葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用課件

（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用

（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用

（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用AIDS插管等侵襲性治療腫瘤和免疫抑制治療骨髓和實(shí)體器官移植廣譜抗生素治療侵襲性真菌感染率上升—（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用+600%+300%+300%Martinetal,NEJM2003;348:1546深部真菌感染不斷增加（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用國內(nèi)深部真菌感染不容忽視

劉正印等，中華醫(yī)學(xué)雜志2003年3月第83卷第5期（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用國內(nèi)情況我院血液科(2004.5-2005.5共118例患者)確診和臨床診斷有7例,發(fā)生率為5.9%以血液病為主的深部真菌感染高危患者中，發(fā)生感染的危險(xiǎn)因素有2種及2種以上廣譜抗生素應(yīng)用、念珠菌菌落定植和應(yīng)用尿管，其中廣譜抗生素應(yīng)用是最主要的危險(xiǎn)因素

（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用深部真菌感染條件致病性真菌念珠菌病曲霉病隱球菌病其他（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用對于侵襲性真菌感染……診斷滯后治療手段有限基礎(chǔ)疾病病死率很高念珠菌血癥若不治療死亡率可以達(dá)到45-76%侵襲性曲霉病死亡率高達(dá)55-70%（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用診斷方法顯微鏡檢查培養(yǎng)血清學(xué)分子生物學(xué)（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用鏡檢和培養(yǎng)方法敏感性低

血培養(yǎng)：在腫瘤和血液病病人中，50%尸檢證實(shí)深部念珠菌感染的病例血培養(yǎng)陰性。培養(yǎng)結(jié)果陽性僅表示存在某種真菌，區(qū)分定植和感染困難培養(yǎng)時(shí)間長有些標(biāo)本采集困難（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用非培養(yǎng)方法優(yōu)點(diǎn)快速報(bào)告結(jié)果敏感性提高取材簡便多以真菌在致病狀態(tài)產(chǎn)生的物質(zhì)為檢測標(biāo)志物，結(jié)果陽性提示有致病性定量檢測可判斷感染嚴(yán)重程度及療效評估（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用非培養(yǎng)診斷的方法簡介真菌細(xì)胞壁成分（1-3）-β-

D-葡聚糖檢測（G試驗(yàn)）真菌抗原檢查半乳甘露聚糖（galactomannan)抗原（GM)甘露聚糖(mannan)抗原隱球菌莢膜多糖抗原（乳膠凝集試驗(yàn)）真菌特異的代謝產(chǎn)物D-阿拉伯糖醇真菌DNA的檢測（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用深部真菌感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)

EORTC/MSG2008修訂版宿主因素臨床特征病原學(xué)真菌鏡檢真菌培養(yǎng)組織病理學(xué)檢查血清學(xué)檢查方法（間接證據(jù)）CSF隱球菌抗原陽性——確診GM-test,G-test——臨床診斷ClinicalInfectiousDiseases2008;46（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用（1-3）-β-

D-葡聚糖檢測（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用（1-3）-β-

D-葡聚糖檢測b1,6glucansb1,3PPLbilayerchitinergosterolb1,3glucansynthasemannoproteins真菌細(xì)胞壁成份，占50%以上其他微生物、動(dòng)物及人的細(xì)胞不含該成份用于侵襲性真菌感染的早期診斷（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用方法：G試驗(yàn)β-葡聚糖可特異性激活鱟（Limulus）變形細(xì)胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故稱G試驗(yàn)。Beta-D-glucan通過激活G因子（FactorG）引起凝集內(nèi)毒素通過激活C因子（FactorC）引起凝集試劑盒:祛除FactorC

Glucan特異（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用BG檢測的特點(diǎn)可檢測多種致病真菌感染念珠菌,曲霉,肺孢子菌,鐮刀菌,地霉,組織胞漿菌,毛孢子菌等不能用于檢測隱球菌和接合菌感染陽性結(jié)果代表存在侵襲性真菌感染真菌對數(shù)生長期釋放量最大,可被體內(nèi)葡聚糖酶降解(glucanase)每周檢測2次（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用BG檢測用于念珠菌血癥

敏感度為62%-100%，特異度為64%-88%不同種念珠菌感染對葡聚糖檢測無明顯影響白念珠菌,光滑念珠菌,熱帶念珠菌,克柔念珠菌,季也蒙念珠菌和葡萄牙念珠菌近平滑念珠菌BG水平較低Clin.Infect.Dis.2005.41:654–659.J.Clin.Microbiol.2005.43:5957–5962J.Clin.Microbiol.2008.46:1009–1013（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用BG檢測用于念珠菌血癥

BG檢測敏感度明顯高于Mannan檢測79.6%vs42%陽性早于血培養(yǎng)陽性和臨床癥狀出現(xiàn)對于念珠菌血癥,BG檢測是首選檢查Clin.Infect.Dis.2005.41:654–659.J.Clin.Microbiol.2005.43:5957–5962J.Clin.Microbiol.2008.46:1009–1013（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用β-（1-3）-D-葡聚糖(BG)檢測

用于侵襲性曲霉感染（IPA)敏感度為55%-100%特異度為52%-100%對于確診IPA，陽性率為85.7-100%高度可疑IPA，陽性率為52.4-66%Med.Mycol.2006.44:5163–5172J.Clin.Microbiol.2008.46:1009–1013J.Clin.Microbiol.2005.43:299–305（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用BG檢測(陽性界值為60pg/mL)和GM（陽性界值為1.0）比較二者在體內(nèi)的代謝動(dòng)力學(xué)相似，敏感度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值均相同，分別為87.5%、89.6%、70%和96.3%二者聯(lián)合可以提高特異度和陽性預(yù)測值，對敏感度和陰性預(yù)測值沒有影響JClinMicrobiol,2005,43:299-305.侵襲性曲霉感染（IPA)

BG檢測與半乳甘露聚糖(GM)檢測（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用BG檢測與半乳甘露聚糖(GM)檢測BG檢測與GM檢測敏感度67%vs38%特異度90%vs100%感染曲霉種類的影響抗真菌藥物應(yīng)用的影響抗生素應(yīng)用的影響（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用BG檢測對于煙曲霉和非煙曲霉感染無差別OrganismSensitivity,%Specificity,%PPV*,%NPV*,%A.fumigatusn=6961887579A.non-fumigatusn=3964886488J.Clin.Microbiol.2008.publishedonline（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用GM檢測煙曲霉感染的敏感性明顯低于非煙曲霉感染OrganismSensitivity,%Specificity,%PPV*,%NPV*,%A.fumigatusn=6913999066A.non-fumigatusn=3949999586J.Clin.Microbiol.2008.publishedonline（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用抗真菌治療對GM檢測的影響抗真菌治療使GM檢測敏感性下降確診IPA的造血干細(xì)胞移植未接受抗真菌治療，GM試驗(yàn)的敏感度為87.5%接受抗真菌治療，敏感度為20%應(yīng)用卡泊芬凈后，GM值會(huì)出現(xiàn)升高BG檢測的敏感性與抗真菌治療無明顯關(guān)系Clin.Infect.Dis.2005.40:1762–1769.Clin.Infect.Dis.2005.41:654–659.（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用抗生素治療

對BG檢測和GM檢測的影響B(tài)G檢測假陽性與應(yīng)用β內(nèi)酰胺類抗生素?zé)o關(guān)Antimicrob.AgentsChemother.2006.50:3450–3453.GM檢測哌拉西林/他唑巴坦導(dǎo)致假陽性（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用IPA的診斷方法BG檢測GM檢測煙曲霉可能陽性率低二者聯(lián)合可以提高檢測的陽性率（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用BG檢測用于肺孢子菌檢測BG是肺孢子菌包囊壁的組成成分可釋放入血液可用于肺孢子菌檢測（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用BG檢測57名PCP患者238名非PCP患者敏感度92%，特異度86%陽性預(yù)測值0.61，陰性預(yù)測值0.96界值31.1pg/mLCHEST2007;131:1173-1180（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用BG檢測AIDS患者合并PCP陽性率為97%（31/32）非HIV感染合并PCPBG值仍舊較高J.Infect.Chemother.2007.13:1–7.J.Med.Microbiol.2000.49:391–392.（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用BG檢測用于PCP診斷敏感度好臨床一致性好數(shù)值升高明顯，甚至高于念珠菌感染PCP(1,299-

1,151pg/ml;median,945pg/ml)念珠菌血癥(700-

779pg/ml;median,447pg/ml).J.Clin.Microbiol.2008.46:1009–1013（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用其它深部真菌感染鐮刀菌、組織胞漿菌、毛孢子菌、地霉、枝頂孢霉感染均可出現(xiàn)陽性對于接合菌和隱球菌均為陰性JMedVetMycol,1997,35:371-374.J.Clin.Microbiol.2008.46:1009–1013J.Clin.Microbiol.2008.publishedonline（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用（1-3）-β-

D-葡聚糖(BG)

檢測方法Fungitec-G(Japan)界值為20pg/mL

Fungitell(US)界值為60pg/mL或80pg/mL

GKT-5MSet動(dòng)態(tài)真菌檢測試劑盒(國內(nèi)金山川公司)界值為20pg/mL或50pg/mL

（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用Fungitec-GTM

20pg/mL41名確診IA患者中有37名陽性59名無真菌感染的腫瘤或結(jié)締組織病的對照中，無一例陽性JClinMicrobiol,1995,33:3115-3118

202名發(fā)熱患者敏感度和特異度分別為90%和100%，陽性預(yù)測值為59%，陰性預(yù)測值為97%

Lancet,1995,345:17-20.（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用FungitellTM

60pg/mL，80pg/mL60pg/mL

敏感度70%，特異度87%80pg/mL敏感度64%，特異度92%ClinInfectDis,2005,41:654-659.（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用GKT-5MSet動(dòng)態(tài)真菌檢測試劑盒

對于侵襲性念珠菌感染以健康人做對照敏感度88.9%,特異度90.2%陽性預(yù)測值50%,陰性預(yù)測值98.7%界值定為13.7pg/ml中國真菌學(xué)雜志，2007，2（4）：202-206（1,3）-β-D-葡聚糖檢測在侵襲性真菌感染中的應(yīng)用GKT-5MSet動(dòng)態(tài)真菌檢測試劑盒

北京大學(xué)第一醫(yī)院2008年4月至2008年8月住院患者臨床懷疑侵襲性真菌感染的患者98例50pg/mLBG≥50pg/mL15例，IFI組7例敏感度63.6%，陽性預(yù)測值46.7%BG＜50pg/mL83例，對照組79例特異度90.8%，陰性預(yù)測值