2024年滬科版選修3生物上冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2024年滬科版選修3生物上冊月考試卷88考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、關于哺乳動物胚胎發(fā)育的說法正確的是A.卵裂期細胞進行了細胞分裂和分化B.胚胎總體積隨分裂次數(shù)增加而不斷增大C.囊胚的滋養(yǎng)層細胞具有發(fā)育全能性D.囊胚腔先于原腸腔出現(xiàn)2、科學家通過基因工程的方法，能使大腸桿菌產(chǎn)生人的胰島素。以下敘述錯誤的是（）A.導入大腸桿菌的目的基因不一定能成功表達B.目的基因的檢測與表達過程中沒有發(fā)生堿基互補配對C.DNA連接酶和限制性核酸內(nèi)切酶都是構建重組質粒必需的工具酶D.可用含抗生素的培養(yǎng)基檢測大腸桿菌中是否導入了重組質粒3、如圖表示利用農(nóng)桿菌轉化法獲得某種轉基因植物的部分操作步驟。以下說法錯誤的是（）

A.利用含有四環(huán)素的培養(yǎng)基可將含Ⅱ的細菌篩選出來B.⑥可與多個核糖體結合，可翻譯出一種多個蛋白質C.Ⅲ是大腸桿菌，通過步驟③將目的基因導入植株D.①過程的完成需要限制酶和DNA連接酶的參與4、下列有關酶的敘述，正確的是A.酶的基本組成單位是氨基酸或脫氧核糖核苷酸B.酶通過降低化學反應的活化能和為反應物供能來提高化學反應速率C.在動物細胞培奍中，胰蛋白酶或膠原蛋白酶可將組織分散成單個細胞D.在PCR中，加入DNA連接酶可連接兩條DNA單鏈中的氫鍵，使雙鏈延伸5、某同學在學習“細胞工程”時，列表比較了動植物細胞工程的有關內(nèi)容，你認為有幾處不正確（）。植物細胞工程動物細胞工程技術手段植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交等動物細胞培養(yǎng)和融合等特殊處理酶解法去除細胞壁胃蛋白酶處理得到細胞懸浮液融合方法物理方法、化學方法、生物方法物理方法、化學方法和生物方法典型應用無病毒植物的培育、人工種子、種間植物雜交等單克隆抗體的制備等培養(yǎng)基區(qū)別所用的糖必須為葡萄糖所用的糖為葡萄糖且動物血清不可缺少

A.0B.1C.2D.36、關于胚胎干細胞的應用敘述錯誤的是A.可以用于治療由于細胞壞死、退化或功能異常引起的疾病B.在體外誘導分化可培育出人造組織器官C.是研究體外細胞分化的理想材料D.不能用于治療糖尿病、肝衰竭等疾病評卷人得分二、多選題(共5題，共10分)7、我國科學家成功地用iPS細胞克隆出了活體小鼠，部分流程如下圖所示，其中Kdm4d為組蛋白去甲基化酶，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑。下列敘述正確的是（）

A.過程①中小分子化合物誘導成纖維細胞突變?yōu)閕PS細胞B.過程②中的卵母細胞需要在體外培養(yǎng)到MⅡ期再除去細胞核C.過程③中可使用電融合法誘導兩細胞融合，進而形成重構胚D.組蛋白去甲基化和脫乙酰化可能有利于重構胚后續(xù)的胚胎發(fā)育8、如圖為雜交瘤細胞制備示意圖。下列敘述正確的是（）

A.骨髓瘤細胞和免疫B細胞可用仙臺病毒誘導融合B.骨髓瘤細胞在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常增殖C.免疫B細胞的種類不唯一所以雜交瘤細胞仍需進一步篩選D.篩選出的雜交瘤細胞體外培養(yǎng)時需添加抗生素防止真菌污染9、下列關于生物技術的敘述，不正確的是（）A.煙草葉片可離體培養(yǎng)產(chǎn)生新個體，小鼠雜交瘤細胞可離體培養(yǎng)增殖B.動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒C.目的基因必須位于重組質粒的起始密碼和終止密碼之間，才能進行轉錄D.目的基因與熒光標記的DNA探針進行分子雜交，能形成磷酸二酯鍵10、梅花鹿屬于單胎動物，季節(jié)性發(fā)情。育種工作者希望通過胚胎工程技術對優(yōu)良品種進行擴大繁殖。下列有關敘述正確的是（）A.在母鹿飼料中添加一定量的促性腺激素使其一次排出多個卵子B.培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)液中含有維生素、激素等多種能源物質C.早期胚胎不可進行無限次的分割，以便獲得更多的優(yōu)良后代D.梅花鹿的胚胎在早期處于游離狀態(tài)，為胚胎收集提供可能11、為了實現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展；現(xiàn)代有機農(nóng)業(yè)；無公害農(nóng)業(yè)通過加大有機肥的使用，提高水肥效率，降低了“石油農(nóng)業(yè)”大量使用化肥、農(nóng)藥對土壤環(huán)境造成的傷害。某農(nóng)科所對三種農(nóng)業(yè)模式的土壤生物情況進行了調查，結果如下表所示。下列說法錯誤的是（）

。農(nóng)業(yè)模式生物組分（類）食物網(wǎng)復雜程度（相對值）石油農(nóng)業(yè)141．00有機農(nóng)業(yè)181．13無公害農(nóng)業(yè)161．04A.三種農(nóng)業(yè)模式中有機農(nóng)業(yè)食物網(wǎng)復雜程度高，其土壤生態(tài)系統(tǒng)抵抗力穩(wěn)定性最高B.許多土壤小動物身體微小、活動能力強，通常用標記重捕法進行調查C.土壤中存在與農(nóng)作物根部共生的微生物，可以實現(xiàn)能量的循環(huán)利用D.有機肥的使用能提高土壤腐生菌的種類，有利于生態(tài)系統(tǒng)的物質循環(huán)評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)12、生物學家利用基因工程技術通過生物反應器生產(chǎn)人的血清蛋白。請根據(jù)相關知識回答下列問題：

（1）在基因工程的操作中的“分子手術刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是________

（3）基因工程中最常用的運載體是______

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達，說明人和牛______13、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細胞膜上的ACE2相互識別，感染人的呼吸道上皮細胞。請分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生_________性免疫反應，人細胞膜上的ACE2的化學本質是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎，此時可通過適度使用_________對病人進行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴重受損。

（3）科學家采集了感染新型冠狀病毒并已康復的甲、乙兩人的血液，檢測相關抗體的水平，結果如圖1。據(jù)此分析，應選取_________的B淋巴細胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測病毒對宿主細胞的感染率，結果如圖2。據(jù)此分析，對病毒抑制效果最好的單抗是__________號。

（5）患者康復后一段時間，若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應的__________細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。14、下圖表示哺乳動物精子和卵細胞發(fā)生和成熟的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）③過程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來的；④過程在__________內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質和透明帶。為了阻止多精入卵，會發(fā)生__________反應和__________反應。

（3）精子的發(fā)生開始的時期是__________；雌性動物卵泡的形成的時期是__________。

（4）初級卵母細胞進行Ⅰ過程是在__________時期完成的，Ⅱ過程是在__________過程中完成的。15、請寫出基因工程的概念：_________________。請寫出胚胎移植的概念：_____________________。請分別寫出植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的原理_________。16、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過胚胎工程技術可以快速繁育優(yōu)良個體，其主要步驟如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對其進行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應鑒定胚胎中與___________有關的基因。

（4）進行步驟乙時，受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。評卷人得分四、判斷題(共5題，共15分)17、一般情況下一個卵細胞只能由一個精子發(fā)生融合形成受精卵()A.正確B.錯誤18、精子入卵后形成雄原核；同時卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核()A.正確B.錯誤19、受精包括受精前的準備階段和受精階段，在自然狀態(tài)下，哺乳動物的受精在子宮內(nèi)完成。（選擇性必修3P56）()A.正確B.錯誤20、下圖表示哺乳動物發(fā)育過程的幾個階段；請判斷下列題的敘述是否正確？

（_____）（1）從A到C的過程中有機物的含量減少。

（_____）（2）A；B時期胚胎中的細胞都是全能細胞。

（_____）（3）胚胎移植必須使用處于B或C時期的胚胎。

（_____）（4）圖示過程細胞通過有絲分裂增殖，遺傳物質可能會發(fā)生改變。A.正確B.錯誤21、在生態(tài)工程建設中，只能遵循“先污染、破壞、再治理”的發(fā)展思路______A.正確B.錯誤評卷人得分五、非選擇題(共3題，共24分)22、2016年10月19日美國新希望生殖醫(yī)學中心正式宣布；世界首個核移植“三父母”男嬰已于2016年4月誕生。為中東一位線粒體攜帶有亞急性壞死腦病基因的母親帶來了希望。培養(yǎng)過程如下圖，據(jù)圖回答：

（1）獲得重組卵母細胞A也會用到體細胞核移植技術；完成①過程需要用微型吸管吸出______________，完成④過程的B細胞需要選擇_______________________（時期）的卵母細胞。

（2）卵母細胞的獲取過程中；需要對女性進行超數(shù)排卵處理，超數(shù)排卵的方法是給女性注射____激素。

（3）為了提高已有胚胎的利用率；可采用________________技術。若選用囊胚期的胚胎，操作過程中要特別注意的問題是_______________________________________。

（4）根據(jù)___________(填標號)判斷，此種繁殖方式是有性生殖。細胞A的培養(yǎng)過程③所需氣體主要有O2和CO2，CO2的主要作用是___________________________。

（5）設計試管嬰兒技術與解決不孕問題而進行的試管嬰兒技術的主要區(qū)別是前者需要在植入前對胚胎進行______________________________。23、馬鈴薯是表達外源蛋白的理想受體材料。某科研小組通過農(nóng)桿菌轉化法獲得高產(chǎn)重組人血清白蛋白（rHSA)的轉基因馬鈴薯；下圖是該小組構建的基因表達載體中T-DNA示意圖。請回答：

（1）天然農(nóng)桿菌Ti質粒的T-DNA上具有tms和tmr基因（分別控制合成植物生長素和細胞分裂素），在人工改造質粒時應使用________切除這兩個基因，以防止____________________。

（2）構建基因表達載體時，在rHSA基因兩端分別加上限制酶KpnⅠ和SalⅠ的識別序列（兩種酶切割產(chǎn)生不同的黏性末端)，從基因表達角度分析其目的是____________。科研小組PCR擴增rHSA基因時，其中一種引物堿基序列為：5＇-CGGGGTACCGCCACCATGGATGCACACAAG-3＇，該序列含有KpnⅠ識別序列和增強表達的序列5＇-GCCACC-3＇，則限制酶KpnⅠ的識別序列是_______________。

（3）將基因表達載體轉入處于___________的農(nóng)桿菌細胞中。用農(nóng)桿菌轉化液與馬鈴薯愈傷組織共培養(yǎng)一段時間后，為了得到已轉化且不含農(nóng)桿菌的愈傷組織，將感染后的愈傷組織轉移至含有潮霉素和羧芐青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，加潮霉素的目的是_______________，加羧芐青霉素的目的是____________。24、現(xiàn)代生物科技在畜牧業(yè)生產(chǎn)中有著廣泛的應用；以下是科學家采用不同方法培育良種牛的過程。請據(jù)圖回答有關問題：

（1）為提高良種奶牛的繁殖能力，在獲取卵細胞之前需用_____對奶牛進行處理使其_______

（2）“轉基因?！盌培育過程中，常用受精卵作為外源基因的受體細胞，主要原因是______，過程h常用的方法是____________。

（3）圖中數(shù)字標號①代表的結構為______，A、B?；蛐褪欠裣嗤?？______

（4）在培育良種牛的過程中，都運用了動物細胞培養(yǎng)技術。在動物細胞培養(yǎng)過程中，為防止雜菌的污染而要加入一定量的____________。評卷人得分六、實驗題(共4題，共24分)25、2018年11月；有關“中國基因編輯嬰兒新聞占據(jù)了各大網(wǎng)絡媒介，一場“科學發(fā)展”與“倫理道德淪喪”爭辯響徹全國。請根據(jù)你所學的知識，分析以下問題：

(1)為了達到所謂的阻斷感染艾滋病”效果，該實驗團隊主要針對CCR5基因進行編輯，實施基因敲除，該過程中可能要用到的工具酶是______________________，敲除后為了使DNA上“缺口”補上，可能用到的工具酶是______________________。

(2)人們擔心這種行為會打開“潘多拉魔盒”’，驅使另一些科研者開展人類基因編輯研究，出現(xiàn)“基因完美的定制人”。在這些研究中，外源基因能與受體細胞DNA成功重組的原因是____________________________________________，這些基因拼接成功后能正常表達的理論基礎是______________________。

(3)由于基因組計劃尚未圓滿完成，人類對自身基因在DNA分子上的位置知之甚少，在這種情況下開展對人類的基因編輯計劃風險非常大。你認為該轉基因技術存在安全性爭論的原因：_________________________________。

(4)轉基因技術并不是令人聞之色變的瘋狂技術，它已在作物品種改良上取得一定的成績。比如，為了獲得“多彩的牽?；ā保蓪_____________________(目的基因名稱)與質粒形成重組質粒，導入到普通牽?；毎校偻ㄟ^______________________技術培養(yǎng)得到符合要求的植株。

(5)為了獲得能生產(chǎn)人胰島素的大腸桿菌，要將含有胰島素合成基因的重組質粒導入到大腸桿菌中。通常用______________________處理大腸桿菌以增加其細胞壁的通透性。26、某些膜內(nèi)蛋白以緊密排列的方陣形式存在稱為OAPs；OAPs的分布異常與某些神經(jīng)性和神經(jīng)肌肉性疾病相關。研究AQP4（一種水通道蛋白）與OAPs結構形成的關系，有助于揭示上述疾病的機制。請回答問題：

(1)AQP4有M1和M23兩種分子量相近的亞型，二者均可獨立構成四聚體發(fā)揮作用?？蒲腥藛T發(fā)現(xiàn)導入并穩(wěn)定表達M23基因的細胞；其細胞膜上有OAPs形成，而敲除該基因的細胞中未見OAPs的形成，該結果表明______。

(2)科研人員繼續(xù)對M1與OAPs形成的關系進行了研究。

①提取大鼠腦組織的總RNA，通過______法獲得cDNA，并通過______技術獲得M1基因。

②將M1基因與質粒用______酶構建基因表達載體，導入中國倉鼠卵巢細胞（CHO）中，用______技術檢測到受體細胞已成功表達M1蛋白。

③科研人員繼續(xù)實驗；方案及結果如下。

。實驗分組。

1對照組。

2對照組。

3實驗組。

實驗處理。

____

____

導入M1基因的CHO細胞。

培養(yǎng)一段時間后裂解細胞并離心；取上清液中蛋白。

培養(yǎng)一段時間后裂解細胞并離心；取上清液中蛋白。

檢測指標。

用電泳技術檢測____的形成情況。

請將表格中的實驗方案補充完整。a：______，b：______；c：______。

(3)綜合上述實驗結果，AQP4與OAPs形成的關系為______。27、藍白斑篩選是基因工程中篩選重組目的基因常用的一種方法；表現(xiàn)為培養(yǎng)基上出現(xiàn)藍白顏色的菌落，可以通過顏色為依據(jù)直接篩選重組菌。用于篩選的菌為β-半乳糖苷酶缺陷型菌株，這種宿主菌中編碼β-半乳糖苷酶的部分缺失，不具有生物活性。用于藍白斑篩選的質粒載體一般含有抗性基因和將宿主菌β-半乳糖苷酶缺失部分補全的序列，在這段序列中還含有多個限制性酶切位點，便于插入目的基因。β-半乳糖苷酶能夠作用于一種無色化合物X-gal，使其變成藍色物質?；卮鹣铝袉栴}：

（1）玻璃和金屬材質的實驗器材利用__________方法滅菌。

（2）培養(yǎng)基滅菌后；需要冷卻到____℃左右時，才能倒平板。倒平板后，平板冷凝要將平板倒扣，原因是________________。

（3）為防止雜菌污染；培養(yǎng)基中要添加______。藍白斑篩選能成功，是因為培養(yǎng)基中添加了_________。

（4）最終培養(yǎng)基出現(xiàn)的白色的菌落是（__）。A．目的基因和載體結合B．只含目的基因C．只含載體（5）需要長期保存該菌種，可采用的方法是_______。28、中國倉鼠卵巢細胞（CHO細胞）能夠高效表達外源基因。科學研究中常使用重組CHO細胞（導入了重組載體的CHO細胞）大量生產(chǎn)外源蛋白；一般步驟為：Ⅰ.長期傳代培養(yǎng)，獲得大量重組細胞；Ⅱ.批式培養(yǎng)，獲得大量外源蛋白。

（1）體外培養(yǎng)動物細胞的基本培養(yǎng)液（BM）中除抗生素和一般營養(yǎng)物質外；還應含有_______。為了獲得能生產(chǎn)抗體A的重組CHO細胞，需要將含有抗體A基因的重組載體通過________法導入CHO細胞，經(jīng)篩選獲得重組CHO細胞。

（2）研究發(fā)現(xiàn)；酵母抽提物（YE）在動物細胞培養(yǎng)和促進蛋白質表達中具有重要作用。為確定YE在不同培養(yǎng)階段的使用策略，研究人員進行了下列實驗。

①圖1所示實驗探究了在長期傳代培養(yǎng)階段________對重組CHO細胞增殖以及抗體A表達量的影響。通過細胞計數(shù)和計算得出實驗結果如圖2所示；結果說明________。此處理對后續(xù)批式培養(yǎng)中的細胞增殖及單個細胞的抗體產(chǎn)量基本無影響。

②進一步探究YE對批式培養(yǎng)階段的影響；應在階段Ⅰ；Ⅱ分別使用___________和________進行培養(yǎng)。結果表明，抗體A的總產(chǎn)量隨著YE濃度的提高而增加。

③綜上所述，為提高抗體A的總產(chǎn)量，整個培養(yǎng)過程中對YE的使用策略是________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、D【分析】試題分析：卵裂期細胞先進行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加，后進行分化，A錯誤；受精卵在卵裂過程中，細胞的總體積基本不變或略有減小，而單個細胞的體積不斷減小，B錯誤；囊胚期的內(nèi)細胞團具有發(fā)育全能性，C錯誤；胚胎發(fā)育的過程為受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原腸胚，囊胚腔先于原腸腔出現(xiàn)，D正確。

點睛：胚胎發(fā)育過程：

（1）卵裂期：細胞進行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加；

（2）桑椹胚：32個細胞左右的胚胎（之前所有細胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細胞）；

（3）囊胚：細胞開始分化；其中個體較大的細胞叫內(nèi)細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔，囊胚的擴大會導致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化；

（4）原腸胚：內(nèi)細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔，（細胞分化在胚胎期達到最大限度）2、B【分析】【分析】

1．基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲?。焕肞CR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

2．基因工程的工具：

（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（3）運載體：常用的運載體：質粒；噬菌體的衍生物、動植物病毒。

【詳解】

A；目的基因導入受體細胞后；在受體細胞中不一定能成功表達，A正確；

B；目的基因的檢測（DNA分子雜交技術、分子雜交技術等）與表達（包括轉錄和翻譯兩個步驟）過程中都發(fā)生了堿基互補配對；B錯誤；

C；構建重組質粒必需的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶；C正確；

D；標記基因一般是抗生素抗性基因；因此可用含抗生素的培養(yǎng)基檢測大腸桿菌中是否導入了重組質粒，D正確。

故選B。

【點睛】

熟知基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各步驟中的細節(jié)問題，并能結合所學的知識準確判斷各選項是解答問題的關鍵！3、C【分析】標記基因是四環(huán)素抗性基因；如果細菌在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基生存，說明了此細菌含有重組質粒，A正確；⑥可與多個核糖體結合，可以同時翻譯出多個同種蛋白質，B錯誤；受體細胞是植物細胞，常用將重組質粒整合到農(nóng)桿菌體中，再用農(nóng)桿菌侵染植物細胞，可以使目的基因整合到植物細胞染色體上，C錯誤；①過程是基因表達載體構建過程，需要同一種限制酶切割目的基因和運載體，再用DNA連接酶連接它們形成基因表達載體，D正確．

【考點定位】基因工程的原理及技術。

【名師點睛】農(nóng)桿菌易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力．農(nóng)桿菌的Ti質粒的T-DNA可轉移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上．約80%的轉基因植物都是用農(nóng)桿菌轉化法獲得的，具體轉化過程：目的基因插人Ti質粒的T-DNA上導入農(nóng)桿菌→導入植物細胞→目的基因整合到植物細胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達．4、C【分析】【分析】

1；酶是由活細胞產(chǎn)生的具有催化活性的有機物；其中大部分是蛋白質、少量是RNA。

2；酶的作用原理是降低化學反應所需要的活化能；使得酶具有高效性。

3；DNA連接酶是在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵。

【詳解】

A；酶的本質多數(shù)是蛋白質；少數(shù)是RNA，故酶的基本組成單位是氨基酸或核糖核苷酸，A錯誤；

B；酶能降低化學反應的活化能；不能夠提供能量，B錯誤；

C；在動物細胞培養(yǎng)中；胰蛋白酶或膠原蛋白酶可將組織分散成單個細胞，C正確；

D；DNA連接酶連接的是磷酸二酯鍵；D錯誤。

故選：C。5、D【分析】【分析】

植物細胞工程的技術手段主要有植物組織培養(yǎng)和植物體細胞雜交；其中植物組織培養(yǎng)是植物細胞工程的基礎；動物細胞工程的技術手段主要有動物細胞培養(yǎng)；動物細胞融合、單克隆抗體的制備、胚胎移植和核移植，其中動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎。動、植物細胞工程的原理和技術手段有相似之點，但也存在不同之處，需要考生在平時的學習過程中注意列表比較。

【詳解】

技術手段：植物細胞工程的技術手段包括植物組織培養(yǎng)和植物體細胞雜交；動物細胞工程的技術包括動物細胞培養(yǎng)；動物細胞融合等，正確；

特殊處理：植物體細胞雜交時；需要用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細胞壁，動物細胞培養(yǎng)時需要用胰蛋白酶處理制備細胞懸浮液，錯誤；

融合方法：誘導植物原生質體融合的方法包括物理方法和化學方法；而誘導動物細胞融合的方法還包括生物方法，錯誤；

典型應用：植物組織培養(yǎng)技術可用于無病毒植物的培育；制備人工種子；植物體細胞雜交技術可用于種間植物雜交等；而動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)技術可用于制備單克隆抗體，正確；

培養(yǎng)液區(qū)別：植物組織培養(yǎng)過程中利用的是蔗糖；錯誤。

即D符合題意；ABC不符合題意。

故選D。6、D【分析】【詳解】

ES細胞可以用于治療由于細胞壞死；退化或功能異常引起的疾病，A正確；ES細胞在體外誘導分化可培育出人造組織器官，解決目前臨床上存在的供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題，B正確；ES細胞具有自我更新和分化的潛能，是研究體外細胞分化的理想材料，C正確；ES細胞可用于治療人類的某些頑癥，如帕金森綜合癥；糖尿病、肝衰竭等疾病，D錯誤。

【考點定位】

胚胎干細胞的研究與應用二、多選題(共5題，共10分)7、B:C【分析】【分析】

生物體基因的堿基序列保持不變；但基因表達和表型發(fā)生可遺傳變化的現(xiàn)象，叫作表觀遺傳；除了DNA甲基化，構成染色體的組蛋白發(fā)生甲基化；乙?；刃揎椧矔绊懟虻谋磉_。

【詳解】

A；過程①中小分子化合物誘導成纖維細胞脫分化為iPS細胞；并未發(fā)生突變，A錯誤；

B；MⅡ期卵母細胞的細胞質內(nèi)含有促使細胞核全能性表現(xiàn)的物質；故要選用MⅡ期卵母細胞去除細胞核，B正確；

C；過程③為動物細胞融合過程；可使用電融合法誘導兩細胞融合，C正確；

D；由圖可知；重構胚在加入中Kdm4d的mRNA和TSA后，發(fā)育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA表達產(chǎn)物為組蛋白去甲基化酶，可以使組蛋白去甲基化，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑，抑制組蛋白脫乙酰酶的作用，保持組蛋白乙?；?，即組蛋白乙?；腿ゼ谆欣谥貥嬇吆罄m(xù)的胚胎發(fā)育過程，D錯誤。

故選BC。8、B:C【分析】【分析】

（1）動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性；細胞的增殖；誘導手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結果產(chǎn)生雜交細胞，主要用于制備單克隆抗體。

（2）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫原理：B淋巴細胞能產(chǎn)生特異性抗體；②細胞融合原理：利用病毒對宿主細胞的穿透性使B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合；③動物細胞培養(yǎng)技術：對雜交瘤細胞進行體內(nèi)；體外培養(yǎng)。

（3）制備單克隆抗體過程中的幾種細胞：①免疫B細胞（漿細胞）：能產(chǎn)生單一抗體；但不能無限增殖；②骨髓瘤細胞：能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；③雜交瘤細胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。

【詳解】

A；骨髓瘤細胞和免疫B細胞可用滅活的仙臺病毒誘導融合；形成雜交瘤細胞，A錯誤；

B；骨髓瘤細胞雖然能無限增殖；但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶，免疫B細胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶，但不具有無限增殖的本領，所以在HAT篩選培養(yǎng)液中，兩兩融合的具有同種核的細胞和骨髓瘤細胞、免疫B細胞都無法生長，只有雜交瘤細胞才能生長，B正確；

C；因每個免疫B細胞只分泌一種特異性抗體；因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來的眾多的雜交瘤細胞所分泌的抗體，不一定都是人類所需要的，還需要進一步把能分泌人類所需要抗體的雜交瘤細胞篩選出來，C正確；

D；篩選出的雜交瘤細胞體外培養(yǎng)時需添加抗生素防止細菌污染；D錯誤。

故選BC。

【點睛】

本題考查單克隆抗體的制備過程，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡結構的能力；能運用所學知識，準確判斷問題的能力。9、C:D【分析】【分析】

基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建（核心）；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達。細胞工程中用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁獲得原生質體和用胰蛋白酶處理動物組織得到單個細胞都采用了酶的專一性原理。誘導原生質體融合和動物細胞融合都采用了生物膜的流動性原理；植物組織培養(yǎng)的原理是細胞的全能性，動物細胞培養(yǎng)的原理是細胞增殖。

【詳解】

A；由細胞工程原理可知；植物細胞或組織離體培養(yǎng)可以得到植物個體，動物細胞可以進行培養(yǎng)而實現(xiàn)增殖，A正確；

B；細胞工程應用非常廣泛；動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒，B正確；

C；基因表達載體構建必須使目的基因必須位于重組質粒的啟動子和終止子之間；這樣才能有利于目的基因表達，C錯誤；

D；DNA分子雜交的原理是堿基互補形成雜交帶；不能產(chǎn)生磷酸二酯鍵，D錯誤。

故選CD。10、C:D【分析】1；精子與卵子在體外受精后；應將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)。發(fā)育培養(yǎng)基的成分：無機鹽和有機鹽，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及血清等物質。

2；胚胎移植的生理學基礎：①動物發(fā)情排卵后；同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的，這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。②早期胚胎在一定時間內(nèi)處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能。③受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應，這為胚胎在受體的存活提供了可能。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。

【詳解】

A；給供體母鹿注射促性腺激素可使其一次排出多個卵子；即超數(shù)排卵，促性腺激素屬于多肽類，添在飼料內(nèi)飼喂會使其被消化分解，A錯誤；

B；培養(yǎng)液中的維生素和激素不是能源物質；B錯誤；

C；早期胚胎分割次數(shù)太多；會影響分割后胚胎的正常發(fā)育，所以早期胚胎不能進行無限次的分割，目前以二分胚胎的移植效率最高，C正確；

D；梅花鹿的胚胎形成后；早期處于游離狀態(tài)，為胚胎收集提供可能，D正確。

故選CD。11、B:C【分析】【分析】

分析表格：表中是三種農(nóng)業(yè)模式土壤生物情況；其中有機農(nóng)業(yè)模式的土壤中生物組分最多，食物網(wǎng)的復雜程度相對值最大，說明該模式的農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性最高。

【詳解】

A；結合表中數(shù)據(jù)可知；有機農(nóng)業(yè)的土壤中，生物組分多，食物網(wǎng)復雜程度高，因此生態(tài)系統(tǒng)抵抗力穩(wěn)定性最高的農(nóng)業(yè)模式為有機農(nóng)業(yè)，A正確；

B；許多土壤小動物身體微??；不適于用標記重捕法進行調查，B錯誤；

C；土壤中存在與農(nóng)作物根部共生的微生物如固氮菌；是指農(nóng)作物為微生物提供有機營養(yǎng)物質，而微生物能為農(nóng)作物提供無機鹽營養(yǎng)，物質能循環(huán)，能量不能循環(huán)。C錯誤；

D；長期使用有機肥后會使腐生細菌增加；腐生細菌是分解者，能將動植物遺體和動物的排遺物分解成無機物，從而再被生產(chǎn)者利用，實現(xiàn)物質循環(huán)。D正確。

故選BC。三、填空題(共5題，共10分)12、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手術刀”即切割DNA的是限制核酸內(nèi)切酶簡稱限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是DNA連接酶；

（3）基因工程中最常用的運載體是質粒；

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達；說明人和牛共用一套遺傳密碼。

【考點定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA連接酶質粒共用一套遺傳密碼13、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對宿主細胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對宿主細胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生特異性免疫反應，人細胞膜上的ACE2的化學本質是蛋白質。

（2）免疫系統(tǒng)對被新冠病毒感染后肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎；此時可通過適度使用免疫抑制劑對病人進行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組，故應選取甲的B細胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對宿主細胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復后一段時間；若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應的記憶細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。

【點睛】

本題結合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識記病毒的結構，明確病毒沒有細胞結構；識記單克隆抗體的制備過程，掌握其優(yōu)點及相關應用，能結合圖中信息準確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶14、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復制；②是減數(shù)分裂，③是精細胞變形為精子過程，④是受精作用；

2；哺乳動物精子和卵子發(fā)生的不同點：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場所唯一（MⅠ和MⅡ的場所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場所不唯一，（MⅠ場所在卵巢，MⅡ場所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機能衰退；多數(shù)哺乳動物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來的；④過程是受精過程，在輸卵管內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質和透明帶，透明帶反應和卵細胞膜反應是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動物精子產(chǎn)生的時期是初情期；雌性動物卵泡細胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級卵母細胞進行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過程中完成的。

【點睛】

本題考查卵細胞的形成過程和受精作用等相關知識，意在考查學生識記相關細節(jié)和解決問題的能力?！窘馕觥扛郀柣w輸卵管透明帶反應卵細胞膜反應初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用15、略

【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織；將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織；器官或細胞，原生質體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質及植物激素的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術。

【詳解】

1；基因工程又稱基因拼接技術和DNA重組技術；是以分子遺傳學為理論基礎，以分子生物學和微生物學的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預先設計的藍圖，在體外構建雜種DNA分子，然后導入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品的遺傳技術。

2；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術。

3；動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織；將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖，其原理是細胞增殖。

4；植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)；指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞，原生質體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質及植物激素的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞具有全能性。

【點睛】

本題考查基因工程概念、胚胎移植、動植物細胞培養(yǎng)等相關知識，意在考察考生對知識點的理解掌握程度?！窘馕觥竣?又叫基因拼接技術或DNA重組技術②.又稱受精卵移植，是指將雌性動物體內(nèi)的的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀況相同的其他雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術③.植物細胞全能性、細胞增殖16、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術，其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體稱為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動物應為常見或存量大的品種)，如轉基因、核移植，或體外受精等任何一項胚胎工程技術所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過胚胎移植技術才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對精子進行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應鑒定胚胎中與有關的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實現(xiàn)的前提是受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應。

【點睛】

胚胎移植的實質：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉移?！窘馕觥烤荧@能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應。四、判斷題(共5題，共15分)17、A【分析】【詳解】

由于存在防止多精入卵的兩道屏障，故一個卵細胞一般只能同一個精子結合，形成受精卵，這句話是正確的。18、A【分析】【詳解】

受精過程為：頂體反應→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應）→卵細胞膜反應（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。精子入卵后形成雄原核，同時被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核，雄、雌原核充分發(fā)育后，相向移動，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此說法正確。

故正確。19、B【分析】【詳解】

受精包括受精前的準備階段和受精階段；在自然狀態(tài)下，哺乳動物的受精在輸卵管內(nèi)完成。

故錯誤。20、B【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原腸胚。圖B中1是滋養(yǎng)層，2是內(nèi)細胞團，3是透明帶，4是囊胚腔；圖C中5是外胚層，6是滋養(yǎng)層，7是原腸腔，8是內(nèi)胚層。

【詳解】

（1）從A到C的過程中細胞均需要消耗能量；故胚胎中有機物的含量均減少，（1）正確。

（2）桑椹胚之前所有細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬全能細胞，故A時期胚胎中的細胞都是全能細胞，囊胚期時細胞出現(xiàn)分化，滋養(yǎng)層細胞不是全能細胞，（2）錯誤。

（3）胚胎移植必須使用處于桑椹胚或囊胚時期的胚胎；處于A或B時期的胚胎，（3）錯誤。

（4）圖示過程細胞通過有絲分裂增殖；有絲分裂過程中可能發(fā)生突變，遺傳物質可能會發(fā)生改變，（4）正確。

故分別為√、×、×、√。21、B【分析】【詳解】

生態(tài)系統(tǒng)的恢復力穩(wěn)定性是有一定限度的，導致了生態(tài)工程的局限性，使生態(tài)工程并不能解決所有的污染、破壞問題，因此不能走“先污染、破壞，后治理”的老路，故錯誤。五、非選擇題(共3題，共24分)22、略

【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖中過程①表示去除捐獻者乙的卵母細胞核獲得去核卵母細胞的過程；過程②表示核移植技術，A表示重組卵母細胞；過程③表示重組卵母細胞的培養(yǎng)，B表示處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細胞；過程④表示體外受精；過程⑤表示早期胚胎培養(yǎng)；過程⑥表示胚胎移植。

【詳解】

（1）圖示過程①表示去除捐獻者乙的卵母細胞核獲得去核卵母細胞的過程；該過程常用微型吸管吸出細胞核和第一極體；過程④表示體外受精，該過程應該選擇培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期的卵母細胞。

（2）捐獻者在取卵前通常需要注射促性腺激素；促進其超數(shù)排卵。

（3）采用胚胎分割技術；可以提高已有胚胎的利用率；選用囊胚期的胚胎進行胚胎分割時，需要對內(nèi)細胞團進行均等分割。

（4）過程④表示體外受精；說明此種繁殖方式是有性生殖；動物細胞培養(yǎng)過程中，需要一定的氣體環(huán)境，主要氣體有二氧化碳和氧氣，其中二氧化碳的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

（5）與試管嬰兒技術相比；設計試管嬰兒技術需要在植入前對胚胎進行遺傳學診斷。

【點睛】

解答本題的關鍵是掌握體外受精的一般步驟，判斷圖中各個數(shù)字代表的過程的名稱，并能夠根據(jù)圖示信息確定三親嬰兒中遺傳物質的來源?！窘馕觥考毎撕偷谝粯O體減數(shù)第二次分裂中期（或MⅡ中期）促性腺胚胎分割將內(nèi)細胞團均等分割④維持培養(yǎng)液的pH遺傳學診斷（或基因檢測或基因診斷）23、略

【分析】【詳解】

試題分析：本題結合轉基因馬鈴薯的形成過程；考查基因工程的相關知識，意在考查學生分析題圖獲取有效信息的能力，以及理解所學知識要點，把握知識間聯(lián)系的能力。學生可根據(jù)題圖和題干的提示；要求，梳理相關知識點，對各小題進行分析作答，同時需要學生掌握基因工程的原理、操作步驟及其一些細節(jié)問題。

（1）由于天然農(nóng)桿菌Ti質粒的T-DNA上具有tms和tmr基因（分別控制合成植物生長素和細胞分裂素），這兩種基因表達可使植物合成植物生長素和細胞分裂素，進而影響了植物體內(nèi)內(nèi)源激素的含量，因此需要用限制性核酸內(nèi)切酶切除tms和tmr基因。

（2）據(jù)圖可知，加上的兩種限制酶的識別序列在啟動子與終止子之間，因此加上兩種限制酶的識別序列后rHSA基因能正向接入其啟動子與終止子之間，保證rHSA基因能準確表達。由于引物系列中含有KpnⅠ識別序列和增強表達的序列；KpnⅠ識別序列應該在增強表達序列5＇-GCCACC-3＇之前，即5’-GGTACC-3’。

（3）將將基因表達載體導入農(nóng)桿菌時，首先必須用Ca2+處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉變?yōu)楦惺軕B(tài)，以便于導入基因表達載體。將感染后的愈傷組織轉移至含有潮霉素和羧芐青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，加潮霉素的目的是篩選出含潮霉素抗性基因的愈傷組織，由于篩選的是愈傷組織，需要把含有潮霉素抗性基因的農(nóng)桿菌除去，因此加入羧芐青霉素的目的是除去含有潮霉素抗性基因的農(nóng)桿菌?！窘馕觥肯拗泼竧ms和tmr基因的表達產(chǎn)物影響受體植物內(nèi)源激素的含量rHSA基因能正向接入其啟動子與終止子之間，保證rHSA基因能準確表達或5’-GGTACC-3’感受態(tài)篩選出含潮霉素抗性基因的愈傷組織除去含有潮霉素抗性基因的農(nóng)桿菌24、略

【分析】【分析】

由圖可知，a體外受精、b早期胚胎培養(yǎng)；c胚胎分割、d胚胎移植、e生下A、B牛、f胚胎移植、g生下C牛、h把目的基因導入受體細胞。

【詳解】

（1）為提高良種奶牛的繁殖能力；需要用促性腺激素處理使其超數(shù)排卵。

（2）由于受精卵的分化程度低；全能性高，全能性易于表達，故“轉基因?！盌培育過程中，常用受精卵作為外源基因的受體細胞。過程h用顯微注射法把目的基因導入受精卵中。

（3）圖中①表示內(nèi)細胞團；會發(fā)育成胎兒的各種組織，A；B牛是經(jīng)胚胎分割形成的，故基因型相同。

（4）在動物細胞培養(yǎng)過程中；為防止雜菌的污染而要加入一定量的抗生素。

【點睛】

動物細胞培養(yǎng)過程中，為防止雜菌的污染而要加入一定量的抗生素；避免細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞產(chǎn)生傷害，需要定期更換培養(yǎng)液?！窘馕觥看傩韵偌に爻瑪?shù)排卵受精卵的全能性易于表達顯微注射法內(nèi)細胞團相同抗生素六、實驗題(共4題，共24分)25、略

【分析】【分析】

基因工程又叫DNA重組技術；是指按照人們的意愿，進行嚴格的設計，并通過體外DNA重組和轉基因等技術，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。DNA重組技術至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）；DNA連接酶、運載體。限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

【詳解】

（1）基因工程用到的工具酶包括限制酶和DNA連接酶（限制性核酸內(nèi)切酶）。實施基因敲除；該過程中可能要用到的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶，敲除后為了使DNA上斷裂的磷酸二酯鍵重新形成，可能用到的工具酶是DNA連接酶。

（2）在基因工程中；外源基因能與受體細胞中的DNA具有共同的結構和化學組成是成功重組的基礎，這些基因拼接成功后能正常表達的理論基礎是所有的生物都共用一套遺傳密碼子表，都遵循中心法則。

（3）“中國基因編輯嬰兒”轉基因技術存在安全性爭論的原因：目前對基因的結構；基因間的相互作用以及基因的調控機制等都了解得相當有限；外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機的；可能導致生命活動必須的正?；蛟獾狡茐摹?/p>

（4）轉基因技術并不是令人聞之色變的瘋狂技術；它已在作物品種改良上取得一定的成績。比如，為了獲得“多彩的牽牛花”，可將與花青素代謝有關的基因與質粒形成重組質粒，導入到普通牽牛花細胞中，再利用植物細胞的全能性，通過植物組織培養(yǎng)技術培養(yǎng)得到符合要求的植株。

（5）將目的基因導入大腸桿菌時，需要先用CaCl2溶液處理大腸桿菌；增大細胞壁的通透性，使大腸桿菌成為感受態(tài)細胞，有利于將目的基因導入細胞中。

【點睛】

本題主要考查基因工程的相關知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡結構的能力?！窘馕觥肯拗菩院怂醿?nèi)切酶DNA連接酶兩者都具有共同的結構和化學組成所有的生物都共用一套遺傳密碼子表，都遵循中心法則目前對基因的結構、基因間的相互作用以及基因的調控機制等都了解得相當有限；外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機的，可能導致生命活動必須的正?；蛟獾狡茐呐c花青素代謝有關的基因植物組織培養(yǎng)CaCl2溶液26、略

【分析】【分析】

1；基因工程的操作過程。

(1)目的基因的獲取。

①從基因文庫中獲取。

基因文庫包括：基因組文庫和部分基因文庫(其中的cDNA文庫是利用反轉錄法獲取的)。

②利用PCR技術擴增。

a.變性(90～95℃)：雙鏈DNA模板在熱作用下；氫鍵斷裂，形成單鏈。

b.復性(55～60℃)：引物與DNA模板結合；形成局部雙鏈。

c.延伸(70～75℃)：在Taq酶的作用下；合成與模板互補的子鏈。

d.循環(huán)重復上述過程；n次循環(huán)后，目的基因的量將被擴增2n倍。

③利用化學方法人工合成：基因比較??；核苷酸序列已知時，選擇該方法。

(2)基因表達載體的構建。

①通常用同一種限制酶切割目的基因和質粒；然后用DNA連接酶將二者連接，改造后成為基因表達載體。

②組成：目的基因；標記基因、啟動子、終止子和復制原點。

(3)將目的基因導入受體細胞。

。生物種類。

植物。

動物。

微生物。

常用方法。

農(nóng)桿菌轉化法。

顯微注射技術。

感受態(tài)細胞法。

受體細胞。

體細胞或受精卵。

受精卵。

原核細胞。

轉化過程。

將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上→農(nóng)桿菌→導入植物細胞→整合到受體細胞染色體的DNA上→表達。

將含有目的基因的表達載體提純→取卵(受精卵)→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動物。

Ca2＋處理細胞→感受態(tài)細胞→重組表達載體DNA分子與感受態(tài)細胞混