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文檔簡介
輸血科標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP文件
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血庫標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)
-01修訂
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目錄
第一章血庫儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
第一節(jié)Dianafuge標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)
程.........................3
第二節(jié)80-2離心機(jī)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)
程........................3
第三節(jié)CU600型電熱恒溫水箱標(biāo)準(zhǔn)操作程
序...................4
第四節(jié)SANYOMBR-107D(H)貯血冰箱標(biāo)
準(zhǔn)操作程序.............4
第五節(jié)Haier低溫冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作程
序.......................4
第六節(jié)海爾冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作程
序.........................5
第七節(jié)醫(yī)院血庫管理軟件應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)
程...................5
第八節(jié)SJW系列數(shù)碼恒溫血小板振蕩保存箱標(biāo)
準(zhǔn)操作規(guī)程............6
第九節(jié)WGH-I型數(shù)碼恒溫解凍箱標(biāo)準(zhǔn)
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操....................6
第二章血庫項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
第一節(jié)血樣采集和送檢、血型復(fù)查及血源組
織標(biāo)準(zhǔn)操作程序...........7
第二節(jié)ABO&Rh(D)血型復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)
程..................8
第三節(jié)Rh血型鑒定標(biāo)準(zhǔn)操作程
序.......................9
第四節(jié)紅細(xì)胞血型抗體篩查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)
程...................11
第五節(jié)抗人球蛋白試
驗(yàn)...........................14
第六節(jié)血液交叉配血試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)
程....................15
第七節(jié)血液出庫(發(fā)血)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)
程....................17
第八節(jié)數(shù)據(jù)記錄及費(fèi)用收取標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)
程...................17
第九節(jié)血液申領(lǐng)、入庫、核對(duì)、貯存標(biāo)準(zhǔn)操
作規(guī)程...............19
第十節(jié)血液報(bào)廢(失效)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)
程.....................19
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第十一節(jié)輸血反應(yīng)處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)
程......................20
第十二節(jié)實(shí)驗(yàn)室消毒和污物處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)
程..................21
第十三節(jié)血庫交接班標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)
程.......................21
第十四節(jié)血液質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)
程......................22
第十五節(jié)血庫夜班操作規(guī)
范..........................23
第十六節(jié)應(yīng)急預(yù)案操作規(guī)
程..........................24
第十七節(jié)貯存式自身輸血(PABD)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)
程.................26
第十八節(jié)臨床醫(yī)師用血申請(qǐng)操作規(guī)
程......................28
第十九節(jié)臨床護(hù)士輸血操作規(guī)
程........................28
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血庫標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
第一章血庫儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
第一節(jié)Dianafuge標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
一、Dianafuge標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
(一)Dianafuge開/關(guān)機(jī)程序
1.開機(jī)
把儀器電源開關(guān)撥到“I”(開)的位置,開
始正確運(yùn)行。
2.關(guān)機(jī)
把儀器電源開關(guān)撥到“0”(關(guān))的位置。
(二)Dianafuge標(biāo)準(zhǔn)操作程序
1.Dianafuge離心機(jī)應(yīng)放置于水平臺(tái)桌上,
電源(壓)須匹配。
2.離心機(jī)在離心前,先按|OPEN|,此時(shí)門
蓋打開,放入檢測(cè)卡(需對(duì)稱放置),放入完畢
后,用手把門蓋按下,然后按ISTARTI,離心機(jī)
開始轉(zhuǎn)動(dòng),10分鐘后自動(dòng)報(bào)警開門蓋,取出卡
片,最后把門蓋按下關(guān)好。
二、Diana-Incubator標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
(一)Diana-Incubator開/關(guān)機(jī)程序
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1.開機(jī)
①按順序依次打開電源開關(guān)。
②把儀器電源開關(guān)撥到“I”(開)的位置,
開始正確運(yùn)行。
2.關(guān)機(jī)
把儀器電源開關(guān)撥到“0”(關(guān))的位置。
(二)Diana-Incubator標(biāo)準(zhǔn)操作程序
1.Diana-Incubator孵育器應(yīng)放置于水平臺(tái)
桌上,電源(壓)須匹配。
2.孵育器的使用,用手開啟門蓋,放入檢
測(cè)卡,按所需要的保溫(其溫度自動(dòng)調(diào)節(jié)保持為
37℃)時(shí)間,順時(shí)針旋轉(zhuǎn)選擇所需時(shí)間,到時(shí)后
會(huì)報(bào)警提示,開門蓋取出卡片后關(guān)蓋。
第二節(jié)CH80-2離心機(jī)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
一、CH80-2離心機(jī)開/關(guān)機(jī)程序
1.開機(jī)
①插上電源
②把電源開關(guān)撥到6配位置,開始正確運(yùn)
行。
2.關(guān)機(jī)
按依次順序把儀器電源開關(guān)撥到藥的位
置。
二、CH80-2離心機(jī)標(biāo)準(zhǔn)操作程序
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1.電源開關(guān)撥到位置
2.離心試管需等重量對(duì)稱放置。
3.按時(shí)間開關(guān)調(diào)至所需離心時(shí)間。
4.再把轉(zhuǎn)速開關(guān)調(diào)至所需離心轉(zhuǎn)速。
5.按啟動(dòng),開始正確運(yùn)行。
5.停止運(yùn)轉(zhuǎn)后取出標(biāo)本。
第三節(jié)CU600型電熱恒溫水箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
CU600型電熱恒溫水箱標(biāo)準(zhǔn)操作程序
1.在水箱內(nèi)加入清潔溫水至總高度1/2~2/3
處。
2.接通電源,選擇工作溫度。
說明操作顯示備注
設(shè)定工按“SET”預(yù)先設(shè)定溫度值顯
37.0
作溫度鍵示閃爍
增加設(shè)
按“+”數(shù)值增加,顯示閃
定溫度52.5
鍵爍
值
減少設(shè)
按“數(shù)值減少,顯示閃
定溫度30.0
鍵爍
值
確定工按“SET”25.0新設(shè)定溫度儲(chǔ)存
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作溫度I鍵II后,顯示箱內(nèi)溫度
3.水槽進(jìn)入升溫狀態(tài),加熱指示燈亮。當(dāng)
箱內(nèi)溫度接近設(shè)定溫度時(shí),加熱指示燈閃爍,到
達(dá)設(shè)定溫度后,控制進(jìn)入恒溫狀態(tài)。
4.水浴箱工作溫度波動(dòng)范圍應(yīng)控制在±1℃
左右,定期用校正過的溫度計(jì)進(jìn)行校正。
5.水浴箱內(nèi)外應(yīng)保持清潔,每周定期清洗
更換清水,經(jīng)常保持水箱內(nèi)水質(zhì)干凈。
第四節(jié)SANYOMBR-107D(H)貯血冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
SANYOMBR-107D(H)貯血冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作程序
1.接通電源,把電源開關(guān)撥到巨迎位置,
開始正確運(yùn)行。
2.溫度控制在2?6℃范圍內(nèi),實(shí)際運(yùn)行
溫度在4℃左右,工作溫度波動(dòng)范圍應(yīng)控制在土
以內(nèi),定期(時(shí))用校正過的溫度計(jì)進(jìn)行校
正。
3.溫度每天記錄四次(晨8時(shí)、上午11時(shí),
下午4時(shí)、晚8時(shí))的溫度,如溫度超出正常范
圍,警報(bào)器會(huì)自動(dòng)報(bào)警,須及時(shí)進(jìn)行處理。
4.每月對(duì)貯血冰箱內(nèi)的溫度芯片進(jìn)行檢查
并作記錄于電腦中,以免查詢。
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5.貯血冰箱內(nèi)外應(yīng)保持清潔,嚴(yán)禁存放她
物;每周清洗消毒一次,用2%戊二醛溶液或施
康I(1:100)消毒;每月冰箱內(nèi)空氣培養(yǎng)一次。
無霉菌生長或培養(yǎng)皿(90mm)細(xì)菌生長菌落
<8CFU/10分鐘或<200CFU/M3為合格,結(jié)果須
登記在記錄本上。
第五節(jié)Haier低溫冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
Haier低溫冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作程序
1.接通電源,把電源開關(guān)撥到我位置,
開始正確運(yùn)行。
2.溫度控制在-30C左右范圍內(nèi),實(shí)際運(yùn)行
溫度波動(dòng)范圍應(yīng)控制在-32℃±3左右,定期(時(shí))
用校正過的溫度計(jì)進(jìn)行校正。
3.溫度每天記錄四次(晨8時(shí)、上午11時(shí),
下午4時(shí)、晚8時(shí))的溫度,如溫度超出正常范
圍,警報(bào)器會(huì)自動(dòng)報(bào)警,須及時(shí)進(jìn)行處理。
4.每月對(duì)低溫冰箱內(nèi)的溫度芯片進(jìn)行檢查
并作記錄于電腦中,以免查詢。
5.定期進(jìn)行化霜清洗消毒。
第六節(jié)海爾冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
海爾冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作程序
1.接通電源,把電源開關(guān)撥到京位置,
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開始正確運(yùn)行。
2.溫度控制在2~8℃左右范圍內(nèi),實(shí)際運(yùn)
行溫度波動(dòng)范圍應(yīng)控制在5℃±2左右,定期
(時(shí))用校正過的溫度計(jì)進(jìn)行校正。
3.溫度每天記錄兩次(上午8時(shí),下午4
時(shí))的溫度,如溫度超出正常范圍,須及時(shí)進(jìn)行
處理。
第七節(jié)醫(yī)院血庫管理軟件應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
醫(yī)院血庫管理軟件應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)操作程序
一、開機(jī)
1.接通電源,開主機(jī)按下①電源開關(guān),同
時(shí)按Ctrl+Alt+Delete----按回車。
2.雙擊醫(yī)院用血管理信息系統(tǒng),輸入本人
的工號(hào)一一按回車鍵一一再回車一一醫(yī)院血庫
管理軟件系統(tǒng)。
二、血液入庫
點(diǎn)擊入庫——點(diǎn)擊新增,輸入血卡號(hào)、血袋
號(hào)、血型、血液類別、血量、采血日期,保存即
可。
三、患者檔案建立
在配發(fā)血前自先將患者檔案輸入電腦內(nèi)。
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點(diǎn)擊【患者檔案】出現(xiàn)患者登記菜單一一點(diǎn)
擊新增進(jìn)入第二聯(lián)患者登記菜單,然后輸入患
者檔案,保存。再輸入其它患者檔案至輸完為止。
如門診病人,能夠輸入就診卡號(hào)。
四、交叉配血
帶有紅細(xì)胞的血液均需做血液交叉配血試
驗(yàn)
直接點(diǎn)擊配血一一出現(xiàn)配血操作菜單一一選
擇入院類型一一輸入患者住院號(hào)、用激光掃描
儀,掃描血袋號(hào)條形碼,出現(xiàn)配血菜單,輸入配
血方法等(已有默認(rèn)結(jié)果)一一按確定,然后
再掃描第二或第三個(gè)助血員的血袋號(hào)條形碼,-
一按確定一一保存一一取消(不打配血收費(fèi)單
時(shí))——退出。
五、出庫(發(fā)血)
直接點(diǎn)擊出庫,出現(xiàn)發(fā)血操作菜單一一選擇
入院類型一一輸入住院號(hào)、用激光掃描儀,掃描
血袋號(hào)條形碼,再掃描第二或第三個(gè)血袋號(hào)條形
碼,一一點(diǎn)擊配血單一一打印血液交叉配合試驗(yàn)
報(bào)告單一一點(diǎn)擊反饋卡一一打印患者輸血不良
反應(yīng)反饋單一一再保存一一取消(不打收費(fèi)單
時(shí))——退出。
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血漿、血小板不需要配血的血液發(fā)血,直接點(diǎn)
擊出庫,并按以上進(jìn)行操作。
第八節(jié)SJW系列數(shù)碼恒溫血小板振蕩保存箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
SJW系列數(shù)碼恒溫血小板振蕩保存箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
1.開機(jī)
①打開電源開關(guān)。
②把儀器電源開關(guān)撥到“I”(開)的位置,
開始正確運(yùn)行。
③打開門,把振蕩箱電源開關(guān)撥到“I”(開)
的位置,振蕩箱開始振蕩運(yùn)行,并顯示
箱內(nèi)溫度22±2℃o
④拉開抽屜,把血小板袋平整放入,注意不
要外露,以免箱體在運(yùn)行時(shí)夾破血小板袋。然后,
關(guān)上抽屜和門讓其運(yùn)行。
2.關(guān)機(jī)
按依次順序把振蕩箱電源開關(guān)撥到“0”(關(guān))
的位置,振蕩箱停止運(yùn)行,然后關(guān)門,再
把儀器電源開關(guān)撥到“0”(關(guān))的位置。
3.消毒
按下消毒鍵,打開電源開關(guān),系統(tǒng)進(jìn)入消毒
狀態(tài)(設(shè)為20分鐘),消毒完畢后,先關(guān)消毒鍵,
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再關(guān)閉電源開關(guān)。
第九節(jié)WGH-I型數(shù)碼恒溫解凍箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
WGH-I型數(shù)碼恒溫解凍箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
1.開機(jī)
①水箱內(nèi)注入清水;
②按順序依次打開電源開關(guān)。
2.融化周期
①裝載:將冷凍血漿袋套進(jìn)外包裝袋,掛到
籃架上;
②編程:設(shè)定融化周期時(shí)間,按下啟動(dòng)鈕;
③振蕩:掛籃降入水箱中,開始振蕩周期;
④上升:融化周期結(jié)束后,掛籃自動(dòng)升出水
面。
3.清潔
每周定期清洗更換清水,經(jīng)常保持水箱內(nèi)水
質(zhì)干凈。
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第二章血庫項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
第一節(jié)血樣采集和送檢、標(biāo)本核收、血型復(fù)查及血源組織標(biāo)準(zhǔn)操作程序
一、血樣采集和送檢與輸血申請(qǐng)單核收標(biāo)準(zhǔn)操作程序
采集血樣
1.采血護(hù)士:采集配血血樣,護(hù)士要求必須
有初級(jí)以上護(hù)士職稱,實(shí)習(xí)/進(jìn)修護(hù)士不得單獨(dú)
進(jìn)行。
2.明確病人用血申請(qǐng),核對(duì)病人信息:姓名、
性別、年齡、住院號(hào)、科別、床號(hào)等信息。
3,準(zhǔn)備采血材料,并明確以下內(nèi)容。
①正確的標(biāo)本:取材正確;
②正確的標(biāo)本量:血型復(fù)查(血交叉)標(biāo)本
抽取3ml;
③正確的標(biāo)識(shí):條形碼號(hào)標(biāo)簽或手工書寫標(biāo)
簽,但必須明確標(biāo)明姓名、科室床號(hào)、住院號(hào)。
4.采集血樣過程:
①確保在采集血樣時(shí),床邊正確的核對(duì)患
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者;
②正確地給血樣試管貼標(biāo)簽:血樣采集后,
在床邊給血樣貼標(biāo)簽,而不應(yīng)該事先貼好標(biāo)簽或
到護(hù)士站后貼標(biāo)簽;
③第一次輸血,應(yīng)同時(shí)采集輸血前五項(xiàng)檢測(cè)
血樣,并記錄抽取時(shí)間入病歷。
5.采血樣完成后,再次核對(duì)血樣標(biāo)識(shí)與申請(qǐng)
單信息,無誤后送輸血科,并進(jìn)行護(hù)理記錄。
6.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求:
①正確完整的血樣標(biāo)識(shí),與申請(qǐng)單一致;
②正確地核對(duì)與采血過程;
③標(biāo)本無溶血、不能在輸液處采集血樣;
④正確地記錄。
送收血樣
1.送血樣人員必須是醫(yī)護(hù)人員,嚴(yán)禁患者
家屬送血樣。
2.血樣送到輸血科后應(yīng)由送血人員和輸血
科人員一起核對(duì)以下信息:
①血樣信息與申請(qǐng)單信息是否一致;
②核對(duì)查看申請(qǐng)單的完整性(必須有血常規(guī)
+血型結(jié)果)、血樣標(biāo)識(shí)的完整性(必須內(nèi)容齊全、
文字清楚);
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③血樣標(biāo)本量、有無溶血;
④雙方核對(duì),無誤后簽字交接。
3.有以下情況,輸血科拒絕收血樣:
①血樣標(biāo)識(shí)不完整;
②血樣無標(biāo)識(shí);
③標(biāo)本量不足、血樣質(zhì)量有問題;
④無輸血申請(qǐng)單或申請(qǐng)單上無血常規(guī)+血型的
結(jié)果。
4.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求
①血樣信息完整無誤;
②血樣質(zhì)量符合要求及采集量正確。
血型復(fù)查核收
1.核對(duì):按要求核對(duì)輸血申請(qǐng)單與血標(biāo)本上
的全部內(nèi)容,并在標(biāo)本接收簿中作記錄;
2.核收:在檢驗(yàn)之星中,進(jìn)行血型復(fù)查醫(yī)囑
的核收;
3.血型復(fù)檢及不完全抗體測(cè)定(具體
操作詳見有關(guān)章節(jié));
4.核對(duì)輸血申請(qǐng)單、血標(biāo)本、病歷中
的姓名、住院號(hào)、血型(如與原始血型不相
符時(shí),必須重新抽取病人標(biāo)本檢測(cè)),正確
無誤后,報(bào)告其血型復(fù)查和抗篩結(jié)果,作記
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錄;
5.輸血申請(qǐng)單按血型類別在文件夾中
放置;血型復(fù)查后的標(biāo)本,按先后次序放在
試管架中。
二、血源組織
1.對(duì)臨床醫(yī)師申請(qǐng)用血種類、用血量
進(jìn)行了解核實(shí),提前備好相應(yīng)血源;
3.血庫存量組織,要求每日存量必須保持在
周用血量的1/2;
當(dāng)發(fā)生重大事件急需大量血液時(shí),按照急診
用血應(yīng)急預(yù)案執(zhí)行
3.特殊血液組織
①緊急用血時(shí),血庫人員在接到特殊用血申
請(qǐng)單時(shí),應(yīng)在第一時(shí)間先向市中心血站報(bào)告用血
種類、用血量和用血時(shí)間等;
②非緊急用時(shí),按規(guī)定須提前1天預(yù)約,由血
庫值班人向血站報(bào)告;
③Rh(D)陰性和其它稀有血型患者的輸血
擇期手術(shù)病人輸血:當(dāng)臨床遇到稀有血型患者
后,應(yīng)對(duì)患者家庭成員、兄弟姐妹進(jìn)行篩選,符
合者到血站體檢獻(xiàn)血,并填寫《稀有血型用血申
請(qǐng)單》。組織到血源后,臨床再擇期手術(shù)用血;
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急診搶救病人緊急輸血:按衛(wèi)生部《臨床輸血
技術(shù)規(guī)范》第十五條Rh(D)檢查可除外。也
可采用自身輸血、同型輸血或配合型輸血。對(duì)緊
急輸用配合型血液時(shí),由經(jīng)管醫(yī)師向患者或其家
屬(代理人)講明,征得同意后方可輸用,由醫(yī)
患雙方共同簽字并載入病歷;
具體實(shí)施可按照稀有血型及應(yīng)急用血管理
條款執(zhí)行
④特殊血液預(yù)約的信息反饋與記錄。
注:
特殊血液是指:單采血小板、洗滌紅細(xì)胞、
冷沉淀、輻照血、Rh(D)陰性和其它稀有血型血
液等
第二節(jié)ABO&Rh(D)血型復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
ABO&Rh(D)血型復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)操作程序
抗A、抗B、抗D血清定型(試管或玻片法)
標(biāo)準(zhǔn)操作程序
【方法原理】
1.ABO血型:根據(jù)紅細(xì)胞上有或無A
抗原或/和B抗原,進(jìn)行紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)。
正定型,是用已知抗一A和抗一B分型血清
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來測(cè)定紅細(xì)胞上有無相應(yīng)的A抗原或/和B
抗原;所謂反定型,是用已知A細(xì)胞和B
細(xì)胞來測(cè)定血清中有無相應(yīng)的抗一A或/和
抗一B。
2.Rh(D)血型:用抗D血清進(jìn)行鑒
定,則凡帶有D抗原者稱為Rh(D)陽性,
不帶D抗原者稱為Rh(D)陰性。
【標(biāo)本采集和處理】
1.標(biāo)本采集:常規(guī)靜脈采血3ml于
EDTA.K2o
2.標(biāo)本保存:室溫放置不超過8小時(shí),
4℃保存不超過72小時(shí),無溶血現(xiàn)象。
【試劑】
1.抗A抗B血型定型試劑(單克隆抗體長
春博德)
2.Anti-D(IgM)Biotesto
3.5%及0型試劑紅細(xì)胞鹽水懸液,制備方
法見附注。
【操作步驟】
1.取小試管3支(或玻片一張劃成三等分),
分別標(biāo)明抗A、抗B、抗D,用滴管分別加抗A、
抗B、抗D分型血清各1滴,再以滴管分別加受
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檢者5%紅細(xì)胞(取1滴壓積紅細(xì)胞加16滴生
理鹽水)懸液1滴,混和。
2.另取小試管3支(或玻片一張劃成三等
分),分別標(biāo)明A、B、O細(xì)胞,用滴管分別加入
受檢者血清1滴,再分別滴加A、B、O型5%
試劑紅細(xì)胞懸液1滴,混和。
3.立即以1000"min離心Imin(或?qū)⒉F?/p>
不斷輕輕轉(zhuǎn)動(dòng),使血清與細(xì)胞充分混勻,連續(xù)約
15min)o
4.將試管輕輕搖動(dòng),先以肉眼觀察有無凝
集(或溶血)現(xiàn)象。如肉眼不見凝集,應(yīng)將反應(yīng)
物倒于玻片上,再以低培鏡檢查。
5.觀察結(jié)果時(shí)既要看有無凝集,更要注意
凝集強(qiáng)度,此有助于A、B亞型、類B或cisAB
的發(fā)現(xiàn)。
6.凝集強(qiáng)度判斷標(biāo)準(zhǔn):
4+=紅細(xì)胞凝集成一大塊,血清清晰透明。
3+二紅細(xì)胞凝集成數(shù)小塊,血清尚清晰。
2+=紅細(xì)胞凝塊分散成許多小塊,見到游離
紅細(xì)胞。
1+二肉眼可見大顆粒,周圍有較多游離紅細(xì)
胞。
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土=鏡下可見數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起,周圍
有很多游離紅細(xì)胞。
MF二混合凝集外觀(mixedfield)是指鏡下
可見少數(shù)紅細(xì)胞凝集,而極大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分
散分布。
一表示陰性,鏡下未見凝集,紅細(xì)胞均勻分
布。見表2—1
表2—1ABO血型正反定型結(jié)果
分型血清+受檢者受檢者血清+試
紅細(xì)胞受檢者劑紅細(xì)胞
抗一A抗一血型A細(xì)胞B細(xì)
B抗一A+B胞O細(xì)胞
+
—++
A
+
B
++
O+
+
AB
+
++
注:+=凝集;一=不凝集。
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7.“AB”注意冷凝集或自身凝集,能夠在
37c水浴中鑒別。
8.血型復(fù)查結(jié)果輸入檢驗(yàn)之星中,核對(duì)后
審定報(bào)告。
第三節(jié)RhD血型鑒定標(biāo)準(zhǔn)操作程序
RhD血型鑒定標(biāo)準(zhǔn)操作程序
RhD血型系統(tǒng)經(jīng)過輸血或妊娠可產(chǎn)生免疫性
抗體,當(dāng)遇到相應(yīng)抗原,可致溶血反應(yīng)或新生兒
溶血病。若誤診誤治,可導(dǎo)致患者殘廢或死亡。
臨床輸血時(shí),一般需作助血型鑒定。
一、RhD血型鑒定標(biāo)準(zhǔn)操作程序
【原理】
應(yīng)用血凝試驗(yàn)檢測(cè)紅細(xì)胞抗原。RhD血型是
由紅細(xì)胞表面是存在或缺失D抗原確定。D抗原
于細(xì)胞株BS226細(xì)胞產(chǎn)生的單克隆抗體發(fā)生特
異性反應(yīng)。
【試劑】
RhD(IgM)血型定型試劑盒(單克隆抗體)
【操作】
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1.鹽水法取小試管(10mmX60mm)1支,
蠟筆標(biāo)記,加試劑1滴,再加人5%受檢者紅細(xì)
胞1滴,混勻,1000r/min離心lmin觀察結(jié)果。
2.對(duì)照管用蠟筆標(biāo)記陽性和陰性,分別
加人抗D血清(IgM)1滴,陽性對(duì)照管加Rh陽
性紅細(xì)胞1滴,陰性對(duì)照管加Rh陰性紅細(xì)胞1
滴,混勻,1000r/min離心lmin觀察結(jié)果。3.結(jié)
果判定如陽性對(duì)照管凝集,陰性對(duì)照管不凝
集,受檢管凝集,即表示受檢者紅細(xì)胞上有相應(yīng)
抗原;受檢管不凝集,即表示受檢紅細(xì)胞上沒有
相應(yīng)抗原。________________________________
【附注】
1.單克隆IgMRh抗血清有商品試劑供應(yīng),
可用鹽水介質(zhì)做凝集試驗(yàn)??寡?IgM)1滴,
加5%受檢者紅細(xì)胞懸液1滴,混合,置7℃水浴
lh,觀察凝集反應(yīng)。
2.如臨床上只要求檢查是否為Rh(D)陽性
還是陰性,只需用抗D血清進(jìn)行鑒別。如結(jié)果為
陰性,則應(yīng)進(jìn)一步檢查排除弱D。
3.在中國漢族人群中,Rh陽性占99.66%,
Rh陰性占0.34%o
4.陽性對(duì)照可取3人0型紅細(xì)胞混合配成。
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陰性對(duì)照不易得到,一般設(shè)計(jì)方法為正常AB型
血清1滴,加5%D陽性紅細(xì)胞懸液1滴和菠蘿
酶試劑混勻,與受檢管一同置7℃水浴lh。
5.Rh血型鑒定應(yīng)嚴(yán)格控制溫度與時(shí)間,因
Rh抗原、抗體凝集反應(yīng)時(shí),凝塊比較脆弱,觀
察反應(yīng)結(jié)果時(shí),應(yīng)輕輕側(cè)動(dòng)試管,不可用力振搖。
【假陽性反應(yīng)原因分析】
1.試劑中存在具有其它特異性的抗體(指不
完全D抗體),因此,對(duì)疑難抗原定型時(shí),建議
用不同來源的抗血清同時(shí)做兩份試驗(yàn),因?yàn)槭褂?/p>
兩份特異性相同的抗血清得到不一致的結(jié)果時(shí),
就會(huì)使檢查人員意識(shí)到有進(jìn)一步試驗(yàn)的必要。
2.多凝集紅細(xì)胞與任何人血清都會(huì)發(fā)生凝
集。
3.當(dāng)用未經(jīng)洗滌的細(xì)胞做試驗(yàn)時(shí),試樣中
的自身凝集和異常蛋白質(zhì)可能引起假陽性結(jié)果。
4.試劑瓶可能被細(xì)菌、外來物質(zhì)或其它抗
血清所污染。
【假陰性反應(yīng)原因分析】
1.搞錯(cuò)抗血清,每次試驗(yàn)時(shí)應(yīng)細(xì)心核對(duì)抗血
清瓶子上的標(biāo)簽。
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2.試管中漏加抗血清,在加人細(xì)胞懸液之
前,必須檢查試管中有無抗血清。
3.未遵照抗血清使用說明書做試驗(yàn),如抗
血清和細(xì)胞間的比例以及溫育的溫度和時(shí)間不
正確。
4.抗血清保存不妥,試劑中的免疫球蛋白
變質(zhì)。
二、弱D(weaKD)型鑒定標(biāo)準(zhǔn)操作程序
【原理】
根據(jù)美AABB技術(shù)手冊(cè)第12版(1996)規(guī)定:
D“這術(shù)語不再使用,攜帶弱的D抗原的紅細(xì)胞
仍被歸類為D陽性,稱之“弱D(weaKD)”。原
稱之“D”紅細(xì)胞一部分具有與正常D
陽性紅細(xì)胞同樣性質(zhì)的D抗原,只是D抗原數(shù)量
減少;另一部分原紅細(xì)胞D抗原與正常D
抗原相比缺少正常D抗原中1個(gè)或多個(gè)抗原表
位。
弱D型紅細(xì)胞與某批或幾批抗D血清在鹽水
介質(zhì)及酶試驗(yàn)中不發(fā)生凝集,但在間接抗人球蛋
白試驗(yàn)中均發(fā)生凝集。因此,當(dāng)用酶試驗(yàn)檢查發(fā)
現(xiàn)與抗D不凝集時(shí),不應(yīng)輕率地定為Rh陰性,
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需進(jìn)一步排除弱D型的可能。
【試劑】
1.抗D血清不同生產(chǎn)單位或批號(hào)不同的抗D
血清3?5個(gè)。
2.抗人球蛋白血清。
3.1%菠蘿酶溶液。
4.5%受檢紅細(xì)胞懸液。
【操作】
1.將受檢者紅細(xì)胞分別與各批抗D血清作
間接抗人球蛋白試驗(yàn)(方法見本章第四節(jié))。
2.將受檢者紅細(xì)胞分別與各批抗D血清作
酶試驗(yàn)(方法見本章第五節(jié))。
【結(jié)果判定】
受檢紅細(xì)胞與各批抗D血清在酶試驗(yàn)中都
不凝集或只與其中1批或數(shù)批抗D血清凝集,但
在間接抗人球蛋白試驗(yàn)中都凝集者,都屬弱D型
細(xì)胞。
【附注】
1.在臨床輸血中,弱D型人經(jīng)輸注D陽性紅
細(xì)胞后可產(chǎn)生抗D抗體。因此受血者若為弱D型,
應(yīng)作Rh陰性論,應(yīng)輸注Rh陰性血液;供血者為
弱D型者,應(yīng)作Rh陽性論,不應(yīng)當(dāng)輸血給Rh陰
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性的受血者。
2.弱D型婦女與Rh陽性丈夫生育的嬰兒可
能發(fā)生新生兒溶血病。
第四節(jié)紅細(xì)胞血型抗體篩查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
紅細(xì)胞血型抗體篩查標(biāo)準(zhǔn)操作程序
紅細(xì)胞血型抗體檢查適用于下列情況:
1.ABO血型鑒定發(fā)現(xiàn)受檢者血清中有ABO
血型以外的抗體時(shí);
2.供血者血清抗體篩檢;
3.輸血前受血者血清抗體檢查;
4.輸血后溶血性輸血反應(yīng)疑為由同種抗體
引起時(shí);
5.孕婦血清的抗體檢查;
6.新生兒溶血病嬰兒血液中抗體檢查;
7.直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽性紅細(xì)胞上抗體
檢查。
篩查方法
一、鹽水介質(zhì)法:
【方法原理】
有些抗體能凝集鹽水混懸的紅細(xì)胞。這些抗體
一般是IgM類抗體,其中許多在22℃下反應(yīng)最
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好。在室溫下有活性而在37c無活性的抗體是
沒有什么臨床意義的。對(duì)患者或供血者的血樣不
需要用這種方法。在37℃下也有活性的樣本(如
抗KelL抗D)是有臨床意義的,
而這些抗體一般可用抗人球蛋白試驗(yàn)和酶技術(shù)
來檢查。
【試劑】
1.試劑紅細(xì)胞:由血型參比實(shí)驗(yàn)室或血液
中心提供,或由各血庫從供血者或工作人員中進(jìn)
行普查得到。篩查紅細(xì)胞以2個(gè)或3個(gè)人抗原互
補(bǔ)的不同的紅細(xì)胞為1套,單獨(dú)分開分裝,因?yàn)?/p>
單一的篩查紅細(xì)胞較混紅細(xì)胞提供較高的敏感
性。
因?yàn)樵S多抗體同雙倍量抗原(純合子)的紅
細(xì)胞反應(yīng)比同單倍量抗原(雜合子)的紅細(xì)胞反應(yīng)
要強(qiáng)得多,而不可能得到的都是純合子紅細(xì)胞,
因此,篩查紅細(xì)胞的抗原組成必須是互補(bǔ),經(jīng)提
供盡可能多的必要的抗原。
篩查紅細(xì)胞大多不包括低頻率抗原,因此不
可能檢出低頻率抗體。這種抗體只有在抗體鑒定
時(shí)被測(cè)到,或在交叉配血時(shí)被發(fā)現(xiàn),或在新生兒
出生后出現(xiàn)黃疽時(shí)被發(fā)現(xiàn)。
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每一組篩查紅細(xì)胞中至少有常見的抗原,而
且是互補(bǔ)的。
如果某種抗體只能與一種特定抗原的純合
子細(xì)胞起反應(yīng),而篩查紅細(xì)胞上這種特定抗原是
雜合子,則該抗體可能被漏檢。
合適的純合子表現(xiàn)型的供血者是很少的,為
了提供有重要抗原的純合子細(xì)胞,需要使用來自
3個(gè)供血者的紅細(xì)胞。
2.血清標(biāo)本:雖然血清和血漿中存在相同
的紅細(xì)胞抗體,但一般都采用血清進(jìn)行抗體檢
查。因?yàn)椋?/p>
①如果血漿中的凝血系統(tǒng)發(fā)生部分激活,就
可產(chǎn)生纖維蛋白,干擾對(duì)凝集的解釋;
②只有經(jīng)過激活補(bǔ)體的作用才能證實(shí)的抗
體,不能在血漿中檢出;
③常見的抗凝劑是結(jié)合Ca2+來防止凝固,
而Ca2+對(duì)于補(bǔ)體的激活是必不可少的。
血清標(biāo)本的采取時(shí)間應(yīng)注意:例如,受血者
血樣一定要在48h內(nèi)采集。為了檢出由于最近紅
細(xì)胞刺激而產(chǎn)生的抗體,血樣必須是新近的。如
果抗體篩查結(jié)果陰性,有時(shí)需要隔數(shù)天后重新采
樣復(fù)查,因?yàn)榇藭r(shí)抗體的濃度可逐漸增強(qiáng)。
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每一樣本應(yīng)詳細(xì)記錄病史,包括姓名、性別、
年齡、民族、妊娠史、輸血史,使用過哪些藥物
(如甲基多巴、青霉素、先鋒霉素等)、采樣日期、
有無抗凝劑、抗凝劑的種類和劑量、血液樣本的
外觀、有無溶血、黃疽以及紅細(xì)胞比積等。
【操作步驟】
1.取受檢者血清2滴于標(biāo)好的試管中。
2.取2%試劑(篩查)紅細(xì)胞懸液1滴于每
個(gè)試管中,混和。
3.1000r/min離心Imin(離心速度和時(shí)間應(yīng)
按質(zhì)控規(guī)定)。
4.觀察溶血和凝集反應(yīng),記錄結(jié)果。
5.按需要置室溫(22?24℃)溫育15?30min。
6.離心,觀察溶血和凝集,并記錄結(jié)果。溶
血或凝集都是陽性結(jié)果。
7.報(bào)告結(jié)果于檢驗(yàn)之星中。
二、凝聚胺法
【方法原理】
利用低離子介質(zhì)(LIM),降低介質(zhì)的離子
強(qiáng)度,減少紅細(xì)胞周圍的陽離子云,以促進(jìn)紅細(xì)
胞和血清(漿)中的抗體結(jié)合。加入凝聚胺可使
紅細(xì)胞產(chǎn)生非特異性的凝聚。最后,加入懸浮液,
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具有中和凝聚胺的作用,使正常紅細(xì)胞非特異性
凝集散開,試驗(yàn)結(jié)果為陰性;但紅細(xì)胞被相應(yīng)的
抗體致敏,則會(huì)被凝聚胺凝結(jié),凝集就不會(huì)散開,
試驗(yàn)結(jié)果為陽性。
【標(biāo)本采集和處理】
1.標(biāo)本采集:常規(guī)靜脈采血于分離膠/促凝
劑管(血清)、或靜脈采血3ml于EDTA.K2(血
漿),一般采用血清進(jìn)行抗體檢查。
2.血清標(biāo)本的采取時(shí)間:要求受檢者血樣
一定要在輸血前3天內(nèi)采集,血樣必須是新近
的。
3.標(biāo)本分離保存:血清及早分離防止溶血,
可冷凍保存,如用冰凍血清作抗體檢查,融化后
的樣本要充分混和,重復(fù)凍融的標(biāo)本不能供抗體
鑒定用。
【試劑】
1.抗體篩查I、II、III細(xì)胞。
2.凝聚胺試劑:低離子介質(zhì)(LIM)、凝聚
胺(Polybrene)>懸浮液(Resuspending)。
3.3?5%紅細(xì)胞懸液:取多個(gè)“0”型人紅
細(xì)胞,經(jīng)生理鹽水洗滌三次,配成3?5%紅細(xì)胞
懸液。
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【操作步驟】
1.準(zhǔn)備樣本,患者血清(血漿)、抗體篩查
I、II、III細(xì)胞或3?5%紅細(xì)胞懸液。
2.取小試管2支,各加被檢血清(漿)2
滴,分別加入3?5%篩檢紅細(xì)胞1滴或I和n
細(xì)胞50ul(0.8%)o
3.各加入LIM0.7ml,混合后,加凝聚胺
Polybrene2滴,并混合。
4.以3400rpm,離心10秒,把上清液倒掉,
輕輕搖動(dòng)試管,目測(cè)紅細(xì)胞有無凝集,如無凝集,
則必須重作。
5.最后加入懸浮液Resuspending!滴,輕
輕轉(zhuǎn)動(dòng)試管混合并觀察結(jié)果。如凝集散開,表示
由凝聚胺引起的非特異性凝集,抗體篩檢結(jié)果為
陰性。如凝集不散開,則紅細(xì)胞抗原抗體結(jié)合的
特異性反應(yīng),抗體篩檢結(jié)果為陽性,應(yīng)進(jìn)一步作
抗體鑒定。
6.報(bào)告結(jié)果于檢驗(yàn)之星中。
五、微柱凝膠法
【方法原理】
利用凝膠過濾技術(shù)和離心技術(shù),抗體篩查細(xì)
胞上有特定的抗原,抗原能夠和相應(yīng)的抗體結(jié)
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合。當(dāng)待檢血清(漿)樣本中有不完全抗體時(shí),
抗體篩查細(xì)胞和待檢血清(漿)中不完全抗體可
專一性的結(jié)合??谷饲虻鞍卓山Y(jié)合抗體,經(jīng)過橋
介作用使細(xì)胞凝集。凝集發(fā)生說明血清(漿)中
有不完全抗體。
【標(biāo)本采集和處理】
1.標(biāo)本采集:常規(guī)靜脈采血于分離膠/促凝
劑管(血清)、或靜脈采血3ml于EDTA.K2(血
漿),一般采用血清進(jìn)行抗體檢查。
2.血清標(biāo)本的采取時(shí)間:要求受檢者血樣
一定要在輸血前3天內(nèi)采集,血樣必須是新近
的。
3.標(biāo)本分離保存:血清及早分離防止溶血,
可冷凍保存,如用冰凍血清作抗體檢查,融化后
的樣本要充分混和,重復(fù)凍融的標(biāo)本不能供抗體
鑒定用。
【試劑】
1.抗體篩查I、II、III細(xì)胞。
2.抗人球蛋白檢測(cè)卡。
3.3?5%紅細(xì)胞懸液:取多個(gè)“0”型人紅
細(xì)胞,經(jīng)生理鹽水洗滌三次,配成3?5%紅細(xì)胞
懸液。
文檔僅供參考,不當(dāng)之處,請(qǐng)聯(lián)系改正。
【操作步驟】
1.準(zhǔn)備樣本,患者血清(血漿)、抗體篩查
I、II、III細(xì)胞或3?5%紅細(xì)胞懸液。
2.標(biāo)記抗人球蛋白檢測(cè)卡、姓名、住院號(hào)、
標(biāo)明I、II、IIIO
3.微柱中加50ul待檢樣本血清(漿)。
4.加抗體篩查I、n、ni細(xì)胞各soul(o.8%)o
5.37℃15分鐘,離心10分鐘。
6.讀結(jié)果和記錄。離心時(shí),凝集塊不能經(jīng)
過凝膠間隙而留在凝膠上層,呈陽性反應(yīng)。未凝
集血細(xì)胞離心時(shí)可經(jīng)過凝膠間隙而沉積在凝膠
管底部,呈陰性反應(yīng)。
7.報(bào)告結(jié)果于檢驗(yàn)之星中。
【附注】
1.判讀試驗(yàn)結(jié)果常見的代號(hào)是:
4+:一個(gè)結(jié)實(shí)的凝集塊。
3+:幾個(gè)大的凝集塊。
2+:中等大的凝塊,背景清晰。
1+:小凝集塊,背景混濁。
±:微小凝集塊,背景混濁。
0:無凝集或溶血。
PH:表示部分溶血,有一些細(xì)胞殘留。
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H:表示完全溶血,無殘留細(xì)胞。
2.抗體篩查試驗(yàn)結(jié)果的解釋
抗體篩檢試驗(yàn)是很有價(jià)值的,但也有其局限
性。一個(gè)陰性試驗(yàn)不一定意味著這一血清中沒有
抗體,而只是在使用這些技術(shù)時(shí),缺乏與篩查細(xì)
胞起反應(yīng)的抗體。如果臨床資料和其它實(shí)驗(yàn)室所
見提供了另外的線索,就應(yīng)擴(kuò)大常規(guī)篩查方法。
例如,如果ABO正反定型不符,就應(yīng)在室溫下做
抗體篩查。如疑為溶血性輸血反應(yīng)、新生兒溶血
病或自身免疫性溶血性貧血,有必要做酶試驗(yàn)或
以放散液做篩查,以證明引起疾病的抗體。
第五節(jié)抗人球蛋白試驗(yàn)
抗人球蛋白試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序
【方法原理】
抗人球蛋白試驗(yàn)(antiglobulintest,AGT)
又稱Coombs試驗(yàn),是檢查不完全抗體的一種很
好的方法、將抗人球蛋白血清(antiglobulin
serum,AGS)加入已經(jīng)致敏的紅細(xì)胞鹽水懸液
中,紅細(xì)胞表面的抗體球蛋白(即使其致敏的不
完全抗體)與抗人球蛋白血清中的抗體發(fā)生特異
性反應(yīng),使紅細(xì)胞發(fā)生凝集??谷饲虻鞍籽宄?/p>
能夠測(cè)定紅細(xì)胞上IgG抗體外,還能夠測(cè)定IgM
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和IgA,也能夠測(cè)補(bǔ)體組分(C3、C4)o所謂廣譜
AGS,即包括抗IgG和抗C3抗體。
【標(biāo)本采集和處理】
標(biāo)本采集:常規(guī)靜脈采血3ml于
EDTA.K2o
【試劑】
1.1%標(biāo)準(zhǔn)A/B/O型紅懸。
2.抗人球蛋白檢測(cè)卡。
3.0.9%生理鹽水。
【操作步驟】
一、AB0血型、RH血型鑒定、直接抗人球蛋白
試驗(yàn):
(1)在戴安娜微柱凝膠新生兒血型卡的8個(gè)
孔中分別加入1%的樣本紅細(xì)胞50ul;
(2)血型卡直接放入專用離心機(jī)離心,觀察結(jié)
果。
二、釋放試驗(yàn)
(1)取壓積紅細(xì)胞0.2ml洗滌三次,再加
0.2ml生理鹽水,56℃水浴10分鐘,轉(zhuǎn)/min
離心3min,吸取上清液備用;(即放散液)
(2)根據(jù)新生兒AB0血型,分別在微孔中加
入1%標(biāo)準(zhǔn)A/B/0型紅懸50ul,然后加入50ul上
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清液,置37℃孵育15分鐘,離心,觀察結(jié)果。
患者ABO血型為“A”型的,加入標(biāo)準(zhǔn)A
型、O型紅細(xì)胞懸液;
“B”型的,加入標(biāo)準(zhǔn)B型、O型紅
細(xì)胞懸液;
“AB”型的,加入標(biāo)準(zhǔn)A型、B型、
O型紅細(xì)胞懸液;
“O”型的,加入標(biāo)準(zhǔn)O型紅細(xì)胞懸
液。
三、游離抗體測(cè)定
(1)根據(jù)新生兒ABO血型,分別在微孔中加
入1%標(biāo)準(zhǔn)A/B/O型紅懸50ul,然后加入50ul樣
本血清;(原則同上)
(2)置37℃孵育15分鐘,離心,觀察結(jié)果。
結(jié)果判斷:
(1)ABO血型、RH血型鑒定、直接抗人
球蛋白試驗(yàn)結(jié)果判斷:
第L5孔
第6孔
Ctl為陰性對(duì)照管;
第7孔
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為兔多克隆抗IgG;
第8孔
AHG為抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果。
(2)游離、釋放試驗(yàn)結(jié)果判斷:
凝集有80%的紅細(xì)胞在微柱管下端2/3以下者
(即1+以上)為陽性。
第六節(jié)血液交叉配血試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
血液交叉配血試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序
交叉配血主要是檢查受血者血清中有無破
壞供血者紅細(xì)胞的抗體,故受血者血清加供
血者紅細(xì)胞相配的一管稱為“主側(cè)”;供血者血
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清加受血者紅細(xì)胞相配的一管稱為“次側(cè)”,兩
者合稱交叉配血。
交叉配血試驗(yàn)又稱不配合性試驗(yàn),是確?;?/p>
者安全輸血必不可少的試驗(yàn),完整的操作
規(guī)程應(yīng)包括:①查閱受血者以前的血型檢查記
錄,如與這次檢查結(jié)果有所不同,應(yīng)及時(shí)分析原
因;②對(duì)收到的受血者血樣應(yīng)作ABO正反定型,
Rh血型和其它血型檢查以及血型抗體檢測(cè)和鑒
定;③選擇預(yù)先進(jìn)行血型檢查的合格供血者作交
叉配血試驗(yàn)。
一、配血要求
1.受血者配血試驗(yàn)的血樣(血型復(fù)查)必須
是輸血前三天之內(nèi)的;
2.核對(duì)病人資料:核對(duì)輸血申請(qǐng)單、受血
者血樣、病歷三者,其內(nèi)容包括:患者姓名、性
別、年齡、科室床號(hào)、住院號(hào)、血型(原始血常
規(guī)血型和血型復(fù)查中血型)、用血品種、用血量
等,必須正確無誤;
3.核對(duì)血液:血液完整性、血液標(biāo)簽、血
液質(zhì)量;
4.核對(duì)取血憑證:按臨床(取血憑證)實(shí)
際用血品種、量進(jìn)行配發(fā)血;
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5.配血前,先復(fù)查受血者和供血者
ABO血型(正、反定型)、Rh(D)血型和
抗篩,并報(bào)告其結(jié)果;
6.在電子病歷或急診醫(yī)生工作站中,
檢查臨床輸血五項(xiàng)的執(zhí)行情況;
7.輸注全血、濃縮紅細(xì)胞、洗滌紅細(xì)胞、
濃縮白細(xì)胞等患者應(yīng)進(jìn)行交叉配血試驗(yàn),其方
法:采用鹽水配血試驗(yàn)、凝聚胺法。
二、鹽水配血試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序
【方法原理】
本法是當(dāng)前最常見的配血方法,能夠發(fā)現(xiàn)臨
床上最重要的ABO不配合性。當(dāng)受血者血清
(漿)和供血者紅細(xì)胞經(jīng)混合并離心后,如有
ABO不配合問題,就會(huì)很快顯示出來。
【標(biāo)本采集和處理】
1.標(biāo)本采集:常規(guī)靜脈采血3ml于
EDTA.K2o
2.標(biāo)本采取時(shí)間:要求受檢者血樣一定要
在輸血前48h(抗篩是48h)內(nèi)采集,血樣必須
是新近的,無溶血現(xiàn)象。
【試劑】
L抗A抗B血型定型試劑(單克隆抗體長
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春博德)
2.Anti-D(IgM)Biotesto
3.0.9%生理鹽水
【操作步驟】
1.從貯血冰箱中取出所需血液,取試管一
支,貼上小標(biāo)簽,在血袋配血管中剪下配血管于
試管內(nèi)。
2.取試管二支,標(biāo)明主次側(cè),主側(cè)管加受
血者血清(漿)2滴,供血者5%紅細(xì)胞懸液1
滴;次側(cè)管加供血者血清(漿)2滴,受血者5%
紅細(xì)胞懸液1滴?;靹?,以1000r/min離心Imin。
3.觀察結(jié)果:輕輕側(cè)動(dòng)試管,冬季應(yīng)注意
冷集素干擾。ABO同型配血,“主側(cè)”和“次側(cè)”
均無溶血及凝集表示無輸血禁忌,能夠輸血。
三、凝聚胺配血試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序
【方法原理】
利用低離子介質(zhì)(LIM),降低介質(zhì)的離子
強(qiáng)度,減少紅細(xì)胞周圍的陽離子云,以促進(jìn)紅細(xì)
胞和血清(漿)中的抗體結(jié)合。加入凝聚胺
(Polybrene)溶液后,可使紅細(xì)胞產(chǎn)生非特異
性的凝聚。最后,加入懸浮液(Resuspending)
具有中和凝聚胺的作用,使正常的紅細(xì)胞非特異
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性凝集散開,試驗(yàn)結(jié)果為陰性;但如果紅細(xì)胞被
相應(yīng)抗體致敏,則會(huì)被凝聚胺凝結(jié),凝集就不會(huì)
散開,試驗(yàn)結(jié)果為陽性。
【標(biāo)本采集和處理】
1.標(biāo)本采集:常規(guī)靜脈采血3ml于
EDTA.K2o
2.標(biāo)本采取時(shí)間:要求受檢者血樣一定要
在輸血前48h內(nèi)采集,血樣必須是新近的,無溶
血現(xiàn)象。
【試劑】
L抗A抗B血型定型試劑(單克隆抗體長
春博德)
2.Anti-D(IgM)Biotesto
3.0.9%生理鹽水
4.凝聚胺試劑:低離子介質(zhì)(LIM)、凝聚
胺(Polybrene)、懸浮液(Resuspending)。
【操作步驟】
1.從貯血冰箱中取出所需血液,取試管一
支,貼上小標(biāo)簽,在血袋配血管中剪下配血管于
試管內(nèi)。
2.取試管二支,標(biāo)明主次側(cè),主側(cè)管加受
血者血清(漿)2滴,供血者5%紅細(xì)胞懸液1
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滴;次側(cè)管加供血者血清(漿)2滴,受血者5%
紅細(xì)胞懸液1滴。
3.各力口LIMO.7mL混勻,再各力口Polybrene
溶液2滴,并混勻。
4.用離心機(jī)1000g離心力(普通離心機(jī)以
3400rpm),離心10秒,然后把上清液倒掉,輕
輕搖動(dòng)試管,目測(cè)紅細(xì)胞有無凝集,無凝集,則
必須重做。
5.最后加入Resuspending2滴,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)
試管混合并同時(shí)觀察結(jié)果,如在30秒內(nèi)凝集散
開,代表是由Polybrene引起的非特異性凝集,
配血結(jié)果相合;如凝集不散開,則為紅細(xì)胞抗原
抗體結(jié)合的特異性反應(yīng),配血結(jié)果不相合。如反
應(yīng)可疑,可進(jìn)一步倒在玻片上用顯微鏡觀察。
6.血液交叉合格后,應(yīng)在醫(yī)院血庫管理軟
件中進(jìn)行配血、出庫操作,打印血液交叉報(bào)告單
和患者輸血不良反應(yīng)反饋單。然后,保存。
【附注】
血液樣本的保留和貯存:受血者和供血者的
血液樣本必須密封或蓋緊,在每次輸血之后,應(yīng)
在2?6℃保存至少7天以上。
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第七節(jié)血液出庫(發(fā)血)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
血液出庫(發(fā)血)標(biāo)準(zhǔn)操作程序
一、核對(duì)、簽字
1.嚴(yán)格執(zhí)行“三查”、“八對(duì)”制度(見輸
血科“三查”、“八對(duì)”制度)。
2.輸血科(血庫)發(fā)血時(shí),應(yīng)當(dāng)認(rèn)真檢查
申請(qǐng)單的填寫項(xiàng)目,合格后方可發(fā)血。未按衛(wèi)生
部《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床用血管理辦法》第十一條規(guī)定
辦理申報(bào)手續(xù)的不得發(fā)血。
3.配血合格后,由醫(yī)務(wù)人員憑取血憑證到
血庫取血,領(lǐng)血時(shí),收發(fā)雙方共同核對(duì)患者(姓
名、性別、年齡、科室床號(hào)、住院號(hào)、血型、用
血品種、用血量)和血站名稱、許可證號(hào)、血型、
血袋編號(hào)、血品種、血量、血液質(zhì)量、血袋完整
性、血液有效時(shí)間以及配血試驗(yàn)結(jié)果等,準(zhǔn)確無
誤時(shí),雙方共同簽字后方可發(fā)血。
二、血液出庫
1.發(fā)血在醫(yī)院血庫管理軟件中進(jìn)行(詳見
醫(yī)院血庫管理軟件操作細(xì)則),并打印交叉配血
報(bào)告單和患者輸血不良反應(yīng)反饋單。
2.收發(fā)雙方共同核對(duì)無誤后,由取血者把
血液放入專用的血液保溫箱內(nèi)送至所需科室輸
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注(要求血液出庫后30分鐘內(nèi)輸入患者體內(nèi))。
3.在血液出庫登記本中,記錄血液發(fā)出時(shí)
間、受血者姓名、科室床號(hào)、住院號(hào)、血品種欄
記錄血量、血費(fèi)、用血互助金、檢查費(fèi)、血袋號(hào)、
發(fā)(?。┭吆灻?/p>
4.血液發(fā)出后,患者與供血者血樣保存于
2?6℃冰箱至少7天。
5.血液發(fā)出后不得退回,以保證下一個(gè)用
血者的安全。如臨床對(duì)發(fā)出的血液要求退回時(shí),
應(yīng)由醫(yī)院主管(醫(yī)務(wù)部)領(lǐng)導(dǎo),輸血科主任簽字
同意“報(bào)廢處理”后,方可退還血費(fèi)等。
6.每日17:00下班前進(jìn)行出庫統(tǒng)計(jì),并記
錄于血液出入庫表格內(nèi)。次晨8時(shí)再統(tǒng)計(jì)夜班出
入庫情況,并加以修正。每月進(jìn)行出入庫統(tǒng)計(jì)并
作保存。
三、血袋回收
回收后的血袋進(jìn)行記錄時(shí)間,并保存于2?
6℃冰箱7天,后按醫(yī)療廢棄物焚燒處理。
第八節(jié)數(shù)據(jù)記錄及費(fèi)用收取標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
數(shù)據(jù)記錄及費(fèi)用收取標(biāo)準(zhǔn)操作程序
一、數(shù)據(jù)記錄
當(dāng)血液發(fā)出后,必須記錄:
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1.輸血申請(qǐng)單上記錄血品種、血量。把血
袋中的小標(biāo)簽貼在申請(qǐng)單上,表明品種、血量。
2.用血通知單上記錄用血日期、血品種及
血量,并簽名。
3.血費(fèi)記錄簿上記錄發(fā)出血液品種的數(shù)量、
血費(fèi)、互助金、檢查費(fèi)等金額。對(duì)欠款記帳或用
現(xiàn)金收取者,應(yīng)用紅筆注明“欠款記帳”或“門
診現(xiàn)金收費(fèi)”字樣。
二、收費(fèi)
當(dāng)血液發(fā)出后,值班者必須對(duì)當(dāng)日(班)的
血費(fèi)、用血互助金、檢查費(fèi)等按規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)及時(shí)記
入收費(fèi)電腦。
1.住院病人收費(fèi):由值班者通知收費(fèi)處在
電腦中收取;
2.對(duì)急診“綠”色通道病人收費(fèi):
①有住院號(hào)者:其全部費(fèi)用記入電腦;
②對(duì)無住院號(hào)而只有門診號(hào)者:當(dāng)班者應(yīng)及
時(shí)通知收費(fèi)處,交納血費(fèi)、檢查費(fèi)、用血互助金
(用手工開具用血互助金交納通知單)等費(fèi)用;
③對(duì)門急診血費(fèi)欠款記帳者:按實(shí)際收費(fèi)的
用血量配發(fā),但通知急診收費(fèi)處采用欠款記帳或
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現(xiàn)金收取用血互助金和檢查等費(fèi)用;
3.門診病人收費(fèi):能夠在門診醫(yī)生站中記
錄所要收取的全部費(fèi)用,由病人(或病人家屬、
授權(quán)人、工友)到門診收費(fèi)窗口,交納血費(fèi)、檢
查費(fèi)、用血互助金(用手工開具用血互助金交納
通知單)等費(fèi)用。門診收取用血互助金后,須把
用血互助金交費(fèi)通知單的第三聯(lián)貼在用血通知
單后面。
1血費(fèi)輸入
名稱金額類別
全血(qx)230元/200ml血費(fèi)室
Rh陰性全血450元/200ml血費(fèi)室
(Rhyxqx)
懸浮紅細(xì)胞(xf)220元/I單位血費(fèi)室
Rh陰性紅細(xì)胞410元/I單位血費(fèi)室
(Rhyxh)
血漿(xxb)5元/10ml血費(fèi)室
冷沉淀(LCD)110/1單位血費(fèi)室
1450%/10單血費(fèi)室
血小板(dcx)
位
洗滌紅細(xì)胞220元/I單位血費(fèi)室
(xdh)
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去甘油紅細(xì)胞二.血費(fèi)室
490元J1單位
(qgy)
機(jī)洗紅細(xì)胞術(shù)
700元/次血費(fèi)室
(JQXDHX)
2檢查費(fèi)輸入
名稱金額類別
鹽水介質(zhì)交叉配5元/次血庫室
血(YSJZ)
特殊介質(zhì)交叉配8元/次血庫室
血(TSJZ)
ABO正反血型8元/次血庫室
鑒定(ABO)
Rh(D)血型鑒8元/次血庫室
定(Rh)
紅細(xì)胞不完全抗40元/次血
體篩查(HXB)庫室
按回車,點(diǎn)擊保存數(shù)據(jù),點(diǎn)擊丫(是),按確定。
注:醫(yī)保病人記帳,進(jìn)入醫(yī)保條件
全血
1.各種急性失血伴低血容量搶救;
2.各種原因引起的經(jīng)其它治療無效的嚴(yán)重
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慢性貧血;
3.重大手術(shù)確需輸血。
紅細(xì)胞
1.各種急性失血伴低血容量搶救;
2.各種原因引起的經(jīng)其它治療無效的嚴(yán)重
慢性貧血;
3.高鉀血癥,肝、腎、心功能不全確需輸
血者;
4.急性溶血性貧血搶救或化療后骨髓抑制
引起的嚴(yán)重貧血;
5.呼吸衰竭使用人工呼吸機(jī)確需輸血。
血漿
1.凝血酶原時(shí)間(PT)或活化部分凝血酶
時(shí)間(APTT)異常伴出血或需手術(shù);
2.凝血因子缺乏伴出血或需手術(shù);
3.抗凝血酶III(AT—III)缺乏;
4.香豆素作用逆轉(zhuǎn)或抗纖溶治療伴出血;
5.輸血量大于15單位;
6.彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)和血栓性血小
板減少性紫瘢(TTP);
7.需行體外循環(huán)手術(shù)。
血小板
1.血小板計(jì)數(shù)低于10X107L;
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2.因骨髓衰竭引起的血小板減少并發(fā)活動(dòng)
性出血,且血小板計(jì)數(shù)低于20X10VL;
3.需行外科手術(shù),且血小板計(jì)數(shù)低于50X
107L;
4.伴有其它出血危險(xiǎn)因素的活動(dòng)性出血,
且血小板計(jì)數(shù)低于30X107L;
5.大血管吻合手術(shù)確需輸注血小板。
冷沉淀
1.甲型血友?。?/p>
2.血管性血友??;
3.纖維蛋白原缺乏癥。
第九節(jié)血液申領(lǐng)、入庫、核對(duì)、貯存標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
血液申領(lǐng)、入庫、核對(duì)、貯存標(biāo)準(zhǔn)操作程序
1.每日進(jìn)行血液庫存量的檢查,及時(shí)對(duì)存
量的補(bǔ)充(要求日存量為周用血量的1/2),值
班人按所需品種、血量填入醫(yī)院用血申請(qǐng)單內(nèi),
由指定人去人民醫(yī)院領(lǐng)取。
2.對(duì)特殊血液的申領(lǐng),應(yīng)遵循先報(bào)告血站
的原則,血站回復(fù)結(jié)果必須及時(shí)與臨床醫(yī)師溝
通,并記錄于記事本中。
3.血液到庫后,值班人必須核對(duì)和驗(yàn)收,
文檔僅供參考,不當(dāng)之處,請(qǐng)聯(lián)系改正。
其內(nèi)容:血袋(外觀、封閉及包裝)是否合格、
標(biāo)簽是否清楚齊全(供血機(jī)構(gòu)名稱、許可證號(hào)、
供血者姓名、編號(hào)、血型、血品種、血量、采血
日期及失效日期)、血液質(zhì)量是否良好、是否按
要求配發(fā)血等。
4.嚴(yán)禁不合格血液入庫。
5.核對(duì)驗(yàn)收無誤后,把人民醫(yī)院拷貝來的
電腦軟盤,拷貝在醫(yī)院血庫管理軟件電腦內(nèi)(詳
見輸血科醫(yī)院血庫管理軟件操作規(guī)程)。然后,
按不同類型、品種、采血日期的先后次序整齊排
列入庫,存放于血庫專用冰箱內(nèi)的相應(yīng)位置。
6.血液入庫數(shù)量登記在血液出入庫表格內(nèi),
每日、月進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
7.全血、紅細(xì)胞保存溫度為2?6℃,并每
天監(jiān)測(cè)和記錄(晨8時(shí)、上午11時(shí)、下午4時(shí)、
晚8時(shí))冰箱溫度各一次;血漿、冷沉淀保存溫
度為-30℃以下,每天監(jiān)測(cè)和記錄(晨8時(shí)、上
午11時(shí)、下午4時(shí)、晚8時(shí))冰箱溫度
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