腎功能衰竭歷史上重大的藥害事件舉例(2)藥品時間國家藥害作用氯磺羥喹1963年日本亞急性脊髓視神經(jīng)病孕激素50年代美國女嬰外生殖器男性化畸形己烯雌酚1966～1969年間美國波士頓市少女陰道癌二碘二乙基錫1954年法國巴黎中毒性腦炎反應停（沙利度胺）1960年左右歐洲、日本、北美、拉丁美洲海豹肢畸形醋酸鉈1930～1960年各國慢性中毒心得寧1968～1979年美國眼-皮膚-黏膜綜合征拜斯亭2001年德國、意大利嚴重的橫紋肌溶解綜合征替馬沙星1991年7月美國替馬沙星綜合征米貝拉地爾美國致死性心律失常特非那丁和阿斯咪唑1997～1998年6月法國/冰島/毛里求斯藥物相互作用引發(fā)致命性的心臟毒性阿洛司瓊2001年8月美國缺血性結腸炎、嚴重便秘蘇丹紅一號1995～2005年歐盟、中國等國家第三類致癌物質芬氟拉明和右芬氟拉明1962～1997年美國增加心臟瓣膜病發(fā)生率奈韋拉平2003年荷蘭肝臟毒性和皮膚過敏以上藥害事件的發(fā)生決大部分是因為臨床前動物實驗沒做好，有的是時間過短、有的是動物數(shù)量不夠、還有的是實驗動物選擇不當。所以，美國早在七十年代就制定了《GLP規(guī)范（草案）》。GLP是非臨床實驗的優(yōu)良實驗室規(guī)范的英文縮寫?，F(xiàn)在一般翻譯為“藥品非臨床安全性研究質量管理規(guī)范”。主要就是針對藥品臨床前動物實驗研究制定的法規(guī)性文件，其主要精神就是所有的動物實驗方法和步驟都是按照既定的標準操作規(guī)程（SOP）進行，確保所有的數(shù)據(jù)都經(jīng)過兩個以上的人審核，所有數(shù)據(jù)和結論的更改都必須記錄在案。由于GLP對動物實驗的要求非常嚴格，使得我們在醫(yī)學和生命科學研究中進行動物實驗時都借鑒GLP規(guī)范制定各種SOP。選擇與人的機能、代謝、結構及疾病特點相似的實驗動物（laboratoryanimalsLA）醫(yī)藥研究中動物選擇的原則：選擇遺傳背景明確，得到良好微生物控制，具有模型性狀顯著且穩(wěn)定的LA，如：猴、小鼠的NH4OH致咳選擇解剖、生理特點符合實驗目的要求的LA。如：裸鼠、青光眼兔、糖尿病大鼠選擇靶器官效應好的LA。選擇科研、檢定及生產(chǎn)中傳統(tǒng)使用的LA。如：家犬的甲狀旁腺位于甲狀腺表面利于甲狀旁腺切除選擇具有特殊反應性的實驗動物品種（系）。如：對血壓的影響，狗、貓、鼠易復制高血壓模型。過敏反應，變態(tài)反應：豚鼠嘔吐反應：狗對皮膚的局部作用：家兔、豚鼠、豬致熱反應：兔，不能用狗（無汗腺或汗腺不發(fā)達）動脈粥樣硬化：鴿、雞、家兔致癌作用：小鼠、大鼠考慮到品種品系放射?。汗罚ú挥猛?，非常敏感）免疫：C57BL/6國際通用小鼠。動物模型的設計原則：相似性：復制的模型盡可能近似與人類疾病。重復性可靠性適用性和可控性易行性和經(jīng)濟性動物模型的復制方法：01物理誘發(fā)方法：放射線（萎縮性胃炎）、機械損傷02化學誘發(fā)方法：致癌劑（Ｄ－氨基半乳糖致大鼠肝硬化）化學毒物、強酸強堿燒傷等03生物誘發(fā)方法：細菌、病毒、寄生蟲、生物毒素等04復合方法：如用細菌加寒冷方法復制豚鼠慢性支氣管炎05遺傳工程方法：AIDS、老年癡呆癥的動物模型06動物模型的優(yōu)點避免了在人類進行實驗所帶來得風險。臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復制出來。例如：放射病、毒氣中毒、戰(zhàn)傷。可以克服人類某些疾病潛伏期長、病程長和發(fā)病率低的缺點。例如：腫瘤、肺心病、再障可以嚴格控制實驗條件，增加實驗條件的可比性可以簡化實驗操作和樣品收集。按時采集所需的各種樣本，及時或分批處死動物收集樣本，以便更好了解疾病過程，完成實驗目的，這點在臨床時辦不到的。有助于更全面的認識疾病和疾病本質。但是動物機體結構和代謝與人類有較大差異，實驗結果不能完全照搬于人。實驗動物既是生命科學研究的支撐條件，又是生命科學研究的對象和內(nèi)容。其發(fā)展和應用程度是衡量一個國家或地區(qū)生命科學研究水平高低的重要標志。實驗動物在保障人類健康和改善人類生存條件方面所起的作用是勿庸置疑的。天花的滅絕、各種人和動物疫苗的研制、斷肢再植、器官移植以及轉基因和克隆技術等重大突破，都是借助于實驗動物獲得成功的。當前人類仍面臨癌癥、艾滋病、SARS等重大疾病的威脅，各種疾病的診斷、治療和預防，藥品、保健食品、美容化妝品的安全性評價以及農(nóng)藥、化肥、除草劑、促生長劑、獸藥添加劑的研制開發(fā)、毒性殘留、生物安全性的評定以及與人們生活環(huán)境密切相關的重大研究都離不開實驗動物。然而與西方發(fā)達國家相比，我國實驗動物基礎明顯滯后于生物高科技的發(fā)展需求。近些年，為提高實驗動物科學技術水平、加強實驗動物工作管理，國家科技部（原國家科委）聯(lián)合有關部門努力工作，使我國實驗動物工作逐步走上了法制化、標準化。國外實驗動物工作現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢隨著生命科學發(fā)展推動了實驗動物科學的現(xiàn)代化進程，以無菌動物、近交系動物和免疫缺陷動物的培育成功奠定了現(xiàn)代實驗動物科學的基礎，而轉基因動物和克隆動物的培育成功又把實驗動物科學推進到一個嶄新階段。主要表現(xiàn)如下：隨著實驗動物質量標準化程度越來越高，實驗動物使用總量減少。01因為實驗動物質量提高，減少了個體差異，提高了實驗結果的均一性和可重復性，少量實驗動物即可獲得準確的實驗結果；另一個原因就是當前普及“3R”原則，替代方法和替代材料的發(fā)現(xiàn)使用減少了實驗動物用量。以英國為例，2000年使用實驗動物數(shù)量比1976年減少50％，而美國在1994年使用實驗動物數(shù)量與1968年相比，減少了近60％。02高等級實驗動物、轉基因動物、模型動物使用量增加。01在日本1985年大鼠使用：普通級﹕清潔級﹕SPF級為2﹕5﹕12，而到1991年該比例則改為2﹕11﹕50。在英國1990年科研使用轉基因動物只占實驗動物總數(shù)的3％，而在2000年短短十年發(fā)展到轉基因動物占動物數(shù)量的18.8％；此外，模型動物和各種人類疾病動物模型使用數(shù)量急劇上升。02國外實驗動物管理趨于法制化隨著實驗動物在生命科學研究和產(chǎn)品檢驗中全方位使用，西方發(fā)達資本主義國家基本上在上個世紀50～70年代先后立法管理，近幾十年又在不斷加以完善和改進。在國外實驗動物生產(chǎn)逐漸向專業(yè)化、商品化、社會化方向發(fā)展。在發(fā)達國家，十分重視通過立法管理實驗動物，盡管國際上不同國家對實驗動物管理和立法有不同的尺度，但都是圍繞保障動物福利和實驗動物質量兩個方面同時進行的。3.1美國美國政府不直接設置專門的管理機構，而是通過立法經(jīng)過動植物檢疫局（APHIS）、食品與藥品管理局（FDA）、國家衛(wèi)生研究院（NIH）、動物飼養(yǎng)管理與應用委員會（LACUC）等官方或民間渠道，對實驗動物及其設施條件進行監(jiān)督與調(diào)控。1966年，第一部保護農(nóng)用動物法規(guī)－《動物福利法》由APHIS頒布實施；1966年頒布《瀕危物種保護法》；1985年頒布《食品安全法》,對動物福利作出了規(guī)定。1990年頒布的《食品和農(nóng)業(yè)保護貿(mào)易法》規(guī)定寵物保護。1963年，NIH頒布了《實驗動物飼養(yǎng)管理與使用指南》，覆蓋了實驗動物在使用、飼養(yǎng)管理、照料、保健過程中的各個方面。1985年，衛(wèi)生部頒布了《人道主義飼養(yǎng)和使用實驗動物的公共衛(wèi)生服務方針》。該方針對政府制定的《美國政府關于在測試、科研和培訓中使用和管理脊椎動物的原則》和《動物福利法》作了全面的補充和完善。FDA頒布了《良好實驗室操作規(guī)程》（GoodLaboratoryPracticeGLP）,制定了非臨床測試標準。在英國，早在1867年會議通過了《防止虐待動物法》。1986年頒布了新的動物法。新動物法最大的特點之一是其許可證制度，它規(guī)定開展與動物有關的科研工作需要同時具有3種許可證，即房屋及設施許可證、項目研究許可證和人員資格認可證。英國內(nèi)務部還頒布了《科研用動物居住和管理操作規(guī)程》、《繁育和供應單位動物居住和管理的操作過程》、《廢棄物的管理操作規(guī)程》、《運輸過程動物福利條例》等。01在德國，新的《動物保護法》也于1986年頒布。其他國家，比他比利時、芬蘭、法國、意大利等也有類似的法令。023.2歐洲日本日本有關實驗動物管理的法規(guī)有30多種。如20世紀70年代頒布的《動物保護與管理的法律》、《家畜傳染病預防法》、《獸醫(yī)法》、《狂犬病預防法》、《動物進出口檢疫法》、《確保建筑物衛(wèi)生環(huán)境的法律》、《確保建筑物衛(wèi)生環(huán)境的法律實施令》、《確保建筑物衛(wèi)生環(huán)境的法律實施細則》等。20世紀80年代頒布的《實驗動物飼養(yǎng)及保育基本準則》、《動物實驗的準則》、《實施醫(yī)藥品安全性試驗的標準》等。1983年和1988年兩次修訂GLP標準。我國實驗動物工作現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢據(jù)統(tǒng)計，目前我國實驗動物生產(chǎn)使用單位有3000多家，從業(yè)人員數(shù)萬人，年產(chǎn)實驗動物總量約1300萬只。但受到認識觀念、經(jīng)費投入以及整體科研發(fā)展水平的限制，我國實驗動物的質量和品種數(shù)量還遠遠落后于西方發(fā)達國家?？蒲袉挝?、高等院校、藥檢機構、疾控部門包括醫(yī)療系統(tǒng)購買先進的儀器設備的時候都舍得投資，一臺機器動輒幾十萬上百萬，儀器的價值成為實力雄厚的象征。而對于實驗動物生產(chǎn)和使用設施的投入總是排不上議事日程，一拖再拖。所以“老子革命幾十年都沒有住上空調(diào)房，小老鼠還要住空調(diào)房”的論調(diào)一度甚囂塵上，因此動物也就只好養(yǎng)在廁所邊、樓梯口、陽臺上。這樣的動物質量無法保證，實驗結果難以令人信服，科研成果的價值大打折扣。我國的實驗動物管理法規(guī)制定起步比較晚。1988年11月14日，《實驗動物管理條例》實施。這是我國第一部實驗動物管理法規(guī)，從此我國實驗動物管理走上了法制化軌道。十幾年來，先后發(fā)布了國家和地方法規(guī)100余項。其核心是對實驗動物及其環(huán)境設施實行質量合格證制度；各有關部門也制定了相應的配套規(guī)章及地方法規(guī)，關于實驗動物標準也相繼制定，基本形成了法制化管理體系，還很不完善，但正如國際實驗動物學會主席、加拿大的魯塞爾教授所說：“新中國的實驗動物事業(yè)，（從1988年算起）只用了不到10年的時間，走完了西方半個世紀的路程?！?001年國家七部委聯(lián)合下發(fā)《實驗動物許可證管理辦法（試行）》，對實驗動物生產(chǎn)和使用單位實行許可證制度，對從事實驗動物和動物實驗人員實行資格證認可制度。0102其中國家法規(guī)有：《實驗動物管理條例》、《實驗動物質量管理辦法》、《藥品非臨床研究質量管理規(guī)定（試行）》、《國家醫(yī)藥管理局實驗動物管理辦法》、《國家醫(yī)藥管理局實驗動物管理實施細則（試行草案）》、《醫(yī)學實驗動物管理實施細則》、《衛(wèi)生部實驗動物管理委員會合格證管理辦法》、《中國科學院實驗動物管理暫行條例》、《中華人民共和國實驗動物47項國家標準》、《中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)學實驗動物標準》、《實驗動物種子中心管理辦法》、《國家嚙齒類實驗動物種子中心引種、供種實施細則》、《省級實驗動物質量檢測機構技術審查準則》、《省級實驗動物質量檢測機構技術審查細則》、《關于當前認可證發(fā)放過程中有關實驗動物種子問題的處理意見》等。其中北京在1996年人大立法通過了《北京市實驗動物管理條例》，2004年又進行了修訂；湖北省2003年借SARS病毒源于動物的契機積極加強實驗動物管理，于2005年人大立法通過《湖北省實驗動物管理條例》；2008年云南省實驗動物立法通過正式實施《云南省實驗動物管理條例》，遼寧省和重慶市分別以省長令、市長令的形式發(fā)布了“實驗動物管理辦法”；其他省市如天津市、山東、江蘇、湖南、吉林、河北、甘肅、江西、安徽等省已頒布或正在研究制定實驗動物管理條例和有關管理法規(guī)。廣東地區(qū)實驗動物工作現(xiàn)狀廣東省是醫(yī)藥大省，醫(yī)藥收入占有國民經(jīng)濟重要成分，同時廣東省又是我國醫(yī)藥產(chǎn)品進出口的重要口岸（約占全國的60％多）。實驗動物在廣東省的科學研究和社會經(jīng)濟發(fā)展中起著重要作用，受到廣東省政府和科技工作者的高度重視，“九五”期間，我省的實驗動物建設相關研究和技術水平發(fā)展迅速，實驗動物管理、設施條件建設、學科建設、人才培養(yǎng)、學術交流于合作等方面取得較大進展，為廣東省科學技術和地區(qū)經(jīng)濟的發(fā)展起到了支撐和促進作用，實驗動物管理與建設向法制化、標準化、規(guī)?；⑸鐣?、產(chǎn)業(yè)化和商品化的目標邁進了一大步。但與迅速發(fā)展的科學技術的要求仍有差距，存在結構不合理、發(fā)展不平衡、資金投入不足、人才缺乏等問題。0102廣東省實驗動物學會中國水生實驗動物專業(yè)委員會中國中醫(yī)藥實驗動物專業(yè)委員會廣東省實驗動物技術質量監(jiān)督站廣東省實驗動物質量監(jiān)測所南方醫(yī)科大學比較醫(yī)學研究所（1996年成為實驗動物學碩士點）（2002年招收比較醫(yī)學方向博士研究生）國家實驗用Beagle犬種子基地中國實驗動物科技信息網(wǎng)我國第一個水生實驗動物——劍尾魚培育成功西藏小型豬實驗動物化初步培育成功HBV轉基因小鼠培育成功及商品化生產(chǎn)SPF兔和SPF白化豚鼠種子基地（一）廣東省實驗動物工作特色1988年制定了《廣東省實驗動物管理辦法》。為了落實許可證管理制度。2002年廣東省八個廳局聯(lián)合下發(fā)了《廣東省實驗動物許可證管理細則（試行）》，依法管理，全面推行了實驗動物合格證和許可證制度。2006年開始進行立法調(diào)研推進立法進程，廣東省實驗動物工作在廣東省科技廳的有力領導下，正飛躍發(fā)展，獨具特色，從以前落后狀況一躍據(jù)全國先進行列，僅次于北京和上海。目前機構落實、有國家相關政策指引、標準配套，有一支精干的執(zhí)法隊伍基本形成。因此，亟待對《實驗動物管理條例》立法，使廣東實驗動物工作者及執(zhí)法者有法可依。我校實驗動物工作的現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢011996年成為碩士點；2002年招收比較醫(yī)學博士；2006年成立比較醫(yī)學研究所；自行培育有FMMU白化豚鼠，實驗用西藏小型豬，建立有SPF新西蘭兔及SPF白化豚鼠種群；有近交系Wistar大鼠，成立有南方醫(yī)科大學實驗動物倫理委員會和管理委員會。02優(yōu)勢和特色：2002年，國家實行實驗動物許可證制度以來廣東省最先取得實驗動物生產(chǎn)、使用許可證（軍隊頒發(fā)）；2006年取得廣東省科技廳頒發(fā)的實驗動物生產(chǎn)、使用許可證廣東省首家規(guī)模化生產(chǎn)SPF級大、小鼠，2003年廣東省首家?guī)ь^取消了普通級大、小鼠的生產(chǎn)廣東省首先繁殖裸鼠、SCID鼠、近交系Wistar大鼠、SPF兔等特色實驗動物的單位廣東省唯一一家能夠生產(chǎn)提供SPF級兔和FMMU白化豚鼠的單位，廣東省SPF新西蘭兔和SPF豚鼠的種子基地廣東省最早建立SPF級動物設施的單位廣東省首批取得實驗動物飼料生產(chǎn)許可證國內(nèi)首次進行西藏小型豬實驗動物化培育，填補了廣東省小型豬生產(chǎn)研究領域的空白，取得了廣東省首張“實驗用小型豬動物質量合格證”。成立了“南方醫(yī)科大學實驗動物管理委員會和倫理委員會”，起草的“南方醫(yī)科大學實驗動物管理辦法（試行）”和“南方醫(yī)科大學動物實驗倫理審查指南（試行）”已作為學?！犊蒲泄芾磙k法》內(nèi)容在科研項目實施中貫徹執(zhí)行。3、成績（1）近幾年所獲各類基金一覽表序號課題項目名稱資金來源金額(萬元)啟動時間主持/參與1運用四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)建立HBV全基因的轉基因小鼠模型國家自然科學基金603主持2可調(diào)控胰腺癌轉基因小鼠模型的制備研究省科技計劃項目2003主持3Cre/loxP系統(tǒng)介導的時空表達HBV轉基因小鼠模型的建立省自然科學基金503主持4可視化胰酶外分泌功能轉基因動物的制備及應用研究省科技計劃項目1204主持5蟲草子實體培養(yǎng)基再利用暨功能性預混料開發(fā)研究省科研條件建設項目1005主持續(xù)上表：6人類風濕關節(jié)炎滑膜－軟骨－鼠嵌合體模型研制及應用省科技計劃項目1005主持7SPF級兔和SPF級豚鼠種子基地建設的研究省科研條件建設項目1005主持8西藏小型豬實驗動物化研究省科研條件建設項目1005主持市科研條件建設項目5005合作主持9西藏小型豬遺傳背景分析及標準化分子標記的建立”由顧為望教授指導的博士生李洪濤成功申請）省科技計劃項目1006主持10“西藏藏豬引入廣州地區(qū)的馴化、培育研究”省科技計劃項目1006主持11磁共振受體成像檢測微小肝癌實驗研究國家自然科學基金3106合作主持9合計184

我們將利用醫(yī)學院校的實驗動物學暨比較醫(yī)學學科的交叉優(yōu)勢，與相關科研院所和醫(yī)藥研發(fā)機構聯(lián)合開展西藏小型豬生物醫(yī)學應用研究。1、近交系豬的培育2、加強西藏小型豬遺傳質量控制將分子遺傳學的研究成果與遺傳育種緊密結合，指導遺傳育種工作的實施。3、免疫學研究（細胞水平、分子水平、基因水平）4、SPF西藏小型豬的培育及其在獸用生物制品生產(chǎn)檢定中在應用5、人類疾病西藏小型豬動物模型研發(fā)：

1）建立西藏小型豬感染性疾病模型

2）多種器官移植模型建立

3）心肌梗死、動脈粥樣硬化及糖尿病等人類重大疾病6、轉基因及基因敲除克隆豬的研究

1）四色熒光蛋白轉基因克隆豬研究

2）豬誘導多能性干細胞（iPS）克隆豬

3）人CPT1A-E3G突變基因轉基因克隆豬研究

4）豬iPS嵌合體制作

5）熱休克蛋白轉基因克隆豬研究

6）酪氨酸激酶基因敲除獲得白化藏豬的研究

7）抗PRRS病毒轉基因克隆豬研究工作展望Inthefuture獲得的相關資助項目西藏藏豬引入廣州地區(qū)的馴化培育研究廣東省農(nóng)業(yè)攻關計劃(NO.2006B20201053)西藏小型豬的實驗動物化研究廣州市科研條件建設項目廣東省科研條件建設項目(NO.2005B60302007)西藏小型豬遺傳背景分析及標準化分子標記研究廣東省科研條件建設項目(NO.2006B60101059)西藏小型豬與比格犬和人的血液流變學特性的比較醫(yī)學研究廣東省科技基礎條件建設項目(NO.2007A060305002)無特定病原體(SPF)試驗用西藏小型豬的培育研究廣東省農(nóng)業(yè)攻關計劃項目(NO.2007B020706002)西藏小型豬在藥物臨床前安全評價中的應用研究廣東省科研條件建設項目(NO.2008B60181056)藏豬異地保種、實驗用豬培育及優(yōu)質特色品系培育研究廣東省重大科技攻關計劃項目(NO.2008B030908013)封閉群FMMU白化豚鼠育種及生產(chǎn)標準化研究膠原涂層煅燒復合成骨細胞治療骨缺損的研究類風濕性關節(jié)炎病理模型制作普魯卡因胺抗血小板聚集作用近幾年取得的科研成果成立了南方醫(yī)科大學實驗動物管理委員會和倫理委員會主任委員由業(yè)務副校長擔任，副主任委員由著名學者和實驗動物學專家擔任，委員由各單位負責人和知名專家組成，對實驗動物的生產(chǎn)、繁殖和供應實施規(guī)范化管理。在動物實驗中堅持3R原則，把應用合格實驗動物和在合格動物實驗環(huán)境條件下開展動物實驗作為申報科研課題和鑒定科研成果的基本條件，對使用不合格實驗動物和在不合格動物實驗環(huán)境條件下進行的實驗、檢定或者安全評價結果無效，課題不予申報，成果不予鑒定。南方醫(yī)科大學動物實驗申請表編號：2007—申請日期：年月日一、申請者基本情況科室課題負責人職稱電話E-mail課題名稱課題執(zhí)行人1職稱課題執(zhí)行人2職稱擬實驗時間年月日至年月日二、所需實驗動物品種品系年齡體重性別數(shù)量來源動物質量合格證編號飼養(yǎng)場所環(huán)境設施許可證號實驗場所環(huán)境設施許可證號三、實驗內(nèi)容概述：使用實驗動物的原理；動物實驗的設計和操作程序等四、其它事項：有毒（害）物質的使用；特殊操作和儀器設備等五、課題負責人承諾以上內(nèi)容填寫屬實，本人對動物實驗設計的科學性、合理性和可行性負全責。課題負責人簽字年月日六、動物實驗設施管理部門意見：負責人簽（章）：年月日南方醫(yī)科大學實驗動物倫理審查表課題名稱：課題負責人：項目意義及必要性動物處置方法聲明:我將自覺遵守實驗動物福利倫理原則，隨時接受實驗動物倫理委員會的監(jiān)督與檢查，如違反規(guī)定，自愿接受處罰。聲明人簽（章）：

年月日倫理委員會審批意見：審查人簽（章）南方醫(yī)科大學實驗動物倫理委員會批準人簽（章）年月日填表說明：1、課題負責人、執(zhí)行人均需在聲明人簽字欄簽字。2、需隨申請書遞交審查資料（電子文檔及書面資料各一份）。要求寫明項目的意義、必要性、項目中有關實驗動物的用途、飼養(yǎng)管理或實驗處置方法、預期出現(xiàn)的對動物的傷害、處死動物的方法、項目進行中涉及動物福利和倫理問題的詳細描述。倫理審查依據(jù)的基本原則：動物保護原則：禁止無意義濫用和濫殺實驗動物；制止沒有科學意義或不必要的動物實驗；優(yōu)化動物實驗方案以減少不必要的動物使用量。動物福利原則：保證實驗動物生存時包括運輸中享有最基本的權利，享有免受饑渴、生活舒適自由，享有良好的飼養(yǎng)和標準化的生活環(huán)境。倫理原則：應充分考慮動物的利益，善待動物，防止或減少動物的應激、痛苦和傷害，尊重動物生命，制止針對動物的野蠻行為，采取痛苦最少的方法處置動物。綜合性科學評估原則：公正性：倫理委員會的審查工作應保持獨立、公正、科學、民主，不受政治、商業(yè)和自身利益的影響；必要性：各類實驗動物飼養(yǎng)、使用或處置需要的充分理由；兼顧人類和實驗動物的利益平衡.實驗動物生產(chǎn)情況品種SPF級普通級小鼠BALB/cBALB/c-nuNIHKMSCIDC57BL大鼠SDWistar豚鼠FMMU白化豚鼠（省種子基地）三色豚鼠白化豚鼠兔新西蘭兔（省種子基地）新西蘭兔豬/犬比格犬西藏小型豬特色品種SPF級新西蘭兔FMMU白化豚鼠FMMU白化豚鼠西藏小型豬特色實驗動物SPF兔實驗用西藏小型豬FMMU白化豚鼠Wistar近交系大鼠本實驗中心已開展的疾病模型工作（一）基因工程動物模型顯微注射法轉基因技術平臺胰蛋白酶原Ⅱ轉基因小鼠綠色熒光蛋白轉基因小鼠1.3copyC型HBV轉基因小鼠轉基因克隆和體細胞基因打靶技術平臺TYR基因敲除西藏小型豬紅、黃、藍、綠四色熒光蛋白轉基因克隆西藏小型豬慢病毒載體法紅色熒光蛋白轉基因小鼠整體成像儀下的轉基因小鼠胰腺組織冷凍切片結果（普通光源,200×）胰腺組織冷凍切片結果（熒光光源,200×）01利用顯微注射法建立綠色熒光蛋白轉基因小鼠02整體成像儀觀察F0代的小鼠SelectationofG418resistantclonesby500ug/mlG418fortwoweeksnucleartransfer:cellsco-expressingfourfluorescentproteinswereselectedasnucleidonorssurrogates—TibetminiaturepigsLinearpEGFPC1,pEYFPN1,pECFPN1andpDsRed-N1respectivelytransfectedintoporcinefetalfibroblastcells(Landrace)byelectroporationsimultaneously轉基因克隆方法制備紅、黃、藍、綠四色熒光蛋白轉基因西藏小型豬clonedpigletsTransgenicfetalfibroblasts(A-E)SurrogatemotherClonedpigletsskintissueofclonedpiglets(H-L),Non-transgenictissue(Non)ascontroltotransgenictissue(Tg)hai