植物工廠化育苗教學(xué)課件 9馴化移栽

試管苗馴化移栽——植物工廠化育苗壯苗繼代培養(yǎng)---細(xì)胞分裂素濃度增加—有助于增殖系數(shù)提高（芽分化）-----芽增殖往往伴有生長勢減弱，表現(xiàn)為瘦弱細(xì)小----不適合移栽，移栽成活率低壯苗----生長好的芽可以分成單株進(jìn)行培養(yǎng)，未成形型的可以分成幾塊芽叢進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)基----高濃度生長素低濃度細(xì)胞分裂素。光照，暗光培養(yǎng)是輔助。不僅依靠強(qiáng)光和暗光調(diào)節(jié)。思路：光照環(huán)境的輔助暗培養(yǎng)—創(chuàng)造黑暗根系生活狀態(tài)---暗培養(yǎng)強(qiáng)光------光照促進(jìn)木質(zhì)部發(fā)育，抑制生長速率，促進(jìn)器官發(fā)育暗培養(yǎng)幫助生根狀態(tài)良好。植物較好的生根，并且這種方式對水分威脅和疾病抗性有所增加，植株可能表現(xiàn)生長遲緩和輕微失綠，但生產(chǎn)實(shí)踐證明比低光形成的苗有較高移栽成活率。提高光照強(qiáng)度，對壯苗有利。刺激植株光合作用制造有機(jī)物，便于異養(yǎng)轉(zhuǎn)向自養(yǎng)。組培苗經(jīng)過初代繼代，生根的過程以后，最終的目的是為了組培苗能成活于外界環(huán)境。成為陸地苗，繼而被生產(chǎn)、商業(yè)而應(yīng)用。

試管苗移栽是組織培養(yǎng)過程的重要環(huán)節(jié)，這個工作環(huán)節(jié)做不好，就會造成組培苗培養(yǎng)的前功盡棄，直接影響了經(jīng)濟(jì)效益。

試管苗環(huán)境特點(diǎn)、組培苗的生理特點(diǎn)、如何馴化組培苗使組培苗順利適應(yīng)外界環(huán)境、馴化方法及移栽方法步驟。（一）試管苗環(huán)境特點(diǎn)1．試管苗的生活環(huán)境組織培養(yǎng)中培育出來的苗通常稱試管苗或組培苗。組培苗在含有培養(yǎng)基組培瓶中生長，與外界環(huán)境自然隔離，形成了獨(dú)特的生態(tài)系統(tǒng)。這個生態(tài)系統(tǒng)與外界環(huán)境條件相比具有以下四大差異，即恒溫、高濕、弱光和無菌。這也是組培苗的環(huán)境。（1）恒溫組培苗培養(yǎng)---培養(yǎng)室進(jìn)行

培養(yǎng)室溫度采用空調(diào)，或者其他電腦操作可人工控溫系統(tǒng)。組培苗恒溫下生長

溫度控制在適合植物生長合適的溫度，一般控制在25±2℃，可以打破季節(jié)，溫差的影響，常年生長。

自然環(huán)境條件，溫度處于不斷變化之中，溫度的調(diào)節(jié)完全是由自然界太陽輻射的日輻射量決定的，溫差大

。季節(jié)差異，溫度也有較大的浮動。（2）高濕組培瓶內(nèi)的水分移動有兩條途徑:一是試管苗吸收的水分，從葉面氣孔蒸騰到培養(yǎng)瓶；二是培養(yǎng)基水分向外蒸發(fā)，而后水汽凝結(jié)又進(jìn)入培養(yǎng)基。培養(yǎng)瓶內(nèi)的水分循環(huán)，培養(yǎng)瓶內(nèi)空氣相對濕度接近于100%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于培養(yǎng)瓶外的空氣濕度。（3）弱光組織培養(yǎng)中的光更多來源于人工燈源與太陽光照強(qiáng)度相比，遠(yuǎn)小于太陽光直射，所以組培苗一般生長也較弱，經(jīng)受不了太陽光的直接照射，容易發(fā)生灼傷。（4）無菌試管苗所在環(huán)境的另一大特點(diǎn)是無菌，

不僅培養(yǎng)基無菌，而且試管苗也無菌。在移栽過程中試管苗要經(jīng)歷由無菌向有菌環(huán)境的轉(zhuǎn)換。面對有菌環(huán)境---組培苗抵抗力的問題

2．組培苗的特點(diǎn)恒溫、高濕、弱光和無菌的環(huán)境導(dǎo)致組培苗與自然苗在生理功能和形態(tài)結(jié)構(gòu)上存在差異，組培苗生理功能形態(tài)結(jié)構(gòu)對逆境的適應(yīng)和環(huán)境的抵抗能力比較差（1）葉片保護(hù)組織不發(fā)達(dá)。

試管苗葉表面角質(zhì)層薄或蠟質(zhì)層不發(fā)達(dá)，葉片沒有表皮毛，或僅有較少表皮毛，保護(hù)葉片，防止強(qiáng)光灼燒，保護(hù)功能較差。試管苗長期在高濕環(huán)境條件下生長，氣孔只開不閉，缺乏控制水分蒸發(fā)的調(diào)節(jié)功能，導(dǎo)致試管苗在馴化過程中以及移栽后葉片大量失水萎蔫。（2）莖的支撐能力較差

自然界木本植物木質(zhì)部發(fā)達(dá)，莖干直立堅(jiān)硬，草本植物表皮層有纖維細(xì)胞使莖稈堅(jiān)硬。

試管苗機(jī)械組織都發(fā)育不好，莖稈嫩而不堅(jiān)強(qiáng)，在缺水時(shí)容易萎蔫和倒伏。（3）根系不發(fā)達(dá)

組培苗的根系不發(fā)達(dá)，有些不容易生根的植物有時(shí)只能形成1-2條根，而且經(jīng)常沒有側(cè)根和根毛，或根毛少，無根毛的現(xiàn)象。

有些愈傷組織上產(chǎn)生的根沒有和維管束相連接，這種根基本上沒有吸收和運(yùn)輸水分和無機(jī)鹽的能力。（4）試管苗莖葉雖呈綠色，但葉綠體的光合作用較差。（5）對逆境的適應(yīng)和抵抗能力弱。自然苗：氣孔生理活性強(qiáng)，葉綠體光合性能好，根系發(fā)達(dá)，吸水力好，，起到保護(hù)作用。組培苗：氣孔生理活性差，氣孔不關(guān)閉，葉綠體光合作用差，莖支撐能力差，根系不發(fā)達(dá)，吸水能力差，有菌無菌的環(huán)境狀態(tài)，抵抗力。（二）試管苗的馴化1．馴化（煉苗）

組培苗在培養(yǎng)瓶中與溫室的條件差別很大，主要是培養(yǎng)瓶中的溫度恒定、濕度高、光照較弱，為了使組培苗適應(yīng)移栽后的環(huán)境并進(jìn)行自養(yǎng)，必須要有一個逐步鍛煉和適應(yīng)的過程，這個過程叫馴化或煉苗。（3）馴化的原則

馴化應(yīng)從溫度、濕度、光照及有無菌等環(huán)境要素進(jìn)行，從環(huán)境上逐漸貼合自然界狀態(tài)。

組培苗從組培瓶內(nèi)移到外界加強(qiáng)自然光，由異養(yǎng)變?yōu)樽责B(yǎng)，由無菌到適應(yīng)有菌，由恒溫、高濕、弱光向自然變溫、低濕、強(qiáng)光過渡。

馴化開始數(shù)天內(nèi)，應(yīng)和培養(yǎng)時(shí)的環(huán)境條件相似，馴化后期，則要與移栽的條件相似。（4）馴化的目的

提高組培苗對外界環(huán)境條件的適應(yīng)性、提高其光合作用的能力、促進(jìn)組培苗健壯、最終達(dá)到提高組培苗移栽成活率的目的。

（4）馴化方法

先放置自然光下閉瓶煉苗7-20天左右（2-3周），遮光度為50%-70%。先增加光照，（增加光照可以增加抵抗力），同時(shí)起到壯苗的作用（葉子深綠，春天葉子發(fā)紅）壯苗后的組培苗狀態(tài)。

移栽前開口1-3天，與外界環(huán)境相互交換，適應(yīng)自然環(huán)境溫濕度及有菌環(huán)境（葉片綠色加深，根系顏色白變黃褐色可以移栽）

優(yōu)點(diǎn)：抵抗力較強(qiáng)（培養(yǎng)基經(jīng)過陽光照射失水較多，微生物繁衍慢，組培苗經(jīng)馴化也起到壯苗效果，移栽更容易成活。

馴化成功的試管苗莖葉顏色加深。開瓶強(qiáng)光煉苗法：

將培養(yǎng)容器的蓋子打開，在自然光下進(jìn)行開瓶煉苗3-7天。

注意的問題：（開瓶煉苗分階段進(jìn)行:首先松蓋一兩天，然后部分開蓋一兩天，然后完全揭去蓋。）（

光照：正午強(qiáng)光或南方光照較強(qiáng)的地區(qū)應(yīng)該注意要采取遮陰措施，如用遮陰棚或溫室避免灼傷小苗）

（污染問題：開蓋培養(yǎng)不夠1周，一般不會引起含蔗糖培養(yǎng)基的污染問題)在試管苗馴化過程中其最大的障礙是濕度問題。試管苗葉片角質(zhì)層不發(fā)達(dá)，葉片通常沒有表皮毛，或僅有較少表皮毛。葉片上甚至出現(xiàn)了大量的水孔，此外，氣孔的數(shù)量、大小也往往超過普通苗。當(dāng)將它們直接移栽到自然環(huán)境中，試管苗蒸滕作用極大，失水率很高，非常容易死亡。所以馴化過程中要精心照看，加強(qiáng)水分管理，確保馴化成功。

2．移栽生根試管苗移栽的合適時(shí)期適合生根組培苗的標(biāo)準(zhǔn)：當(dāng)試管苗長出白色粗壯的小不定根3-4條時(shí)，根長約0.5-1cm，芽苗長2cm左右時(shí)，可以進(jìn)行試管苗的馴化、移栽。如果根生長很長而且變成黃褐色，說明根系已老化，移栽時(shí)則成活率降低。如果短時(shí)期移苗有困難，可以有計(jì)劃地降低培養(yǎng)室溫度，抑制根的生長，達(dá)到在合適時(shí)期同步移苗?？瞻着囵B(yǎng)基。（2）基質(zhì)的選擇

透氣性、保濕性和一定的肥力，一般可選用珍珠巖、蛭石等

組培移栽首選顆粒大，縫隙大的基質(zhì)珍珠巖---考慮不容易爛根（如果粘基質(zhì)澆水多，組培苗爛根）。其次蛭石

沙子比重大，移栽苗容易傷根，太陽曬吸熱，晚上涼，溫差大對組培苗培養(yǎng)不利（為了增加粘著力和一定的肥力可配合草炭土或腐殖土）珍珠巖、蛭石、草炭1：1：1（3）滅菌

用塑料裝好高壓滅菌鍋滅菌20分鐘-30分鐘備用或

噴灑高錳酸鉀或者多菌靈溶液，噴灑全面。噴后用塑料覆蓋20-30分鐘。①河砂河砂分為粗砂、細(xì)砂兩種類型。粗砂即平常所說的河砂，其顆粒直徑為1-2mm。細(xì)砂即通常所說的面砂，其顆粒直徑為0．1-0．2mm。河砂的特點(diǎn)是排水性強(qiáng)，但保水蓄肥能力較差，一般不單獨(dú)用來直接栽種試管苗。②草炭土草炭土是由沉積在沼澤中的植物殘骸經(jīng)過長時(shí)間的腐爛所形成，其保水性好，蓄肥能力強(qiáng)，呈中性或微酸性反應(yīng)，但通常不能單獨(dú)用來栽種試管苗，宜與河砂等種類相互混合配成盆土而加以使用。③腐殖土腐殖土是由植物落葉經(jīng)腐爛所形成。一種是自然形成，一種是人為造成，人工制造時(shí)可將秋季的落葉收集起來，然后埋人坑中，灌水壓實(shí)令其腐爛。第二年春季將其取出置于空氣中，在經(jīng)常噴水保濕的條件下使其風(fēng)化，然后過篩即可獲得。腐葉上含有大量的礦質(zhì)營養(yǎng)、有機(jī)物質(zhì)，它通常不能單獨(dú)使用。摻有腐殖土的栽培基質(zhì)有助于植株發(fā)根。（3）容器選擇栽培容器可用6×6cm-10×10cm的軟塑料缽，也可用育苗盤。前者占地大，耗用大量基質(zhì)，但幼苗不用再移，后者需要二次移苗，但省空間、省基質(zhì)。也可在事先做好的苗床上直接進(jìn)行移栽。（4）移栽方法

取苗：

從瓶中取苗，動作要輕，不能用力過猛，防止扯斷苗根。

如果培養(yǎng)基太干燥，可以先用清水浸泡一段時(shí)間再取苗。

清洗：一只手輕輕捏住苗，另一只手輕揉苗根，將附于其上的瓊脂塊和松散的愈傷組織清理掉（20℃左右的溫水洗苗），放入另一盆溫水中再清洗一次，將培養(yǎng)基徹底洗掉。如果根過長，可以進(jìn)行適當(dāng)裁剪留2-3厘米即可（也有的操作取出試管苗后在20℃的溫水浸泡10分鐘，換水兩次，清洗。）清洗一定要干凈，否則殘留的培養(yǎng)基會導(dǎo)致霉菌污染。

組培苗滅菌：溫水涮洗干凈之后，放入500-800倍多菌靈水溶液浸泡10-15分鐘。

移栽：軟塑料缽或育苗盤，將消毒后珍珠巖、蛭石放在苗盤內(nèi)，厚度4-6cm,用水淋透，每穴種一棵，于中心位置，用一個筷子粗的竹簽先挖一小坑，種后輕輕鎮(zhèn)壓；不要折根，將清洗完的組培苗栽植在培養(yǎng)基質(zhì)，用水噴淋后放置在拱棚內(nèi)2-3周培養(yǎng)。栽植深度、間距要求：

深度：葉片不接觸基質(zhì)。

邊栽邊覆蓋基質(zhì)，成行栽植，而后輕輕鎮(zhèn)壓。

株距以苗不相互接觸為宜，行距以為株距的2-3倍。種好后用噴霧器噴水，沖掉葉面上沾著的基質(zhì)。栽后澆透水不要折根另一種手法培養(yǎng)生根苗——達(dá)到移栽標(biāo)準(zhǔn)后-打開培養(yǎng)瓶注入少量自來水-半遮光3-5天-取出試管苗-20度溫水浸泡（目的洗去干粘在苗的瓊脂及培養(yǎng)基）---清洗干凈—移栽到經(jīng)過消毒的基質(zhì)中，保持溫度水分，長出2-3片新葉時(shí)可以移栽田間或噴薄（三）移栽后幼苗的管理1．保持小苗的水分供需平衡。（1）在移栽后5-7d內(nèi)，應(yīng)給予較高的空氣濕度條件，使葉面的水分蒸發(fā)減少，盡量接近培養(yǎng)瓶的條件，讓小苗始終保持挺拔的狀態(tài)。（2）營養(yǎng)缽的培養(yǎng)基質(zhì)澆透水，搭設(shè)小拱棚，以減少水分的蒸發(fā)，并且初期要常噴霧處理，保持拱棚薄膜上有水珠出現(xiàn)。

（3）5-7d后，發(fā)現(xiàn)小苗有生長趨勢，可逐漸降低濕度，減少噴水次數(shù)，將拱棚兩端打開通風(fēng)，使小苗適應(yīng)濕度較小的條件。

約15d后揭去拱棚的薄膜，并給予水分控制，逐漸減少澆水，促進(jìn)小苗長得粗壯。2．防止菌類滋生?；|(zhì)進(jìn)行高壓滅菌或烘烤滅菌或高錳酸鉀攪拌。可以適當(dāng)使用一定濃度的殺菌劑以便有效地保護(hù)幼苗，如多菌靈、托布津，濃度800-1000倍，噴藥宜7-10d一次。移苗時(shí)盡量少傷苗，傷口過多，根損傷過多，微生物進(jìn)入，菌類滋生，都是造成死苗的原因。

3．一定的溫度、光條件。適宜的生根溫度是18-20度.冬春季地溫較低時(shí)，可用電熱線來加溫。溫度過低會使幼苗生長遲緩，或不易成活。溫度過高會使水分蒸發(fā)，從而使水分平衡受到破壞，并會促使菌類滋生。

初期可用較弱的光照，在小拱棚上加蓋遮陽網(wǎng)或報(bào)紙等，以防陽光灼傷小苗和增加水分的蒸發(fā)。

保持溫室內(nèi)每天通風(fēng)3、4h。當(dāng)小植株有了新的生長時(shí)，逐漸加強(qiáng)光照，后期可直接利用自然光照。促進(jìn)光合產(chǎn)物的積累，增強(qiáng)抗性，促其成活。4．保持基質(zhì)適當(dāng)?shù)耐庑?。要選擇適當(dāng)?shù)念w粒狀基質(zhì)，保證良好的通氣作用。在管理過程中不要澆水過多，過多的水應(yīng)迅速瀝除，以利根系呼吸。

栽后管理最重要的工作保濕：基質(zhì)顆粒大，透水快，透氣好空氣環(huán)境小拱棚或密閉塑料膜保濕加噴霧保濕結(jié)合。保證不萎蔫不失水（四）移栽常見問題移栽是整個培養(yǎng)過程的最后一個階段，也是很重要的階段。如果不精心，細(xì)致的進(jìn)行移栽及栽后管理，組培苗生產(chǎn)將前功盡棄。思考為什么要對植物組織培養(yǎng)苗進(jìn)行馴化？植物組織培養(yǎng)苗具有哪些特點(diǎn)？如何對植物組織培養(yǎng)苗進(jìn)行馴化？植物組織培養(yǎng)苗移栽過程中要注意哪些問題？在溫室培養(yǎng)一段時(shí)間后，幼苗完全適應(yīng)自然環(huán)境