免疫學(xué)技術(shù) 酶促化學(xué)發(fā)光免疫分析（臨床免疫檢驗(yàn)）

酶促化學(xué)發(fā)光免疫分析在我國免疫體外診斷行業(yè)中，化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)憑借其高靈敏度、高特異性，檢測時(shí)間短，可定量檢測，可實(shí)現(xiàn)自動化的特點(diǎn)，成為主流技術(shù)被廣泛應(yīng)用于臨床診斷和科研。我國化學(xué)發(fā)光行業(yè)發(fā)展起步較晚，從國內(nèi)化學(xué)發(fā)光企業(yè)的整體技術(shù)水平來看，大部分國產(chǎn)體外診斷產(chǎn)品依然采用酶促發(fā)光技術(shù)前言酶促化學(xué)發(fā)光免疫分析(ECLIA)是用參與催化某一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的酶標(biāo)記抗原或抗體，發(fā)光底物在酶的催化下發(fā)光，通過測定發(fā)光強(qiáng)度以實(shí)現(xiàn)對待測物質(zhì)的免疫分析，也稱之為發(fā)光酶免疫分析(LEIA)酶促化學(xué)發(fā)光免疫分析酶促化學(xué)發(fā)光免疫分析酶促反應(yīng)發(fā)光劑利用標(biāo)記酶的催化作用使底物發(fā)光這一類需酶催化后發(fā)光的物質(zhì)稱為酶促反應(yīng)發(fā)光劑酶促發(fā)光免疫分析根據(jù)發(fā)光底物性質(zhì)分類化學(xué)發(fā)光酶免疫分析熒光酶免疫分析采用熒光底物測定熒光強(qiáng)度采用發(fā)光底物測定光強(qiáng)度發(fā)光底物發(fā)光底物1.魯米諾及其衍生物：是HRP最常用的發(fā)光底物2.對-羥基苯乙酸：是HRP的熒光底物熒光底物1.AMPPD：是ALP常用的發(fā)光底物2.4-甲基傘形酮磷酸鹽：是ALP的熒光底物辣根過氧化物酶(HRP)的發(fā)光底物堿性磷酸酶(ALP)的發(fā)光底物檢測原理酶促發(fā)光免疫分析屬于非均相免疫分析系統(tǒng)測定前，需采用固相吸附分離方法將結(jié)合標(biāo)記物(B)和游離標(biāo)記物(F)分離根據(jù)固相載體的不同酶促化學(xué)發(fā)光又分為板式化學(xué)發(fā)光和微粒子化學(xué)發(fā)光板式化學(xué)發(fā)光板式化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測原理微粒子化學(xué)發(fā)光發(fā)光酶免疫分析檢測原理微粒子化學(xué)發(fā)光熒光酶免疫分析檢測原理分離技術(shù)1用抗原或抗體包被磁顆粒，通過一定反應(yīng)模式在磁場將結(jié)合狀態(tài)和游離狀態(tài)酶標(biāo)記物進(jìn)行分離磁顆粒分離法包被載體為無磁性微粒子，用纖維膜柱子進(jìn)行酶標(biāo)記物的結(jié)合狀態(tài)和游離狀態(tài)的分離微粒子捕獲法23在聚苯乙烯反應(yīng)珠或反應(yīng)孔上包被已知抗體，通過洗滌將結(jié)合狀態(tài)和游離狀態(tài)的酶標(biāo)記物進(jìn)行分離包被聚苯乙烯珠或孔分離法方法評價(jià)01040203采用納米微球作為固相載體，比表面積大，結(jié)合抗體的容量大，從而拓寬了分析的線性范圍酶催化發(fā)光底物發(fā)出的光穩(wěn)定，持續(xù)時(shí)間長，與色源底物相比，具有更高的分析敏感度自動化水平較高酶促發(fā)光免疫分析采用酶蛋白作為標(biāo)記物其活性易受環(huán)境因素影響臨床應(yīng)用激素貧血因子腫瘤標(biāo)記物病原體血清標(biāo)志物甲狀腺激素生殖激素腎上腺激素垂體激素維生素B12葉酸紅細(xì)胞葉酸鐵蛋白AFPCEAPSACA19-9HBsAgHBsAbHBeAgHBeAb胰島素C-肽肌紅蛋白肌鈣蛋白骨膠原酶脫氧吡啶啉總lgE特異性lgE茶堿地高辛環(huán)孢素巴比妥治療藥物監(jiān)測過敏性疾病骨代謝糖尿病和心血管疾病01020304酶促化學(xué)發(fā)光免疫分析的方法類型酶促化學(xué)發(fā)光免疫分析的關(guān)鍵技術(shù)酶促化學(xué)發(fā)光免疫分析的臨床應(yīng)用

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