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胃腸運(yùn)動(dòng)的直接觀察離體腸段平滑肌運(yùn)動(dòng)的描記目的:1.動(dòng)物在體胃腸運(yùn)動(dòng)及調(diào)節(jié)
2.了解腸段平滑肌的生理特性
3.學(xué)習(xí)離體腸段平滑肌運(yùn)動(dòng)描記的實(shí)驗(yàn)方法原理:胃腸道平滑肌經(jīng)常維持一定的緊張性收縮,在體內(nèi)受到神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)。在神經(jīng)及某些藥物的作用下,這種緊張性及運(yùn)動(dòng)節(jié)律可發(fā)生改變。神經(jīng)調(diào)節(jié)中,副交感神經(jīng)通過釋放乙酰膽堿使其運(yùn)動(dòng)加強(qiáng),交感神經(jīng)通過釋放去甲腎上腺素使其運(yùn)動(dòng)減弱。原理:胃腸道平滑肌以膽堿能神經(jīng)占優(yōu)勢(shì),小劑量或低濃度的乙酰膽堿能激動(dòng)M受體,產(chǎn)生與興奮膽堿能神經(jīng)節(jié)后纖維相似的作用,興奮胃腸道平滑肌。阿托品與膽堿受體結(jié)合阻斷膽堿能遞質(zhì)從而產(chǎn)生抗膽堿作用。新思的明作為膽堿酯酶的抑制劑,抑制乙酰膽堿的分解,使乙酰膽堿的作用持續(xù)加強(qiáng)。12原理:消化道平滑肌的特點(diǎn)是興奮性較低,收縮緩慢,富有伸展性,具有緊張性,自動(dòng)節(jié)律性,對(duì)化學(xué)物質(zhì),溫度和機(jī)械牽張刺激較敏感等特點(diǎn),給予離體腸肌一接近于在體情況的適宜環(huán)境,消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。本實(shí)驗(yàn)觀察當(dāng)模擬內(nèi)環(huán)境發(fā)生變化時(shí),離體小腸平滑肌運(yùn)動(dòng)的變化。12消化道平滑肌一般特性:01020304興奮性低,收縮緩慢(靜息電位變化大,-50至-60mv,由大量K+外流、少量Na+和Cl-內(nèi)流形成),伸展性自動(dòng)節(jié)律性(BER,節(jié)律自動(dòng)去極化、復(fù)極化的緩慢慢波電位;一旦去極化達(dá)到閾電位-40mv,大量Ca2+和少量Na+快速內(nèi)流即產(chǎn)生動(dòng)作電位)緊張性05對(duì)化學(xué)、溫度和機(jī)械牽張刺激的敏感性慢波電位(基本電節(jié)律)頻率:胃3次/min;十二指腸12次/min;回腸末端8-9次/min1波幅:10-15mV2產(chǎn)生機(jī)制:可能與細(xì)胞膜上生電性鈉泵的活動(dòng)有關(guān)。3動(dòng)作電位4特點(diǎn):鋒電位上升慢、時(shí)程較長(10-20ms)、幅值較低。5產(chǎn)生機(jī)制:主要是Ca2+內(nèi)流601原理:02該實(shí)驗(yàn)方法不僅在理論上證明平滑肌的生理特性,而且還可用來測(cè)量化學(xué)物質(zhì)或藥物的生理學(xué)特性,被稱為生物學(xué)鑒定法。家兔,手術(shù)臺(tái),手術(shù)器械,麥?zhǔn)显〔?,恒溫水浴,RM6240,張力換能器,氧氣袋,鐵架臺(tái),燒杯,酒精燈,滴管,注射器,臺(tái)氏液,阿托品(0.5mg/ml),新思的明(1mg/ml)0.01%腎上腺素,0.01%乙酰膽堿,1mol/LNaOH,1mol/LHCl方法與步驟:胃腸運(yùn)動(dòng)觀察:手術(shù)操作:家兔稱重,麻醉將兔子仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上剪腹部毛,沿腹中線切口,剖開腹腔,暴露胃腸。方法與步驟:實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目:觀察正常情況下胃和小腸的運(yùn)動(dòng)。注意其緊張度(可用手觸摸胃測(cè)其緊張度)。由耳緣靜脈靜脈注射新思的明0.25ml,或滴幾滴于胃腸漿膜上,觀察胃和小腸運(yùn)動(dòng)的變化。在新思的明作用的基礎(chǔ)上,注射阿托品0.25ml,觀察胃和小腸運(yùn)動(dòng)的變化。離體小腸平滑肌的生理特性:實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:裝備麥?zhǔn)显〔郏瑢⑵浞胖糜?7℃恒溫水浴。麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)盛滿37℃臺(tái)氏液,將充滿氧氣的球膽經(jīng)橡皮管連接至麥?zhǔn)显〔垡倚屯夤苌?,不斷注入氧氣,調(diào)節(jié)氣流速度,使氣泡一個(gè)接一個(gè)注入。RM6240方法與步驟:No.1在幽門下端分離十二指腸3-4cm,雙結(jié)扎此腸段,于雙結(jié)扎中間將腸段剪斷,用臺(tái)氏液反復(fù)沖洗腸內(nèi)容物,在其兩端穿線,將一端固定于麥?zhǔn)显〔垡倚屯夤軖煦^上,另一端與張力換能器相連。No.2待此裝置穩(wěn)定10-20分鐘后,使用RM6240記錄小腸段平滑肌運(yùn)動(dòng)曲線。方法與步驟:觀察記錄37℃臺(tái)氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。01觀察記錄25℃臺(tái)氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。02實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目:方法與步驟:待平滑肌穩(wěn)定后,加入0.01%腎上腺素3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動(dòng)的變化。然后用臺(tái)氏液反復(fù)沖洗并更換新的臺(tái)氏液。02待臺(tái)氏液溫度穩(wěn)定在37℃后,用滴管向浴槽中加入0.01%乙酰膽堿3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動(dòng)的變化。然后用臺(tái)氏液反復(fù)沖洗并更換新的臺(tái)氏液。01方法與步驟:01滴加1mol/LHCl溶液3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動(dòng)的變化。然后用臺(tái)氏液反復(fù)沖洗并更換新的臺(tái)氏液。02滴加1mol/LNaOH溶液3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動(dòng)的變化。然后用臺(tái)氏液反復(fù)沖洗并更換新的臺(tái)氏液。注意事項(xiàng):實(shí)驗(yàn)操作過程中,注意動(dòng)物保溫。經(jīng)常用溫?zé)岬纳睇}水濕潤胃腸。01取小腸標(biāo)本時(shí)勿牽拉;標(biāo)本安裝好后應(yīng)在臺(tái)氏液里穩(wěn)定5-10分鐘,待標(biāo)本有收縮活
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