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文檔簡介
第三章:氨基酸、肽類、蛋白質(zhì)化學一、填充題組成蛋白質(zhì)氨基酸的結(jié)構(gòu)通式是( )。具有紫外吸收能力的氨基酸有( )、( )和( ),其中以( )的吸收最強。脯氨酸是( )氨基酸,與茚三酮反應生成( )色物質(zhì)。( )和( )是相對分子質(zhì)量小且不含硫的氨基酸,在一個肽鏈折疊的蛋白質(zhì)中它能形成內(nèi)部氫鍵。5范斯萊克(VanSlyke)法測定氨基氮主要利用( )與( )作用生成TOC\o"1-5"\h\z( )。實驗室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基與中性甲醛反應,然后用堿來滴定( )上放出的( )。賴氨酸帶三個解離基團,它們的pK分別為2.18,8.95及10.53。賴氨酸的等電點為( )。肽鏈的N末端可以用( )法、( )法、( )法和( )法測定,而( )法和( )法是測定C末端氨基酸最常用的方法。 )。9蛋白質(zhì)分子的a-螺旋結(jié)構(gòu),每圈螺旋包含( )個氨基酸殘基,螺距為( )nm,每個氨基酸殘基沿軸上升高度為( )nm。天然蛋白質(zhì)分子中的a-螺旋大多屬于( )手螺旋。二、是非題某化合物和茚三酮反應呈藍紫色,因而可以斷定它是氨基酸或是蛋白質(zhì)。()亮氨酸疏水性比纈氨酸強。()氨基酸在水溶液或在晶體狀態(tài)時都以兩性離子形式存在。()TOC\o"1-5"\h\z4合成的多聚谷氨酸在pH7時,其Y-羧基電離為-COO-,由于靜電相斥,分子較松散,在pH4時并不電離,容易形成螺旋結(jié)構(gòu)。( )5溶液的pH可以影響氨基酸的pI值。( )組氨酸是人體的一種半必需氨基酸。( )蛋白質(zhì)分子中個別氨基酸的取代未必會引起蛋白質(zhì)活性的改變。()二硫鍵和蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)密切有關,因此沒有二硫鍵的蛋白質(zhì)就沒有三級結(jié)構(gòu)。()凝膠過濾法可用于測定蛋白質(zhì)的分子量,分子量小的蛋白質(zhì)先流出柱,分子量大的后流出柱。( )10蛋白質(zhì)在小于等電點的pH溶液中,向陽極移動,而在大于等電點的pH溶液中,將向陰極移動。()三、選擇題1下列哪種氨基酸溶液不能引起偏振光的旋轉(zhuǎn)()A丙氨酸B甘氨酸C亮氨酸D絲氨酸2下列氨基酸在生理pH范圍內(nèi)緩沖能量最大的是( )AGlyBHisCCysDAspTOC\o"1-5"\h\z分子中含有兩個不對稱碳原子的氨基酸是( )AProBTyrCThrDArg氨基酸不具有的化學反應是( )A雙縮脲反應B茚三酮反應CDNFB反應DPITC反應5用紙層析分離丙氨酸、亮氨酸和賴氨酸的混合物,則它們之間Rf的關系應為( )AAla>Leu>Lys BLys>Ala>LeuCLeu>Ala>Lys DLeu>Lys>Ala7下列哪種氨基酸有米倫(Millon)反應( )ATrpBTyrCPheDArg8Pauly試劑是將對氨基苯磺酸的重氮化合物噴灑到濾紙上,定性檢測蛋白質(zhì)的試劑,在蛋白質(zhì)的地方顯橘紅色。它的生色反應是發(fā)生在蛋白質(zhì)內(nèi)的()A色氨酸的吲哚環(huán) B半胱氨酸的巰基C組氨酸的a氨基 D酪氨酸的酚羥基9在組蛋白的組氨酸側(cè)鏈上進行()以調(diào)節(jié)其生物功能。A磷酸化B糖基化C乙?;疍羥基化11如果要測定一個小肽的氨基酸順序,下列試劑中選擇一個你認為最合適的()A茚三酮BCNBr C胰蛋白酶D異硫氰酸苯酯蛋白質(zhì)可與堿共熱水解,雖然這個過程會破壞一些氨基酸,但它卻被常用來定量蛋白質(zhì)的( )ASer BCys CThrDTrp在pH7的水溶液里,在典型的球狀蛋白分子中,處于分子的內(nèi)部的氨基酸殘基經(jīng)常是()AGluBPheCThrDAsn16胰蛋白酶專一水解多肽鍵中()A堿性殘基N端B酸性殘基N端C堿性殘基C端D酸性殘基C端17羧肽酶C專門水解C端倒數(shù)第二位是哪個氨基酸形成的肽鏈( )AArgBLys CCys DPro下列蛋白質(zhì)中,()不是糖蛋白A免疫球蛋白 B溶菌酶C轉(zhuǎn)鐵蛋白 D膠原蛋白血紅蛋白的氧合曲線向右移動是由于()A02分壓的減少BCO2分壓的減少CC02分壓的增加 DpH值的增加SDS凝膠電泳測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量是根據(jù)各種蛋白質(zhì)()A在一定pH值下所帶凈電荷的不同B分子大小不同 C分子極性不同D溶解度不同四、問答及計算題1試命名下列氨基酸(均存在于蛋白質(zhì)中)(1)用強酸或強堿處理能轉(zhuǎn)變成存在于蛋白質(zhì)中的另一種氨基酸。(2)空氣中即可氧化為存在于蛋白質(zhì)中的另一種氨基酸。(3)能在279nm強烈吸收紫外光,易為強酸所破壞。(4)在pH6?pH8內(nèi)有緩沖能力。
(5)與茚三酮反應生成一種黃色產(chǎn)物。(6)其水溶液無旋光性。2分析下列4個肽的混合物,在Dowex-1(一種陰離子交換樹脂)的離子交換柱上以從pH10f1.0連續(xù)變化的緩沖系統(tǒng)作洗脫,試說出每種肽洗脫的相對次序。A賴-甘-丙-甘 B賴-甘-丙-谷C谷-甘-丙-谷 D組-甘-丙-谷3某一條肽經(jīng)酸水解組成分析含5種氨基酸,其N端非常容易環(huán)化。經(jīng)CNBr處理后得一游離堿性氨基酸,Pauly反應陽性。若用胰蛋白酶作用則得兩個肽段;其一為坂口反應陽性,另一在280nm有強的光吸收,并呈Millon氏陽性反應。求此肽段氨基酸排列順序,并指出它的等電點應該是大于、等于或小于pH7。4蛋白質(zhì)化學中常用的試劑有下列一些:CNBr,尿素,£-巰基乙醇,胰蛋白酶,過甲酸,丹磺酰氯,6mol/LHCl,茚三酮,異硫氰酸苯酯和胰凝乳蛋白酶等。為完成下列各項試驗,請回答每項的最適試劑是什么?(1)一個小肽的氨基酸順序的測定(2)多肽鏈的氨基末端的測定(3)一個沒有二硫鍵的蛋白質(zhì)的可逆變性(4)芳香族氨基酸殘基的羧基一側(cè)肽鍵的水解(5)甲硫氨酸的羧基一側(cè)肽鍵的裂解(6)通過氧化途徑將二硫鍵打開參考答案二、是非題錯2對3對4對5錯6對7對8錯9錯10錯11錯12錯13對14對15錯16對17錯18對19錯20對21錯22錯23錯24對25對26錯27對28對29錯30錯三、選擇題TOC\o"1-5"\h\z1B2B3C4A5C6C7B8D9A10C 11D 12A 13D14B 15C 16C 17D 18B 19C 20B 21B 22D 23D 24A25C 26D 27A28B 29C 30A 31B 32A 33D 34A 35D四、問答及計算題1(1)谷氨酰胺或天冬酰胺(2)半胱氨酸(3)色氨酸(4)組氨酸(5)脯氨酸(6)甘氨酸4個肽被洗脫下來的先合順序依次為AfBfDfC。該五肽的順序為:谷氨酰-精氨酰-酪氨酰-甲硫氨酰-組氨酰。此肽段的等電點大于7。(1)異硫氰酸苯酯(2)丹磺酰氯(3)尿素(4)胰凝乳蛋白酶(5)CNBr(6)過甲酸。第三章:酶化學一、填充題1全酶是由()和()組成,在催化反應時,二者所起的作用不1全酶是由()和()組成,在催化反應時,二者所起的作用不同,其中()決定酶的專一性和高效率,()起傳遞電子、原子或化學基團的作用。2酶活性中心往往處于酶分子表面的()中,形成()區(qū),從而使酶與底物之間的作用加強。3T.R.Cech和同,其中()決定酶的專一性和高效率,()起傳遞電子、原子或化學基團的作用。2酶活性中心往往處于酶分子表面的()中,形成()區(qū),從而使酶與底物之間的作用加強。3T.R.Cech和S.Altman因各自發(fā)現(xiàn)了()而共同獲得1989年的諾貝爾化學獎。4金屬離子對酶的激活作用有兩種,一是作為(),二是作為)。5乳酸脫氫酶有()種( )個亞基組成。體內(nèi)有( )種乳酸脫氫酶的同工酶,在臨床診斷上有應用價值。6胰蛋白酶的專一性就是在( )殘基右側(cè)的肽鍵上水解;羧肽酶B專一性地從蛋白質(zhì)的羧羰切下( )氨基酸。7同一種酶有n個底物,就有( )個Km值,其中Km值最( )的底物,便為該酶的最適底物。8測定酶活力時,底物濃度應( ),反應溫度應選在( ),反應pH選在( ),反應時間應在反應的( )期進行。9表示酶量的多少常用( )表示。二、是非題與非酶反應相比,酶反應能使更多的底物變成為產(chǎn)物。()酶影響它怕催化反應的平衡的到達時間。()輔基與輔酶的區(qū)別只在于它們與蛋白質(zhì)結(jié)合的牢固程度不同,并無嚴格的界限。()氧化酶都含有細胞色素。()5酶反應最適pH只取決于酶蛋白本身結(jié)構(gòu)。( )在極低底物濃度時,酶促反應初速度與底物濃度成正比。()做為輔因子的金屬離子,一般并不參與酶活性中心的形成。()底物與酶的活性中心靠共價鍵結(jié)合,以提高催化效率。()測定反應的最適溫度時,先將酶在不同溫度下保溫一段時間,然后在30℃下測定酶活性。()Km值是酶的一種特征性常數(shù),有的酶雖可以有幾種底物,但其Km值都是固定不變的。三、選擇題1在測定酶活力是,用下列哪種方法處理酶和底物才合理()A其中一種用緩沖液配制即可B分別用緩沖液配制,然后混合進行反應C先混合,然后保溫進行反應D分別用緩沖液配制,再預保溫兩者,最后混合進行反應假定一種酶只有當某一特定的組氨酸殘基側(cè)鏈未被質(zhì)子化時,酶分子才具有活性,降低pH對于該酶會發(fā)生下列哪一種類型的抑制作用。()A反競爭性B非競爭性 C競爭性D混合型酶的純粹競爭性抑制具有下列哪種動力學效應()AVmax不變,Km增大BVmax不變,Km減少CVmax增大,Km減小DVmax增大,Km不變酶與底物分子間的關系可以恰當?shù)乇硎龀桑ǎ〢一種臨時性結(jié)合 B通過共價鍵的一種穩(wěn)定結(jié)合C酶在其中發(fā)生永久性改變的一種結(jié)合D隨機的非互補結(jié)合5已知胰凝乳蛋白酶的轉(zhuǎn)換數(shù)是100s-i,DNA聚合酶是15s-i。下列說法正確的是()A胰凝乳蛋白酶的底物結(jié)合常數(shù)高于DNA聚合酶B胰凝乳蛋白酶反應速度比DNA聚合酶反應速度更大C在一定的酶濃度和飽和底物水平下胰凝乳蛋白酶反應速度比DNA聚合酶在相同條件下更低D在飽和底物水平下,胰凝乳蛋白酶的反應速度大約是DNA聚合酶反應速度的6.7倍四、問答及計算題1何為酶的活力和比活力?測定酶活力時應注意什么?為什么測定酶活力時以測定初速度為宜,并且底物濃度遠遠大于酶濃度?2已糖激酶溶液在45℃,12min內(nèi)會丟失50%活性。但是當有大量底物葡萄糖存在時,該酶在45℃只丟失3%活性。試解釋此現(xiàn)象。9甘油醛-3-磷酸脫氫酶,相對分子質(zhì)量為4萬,由4個相同亞基組成,每個亞基上有一個活性位點,在最適條件下,5ug純酶制品每分鐘可以催化2.8umol甘油醛-3-磷酸轉(zhuǎn)化為甘油酸-3-磷酸。請計算酶的比活力和單個活性位點的轉(zhuǎn)換數(shù)。10a-糜蛋白酶(Mr24000)可以水解苯甲酰-L-酪氨酸乙酯。比活為45.0umol/min/mg酶。已知。-糜蛋白酶只有一個活性位點。求轉(zhuǎn)換數(shù)。11(1)對于一個遵循米氏動力學的酶而言,當[S]=Km時,若U=35umol/min,Vmax是多少umol/min?(2)當[S]=2X10-5mol/L,U=40umol/min,這個酶的Km是多少?(3)若I表示競爭性抑制劑,KI=4X10-5mol/L,當[S]=3X10-2mol/L和[I]=3X10-5mol/L時,U是多少?12在不同底物濃度的反應體系中,分別測有無抑制劑存在時的u,數(shù)據(jù)如下:[S]無I有I(2.2X10-4mol/L)mol/L(X10-4)v(^mol/min)v(Nmol/min)1.028171.536232.043295.065507.57461求有無抑制劑存在時的Vmax和Km(K'm),并判斷這種抑制劑是什么類型的抑制劑。13稱取25mg蛋白酶粉配制成25mL酶溶液,從中取出0.1mL酶液,以酪蛋白為底物,用Folin-酚比色法測定酶活力,得各每小時產(chǎn)生1500ug酪氨酸。另取2mL酶液,用凱氏定氮法測得蛋白氮為0.2mg。若以每分鐘產(chǎn)生1ug酪氨酸的酶量為1個活力單位計算,根據(jù)以上數(shù)據(jù),求出:(1)1mL酶液中所含蛋白質(zhì)量及活力單位;(2)比活力;(3)1g酶制劑的總蛋白量及總活力。參考答案一、填充題1酶蛋白輔酶因子酶蛋白輔酶因子2凹穴疏水3核酶(具有催化作用的RNA)4酶的輔助因子直接的激活劑52 4 5 6堿性氨基酸堿性7n小8遠遠超過酶濃度最適溫度最適初9酶的活力單位數(shù)108111絕對立體121/Km1/Vmax13亞基解離14正碳離子五價磷過渡態(tài)ZM+-活化水 四面體肽鍵氧陰離子活化水15無酶時不反應 被靶酶專一性激活 與靶酶反應必須比解離更為迅速,即K1>>Kdis16最慢的第一步反應17酶活性中心18別構(gòu)酶共價調(diào)節(jié)酶齊變序變19絲氨酸20蛋白激酶蛋白磷酸酯酶21糖基化乙?;痀-羧基化 ADP-核糖基化 22天冬氨酸組氨酸23腺苷酰化脫腺苷?;?4比活力總活力25增大變小二、是非題1錯2對3對4錯5錯6對7錯8錯9錯10錯11對12對13錯14對15錯16錯17錯18錯19對20對21對22錯23對24錯25對26對27錯28錯29錯30對三、選擇題1D2B 3A4A5D6D7D8B9A10C11C12B13A14B15A16B17B18B19C20D四、問答及計算題1酶活力指酶催化某一化學反應的能力,可以用一定條件下所催化的化學反應的反應速度來表示。酶比活力指一定量的酶,例如1mg或1g等,所具有的總的活力。由于酶催化的反應只在反應初始階段具有恒定的速率,因此測定酶的活力以測定初速度為宜。由于酶的活性受到測定環(huán)境如底物濃度、pH、溫度、抑制劑、激活劑等影響,因此酶活力測定要選擇最適條件,包括最適pH、最適溫度、最適底物濃度、最適離子強度等。由于酶活力與酶量是成正比的,為保證所有的酶都能結(jié)合底物,參與反應,底物濃度要遠遠大于酶濃度。2已糖激酶能催化葡萄糖與ATP反應,使葡萄糖磷酸化。在無ATP時,葡萄糖與已糖激酶結(jié)合,能穩(wěn)定游離酶分子,抵抗酶變性。由于無ATP,不會發(fā)生上述反應。比活力=2.8U/5X10-3mg=560U/mg轉(zhuǎn)換數(shù)/活性位點=2.8umol/min:(5ug/40000ug/umolX4)=5600/min=93.3/s轉(zhuǎn)換數(shù)=45.0X10-6X1000X24000=1080/min答:(1)Vmax=70umol/min(2)Km=1.5X10-5mol/L(3)因為,[S]>>Km,[I],所以,U=Vmax=70umol/min12答:先分別求出1/[S],1/V,1/山,作1/Vs1/[S],1/V/s1/[S]圖,從圖中求出:1/V=0.01min/^mol V=100Nmol/min-1/Km=-3.7X103L/mol Km=2.7X10-4mol/L-1/K'm=-2.0X103L/mol K'm=5X10-4mol/L因為Vmax不變,Km增大,所以是競爭性可逆抑制。13答:(1))0.625mg蛋白質(zhì);250U(2)400U/mg蛋白質(zhì)(3)0.625g;2.5X105U第五章:核酸化學
一、填充題1、核酸完全的水解產(chǎn)物是()、()和()。其中( )又可分為()堿和()堿。2、體內(nèi)的嘌呤主要有()和();嘧啶堿主要有()、( )和( )。某些RNA分子中還含有微量的其它堿基,稱為()。3、嘌呤環(huán)上的第()位氮原子與戊糖的第()位碳原子相連形成())。);dCDP( )。)。);dCDP( )。)的形式存在,但也可局部)結(jié)構(gòu)。)環(huán),( )環(huán)),反密碼環(huán)的功)。4、體內(nèi)兩種主要的環(huán)核苷酸是( )和(5、寫出下列核苷酸符號的中文名稱:ATP(6、RNA的二級結(jié)構(gòu)大多數(shù)是以單股(盤曲形成( )結(jié)構(gòu),典型的tRNA結(jié)構(gòu)是(7、tRNA的三葉草型結(jié)構(gòu)中有( )環(huán),(及( )環(huán),還有( )。8、tRNA的三葉草型結(jié)構(gòu)中,其中氨基酸臂的功能是(能是( )。9、其中一股鏈為5'ATGCC3’的雙螺旋DNA的互補鏈順序是(二、是非題1稀有堿基是指細胞中含量很少的游離嘌呤或嘧啶。()2如果DNA樣品A的Tm低于DNA樣品B的Tm,那么樣品A含有的A-T堿基對高于樣品B。( ) m m3由于DNA是多陰離子,所以它的熔點隨鹽物質(zhì)質(zhì)量濃度增加而增加。( )4超速離心測定DNA相對分子質(zhì)量時待測DNA溶液應具有較高濃度。( )5“荷載的"tRNA指結(jié)合有氨基酸的tRNA。( )6包括核糖體在內(nèi)的所有RNP,蛋白質(zhì)是其主要的功能成分,核酸則作為結(jié)構(gòu)成分。( )7用堿水解核酸,可以得到純的3'-核苷酸的混合物。( )8對于提純的DNA樣品,測得OD260/OD280VL8,則說明樣品中有蛋白質(zhì)殘留。( )9真核生物成熟mRNA的兩端均帶有游離的3'-OH。( )10rRNA在蛋白質(zhì)合成中只起到裝配者作用,而tRNA不但具有攜帶氨酸功能并有解譯作用。三、選擇題1、自然界游離核苷酸中,磷酸最常見是位于()A戊糖的C-5'上 B戊糖的C-2’上C戊糖的C-3'上 D戊糖的C-2'和C-5’上TOC\o"1-5"\h\z2、可用于測量生物樣品中核酸含量的元素是( )A碳B氫C氧 D磷3、下列哪種堿基只存在于RNA而不存在于DNA( )A尿嘧啶B腺嘌呤C胞嘧啶D胸腺嘧啶核酸中核苷酸之間的連接方式是()A2’,3’磷酸二酯鍵 B糖苷鍵C2’,5’磷酸二酯鍵 D3’,5’磷酸二酯鍵核酸對紫外線的最大吸收峰在哪一波長附近()A280nm B260nm
C200nm D340nmTOC\o"1-5"\h\z6、DNA變性是指( )A分子中磷酸二酯鍵斷裂 B多核苷酸鏈解聚CDNA分子由超螺旋一雙鏈雙螺旋 D互補堿基之間氫鍵斷裂7、DNATm值較高是由于下列哪組核苷酸含量較高所致( )AG+A BC+GCA+T DC+T8某DNA分子中腺嘌呤的含量為15%,則胞嘧啶的含量應為( )A15% B30% C40%D35%9、寡聚dT-纖維素柱層析用于( )。A從總DNA中分離純化質(zhì)粒DNAB從總核蛋白中分離出DNPC從總RNA中純化mRNAD除去雜蛋白10、雙鏈DNA熱變性后( )A黏度下降B沉降系數(shù)下降 C浮力密度下降 D紫外吸收下降四、問答題1DNA的Walson-Crick雙螺旋結(jié)構(gòu)模型要點是什么?DNA在純水室溫下放置時,為什么線狀雙鏈DNA會分離成它的組成鏈?預測所給樣品各組成部分的相對遷移速度或相對沉降位置.(1)瓊脂糖凝膠電泳分離某質(zhì)粒DNA的環(huán)狀、開環(huán)形、線形和變性無規(guī)則線團的混合物。(2)氯化銫密度梯度離心分離長度相同的兩種DNA的混合物,A來自一種嗜熱菌,B來自大腸桿菌。4下列哪些物質(zhì)能降低雙鏈DNA的Tm值?并解釋它們的作用方式。SSB;核組蛋白;氯化鈉;甲酰胺;堿5某細菌DNA相對分子質(zhì)量為4.0X108,求(1)此DNA分子長度;(2)此DNA分子的體積;(3)此DNA分子含多少個螺旋?6某DNA分子的浮力密度是1.699g/cm3,求其含(G-C)%?7試用酶學方法來區(qū)別:(1)單鏈DNA和雙鏈DNA;(2)線狀DNA和環(huán)狀DNA參考答案一、填充題1磷酸腺嘌呤91CAMP含氮堿鳥嘌呤糖苷鍵cGMP1磷酸腺嘌呤91CAMP含氮堿鳥嘌呤糖苷鍵cGMP三磷酸腺苷多核苷酸鏈二氫尿嘧啶與氨基酸結(jié)合戊糖含氮堿胞嘧啶尿嘧啶嘌呤核苷脫氧二磷酸胞苷雙螺旋三葉草反密碼TpC額外辨認密碼子嘌呤嘧啶胸腺嘧啶稀有堿基氨基酸臂9、5’GGCAT3’10、連接核糖與磷酸、連接兩
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