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2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物樣本采集規(guī)范GB/T42060-2022《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室樣品采集、GB/T40352.1-2021《人類(lèi)組織樣本GB/T37864-2019《生物樣本GB19489-2008《實(shí)驗(yàn)室生物安全通GB/T14926.42-2001《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物WS/T662-2020《臨床體液檢驗(yàn)技術(shù)》4.1樣本采集方案的制定4.2福利倫理審查4.3設(shè)備和耗材確認(rèn)34.4樣本儲(chǔ)存條件確認(rèn)4.5個(gè)人防護(hù)準(zhǔn)備應(yīng)根據(jù)采集對(duì)象潛在的生物安全風(fēng)險(xiǎn),佩戴手套、口4.6場(chǎng)地、人員確認(rèn)場(chǎng)地應(yīng)是專(zhuān)屬場(chǎng)地,禁止辦公使用;場(chǎng)地有紫外和其他消毒設(shè)施,組織樣本采集的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)符合5.1組織樣本采集5.1.3遵循距離病灶中心由遠(yuǎn)及近的原則,先后采集正常組織、病灶旁組織、病灶組織樣本。所采集5.1.4應(yīng)盡快降低所采集組織樣本的溫度,必要時(shí)使用試劑(如RNAl5.1.5記錄相關(guān)信息,包括但不限5.2血液樣本采集5.2.3常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的采血部位、最大安全采血量和最小致死采血量,見(jiàn)附錄動(dòng)物麻醉后,用左手拇指和食指抓住兩耳之間的頭部皮膚,使頭部固定、眼球充分外突離心后,獲得實(shí)驗(yàn)所需要的血清。此采血法適合小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠的血液樣本的采4取血后用棉球壓迫止血。將血液迅速移入采血管。此采血法適合犬、猴、兔的血液樣本采集。5.2.9血液樣本采集后應(yīng)立即按照制造商的說(shuō)明要求,將含有添加劑的采血管中的血液樣本緩慢地翻5.3唾液樣本的采集5.3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物唾液樣本的采集通常指犬、豬等大動(dòng)物,一般采用刺激法。5.3.3采集犬、豬的頜下腺的唾液,需將動(dòng)物進(jìn)行中長(zhǎng)效麻醉后,在頜下腺排泄管管壁上作一切口,用容器收集。由于唾液腺共有三對(duì),故采取不同5.4精液樣本的采集5.4.1常用的精液樣本采集方法有假5.4.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物精液的采集常用假陰道采精法,適用于兔、山羊、綿羊、豬、犬等動(dòng)物。小動(dòng)物則常55.5陰道內(nèi)液樣本的采集5.5.1采集陰道內(nèi)液一般進(jìn)行涂片檢查,檢查雌性動(dòng)物的生理周期等特征。5.5.2沖洗法棉簽在載玻片上均勻轉(zhuǎn)動(dòng),作成涂片可以進(jìn)行細(xì)胞5.5.4刮取法用光滑的小勺或小刮片慢慢插入陰道中,在陰道5.6乳汁樣本的采集5.6.1按摩法采用吸乳器吸在動(dòng)物乳頭上,造成負(fù)壓而使乳汁被動(dòng)吸5.7尿液樣本采集5.7.1通常在實(shí)驗(yàn)前需要給動(dòng)物灌服一定量的水。5.7.2盡量避免食物、糞便、毛發(fā)和血液等對(duì)尿液樣品的污染。能造成較大的誤差,因此一般需收集5小時(shí)以上的尿液取平均值。此法適用于大鼠、小5.7.4導(dǎo)尿法4cm),沿腹中線切開(kāi)腹壁及腹膜,找到膀胱翻出腹外。辨認(rèn)清楚輸尿管進(jìn)入膀胱背側(cè)的部位(膀胱三角)后,分離出兩側(cè)輸尿管,分別在靠近膀胱處穿線結(jié)扎。在離此結(jié)扎點(diǎn)約2cm處的輸尿管近腎段下方穿一根絲線。用眼科剪在管壁上剪一斜向腎側(cè)的小切口,分別插入充滿生理鹽水的細(xì)塑料管(插入端剪成斜面),用留置的線結(jié)扎固定??梢?jiàn)到尿滴從插管中流出(頭幾滴是生理鹽水),塑料管的另一端與帶刻度6注意不應(yīng)緊貼膀胱后壁而堵塞輸尿管。下端接橡5.7.10反射排尿法5.8糞便樣本采集把,剪開(kāi)腹部肌肉,暴露回盲部剪開(kāi)回盲部,用滅菌接種環(huán)挑取將糞便前段棄去,取中段糞便樣本用于保存。對(duì)稀軟便,可直接收集樣本;對(duì)干便可加適量PB
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