DB51T 1079-2010 飼料中嘔吐毒素的測(cè)定 高效液相色譜法

備案號(hào)：28169-2010DB51DB51/T1079—2010飼料中嘔吐毒素的測(cè)定2010-06-01發(fā)布2010-07-01實(shí)施I前言 12規(guī)范性引用文件 1 14試劑和溶液 15儀器與設(shè)備 1 27分析步驟 28結(jié)果計(jì)算 29精密度 2附錄A(資料性附錄) 3DB51/T1079-2010本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A為資料性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省畜牧食品局提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省飼料工作總站負(fù)責(zé)起草。本標(biāo)準(zhǔn)起草人：柏凡、張靜、李云、馮婭、魏敏、趙立軍。1DB51/T1079-2010飼料中嘔吐毒素的測(cè)定高效液相色譜法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)適用于配合飼料、濃縮飼料及飼料原料的測(cè)定。本標(biāo)準(zhǔn)中檢出限為0.3mg/kg。下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T14699.1飼料采樣GB/T20195動(dòng)物飼料試樣的制備3原理測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法計(jì)算嘔吐毒素含量。4試劑和溶液4.1乙腈：色譜純。4.3聚乙二醇8000(PEG8000)。4.4嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)品：含量大于98%。4.4.1標(biāo)準(zhǔn)貯備液：精密稱取10mg嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)品，用乙腈溶解、定容至100mL,此貯備液濃100μg/mL,置于冰箱中2℃~8℃保存，有效期6個(gè)月。1.0μg/mL,2.0μg/mL,5.0μg/mL,10.0μg/mL。置于冰箱中2℃~8℃保存，有效期1個(gè)月。2DB51/T1079-20106試樣制備按GB/T14699.1規(guī)定采集試樣后，按GB/T20195規(guī)定，選取具有代表性的實(shí)驗(yàn)室樣品1kg,四分法縮減分取200g左右，粉碎過(guò)1mm孔篩，混勻裝入磨口瓶中備用。7分析步驟7.1試樣溶液的制備7.1.1提取稱取25g試樣(精確至0.01g)于錐形瓶中，加入5g聚乙二醇8000(4.3),100mL水，振蕩提取30min,離心，取上清液過(guò)濾，濾液待凈化(濃度較高時(shí)濾液應(yīng)用水稀釋后待凈化，以免小柱超載)。將免疫親和柱中緩沖液排出，用1mL水過(guò)柱，準(zhǔn)確吸取2.0mL提取液以1滴/秒的速度通過(guò)免疫親和柱，用5mL水淋洗，抽干柱子，用2mL甲醇(4.2)洗脫。洗脫液60℃氮?dú)獯蹈?，?zhǔn)確加入流動(dòng)相(7.2.3)500μL,渦旋30s,過(guò)0.45μm濾膜，上機(jī)測(cè)定。7.2色譜條件7.2.2柱溫：30℃。7.2.3。7.2.5檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器(或二極管陣列檢測(cè)器),檢測(cè)波長(zhǎng)220nm。按上述色譜條件，分別將標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣溶液上級(jí)測(cè)定，按照保留時(shí)間進(jìn)行定性，單點(diǎn)或多點(diǎn)校正外標(biāo)法定量。8結(jié)果計(jì)算試樣中嘔吐毒素的含量X,以質(zhì)量分?jǐn)?shù)毫克每千克(mg/kg)表示，單點(diǎn)校正按式(1)計(jì)算：V——上機(jī)定容體積，單位為毫升(mL);As——嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)的色譜峰面積；A——試樣溶液對(duì)應(yīng)的色譜峰面積；Cs——嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL);m——試樣質(zhì)量，單位為克(g);n——稀釋倍數(shù)。結(jié)