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文檔簡介

1蛋白質(zhì)高效純化技術規(guī)范4.1組氨酸。4.12純化填料。25.6水浴鍋。5.10磁力攪拌器。5.12高壓制備液相。5.14磁力攪拌器。5.16高壓層析系統(tǒng)。5.18落地式電動攪拌。5.19氣動攪拌機罐。5.20凍干機。5.22醫(yī)用低溫保存箱。5.23超低溫冰箱。5.24高效液相色譜儀。5.26紫外分光光度計。5.27超純水機。5.28數(shù)顯渦旋儀。5.29低速臺式離心機。5.30高速冷凍離心機。5.31管式離心機。5.32高壓均質(zhì)機。5.33冷卻水循環(huán)機。5.34高速分散機。5.36超濾膜。5.37過濾器。3均質(zhì)機破碎，獲得重組蛋白包涵體（濃懸濁液，又稱“包涵體泥加入由氯化鈉、純水混合制成的緩沖液，將包涵體泥漿清洗2次，每次清洗后，使用管式離心機6.2.1.1在清洗離心獲得的包涵體泥漿中加入由氫氧化鈉、氨丁三醇、鹽酸、純水混合制成的緩沖液6.2.1.2進行兩步反相色譜純化，經(jīng)等電點沉淀后，獲取純化主6.2.2.1使用色譜樹脂填料進行色譜6.2.2.2使用由氨丁三醇、異丙醇、甲酸、純水混合制成的緩沖液對層析柱進行沖洗、滅菌、再生、6.2.2.3將溶解稀釋后的包涵體溶液上柱，通過層析系統(tǒng)、中低壓制備液相、高壓制備液相等操控將6.2.2.4使用緩沖液洗脫層析柱上的目標6.2.2.5純化結(jié)束后用緩沖液沖洗色譜樹脂，進行清洗6.2.3.1使用由氫氧化鈉、鹽酸混合制成的pH調(diào)節(jié)劑將色譜純化得到的蛋白溶液的pH值調(diào)節(jié)至等6.2.3.2目的蛋白析出為沉淀，使用管式離心機進行分離，離心過程通過冷卻水循環(huán)機對管式離心機6.3.1.1使用色譜樹脂填料進行色譜6.3.1.2使用由氯化鈉、冰醋酸、組氨酸、磷酸氫二鈉十二水化合物、純水混合制成的緩沖液對層析6.3.1.3將稀釋后的包涵體溶液上柱，通過層析系統(tǒng)、中低壓制備液相、高壓制備液相等控制蛋白液6.3.1.4使用緩沖液洗脫層析柱上的目標6.3.1.5純化結(jié)束后用緩沖液沖洗色譜樹脂，進行清洗46.3.2.1使用過濾孔徑為0.001μm～0.1μm的過濾膜，在外界壓力作用下截6.3.2.2超濾產(chǎn)生的濾過廢液和少量

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