第11章-臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)儀器與技術(shù)

第十一章

臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)儀器與技術(shù)

施新明目錄第一節(jié)免疫熒光分析儀器與技術(shù)第二節(jié)散射比濁分析儀器與技術(shù)第三節(jié)

酶免疫分析儀器與技術(shù)第四節(jié)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器與技術(shù)第五節(jié)自動(dòng)化免疫分析儀的臨床應(yīng)用

重點(diǎn)提示1.自動(dòng)免疫熒光染色的技術(shù)原理是什么？2.時(shí)間分辨熒光免疫分析儀的基本原理和性能特點(diǎn)是什么？3.散射比濁儀器的分類(lèi)和原理是什么？4.比濁法檢測(cè)抗原過(guò)剩的方法有哪些？5.酶聯(lián)免疫分析技術(shù)的原理是什么？6.化學(xué)發(fā)光酶免疫分析的技術(shù)原理是什么？7.吖啶酯化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的原理是什么？8.電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的原理和特點(diǎn)是什么？9.光激化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的原理是什么？第一節(jié)免疫熒光分析儀器與技術(shù)一、免疫熒光染色儀器與技術(shù)（一）免疫熒光染色技術(shù)原理將熒光素標(biāo)記在抗體上，免疫反應(yīng)結(jié)束后使用特定波長(zhǎng)的激發(fā)光照射標(biāo)記的熒光素，熒光素吸收激發(fā)光的能量，產(chǎn)生可見(jiàn)的熒光。一、免疫熒光染色儀器與技術(shù)（二）免疫熒光染色相關(guān)儀器1.免疫熒光染色自動(dòng)操作儀

用于自動(dòng)化完成血清稀釋、加樣、溫育、清洗等檢測(cè)過(guò)程?；窘Y(jié)構(gòu)包含加樣系統(tǒng)、清洗系統(tǒng)、溫育系統(tǒng)、機(jī)械臂和軟件系統(tǒng)等。1.條形碼掃描器2.樣品軌架3.樣品針清洗站4.清洗站5.清洗機(jī)頭6.載片托盤(pán)7.試劑架8.用于初始稀釋的稀釋板9.用于系列稀釋的稀釋板一、免疫熒光染色儀器與技術(shù)（二）免疫熒光染色相關(guān)儀器1.免疫熒光染色自動(dòng)操作儀

加樣系統(tǒng)由樣品針和清洗站、樣品軌架和試劑架等構(gòu)成；清洗系統(tǒng)包括儲(chǔ)液桶、清洗站、清洗機(jī)頭、廢液排除管路等部件；溫育系統(tǒng)包括恒溫器，孵育蓋等；機(jī)械臂用于移動(dòng)樣品針、清洗機(jī)；特點(diǎn)：①能夠替代手工操作，降低操作者的工作強(qiáng)度；②使免疫熒光染色過(guò)程標(biāo)準(zhǔn)化，減少人為操作誤差；③清洗充分，減少非特異性的干擾。一、免疫熒光染色儀器與技術(shù)（二）免疫熒光染色相關(guān)儀器2.全自動(dòng)免疫熒光判讀系統(tǒng)（1）技術(shù)原理：

DAPI染色使熒光顯微鏡能夠定位細(xì)胞；拍攝FITC染色的熒光圖像；智能數(shù)字熒光圖像識(shí)別軟件進(jìn)行熒光模型的判讀。一、免疫熒光染色儀器與技術(shù)（二）免疫熒光染色相關(guān)儀器2.全自動(dòng)免疫熒光判讀系統(tǒng)熒光強(qiáng)度判讀：軟件自動(dòng)分析熒光圖片中的每個(gè)像素點(diǎn)的熒光強(qiáng)度，根據(jù)熒光強(qiáng)度的數(shù)值來(lái)判讀熒光結(jié)果。熒光模型的判讀：①模式識(shí)別原理計(jì)算機(jī)系統(tǒng)將圖形轉(zhuǎn)化為數(shù)字參數(shù)，與數(shù)據(jù)庫(kù)中存儲(chǔ)的大量數(shù)據(jù)比對(duì)，判讀熒光模型。需要計(jì)算能力強(qiáng)大的計(jì)算機(jī)；有學(xué)習(xí)能力，識(shí)別能力會(huì)隨數(shù)據(jù)庫(kù)內(nèi)數(shù)據(jù)的累積而提高。一、免疫熒光染色儀器與技術(shù)②圖形識(shí)別算法原理；軟件系統(tǒng)對(duì)陽(yáng)性結(jié)果模擬合成一張三維全息圖，測(cè)定三維圖的峰和谷，轉(zhuǎn)換成數(shù)值信息，與軟件中設(shè)定的條件進(jìn)行匹配，所需設(shè)備簡(jiǎn)單。一、免疫熒光染色儀器與技術(shù)（2）基本結(jié)構(gòu)：主要由全自動(dòng)熒光顯微鏡、成像系統(tǒng)、機(jī)械與控制系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)和軟件系統(tǒng)組成。1、自動(dòng)熒光顯微鏡；2、冷CCD攝像頭；3、計(jì)算機(jī)；4、熒光準(zhǔn)直儀；5、顯微鏡控制器；6、LED熒光光源發(fā)生器二、時(shí)間分辨免疫熒光分析儀器與技術(shù)（一）時(shí)間分辨免疫熒光分析技術(shù)原理鑭系元素的熒光壽命比非特異性熒光長(zhǎng)，利用這一特點(diǎn)，使用鑭系三價(jià)稀土離子及其螯合物作為標(biāo)記物標(biāo)記抗體（或抗原）進(jìn)行免疫反應(yīng)，待反應(yīng)體系中血清、溶劑和其他成分的短壽命背景熒光完全衰變后，再測(cè)量鑭系元素的特異性熒光，以有效地降低本底熒光的干擾。這種技術(shù)稱時(shí)間分辨熒光免疫分析（TRFIA）。二、時(shí)間分辨免疫熒光分析儀器與技術(shù)（一）時(shí)間分辨免疫熒光分析技術(shù)原理1.解離增強(qiáng)鑭系元素?zé)晒饷庖叻治鲈鰪?qiáng)液可使鑭系元素形成具有高強(qiáng)度熒光的穩(wěn)定螯合物。增強(qiáng)液使Eu3+標(biāo)記的抗體抗原復(fù)合物pH降至2～3，有利于Eu3+從復(fù)合物上完全解離下來(lái)。游離的Eu3+被増強(qiáng)液中的螯合劑所螯合、再與增強(qiáng)液中的β-二酮體生成一個(gè)Eu3+在其內(nèi)部的保護(hù)性膠態(tài)分子團(tuán)。新生成的螯合物在紫外光激發(fā)下能發(fā)射出很強(qiáng)的熒光，信號(hào)的增強(qiáng)效果可達(dá)上百萬(wàn)倍。2.FIAgen分析系統(tǒng)

用雙功能螯合劑4,7-二（氯磺?；┍交?1,10-菲咯啉-2,9-二羧酸，并把生物素-親和素系統(tǒng)引入TRFIA系統(tǒng)。二、時(shí)間分辨免疫熒光分析儀器與技術(shù)（一）時(shí)間分辨免疫熒光分析技術(shù)原理3.酶放大TRFIA采用堿性磷酸酶水解5-氟水楊酸磷酸酯，生成5-氟水楊酸，在堿性條件下5-氟水楊酸可與鑭系元素（Tb3+）和乙二胺四乙酸形成強(qiáng)熒光絡(luò)合物，在激發(fā)光源激發(fā)下產(chǎn)生熒光。4.均相TRFA系統(tǒng)

利用三聯(lián)吡啶類(lèi)化合物將鑭系元素（Eu3+）和別藻藍(lán)蛋白連接，組成能量轉(zhuǎn)移效率最高的能量供體和受體對(duì)，測(cè)量前不必分離結(jié)合標(biāo)記物和游離標(biāo)記物，可以用雙波長(zhǎng)時(shí)間分辨免疫熒光分析儀直接測(cè)定固相熒光。二、時(shí)間分辨免疫熒光分析儀器與技術(shù)（二）時(shí)間分辨免疫熒光分析儀的基本結(jié)構(gòu)二、時(shí)間分辨免疫熒光分析儀器與技術(shù)（三）時(shí)間分辨免疫熒光分析儀的性能特點(diǎn)1.靈敏度高，檢測(cè)下限可以達(dá)到10-18mol/L；分析范圍寬，可達(dá)4～5個(gè)數(shù)量級(jí)。2.標(biāo)記結(jié)合物穩(wěn)定，有效使用期長(zhǎng)。3.特異性強(qiáng)。4.測(cè)量快速，易于自動(dòng)化，無(wú)放射污染。5.不足之處是易受環(huán)境、試劑和容器中的鑭系元素離子的污染，使檢測(cè)本底增高。第二節(jié)散射比濁分析儀器與技術(shù)一、散射比濁法技術(shù)原理液相的免疫沉淀反應(yīng)和散射光譜原理相結(jié)合而形成的免疫分析技術(shù)?？扇苄钥乖?、抗體在液相中特異結(jié)合，形成免疫復(fù)合物從而引起液體濁度的改變，利用散射光譜分析技術(shù)測(cè)定濁度變化而得知待測(cè)抗原的濃度。二、散射比濁技術(shù)的分類(lèi)（一）終點(diǎn)散射比濁法抗原和抗體反應(yīng)達(dá)到平衡，免疫復(fù)合物形成的量不再增加，反應(yīng)體系的濁度不再變化時(shí)，可以認(rèn)為是免疫反應(yīng)結(jié)束。特點(diǎn)：反應(yīng)過(guò)程時(shí)間較長(zhǎng)，抗體復(fù)合物易聚合形成大顆粒沉淀，導(dǎo)致偏低的結(jié)果，標(biāo)本內(nèi)抗原含量較低時(shí)，敏感性不夠。主流的散射比濁儀器通常不采用終點(diǎn)散射比濁法。二、散射比濁技術(shù)的分類(lèi)（二）定時(shí)散射比濁法由終點(diǎn)散射比濁法改進(jìn)而成。反應(yīng)分預(yù)反應(yīng)階段和反應(yīng)階段。預(yù)反應(yīng)階段用于保證抗原抗體比例合適，避免產(chǎn)生的鉤狀效應(yīng)。反應(yīng)階段抗原、抗體反應(yīng)形成不可溶性小分子顆粒，產(chǎn)生的散射光信號(hào)，這種信號(hào)與待測(cè)的抗原量成正比。二、散射比濁技術(shù)的分類(lèi)（三）速率散射比濁法速率散射比濁法是一種抗原抗體結(jié)合的動(dòng)力學(xué)測(cè)定方法。速率是在單位時(shí)間內(nèi)抗原、抗體結(jié)合形成復(fù)合物的速度?？乖?、抗體結(jié)合速率最大的某一時(shí)刻稱為速率峰，當(dāng)反應(yīng)體系的抗體過(guò)量時(shí)，速率峰的高低與抗原含量成正比。速率散射比濁法動(dòng)態(tài)地測(cè)定單位時(shí)間內(nèi)抗原-抗體復(fù)合物形成的散射光信號(hào)，從而獲得多個(gè)速率峰，峰值的高低與待測(cè)物質(zhì)（抗原）的量成正比。當(dāng)儀器測(cè)定到某一時(shí)間內(nèi)形成速率下降時(shí)，所出現(xiàn)速率峰的峰值高低代表所測(cè)抗原的量。速率散射比濁法具有檢測(cè)速度快、敏感性高、精確度高、穩(wěn)定性好的優(yōu)點(diǎn)。二、散射比濁技術(shù)的分類(lèi)（三）速率散射比濁法二、散射比濁技術(shù)的分類(lèi)（四）乳膠增強(qiáng)免疫比濁法選擇一種大小適中、均勻一致的乳膠顆粒，吸附或交聯(lián)抗體，在液相狀態(tài)下，單個(gè)乳膠顆粒在入射光波長(zhǎng)內(nèi)光線可透過(guò)，使透過(guò)光增加，散射光量減少；當(dāng)結(jié)合了膠乳顆粒的抗體遇到相應(yīng)抗原發(fā)生聚集時(shí)，則使透過(guò)光減少，散射光增加，散射光的增加程度與膠乳凝集成正比，也與抗原量成正比?？贵w吸附于乳膠顆粒表面可以增加免疫反應(yīng)復(fù)合物的直徑，從而增強(qiáng)散射光強(qiáng)度，達(dá)到提高散射比濁法檢測(cè)靈敏度的目的（檢測(cè)水平可達(dá)到ng/ml或pg/ml）?；趩慰寺】贵w膠乳免疫比濁技術(shù)的定量分析是比濁分析技術(shù)的發(fā)展方向。三、定時(shí)散射比濁分析儀的基本結(jié)構(gòu)與性能（一）基本結(jié)構(gòu)BNⅡ散射免疫比濁分析儀由分析儀主機(jī)、計(jì)算機(jī)、鍵盤(pán)、打印機(jī)、條形碼掃描儀等組成。主要結(jié)構(gòu)包括加樣系統(tǒng)，孵育轉(zhuǎn)盤(pán)、光路系統(tǒng)和液路系統(tǒng)等。三、定時(shí)散射比濁分析儀的基本結(jié)構(gòu)與性能（二）性能特點(diǎn)以定時(shí)散射比濁分析法為原理。比濁儀檢測(cè)器與光路呈13°～24°角測(cè)量散射光。使用乳膠顆粒增強(qiáng)技術(shù)，提高檢測(cè)的靈敏度。采用預(yù)先反應(yīng)程序，防止抗原過(guò)剩。非特異性反應(yīng)的排除通過(guò)測(cè)定反應(yīng)管起始值和空白值之間的差異，排除樣本由于內(nèi)源性濁度或其有快速反應(yīng)特性所帶來(lái)的非特異性干擾。四、速率散射比濁分析儀的基本結(jié)構(gòu)與性能（一）基本結(jié)構(gòu)IMMAGE800速率散射免疫比濁分析儀由分析儀、計(jì)算機(jī)、打印機(jī)三部分組成。分析儀包括濁度儀、加樣系統(tǒng)、試劑和樣品轉(zhuǎn)盤(pán)、清洗工作站等。四、速率散射比濁分析儀的基本結(jié)構(gòu)與性能（二）性能特點(diǎn)用雙光徑系統(tǒng)設(shè)計(jì)，組合應(yīng)用散射比濁法和透射比濁法兩種技術(shù)，以及速率散射比濁法、速率抑制散射比濁法、近紅外顆粒速率透射法、近紅外顆粒速率抑制透射法四種方法，分別檢測(cè)大、中、小分子。①LED光源（透射比濁）；②激光光源（散射比濁）；③聚焦鏡頭；④分光棱鏡；⑤反應(yīng)杯；⑥散射比濁檢測(cè)儀；⑦激光反射；⑧透射比濁檢測(cè)儀四、速率散射比濁分析儀的基本結(jié)構(gòu)與性能（二）性能特點(diǎn)1.采用速率檢測(cè)法實(shí)現(xiàn)，排除干擾信號(hào)，提高準(zhǔn)確度。2.抗原過(guò)量自動(dòng)監(jiān)測(cè)

在抗體與抗原反應(yīng)過(guò)程完成時(shí)，再加入已知相應(yīng)抗原到反應(yīng)體系中；如果新增的抗原可與過(guò)量的抗體結(jié)合反應(yīng)，則產(chǎn)生新的速率峰，由此證明抗體過(guò)量，待測(cè)的抗原免疫反應(yīng)完全；若新加入抗原后不出現(xiàn)新的速率峰，則說(shuō)明反應(yīng)體系中抗體不足，存在抗原過(guò)量，需將待測(cè)樣品進(jìn)一步稀釋復(fù)測(cè)。3.全程動(dòng)力學(xué)空白對(duì)照，排除非特異性的干擾，確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性。五、散射比濁分析儀的性能要求1.靈敏度

2.精密度

3.準(zhǔn)確度

4.攜帶污染

5.溫度準(zhǔn)確度與波動(dòng)度

6.樣品和試劑加樣準(zhǔn)確度與重復(fù)性

第三節(jié)酶免疫分析儀器與技術(shù)一、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（一）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的原理酶標(biāo)記固相免疫分析技術(shù)。抗體、抗原進(jìn)行免疫反應(yīng)后，標(biāo)記的酶水解反應(yīng)底物而使之顯色。顯色程度與其濃度成一定關(guān)系，能對(duì)抗原（或抗體）進(jìn)行定性或定量。一、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（二）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)技術(shù)常用酶與底物常用酶作用底物顯色辣根過(guò)氧化物酶，HRP鄰苯二胺，OPD四甲基聯(lián)苯胺TMB黃色藍(lán)色堿性磷酸酶

，ALP對(duì)-硝基苯磷酸酯PNP黃色β-半乳糖苷酶

，

β-Gal4-甲傘酮基-β-D-半乳糖苷葡萄糖氧化酶，GOD對(duì)硝基氮藍(lán)四唑藍(lán)色二、酶標(biāo)儀（一）酶標(biāo)儀的基本原理與結(jié)構(gòu)基本工作原理和主要結(jié)構(gòu)與光電比色計(jì)基本相同。相當(dāng)于專(zhuān)用于ELISA的光電比色計(jì)或分光光度計(jì)。二、酶標(biāo)儀（二）酶標(biāo)儀的性能要求酶標(biāo)儀計(jì)量性能評(píng)價(jià)要求包括：外觀檢查、示值穩(wěn)定性、波長(zhǎng)示值誤差、波長(zhǎng)重復(fù)性、吸光度示值誤差、吸光度重復(fù)性、靈敏度、通道差異、絕緣電阻9項(xiàng)。與檢測(cè)性能相關(guān)的有7項(xiàng)。示值穩(wěn)定性要求在±0.005；波長(zhǎng)示值誤差±3nm；波長(zhǎng)重復(fù)性±1.5nm；吸光度示值誤差±0.03；吸光度重復(fù)性1%；靈敏度≥0.01L/mg；通道差異0.03。三、全自動(dòng)酶免疫分析系統(tǒng)（一）全自動(dòng)酶免疫分析系統(tǒng)的基本結(jié)構(gòu)全自動(dòng)酶免疫分析系統(tǒng)是具有自動(dòng)加樣本、加試劑，自動(dòng)控溫溫育，自動(dòng)洗板和自動(dòng)判讀計(jì)算等功能的分析系統(tǒng)。可用于各種酶免疫實(shí)驗(yàn)、血庫(kù)篩查、生化檢測(cè)、細(xì)胞培養(yǎng)、分子生物學(xué)等各個(gè)方面。三、全自動(dòng)酶免疫分析系統(tǒng)（二）全自動(dòng)酶免疫分析系統(tǒng)的特點(diǎn)1．加樣系統(tǒng)加樣系統(tǒng)用于樣本和試劑的分配加樣系統(tǒng)永久性加樣針采用一次性吸頭三、全自動(dòng)酶免疫分析系統(tǒng)（二）全自動(dòng)酶免疫分析系統(tǒng)的特點(diǎn)2．溫控孵育系統(tǒng)提供在孵育時(shí)酶標(biāo)板所需溫度，防止蒸發(fā)，并可振蕩孵育，可使免疫反應(yīng)更加充分，提高檢測(cè)靈敏度。3．洗滌工作站

洗滌工作站主要用于洗滌加樣針和反應(yīng)板。4．酶標(biāo)儀洗板機(jī)酶標(biāo)儀第四節(jié)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器與技術(shù)一、化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)原理與分類(lèi)（一）化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)原理化學(xué)發(fā)光的原理在化學(xué)反應(yīng)過(guò)程中，發(fā)光劑吸收化學(xué)能后，從穩(wěn)定的基態(tài)分子被激發(fā)到不穩(wěn)定的激發(fā)態(tài)，在激發(fā)態(tài)時(shí)分子有很高并且不穩(wěn)定的能量，釋放能量重新回到基態(tài)，能量以光子形式釋放。一、化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)原理與分類(lèi)（一）化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)原理2.化學(xué)發(fā)光免疫分析的原理通過(guò)免疫反應(yīng)特異性地將待測(cè)組分從樣本中分離，再通過(guò)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)顯示分離的組分，并且化學(xué)發(fā)光的反應(yīng)強(qiáng)度與待測(cè)組分的含量成一定的比例關(guān)系。一、化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)原理與分類(lèi)（二）化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的分類(lèi)化學(xué)發(fā)光酶免疫測(cè)定將酶標(biāo)記于示蹤抗體上，再以酶催化底物進(jìn)行化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。常用的工具酶有：辣根過(guò)氧化物酶（HRP）常用的底物有魯米諾或其衍生物異魯米諾，在HRP和啟動(dòng)發(fā)光試劑（NaOH和H2O2）作用下進(jìn)行發(fā)光反應(yīng)，其波長(zhǎng)為425nm。是一類(lèi)重要的發(fā)光試劑。堿性磷酸酶（ALP），常用的底物是AMPPD，ALP水解AMPPD，產(chǎn)生金剛烷酮和產(chǎn)生470nm的光，可持續(xù)幾十分鐘。一、化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)原理與分類(lèi)（二）化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的分類(lèi)2.化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的免疫分析方法。常用標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)有吖啶酯類(lèi)化合物，通過(guò)啟動(dòng)發(fā)光試劑（NaOH和H2O2）作用而發(fā)光，強(qiáng)烈的直接發(fā)光在一秒內(nèi)完成，為快速的閃爍發(fā)光。特點(diǎn)：化學(xué)反應(yīng)簡(jiǎn)單、快速、無(wú)需催化劑；檢測(cè)小分子抗原時(shí)一般采用競(jìng)爭(zhēng)法，大分子抗原則大多采用夾心法。非特異性結(jié)合少、本底低；檢測(cè)大分子靈敏度高。一、化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)原理與分類(lèi)（二）化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的分類(lèi)3.電化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定反應(yīng)體系中含有三聯(lián)吡啶釕[Ru（bpy）3]2+，再加入含三丙胺（TPA）的緩沖液，電極加電壓，使二價(jià)釕被氧化成三價(jià)，TPA被氧化形成強(qiáng)還原劑，形成激發(fā)態(tài)的釕，激發(fā)態(tài)的三聯(lián)吡啶釕不穩(wěn)定，發(fā)射出一個(gè)波長(zhǎng)620nm的光子，重新生成基態(tài)的釕，發(fā)光標(biāo)記物可循環(huán)發(fā)光。一、化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)原理與分類(lèi)（二）化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的分類(lèi)4.光激化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)競(jìng)爭(zhēng)法光激化學(xué)發(fā)光原理抗體包被感光微球，抗原包被發(fā)光微球，抗體與抗原結(jié)合，感光微球在680nm激發(fā)光照射下，產(chǎn)生單線態(tài)氧擴(kuò)散至發(fā)光微球并傳遞能量，發(fā)光微球發(fā)射520～620nm熒光信號(hào)。單線態(tài)氧的半衰期只有4微秒（μs），在反應(yīng)體系中只能擴(kuò)散大約200nm。發(fā)光的量與樣品中的待測(cè)抗原量成反比。一、化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)原理與分類(lèi)（三）順磁性顆粒分離技術(shù)順磁顆粒的核心為氧化鐵，表面包有高分子化合物。特點(diǎn)：順磁性：指有些固體的原子具有本征磁矩。當(dāng)受外磁場(chǎng)作用時(shí)，表現(xiàn)出宏觀磁性。沒(méi)有外加磁場(chǎng)時(shí)，顆粒間沒(méi)有相互作用，能夠在液體中形成均勻的懸液。大比表面積：表面功能基團(tuán)密度及選擇性吸附能力變大，生物相容性：多數(shù)生物高分子如多聚糖、蛋白質(zhì)等具有良好的生物相容性。功能基團(tuán)特性：能與生物高分子的多種活性基團(tuán)共價(jià)連接，可在其表面穩(wěn)定地固定生物活性物質(zhì)。二、化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器的基本結(jié)構(gòu)與性能要求（一）化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器的基本結(jié)構(gòu)及其作用1.控制系統(tǒng)分析儀器的大腦，通常由軟件系統(tǒng)和硬件系統(tǒng)組成。2.取樣系統(tǒng)取樣系統(tǒng)能夠自動(dòng)將樣本和試劑定量加入反應(yīng)管中。二、化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器的基本結(jié)構(gòu)與性能要求（一）化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器的基本結(jié)構(gòu)及其作用3.反應(yīng)孵育系統(tǒng)提供合適環(huán)境溫度以便進(jìn)行免疫反應(yīng)。4.清洗系統(tǒng)用以去除化學(xué)發(fā)光反應(yīng)所不需要的游離相。二、化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器的基本結(jié)構(gòu)與性能要求（一）化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器的基本結(jié)構(gòu)及其作用5.測(cè)量系統(tǒng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)產(chǎn)生的光信號(hào)通過(guò)光電倍增管進(jìn)行測(cè)量，最后換算出相對(duì)發(fā)光單位（RLU）。6.試劑和消耗品系統(tǒng)保存試劑和消耗品，并維持合適的溫度環(huán)境。二、化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器的基本結(jié)構(gòu)與性能要求（二）化學(xué)發(fā)光分析儀器的性能要求反應(yīng)區(qū)溫度控制的準(zhǔn)確性

應(yīng)在設(shè)定值的±0.5℃內(nèi)，波動(dòng)度不超過(guò)±1.0℃。2.分析儀器的穩(wěn)定性

分析儀開(kāi)機(jī)處于穩(wěn)定工作狀態(tài)后第4小時(shí)、第8小時(shí)的測(cè)試結(jié)果與處于穩(wěn)定工作狀態(tài)初始時(shí)的測(cè)試結(jié)果的相對(duì)偏倚不超過(guò)±10％。3.批內(nèi)測(cè)量重復(fù)性

CV≤8%。4.線性相關(guān)性

在不小于2個(gè)數(shù)量級(jí)的濃度范圍內(nèi)，線性相關(guān)系數(shù)（r）≥0.994。二、化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器的基本結(jié)構(gòu)與性能要求（二）化學(xué)發(fā)光分析儀器的性能要求5.攜帶污染率

應(yīng)≤10-5。6.分析儀應(yīng)具備的主要功能

①用戶可以通過(guò)人機(jī)對(duì)話指令，使儀器能自動(dòng)完成不同樣品、測(cè)試項(xiàng)目的分析任務(wù)；②儀器應(yīng)能提示試劑等消耗品、廢棄物的狀態(tài)；③儀器具備自檢功能；④儀器對(duì)操作錯(cuò)誤、機(jī)械及電路故障應(yīng)有相應(yīng)提示。二、化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器的基本結(jié)構(gòu)與性能要求（三）臨床常用化學(xué)發(fā)光分析儀器的主要特點(diǎn)1．ACCESS2全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)堿性磷酸酶標(biāo)記，AMPPD作為發(fā)光底物，是典型的化學(xué)發(fā)光酶免疫反應(yīng)。采用超細(xì)磁性微粒子技術(shù)，微粒子直徑＜7μm；采用超聲波清洗分離技術(shù)，清洗效率高，交叉污染率；直接穿刺式試劑盒，防止試劑揮發(fā)而濃縮。二、化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器的基本結(jié)構(gòu)與性能要求（三）臨床常用化學(xué)發(fā)光分析儀器的主要特點(diǎn)2．ARCHITECTi2000SR全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)采用的是吖啶酯衍生物直接標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)。采用的啶酯類(lèi)衍生物增加了親水基團(tuán)，改善了吖啶酯化合物的水溶性，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠。RSH軌道處理系統(tǒng)采用人工智能機(jī)械臂樣本傳輸軌道系統(tǒng)，提高了實(shí)驗(yàn)效率。二、化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器的基本結(jié)構(gòu)與性能要求（三）臨床常用化學(xué)發(fā)光分析儀器的主要特點(diǎn)3．cobase系列電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析原理，具有較高的靈敏度、較寬的檢測(cè)范圍和較快的檢測(cè)速度。使用一次性加樣頭，避免交叉污染。采用模塊化組合結(jié)構(gòu)，可與生化分析儀器模塊，組成生化免疫一體化儀器。第五節(jié)自動(dòng)化免疫分析儀的臨床應(yīng)用自動(dòng)化免疫分析儀的臨床應(yīng)用一、免疫熒光染色技術(shù)的應(yīng)用常用于自身抗體檢測(cè)，用于輔助診斷自身免疫性疾病。此技術(shù)還可用于免疫病理檢測(cè)。也可用于淋巴細(xì)胞表面CD抗原、抗原受體、補(bǔ)體受體、Fc受體等膜分子的檢測(cè)。二、時(shí)間分辨免疫熒光分析儀的應(yīng)用適用于大、中、小分子的檢測(cè)，可用于蛋白質(zhì)、激素、藥物、腫瘤標(biāo)志物、抗原/抗體等。三、散射免疫比濁分析儀的應(yīng)用散射免疫比濁分析儀目前在臨床上主要用于蛋白質(zhì)測(cè)定。自動(dòng)化免疫分析儀的臨床應(yīng)用四、酶免疫分析儀器的應(yīng)用全自動(dòng)的酶免疫分析系統(tǒng)作為實(shí)驗(yàn)室常