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文檔簡介

輸血科標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP文件

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血庫標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)

-01修訂

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目錄

第一章血庫儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

第一節(jié)Dianafuge標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)

程.........................3

第二節(jié)80-2離心機(jī)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)

程........................3

第三節(jié)CU600型電熱恒溫水箱標(biāo)準(zhǔn)操作程

序...................4

第四節(jié)SANYOMBR-107D(H)貯血冰箱標(biāo)

準(zhǔn)操作程序.............4

第五節(jié)Haier低溫冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作程

序.......................4

第六節(jié)海爾冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作程

序.........................5

第七節(jié)醫(yī)院血庫管理軟件應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)

程...................5

第八節(jié)SJW系列數(shù)碼恒溫血小板振蕩保存箱標(biāo)

準(zhǔn)操作規(guī)程............6

第九節(jié)WGH-I型數(shù)碼恒溫解凍箱標(biāo)準(zhǔn)

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操....................6

第二章血庫項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

第一節(jié)血樣采集和送檢、血型復(fù)查及血源組

織標(biāo)準(zhǔn)操作程序...........7

第二節(jié)ABO&Rh(D)血型復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)

程..................8

第三節(jié)Rh血型鑒定標(biāo)準(zhǔn)操作程

序.......................9

第四節(jié)紅細(xì)胞血型抗體篩查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)

程...................11

第五節(jié)抗人球蛋白試

驗(yàn)...........................14

第六節(jié)血液交叉配血試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)

程....................15

第七節(jié)血液出庫(發(fā)血)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)

程....................17

第八節(jié)數(shù)據(jù)記錄及費(fèi)用收取標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)

程...................17

第九節(jié)血液申領(lǐng)、入庫、核對(duì)、貯存標(biāo)準(zhǔn)操

作規(guī)程...............19

第十節(jié)血液報(bào)廢(失效)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)

程.....................19

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第十一節(jié)輸血反應(yīng)處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)

程......................20

第十二節(jié)實(shí)驗(yàn)室消毒和污物處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)

程..................21

第十三節(jié)血庫交接班標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)

程.......................21

第十四節(jié)血液質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)

程......................22

第十五節(jié)血庫夜班操作規(guī)

范..........................23

第十六節(jié)應(yīng)急預(yù)案操作規(guī)

程..........................24

第十七節(jié)貯存式自身輸血(PABD)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)

程.................26

第十八節(jié)臨床醫(yī)師用血申請(qǐng)操作規(guī)

程......................28

第十九節(jié)臨床護(hù)士輸血操作規(guī)

程........................28

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血庫標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

第一章血庫儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

第一節(jié)Dianafuge標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

一、Dianafuge標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

(一)Dianafuge開/關(guān)機(jī)程序

1.開機(jī)

把儀器電源開關(guān)撥到“I”(開)的位置,開

始正確運(yùn)行。

2.關(guān)機(jī)

把儀器電源開關(guān)撥到“0”(關(guān))的位置。

(二)Dianafuge標(biāo)準(zhǔn)操作程序

1.Dianafuge離心機(jī)應(yīng)放置于水平臺(tái)桌上,

電源(壓)須匹配。

2.離心機(jī)在離心前,先按|OPEN|,此時(shí)門

蓋打開,放入檢測(cè)卡(需對(duì)稱放置),放入完畢

后,用手把門蓋按下,然后按ISTARTI,離心機(jī)

開始轉(zhuǎn)動(dòng),10分鐘后自動(dòng)報(bào)警開門蓋,取出卡

片,最后把門蓋按下關(guān)好。

二、Diana-Incubator標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

(一)Diana-Incubator開/關(guān)機(jī)程序

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1.開機(jī)

①按順序依次打開電源開關(guān)。

②把儀器電源開關(guān)撥到“I”(開)的位置,

開始正確運(yùn)行。

2.關(guān)機(jī)

把儀器電源開關(guān)撥到“0”(關(guān))的位置。

(二)Diana-Incubator標(biāo)準(zhǔn)操作程序

1.Diana-Incubator孵育器應(yīng)放置于水平臺(tái)

桌上,電源(壓)須匹配。

2.孵育器的使用,用手開啟門蓋,放入檢

測(cè)卡,按所需要的保溫(其溫度自動(dòng)調(diào)節(jié)保持為

37℃)時(shí)間,順時(shí)針旋轉(zhuǎn)選擇所需時(shí)間,到時(shí)后

會(huì)報(bào)警提示,開門蓋取出卡片后關(guān)蓋。

第二節(jié)CH80-2離心機(jī)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

一、CH80-2離心機(jī)開/關(guān)機(jī)程序

1.開機(jī)

①插上電源

②把電源開關(guān)撥到6配位置,開始正確運(yùn)

行。

2.關(guān)機(jī)

按依次順序把儀器電源開關(guān)撥到藥的位

置。

二、CH80-2離心機(jī)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

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1.電源開關(guān)撥到位置

2.離心試管需等重量對(duì)稱放置。

3.按時(shí)間開關(guān)調(diào)至所需離心時(shí)間。

4.再把轉(zhuǎn)速開關(guān)調(diào)至所需離心轉(zhuǎn)速。

5.按啟動(dòng),開始正確運(yùn)行。

5.停止運(yùn)轉(zhuǎn)后取出標(biāo)本。

第三節(jié)CU600型電熱恒溫水箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

CU600型電熱恒溫水箱標(biāo)準(zhǔn)操作程序

1.在水箱內(nèi)加入清潔溫水至總高度1/2~2/3

處。

2.接通電源,選擇工作溫度。

說明操作顯示備注

設(shè)定工按“SET”預(yù)先設(shè)定溫度值顯

37.0

作溫度鍵示閃爍

增加設(shè)

按“+”數(shù)值增加,顯示閃

定溫度52.5

鍵爍

減少設(shè)

按“數(shù)值減少,顯示閃

定溫度30.0

鍵爍

確定工按“SET”25.0新設(shè)定溫度儲(chǔ)存

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作溫度I鍵II后,顯示箱內(nèi)溫度

3.水槽進(jìn)入升溫狀態(tài),加熱指示燈亮。當(dāng)

箱內(nèi)溫度接近設(shè)定溫度時(shí),加熱指示燈閃爍,到

達(dá)設(shè)定溫度后,控制進(jìn)入恒溫狀態(tài)。

4.水浴箱工作溫度波動(dòng)范圍應(yīng)控制在±1℃

左右,定期用校正過的溫度計(jì)進(jìn)行校正。

5.水浴箱內(nèi)外應(yīng)保持清潔,每周定期清洗

更換清水,經(jīng)常保持水箱內(nèi)水質(zhì)干凈。

第四節(jié)SANYOMBR-107D(H)貯血冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

SANYOMBR-107D(H)貯血冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作程序

1.接通電源,把電源開關(guān)撥到巨迎位置,

開始正確運(yùn)行。

2.溫度控制在2?6℃范圍內(nèi),實(shí)際運(yùn)行

溫度在4℃左右,工作溫度波動(dòng)范圍應(yīng)控制在土

以內(nèi),定期(時(shí))用校正過的溫度計(jì)進(jìn)行校

正。

3.溫度每天記錄四次(晨8時(shí)、上午11時(shí),

下午4時(shí)、晚8時(shí))的溫度,如溫度超出正常范

圍,警報(bào)器會(huì)自動(dòng)報(bào)警,須及時(shí)進(jìn)行處理。

4.每月對(duì)貯血冰箱內(nèi)的溫度芯片進(jìn)行檢查

并作記錄于電腦中,以免查詢。

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5.貯血冰箱內(nèi)外應(yīng)保持清潔,嚴(yán)禁存放她

物;每周清洗消毒一次,用2%戊二醛溶液或施

康I(1:100)消毒;每月冰箱內(nèi)空氣培養(yǎng)一次。

無霉菌生長或培養(yǎng)皿(90mm)細(xì)菌生長菌落

<8CFU/10分鐘或<200CFU/M3為合格,結(jié)果須

登記在記錄本上。

第五節(jié)Haier低溫冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

Haier低溫冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作程序

1.接通電源,把電源開關(guān)撥到我位置,

開始正確運(yùn)行。

2.溫度控制在-30C左右范圍內(nèi),實(shí)際運(yùn)行

溫度波動(dòng)范圍應(yīng)控制在-32℃±3左右,定期(時(shí))

用校正過的溫度計(jì)進(jìn)行校正。

3.溫度每天記錄四次(晨8時(shí)、上午11時(shí),

下午4時(shí)、晚8時(shí))的溫度,如溫度超出正常范

圍,警報(bào)器會(huì)自動(dòng)報(bào)警,須及時(shí)進(jìn)行處理。

4.每月對(duì)低溫冰箱內(nèi)的溫度芯片進(jìn)行檢查

并作記錄于電腦中,以免查詢。

5.定期進(jìn)行化霜清洗消毒。

第六節(jié)海爾冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

海爾冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作程序

1.接通電源,把電源開關(guān)撥到京位置,

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開始正確運(yùn)行。

2.溫度控制在2~8℃左右范圍內(nèi),實(shí)際運(yùn)

行溫度波動(dòng)范圍應(yīng)控制在5℃±2左右,定期

(時(shí))用校正過的溫度計(jì)進(jìn)行校正。

3.溫度每天記錄兩次(上午8時(shí),下午4

時(shí))的溫度,如溫度超出正常范圍,須及時(shí)進(jìn)行

處理。

第七節(jié)醫(yī)院血庫管理軟件應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

醫(yī)院血庫管理軟件應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)操作程序

一、開機(jī)

1.接通電源,開主機(jī)按下①電源開關(guān),同

時(shí)按Ctrl+Alt+Delete----按回車。

2.雙擊醫(yī)院用血管理信息系統(tǒng),輸入本人

的工號(hào)一一按回車鍵一一再回車一一醫(yī)院血庫

管理軟件系統(tǒng)。

二、血液入庫

點(diǎn)擊入庫——點(diǎn)擊新增,輸入血卡號(hào)、血袋

號(hào)、血型、血液類別、血量、采血日期,保存即

可。

三、患者檔案建立

在配發(fā)血前自先將患者檔案輸入電腦內(nèi)。

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點(diǎn)擊【患者檔案】出現(xiàn)患者登記菜單一一點(diǎn)

擊新增進(jìn)入第二聯(lián)患者登記菜單,然后輸入患

者檔案,保存。再輸入其它患者檔案至輸完為止。

如門診病人,能夠輸入就診卡號(hào)。

四、交叉配血

帶有紅細(xì)胞的血液均需做血液交叉配血試

驗(yàn)

直接點(diǎn)擊配血一一出現(xiàn)配血操作菜單一一選

擇入院類型一一輸入患者住院號(hào)、用激光掃描

儀,掃描血袋號(hào)條形碼,出現(xiàn)配血菜單,輸入配

血方法等(已有默認(rèn)結(jié)果)一一按確定,然后

再掃描第二或第三個(gè)助血員的血袋號(hào)條形碼,-

一按確定一一保存一一取消(不打配血收費(fèi)單

時(shí))——退出。

五、出庫(發(fā)血)

直接點(diǎn)擊出庫,出現(xiàn)發(fā)血操作菜單一一選擇

入院類型一一輸入住院號(hào)、用激光掃描儀,掃描

血袋號(hào)條形碼,再掃描第二或第三個(gè)血袋號(hào)條形

碼,一一點(diǎn)擊配血單一一打印血液交叉配合試驗(yàn)

報(bào)告單一一點(diǎn)擊反饋卡一一打印患者輸血不良

反應(yīng)反饋單一一再保存一一取消(不打收費(fèi)單

時(shí))——退出。

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血漿、血小板不需要配血的血液發(fā)血,直接點(diǎn)

擊出庫,并按以上進(jìn)行操作。

第八節(jié)SJW系列數(shù)碼恒溫血小板振蕩保存箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

SJW系列數(shù)碼恒溫血小板振蕩保存箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1.開機(jī)

①打開電源開關(guān)。

②把儀器電源開關(guān)撥到“I”(開)的位置,

開始正確運(yùn)行。

③打開門,把振蕩箱電源開關(guān)撥到“I”(開)

的位置,振蕩箱開始振蕩運(yùn)行,并顯示

箱內(nèi)溫度22±2℃o

④拉開抽屜,把血小板袋平整放入,注意不

要外露,以免箱體在運(yùn)行時(shí)夾破血小板袋。然后,

關(guān)上抽屜和門讓其運(yùn)行。

2.關(guān)機(jī)

按依次順序把振蕩箱電源開關(guān)撥到“0”(關(guān))

的位置,振蕩箱停止運(yùn)行,然后關(guān)門,再

把儀器電源開關(guān)撥到“0”(關(guān))的位置。

3.消毒

按下消毒鍵,打開電源開關(guān),系統(tǒng)進(jìn)入消毒

狀態(tài)(設(shè)為20分鐘),消毒完畢后,先關(guān)消毒鍵,

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再關(guān)閉電源開關(guān)。

第九節(jié)WGH-I型數(shù)碼恒溫解凍箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

WGH-I型數(shù)碼恒溫解凍箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1.開機(jī)

①水箱內(nèi)注入清水;

②按順序依次打開電源開關(guān)。

2.融化周期

①裝載:將冷凍血漿袋套進(jìn)外包裝袋,掛到

籃架上;

②編程:設(shè)定融化周期時(shí)間,按下啟動(dòng)鈕;

③振蕩:掛籃降入水箱中,開始振蕩周期;

④上升:融化周期結(jié)束后,掛籃自動(dòng)升出水

面。

3.清潔

每周定期清洗更換清水,經(jīng)常保持水箱內(nèi)水

質(zhì)干凈。

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第二章血庫項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

第一節(jié)血樣采集和送檢、標(biāo)本核收、血型復(fù)查及血源組織標(biāo)準(zhǔn)操作程序

一、血樣采集和送檢與輸血申請(qǐng)單核收標(biāo)準(zhǔn)操作程序

采集血樣

1.采血護(hù)士:采集配血血樣,護(hù)士要求必須

有初級(jí)以上護(hù)士職稱,實(shí)習(xí)/進(jìn)修護(hù)士不得單獨(dú)

進(jìn)行。

2.明確病人用血申請(qǐng),核對(duì)病人信息:姓名、

性別、年齡、住院號(hào)、科別、床號(hào)等信息。

3,準(zhǔn)備采血材料,并明確以下內(nèi)容。

①正確的標(biāo)本:取材正確;

②正確的標(biāo)本量:血型復(fù)查(血交叉)標(biāo)本

抽取3ml;

③正確的標(biāo)識(shí):條形碼號(hào)標(biāo)簽或手工書寫標(biāo)

簽,但必須明確標(biāo)明姓名、科室床號(hào)、住院號(hào)。

4.采集血樣過程:

①確保在采集血樣時(shí),床邊正確的核對(duì)患

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者;

②正確地給血樣試管貼標(biāo)簽:血樣采集后,

在床邊給血樣貼標(biāo)簽,而不應(yīng)該事先貼好標(biāo)簽或

到護(hù)士站后貼標(biāo)簽;

③第一次輸血,應(yīng)同時(shí)采集輸血前五項(xiàng)檢測(cè)

血樣,并記錄抽取時(shí)間入病歷。

5.采血樣完成后,再次核對(duì)血樣標(biāo)識(shí)與申請(qǐng)

單信息,無誤后送輸血科,并進(jìn)行護(hù)理記錄。

6.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求:

①正確完整的血樣標(biāo)識(shí),與申請(qǐng)單一致;

②正確地核對(duì)與采血過程;

③標(biāo)本無溶血、不能在輸液處采集血樣;

④正確地記錄。

送收血樣

1.送血樣人員必須是醫(yī)護(hù)人員,嚴(yán)禁患者

家屬送血樣。

2.血樣送到輸血科后應(yīng)由送血人員和輸血

科人員一起核對(duì)以下信息:

①血樣信息與申請(qǐng)單信息是否一致;

②核對(duì)查看申請(qǐng)單的完整性(必須有血常規(guī)

+血型結(jié)果)、血樣標(biāo)識(shí)的完整性(必須內(nèi)容齊全、

文字清楚);

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③血樣標(biāo)本量、有無溶血;

④雙方核對(duì),無誤后簽字交接。

3.有以下情況,輸血科拒絕收血樣:

①血樣標(biāo)識(shí)不完整;

②血樣無標(biāo)識(shí);

③標(biāo)本量不足、血樣質(zhì)量有問題;

④無輸血申請(qǐng)單或申請(qǐng)單上無血常規(guī)+血型的

結(jié)果。

4.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求

①血樣信息完整無誤;

②血樣質(zhì)量符合要求及采集量正確。

血型復(fù)查核收

1.核對(duì):按要求核對(duì)輸血申請(qǐng)單與血標(biāo)本上

的全部內(nèi)容,并在標(biāo)本接收簿中作記錄;

2.核收:在檢驗(yàn)之星中,進(jìn)行血型復(fù)查醫(yī)囑

的核收;

3.血型復(fù)檢及不完全抗體測(cè)定(具體

操作詳見有關(guān)章節(jié));

4.核對(duì)輸血申請(qǐng)單、血標(biāo)本、病歷中

的姓名、住院號(hào)、血型(如與原始血型不相

符時(shí),必須重新抽取病人標(biāo)本檢測(cè)),正確

無誤后,報(bào)告其血型復(fù)查和抗篩結(jié)果,作記

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錄;

5.輸血申請(qǐng)單按血型類別在文件夾中

放置;血型復(fù)查后的標(biāo)本,按先后次序放在

試管架中。

二、血源組織

1.對(duì)臨床醫(yī)師申請(qǐng)用血種類、用血量

進(jìn)行了解核實(shí),提前備好相應(yīng)血源;

3.血庫存量組織,要求每日存量必須保持在

周用血量的1/2;

當(dāng)發(fā)生重大事件急需大量血液時(shí),按照急診

用血應(yīng)急預(yù)案執(zhí)行

3.特殊血液組織

①緊急用血時(shí),血庫人員在接到特殊用血申

請(qǐng)單時(shí),應(yīng)在第一時(shí)間先向市中心血站報(bào)告用血

種類、用血量和用血時(shí)間等;

②非緊急用時(shí),按規(guī)定須提前1天預(yù)約,由血

庫值班人向血站報(bào)告;

③Rh(D)陰性和其它稀有血型患者的輸血

擇期手術(shù)病人輸血:當(dāng)臨床遇到稀有血型患者

后,應(yīng)對(duì)患者家庭成員、兄弟姐妹進(jìn)行篩選,符

合者到血站體檢獻(xiàn)血,并填寫《稀有血型用血申

請(qǐng)單》。組織到血源后,臨床再擇期手術(shù)用血;

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急診搶救病人緊急輸血:按衛(wèi)生部《臨床輸血

技術(shù)規(guī)范》第十五條Rh(D)檢查可除外。也

可采用自身輸血、同型輸血或配合型輸血。對(duì)緊

急輸用配合型血液時(shí),由經(jīng)管醫(yī)師向患者或其家

屬(代理人)講明,征得同意后方可輸用,由醫(yī)

患雙方共同簽字并載入病歷;

具體實(shí)施可按照稀有血型及應(yīng)急用血管理

條款執(zhí)行

④特殊血液預(yù)約的信息反饋與記錄。

注:

特殊血液是指:單采血小板、洗滌紅細(xì)胞、

冷沉淀、輻照血、Rh(D)陰性和其它稀有血型血

液等

第二節(jié)ABO&Rh(D)血型復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

ABO&Rh(D)血型復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)操作程序

抗A、抗B、抗D血清定型(試管或玻片法)

標(biāo)準(zhǔn)操作程序

【方法原理】

1.ABO血型:根據(jù)紅細(xì)胞上有或無A

抗原或/和B抗原,進(jìn)行紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)。

正定型,是用已知抗一A和抗一B分型血清

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來測(cè)定紅細(xì)胞上有無相應(yīng)的A抗原或/和B

抗原;所謂反定型,是用已知A細(xì)胞和B

細(xì)胞來測(cè)定血清中有無相應(yīng)的抗一A或/和

抗一B。

2.Rh(D)血型:用抗D血清進(jìn)行鑒

定,則凡帶有D抗原者稱為Rh(D)陽性,

不帶D抗原者稱為Rh(D)陰性。

【標(biāo)本采集和處理】

1.標(biāo)本采集:常規(guī)靜脈采血3ml于

EDTA.K2o

2.標(biāo)本保存:室溫放置不超過8小時(shí),

4℃保存不超過72小時(shí),無溶血現(xiàn)象。

【試劑】

1.抗A抗B血型定型試劑(單克隆抗體長

春博德)

2.Anti-D(IgM)Biotesto

3.5%及0型試劑紅細(xì)胞鹽水懸液,制備方

法見附注。

【操作步驟】

1.取小試管3支(或玻片一張劃成三等分),

分別標(biāo)明抗A、抗B、抗D,用滴管分別加抗A、

抗B、抗D分型血清各1滴,再以滴管分別加受

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檢者5%紅細(xì)胞(取1滴壓積紅細(xì)胞加16滴生

理鹽水)懸液1滴,混和。

2.另取小試管3支(或玻片一張劃成三等

分),分別標(biāo)明A、B、O細(xì)胞,用滴管分別加入

受檢者血清1滴,再分別滴加A、B、O型5%

試劑紅細(xì)胞懸液1滴,混和。

3.立即以1000"min離心Imin(或?qū)⒉F?/p>

不斷輕輕轉(zhuǎn)動(dòng),使血清與細(xì)胞充分混勻,連續(xù)約

15min)o

4.將試管輕輕搖動(dòng),先以肉眼觀察有無凝

集(或溶血)現(xiàn)象。如肉眼不見凝集,應(yīng)將反應(yīng)

物倒于玻片上,再以低培鏡檢查。

5.觀察結(jié)果時(shí)既要看有無凝集,更要注意

凝集強(qiáng)度,此有助于A、B亞型、類B或cisAB

的發(fā)現(xiàn)。

6.凝集強(qiáng)度判斷標(biāo)準(zhǔn):

4+=紅細(xì)胞凝集成一大塊,血清清晰透明。

3+二紅細(xì)胞凝集成數(shù)小塊,血清尚清晰。

2+=紅細(xì)胞凝塊分散成許多小塊,見到游離

紅細(xì)胞。

1+二肉眼可見大顆粒,周圍有較多游離紅細(xì)

胞。

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土=鏡下可見數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起,周圍

有很多游離紅細(xì)胞。

MF二混合凝集外觀(mixedfield)是指鏡下

可見少數(shù)紅細(xì)胞凝集,而極大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分

散分布。

一表示陰性,鏡下未見凝集,紅細(xì)胞均勻分

布。見表2—1

表2—1ABO血型正反定型結(jié)果

分型血清+受檢者受檢者血清+試

紅細(xì)胞受檢者劑紅細(xì)胞

抗一A抗一血型A細(xì)胞B細(xì)

B抗一A+B胞O細(xì)胞

+

—++

A

+

B

++

O+

+

AB

+

++

注:+=凝集;一=不凝集。

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7.“AB”注意冷凝集或自身凝集,能夠在

37c水浴中鑒別。

8.血型復(fù)查結(jié)果輸入檢驗(yàn)之星中,核對(duì)后

審定報(bào)告。

第三節(jié)RhD血型鑒定標(biāo)準(zhǔn)操作程序

RhD血型鑒定標(biāo)準(zhǔn)操作程序

RhD血型系統(tǒng)經(jīng)過輸血或妊娠可產(chǎn)生免疫性

抗體,當(dāng)遇到相應(yīng)抗原,可致溶血反應(yīng)或新生兒

溶血病。若誤診誤治,可導(dǎo)致患者殘廢或死亡。

臨床輸血時(shí),一般需作助血型鑒定。

一、RhD血型鑒定標(biāo)準(zhǔn)操作程序

【原理】

應(yīng)用血凝試驗(yàn)檢測(cè)紅細(xì)胞抗原。RhD血型是

由紅細(xì)胞表面是存在或缺失D抗原確定。D抗原

于細(xì)胞株BS226細(xì)胞產(chǎn)生的單克隆抗體發(fā)生特

異性反應(yīng)。

【試劑】

RhD(IgM)血型定型試劑盒(單克隆抗體)

【操作】

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1.鹽水法取小試管(10mmX60mm)1支,

蠟筆標(biāo)記,加試劑1滴,再加人5%受檢者紅細(xì)

胞1滴,混勻,1000r/min離心lmin觀察結(jié)果。

2.對(duì)照管用蠟筆標(biāo)記陽性和陰性,分別

加人抗D血清(IgM)1滴,陽性對(duì)照管加Rh陽

性紅細(xì)胞1滴,陰性對(duì)照管加Rh陰性紅細(xì)胞1

滴,混勻,1000r/min離心lmin觀察結(jié)果。3.結(jié)

果判定如陽性對(duì)照管凝集,陰性對(duì)照管不凝

集,受檢管凝集,即表示受檢者紅細(xì)胞上有相應(yīng)

抗原;受檢管不凝集,即表示受檢紅細(xì)胞上沒有

相應(yīng)抗原。________________________________

【附注】

1.單克隆IgMRh抗血清有商品試劑供應(yīng),

可用鹽水介質(zhì)做凝集試驗(yàn)??寡?IgM)1滴,

加5%受檢者紅細(xì)胞懸液1滴,混合,置7℃水浴

lh,觀察凝集反應(yīng)。

2.如臨床上只要求檢查是否為Rh(D)陽性

還是陰性,只需用抗D血清進(jìn)行鑒別。如結(jié)果為

陰性,則應(yīng)進(jìn)一步檢查排除弱D。

3.在中國漢族人群中,Rh陽性占99.66%,

Rh陰性占0.34%o

4.陽性對(duì)照可取3人0型紅細(xì)胞混合配成。

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陰性對(duì)照不易得到,一般設(shè)計(jì)方法為正常AB型

血清1滴,加5%D陽性紅細(xì)胞懸液1滴和菠蘿

酶試劑混勻,與受檢管一同置7℃水浴lh。

5.Rh血型鑒定應(yīng)嚴(yán)格控制溫度與時(shí)間,因

Rh抗原、抗體凝集反應(yīng)時(shí),凝塊比較脆弱,觀

察反應(yīng)結(jié)果時(shí),應(yīng)輕輕側(cè)動(dòng)試管,不可用力振搖。

【假陽性反應(yīng)原因分析】

1.試劑中存在具有其它特異性的抗體(指不

完全D抗體),因此,對(duì)疑難抗原定型時(shí),建議

用不同來源的抗血清同時(shí)做兩份試驗(yàn),因?yàn)槭褂?/p>

兩份特異性相同的抗血清得到不一致的結(jié)果時(shí),

就會(huì)使檢查人員意識(shí)到有進(jìn)一步試驗(yàn)的必要。

2.多凝集紅細(xì)胞與任何人血清都會(huì)發(fā)生凝

集。

3.當(dāng)用未經(jīng)洗滌的細(xì)胞做試驗(yàn)時(shí),試樣中

的自身凝集和異常蛋白質(zhì)可能引起假陽性結(jié)果。

4.試劑瓶可能被細(xì)菌、外來物質(zhì)或其它抗

血清所污染。

【假陰性反應(yīng)原因分析】

1.搞錯(cuò)抗血清,每次試驗(yàn)時(shí)應(yīng)細(xì)心核對(duì)抗血

清瓶子上的標(biāo)簽。

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2.試管中漏加抗血清,在加人細(xì)胞懸液之

前,必須檢查試管中有無抗血清。

3.未遵照抗血清使用說明書做試驗(yàn),如抗

血清和細(xì)胞間的比例以及溫育的溫度和時(shí)間不

正確。

4.抗血清保存不妥,試劑中的免疫球蛋白

變質(zhì)。

二、弱D(weaKD)型鑒定標(biāo)準(zhǔn)操作程序

【原理】

根據(jù)美AABB技術(shù)手冊(cè)第12版(1996)規(guī)定:

D“這術(shù)語不再使用,攜帶弱的D抗原的紅細(xì)胞

仍被歸類為D陽性,稱之“弱D(weaKD)”。原

稱之“D”紅細(xì)胞一部分具有與正常D

陽性紅細(xì)胞同樣性質(zhì)的D抗原,只是D抗原數(shù)量

減少;另一部分原紅細(xì)胞D抗原與正常D

抗原相比缺少正常D抗原中1個(gè)或多個(gè)抗原表

位。

弱D型紅細(xì)胞與某批或幾批抗D血清在鹽水

介質(zhì)及酶試驗(yàn)中不發(fā)生凝集,但在間接抗人球蛋

白試驗(yàn)中均發(fā)生凝集。因此,當(dāng)用酶試驗(yàn)檢查發(fā)

現(xiàn)與抗D不凝集時(shí),不應(yīng)輕率地定為Rh陰性,

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需進(jìn)一步排除弱D型的可能。

【試劑】

1.抗D血清不同生產(chǎn)單位或批號(hào)不同的抗D

血清3?5個(gè)。

2.抗人球蛋白血清。

3.1%菠蘿酶溶液。

4.5%受檢紅細(xì)胞懸液。

【操作】

1.將受檢者紅細(xì)胞分別與各批抗D血清作

間接抗人球蛋白試驗(yàn)(方法見本章第四節(jié))。

2.將受檢者紅細(xì)胞分別與各批抗D血清作

酶試驗(yàn)(方法見本章第五節(jié))。

【結(jié)果判定】

受檢紅細(xì)胞與各批抗D血清在酶試驗(yàn)中都

不凝集或只與其中1批或數(shù)批抗D血清凝集,但

在間接抗人球蛋白試驗(yàn)中都凝集者,都屬弱D型

細(xì)胞。

【附注】

1.在臨床輸血中,弱D型人經(jīng)輸注D陽性紅

細(xì)胞后可產(chǎn)生抗D抗體。因此受血者若為弱D型,

應(yīng)作Rh陰性論,應(yīng)輸注Rh陰性血液;供血者為

弱D型者,應(yīng)作Rh陽性論,不應(yīng)當(dāng)輸血給Rh陰

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性的受血者。

2.弱D型婦女與Rh陽性丈夫生育的嬰兒可

能發(fā)生新生兒溶血病。

第四節(jié)紅細(xì)胞血型抗體篩查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

紅細(xì)胞血型抗體篩查標(biāo)準(zhǔn)操作程序

紅細(xì)胞血型抗體檢查適用于下列情況:

1.ABO血型鑒定發(fā)現(xiàn)受檢者血清中有ABO

血型以外的抗體時(shí);

2.供血者血清抗體篩檢;

3.輸血前受血者血清抗體檢查;

4.輸血后溶血性輸血反應(yīng)疑為由同種抗體

引起時(shí);

5.孕婦血清的抗體檢查;

6.新生兒溶血病嬰兒血液中抗體檢查;

7.直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽性紅細(xì)胞上抗體

檢查。

篩查方法

一、鹽水介質(zhì)法:

【方法原理】

有些抗體能凝集鹽水混懸的紅細(xì)胞。這些抗體

一般是IgM類抗體,其中許多在22℃下反應(yīng)最

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好。在室溫下有活性而在37c無活性的抗體是

沒有什么臨床意義的。對(duì)患者或供血者的血樣不

需要用這種方法。在37℃下也有活性的樣本(如

抗KelL抗D)是有臨床意義的,

而這些抗體一般可用抗人球蛋白試驗(yàn)和酶技術(shù)

來檢查。

【試劑】

1.試劑紅細(xì)胞:由血型參比實(shí)驗(yàn)室或血液

中心提供,或由各血庫從供血者或工作人員中進(jìn)

行普查得到。篩查紅細(xì)胞以2個(gè)或3個(gè)人抗原互

補(bǔ)的不同的紅細(xì)胞為1套,單獨(dú)分開分裝,因?yàn)?/p>

單一的篩查紅細(xì)胞較混紅細(xì)胞提供較高的敏感

性。

因?yàn)樵S多抗體同雙倍量抗原(純合子)的紅

細(xì)胞反應(yīng)比同單倍量抗原(雜合子)的紅細(xì)胞反應(yīng)

要強(qiáng)得多,而不可能得到的都是純合子紅細(xì)胞,

因此,篩查紅細(xì)胞的抗原組成必須是互補(bǔ),經(jīng)提

供盡可能多的必要的抗原。

篩查紅細(xì)胞大多不包括低頻率抗原,因此不

可能檢出低頻率抗體。這種抗體只有在抗體鑒定

時(shí)被測(cè)到,或在交叉配血時(shí)被發(fā)現(xiàn),或在新生兒

出生后出現(xiàn)黃疽時(shí)被發(fā)現(xiàn)。

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每一組篩查紅細(xì)胞中至少有常見的抗原,而

且是互補(bǔ)的。

如果某種抗體只能與一種特定抗原的純合

子細(xì)胞起反應(yīng),而篩查紅細(xì)胞上這種特定抗原是

雜合子,則該抗體可能被漏檢。

合適的純合子表現(xiàn)型的供血者是很少的,為

了提供有重要抗原的純合子細(xì)胞,需要使用來自

3個(gè)供血者的紅細(xì)胞。

2.血清標(biāo)本:雖然血清和血漿中存在相同

的紅細(xì)胞抗體,但一般都采用血清進(jìn)行抗體檢

查。因?yàn)椋?/p>

①如果血漿中的凝血系統(tǒng)發(fā)生部分激活,就

可產(chǎn)生纖維蛋白,干擾對(duì)凝集的解釋;

②只有經(jīng)過激活補(bǔ)體的作用才能證實(shí)的抗

體,不能在血漿中檢出;

③常見的抗凝劑是結(jié)合Ca2+來防止凝固,

而Ca2+對(duì)于補(bǔ)體的激活是必不可少的。

血清標(biāo)本的采取時(shí)間應(yīng)注意:例如,受血者

血樣一定要在48h內(nèi)采集。為了檢出由于最近紅

細(xì)胞刺激而產(chǎn)生的抗體,血樣必須是新近的。如

果抗體篩查結(jié)果陰性,有時(shí)需要隔數(shù)天后重新采

樣復(fù)查,因?yàn)榇藭r(shí)抗體的濃度可逐漸增強(qiáng)。

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每一樣本應(yīng)詳細(xì)記錄病史,包括姓名、性別、

年齡、民族、妊娠史、輸血史,使用過哪些藥物

(如甲基多巴、青霉素、先鋒霉素等)、采樣日期、

有無抗凝劑、抗凝劑的種類和劑量、血液樣本的

外觀、有無溶血、黃疽以及紅細(xì)胞比積等。

【操作步驟】

1.取受檢者血清2滴于標(biāo)好的試管中。

2.取2%試劑(篩查)紅細(xì)胞懸液1滴于每

個(gè)試管中,混和。

3.1000r/min離心Imin(離心速度和時(shí)間應(yīng)

按質(zhì)控規(guī)定)。

4.觀察溶血和凝集反應(yīng),記錄結(jié)果。

5.按需要置室溫(22?24℃)溫育15?30min。

6.離心,觀察溶血和凝集,并記錄結(jié)果。溶

血或凝集都是陽性結(jié)果。

7.報(bào)告結(jié)果于檢驗(yàn)之星中。

二、凝聚胺法

【方法原理】

利用低離子介質(zhì)(LIM),降低介質(zhì)的離子

強(qiáng)度,減少紅細(xì)胞周圍的陽離子云,以促進(jìn)紅細(xì)

胞和血清(漿)中的抗體結(jié)合。加入凝聚胺可使

紅細(xì)胞產(chǎn)生非特異性的凝聚。最后,加入懸浮液,

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具有中和凝聚胺的作用,使正常紅細(xì)胞非特異性

凝集散開,試驗(yàn)結(jié)果為陰性;但紅細(xì)胞被相應(yīng)的

抗體致敏,則會(huì)被凝聚胺凝結(jié),凝集就不會(huì)散開,

試驗(yàn)結(jié)果為陽性。

【標(biāo)本采集和處理】

1.標(biāo)本采集:常規(guī)靜脈采血于分離膠/促凝

劑管(血清)、或靜脈采血3ml于EDTA.K2(血

漿),一般采用血清進(jìn)行抗體檢查。

2.血清標(biāo)本的采取時(shí)間:要求受檢者血樣

一定要在輸血前3天內(nèi)采集,血樣必須是新近

的。

3.標(biāo)本分離保存:血清及早分離防止溶血,

可冷凍保存,如用冰凍血清作抗體檢查,融化后

的樣本要充分混和,重復(fù)凍融的標(biāo)本不能供抗體

鑒定用。

【試劑】

1.抗體篩查I、II、III細(xì)胞。

2.凝聚胺試劑:低離子介質(zhì)(LIM)、凝聚

胺(Polybrene)>懸浮液(Resuspending)。

3.3?5%紅細(xì)胞懸液:取多個(gè)“0”型人紅

細(xì)胞,經(jīng)生理鹽水洗滌三次,配成3?5%紅細(xì)胞

懸液。

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【操作步驟】

1.準(zhǔn)備樣本,患者血清(血漿)、抗體篩查

I、II、III細(xì)胞或3?5%紅細(xì)胞懸液。

2.取小試管2支,各加被檢血清(漿)2

滴,分別加入3?5%篩檢紅細(xì)胞1滴或I和n

細(xì)胞50ul(0.8%)o

3.各加入LIM0.7ml,混合后,加凝聚胺

Polybrene2滴,并混合。

4.以3400rpm,離心10秒,把上清液倒掉,

輕輕搖動(dòng)試管,目測(cè)紅細(xì)胞有無凝集,如無凝集,

則必須重作。

5.最后加入懸浮液Resuspending!滴,輕

輕轉(zhuǎn)動(dòng)試管混合并觀察結(jié)果。如凝集散開,表示

由凝聚胺引起的非特異性凝集,抗體篩檢結(jié)果為

陰性。如凝集不散開,則紅細(xì)胞抗原抗體結(jié)合的

特異性反應(yīng),抗體篩檢結(jié)果為陽性,應(yīng)進(jìn)一步作

抗體鑒定。

6.報(bào)告結(jié)果于檢驗(yàn)之星中。

五、微柱凝膠法

【方法原理】

利用凝膠過濾技術(shù)和離心技術(shù),抗體篩查細(xì)

胞上有特定的抗原,抗原能夠和相應(yīng)的抗體結(jié)

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合。當(dāng)待檢血清(漿)樣本中有不完全抗體時(shí),

抗體篩查細(xì)胞和待檢血清(漿)中不完全抗體可

專一性的結(jié)合??谷饲虻鞍卓山Y(jié)合抗體,經(jīng)過橋

介作用使細(xì)胞凝集。凝集發(fā)生說明血清(漿)中

有不完全抗體。

【標(biāo)本采集和處理】

1.標(biāo)本采集:常規(guī)靜脈采血于分離膠/促凝

劑管(血清)、或靜脈采血3ml于EDTA.K2(血

漿),一般采用血清進(jìn)行抗體檢查。

2.血清標(biāo)本的采取時(shí)間:要求受檢者血樣

一定要在輸血前3天內(nèi)采集,血樣必須是新近

的。

3.標(biāo)本分離保存:血清及早分離防止溶血,

可冷凍保存,如用冰凍血清作抗體檢查,融化后

的樣本要充分混和,重復(fù)凍融的標(biāo)本不能供抗體

鑒定用。

【試劑】

1.抗體篩查I、II、III細(xì)胞。

2.抗人球蛋白檢測(cè)卡。

3.3?5%紅細(xì)胞懸液:取多個(gè)“0”型人紅

細(xì)胞,經(jīng)生理鹽水洗滌三次,配成3?5%紅細(xì)胞

懸液。

文檔僅供參考,不當(dāng)之處,請(qǐng)聯(lián)系改正。

【操作步驟】

1.準(zhǔn)備樣本,患者血清(血漿)、抗體篩查

I、II、III細(xì)胞或3?5%紅細(xì)胞懸液。

2.標(biāo)記抗人球蛋白檢測(cè)卡、姓名、住院號(hào)、

標(biāo)明I、II、IIIO

3.微柱中加50ul待檢樣本血清(漿)。

4.加抗體篩查I、n、ni細(xì)胞各soul(o.8%)o

5.37℃15分鐘,離心10分鐘。

6.讀結(jié)果和記錄。離心時(shí),凝集塊不能經(jīng)

過凝膠間隙而留在凝膠上層,呈陽性反應(yīng)。未凝

集血細(xì)胞離心時(shí)可經(jīng)過凝膠間隙而沉積在凝膠

管底部,呈陰性反應(yīng)。

7.報(bào)告結(jié)果于檢驗(yàn)之星中。

【附注】

1.判讀試驗(yàn)結(jié)果常見的代號(hào)是:

4+:一個(gè)結(jié)實(shí)的凝集塊。

3+:幾個(gè)大的凝集塊。

2+:中等大的凝塊,背景清晰。

1+:小凝集塊,背景混濁。

±:微小凝集塊,背景混濁。

0:無凝集或溶血。

PH:表示部分溶血,有一些細(xì)胞殘留。

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H:表示完全溶血,無殘留細(xì)胞。

2.抗體篩查試驗(yàn)結(jié)果的解釋

抗體篩檢試驗(yàn)是很有價(jià)值的,但也有其局限

性。一個(gè)陰性試驗(yàn)不一定意味著這一血清中沒有

抗體,而只是在使用這些技術(shù)時(shí),缺乏與篩查細(xì)

胞起反應(yīng)的抗體。如果臨床資料和其它實(shí)驗(yàn)室所

見提供了另外的線索,就應(yīng)擴(kuò)大常規(guī)篩查方法。

例如,如果ABO正反定型不符,就應(yīng)在室溫下做

抗體篩查。如疑為溶血性輸血反應(yīng)、新生兒溶血

病或自身免疫性溶血性貧血,有必要做酶試驗(yàn)或

以放散液做篩查,以證明引起疾病的抗體。

第五節(jié)抗人球蛋白試驗(yàn)

抗人球蛋白試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

【方法原理】

抗人球蛋白試驗(yàn)(antiglobulintest,AGT)

又稱Coombs試驗(yàn),是檢查不完全抗體的一種很

好的方法、將抗人球蛋白血清(antiglobulin

serum,AGS)加入已經(jīng)致敏的紅細(xì)胞鹽水懸液

中,紅細(xì)胞表面的抗體球蛋白(即使其致敏的不

完全抗體)與抗人球蛋白血清中的抗體發(fā)生特異

性反應(yīng),使紅細(xì)胞發(fā)生凝集??谷饲虻鞍籽宄?/p>

能夠測(cè)定紅細(xì)胞上IgG抗體外,還能夠測(cè)定IgM

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和IgA,也能夠測(cè)補(bǔ)體組分(C3、C4)o所謂廣譜

AGS,即包括抗IgG和抗C3抗體。

【標(biāo)本采集和處理】

標(biāo)本采集:常規(guī)靜脈采血3ml于

EDTA.K2o

【試劑】

1.1%標(biāo)準(zhǔn)A/B/O型紅懸。

2.抗人球蛋白檢測(cè)卡。

3.0.9%生理鹽水。

【操作步驟】

一、AB0血型、RH血型鑒定、直接抗人球蛋白

試驗(yàn):

(1)在戴安娜微柱凝膠新生兒血型卡的8個(gè)

孔中分別加入1%的樣本紅細(xì)胞50ul;

(2)血型卡直接放入專用離心機(jī)離心,觀察結(jié)

果。

二、釋放試驗(yàn)

(1)取壓積紅細(xì)胞0.2ml洗滌三次,再加

0.2ml生理鹽水,56℃水浴10分鐘,轉(zhuǎn)/min

離心3min,吸取上清液備用;(即放散液)

(2)根據(jù)新生兒AB0血型,分別在微孔中加

入1%標(biāo)準(zhǔn)A/B/0型紅懸50ul,然后加入50ul上

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清液,置37℃孵育15分鐘,離心,觀察結(jié)果。

患者ABO血型為“A”型的,加入標(biāo)準(zhǔn)A

型、O型紅細(xì)胞懸液;

“B”型的,加入標(biāo)準(zhǔn)B型、O型紅

細(xì)胞懸液;

“AB”型的,加入標(biāo)準(zhǔn)A型、B型、

O型紅細(xì)胞懸液;

“O”型的,加入標(biāo)準(zhǔn)O型紅細(xì)胞懸

液。

三、游離抗體測(cè)定

(1)根據(jù)新生兒ABO血型,分別在微孔中加

入1%標(biāo)準(zhǔn)A/B/O型紅懸50ul,然后加入50ul樣

本血清;(原則同上)

(2)置37℃孵育15分鐘,離心,觀察結(jié)果。

結(jié)果判斷:

(1)ABO血型、RH血型鑒定、直接抗人

球蛋白試驗(yàn)結(jié)果判斷:

第L5孔

第6孔

Ctl為陰性對(duì)照管;

第7孔

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為兔多克隆抗IgG;

第8孔

AHG為抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果。

(2)游離、釋放試驗(yàn)結(jié)果判斷:

凝集有80%的紅細(xì)胞在微柱管下端2/3以下者

(即1+以上)為陽性。

第六節(jié)血液交叉配血試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

血液交叉配血試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

交叉配血主要是檢查受血者血清中有無破

壞供血者紅細(xì)胞的抗體,故受血者血清加供

血者紅細(xì)胞相配的一管稱為“主側(cè)”;供血者血

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清加受血者紅細(xì)胞相配的一管稱為“次側(cè)”,兩

者合稱交叉配血。

交叉配血試驗(yàn)又稱不配合性試驗(yàn),是確?;?/p>

者安全輸血必不可少的試驗(yàn),完整的操作

規(guī)程應(yīng)包括:①查閱受血者以前的血型檢查記

錄,如與這次檢查結(jié)果有所不同,應(yīng)及時(shí)分析原

因;②對(duì)收到的受血者血樣應(yīng)作ABO正反定型,

Rh血型和其它血型檢查以及血型抗體檢測(cè)和鑒

定;③選擇預(yù)先進(jìn)行血型檢查的合格供血者作交

叉配血試驗(yàn)。

一、配血要求

1.受血者配血試驗(yàn)的血樣(血型復(fù)查)必須

是輸血前三天之內(nèi)的;

2.核對(duì)病人資料:核對(duì)輸血申請(qǐng)單、受血

者血樣、病歷三者,其內(nèi)容包括:患者姓名、性

別、年齡、科室床號(hào)、住院號(hào)、血型(原始血常

規(guī)血型和血型復(fù)查中血型)、用血品種、用血量

等,必須正確無誤;

3.核對(duì)血液:血液完整性、血液標(biāo)簽、血

液質(zhì)量;

4.核對(duì)取血憑證:按臨床(取血憑證)實(shí)

際用血品種、量進(jìn)行配發(fā)血;

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5.配血前,先復(fù)查受血者和供血者

ABO血型(正、反定型)、Rh(D)血型和

抗篩,并報(bào)告其結(jié)果;

6.在電子病歷或急診醫(yī)生工作站中,

檢查臨床輸血五項(xiàng)的執(zhí)行情況;

7.輸注全血、濃縮紅細(xì)胞、洗滌紅細(xì)胞、

濃縮白細(xì)胞等患者應(yīng)進(jìn)行交叉配血試驗(yàn),其方

法:采用鹽水配血試驗(yàn)、凝聚胺法。

二、鹽水配血試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

【方法原理】

本法是當(dāng)前最常見的配血方法,能夠發(fā)現(xiàn)臨

床上最重要的ABO不配合性。當(dāng)受血者血清

(漿)和供血者紅細(xì)胞經(jīng)混合并離心后,如有

ABO不配合問題,就會(huì)很快顯示出來。

【標(biāo)本采集和處理】

1.標(biāo)本采集:常規(guī)靜脈采血3ml于

EDTA.K2o

2.標(biāo)本采取時(shí)間:要求受檢者血樣一定要

在輸血前48h(抗篩是48h)內(nèi)采集,血樣必須

是新近的,無溶血現(xiàn)象。

【試劑】

L抗A抗B血型定型試劑(單克隆抗體長

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春博德)

2.Anti-D(IgM)Biotesto

3.0.9%生理鹽水

【操作步驟】

1.從貯血冰箱中取出所需血液,取試管一

支,貼上小標(biāo)簽,在血袋配血管中剪下配血管于

試管內(nèi)。

2.取試管二支,標(biāo)明主次側(cè),主側(cè)管加受

血者血清(漿)2滴,供血者5%紅細(xì)胞懸液1

滴;次側(cè)管加供血者血清(漿)2滴,受血者5%

紅細(xì)胞懸液1滴?;靹?,以1000r/min離心Imin。

3.觀察結(jié)果:輕輕側(cè)動(dòng)試管,冬季應(yīng)注意

冷集素干擾。ABO同型配血,“主側(cè)”和“次側(cè)”

均無溶血及凝集表示無輸血禁忌,能夠輸血。

三、凝聚胺配血試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

【方法原理】

利用低離子介質(zhì)(LIM),降低介質(zhì)的離子

強(qiáng)度,減少紅細(xì)胞周圍的陽離子云,以促進(jìn)紅細(xì)

胞和血清(漿)中的抗體結(jié)合。加入凝聚胺

(Polybrene)溶液后,可使紅細(xì)胞產(chǎn)生非特異

性的凝聚。最后,加入懸浮液(Resuspending)

具有中和凝聚胺的作用,使正常的紅細(xì)胞非特異

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性凝集散開,試驗(yàn)結(jié)果為陰性;但如果紅細(xì)胞被

相應(yīng)抗體致敏,則會(huì)被凝聚胺凝結(jié),凝集就不會(huì)

散開,試驗(yàn)結(jié)果為陽性。

【標(biāo)本采集和處理】

1.標(biāo)本采集:常規(guī)靜脈采血3ml于

EDTA.K2o

2.標(biāo)本采取時(shí)間:要求受檢者血樣一定要

在輸血前48h內(nèi)采集,血樣必須是新近的,無溶

血現(xiàn)象。

【試劑】

L抗A抗B血型定型試劑(單克隆抗體長

春博德)

2.Anti-D(IgM)Biotesto

3.0.9%生理鹽水

4.凝聚胺試劑:低離子介質(zhì)(LIM)、凝聚

胺(Polybrene)、懸浮液(Resuspending)。

【操作步驟】

1.從貯血冰箱中取出所需血液,取試管一

支,貼上小標(biāo)簽,在血袋配血管中剪下配血管于

試管內(nèi)。

2.取試管二支,標(biāo)明主次側(cè),主側(cè)管加受

血者血清(漿)2滴,供血者5%紅細(xì)胞懸液1

文檔僅供參考,不當(dāng)之處,請(qǐng)聯(lián)系改正。

滴;次側(cè)管加供血者血清(漿)2滴,受血者5%

紅細(xì)胞懸液1滴。

3.各力口LIMO.7mL混勻,再各力口Polybrene

溶液2滴,并混勻。

4.用離心機(jī)1000g離心力(普通離心機(jī)以

3400rpm),離心10秒,然后把上清液倒掉,輕

輕搖動(dòng)試管,目測(cè)紅細(xì)胞有無凝集,無凝集,則

必須重做。

5.最后加入Resuspending2滴,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)

試管混合并同時(shí)觀察結(jié)果,如在30秒內(nèi)凝集散

開,代表是由Polybrene引起的非特異性凝集,

配血結(jié)果相合;如凝集不散開,則為紅細(xì)胞抗原

抗體結(jié)合的特異性反應(yīng),配血結(jié)果不相合。如反

應(yīng)可疑,可進(jìn)一步倒在玻片上用顯微鏡觀察。

6.血液交叉合格后,應(yīng)在醫(yī)院血庫管理軟

件中進(jìn)行配血、出庫操作,打印血液交叉報(bào)告單

和患者輸血不良反應(yīng)反饋單。然后,保存。

【附注】

血液樣本的保留和貯存:受血者和供血者的

血液樣本必須密封或蓋緊,在每次輸血之后,應(yīng)

在2?6℃保存至少7天以上。

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第七節(jié)血液出庫(發(fā)血)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

血液出庫(發(fā)血)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

一、核對(duì)、簽字

1.嚴(yán)格執(zhí)行“三查”、“八對(duì)”制度(見輸

血科“三查”、“八對(duì)”制度)。

2.輸血科(血庫)發(fā)血時(shí),應(yīng)當(dāng)認(rèn)真檢查

申請(qǐng)單的填寫項(xiàng)目,合格后方可發(fā)血。未按衛(wèi)生

部《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床用血管理辦法》第十一條規(guī)定

辦理申報(bào)手續(xù)的不得發(fā)血。

3.配血合格后,由醫(yī)務(wù)人員憑取血憑證到

血庫取血,領(lǐng)血時(shí),收發(fā)雙方共同核對(duì)患者(姓

名、性別、年齡、科室床號(hào)、住院號(hào)、血型、用

血品種、用血量)和血站名稱、許可證號(hào)、血型、

血袋編號(hào)、血品種、血量、血液質(zhì)量、血袋完整

性、血液有效時(shí)間以及配血試驗(yàn)結(jié)果等,準(zhǔn)確無

誤時(shí),雙方共同簽字后方可發(fā)血。

二、血液出庫

1.發(fā)血在醫(yī)院血庫管理軟件中進(jìn)行(詳見

醫(yī)院血庫管理軟件操作細(xì)則),并打印交叉配血

報(bào)告單和患者輸血不良反應(yīng)反饋單。

2.收發(fā)雙方共同核對(duì)無誤后,由取血者把

血液放入專用的血液保溫箱內(nèi)送至所需科室輸

文檔僅供參考,不當(dāng)之處,請(qǐng)聯(lián)系改正。

注(要求血液出庫后30分鐘內(nèi)輸入患者體內(nèi))。

3.在血液出庫登記本中,記錄血液發(fā)出時(shí)

間、受血者姓名、科室床號(hào)、住院號(hào)、血品種欄

記錄血量、血費(fèi)、用血互助金、檢查費(fèi)、血袋號(hào)、

發(fā)(?。┭吆灻?/p>

4.血液發(fā)出后,患者與供血者血樣保存于

2?6℃冰箱至少7天。

5.血液發(fā)出后不得退回,以保證下一個(gè)用

血者的安全。如臨床對(duì)發(fā)出的血液要求退回時(shí),

應(yīng)由醫(yī)院主管(醫(yī)務(wù)部)領(lǐng)導(dǎo),輸血科主任簽字

同意“報(bào)廢處理”后,方可退還血費(fèi)等。

6.每日17:00下班前進(jìn)行出庫統(tǒng)計(jì),并記

錄于血液出入庫表格內(nèi)。次晨8時(shí)再統(tǒng)計(jì)夜班出

入庫情況,并加以修正。每月進(jìn)行出入庫統(tǒng)計(jì)并

作保存。

三、血袋回收

回收后的血袋進(jìn)行記錄時(shí)間,并保存于2?

6℃冰箱7天,后按醫(yī)療廢棄物焚燒處理。

第八節(jié)數(shù)據(jù)記錄及費(fèi)用收取標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

數(shù)據(jù)記錄及費(fèi)用收取標(biāo)準(zhǔn)操作程序

一、數(shù)據(jù)記錄

當(dāng)血液發(fā)出后,必須記錄:

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1.輸血申請(qǐng)單上記錄血品種、血量。把血

袋中的小標(biāo)簽貼在申請(qǐng)單上,表明品種、血量。

2.用血通知單上記錄用血日期、血品種及

血量,并簽名。

3.血費(fèi)記錄簿上記錄發(fā)出血液品種的數(shù)量、

血費(fèi)、互助金、檢查費(fèi)等金額。對(duì)欠款記帳或用

現(xiàn)金收取者,應(yīng)用紅筆注明“欠款記帳”或“門

診現(xiàn)金收費(fèi)”字樣。

二、收費(fèi)

當(dāng)血液發(fā)出后,值班者必須對(duì)當(dāng)日(班)的

血費(fèi)、用血互助金、檢查費(fèi)等按規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)及時(shí)記

入收費(fèi)電腦。

1.住院病人收費(fèi):由值班者通知收費(fèi)處在

電腦中收取;

2.對(duì)急診“綠”色通道病人收費(fèi):

①有住院號(hào)者:其全部費(fèi)用記入電腦;

②對(duì)無住院號(hào)而只有門診號(hào)者:當(dāng)班者應(yīng)及

時(shí)通知收費(fèi)處,交納血費(fèi)、檢查費(fèi)、用血互助金

(用手工開具用血互助金交納通知單)等費(fèi)用;

③對(duì)門急診血費(fèi)欠款記帳者:按實(shí)際收費(fèi)的

用血量配發(fā),但通知急診收費(fèi)處采用欠款記帳或

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現(xiàn)金收取用血互助金和檢查等費(fèi)用;

3.門診病人收費(fèi):能夠在門診醫(yī)生站中記

錄所要收取的全部費(fèi)用,由病人(或病人家屬、

授權(quán)人、工友)到門診收費(fèi)窗口,交納血費(fèi)、檢

查費(fèi)、用血互助金(用手工開具用血互助金交納

通知單)等費(fèi)用。門診收取用血互助金后,須把

用血互助金交費(fèi)通知單的第三聯(lián)貼在用血通知

單后面。

1血費(fèi)輸入

名稱金額類別

全血(qx)230元/200ml血費(fèi)室

Rh陰性全血450元/200ml血費(fèi)室

(Rhyxqx)

懸浮紅細(xì)胞(xf)220元/I單位血費(fèi)室

Rh陰性紅細(xì)胞410元/I單位血費(fèi)室

(Rhyxh)

血漿(xxb)5元/10ml血費(fèi)室

冷沉淀(LCD)110/1單位血費(fèi)室

1450%/10單血費(fèi)室

血小板(dcx)

洗滌紅細(xì)胞220元/I單位血費(fèi)室

(xdh)

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去甘油紅細(xì)胞二.血費(fèi)室

490元J1單位

(qgy)

機(jī)洗紅細(xì)胞術(shù)

700元/次血費(fèi)室

(JQXDHX)

2檢查費(fèi)輸入

名稱金額類別

鹽水介質(zhì)交叉配5元/次血庫室

血(YSJZ)

特殊介質(zhì)交叉配8元/次血庫室

血(TSJZ)

ABO正反血型8元/次血庫室

鑒定(ABO)

Rh(D)血型鑒8元/次血庫室

定(Rh)

紅細(xì)胞不完全抗40元/次血

體篩查(HXB)庫室

按回車,點(diǎn)擊保存數(shù)據(jù),點(diǎn)擊丫(是),按確定。

注:醫(yī)保病人記帳,進(jìn)入醫(yī)保條件

全血

1.各種急性失血伴低血容量搶救;

2.各種原因引起的經(jīng)其它治療無效的嚴(yán)重

文檔僅供參考,不當(dāng)之處,請(qǐng)聯(lián)系改正。

慢性貧血;

3.重大手術(shù)確需輸血。

紅細(xì)胞

1.各種急性失血伴低血容量搶救;

2.各種原因引起的經(jīng)其它治療無效的嚴(yán)重

慢性貧血;

3.高鉀血癥,肝、腎、心功能不全確需輸

血者;

4.急性溶血性貧血搶救或化療后骨髓抑制

引起的嚴(yán)重貧血;

5.呼吸衰竭使用人工呼吸機(jī)確需輸血。

血漿

1.凝血酶原時(shí)間(PT)或活化部分凝血酶

時(shí)間(APTT)異常伴出血或需手術(shù);

2.凝血因子缺乏伴出血或需手術(shù);

3.抗凝血酶III(AT—III)缺乏;

4.香豆素作用逆轉(zhuǎn)或抗纖溶治療伴出血;

5.輸血量大于15單位;

6.彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)和血栓性血小

板減少性紫瘢(TTP);

7.需行體外循環(huán)手術(shù)。

血小板

1.血小板計(jì)數(shù)低于10X107L;

文檔僅供參考,不當(dāng)之處,請(qǐng)聯(lián)系改正。

2.因骨髓衰竭引起的血小板減少并發(fā)活動(dòng)

性出血,且血小板計(jì)數(shù)低于20X10VL;

3.需行外科手術(shù),且血小板計(jì)數(shù)低于50X

107L;

4.伴有其它出血危險(xiǎn)因素的活動(dòng)性出血,

且血小板計(jì)數(shù)低于30X107L;

5.大血管吻合手術(shù)確需輸注血小板。

冷沉淀

1.甲型血友?。?/p>

2.血管性血友??;

3.纖維蛋白原缺乏癥。

第九節(jié)血液申領(lǐng)、入庫、核對(duì)、貯存標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

血液申領(lǐng)、入庫、核對(duì)、貯存標(biāo)準(zhǔn)操作程序

1.每日進(jìn)行血液庫存量的檢查,及時(shí)對(duì)存

量的補(bǔ)充(要求日存量為周用血量的1/2),值

班人按所需品種、血量填入醫(yī)院用血申請(qǐng)單內(nèi),

由指定人去人民醫(yī)院領(lǐng)取。

2.對(duì)特殊血液的申領(lǐng),應(yīng)遵循先報(bào)告血站

的原則,血站回復(fù)結(jié)果必須及時(shí)與臨床醫(yī)師溝

通,并記錄于記事本中。

3.血液到庫后,值班人必須核對(duì)和驗(yàn)收,

文檔僅供參考,不當(dāng)之處,請(qǐng)聯(lián)系改正。

其內(nèi)容:血袋(外觀、封閉及包裝)是否合格、

標(biāo)簽是否清楚齊全(供血機(jī)構(gòu)名稱、許可證號(hào)、

供血者姓名、編號(hào)、血型、血品種、血量、采血

日期及失效日期)、血液質(zhì)量是否良好、是否按

要求配發(fā)血等。

4.嚴(yán)禁不合格血液入庫。

5.核對(duì)驗(yàn)收無誤后,把人民醫(yī)院拷貝來的

電腦軟盤,拷貝在醫(yī)院血庫管理軟件電腦內(nèi)(詳

見輸血科醫(yī)院血庫管理軟件操作規(guī)程)。然后,

按不同類型、品種、采血日期的先后次序整齊排

列入庫,存放于血庫專用冰箱內(nèi)的相應(yīng)位置。

6.血液入庫數(shù)量登記在血液出入庫表格內(nèi),

每日、月進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

7.全血、紅細(xì)胞保存溫度為2?6℃,并每

天監(jiān)測(cè)和記錄(晨8時(shí)、上午11時(shí)、下午4時(shí)、

晚8時(shí))冰箱溫度各一次;血漿、冷沉淀保存溫

度為-30℃以下,每天監(jiān)測(cè)和記錄(晨8時(shí)、上

午11時(shí)、下午4時(shí)、晚8時(shí))冰箱溫度

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