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文檔簡介

實驗復(fù)習(xí)之二——物質(zhì)鑒定類

實驗復(fù)習(xí)之三

——物質(zhì)鑒定類考查內(nèi)容等級要求abc1.檢測生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)

14.模擬尿糖的檢測√20.DNA的粗提取與鑒定

【學(xué)習(xí)目標】《考試說明》要求:嘗試用化學(xué)試劑檢測生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)、DNA和淀粉【自主先學(xué)】請大聲朗讀【自主先學(xué)】1、2,解決以下問題。1.請分別說出鑒定可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)、DNA的試劑是什么?反應(yīng)前后分別呈現(xiàn)什么顏色?2.哪些實驗需要加熱的?3.哪個實驗需要顯微鏡?4.哪些實驗需要用到酒精,所用酒精的體積分數(shù)及其作用?【實驗原理】教材規(guī)定實驗中的“染色劑”歸納試劑被染成分呈現(xiàn)顏色斐林試劑還原糖磚紅色沉淀蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)染液脂肪橘黃色(或紅色)雙縮脲試劑蛋白質(zhì)紫色二苯胺試劑(甲基綠染液)DNA藍色綠色吡羅紅染液RNA紅色龍膽紫溶液染色體紫色醋酸洋紅溶液紅色改良苯酚品紅染液紅色淀粉綠色橘黃色紅色藍色紫色磚紅色灰綠色還原性糖脂肪蛋白質(zhì)DNARNA染色體纖維素乙醇蘇丹Ⅲ染液蘇丹Ⅳ染液酸性重鉻酸鉀醋酸洋紅改良品紅苯酚剛果紅甲基綠吡羅紅雙縮脲試劑二苯胺試劑碘液龍膽紫斐林試劑班氏試劑材料試劑顏色【連連看】2.三類有機物檢測在操作步驟上的“三個唯一”(1)唯一需要加熱——還原糖檢測,且必須水浴加熱,不能用酒精燈直接加熱。若不加熱,則無磚紅色沉淀出現(xiàn)。(2)唯一需要顯微鏡——脂肪檢測。(3)唯一使用酒精——脂肪的鑒定,實驗用體積分數(shù)為50%的酒精洗去浮色。【知識鏈接】3.檢測生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的實驗中,哪些實驗需要加熱?哪些實驗需要用顯微鏡觀察?(1)只有檢測還原糖的實驗需要加熱,且實驗中需要用溫水浴加熱,不用酒精燈直接加熱。(2)只有檢測脂肪的實驗需要用顯微鏡觀察,因為脂肪顆粒儲存于細胞中,必須用顯微鏡觀察?!竞献魈骄俊繉W(xué)案P26【方法步驟】下圖是檢測還原糖的實驗(1)如下圖示的處理,2min后試管內(nèi)將呈現(xiàn)何種顏色?試加以分析說明。應(yīng)為藍色(斐林試劑的顏色,因未經(jīng)水浴加熱,只有將試管置于50~65℃溫水中,經(jīng)水浴加熱后,方可呈現(xiàn)“磚紅色沉淀”)。(2)向某試管內(nèi)無色液體中加入斐林試劑,經(jīng)加熱若出現(xiàn)磚紅色沉淀,則表明試管內(nèi)含有葡萄糖,對嗎?不對。只能證明含有“還原糖”,不能具體證明是哪種還原糖。【方法步驟】下圖為某種物質(zhì)鑒定方案,請推測:(1)圖示的實驗方案用于鑒定何類物質(zhì),其中“某試劑”是什么?A液、B液分別指什么?

(2)若溶液中有被檢測物質(zhì)則右側(cè)試管“搖勻后”變成何種顏色?(1)蛋白質(zhì)及多肽化合物;雙縮脲試劑;A為0.1g/mLNaOH溶液;B為0.01g/mLCuSO4溶液。(2)紫色。1.在檢測生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的實驗中,對于選材有什么要求?(1)含量較高,如檢測還原糖時宜選用蘋果,蘋果含大量還原糖,不能選擇甘蔗、甜菜等,因為這兩種實驗材料中含蔗糖較高,蔗糖不具有還原性。(2)顏色為白色或淺色。白色或淺色的材料可以避免材料本身的顏色遮蓋反應(yīng)結(jié)果,如檢測還原糖時一般不選擇西瓜,檢測蛋白質(zhì)時一般不選擇血紅蛋白等?!竞献魈骄俊?/p>

2.蔗糖溶液中加入斐林試劑后呈現(xiàn)什么顏色?蔗糖屬于非還原糖,不與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)。觀察到的現(xiàn)象不是無色,而是淺藍色[Cu(OH)2的顏色]。【合作探究】4.用蛋清稀釋液作為實驗材料鑒定蛋白質(zhì),

為什么一定要稀釋到一定程度?如果不充分稀釋蛋清液,與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)后會粘在試管的內(nèi)壁上,使反應(yīng)不徹底,試管也不容易洗刷干凈。5.鑒定還原糖時使用的斐林試劑為何要現(xiàn)配現(xiàn)用?因為斐林試劑很不穩(wěn)定,容易產(chǎn)生藍色的Cu(OH)2沉淀,所以應(yīng)將甲液和乙液分別配制,使用時現(xiàn)配現(xiàn)用?!竞献魈骄俊?.斐林試劑與雙縮脲試劑成分相同,但在使用時,斐林試劑甲液與乙液必須混合使用,而雙縮脲試劑則先滴加A液,再滴加B液,請分析原因。

兩個實驗的反應(yīng)原理不同,所以使用方法不同(1)檢測還原糖:反應(yīng)原理是Cu(OH)2與還原糖反應(yīng)生成磚紅色的Cu2O沉淀,所以先將甲液和乙液混合生成Cu(OH)2后再與還原糖反應(yīng)。(2)檢測蛋白質(zhì):反應(yīng)原理是肽鍵(含2個以上)在堿性環(huán)境中與Cu2+反應(yīng)產(chǎn)生紫色絡(luò)合物,所以先滴加A液的目的是制造堿性環(huán)境。【合作探究】【知識鏈接】1.區(qū)分斐林試劑與雙縮脲試劑的“一同三不同”【方法步驟】脂肪的鑒定取材制片(染色、去浮色、裝片)觀察結(jié)論切片蘇丹Ⅲ染液將花生子葉切片中的脂肪染成橘黃色有綠色光澤的棕紅色蘇丹Ⅳ染液將液體中的脂肪染成紅色深褐色7.脂肪的鑒定中,使用酒精的濃度、作用和原理是什么?體積分數(shù)50%,洗去浮色

,染液溶于酒精【合作探究】【實驗成功關(guān)鍵點】(1)不宜選取有顏色的材料,否則會干擾實驗結(jié)果的顏色變化。(2)由于蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液易溶于酒精,故可用體積分數(shù)為50%的酒精洗去浮色。(3)蛋白質(zhì)鑒定中,若用大豆作材料,必須提前浸泡;若用蛋清作材料,必須稀釋,防止其黏在試管上不易刷洗。(4)物質(zhì)鑒定實驗一般可預(yù)留部分樣液作對照實驗,若需進一步設(shè)立對照實驗,對照組應(yīng)加入成分已知的物質(zhì),如驗證唾液淀粉酶是蛋白質(zhì),對照組可加入稀釋的雞蛋清溶液?!咀灾飨葘W(xué)】DNA的鑒定項目2只20mL的試管1號2號實驗步驟加入2mol/L的NaCl溶液5mL5mL加入絲狀物(DNA)--+玻璃棒攪拌--+加入二苯胺試劑4mL4mL沸水浴加熱5min5min觀察現(xiàn)象不變藍變藍DNA的鑒定DNA的鑒定幾類物質(zhì)鑒定實驗總結(jié)實驗名稱試劑顏色生物材料備注淀粉的鑒定碘液藍色脫色的葉片

還原糖的鑒定斐林試劑磚紅色沉淀蘋果或梨勻漿等現(xiàn)配現(xiàn)用、水浴加熱脂肪的鑒定蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)染液橘黃(或紅)色花生種子切片需用高倍鏡觀察實驗名稱試劑顏色生物材料備注蛋白質(zhì)的鑒定雙縮脲試劑紫色豆?jié){、稀蛋清等

先加A液,后

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