2024年華東師大版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案

…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2024年華東師大版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、人類利用微生物發(fā)酵制作果酒、果醋歷史悠久。果酒進一步發(fā)酵可獲得果醋，二者都具有一定的保健養(yǎng)生功效。下列有關果酒、果醋的制作敘述錯誤的是（）A.制作果酒、果醋的菌種在結構上最大的差異是有無成形細胞核B.醋酸菌在氧氣充足與缺乏時都可生成醋酸，但利用的原料不同C.用葡萄酒制作葡萄醋時，需將發(fā)酵的溫度適當提高D.果汁發(fā)酵后是否產(chǎn)生酒精可用酸性重鉻酸鉀來檢驗2、在不損傷植物細胞內部的結構的情況下，下列可用于去除細胞壁的物質是（）A.蛋白酶B.纖維素酶C.鹽酸D.淀粉酶3、下列關于轉基因植物的敘述，正確的是（）A.轉基因植物有可能成為“入侵的外來物種”，威脅生態(tài)系統(tǒng)中其他生物的生存B.轉基因抗蟲植物不會導致昆蟲群體抗性基因頻率增加C.動物的生長激素基因轉入植物后不能表達D.若轉基因植物的外源基因來源于自然界，則不存在安全性問題4、日本京都大學的教授將4個關鍵基因移植入已分化的體細胞中并表達；使這個細胞成為具有類似干細胞功能的多能干細胞（iPS細胞）。如圖為該技術在人體細胞中實驗示意圖，據(jù)圖分析下列說法正確的是（）

A.iPS細胞與肌肉細胞有相同的遺傳物質，關鍵基因在肌肉細胞中能復制、轉錄和翻譯B.過程①②③是基因選擇性表達的結果，圖示過程體現(xiàn)了iPS細胞具有全能性C.用該技術得到的新生器官替換供體病變器官，可避免異體移植產(chǎn)生的免疫排斥反應D.4個關鍵基因表達過程將改變肌肉細胞的細胞質環(huán)境，使iPS細胞功能趨向專門化5、下列有關基因工程的基本工具敘述正確的是（）A.限制酶只存在于原核生物中，只能識別DNA分子的特定核苷酸序列B.只有同種限制酶切割的末端才能連接，不同限制酶切割的末端不能連接C.基因工程中，只能利用天然質粒，質粒上的標記基因用于重組DNA的篩選D.T4DNA連接酶既可以連接粘性末端，也可以連接平末端，但連接平末端的效率相對較低評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)6、科學家通過“治療性克隆”研究發(fā)現(xiàn)；利用病人本身的細胞可治療其患有的某些疾病。一般將胚胎干細胞進行基因修飾后，經(jīng)誘導分化成相應的組織器官用于移植。其過程如下圖所示。下列關于“治療性克隆”的敘述不正確的是（）

A.人類“治療性克隆”屬于生物工程中的細胞工程B.該治療過程中應用的主要技術有核移植、動物細胞培養(yǎng)、胚胎移植等C.此過程體現(xiàn)了胚胎干細胞具有全能性D.“治療性克隆”與“異體器官移植”相比，其優(yōu)點之一是避免了免疫排斥反應7、中國科學院動物研究所首席科學家；動物克隆與受精生物學學科帶頭人陳大元；曾主持科研攻關項目——“攀登”，進行大熊貓的異種克隆。他們將大熊貓的體細胞核放入兔子的去核卵母細胞之中，并使其成功發(fā)育成囊胚，標志著異種核質相容的問題得到解決，異種克隆大熊貓邁過了第一道“坎”；然后至關重要的是選擇一種合適的“代孕母體”。下圖是該研究的理論流程圖。下列說法正確的是（）

A.整個過程用到的技術手段有動物細胞培養(yǎng)、動物體細胞核移植和胚胎移植等B.誘導超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細胞C.重構胚發(fā)育成囊胚所需營養(yǎng)主要來源于“代孕母體”D.步驟甲和步驟乙中的供體和受體需要同期發(fā)情處理8、嵌合體是指由兩個或兩個以上具有不同遺傳物質的細胞系形成的聚合胚胎發(fā)育而成的個體嵌合體的制備是研究干細胞體內分化能力的有效方法之一，有望在未來為解決器官移植供體短缺等醫(yī)學難題開辟新的方向。研究人員將小鼠誘導性胚胎干細胞（ES）注入到豬的囊胚期胚胎后獲得豬一鼠嵌合體。下列相關敘述正確的是（）A.培育嵌合體與克隆動物的生物學原理不相同，前者運用的是細胞的增殖與分化后者是動物細胞核的全能性B.胚胎干細胞具有分化為成年動物體內的任何一種類型的細胞的潛能C.將胚胎干細胞注入豬囊胚的滋養(yǎng)層處才能獲得豬—鼠嵌合體D.若培育出“人—獸嵌合體”將會面臨與克隆人一樣的倫理問題9、近年來；全人源化單克隆抗體技術發(fā)展迅速，利用轉基因鼠技術進行全人源化單克隆抗體的制備流程如圖所示，下列說法正確的是（）

A.該技術能降低單克隆抗體藥物的免疫排斥反應B.過程①②采用核移植技術，體現(xiàn)了動物細胞核的全能性C.過程⑧要經(jīng)過選擇培養(yǎng)基篩選、克隆化培養(yǎng)和抗體檢測等過程D.體外培養(yǎng)B細胞也可以大量獲得針對該抗原的單克隆抗體10、野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長，氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長，下圖為純化某氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖，①②③④代表培養(yǎng)基，A、B、C表示操作步驟，D、E為菌落。下列敘述正確的是（）

A.圖中①②④為完全培養(yǎng)基，③為基本培養(yǎng)基B.A操作的目的是提高突變率，增加突變株的數(shù)量C.B的正確操作是用涂布器蘸取菌液后均勻地涂布在②表面D.經(jīng)C過程原位影印及培養(yǎng)后，可從④中挑取D進行純化培養(yǎng)11、為探究提高“日照藍莓”品質和產(chǎn)量的新途徑，某生物興趣小組以“日照藍莓”的主要品種——兔眼藍莓為實驗材料進行脫毒處理，其技術路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關敘述正確的是（）A.取材時可選用兔眼藍莓的芽尖等分生組織作為外植體B.用70%酒精和5%左右次氯酸鈉對外植體消毒時，要控制好時間以避免造成傷害C.對分化培養(yǎng)基滅菌前需添加生長素類、細胞分裂素類和赤霉素類等生長調節(jié)劑D.脫毒后的兔眼藍莓果實體積更大，產(chǎn)量更高，后代個體中更不易被病毒感染12、DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團呈離子狀態(tài)，不同相對分子質量DNA進行瓊脂糖凝膠電泳時可分開成不同條帶，相同分子量的為一條帶。用某種限制性核酸內切酶完全酶切質粒后，電泳后出現(xiàn)3條帶。下列敘述正確的是（）A.該質粒上只有3個酶切位點B.瓊脂糖凝膠電泳可以用來分離DNAC.外加電場時，DNA向正極泳動D.瓊脂糖帶負電荷，有利于DNA的泳動13、2019年，中國科學院神經(jīng)科學研究所利用CRISPR—Cas9基因編輯技術，用基因敲除的猴的體細胞通過克隆技術培育出5只克隆疾病猴。下列相關敘述錯誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，可減少個體差異對實驗的干擾B.受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎都成功發(fā)育為克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機制和開發(fā)相應藥物D.可以運用該基因編輯技術進行生殖性克隆人的研究評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)14、下圖表示哺乳動物精子和卵細胞發(fā)生和成熟的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）③過程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來的；④過程在__________內完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質和透明帶。為了阻止多精入卵，會發(fā)生__________反應和__________反應。

（3）精子的發(fā)生開始的時期是__________；雌性動物卵泡的形成的時期是__________。

（4）初級卵母細胞進行Ⅰ過程是在__________時期完成的，Ⅱ過程是在__________過程中完成的。15、______——“分子手術刀”16、___________（簡稱PCR）是一種____________迅速_______________的技術，它能以極少數(shù)的DNA為模板，在幾個小時內復制出上百萬份的DNA拷貝。17、在日常生活中，我們還遇到哪些有關生物技術安全與倫理問題？我們能基于所學生物學知識參與這些問題的討論嗎？嘗試舉一個實例加以說明______。18、基因工程是蛋白質工程的關鍵技術；蛋白質工程是基因工程的延伸。有人對基因工程和蛋白質工程的關系進行了比較，并歸納為下表。

基因工程與蛋白質工程的比較。比較項目蛋白質工程蛋白質工程原理中心法則中心法則區(qū)別過程獲取目的基因→構建表達載體→導入受體細胞→目的基因的檢測與鑒定預期蛋白質功能→設計蛋白質結構→推測氨基酸序列→合成DNA→表達出蛋白質實質定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需要的生物類型或生物產(chǎn)品（基因的異體表達）定向改造蛋白質的分子結構以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質定向改造蛋白質的分子結構以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質結果生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質聯(lián)系蛋白質工程是第二代基因工程

上表的比較是否正確？如果有不妥之處，嘗試進行修改。_________評卷人得分四、判斷題(共2題，共4分)19、雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯誤20、轉入油菜的抗除草劑基因，可能通過花粉傳入環(huán)境中。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共15分)21、被稱為“水中小白鼠”的斑馬魚是一種體長4厘米左右的熱帶淡水魚；與人類基因同源性高達87%，并有相似的器官；生理功能和信號通路。由于發(fā)育周期短、費用低、體外受精、透明等優(yōu)點，斑馬魚現(xiàn)在越來越廣泛地應用于毒性檢測、疾病模型創(chuàng)制、藥物篩選等領域中。

研究人員欲通過使胰島素基因表達受阻從而構建糖尿病模型斑馬魚。嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑；通過將其注入斑馬魚受精卵可阻礙相關基因的表達。針對其作用原理，現(xiàn)有兩種假說：

假說1：嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內含子2的對應序列不能被剪切。

假說2：嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內含子2和外顯子3的對應序列同時被剪切。

為了驗證上述假說；研究人員進行了如下實驗：

(1)從受精卵發(fā)育了3天的實驗組和對照組的細胞中提取總RNA，再通過逆轉錄獲得cDNA。若假說1成立，選擇上圖所示引物2和引物3進行PCR后的結果為______（填字母）。A．實驗組有雜交帶B．實驗組無雜交帶C．對照組有雜交帶D．對照組無雜交帶(2)若要證明假說2成立，進行PCR時，需要選擇上圖所示引物有____________。

(3)采用PCR技術擴增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)為了獲取大量斑馬魚胚胎干細胞用于藥物篩選，可加入__________________，用于分散斑馬魚囊胚中的__________________。再取分散細胞作為初始材料進行______培養(yǎng)，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細胞作為______細胞，以提高斑馬魚胚胎干細胞的數(shù)量。22、下圖是某同學設計的傳統(tǒng)發(fā)酵裝置示意圖。比較傳統(tǒng)發(fā)酵技術與現(xiàn)代發(fā)酵工程；回答下列問題：

(1)傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒的原理是______。請設計簡單的實驗驗證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精（不考慮發(fā)酵液中葡萄糖的影響），寫出實驗思路并預期實驗結果與結論______。

(2)傳統(tǒng)發(fā)酵技術一般以天然存在的______發(fā)酵，品質不一，現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵一般為單一菌種發(fā)酵，品質較高。自制的果酒并非商品意義上的產(chǎn)品，在實際生產(chǎn)中還需要經(jīng)過______裝瓶等過程才能獲得成品酒。

(3)若要測定發(fā)酵罐中酵母菌的種群密度，取10mL發(fā)酵液稀釋1000倍，利用25×16的血細胞計數(shù)板，觀察并統(tǒng)計到中方格中的酵母菌平均數(shù)為9個，則每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量約是______個。

(4)利用上圖中裝置釀酒與釀醋時，操作上的最主要的區(qū)別是______。23、嗜熱土壤芽孢桿菌產(chǎn)生的β-萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶。為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應用；開展了以下實驗。如圖為質粒限制酶酶切圖譜，如表為幾種限制酶的識別序列及酶切位點。請回答下列問題：

(1)通常情況下，獲得的目的基因需要進行擴增，最簡便的方法是_________技術。

(2)分析上圖，可選擇_______和_______兩種不同的限制酶切割質粒，以防止質粒自身環(huán)化。質粒被切割后，可用_______將其與目的基因連接。在動物基因工程中將目的基因導入受體細胞時通常的方法是_______。

(3)大腸桿菌不能降解纖維素，但轉入上述建構好的表達載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因為_______。

(4)蛋白質工程是二代基因工程，它的基本途徑是從預期的蛋白質功能出發(fā)→_______→_______→找到相對應的脫氧核苷酸序列。評卷人得分六、綜合題(共4題，共16分)24、酶是細胞合成的生物催化劑；已經(jīng)從實驗室走進人們的生產(chǎn)；生活。請結合酶在食品、醫(yī)藥方面的應用來回答問題：

（1）腐乳又稱豆腐乳，是中國流傳數(shù)千年的特色傳統(tǒng)民間美食。經(jīng)過發(fā)酵的腐乳易于消化吸收，是因為毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質分解成_____________。在制作腐乳過程中，加鹽的作用是_____________（答出兩點即可）。

（2）從細胞中提取出的酶，應置于緩沖溶液中，原因是緩沖溶液能夠_____________。若采用凝膠色譜法對酶進行純化，裝填色譜柱前應將凝膠加入洗脫液并用沸水浴加熱，用沸水加熱的優(yōu)點有__________（答出兩點即可）。

（3）“多酶片”是經(jīng)特殊工藝制成的雙層藥片，可用于治療消化不良。內層是腸溶衣（不易溶于胃液，可溶于腸液）包裹的胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶，外層是糖衣（可溶于胃液）包裹的胃蛋白酶。為使藥物充分發(fā)揮作用，使用時建議____________（填“整片吞服”或“嚼碎服用”），理由是________________________。25、新型冠狀病毒(RNA病毒)可通過表面的刺突蛋白(S蛋白)與人呼吸道黏膜上皮細胞的ACE2受體結合；侵入人體引起肺炎。抗體可阻斷病毒的黏附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點之一。如圖為篩選；制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖，序號①～④表示細胞。據(jù)圖回答下列問題：

(1)診斷是否感染新型冠狀病毒，可通過咽拭子取樣，其檢測的是病毒的________，還可采集血液樣本檢查血清中________________；另外通過胸透檢測胸部是否有病毒侵染的陰影；也可確診。

(2)研制抗S蛋白單克隆抗體時，需先給小鼠注射S蛋白以激活小鼠的免疫細胞。圖中①、②分別表示______________、______________，用選擇性培養(yǎng)基篩選獲得③，再經(jīng)多次篩選出的④為______________，該細胞的特點是_______________________。

(3)細胞①、②融合常用的化學法是用________作為誘導劑。26、重疊延伸PCR技術是采用具有互補末端的引物；使PCR產(chǎn)物形成了重疊鏈，從而在隨后的擴增反應中通過重疊鏈的延伸，將不同來源的擴增片段重疊拼接起來的技術，可通過定點誘變在體外改造DNA分子，并將改造后的目的基因導入質粒構建目的基因表達載體。

(1)上圖所示的重疊延伸PCR技術中，PCR1的引物是_________。PCR4可獲得大量定點誘變目的基因，此時的引物為__________。PCR3時模板DNA不能選擇DNA分子③的原因是___________。

(2)為使重疊延伸PCR技術改造后的目的基因（該基因序列不含圖中限制酶的識別序列）能與載體正確連接，PCR4時，應在基因上、下游引物的_________端分別添加限制酶_________的酶切位點。

(3)將目的基因、質粒及大腸桿菌混合，溫育一段時間后涂在含四環(huán)素的平板上培養(yǎng)，一段時間后平板上長出菌落。這些菌落的菌體內_________（填“一定不一定”）含有目的基因，理由是_________。27、胰蛋白酶抑制劑（TI）可抑制昆蟲蛋白酶活性；阻礙昆蟲消化蛋白質。鹽藻是一種無細胞壁的單細胞真核綠藻，是能在高鹽條件下生長的新型生物反應器。研究人員利用基因工程技術構建TI基因的表達載體，并將其導入鹽藻細胞中，進行了一系列實驗?；卮鹣铝袉栴}：

(1)研究人員利用PCR技術特異性地擴增目的基因的前提是需要___________，以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關重要，將處理溫度控制在90～95℃，是為了___________。

(2)獲取目的基因后，為了構建基因表達載體，還需要使用的酶是___________（答出2種）。構建成功的基因表達載體應含有的結構有目的基因、啟動子、___________（答出3種）等結構。

(3)研究人員將TI基因導入受體細胞后進行了檢測，相關步驟和實驗結果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是___________。據(jù)表分析，該實驗結果說明___________。組別實驗步驟實驗結果①②③③轉基因鹽藻（A組）離心收集三組細胞制備可溶性蛋白質樣品將TI注射到大白兔體內，獲取TI抗體讓TI抗體和樣品進行混合檢測有雜交帶非轉基因鹽藻（B組）無雜交帶無雜交帶陽性對照組（C組）有雜交帶有雜交帶參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、B【分析】【分析】

1；果酒制作原理：酵母菌是兼性厭氧微生物。在缺氧、呈酸性發(fā)酵液中；酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物生長受抑制。酵母菌在無氧條件下進行酒精發(fā)酵。酒精發(fā)酵的溫度，20℃左右。

2；果醋的制作。

（1）菌種：醋酸菌；又名醋酸桿菌。①繁殖方式：二分裂。②代謝類型：異養(yǎng)需氧型。③溫度：30℃-35℃

（2）原理：①當氧氣充足；糖源充足時；醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。④當氧氣充足、缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；制作果酒的酵母菌為真菌；制作果醋的醋酸桿菌為細菌，屬于原核生物，所以，二者菌種在結構上最大的差異是有無成形細胞核，A正確；

B；當氧氣充足、糖源充足時；醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；氧氣充足、缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。要產(chǎn)生醋酸，氧氣必須充足，不能缺乏，B錯誤；

C；醋酸菌的最適溫度高于酵母菌；所以用葡萄酒制作葡萄醋時需將發(fā)酵的溫度適當提高，C正確；

D；酒精與酸性重鉻酸鉀在酸條件下發(fā)生反應生成灰綠色；所以果汁發(fā)酵后是否產(chǎn)生酒精可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，D正確。

故選B。2、B【分析】【分析】

植物細胞工程中在不損傷植物細胞的結構的情況下除去細胞壁的方法是酶解法；植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，即用纖維素酶和果膠酶處理，使細胞壁溶解。

【詳解】

植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠；在不損傷植物細胞內部結構的情況下，可用纖維素酶和果膠酶處理植物細胞，以去除細胞壁，B正確。

故選B。3、A【分析】【分析】

轉基因生物的安全性問題包括：食物安全（滯后效應；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。自然界所有生物共用一套遺傳密碼子；所以一種生物的基因能在另一種生物體內表達。

【詳解】

A；轉基因生物可能擁有特定的某些更適應環(huán)境；更具有競爭力的性狀，則其可能威脅到生態(tài)系統(tǒng)中其他生物的生存，A正確；

B；由于植物與害蟲間是相互選擇的；轉基因抗蟲植物可使昆蟲群體抗性基因頻率增加，B錯誤；

C；由于不同生物共用一套遺傳密碼；所以動物生長激素基因轉入植物后也能表達，C錯誤；

D；即使轉基因植物的外源基因來源于自然界也可能會存在安全性問題；轉基因植物是否存在安全性問題，要通過驗證才能確定，D錯誤。

故選A。

【點睛】4、C【分析】【分析】

分析題圖：首先將4個關鍵基因移植入已分化的肌肉細胞中并表達；使這個肌肉細胞成為具有類似干細胞功能的多能干細胞（iPS細胞），再誘導多能干細胞（iPS細胞）分化形成神經(jīng)細胞；心肌細胞和肝臟細胞等。

【詳解】

A；肌肉細胞中無關鍵基因；因此與iPS細胞的遺傳物質不同，A錯誤；

B；圖示過程中沒有新個體的產(chǎn)生；因此沒有體現(xiàn)出細胞的全能性，B錯誤；

C；用該技術得到的新生器官替換供體病變器官；可避免異體移植產(chǎn)生的免疫排斥反應，C正確；

D；由圖可知；4個關鍵基因的表達使肌肉細胞發(fā)生了“脫分化”，使iPS細胞功能趨向多能化，D錯誤。

故選C。

【點睛】5、D【分析】【分析】

基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運載體：常用的運載體：質粒；噬菌體、動植物病毒。

【詳解】

A；限制酶大多來自原核生物；只能識別DNA分子的特定核苷酸序列，A錯誤；

B；不同限制酶切割后；若黏性末端相同也能連接，B錯誤；

C；基因工程中用到的質粒多是在天然質粒的基礎上進行過人工改造的；C錯誤；

D、T4DNA連接酶是從T4噬菌體中分離得到的；既可以連接粘性末端，也可以連接平末端，但連接平末端的效率相對較低，D正確。

故選D。二、多選題(共8題，共16分)6、B:C【分析】【分析】

1；治療性克?。褐咐每寺〖夹g產(chǎn)生特定細胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類個體。2、分析題圖：圖示為治療性克隆的大概過程，即從患者身上提取一個體細胞核，移植到去核的卵細胞中，形成一個新細胞，經(jīng)過動物細胞培養(yǎng)成胚胎干細胞，經(jīng)過細胞分裂、分化形成組織和器官。

【詳解】

A；人類“治療性克隆”應用的主要技術有核移植、動物細胞培養(yǎng)；屬于生物工程中的動物細胞工程，A正確；

B；由圖可知；該治療過程中應用的主要技術有核移植、動物細胞培養(yǎng)，沒有應用胚胎移植技術，B錯誤；

C；此過程沒有形成完整個體；不能體現(xiàn)胚胎干細胞的全能性，C錯誤；

D；“治療性克隆”與“異體器官移植”相比；器官來自于同一個體，其優(yōu)點之一是避免了免疫排斥反應，D正確。

故選BC。7、A:B【分析】【分析】

1；析題圖：步驟甲為細胞核移植；步驟乙為胚胎移植，其中誘導超數(shù)排卵用的是促性腺激素。

2；動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個胚胎最終發(fā)育為動物。

3；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物體內；使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術。其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體叫“受體”。

【詳解】

A；步驟甲和步驟乙分別是指細胞核移植和胚胎移植作用；所以整個過程用到的技術手段有動物細胞培養(yǎng)（重組胚胎培養(yǎng)）、動物體細胞核移植和胚胎移植等，A正確；

B；誘導超數(shù)排卵所注射的激素是促性腺激素；只能作用于性腺，B正確；

C；重組細胞發(fā)育成早期胚胎所需營養(yǎng)主要來源于去核的卵母細胞；C錯誤；

D；步驟乙中的供體和受體需要同期發(fā)情處理；甲不需要，D錯誤。

故選AB。

【點睛】

分本題結合圖解，考查胚胎工程的相關知識，要求考生識記體外受精的過程及條件；識記早期胚胎培養(yǎng)的過程及條件，能結合圖中信息準確判斷各選項。8、A:B:D【分析】【分析】

1；胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。②配種或人工授精。③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）。對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對胚胎進行移植。⑤移植后的檢查。對受體母牛進行是否妊娠的檢查。

2；胚胎移植的生理學基礎：①動物發(fā)情排卵后；同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。②早期胚胎在一定時間內處于游離狀態(tài)。這就為胚胎的收集提供了可能。③受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應。這為胚胎在受體內的存活提供了可能。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。

【詳解】

A；培育嵌合體的生物學原理是細胞的增殖和分化；克隆動物的生物學原理是動物細胞核具有全能性，兩者的原理不相同，操作方法有差別，A正確；

B；由題干信息“將小鼠誘導性胚胎干細胞（ES）注入到豬的囊胚期胚胎后獲得豬一鼠嵌合體”可知；胚胎干細胞分化程度低，具有分化為成年動物體內的任何一種類型的細胞的潛能，B正確；

C；滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜、胎盤；內細胞團將來發(fā)育為胚胎的各種組織、器官，故應將胚胎干細胞注入豬囊胚的內細胞團處才能獲得豬—鼠嵌合體，C錯誤；

D；若培育出“人—獸嵌合體”將會面臨與克隆人一樣的倫理問題；是不道德的，D正確。

故選ABD。

【點睛】9、A:C【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原；從該動物的脾臟中獲取B淋巴細胞，將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞，最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；利用轉基因鼠技術進行全人源化單克隆抗體；能降低單克隆抗體藥物的免疫排斥反應，A正確；

B；過程①②利用的是轉基因技術；B錯誤；

C；融合后的細胞需要用選擇培養(yǎng)基篩選獲得雜交瘤細胞；還要經(jīng)過克隆化培養(yǎng)、（專一性）抗體檢測等，C正確；

D；B細胞在體外培養(yǎng)條件下不能無限增殖；體外培養(yǎng)B細胞不能獲得大量的單克隆抗體，D錯誤。

故選AC。10、A:D【分析】【分析】

由題圖信息分析可知；圖中首先利用培養(yǎng)基擴增菌體，然后在涂布在平板上，再通過影印法將菌種接種到兩種培養(yǎng)基中，分別是基本培養(yǎng)基；完全培養(yǎng)基；野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長，而氨基酸營養(yǎng)缺陷型菌株由于發(fā)生基因突變無法合成某種氨基酸只能在完全培養(yǎng)基上生長，據(jù)此利用培養(yǎng)基的種類便可以選擇出氨基酸突變株。

【詳解】

A；野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長；氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長，根據(jù)題干信息和圖形分析，圖中①②④中含有菌落，①②④為完全培養(yǎng)基，③中影印處無菌落，③為基本培養(yǎng)基，A正確；

B；紫外線可以提高突變的頻率；而A操作即培養(yǎng)的目的是提高已經(jīng)突變菌株的濃度（A操作不能提高突變率），即增加突變株的數(shù)量，B錯誤；

C；B操作是將菌液滴加到培養(yǎng)基表面；再用涂布器將菌液均勻的涂布在②表面，C錯誤；

D；從圖中可看出；D在③基本培養(yǎng)基中無法生長，在完全培養(yǎng)基中可生長，說明D是氨基酸缺陷型菌落，故經(jīng)C過程影印及培養(yǎng)后，可從④培養(yǎng)基中挑取D菌落進行純化培養(yǎng)，D正確。

故選AD。11、A:B【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)技術：

1；過程：離體的植物組織；器官或細胞(外植體)→愈傷組織→胚狀體→植株(新植體)。

2；原理：植物細胞的全能性。

3；條件：①細胞離體和適宜的外界條件(如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等)；②一定的營養(yǎng)(無機、有機成分)和植物激素(生長素和細胞分裂素)。

【詳解】

A；取材時可選用兔眼藍莓的芽尖等分生組織作為外植體；這是因為芽尖分裂旺盛，且很少帶有病毒，甚至不含毒，A正確；

B；用70%酒精和5%左右次氯酸鈉對外植體消毒時；要控制好時間以避免造成傷害，否則外植體會受到損失，導致實驗失敗，B正確；

C；生長調節(jié)劑應該在培養(yǎng)基滅菌后添加；否則高溫可能使其失去效果，C錯誤；

D；脫毒后的兔眼藍莓果實體積更大；產(chǎn)量更高，后代個體中含病毒較少，但并不是不易被病毒感染，D錯誤。

故選AB。12、B:C:D【分析】【分析】

分析題干：質粒上的DNA分子為環(huán)狀；某種限制性內切酶完全酶切環(huán)狀質粒后，出現(xiàn)3條帶（相同分子量的為一條帶），即3種不同分子量DNA（至少被切割成3條DNA片段），因此環(huán)狀質粒上至少有3個酶切位點。

【詳解】

A；由分析可知；該質粒上至少含有3個酶切位點，A錯誤；

B；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團呈離子狀態(tài)；帶負電，DNA在一定的電場力作用下，在凝膠中向正極泳動，DNA分子越大，泳動越慢，因此瓊脂糖凝膠電泳可以用來分離DNA，B正確；

C；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團呈離子狀態(tài)；帶負電，因此外加電場時，DNA向正極泳動，C正確；

D；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團呈離子狀態(tài)；帶負電，若瓊脂糖帶負電荷，使得電場力增強，有利于DNA向正極泳動，D正確。

故選BCD。13、B:D【分析】【分析】

動物細胞核移植技術是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。

【詳解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的體細胞通過克隆技術（屬于無性繁殖）獲得的；所以其基因組成差異小，可減少個體差異對實驗的干擾，A正確；

B；經(jīng)基因編輯后形成的胚胎不一定都能發(fā)育成克隆疾病猴；B錯誤；

C；克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機制和開發(fā)相應藥物；C正確；

D；不能利用該技術進行克隆人的研究；D錯誤。

故選BD。

【點睛】三、填空題(共5題，共10分)14、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復制；②是減數(shù)分裂，③是精細胞變形為精子過程，④是受精作用；

2；哺乳動物精子和卵子發(fā)生的不同點：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場所唯一（MⅠ和MⅡ的場所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場所不唯一，（MⅠ場所在卵巢，MⅡ場所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機能衰退；多數(shù)哺乳動物卵子的形成和在卵巢內的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來的；④過程是受精過程，在輸卵管內完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質和透明帶，透明帶反應和卵細胞膜反應是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動物精子產(chǎn)生的時期是初情期；雌性動物卵泡細胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級卵母細胞進行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過程中完成的。

【點睛】

本題考查卵細胞的形成過程和受精作用等相關知識，意在考查學生識記相關細節(jié)和解決問題的能力?！窘馕觥扛郀柣w輸卵管透明帶反應卵細胞膜反應初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制性核酸內切酶（限制酶16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】多聚酶鏈式反應體外擴增DNA片段17、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到的有關生物技術安全與倫理問題有：生殖性克隆人倫理問題；試管嬰兒與設計試管嬰兒倫理問題、轉基因產(chǎn)品的安全性與倫理問題和生物武器的安全性等。

例如轉基因產(chǎn)品的安全性：轉基因技術的安全性的爭議；主要集中在兩個方面，一是對人是否安全，二是對環(huán)境的影響。

對人的安全方面；支持轉基因技術的人認為投放市場的轉基因作物都是經(jīng)過充分實驗的，被改變的基因僅限于增加作物的抗??；抗災害能力，并且在北美地區(qū)轉基因食品已經(jīng)使用的很多年，可以說現(xiàn)在美國加拿大20歲左右的年輕人從小就是吃轉基因食品長大的；反對轉基因技術的人認為轉基因食品有害，他們的證據(jù)主要是一位科學家的實驗證明，用轉基因食品喂養(yǎng)的小白鼠癌癥發(fā)病率明顯升高，但問題是這個實驗只成功過一次，后來別的科學家在相同的條件下都沒能再現(xiàn)這個實驗結果。

在環(huán)境方面對轉基因技術的爭議是最大的；也是歐洲人反對轉基因技術的重要依據(jù)，反對人持有的觀點是，通過改良基因創(chuàng)造出抵抗病蟲害和其他災害的植物，這種技術如果失去控制可能會把農(nóng)作物改造成適應性極強的超級植物，自然平衡使任何生物都不可能占絕對優(yōu)勢地位，但轉基因技術產(chǎn)生的超級植物可能會打破自然平衡而泛濫成災。

倫理問題：由于轉基因技術創(chuàng)新打破了物種界限,使不同物種間的基因可以進行前所未有的新組合,其可能造成的危害難以預見,這就使轉基因技術創(chuàng)新呈現(xiàn)前所未有的復雜性,并不可避免地會引發(fā)很多全新的社會倫理問題,引出種種有關生物科學家的道德責任和學術自由的哲學爭論。在轉基因植物技術創(chuàng)新中,功利主義的預設和學術自由的主張必須以人類的價值、尊嚴和社會公正為前提條件。相關領域的科學家必須擔當起必要的道德責任,把握好倫理橫桿,以促使轉基因植物技術創(chuàng)新沿著科學的軌道健康發(fā)展?！窘馕觥吭谌粘Ｉ钪?；我們遇到的有關生物技術安全與倫理問題有：生殖性克隆人倫理問題；試管嬰兒與設計試管嬰兒倫理問題、轉基因產(chǎn)品的安全性與倫理問題和生物武器的安全性等。

例如轉基因產(chǎn)品的安全性：轉基因技術的安全性的爭議；主要集中在兩個方面，一是對人是否安全，二是對環(huán)境的影響。

對人的安全方面；支持轉基因技術的人認為投放市場的轉基因作物都是經(jīng)過充分實驗的，被改變的基因僅限于增加作物的抗??；抗災害能力，并且在北美地區(qū)轉基因食品已經(jīng)使用的很多年，可以說現(xiàn)在美國加拿大20歲左右的年輕人從小就是吃轉基因食品長大的；反對轉基因技術的人認為轉基因食品有害，他們的證據(jù)主要是一位科學家的實驗證明，用轉基因食品喂養(yǎng)的小白鼠癌癥發(fā)病率明顯升高，但問題是這個實驗只成功過一次，后來別的科學家在相同的條件下都沒能再現(xiàn)這個實驗結果。

在環(huán)境方面對轉基因技術的爭議是最大的；也是歐洲人反對轉基因技術的重要依據(jù)，反對人持有的觀點是，通過改良基因創(chuàng)造出抵抗病蟲害和其他災害的植物，這種技術如果失去控制可能會把農(nóng)作物改造成適應性極強的超級植物，自然平衡使任何生物都不可能占絕對優(yōu)勢地位，但轉基因技術產(chǎn)生的超級植物可能會打破自然平衡而泛濫成災。

倫理問題：由于轉基因技術創(chuàng)新打破了物種界限,使不同物種間的基因可以進行前所未有的新組合,其可能造成的危害難以預見,這就使轉基因技術創(chuàng)新呈現(xiàn)前所未有的復雜性,并不可避免地會引發(fā)很多全新的社會倫理問題,引出種種有關生物科學家的道德責任和學術自由的哲學爭論。在轉基因植物技術創(chuàng)新中,功利主義的預設和學術自由的主張必須以人類的價值、尊嚴和社會公正為前提條件。相關領域的科學家必須擔當起必要的道德責任,把握好倫理橫桿,以促使轉基因植物技術創(chuàng)新沿著科學的軌道健康發(fā)展。18、略

【分析】【詳解】

蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規(guī)律及其生物功能的關系作為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質進行改造，或制造一種新的蛋白質，其結果是生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質。【解析】蛋白質工程的結果是生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質四、判斷題(共2題，共4分)19、A【分析】【詳解】

雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力，精子獲能的過程不是獲得能量的過程，是獲得受精能力的過程，可在獲能液或受精液中完成，故正確。20、A【分析】【詳解】

轉入到油菜的抗除草劑基因，則可能通過減數(shù)分裂進入到花粉細胞中，進而傳入環(huán)境中的其他生物體內。本說法正確。五、實驗題(共3題，共15分)21、略

【分析】【分析】

根據(jù)題干信息分析；糖尿病模型斑馬魚的構建的原理是使胰島素基因表達受阻，而使胰島素基因表達受阻是通過給斑馬魚受精卵注射嗎啉反義寡核苷酸實線的；嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑，其作用的機理有兩種假說：可能是導致RNA前體上內含子2的對應序列不能被剪切，也可能是導致RNA前體上內含子2和外顯子3的對應序列同時被剪切。

(1)

根據(jù)引物2和引物3在胰島素基因片段上的位置；通過PCR擴增能得到內含子2的序列，若假說1成立，即嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內含子2的對應序列不能被剪切，故實驗組中應含有內含子2的序列，而對照組的該片段被切除了，因此用引物2和引|物3進行PCR反應，其結果為實驗組中有雜交帶，而對照組中無雜交帶。

故選AD。

(2)

若要證明假說2成立；即RNA前體上內含子2和外顯子3的對應序列同時被剪切下去，則可以選擇圖示引物5和引物2；引物5和引物6進行PCR，觀察是否有雜交帶出現(xiàn)。

(3)

由于DNA聚合酶不能從頭合成DNA；而只能從引物3′端延伸DNA鏈，因此DNA復制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶處理斑馬魚囊胚中的內細胞團；可以獲得分散的斑馬魚胚胎干細胞，然后對其進行原代培養(yǎng)，接著分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細胞作為飼養(yǎng)層細胞，以提高斑馬魚胚胎干細胞的數(shù)量。

【點睛】

解答本題的關鍵是掌握基因的表達的相關知識點，明確基因轉錄出來的mRNA是要經(jīng)過加工成為成熟的mRNA才能作為翻譯的模板的，并能夠根據(jù)題干提取有效信息進行答題?！窘馕觥?1)AD

(2)5、65；2

(3)DNA聚合酶不能從頭合成DNA；只能從3′端延伸DNA鏈，因此DNA復制需要引物。（得分點：“只能從3′端延伸DNA鏈”）

(4)胰蛋白酶內細胞團原代飼養(yǎng)層22、略

【分析】【分析】

參與果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陳代謝的類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，較適宜的發(fā)酵溫度為18~30℃。在無氧的環(huán)境中酵母菌把糖類分解為酒精和二氧化碳。在果酒制作過程中檢測發(fā)酵液是否含有酒精，取樣后滴加適量酸性重鉻酸鉀溶液并振蕩，若觀察到溶液顏色的變化是橙色變成灰綠色，則說明發(fā)酵液中含有酒精。

【詳解】

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒都是利用了酵母菌的無氧呼吸。酵母菌屬于真核生物；其代謝類型是兼性厭氧型，在有氧條件下進行大量增殖，在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精。

橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與乙醇（即酒精）發(fā)生化學反應；變成灰綠色，該實驗目的是驗證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精，因此實驗自變量是是否加入發(fā)酵液，因變量為溶液顏色變化。對照組中應加入酒精作為陽性對照。實驗過程中應遵循等量原則；單一變量原則等，因此實驗思路是：取兩支試管分別標號A、B，A試管中各加入2ml發(fā)酵液，作為實驗組，B試管中各加入2ml酒精，作為對照組，兩試管中都加入適量酸性重鉻酸鉀，振蕩后觀察試管中顏色變化，AB兩試管都變?yōu)榛揖G色，即可驗證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精。

（2）傳統(tǒng)發(fā)酵技術一般不進行嚴格滅菌操作；因此其發(fā)酵菌種為天然的混合菌種?，F(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀制果酒不同于自制果酒，需要經(jīng)過沉淀；過濾、滅菌、裝瓶等過程才能獲得成品酒。

（3）25×16型的血細胞計數(shù)板計算公式：酵母細胞個數(shù)/1mL=1個中方格中酵母菌數(shù)×25×10000×稀釋倍數(shù)，因此該實驗中每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）釀酒利用酵母菌的無氧呼吸，需要關閉充氣口，釀醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充氣孔中充入無菌空氣?！窘馕觥?1)酵母菌是兼性厭氧微生物；在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精實驗思路：取兩支試管分別標號A；B，向A試管中各加入2ml發(fā)酵液，向B試管中各加入2ml酒精，向AB兩試管各滴加0．5ml溶有0．1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液（或酸性重鉻酸鉀），并輕輕震蕩，觀察試管中溶液顏色變化。

(2)混合菌種沉淀；過濾、滅菌。

(3)2.25×109

(4)釀酒時需關閉充氣口，釀醋時則需向充氣孔中充入無菌空氣23、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作過程主要包括四個步驟：目的基因的獲??；基因表達載體的構建；將目的基因導人受體細胞；目的基因的檢測與鑒定。（1）目的基因的獲取方法目的基因的獲取方法主要有從自然界已有的物種中分離出來（如鳥槍法從基因文庫或cDNA文庫中獲?。⑷斯ず铣桑ǔＳ玫姆椒ㄓ谢瘜W合成法和反轉錄法）、PCR技術擴增目的基因。（2）構建基因表達載體；需分別用限制酶切割目的基因和質粒，用限制酶切割質粒時，選擇的限制酶不可以破壞質粒上的標記基因和復制原點、啟動子、終止子等必須的結構。用DNA連接酶連接，構成重組質粒。（3）將目的基因導入動物細胞常用顯微注射法：將含有目的基因的表達載體提純→從雌性動物體內取出卵（可在體外受精，也可在體內受精）→采用顯微注射儀進行顯微注射→將注射了目的基因的受精卵經(jīng)胚胎早期培養(yǎng)一段時間后，移植到雌性動物的輸卵管或子宮內，使其發(fā)育成為具有新性狀的動物。

2；蛋白質工程的基本途徑是從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列。

【詳解】

（1）獲取目的基因的方法主要有三種；最簡便的是PCR技術。

（2）用限制酶切割質粒時；選擇的限制酶不可以破壞質粒上的標記基因和復制原點；啟動子、終止子等必須的結構，由圖可知可選用NdeⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割質粒。用DNA連接酶將切割后的質粒與目的基因連接。在動物基因工程中將目的基因導入受體細胞時通常的方法是顯微注射法。

（3）上述建構好的表達載體含有能夠表達β-萄糖苷酶(BglB)的基因；轉基因大腸桿菌能夠分泌出有活性的β-萄糖苷酶，所以能夠降解纖維素。

（4）蛋白質工程的基本途徑是從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列?！窘馕觥?1)PCR

(2)NdeⅠBamHⅠDNA連接酶顯微注射法。

(3)轉基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶。

(4)設計預期的蛋白質結構推測應有的氨基酸序列六、綜合題(共4題，共16分)24、略

【分析】【分析】

（1）腐乳的發(fā)酵在多種微生物的協(xié)同作用下進行；其中起主要作用的是毛霉，它是一種絲狀真菌，新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以將脂肪水解成甘油和脂肪酸。

2；凝膠色譜法的原理：根據(jù)相對分子質量的大小來分離蛋白質的有效方法；相對分子質量小的蛋白質容易進入凝膠內部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質量大的蛋白質不容易進入凝膠內部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質量不同的蛋白質得以分離。

【詳解】

（1）參與腐乳發(fā)酵的微生物主要是毛霉；其產(chǎn)生的蛋白酶可將豆腐中的大分子有機物蛋白質分解為小分子肽和氨基酸。腐乳制作過程中；加鹽可以析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，同時抑制微生物的生長，避免豆腐塊變質。要制作出色香味俱全的腐乳，關鍵在于的鹵湯配制。

（2）凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質量的大小來分離蛋白質的有效方法。從細胞中提取出的酶；應置于緩沖溶液中，可通過緩沖液調節(jié)外界的酸和堿溶液對溶液pH的影響，維持pH基本不變。處理色譜柱填料時，可以將加入洗脫液的濕凝膠用沸水浴加熱，以加速膨脹，這種方法不但能夠節(jié)省時間，而且還可以除去凝膠中可能帶有的微生物，排除膠粒中的空氣。

（3）多酶片內層是腸溶衣（不易溶于胃液；可溶于腸液）包裹的胰蛋白酶；胰脂肪酶、胰淀粉酶，外層是糖衣（可溶于胃液）包裹的胃蛋白酶。為使藥物充分發(fā)揮作用，使用時建議整片吞服，理由是整片吞服使腸溶衣在胃液中不被破壞，確保腸溶衣包裹的酶在腸溶液中發(fā)揮作用，若嚼碎服用，腸溶衣包裹的酶釋放后會在酸性的胃液中失活，無法發(fā)揮作用。

【點睛】

本題主要考查腐乳的制作、蛋白質的提取和分離、多酶片的作用效果等，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實驗的原理、實驗采用的方法、實驗現(xiàn)象等，需要考生在平時的學校過程中注意積累?！窘馕觥啃》肿与暮桶被嵛龀龆垢械乃?，使豆腐塊變硬，在后期的制作中不會過早酥欄；同時抑制微生物的生長，避免豆腐塊變質；調味抵制外界的酸和堿溶液對溶液pH的影響，維持pH基本不變節(jié)約時間；除去凝膠中可能帶有的微生物；排除凝膠內的空氣整片吞服整片吞服使腸溶衣在胃液中不被破壞，確保腸溶衣包裏的酶在