2015-2024年十年高考生物真題分類匯編專題23發(fā)酵工程（全國）

2013-2024年十年高考真題匯編PAGEPAGE1專題23發(fā)酵工程考點十年考情（2015-2024）命題趨勢考點1微生物的培養(yǎng)與應用（10年10考）2024·貴州、江西、湖南、浙江、河北、山東、吉林、全國、甘肅、安徽、廣東2023·北京、山東、廣東、浙江、湖南2022·天津、遼寧、江蘇、海南、湖北、浙江、重慶、河北、北京、廣東、全國2021·天津、北京、山東、浙江、江蘇、重慶、湖南2020·江蘇、山東、浙江、全國2019·全國、上海、江蘇、北京2018·浙江、全國、江蘇、海南2017·江蘇、全國、浙江、上海2016·四川、上海、江蘇、全國2015·全國、江蘇、上海、山東、四川從近10年全國各地的高考試題來看，發(fā)酵工程專題以來自生產(chǎn)生活實際的實例為情境考查微生物的培養(yǎng)及應用、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)、發(fā)酵工程與應用；試題側(cè)重考查學生對科學探究和科學思維及利用所學知識解決實際問題能力的考查。此部分內(nèi)容集中在非選擇題部分考察。考點2傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與應用（10年10考）2024·浙江、湖北、北京2023·浙江、山東2022·湖南、江蘇2021·江蘇、海南、湖北、遼寧、山東、浙江2020·江蘇2019·江蘇2018·海南、北京、江蘇2017·全國、浙江、海南、江蘇2016·天津、江蘇、全國、四川2015·江蘇、全國考點3發(fā)酵工程與應用（10年10考）2024·江西、山東、河北、北京、安徽2023·山東、全國2022·湖北、山東、湖南、浙江、遼寧、廣東2021·重慶、河北、廣東、全國2020·天津、浙江、全國2019·海南、浙江2018·江蘇、浙江2017·江蘇、浙江2016·海南、江蘇2015·江蘇、上?？键c1微生物的培養(yǎng)與應用〖2024年高考真題〗1．（2024·貴州·高考真題）生物學實驗中合理選擇材料和研究方法是順利完成實驗的前提條件。下列敘述錯誤的是（

）A．稀釋涂布平板法既可分離菌株又可用于計數(shù)B．進行胚胎分割時通常是在原腸胚期進行分割C．獲取馬鈴薯脫毒苗常選取莖尖進行組織培養(yǎng)D．使用不同的限制酶也能產(chǎn)生相同的黏性末端2．（2024·江西·高考真題）井岡霉素是我國科學家發(fā)現(xiàn)的一種氨基寡糖類抗生素，它由吸水鏈霉菌井岡變種（JGs，一種放線菌，菌體呈絲狀生長）發(fā)酵而來，在水稻病害防治等領域中得到廣泛應用。下列關(guān)于JGs發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素的敘述，正確的是（

）A．JGs可發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素，因為它含有能夠編碼井岡霉素的基因B．JGs接入發(fā)酵罐前需要擴大培養(yǎng)，該過程不影響井岡霉素的產(chǎn)量C．提高JGs發(fā)酵培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度，會提高井岡霉素的產(chǎn)量D．稀釋涂布平板法不宜用于監(jiān)控JGs發(fā)酵過程中活細胞數(shù)量的變化3．（2024·湖南·高考真題）微生物平板劃線和培養(yǎng)的具體操作如圖所示，下列操作正確的是（）

A．①②⑤⑥ B．③④⑥⑦ C．①②⑦⑧ D．①③④⑤4．（2024·浙江·高考真題）脲酶催化尿素水解，產(chǎn)生的氨可作為細菌的氮源。脲酶被去除鎳后失去活性。下列敘述錯誤的是（

）A．鎳是組成脲酶的重要元素B．鎳能提高尿素水解反應的活化能C．產(chǎn)脲酶細菌可在以NH4Cl為唯一氮源的培養(yǎng)基生長繁殖D．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可用于篩選產(chǎn)脲酶細菌5．（2024·河北·高考真題）下列相關(guān)實驗操作正確的是（

）A．配制PCR反應體系時，加入等量的4種核糖核苷酸溶液作為擴增原料B．利用添加核酸染料的凝膠對PCR產(chǎn)物進行電泳后，在紫外燈下觀察結(jié)果C．將配制的酵母培養(yǎng)基煮沸并冷卻后，在酒精燈火焰旁倒平板D．將接種環(huán)燒紅，迅速蘸取酵母菌液在培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)，獲得單菌落6．（2024·山東·高考真題）酵母菌在合成色氨酸時需要3種酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分別為相應酶的編碼基因突變的色氨酸依賴型突變體。已知3種酶均不能進出細胞，而色氨酸合成途徑的中間產(chǎn)物積累到一定程度時可分泌到胞外。將這3種突變體均勻劃線接種到含有少量色氨酸的培養(yǎng)基上，生長情況如圖。據(jù)圖分析，3種酶在該合成途徑中的作用順序為（）A．X→Y→Z B．Z→Y→X C．Y→X→Z D．Z→X→Y7．（2024·吉林·高考真題）某些香蕉植株組織中存在的內(nèi)生菌可防治香蕉枯萎病，其篩選流程及抗性檢測如圖。下列操作正確的是（

）A．在大量感染香蕉枯萎病的香蕉種植園內(nèi)，從感病植株上采集樣品B．將采集的樣品充分消毒后，用蒸餾水沖洗，收集沖洗液進行無菌檢測C．將無菌檢測合格的樣品研磨，經(jīng)稀釋涂布平板法分離得到內(nèi)生菌的單菌落D．判斷內(nèi)生菌的抗性效果需比較有無接種內(nèi)生菌的平板上的病原菌菌斑大小8．（2024·江西·高考真題）聚對苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一種聚酯塑料，會造成環(huán)境污染。磷脂酶可催化PET降解。為獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物，研究人員試驗了2種方法?；卮鹣铝袉栴}：(1)方法1從土壤等環(huán)境樣品中篩選高產(chǎn)磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇酯（一種磷脂類物質(zhì)）為唯一碳源制備培養(yǎng)基，可提高該方法的篩選效率。除碳源外，該培養(yǎng)基中至少還應該有、、等營養(yǎng)物質(zhì)。(2)方法2采用技術(shù)定向改造現(xiàn)有微生物，以獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物。除了編碼磷脂酶的基因外，該技術(shù)還需要、、等“分子工具”。(3)除了上述2種方法之外，還可以通過技術(shù)非定向改造現(xiàn)有微生物，篩選獲得能夠高產(chǎn)磷脂酶的微生物。(4)將以上獲得的微生物接種到鑒別培養(yǎng)基（在牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中添加2%的瓊脂粉和適量的卵黃磷脂）平板上培養(yǎng)，可以通過觀察卵黃磷脂水解圈的大小，初步判斷微生物產(chǎn)磷脂酶的能力，但不能以水解圈大小作為判斷微生物產(chǎn)磷脂酶能力的唯一依據(jù)。從平板制作的角度分析，其原因可能是。9．（2024·全國·高考真題）合理使用消毒液有助于減少傳染病的傳播。某同學比較了3款消毒液A、B、C殺滅細菌的效果，結(jié)果如圖所示。回答下列問題。(1)該同學采用顯微鏡直接計數(shù)法和菌落計數(shù)法分別測定同一樣品的細菌數(shù)量，發(fā)現(xiàn)測得的細菌數(shù)量前者大于后者，其原因是。(2)該同學從100mL細菌原液中取1mL加入無菌水中得到10mL稀釋菌液，再從稀釋菌液中取200μL涂布平板，菌落計數(shù)的結(jié)果為100，據(jù)此推算細菌原液中細菌濃度為個/mL。(3)菌落計數(shù)過程中，涂布器應先在酒精燈上灼燒，冷卻后再涂布。灼燒的目的是，冷卻的目的是。(4)據(jù)圖可知殺菌效果最好的消毒液是，判斷依據(jù)是。（答出兩點即可）(5)鑒別培養(yǎng)基可用于反映消毒液殺滅大腸桿菌的效果。大腸桿菌在伊紅美藍培養(yǎng)基上生長的菌落呈色。10．（2024·甘肅·高考真題）源于細菌的纖維素酶是一種復合酶，能降解纖維素。為了提高纖維素酶的降解效率，某課題組通過篩選高產(chǎn)纖維素酶菌株，克隆表達降解纖維素的三種酶（如下圖），研究了三種酶混合的協(xié)同降解作用，以提高生物質(zhì)資源的利用效率。回答下列問題。

(1)過程①②采用以羧甲基纖維素鈉為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選菌株X，能起到篩選作用的原因是。高產(chǎn)纖維素酶菌株篩選時，剛果紅培養(yǎng)基上的菌落周圍透明圈大小反映了。(2)過程④擴增不同目的基因片段需要的關(guān)鍵酶是。(3)過程⑤在基因工程中稱為，該過程需要的主要酶有。(4)過程⑥大腸桿菌作為受體細胞的優(yōu)點有。該過程用Ca2+處理細胞，使其處于一種的生理狀態(tài)。(5)課題組用三種酶及酶混合物對不同生物質(zhì)原料進行降解處理，結(jié)果如下表。表中協(xié)同系數(shù)存在差異的原因是（答出兩點）。生物質(zhì)原料降解率（%）協(xié)同系數(shù)酶A酶B酶C混1混2混1混2小麥秸稈7.086.038.198.6126.9874.33114.64玉米秸稈2.621.483.763.929.8824.9877.02玉米芯0.620.480.860.986.791.8211.34注：混1和混2表示三種酶的混合物11．（2024·安徽·高考真題）丁二醇廣泛應用于化妝品和食品等領域。興趣小組在已改造的大腸桿菌中引入合成丁二醇的關(guān)鍵基因X，以提高丁二醇的產(chǎn)量?；卮鹣铝袉栴}。(1)擴增X基因時，PCR反應中需要使用TaqDNA聚合酶，原因是。(2)使用BamHI和SalI限制酶處理質(zhì)粒和X基因，連接后轉(zhuǎn)化大腸桿菌，并涂布在無抗生素平板上（如圖）。在此基礎上，進一步篩選含目的基因菌株的實驗思路是。、(3)研究表明，碳源和氮源的種類、濃度及其比例會影響微生物生長和發(fā)酵產(chǎn)物積累。如果培養(yǎng)基中碳源相對過多，容易使其氧化不徹底，形成較多的，引起發(fā)酵液pH值下降。興趣小組通過單因子實驗確定了木薯淀粉和酵母粉的最適濃度分別為100g.L-1和15g.L-1。在此基礎上，設置不同濃度的木薯淀粉（90g.L-1、100g.L-1、110g.L-1）和酵母粉（12g.L-1、15g.L-1、18g.L-1）篩選碳源和氮源濃度的最佳組合，以獲得較高發(fā)酵產(chǎn)量，理論上應設置（填數(shù)字）組實驗（重復組不計算在內(nèi)）。(4)大腸桿菌在發(fā)酵罐內(nèi)進行高密度發(fā)酵時，溫度會升高，其原因是。(5)發(fā)酵工業(yè)中通過菌種選育、擴大培養(yǎng)和發(fā)酵后，再經(jīng)，最終獲得發(fā)酵產(chǎn)品。12．（2024·廣東·高考真題）駒形桿菌可合成細菌纖維素（BC）并將其分泌到胞外組裝成膜。作為一種性能優(yōu)異的生物材料，BC膜應用廣泛。研究者設計了酪氨酸酶（可催化酪氨酸形成黑色素）的光控表達載體，將其轉(zhuǎn)入駒形桿菌后構(gòu)建出一株能合成BC膜并可實現(xiàn)光控染色的工程菌株，為新型紡織原料的綠色制造及印染工藝升級提供了新思路（圖一）?；卮鹣铝袉栴}：(1)研究者優(yōu)化了培養(yǎng)基的（答兩點）等營養(yǎng)條件，并控制環(huán)境條件，大規(guī)模培養(yǎng)工程菌株后可在氣液界面處獲得BC菌膜（菌體和BC膜的復合物）。(2)研究者利用T7噬菌體來源的RNA聚合酶（T7RNAP）及藍光光敏蛋白標簽，構(gòu)建了一種可被藍光調(diào)控的基因表達載體（光控原理見圖二a，載體的部分結(jié)構(gòu)見圖二b）。構(gòu)建載體時，選用了通用型啟動子PBAD（被工程菌RNA聚合酶識別）和特異型啟動子PT7（僅被T7RNAP識別）。為實現(xiàn)藍光控制染色，啟動子①②及③依次為，理由是。(3)光控表達載體攜帶大觀霉素（抗生素）抗性基因。長時間培養(yǎng)時在培養(yǎng)液中加入大觀霉素，其作用為（答兩點）。(4)根據(jù)預設的圖案用藍光照射已長出的BC菌膜并繼續(xù)培養(yǎng)一段時間，隨后將其轉(zhuǎn)至染色池處理，發(fā)現(xiàn)只有經(jīng)藍光照射的區(qū)域被染成黑色，其原因是。(5)有企業(yè)希望生產(chǎn)其他顏色圖案的BC膜。按照上述菌株的構(gòu)建模式提出一個簡單思路。13．（2024·浙江·高考真題）鋅轉(zhuǎn)運蛋白在某種植物根部細胞特異性表達并定位于細胞質(zhì)膜，具有吸收和轉(zhuǎn)運環(huán)境中Zn2+的功能。為研究該植物2種鋅轉(zhuǎn)運蛋白M和N與吸收Zn2+相關(guān)的生物學功能，在克隆M、N基因基礎上，轉(zhuǎn)化鋅吸收缺陷型酵母，并進行細胞學鑒定?；卮鹣铝袉栴}：(1)鋅轉(zhuǎn)運蛋白基因M、N克隆。以該植物為材料提取并純化mRNA，反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。根據(jù)序列信息設計引物進行PCR擴增，PCR每個循環(huán)第一步是進行熱變性處理，該處理的效果類似于生物體內(nèi)的作用效果。PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳時，DNA分子因為含而帶負電荷，凝膠點樣孔端應靠近電泳槽負極接口；當2個PCR產(chǎn)物分子量接近時，若延長電泳時間，凝膠中這2個條帶之間的距離會?；厥誅NA片段，連接至克隆載體，轉(zhuǎn)化大腸桿菌，測序驗證。(2)重組表達載體構(gòu)建。分別將含M、N基因的重組質(zhì)粒和酵母表達載體同時進行雙酶切處理，然后利用連接，將得到的重組表達載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌。用PCR快速驗證重組轉(zhuǎn)化是否成功。此反應可以用大腸桿菌懸液當模板的原因是。(3)酵母菌轉(zhuǎn)化。取凍存的鋅吸收缺陷型酵母菌株，直接在固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，活化后接種至液體培養(yǎng)基，采用以擴大菌體數(shù)量，用重組表達載體轉(zhuǎn)化酵母菌。檢測M、N基因在受體細胞中的表達水平，無顯著差異。(4)轉(zhuǎn)基因酵母功能鑒定。分別將轉(zhuǎn)化了M、N基因的酵母菌株于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)至OD600為0.6。將菌液用法逐級稀釋至OD600為0.06、0.006和0.0006，然后各取10μL菌液用涂布器均勻涂布在固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)2天，菌落生長如圖。該實驗中陰性對照為。由實驗結(jié)果可初步推測：轉(zhuǎn)運蛋白M和N中，轉(zhuǎn)運Zn2+能力更強的是，依據(jù)是。注：OD600為波長600nm下的吸光值，該值越大，菌液濃度越高；空載體為未插入M或N基因的表達載體?！?023年高考真題〗1．（2023·北京·統(tǒng)考高考真題）高中生物學實驗中，下列實驗操作能達成所述目標的是（）A．用高濃度蔗糖溶液處理成熟植物細胞觀察質(zhì)壁分離B．向泡菜壇蓋邊沿的水槽中注滿水形成內(nèi)部無菌環(huán)境C．在目標個體集中分布的區(qū)域劃定樣方調(diào)查種群密度D．對外植體進行消毒以杜絕接種過程中的微生物污染2．（2023·山東·高考真題）平板接種常用在微生物培養(yǎng)中。下列說法正確的是（

）A．不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)B．平板涂布時涂布器使用前必須進行消毒C．接種后未長出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄D．利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物3．（2023·廣東·統(tǒng)考高考真題）研究者擬從堆肥中取樣并篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌。根據(jù)堆肥溫度變化曲線（如圖）和選擇培養(yǎng)基篩選原理來判斷，下列最可能篩選到目標菌的條件組合是（

）

A．a(chǎn)點時取樣、尿素氮源培養(yǎng)基B．b點時取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基C．b點時取樣、蛋白胨氮源培養(yǎng)基D．c點時取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基4．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）某同學想從泡菜汁中篩選耐高鹽乳酸菌，進行了如下實驗：取泡菜汁樣品，劃線接種于一定NaCl濃度梯度的培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)得到了單菌落。下列敘述正確的是（

）A．培養(yǎng)基pH需偏堿性 B．泡菜汁需多次稀釋后才能劃線接種C．需在無氧條件下培養(yǎng) D．分離得到的微生物均為乳酸菌5．（2023·北京·統(tǒng)考高考真題）自然界中不同微生物之間存在著復雜的相互作用。有些細菌具有溶菌特性，能夠破壞其他細菌的結(jié)構(gòu)使細胞內(nèi)容物釋出。科學家試圖從某湖泊水樣中分離出有溶菌特性的細菌。(1)用于分離細菌的固體培養(yǎng)基包含水、葡萄糖、蛋白胨和瓊脂等成分，其中蛋白胨主要為細菌提供和維生素等。(2)A菌通常被用做溶菌對象。研究者將含有一定濃度A菌的少量培養(yǎng)基傾倒在固體培養(yǎng)平板上，凝固形成薄層。培養(yǎng)一段時間后，薄層變渾濁（如圖），表明。(3)為分離出具有溶菌作用的細菌，需要合適的菌落密度，因此應將含菌量較高的湖泊水樣后，依次分別涂布于不同的渾濁薄層上。培養(yǎng)一段時間后，能溶解A菌的菌落周圍會出現(xiàn)。采用這種方法，研究者分離、培養(yǎng)并鑒定出P菌。(4)為探究P菌溶解破壞A菌的方式，請?zhí)岢鲆粋€假設，該假設能用以下材料和設備加以驗證（主要實驗材料和設備：P菌、A菌、培養(yǎng)基、圓形濾紙小片、離心機和細菌培養(yǎng)箱）。6．（2023·湖南·統(tǒng)考高考真題）某些植物根際促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用?；卮鹣铝袉栴}：(1)若從植物根際土壤中篩選分解淀粉的固氮細菌，培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括水和。(2)現(xiàn)從植物根際土壤中篩選出一株解淀粉芽孢桿菌H，其產(chǎn)生的抗菌肽抑菌效果見表。據(jù)表推測該抗菌肽對的抑制效果較好，若要確定其有抑菌效果的最低濃度，需在μg·mL-1濃度區(qū)間進一步實驗。測試菌抗菌肽濃度/（μg?mL-1）55.2027.6013.806.903.451.730.86金黃色葡萄球菌++枯草芽孢桿菌++禾谷鐮孢菌-++++++假絲酵母-++++++注：“+”表示長菌，“-”表示未長菌。(3)研究人員利用解淀粉芽孢桿菌H的淀粉酶編碼基因M構(gòu)建高效表達質(zhì)粒載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌成功構(gòu)建基因工程菌A。在利用A菌株發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶M過程中，傳代多次后，生產(chǎn)條件未變，但某子代菌株不再產(chǎn)生淀粉酶M。分析可能的原因是（答出兩點即可）。(4)研究人員通過肺上皮干細胞誘導生成肺類器官，可自組裝或與成熟細胞組裝成肺類裝配體，如圖所示。肺類裝配體培養(yǎng)需要滿足適宜的營養(yǎng)、溫度、滲透壓、pH以及（答出兩點）等基本條件。肺類裝配體形成過程中是否運用了動物細胞融合技術(shù)（填“是”或“否”）。

(5)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）是一種耐藥菌，嚴重危害人類健康?？蒲腥藛T擬用MRSA感染肺類裝配體建立感染模型，來探究解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽是否對MRSA引起的肺炎有治療潛力。以下實驗材料中必備的是。①金黃色葡萄球菌感染的肺類裝配體

②MRSA感染的肺類裝配體

③解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽

④生理鹽水

⑤青霉素（抗金黃色葡萄球菌的藥物）

⑥萬古霉素（抗MRSA的藥物）〖2022年高考真題〗7．（2022·天津·高考真題）下圖所示實驗方法的應用或原理，不恰當?shù)氖牵?/p>

）實驗方法應用原理A．分離綠葉中的色素B．不同色素在層析液中溶解度不同C．細菌計數(shù)D．逐步稀釋A．A B．B C．C D．D8．（2022·遼寧·統(tǒng)考高考真題）為避免航天器在執(zhí)行載人航天任務時出現(xiàn)微生物污染風險，需要對航天器及潔凈的組裝車間進行環(huán)境微生物檢測。下列敘述錯誤的是（

）A．航天器上存在適應營養(yǎng)物質(zhì)匱乏等環(huán)境的極端微生物B．細菌形成菌膜粘附于航天器設備表面產(chǎn)生生物腐蝕C．在組裝車間地面和設備表面采集環(huán)境微生物樣品D．采用平板劃線法等分離培養(yǎng)微生物，觀察菌落特征9．（2022·江蘇·統(tǒng)考高考真題）航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細胞跳動的視頻。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．培養(yǎng)心肌細胞的器具和試劑都要先進行高壓蒸汽滅菌B．培養(yǎng)心肌細胞的時候既需要氧氣也需要二氧化碳C．心肌細胞在培養(yǎng)容器中通過有絲分裂不斷增殖D．心肌細胞在神經(jīng)細胞發(fā)出的神經(jīng)沖動的支配下跳動10．（2022·江蘇·統(tǒng)考高考真題）下列有關(guān)實驗方法的描述合理的是（

）A．將一定量胡蘿卜切碎，加適量水、石英砂，充分研磨，過濾，獲取胡蘿卜素提取液B．適當濃度蔗糖溶液處理新鮮黑藻葉裝片，可先后觀察到細胞質(zhì)流動與質(zhì)壁分離現(xiàn)象C．檢測樣品中的蛋白質(zhì)時，須加熱使雙縮脲試劑與蛋白質(zhì)發(fā)生顯色反應D．用溴麝香草酚藍水溶液檢測發(fā)酵液中酒精含量的多少，可判斷酵母菌的呼吸方式11．（2022·江蘇·統(tǒng)考高考真題）下列是某同學分離高產(chǎn)脲酶菌的實驗設計，不合理的是（

）A．選擇農(nóng)田或公園土壤作為樣品分離目的菌株B．在選擇培養(yǎng)基中需添加尿素作為唯一氮源C．適當稀釋樣品是為了在平板上形成單菌落D．可分解酚紅指示劑使其褪色的菌株是產(chǎn)脲酶菌12．（2022·海南·統(tǒng)考高考真題）為探究校內(nèi)植物園土壤中的細菌種類，某興趣小組采集園內(nèi)土壤樣本并開展相關(guān)實驗。下列有關(guān)敘述錯誤的是（

）A．采樣時應隨機采集植物園中多個不同地點的土壤樣本B．培養(yǎng)細菌時，可選用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基C．土壤溶液稀釋倍數(shù)越低，越容易得到單菌落D．鑒定細菌種類時，除形態(tài)學鑒定外，還可借助生物化學的方法13．（2022·湖北·統(tǒng)考高考真題）滅菌、消毒、無菌操作是生物學實驗中常見的操作。下列敘述正確的是（）A．動、植物細胞DNA的提取必須在無菌條件下進行B．微生物、動物細胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C．為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌D．可用濕熱滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌14．（2022·湖北·統(tǒng)考高考真題）滅菌、消毒、無菌操作是生物學實驗中常見的操作。下列敘述正確的是（）A．動、植物細胞DNA的提取必須在無菌條件下進行B．微生物、動物細胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C．為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌D．可用濕熱滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌15．（2022·浙江·高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）回答與產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌育種有關(guān)的問題：(1)為快速分離產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌，可將土樣用制成懸液，再將含有懸液的三角瓶置于80℃的中保溫一段時間，其目的是。(2)為提高篩選效率，可將菌種的過程與菌種的產(chǎn)酶性能測定一起進行：將上述懸液稀釋后涂布于淀粉為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，采用顯色方法，根據(jù)透明圈與菌落直徑比值的大小，可粗略估計出菌株是否產(chǎn)酶及產(chǎn)酶性能。(3)為了獲得高產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌，可利用現(xiàn)有菌種，通過后再篩選獲得，或利用轉(zhuǎn)基因、等技術(shù)獲得。（二）回答與植物轉(zhuǎn)基因和植物克隆有關(guān)的問題：(4)在用農(nóng)桿菌侵染的方法進行植物轉(zhuǎn)基因過程中，通常要使用抗生素，其目的一是抑制生長，二是篩選轉(zhuǎn)化細胞。當選擇培養(yǎng)基中抗生素濃度時，通常會出現(xiàn)較多假陽性植株，因此在轉(zhuǎn)基因前需要對受體進行抗生素的檢測。(5)為提高培育轉(zhuǎn)基因植株的成功率，植物轉(zhuǎn)基因受體需具有較強的能力和遺傳穩(wěn)定性。對培養(yǎng)的受體細胞遺傳穩(wěn)定性的早期檢測，可通過觀察細胞內(nèi)形態(tài)是否改變進行判斷，也可通過觀察分裂期染色體的，分析染色體組型是否改變進行判斷。(6)植物轉(zhuǎn)基因受體全能性表達程度的高低主要與受體的基因型、培養(yǎng)環(huán)境、繼代次數(shù)和長短等有關(guān)。同時也與受體的取材有關(guān)，其中受體為時全能性表達能力最高。16．（2022·重慶·統(tǒng)考高考真題）研究發(fā)現(xiàn)柑橘精油可抑制大腸桿菌的生長。某興趣小組采用水蒸氣蒸餾法和壓榨法提取了某種橘皮的精油（分別簡稱為HDO和CPO），并研究其抑菌效果的差異。(1)為便于精油的提取，壓榨前需用浸泡橘皮一段時間。在兩種方法收集的油水混合物中均加入NaCl，其作用是；為除去油層中的水分，需加入。(2)無菌條件下，該小組制備了兩個大腸桿菌平板，用兩片大小相同的無菌濾紙分別蘸取HDO和CPO貼于含菌平板上，37℃培養(yǎng)24h，抑菌效果見如圖。有同學提出該實驗存在明顯不足：①未設置對照，設置本實驗對照的做法是，其作用是；②不足之處還有（答兩點）。(3)若HDO的抑菌效果低于CPO，從提取方法的角度分析，主要原因是。17．（2022·河北·統(tǒng)考高考真題）番茄灰霉病菌嚴重影響番茄生產(chǎn)，枯草芽孢桿菌可以產(chǎn)生對多種病原菌具有抑制作用的蛋白質(zhì)。為探究枯草芽孢桿菌能否用于番茄灰霉病的生物防治，研究者設計了相關(guān)實驗?；卮鹣铝袉栴}：(1)檢測枯草芽孢桿菌對番茄灰霉病菌的抑制作用時，取適量菌液涂布于固體培養(yǎng)基上，將無菌濾紙片（直徑5mm）在菌液中浸泡后覆蓋于固體培養(yǎng)基中心，數(shù)秒后取出濾紙片，培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)后測量大小以判定抑菌效果。(2)枯草芽孢桿菌為好氧微生物，液體培養(yǎng)時應采用（填“靜置”或“搖床震蕩”）培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中抽樣檢測活菌數(shù)量時，應采用（填“稀釋涂布平板法”或“顯微鏡直接計數(shù)法”），其原因是。(3)電泳分離蛋白質(zhì)混合樣品的原理是。利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測定枯草芽孢桿菌的抗菌蛋白分子量時，SDS的作用是。(4)枯草芽孢桿菌長期保藏時，常以其作為保藏對象。18．（2022·北京·統(tǒng)考高考真題）人體細胞因表面有可被巨噬細胞識別的“自體”標志蛋白C，從而免于被吞噬。某些癌細胞表面存在大量的蛋白C，更易逃脫吞噬作用。研究者以蛋白C為靶點，構(gòu)建了可感應群體密度而裂解的細菌菌株，擬用于制備治療癌癥的“智能炸彈”。(1)引起群體感應的信號分子A是一種脂質(zhì)小分子，通常以的方式進出細胞。細胞內(nèi)外的A隨細菌密度的增加而增加，A積累至一定濃度時才與胞內(nèi)受體結(jié)合，調(diào)控特定基因表達，表現(xiàn)出細菌的群體響應。(2)研究者將A分子合成酶基因、A受體基因及可使細菌裂解的L蛋白基因同時轉(zhuǎn)入大腸桿菌，制成AL菌株。培養(yǎng)的AL菌密度變化如圖1。其中，AL菌密度驟降的原因是：AL菌密度增加引起A積累至臨界濃度并與受體結(jié)合，。(3)蛋白K能與蛋白C特異性結(jié)合并阻斷其功能。研究者將K基因轉(zhuǎn)入AL菌，制成ALK菌株，以期用于腫瘤治療。為驗證ALK菌能產(chǎn)生蛋白K，應以菌株裂解的上清液為對照進行實驗。請從下列選項中選取所需材料與試劑的序號，完善實驗組的方案。實驗材料與試劑：①ALK菌裂解的上清液②帶熒光標記的K的抗體③帶熒光標記的C的抗體④腫瘤細胞實驗步驟：先加入保溫后漂洗，再加入保溫后漂洗，檢測熒光強度。(4)研究者向下圖2所示小鼠左側(cè)腫瘤內(nèi)注射ALK菌后，發(fā)現(xiàn)ALK菌只存在于該側(cè)瘤內(nèi)，兩周內(nèi)即觀察到雙側(cè)腫瘤生長均受到明顯抑制。而向瘤內(nèi)單獨注射蛋白K或AL菌，對腫瘤無明顯抑制作用。請應用免疫學原理解釋“智能炸彈”ALK菌能有效抑制對側(cè)腫瘤生長的原因。19．（2022·廣東·高考真題）研究深海獨特的生態(tài)環(huán)境對于開發(fā)海洋資源具有重要意義。近期在“科學號”考察船對中國南海科考中，中國科學家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的微生物菌株并進一步研究了其生物學特性?；卮鹣铝袉栴}：(1)研究者先制備富集培養(yǎng)基，然后采用法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品，28℃厭氧培養(yǎng)一段時間后，獲得了含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，為了獲得純種培養(yǎng)物，除了稀釋涂布平板法，還可采用法。據(jù)圖分析，擬桿菌新菌株在以為碳源時生長狀況最好。(2)研究發(fā)現(xiàn)，將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來，推測其原因可能是。（答一點即可）(3)藻類細胞解體后的難降解多糖物質(zhì)，通常會聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成成分的角度考慮，擬桿菌對深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能是。(4)深海冷泉環(huán)境特殊，推測此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能還有。20．（2022·全國·統(tǒng)考高考真題）化合物S被廣泛應用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)、用菌株C可生產(chǎn)S，S的產(chǎn)量與菌株C培養(yǎng)所利用的碳源關(guān)系密切。為此，某小組通過實驗比較不同碳源對菌體生長和S產(chǎn)量的影響，結(jié)果見表。碳源細胞干重（g/L）S產(chǎn)量（g/L）葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18回答下列問題。(1)通常在實驗室培養(yǎng)微生物時，需要對所需的玻璃器皿進行滅菌，滅菌的方法有（答出2點即可）。(2)由實驗結(jié)果可知，菌株C生長的最適碳源是；用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是。菌株C的生長除需要碳源外，還需要（答出2點即可）等營養(yǎng)物質(zhì)。(3)由實驗結(jié)果可知，碳源為淀粉時菌株C不能生長，其原因是。(4)若以制糖廢液作為碳源，為進一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，某同學進行了相關(guān)實驗。請簡要寫出實驗思路：。(5)利用制糖廢液生產(chǎn)S可以實現(xiàn)廢物利用，其意義是（答出1點即可）。21．（2022·全國·高考真題）某同學從被石油污染的土壤中分離得到A和B兩株可以降解石油的細菌，在此基礎上采用平板培養(yǎng)法比較二者降解石油的能力，并分析兩個菌株的其他生理功能。實驗所用的培養(yǎng)基成分如下。培養(yǎng)基Ⅰ：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，石油。培養(yǎng)基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，石油。操作步驟：①將A、B菌株分別接種在兩瓶液體培養(yǎng)基Ⅰ中培養(yǎng)，得到A、B菌液；②液體培養(yǎng)基Ⅰ、Ⅱ中添加瓊脂，分別制成平板Ⅰ、Ⅱ，并按圖中所示在平板上打甲、乙兩孔?；卮鹣铝袉栴}。菌株透明圈大小平板Ⅰ平板ⅡA+++++B++-(1)實驗所用培養(yǎng)基中作為碳源的成分是。培養(yǎng)基中NH4NO3的作用是為菌株的生長提供氮源，氮源在菌體內(nèi)可以參與合成（答出2種即可）等生物大分子。(2)步驟①中，在資源和空間不受限制的階段，若最初接種N0個A細菌，繁殖n代后細菌的數(shù)量是。(3)為了比較A、B降解石油的能力，某同學利用步驟②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ進行實驗，結(jié)果如表所示（“+”表示有透明圈，“+”越多表示透明圈越大，“-”表示無透明圈），推測該同學的實驗思路是。(4)現(xiàn)有一貧氮且被石油污染的土壤，根據(jù)上表所示實驗結(jié)果，治理石油污染應選用的菌株是，理由是?！?021年高考真題〗22．（2021·天津·統(tǒng)考高考真題）下列操作能達到滅菌目的的是（

）A．用免洗酒精凝膠擦手 B．制作泡菜前用開水燙洗容器C．在火焰上灼燒接種環(huán) D．防疫期間用石炭酸噴灑教室23．（2021·北京·統(tǒng)考高考真題）野生草本植物多具有根系發(fā)達、生長較快、抗逆性強的特點，除用于生態(tài)治理外，其中一些可替代木材栽培食用菌，收獲后剩余的菌渣可作肥料或飼料。相關(guān)敘述錯誤的是（）A．種植此類草本植物可以減少水土流失B．菌渣作為農(nóng)作物的肥料可實現(xiàn)能量的循環(huán)利用C．用作培養(yǎng)基的草本植物給食用菌提供碳源和氮源D．菌渣作飼料實現(xiàn)了物質(zhì)在植物、真菌和動物間的轉(zhuǎn)移24．（2021·北京·統(tǒng)考高考真題）人體皮膚表面存在著多種微生物，某同學擬從中分離出葡萄球菌。下述操作不正確的是（）A．對配制的培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌B．使用無菌棉拭子從皮膚表面取樣C．用取樣后的棉拭子在固體培養(yǎng)基上涂布D．觀察菌落的形態(tài)和顏色等進行初步判斷25．（2021·山東·統(tǒng)考高考真題）解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{色。將不能直接吸收脂肪的甲，乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍色，乙菌菌落周圍不變色，下列說法錯誤的是（

）A．甲菌屬于解脂菌B．實驗中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C．可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進行對比D．該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力26．（2021·浙江·統(tǒng)考高考真題）下列關(guān)于原生質(zhì)體和細胞計數(shù)的敘述，錯誤的是（）A．測定植物原生質(zhì)體的密度時，可用血細胞計數(shù)板B．紅墨水不能進入活細胞，可用于檢測細胞的存活狀態(tài)并計數(shù)C．涂布分離法和劃線分離法均能得到單菌落，都可用于細胞計數(shù)D．酵母菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間后，可用比濁計測定其密度27．（2021·江蘇·高考真題）為提高一株石油降解菌的凈化能力，將菌涂布于石油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，以致死率為90%的輻照劑量誘變處理，下列敘述不合理的是（

）A．將培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中后滅菌，可降低培養(yǎng)基污染的概率B．涂布用的菌濃度應控制在30~300個/mLC．需通過預實驗考察輻射時間對存活率的影響，以確定最佳誘變時間D．挑取培養(yǎng)基上長出的較大單菌落，給純化后進行降解效率分析28．（2021·山東·統(tǒng)考高考真題）含硫蛋白質(zhì)在某些微生物的作用下產(chǎn)生硫化氫導致生活污水發(fā)臭。硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結(jié)合形成黑色沉淀。為探究發(fā)臭水體中甲、乙菌是否產(chǎn)生硫化氫及兩種菌的運動能力，用穿刺接種的方法，分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，如圖所示。若兩種菌繁殖速度相等，下列說法錯誤的是（

）A．乙菌的運動能力比甲菌強B．為不影響菌的運動需選用液體培養(yǎng)基C．該實驗不能比較出兩種菌產(chǎn)生硫化氫的量D．穿刺接種等接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染29．（2021·浙江·統(tǒng)考高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）某環(huán)保公司從淤泥中分離到一種高效降解富營養(yǎng)化污水污染物的細菌菌株，制備了固定化菌株。（1）從淤泥中分離細菌時常用劃線分離法或法，兩種方法均能在固體培養(yǎng)基上形成。對分離的菌株進行誘變、和鑒定，從而獲得能高效降解富營養(yǎng)化污水污染物的菌株。該菌株只能在添加了特定成分X的培養(yǎng)基上繁殖。（2）固定化菌株的制備流程如下；①將菌株與該公司研制的特定介質(zhì)結(jié)合；②用蒸餾水去除；③檢驗固定化菌株的。菌株與特定介質(zhì)的結(jié)合不宜直接采用交聯(lián)法和共價偶聯(lián)法，可以采用的2種方法是。（3）對外，只提供固定化菌株有利于保護該公司的知識產(chǎn)權(quán)，推測其原因是。（二）三葉青為蔓生的藤本植物，以根入藥。由于野生三葉青對生長環(huán)境要求非?？量蹋约吧鷳B(tài)環(huán)境的破壞和過度的采挖，目前我國野生三葉青已十分珍稀。（1）為保護三葉青的多樣性和保證藥材的品質(zhì)，科技工作者依據(jù)生態(tài)工程原理，利用技術(shù)，實現(xiàn)了三葉青的林下種植。（2）依據(jù)基因工程原理，利用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片，葉片產(chǎn)生酚類化合物，誘導發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上vir系列基因表達形成和限制性核酸內(nèi)切酶等，進而從質(zhì)粒上復制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段（T-DNA）。T-DNA進入葉片細胞并整合到染色體上，T-DNA上rol系列基因表達，產(chǎn)生相應的植物激素，促使葉片細胞持續(xù)不斷地分裂形成，再分化形成毛狀根。（3）剪取毛狀根，轉(zhuǎn)入含頭孢類抗生素的固體培養(yǎng)基上進行多次培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添加抗生素的主要目的是。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進行懸浮培養(yǎng)，通過控制搖床的和溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的，獲得大量毛狀根，用于提取藥用成分。30．（2021·重慶·高考真題）為了研究PDCD4基因?qū)π∈笞訉m內(nèi)膜基質(zhì)細胞凋亡的影響，進行了相關(guān)實驗。(1)取小鼠子宮時，為避免細菌污染，手術(shù)器具應進行處理；子宮取出剪碎后，用處理一定時間，可獲得分散的子宮內(nèi)膜組織細胞，再分離獲得基質(zhì)細胞用于培養(yǎng)。(2)培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)應有（填寫兩種）；培養(yǎng)箱中CO2濃度為5%，其主要作用是。(3)在含PDCD4基因的表達載體中，啟動子的作用是。為了證明PDCD4基因?qū)|(zhì)細胞凋亡的作用，以含PDCD4基因的表達載體和基質(zhì)細胞的混合培養(yǎng)為實驗組，還應設立兩個對照組，分別為。經(jīng)檢測，實驗組中PDCD4表達水平和細胞凋亡率顯著高于對照組，說明該基因?qū)|(zhì)細胞凋亡具有（填“抑制”或“促進”）作用。31．（2021·浙江·統(tǒng)考高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）回答與甘蔗醋制作有關(guān)的問題：（1）為了獲得釀造甘蔗醋的高產(chǎn)菌株，以自然發(fā)酵的甘蔗渣為材料進行篩選。首先配制醋酸菌選擇培養(yǎng)基：將適量的葡萄糖、KH2PO4、MgSO4溶解并定容，調(diào)節(jié)pH，再高壓蒸汽滅菌，經(jīng)后加入3%體積的無水乙醇。然后將10g自然發(fā)酵的甘蔗渣加入選擇培養(yǎng)基，振蕩培養(yǎng)24h。用將少量上述培養(yǎng)液涂布到含CaCO3的分離培養(yǎng)基上，在30℃培養(yǎng)48h。再挑取分離培養(yǎng)基上具有的單菌落若干，分別接種到與分離培養(yǎng)基成分相同的培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h后，置于4℃冰箱中保存。（2）優(yōu)良產(chǎn)酸菌種篩選。將冰箱保存的菌種分別接入選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)一段時間后，取合適接種量的菌液在30℃、150r/min條件下振蕩培養(yǎng)。持續(xù)培養(yǎng)至培養(yǎng)液中醋酸濃度不再上升，或者培養(yǎng)液中含量達到最低時，發(fā)酵結(jié)束。篩選得到的優(yōu)良菌種除了產(chǎn)酸量高外，還應有（答出2點即可）等特點。（3）制醋過程中，可將甘蔗渣制作成固定化介質(zhì)，經(jīng)后用于發(fā)酵。其固定化方法為。（二）斑馬魚是一種模式動物，體外受精發(fā)育，胚胎透明、便于觀察，可用于水質(zhì)監(jiān)測，基因功能分析以及藥物毒性與安全性評價等。（1）由于人類活動產(chǎn)生的生活污水日益增多，大量未經(jīng)處理的污水直接排入河流、湖泊會引起水體，導致藻類大量繁殖形成水華。取水樣喂養(yǎng)斑馬魚，可用斑馬魚每周的體重和死亡率等指標監(jiān)測水體污染程度。（2）為了研究某基因在斑馬魚血管發(fā)育過程中的分子調(diào)控機制，用DNA連接酶將該基因連接到質(zhì)粒載體形成，導入到大腸桿菌菌株DH5α中。為了能夠連接上該目的基因、并有利于獲得含該目的基因的DH5α陽性細胞克隆，質(zhì)粒載體應含有（答出2點即可）。提取質(zhì)粒后，采用法，將該基因?qū)氲桨唏R魚受精卵細胞中，培養(yǎng)并觀察轉(zhuǎn)基因斑馬魚胚胎血管的發(fā)育情況。（3）為了獲取大量斑馬魚胚胎細胞用于藥物篩選，可用分散斑馬魚囊胚的內(nèi)細胞團，取分散細胞作為初始材料進行培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加成纖維細胞作為，以提高斑馬魚胚胎細胞克隆的形成率。32．（2021·湖南·統(tǒng)考高考真題）大熊貓是我國特有的珍稀野生動物，每只成年大熊貓每日進食竹子量可達12~38kg。大熊貓可利用竹子中8%的纖維素和27%的半纖維素。研究人員從大熊貓糞便和土壤中篩選纖維素分解菌。回答下列問題：（1）纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分，即。為篩選纖維素分解菌，將大熊貓新鮮糞便樣品稀釋液接種至以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，該培養(yǎng)基從功能上分類屬于培養(yǎng)基。（2）配制的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理，目的是。檢測固體培養(yǎng)基滅菌效果的常用方法是。（3）簡要寫出測定大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌活菌數(shù)的實驗思路。（4）為高效降解農(nóng)業(yè)秸稈廢棄物，研究人員利用從土壤中篩選獲得的3株纖維素分解菌，在37℃條件下進行玉米秸稈降解實驗，結(jié)果如表所示。在該條件下纖維素酶活力最高的是菌株，理由是。菌株秸稈總重(g)秸稈殘重(g)秸稈失重（%）纖維素降解率（%）A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.32〖2020年高考真題〗33．（2020·江蘇·統(tǒng)考高考真題）為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是（

）A．倒平板后需間歇晃動，以保證表面平整B．圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細菌數(shù)量均太多，應從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C．該實驗結(jié)果因單菌落太多，不能達到菌種純化的目的D．菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色34．（2020·江蘇·統(tǒng)考高考真題）甲、乙兩個實驗小組分別進行了“酵母細胞固定化技術(shù)”的實驗，結(jié)果如下圖所示。出現(xiàn)乙組實驗結(jié)果的原因可能為（

）A．CaCl2溶液濃度過高 B．海藻酸鈉溶液濃度過高C．注射器滴加速度過慢 D．滴加時注射器出口浸入到CaCl2溶液中35．（2020·山東·統(tǒng)考高考真題）野生型大腸桿菌可以在基本培養(yǎng)基上生長，發(fā)生基因突變產(chǎn)生的氨基酸依賴型菌株需要在基本培養(yǎng)基上補充相應氨基酸才能生長。將甲硫氨酸依賴型菌株M和蘇氨酸依賴型菌株N單獨接種在基本培養(yǎng)基上時，均不會產(chǎn)生菌落。某同學實驗過程中發(fā)現(xiàn)，將M、N菌株混合培養(yǎng)一段時間，充分稀釋后再涂布到基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后出現(xiàn)許多由單個細菌形成的菌落，將這些菌落分別接種到基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后均有菌落出現(xiàn)。該同學對這些菌落出現(xiàn)原因的分析，不合理的是（

）A．操作過程中出現(xiàn)雜菌污染B．M、N菌株互為對方提供所缺失的氨基酸C．混合培養(yǎng)過程中，菌株獲得了對方的遺傳物質(zhì)D．混合培養(yǎng)過程中，菌株中已突變的基因再次發(fā)生突變36．（2020·浙江·高考真題）下列關(guān)于微生物培養(yǎng)及利用的敘述，錯誤的是（

）A．利用尿素固體培養(yǎng)基可迅速殺死其他微生物，而保留利用尿素的微生物B．配制培養(yǎng)基時應根據(jù)微生物的種類調(diào)整培養(yǎng)基的pHC．酵母菌不能直接利用糯米淀粉發(fā)酵得到糯米酒D．適宜濃度的酒精可使醋化醋桿菌活化37．（2020·浙江·統(tǒng)考高考真題）下列關(guān)于淀粉酶的敘述，錯誤的是A．植物、動物和微生物能產(chǎn)生淀粉酶B．固相淀粉酶比水溶液中的淀粉酶穩(wěn)定性更高C．枯草桿菌淀粉酶的最適溫度比唾液淀粉酶的高D．淀粉被淀粉酶水解形成的糊精遇碘-碘化鉀溶液不顯色38．（2020·浙江·統(tǒng)考高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）回答與泡菜制作有關(guān)的問題：（1）用蘿卜等根菜類蔬菜制作泡菜，用熱水短時處理，可抑制某些微生物產(chǎn)生，從而使成品泡菜口感較脆。同時，該處理也會使泡菜發(fā)酵時間縮短，其原因是。（2）泡菜發(fā)酵初期，由于泡菜罐加蓋并水封，會使菌被逐漸抑制。發(fā)酵中期，乳酸菌大量繁殖，會使菌受到抑制。發(fā)酵后期，乳酸生產(chǎn)過多，會使乳酸菌受到抑制。（3）從泡菜汁中可分離制作酸奶的乳酸菌，首先對經(jīng)多次發(fā)酵的泡菜汁進行過濾，然后取濾液進行，再用的方法在某種含牛乳的專用的培養(yǎng)基中進行初步篩選。該培養(yǎng)基必須含有，以便于觀察是否產(chǎn)酸。（4）自然界中醋桿菌常與乳酸菌共同生長。若要篩選出醋桿菌，則其專用的培養(yǎng)基中應添加。（二）回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題：（1）為了獲取某植物葉片無菌的原生質(zhì)體，先將葉片經(jīng)表面消毒并去除下表皮，再將其置于經(jīng)處理的較高滲透壓的混合酶液中。酶解后，經(jīng)多次離心獲得原生質(zhì)體。然后測定該原生質(zhì)體的活性，可采用的方法有（答出2點即可）。（2）若要獲得已知序列的抗病基因，可采用或PCR的方法。為了提高目的基因和質(zhì)粒重組的成功率，選擇使用，對含目的基因的DNA片段進行處理，使其兩端形成不同的黏性末端，對質(zhì)粒也進行相同的處理，然后用DNA連接酶連接形成重組質(zhì)粒。通過在大腸桿菌中，以獲得大量的重組質(zhì)粒，最終將其導入原生質(zhì)體中。（3）原生質(zhì)體在培養(yǎng)過程中，只有重新形成后，才可進行有絲分裂。多次分裂形成的小細胞團可通過或器官發(fā)生的途徑再生植株。39．（2020·江蘇·統(tǒng)考高考真題）產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株，科研人員開展了相關(guān)研究。請回答下列問題：（1）常規(guī)微生物實驗中，下列物品及其滅菌方法錯誤的是（填編號）。編號①②③④物品培養(yǎng)基接種環(huán)培養(yǎng)皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧（2）稱取1．0g某土壤樣品，轉(zhuǎn)入99mL無菌水中，制備成菌懸液，經(jīng)后，獲得細胞密度不同的菌懸液。分別取0．1mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上，其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長出了46個酵母菌落，則該樣本中每克土壤約含酵母菌個。（3）為了進一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力，對分離所得的菌株，采用射線輻照進行育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，按照菌落直徑大小進行初篩，選擇直徑的菌落，純化后獲得A、B兩突變菌株。（4）在處理含油廢水的同時，可獲得單細胞蛋白，實現(xiàn)污染物資源化。為評價A、B兩菌株的相關(guān)性能，進行了培養(yǎng)研究，結(jié)果如圖。據(jù)圖分析，應選擇菌株進行后續(xù)相關(guān)研究，理由是。40．（2020·全國·統(tǒng)考高考真題）某種物質(zhì)S（一種含有C、H、N的有機物）難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機鹽、水和S，乙的組分為無機鹽、水、S和Y?；卮鹣铝袉栴}：（1）實驗時，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用的方法進行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是。甲、乙培養(yǎng)基均屬于培養(yǎng)基。（2）實驗中初步估測搖瓶M中細菌細胞數(shù)為2×107個/mL，若要在每個平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則至少應將搖瓶M中的菌液稀釋倍。（3）在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時，某菌株對S的降解量反而下降，其原因可能是（答出1點即可）。（4）若要測定淤泥中能降解S的細菌細胞數(shù)，請寫出主要實驗步驟。（5）上述實驗中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細菌的生長提供4類營養(yǎng)物質(zhì)，即。〖2019年高考真題〗41．（2019·上?！じ呖颊骖}）下圖表示利用β-糖苷酶時使用的一種酶的固定化技術(shù)，該技術(shù)是（

）

A．交聯(lián) B．包埋 C．沉淀 D．載體結(jié)合42．（2019·江蘇·統(tǒng)考高考真題）下列關(guān)于加酶洗滌劑的敘述，錯誤的是A．加酶洗衣粉中一般都含有酸性脂肪酶B．用加酶洗滌劑能減少洗滌時間并節(jié)約用水C．含纖維素酶洗滌劑可以洗滌印花棉織物D．加酶洗衣粉中的蛋白酶是相對耐高溫的43．（2019·江蘇·統(tǒng)考高考真題）下列關(guān)于產(chǎn)纖維素酶菌分離及運用的敘述，不合理的是A．篩選培養(yǎng)基中應含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生長營養(yǎng)B．可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌C．在分離平板上長出的菌落需進一步確定其產(chǎn)纖維素酶的能力D．用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈可提高其飼用價值44．（2019·江蘇·統(tǒng)考高考真題）下列關(guān)于微生物實驗操作的敘述，錯誤的是A．培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進行高壓蒸汽滅菌B．接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進行灼燒C．接種后的培養(yǎng)皿要倒置，以防培養(yǎng)污染D．菌種分離和菌落計數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基45．（2019·北京·統(tǒng)考高考真題）篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若細菌能分解淀粉，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，會出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈（如圖），實驗結(jié)果見下表。菌種菌落直徑：C（mm）透明圈直徑：H（mm）H/C細菌Ⅰ5.111.22.2細菌Ⅱ8.113.01.6有關(guān)本實驗的敘述，錯誤的是A．培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營養(yǎng)物質(zhì)B．篩選分解淀粉的細菌時，菌液應稀釋后涂布C．以上兩種細菌均不能將淀粉酶分泌至細胞外D．H/C值反映了兩種細菌分解淀粉能力的差異46．（2019·全國·統(tǒng)考高考真題）物質(zhì)W是一種含氮有機物，會污染土壤。W在培養(yǎng)基中達到一定量時培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細菌（目標菌）?；卮鹣铝袉栴}。（1）要從土壤中分離目標菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應該是。（2）在從土壤中分離目標菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細菌都能生長并形成菌落（如圖所示）。如果要得到目標菌，應該選擇菌落進一步純化，選擇的依據(jù)是。（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設計實驗進一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，請簡要寫出實驗思路、預期結(jié)果和結(jié)論，即。（4）該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶（酶E）。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進行如下實驗，請完善相關(guān)內(nèi)容。①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加，三處滴加量相同。②一段時間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明。（2019·上?！じ呖颊骖}）2019年7月，《上海市生活垃圾分類管理條例》施行，生活垃圾分類成為市民的日常生活方式，生活垃圾分類中的濕垃圾是指可被微生物降解的有機物。47．下列屬于濕垃圾的是。①剩余飯菜

②玻璃碎片

③植物落葉

④過期面包⑤果皮果殼48．濕垃圾降解后才能被植物利用，是因為根毛細胞難吸收。A．尿素 B．礦物質(zhì) C．H2O D．大分子有機物處理是垃圾的有效方法之一是用微生物對其進行降解。下圖表示篩選高效降解淀粉菌種的過程。49．培養(yǎng)基中加入碳源是。根據(jù)上圖，將菌液接種到培養(yǎng)基的方法是。50．據(jù)圖，菌落①與菌落②周圍透明圈的大小不同，原因可能是兩個菌群。A．對碘液分解能力不同 B．分泌的淀粉酶活性不同C．合成淀粉量不同 D．受淀粉抑制程度不同51．對篩選到的菌落①與菌落②進行鑒定，發(fā)現(xiàn)①屬于真菌，②屬于細菌，兩者的本質(zhì)區(qū)別是。A．細胞膜的成分 B．有無細胞結(jié)構(gòu) C．核糖體的有無 D．有無完整核膜52．若垃圾分類不當，在濕垃圾中混入了過期的抗生素或電池等，將不利于微生物分解，原因是。A．會抑制微生物生長 B．是微生物的生長因子C．促進有機物的合成 D．為微生物提供碳源和氮源53．（2019·全國·統(tǒng)考高考真題）回答下列與細菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。（1）在細菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是。硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上（填“能夠”或“不能”）生長，原因是。（2）用平板培養(yǎng)細菌時一般需要將平板（填“倒置”或“正置”）。（3）單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是。（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。54．（2019·全國·統(tǒng)考高考真題）已知一種有機物X（僅含有C、H兩種元素）不易降解，會造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細菌（目標菌）。Ⅰ號培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X（5g/L）。Ⅱ號培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無機鹽（適量），X（15g/L）。Ⅲ號培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無機鹽（適量）。X（45g/L）?；卮鹣铝袉栴}。（1）在Ⅰ號培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是。Ⅱ、Ⅲ號培養(yǎng)基為微生物提供碳源的有機物是。（2）若將土壤懸浮液種在Ⅱ號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細菌比例會，其原因是。（3）Ⅱ號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標菌并對菌落進行計數(shù)，接種時，應采用的方法是。（4）假設從Ⅲ號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供和?！?018年高考真題〗1．（2018·海南·高考真題）將相等數(shù)量的硝化細菌和大腸桿菌分別接種到含銨鹽的無機鹽培養(yǎng)液中，在適宜溫度下振蕩培養(yǎng)。若用虛線表示大腸桿菌的生長趨勢，實線表示硝化細菌的生長趨勢，則下圖中能正確表示兩種菌體生長趨勢的是（）A． B．C． D．2．（2018·江蘇·高考真題）花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖，下列敘述正確的是A．為了防止微生物污染，過程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30minB．過程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細胞分裂素以利于根的分化C．過程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體D．過程④應將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上5．（2018·江蘇·高考真題）酵母的蛋白質(zhì)含量可達自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢中醇作為碳源進行培養(yǎng)，這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母，并進行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程，請回答下列問題:（1）配制培養(yǎng)基時，按照培養(yǎng)基配方準確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的，及時對培養(yǎng)基進行分裝，并進行滅菌。（2）取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標記好的無菌培養(yǎng)皿中，在步驟③中將溫度約（在25℃、50℃或80℃中選擇）的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻，冷凝后倒置培養(yǎng)。（3）挑取分離平板中長出的單菌落，按步驟④進行劃線。下列敘述合理的有。a.為保證無菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b.劃線時應避免劃破培養(yǎng)基表面，以免不能形成正常菌落c.挑取菌落時，應挑取多個菌落，分別測定酵母細胞中甲醇的含量d.可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇高耐受株（4）分離培養(yǎng)酵母菌通常使用（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”）培養(yǎng)基，步驟⑤中，為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和供應。為監(jiān)測酵母的活細胞密度，將發(fā)酵液稀釋1000倍后，經(jīng)等體積臺盼藍染液染色，用25×16型（1mm×lmm×O.1mm）血細胞計數(shù)板計數(shù)5個中格中的細胞數(shù)，理論上色細胞的個數(shù)應不少于，才能達到每毫升3×109個活細胞的預期密度。6．（2018·全國·高考真題）回答下列與酵母菌有關(guān)的問題：（1）分離培養(yǎng)酵母菌通常使用（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”）培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應采用滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后會觀察到菌落，菌落的含義是。（2）酵母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，可促進（填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”）；若進行厭氧培養(yǎng)，可促進（填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”）。（3）制作面包時，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是。7．（2018·全國·高考真題）在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}：（1）在實驗室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具（填“可以”或“不可以”）放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是。（3）密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能，在照射前，適量噴灑，可強化消毒效果。（4）水廠供應的自來水通常是經(jīng)過（填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”）消毒的。（5）某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達到設定要求，而鍋內(nèi)并沒有達到相應溫度，最可能的原因是。8．（2018·全國·高考真題）將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。回答下列問題：（1）M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應加入鏈霉素以抑制的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。（2）M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有（答出兩點即可）。氮源進入細菌后，可參與合成的生物大分子有（答出兩點即可）。（3）若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)生淀粉酶的微生物，加入的顯色劑是，該方法能篩選出產(chǎn)生淀粉酶微生物的原理。（4）甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133。乙同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。有人認為這兩位同學的結(jié)果中，乙同學的結(jié)果可信度低，其原因是：。9．（2018·浙江·高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）回答與果膠、淀粉等提取和利用有關(guān)的問題：某植物富含果膠、淀粉、蛋白質(zhì)和纖維素成分。某小組開展了該植物綜合利用的研究。(1)果膠提取工藝研究結(jié)果表明，原料先經(jīng)過一段時間沸水漂洗的果膠得率（提取得到的果膠占原料質(zhì)量的百分率）顯著高于常溫水漂洗的果膠得率，最主要原因是沸水漂洗(A．有助于清洗雜質(zhì)和去除可溶性糖

B．使植物組織變得松散

C．使有關(guān)酶失活

D．有利細胞破裂和原料粉碎制漿)。(2)在淀粉分離生產(chǎn)工藝研究中，為促進淀粉絮凝沉降，添加生物絮凝劑（乳酸菌菌液），其菌株起重要作用。為了消除絮凝劑中的雜菌，通常將生產(chǎn)上使用的菌液，采用，進行單菌落分離，然后將其，并進行特性鑒定，篩選得到純的菌株。(3)在用以上提取過果膠和淀粉后的剩渣加工飲料工藝研究中，將剩渣制成的汁液經(jīng)蛋白酶和纖維素酶徹底酶解處理后，發(fā)現(xiàn)仍存在渾濁和沉淀問題,可添加使果膠徹底分解成半乳糖醛酸，再添加，以解決汁液渾濁和沉淀問題。(4)在建立和優(yōu)化固定化酶反應器連續(xù)生產(chǎn)工藝研究中，通常要分析汁液中各種成分的濃度和所用酶的活性，然后主要優(yōu)化各固定化酶反應器中的（答出2點即可）、反應液pH和酶反應時間等因素。其中，酶反應時間可通過來調(diào)節(jié)。（二）回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題。(1)將含某抗蟲基因的載體和含卡那霉素抗性基因的載體pBI121均用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI酶切，在切口處形成。選取含抗蟲基因的DNA片段與切割后的pBI121用DNA連接酶連接。在兩個片段相鄰處形成，獲得重組質(zhì)粒。(2)已知用CaCl2處理細菌，會改變其某些生理狀態(tài)。取CaCl2處理過的農(nóng)桿菌與重組質(zhì)粒在離心管內(nèi)進行混合等操作，使重組質(zhì)粒進入農(nóng)桿菌，完成實驗。在離心管中加入液體培養(yǎng)基，置于搖床慢速培養(yǎng)一段時間，其目的是，從而表達卡那霉素抗性基因，并大量增殖。(3)取田間不同品種水稻的幼胚，先進行，然后接種到培養(yǎng)基中培養(yǎng)，幼胚發(fā)生形成愈傷組織，并進行繼代培養(yǎng)。用含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染愈傷組織，再培養(yǎng)愈傷組織，以便獲得抗蟲的轉(zhuǎn)基因水稻。影響愈傷組織能否成功再生出植株的因素有：培養(yǎng)條件如光溫、培養(yǎng)基配方如植物激素配比、以及（答2點即可）?！?017年高考真題〗1．（2017·上?！じ呖颊骖}）硝化細菌廣泛存在于通氣性較好的土壤中，其部分代謝反應如圖所示，下列關(guān)于硝化細菌的培養(yǎng)條件的描述正確的是（）A．碳源為葡萄糖 B．培養(yǎng)時需隔絕空氣C．氮源是氨氣 D．培養(yǎng)時需冷藏2．（2017·上?！じ呖颊骖}）在培養(yǎng)基配制和微生物接種的過程中，確保無雜菌污染被稱為無菌操作。圖中，符合無菌操作要求的有A．①②③④ B．①②③⑤ C．①③④⑤ D．②③④⑤3．（2017·浙江·高考真題）回答下列（一）（二）小題（一）請回答從土壤中分離產(chǎn)脲酶細菌和脲酶固定化實驗的有關(guān)問題（1）LB固體培養(yǎng)基：取適量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl，加入一定量的蒸餾水溶解，再加，滅菌備用。（2）尿素固體培養(yǎng)基：先將適宜濃度的尿素溶液用滅菌過的G6玻璃砂漏斗過濾，因為G6玻璃砂漏斗，故用于過濾細菌。然后將尿素溶液加入到已經(jīng)滅菌的含有酚紅的培養(yǎng)基中，備用。（3）取適量含產(chǎn)脲酶細菌的10-4、10-5兩種土壤稀釋液，分別涂布接種到LB固體培養(yǎng)基和尿素固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)48h，推測固體培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)最少的是（A．10-5稀釋液+尿素固體培養(yǎng)基

B．10-5稀釋液+LB固體培養(yǎng)基

C．10-4稀釋液+尿素固體培養(yǎng)基

D．10-4稀釋液+LB固體培養(yǎng)基）。在尿素固體培養(yǎng)基上產(chǎn)脲酶細菌菌落周圍出現(xiàn)，其原因是細菌產(chǎn)生的脲酶催化尿素分解產(chǎn)生所致。（4）制備固定化脲酶時，用石英砂吸附脲酶，裝柱。再用蒸餾水洗滌固定化酶柱，其作用是。（二）某小組欲進行煙草原生質(zhì)體分離與培養(yǎng)的研究。請回答：（1）原生質(zhì)體的分離：在無菌條件下，取煙草無菌苗的葉片，放入含有0.5mol/L甘露醇（維持較高滲透壓）的混合液處理，經(jīng)過離心純化后獲得原生質(zhì)體。（2）原生質(zhì)體的培養(yǎng)：將原生質(zhì)體進行培養(yǎng)，重新長出細胞壁，形成胚性細胞。此時，應該培養(yǎng)基中甘露醇濃度，以利于胚性細胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細胞團，然后經(jīng)兩條途徑形成再生植株。途徑一：細胞團經(jīng)球形胚、和胚狀體，最后發(fā)育成植株。途徑二：細胞團增殖為愈傷組織，然后在發(fā)芽培養(yǎng)基上誘導出芽，切割芽經(jīng)過生根后形成完整植株。上述發(fā)芽培養(yǎng)基中含量相對較高的激素是，胚性細胞的主要特點是：。（A．液泡小、細胞核小

B．液泡大，細胞核大

C．液泡大，細胞核小

D．液泡小、細胞核大）（3）為了對煙草的某些性狀進行改良，分離的到兩種煙草的原生質(zhì)體后，通過方法將他們的遺傳物質(zhì)組合在一起，經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。提取再生植株的DNA，采用擴增相關(guān)基因，來鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。4．（2017·江蘇·高考真題）苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中，對環(huán)境有嚴重危害。小明同學準備依據(jù)下圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題:（1）酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有。（2）將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸。以達到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集，應進一步，以便于菌落計數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質(zhì)外，還必須添加。（3）下圖為連續(xù)劃線法示意圖，在圖中（填圖中序號）區(qū)域更易獲得單菌落。（4）采用比色測定法（使用苯酚顯色劑）檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進行顯色反應，下表中1~5號比色管的苯酚濃度應分別為。管號123456苯酚濃度（mg/L）1如果廢水為50mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，則需將殘留液稀釋（填序號：①5

②10

③20）倍后，再進行比色。5．（2017·全國·高考真題）某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}：（1）有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是，但可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是（答出兩點即可）。（2）為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應選擇（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是