《卷煙 側(cè)流煙氣中羰基化合物的測(cè)定 高效液相色譜法》試驗(yàn)報(bào)告

PAGEPAGE1《卷煙側(cè)流煙氣中羰基化合物的測(cè)定高效液相色譜法》實(shí)驗(yàn)報(bào)告為了配合煙草行業(yè)采標(biāo)工作的開展，國(guó)家煙草專賣局國(guó)煙科[2009]第100號(hào)文“2009年度國(guó)家煙草專賣局標(biāo)準(zhǔn)制（修）訂項(xiàng)目計(jì)劃”下達(dá)的工作計(jì)劃，受國(guó)家煙草專賣局（中國(guó)煙草總公司）委托、湖南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司牽頭承擔(dān)、中國(guó)煙草標(biāo)準(zhǔn)化研究中心協(xié)助管理，在紅塔煙草（集團(tuán)）有限責(zé)任公司、北京卷煙廠、福建中煙工業(yè)有限責(zé)任公司、中國(guó)煙草質(zhì)檢中心等相關(guān)協(xié)助單位的積極參與下，進(jìn)行了《卷煙側(cè)流煙氣中主要羰基化合物的測(cè)定高效液相色譜法》轉(zhuǎn)化為行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的工作。本標(biāo)準(zhǔn)中卷煙側(cè)流煙氣中主要羰基化合物的收集及樣品前處理部分主要依據(jù)1999年加拿大衛(wèi)生部頒布的側(cè)流煙氣中羰基化合物的檢測(cè)方法（DeterminationofSelectedCarbonylsinSidestreamTobaccoSmoke.No.T-204）修改采用而形成；樣品的分析與檢測(cè)部分則以煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YC/T254-2008:《卷煙主流煙氣中主要羰基化合物的測(cè)定高效液相色譜法》為參考。項(xiàng)目組根據(jù)我國(guó)國(guó)情，對(duì)該方法進(jìn)行了驗(yàn)證試驗(yàn)。在試驗(yàn)中我們選取了采用魚尾罩收集卷煙側(cè)流煙氣、高效液相色譜法測(cè)定側(cè)流煙氣中的羰基化合物，并對(duì)檢測(cè)方法中涉及的相關(guān)條件試驗(yàn)及方法回收率、精密度、檢出限等指標(biāo)進(jìn)行了考察。嚴(yán)格按照推薦方法規(guī)定的測(cè)試要求，分別在紅塔煙草（集團(tuán)）有限責(zé)任公司、北京卷煙廠、福建中煙工業(yè)有限責(zé)任公司、中國(guó)煙草質(zhì)檢中心進(jìn)行了對(duì)比試驗(yàn)驗(yàn)證。范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了卷煙側(cè)流煙氣中主要羰基化合物的高效液相色譜測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于卷煙側(cè)流煙氣中主要羰基化合物的測(cè)定。規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T5606.1卷煙第1部分：抽樣GB/T19609卷煙用常規(guī)分析用吸煙機(jī)測(cè)定總粒相物和焦油原理采用側(cè)流吸煙機(jī)抽吸卷煙，側(cè)流煙氣通過魚尾罩，粒相部分用經(jīng)2,4-二硝基苯肼（2,4-DNPH）溶液處理過的玻璃纖維濾片截留后，氣相部分用2,4-二硝基苯肼（2,4-DNPH）溶液吸收捕集卷煙側(cè)流煙氣中的羰基化合物并衍生化，通過高效液相色譜分別定量測(cè)定粒相、氣相部分衍生化合物的含量來(lái)對(duì)卷煙側(cè)流煙氣中主要羰基化合物進(jìn)行定量分析。試劑與材料除特別要求以外，均應(yīng)使用分析純?cè)噭?。去離子水，應(yīng)符合GB/T6682中的要求（使用前經(jīng)0.45μm濾膜過濾）。乙腈，色譜純（或分析純經(jīng)重蒸后使用）。高氯酸。吡啶。4.62,4-二硝基苯肼（2,4-DNPH），使用前應(yīng)經(jīng)乙腈重結(jié)晶。4.7甲醛、乙醛、丙酮、丙烯醛、丙醛、巴豆醛、2丁酮、丁醛的2，4一二硝基苯腙衍生化合物，純度應(yīng)大于97%。衍生化試劑：稱取1.5g經(jīng)提純的2,4-DNPH固體（4.6）溶解于約中(4.3)，加入200μm高氯酸（4.4）后，乙腈(4.3)定容至100mL。濾片萃取液：2%（體積分?jǐn)?shù)）的吡啶（4.5）/乙腈（4.3）溶液。4.10氣體吸收液：稱取2.5g經(jīng)提純的2,4-DNPH固體（4.6）溶解于約1000mL乙腈中(4.3)，加入2mL羰基化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：在50mL燒杯中分別稱取約50mg左右的甲醛、乙醛、丙酮、丙烯醛、丙醛、巴豆醛、2丁酮、丁醛的2，4一二硝基苯腙衍生化合物（4.7），精確至0.0001g，加入約30mL乙腈(4.3)完全溶解后，轉(zhuǎn)移至100mL的容量瓶中，用乙腈(4.3)定容至刻度。該標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液應(yīng)使用棕色容量瓶配制，并在-20℃4.11.2一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)溶液：移取10mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（4.11.1）至500mL的容量瓶中，用乙腈(4.3)定容稀釋至刻度。該一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)在使用前配制。羰基化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液：分別準(zhǔn)確移取0.1mL、0.2mL、0.5mL、1mL、5mL、25mL一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)溶液（4.11.2）至50mL容量瓶中，用乙腈(4.3)定容至刻度。此6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液以及一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)溶液（4.11.2）為系列標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)溶液。該羰基化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)在使用前配制。儀器與設(shè)備GB/T19609所規(guī)定的各項(xiàng)儀器設(shè)備及下述各項(xiàng)。分析天平，精確至0.0001g。卷煙側(cè)流吸煙機(jī)。高效液相色譜儀，具有柱溫箱、梯度洗脫功能、紫外檢測(cè)器。推薦色譜預(yù)柱：4.3×10mm；固定相C18（DIONEXExplosivesE2）；填料粒度:5μm。推薦色譜分析柱：4.6×250mm；固定相C18（DIONEXExplosivesE2）；填料粒度:5μm。旋轉(zhuǎn)式機(jī)械振蕩器。有機(jī)相濾膜，0.45μm。真空干燥器。魚尾罩。氣體吸收瓶，80mL（規(guī)格參見附錄A圖A.1）。采樣及試樣制備6.1按GB/T5606.1抽取實(shí)驗(yàn)室樣品。6.2玻璃纖維濾片的處理和準(zhǔn)備將兩張玻璃纖維濾片疊放，用移液管均勻加入2mL2.4-DNPH衍生化試劑（4.8），放置于真空干燥器（5.6）中晾干。在卷煙抽吸前，在晾干的濾片上準(zhǔn)確加入1mL2.4-DNPH衍生化試劑（4.8）。卷煙側(cè)流煙氣捕集裝置粒相部分中的羰基化合物用經(jīng)2,4-DNPH溶液處理過的玻璃纖維濾片（6.2）截留，氣相部分由兩個(gè)80mL氣體吸收瓶捕集，吸收瓶中各裝入30mL氣體吸收液(4.10),檢查裝置的氣密性。捕集裝置示意圖見下圖B。1——魚尾罩；5——?dú)怏w流量計(jì)；2——側(cè)流煙氣捕集器（劍橋?yàn)V片）；6——（連接）泵；3——?dú)怏w吸收瓶；7——主流煙氣捕集器（劍橋?yàn)V片）；4——?dú)怏w吸收液；8——主流煙氣。圖B單個(gè)孔道卷煙側(cè)流煙氣捕集裝置示意圖6.4卷煙的抽吸校準(zhǔn)側(cè)流空氣流速為3L/min，按GB/T19609規(guī)定條件抽吸卷煙，每個(gè)通道抽吸兩支，卷煙抽吸結(jié)束后，空吸2口，取出側(cè)流煙氣捕集器，放置3分鐘，使煙氣中的羰基化合物充分與DNPH進(jìn)行反應(yīng)。6.5實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)空氣空白樣品的測(cè)定取同樣卷煙，不點(diǎn)燃，每支進(jìn)行7口空吸，然后按照上述條件進(jìn)行處理，得到實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)空氣空白樣品，在最后的測(cè)定結(jié)果中要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)空氣空白扣除。測(cè)定次數(shù)每個(gè)樣品平行測(cè)定兩次。樣品前處理和分析7.1粒相(濾片)部分處理抽吸完卷煙后，取出截留側(cè)流煙氣的玻璃纖維濾片，將捕集器內(nèi)壁用濾片擦干凈，將濾片放入100mL錐型瓶中，準(zhǔn)確加入50.0mL濾片萃取液(4.9)，機(jī)械振蕩10min，靜置2min，取適量萃取液用0.45μm濾膜（5.5）過濾后，移到2mL色譜瓶中，即可進(jìn)行HPLC分析。氣相(魚尾罩+吸收液）部分處理魚尾罩內(nèi)壁用約30mL氣體吸收液(4.10)淋洗至150mL容量瓶中。7.2.2將兩個(gè)氣體吸收瓶中吸收液轉(zhuǎn)移至150mL容量瓶中，分別用3mL～5mL乙腈(4.3)淋洗吸收瓶與側(cè)流煙氣接觸部分，每個(gè)吸收瓶各洗滌2次～3次，淋洗液并入150mL容量瓶中，再向150mL容量瓶中加入5.0mL吡啶（4.5），用乙腈(4.3)定容至刻度，搖勻，靜置2min，取適量萃取液用0.45μm濾膜（5.5）過濾后，移到2mL色譜瓶中，即可進(jìn)行HPLC分析。高效液相色譜儀按照儀器說明書操作高效液相色譜儀進(jìn)行。流動(dòng)相A：水；流動(dòng)相B：乙腈；柱溫： 30℃柱流量： 1.0mL/min；進(jìn)樣體積：10μL；檢測(cè)器：檢測(cè)波長(zhǎng)：365nm；分析時(shí)間約為45分鐘。液相色譜梯度洗脫程序：0min:A-50%、B-50%；20min:A-50%、B-50%；25min:A-40%、B-60%；30min:A-40%、B-60%；35min:A-20%、B-80%；40min:A-10%、B-90%；41min:A-50%、B-50%；45min:A-50%、B-50%。7.4測(cè)定用高效液相色譜測(cè)定一系列羰基化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液（4.12），得到8種羰基化合物的積分峰面積，用峰面積為縱坐標(biāo)，微克每毫升（μg/mL）計(jì)的羰基化合物濃度（注意將腙的濃度換算為羰基化合物的濃度）作為橫坐標(biāo)分別建立8種羰基化合物的校正曲線，對(duì)校正數(shù)據(jù)進(jìn)行線性回歸，R2應(yīng)不小于0.99。分別測(cè)定卷煙側(cè)流煙氣中的粒相、氣相部分樣品，從樣品中羰基化合物的峰面積分別計(jì)算每一個(gè)卷煙側(cè)流煙氣粒相、氣相部分樣品中8種羰基化合物的濃度，每一樣品粒相、氣相部分濃度之和即為該樣品的最終測(cè)定濃度。結(jié)果的計(jì)算與表述卷煙側(cè)流煙氣粒相物中8種羰基化合物的傳輸量按式(1)計(jì)算得出。y1=c1×V1/n················(1)式中：y1——每支卷煙側(cè)流煙氣粒相物中羰基化合物的傳輸量，單位為微克每支(μg/支)；c1——濾片萃取液中羰基化合物的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL)；V1——濾片萃取液的體積，單位為毫升(mL)；n——每次測(cè)試抽吸卷煙支數(shù)，單位為支。卷煙側(cè)流煙氣氣相中8種羰基化合物的傳輸量按(2)計(jì)算得出。y2=c2×V2/n················(2)式中：y2——每支卷煙側(cè)流煙氣氣相物中羰基化合物的傳輸量，單位為微克每支(μg/支)；c2——150mL容量瓶樣品溶液中羰基化合物的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL)；V2——150mL容量瓶定容體積，單位為毫升(mL)；n——每次測(cè)試抽吸卷煙支數(shù)，單位為支。卷煙側(cè)流煙氣的氰化氫釋放量按式(3)計(jì)算得出。y=y1+y2·················(3)式中：y——每支卷煙側(cè)流煙氣中羰基化合物的最終測(cè)定傳輸量，單位為微克每支(μg/支)；y1——每支卷煙側(cè)流煙氣粒相物中羰基化合物的傳輸量，單位為微克每支(μg/支)；y2——每支卷煙側(cè)流煙氣氣相物中羰基化合物的傳輸量，單位為微克每支(μg/支)；以兩次測(cè)定的平均值作為測(cè)定結(jié)果（應(yīng)扣除實(shí)驗(yàn)室空白），精確至0.1μg/支。兩次平行測(cè)定結(jié)果之間的相對(duì)偏差應(yīng)小于10％。結(jié)果與討論9.1卷煙側(cè)流煙氣抽吸裝置各部位羰基化合物含量分布參照裝置圖B，每一通道連接串聯(lián)3個(gè)80mL氣體吸收瓶（由左至右依次為前、中、后，分別簡(jiǎn)稱為前置、中置和后置吸收瓶），按要求使用兩張?zhí)幚磉^的玻璃纖維濾片（6.2），平行1組5個(gè)通道，每一吸收瓶各放入30毫升氣體吸收液（4.10），校準(zhǔn)真空泵流速為3L/分鐘，以同一種卷煙樣品作為樣煙，每通道抽吸2支樣煙，按前述方法抽吸，抽吸結(jié)束后分別對(duì)各部位進(jìn)行如下處理：9.1.1卷煙側(cè)流煙氣濾片：放入100mL錐形瓶中，加入50mL濾片萃取液（4.9），搖振10分鐘，靜置2分鐘，取適量萃取液用0.45μm濾膜（5.5）過濾后，移到2mL色譜瓶中，即可進(jìn)行HPLC分析。9.1.2魚尾罩：魚尾罩內(nèi)壁用約30mL氣體吸收液(4.10)淋洗至50mL容量瓶中，向50mL容量瓶中加入1mL吡啶（4.5），乙腈(4.3)定容至刻度，搖勻，靜置2min，取適量溶液用0.45μm濾膜（5.5）過濾后，移到2mL色譜瓶中，進(jìn)行HPLC分析。9.1.3前置吸收瓶：將30mL吸收液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，每次用約3mL乙腈(4.3)淋洗吸收瓶?jī)?nèi)壁、與側(cè)流煙氣接觸部分，洗滌2次～3次，淋洗液一同并入50mL容量瓶中，再向50mL容量瓶中加入1mL吡啶（4.5），用乙腈(4.3)定容至刻度，搖勻，靜置2min，取適量萃取液用0.45μm濾膜（5.5）過濾后，移到2mL色譜瓶中，進(jìn)行HPLC分析。9.1.4中置吸收瓶：將30mL吸收液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，后處理同9.1.3；9.1.5后置吸收瓶：將30mL吸收液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，后處理同9.1.3；將上述各部位處理液進(jìn)樣分析，檢測(cè)結(jié)果見下表1。表1卷煙側(cè)流煙氣抽吸裝置各部位羰基化合物含量分布檢測(cè)結(jié)果(單位：μg/支)部位甲醛乙醛丙酮丙烯醛丙醛巴豆醛2-丁酮丁醛總量占%濾片97.0129.040.08.938.511.616.69.1350.78.32魚尾罩372.54.02.60.01.20.02.21.1383.59.10前置吸收瓶103.01520.0797.5292.5310.078.5178.5110.03390.080.41中置吸收瓶0.933.027.76.64.85.410.32.691.52.17后置吸收瓶0.00.30.00.00.00.00.00.00.30.01（合計(jì)）573.41686.3867.8308.0354.595.5207.6122.84216.0100.01從表中可以看出：（1）、8種羰基化合物含量以前置吸收瓶最多，占總量的80%以上，魚尾罩和濾片上各占8-9%，中置吸收瓶較少，只有總量的2%左右，而后置吸收瓶基本沒有。本方法串聯(lián)2個(gè)80mL氣體吸收瓶（每一吸收瓶各放入30毫升氣體吸收液），足以將卷煙側(cè)流煙氣吸收完全。（2）、側(cè)流煙氣中的甲醛主要集中在，魚尾罩上，所以應(yīng)注意當(dāng)抽吸結(jié)束后，需立即對(duì)魚尾罩進(jìn)行處理。9.2樣品不同收集方法對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響卷煙抽吸完畢后，采用三種不同樣品收集方法，依次如下：方法Ⅰ、參照9.1方法，對(duì)抽吸裝置4個(gè)部位（濾片、魚尾罩、前置吸收瓶、后置吸收瓶）進(jìn)行單獨(dú)處理，分別檢測(cè)，再對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行加和統(tǒng)計(jì)；方法Ⅱ、分兩個(gè)部分對(duì)樣品進(jìn)行處理：（1）卷煙側(cè)流煙氣濾片：處理方法與9.1.1相同；（2）魚尾罩及吸收液處理：先將魚尾罩內(nèi)壁用約30mL氣體吸收液(4.10)淋洗至150mL容量瓶中；再將兩個(gè)氣體吸收瓶中吸收液轉(zhuǎn)移至150mL容量瓶中，分別用3mL～5mL乙腈(4.3)淋洗吸收瓶與側(cè)流煙氣接觸部分，每個(gè)吸收瓶各洗滌2次～3次，淋洗液并入150mL容量瓶中，再向150mL容量瓶中加入5.0mL吡啶（4.5），用乙腈(4.3)定容至刻度，搖勻，靜置2min，取適量萃取液用0.45μm濾膜（5.5）過濾后，移到2mL色譜瓶中，即可進(jìn)行HPLC分析。方法Ⅲ、合為一個(gè)部分對(duì)樣品進(jìn)行一次檢測(cè)首先將抽吸完后的卷煙側(cè)流煙氣濾片放入150mL容量瓶中；再將魚尾罩內(nèi)壁用約30mL氣體吸收液(4.10)淋洗至150mL容量瓶中；然后將兩個(gè)氣體吸收瓶中吸收液轉(zhuǎn)移至150mL容量瓶中，分別用3mL～5mL乙腈(4.3)淋洗吸收瓶與側(cè)流煙氣接觸部分，每個(gè)吸收瓶各洗滌2次～3次，淋洗液并入150mL容量瓶中；向150mL容量瓶中加入6.0mL吡啶（4.5），搖振10分鐘；用乙腈(4.3)定容至刻度，搖勻，靜置2min，取適量萃取液用0.45μm濾膜（5.5）過濾后，移到2mL色譜瓶中，進(jìn)行HPLC分析。上述三種不同處理方法分析檢測(cè)結(jié)果見下表2。表2卷煙側(cè)流煙氣樣品不同收集方法羰基化合物檢測(cè)結(jié)果(單位：μg/支)方法甲醛乙醛丙酮丙烯醛丙醛巴豆醛2-丁酮丁醛總量Ⅰ573.41686.0867.8308.0354.595.5207.6122.84215.7Ⅱ561.81712.3852.8341.3344.5101.9205.8121.24241.4Ⅲ592.51765.0870.0351.0344.3100.5208.5120.84352.5從表中可以看出，三種不同處理方法的分析檢測(cè)結(jié)果基本接近。但方法Ⅰ樣品處理過程繁瑣，分析時(shí)間長(zhǎng)；方法Ⅲ雖然樣品處理過程最簡(jiǎn)單，分析時(shí)間最短，考慮加入的兩張濾片對(duì)容量瓶的定容有影響，對(duì)檢測(cè)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生誤差。綜合來(lái)看，方法Ⅱ相對(duì)較實(shí)用，也較科學(xué)。本標(biāo)準(zhǔn)最終選擇方法Ⅱ作為最佳樣品處理方法。9.3實(shí)驗(yàn)室空白對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響羰基化合物是一種在環(huán)境中普遍存在的化合物，室內(nèi)空氣中通常會(huì)含有少量的丙酮和甲醛等成分，在對(duì)卷煙側(cè)流煙氣中主要羰基化合物進(jìn)行準(zhǔn)確分析時(shí)，必須對(duì)這點(diǎn)進(jìn)行考慮，在最后的測(cè)定結(jié)果中要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)空氣空白扣除。下圖C為實(shí)驗(yàn)室空白空氣中羰基化合物的液相色譜圖。1、甲醛2、乙醛3、丙酮4、丙烯醛圖C實(shí)驗(yàn)室空白羰基化合物色譜圖9.4工作曲線與檢測(cè)限9.4.1標(biāo)準(zhǔn)溶液和典型卷煙樣品液相色譜圖配置一定濃度的羰基化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液，同時(shí)將某一典型卷煙側(cè)流煙氣處理樣品液按本標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定之方法分析檢測(cè)，分別得到的液相色譜圖如下圖D、圖E所示。1、甲醛2、乙醛3、丙酮4、丙烯醛5、丙醛6、巴豆醛7、2-丁酮8、丁醛圖D標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖1、甲醛2、乙醛3、丙酮4、丙烯醛5、丙醛6、巴豆醛7、2-丁酮8、丁醛圖E典型卷煙煙氣樣品色譜圖9.4.2工作曲線與檢測(cè)限參照4.12配置羰基化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液，按本標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定之檢測(cè)方法，按由低到高濃度順序?qū)Ω鳂?biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行HPLC分析。以各種羰基化合物苯腙衍生物色譜峰面積為縱坐標(biāo)，微克每毫升（μg/mL）計(jì)的羰基化合物濃度（注意將腙的濃度換算為羰基化合物的濃度）作為橫坐標(biāo)分別建立8種羰基化合物的校正曲線，對(duì)校正數(shù)據(jù)進(jìn)行線性回歸，得到回歸曲線及其相關(guān)參數(shù)（見下表3）。將最低濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液平行測(cè)定5次，所得測(cè)定結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)偏差的3倍即為測(cè)定方法的檢測(cè)限（見下表3）。表38種羰基化合物的回歸方程及檢測(cè)限羰基化合物含量范圍(μg/支)回歸方程相關(guān)系數(shù)檢測(cè)限(μg/支)甲醛100~1000y=0.0224x+0.18320.99990.0041乙醛300~3000y=0.0198x+0.04620.99990.0053丙酮150~1500y=0.0036x+0.0680.99980.0065丙烯醛50~700y=0.0319x+0.05030.99970.0050丙醛50~600y=0.00546x+0.04080.99980.0065巴豆醛30~300y=0.012x+0.03040.99990.00862-丁酮40~400y=0.0162x+0.05110.99980.0080丁醛20~250y=0.0138x+0.01250.99970.0088從表3中可見，各羰基化合物工作曲線回歸方程的線性相關(guān)系數(shù)均超過0.999，表明在卷煙側(cè)流煙氣中羰基化合物的含量范圍內(nèi)，檢測(cè)器響應(yīng)與這8種羰基化合物的濃度呈明顯的線性關(guān)系。8種羰基化合物的檢測(cè)限均在ng級(jí)的水平，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于卷煙側(cè)流煙氣中羰基化合物的實(shí)際含量，表明本方法的靈敏度較高。9.5樣品加標(biāo)回收率9.5.1側(cè)流煙氣粒相（濾片）部分樣品加標(biāo)回收率在處理好的玻璃纖維濾片（6.2）上分別按低、中、高濃度加入3個(gè)不同濃度的8種羰基化合物苯腙衍生物標(biāo)準(zhǔn)溶液，捕集已知卷煙側(cè)流煙氣羰基化合物含量的側(cè)流煙氣，實(shí)驗(yàn)完畢后按7.1處理卷煙側(cè)流煙氣濾片和HPLC分析，并根據(jù)原含量、加入量、測(cè)定量計(jì)算回收率。試驗(yàn)結(jié)果見下表4。表4粒相（濾片）部分樣品加標(biāo)回收率試驗(yàn)結(jié)果低濃度中濃度高濃度化合物原含量加標(biāo)量回收率加標(biāo)量回收率加標(biāo)量回收率（μg/支）（μg/支）（%）（μg/支）（%）（μg/支）（%）甲醛106.451.2102.4102.499.0153.697.8乙醛132.060.196.6120.297.8180.389.7丙酮38.721.597.343.095.964.591.6丙烯醛9.35.294.710.496.215.687.6丙醛37.622.2100.844.498.866.697.4巴豆醛11.86.395.212.696.318.993.82-丁酮16.58.292.716.494.624.695.5丁醛8.85.193.110.296.215.396.79.5.2側(cè)流煙氣氣相（魚尾罩+吸收液）部分樣品加標(biāo)回收率試驗(yàn)事先在前置吸收瓶中分別按低、中、高濃度加入3個(gè)不同濃度的8種羰基化合物苯腙衍生物標(biāo)準(zhǔn)溶液，捕集已知卷煙側(cè)流煙氣羰基化合物含量的側(cè)流煙氣，實(shí)驗(yàn)完畢后按7.2處理氣相（魚尾罩+吸收液）部分樣品、進(jìn)行HPLC分析，并根據(jù)原含量、加入量、測(cè)定量計(jì)算回收率。試驗(yàn)結(jié)果見下表5。表5氣相（魚尾罩+吸收液）部分樣品加標(biāo)回收率試驗(yàn)結(jié)果低濃度中濃度高濃度化合物原含量加標(biāo)量回收率加標(biāo)量回收率加標(biāo)量回收率（μg/支）（μg/支）（%）（μg/支）（%）（μg/支）（%）甲醛468.5210.599.3421.097.5631.5102.1乙醛1564.3850.396.81700.699.52550.9101.4丙酮810.2451.793.7903.495.81355.197.3丙烯醛295.6181.092.3362.087.6543.089.9丙醛308.7175.694.8351.293.7526.896.0巴豆醛82.651.2100.7102.498.8153.6103.42-丁酮180.3102.694.6205.293.5307.895.0丁醛115.450.898.7101.697.6152.496.6從表4、表5可以看出，8種羰基化合物的測(cè)定方法回收率在87.6%-103.4%，說明方法的準(zhǔn)確性較高。9.6方法的重復(fù)性 方法的重復(fù)性是以組內(nèi)測(cè)定結(jié)果的重復(fù)性和組間測(cè)定結(jié)果的重復(fù)性來(lái)評(píng)價(jià)的。組內(nèi)測(cè)定結(jié)果重復(fù)性是以同一樣品每天重復(fù)進(jìn)樣5次，連續(xù)測(cè)定3天，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差來(lái)表示的。組間測(cè)定結(jié)果重復(fù)性是以連續(xù)3天，每天測(cè)定5組樣品，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差來(lái)表示的。8種羰基化合物組間測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.78%-5.13%，組內(nèi)測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.85%-4.19%（表6），說明該方法有很好的重復(fù)性。表68種羰基化合物測(cè)定的重復(fù)性組間重復(fù)性(n=15)組內(nèi)重復(fù)性(n=15)化合物平均值相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差平均值相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（μg/支）（%）（μg/支）（%）甲醛597.02.78582.41.85乙醛1743.84.321691.92.69丙酮887.83.08870.43.17丙烯醛343.05.13332.43.62丙醛366.83.65348.82.76巴豆醛102.33.4997.52.092-丁酮218.14.61209.04.19丁醛124.24.12121.43.229.7主流煙氣與側(cè)流煙氣測(cè)定結(jié)果比較選取兩種不同的卷煙樣品①和②，按本標(biāo)準(zhǔn)方法分別檢測(cè)卷煙側(cè)流煙氣中8種羰基化合物的含量，同時(shí)按煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《卷煙主流煙氣中主要羰基化合物的測(cè)定高效液相色譜法》（YC/T254-2008）方法分別檢測(cè)卷煙主流煙氣中8種羰基化合物的含量，檢測(cè)結(jié)果見下表7。表7主、側(cè)流煙氣中8種羰基化合物測(cè)定結(jié)果比較樣品檢測(cè)結(jié)果甲醛乙醛丙酮丙烯醛丙醛巴豆醛2-丁酮丁醛總量側(cè)流煙氣555.21711.2892.5318.9355.3101.6222.9122.64280.2①主流煙氣65.1653.3286.262.556.021.375.739.51259.6側(cè)/主8.532.623.125.106.344.772.943.103.40側(cè)流煙氣645.31846.3959.0355.5424.3102.1226.7130.54689.5②主流煙氣93.6708.3323.873.559.528.082.343.51412.4側(cè)/主6.902.612.964.847.133.652.763.003.32從上表中可看出，側(cè)流煙氣中8種羰基化合物的含量普遍要比主流高，尤其以甲醛和丙醛最突出（側(cè)流是主流的6-9倍）；即使是比值最低的乙醛，其側(cè)流中的含量也是主流的2-3倍。9.8共同試驗(yàn)為考察本標(biāo)準(zhǔn)方法在不同實(shí)驗(yàn)室間的再現(xiàn)性，項(xiàng)目組分別在湖南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司、紅塔煙草（集團(tuán)）有限責(zé)任公司、福建中煙工業(yè)有限責(zé)任公司、北京卷煙廠、中國(guó)煙草質(zhì)檢中心對(duì)卷煙側(cè)流煙氣中主要羰基化合物的釋放量進(jìn)行了測(cè)試試驗(yàn)以進(jìn)行驗(yàn)證。9.8.1共同試驗(yàn)樣品共同試驗(yàn)研究選用5個(gè)卷煙樣品，編號(hào)依次為A、B、C、D、E。表8樣品信息樣品編號(hào)類型焦油量，mg煙支規(guī)格A烤煙型12.4（59＋25）mm×24.6mmB混合型8.0（59＋25）mm×24.5mmC烤煙型13.0（60＋24）mm×24.5mmD烤煙型14.2（60＋24）mm×24.8mmE烤煙型14.5（60＋24）mm×24.8mm共同試驗(yàn)時(shí)間及檢測(cè)儀器卷煙側(cè)流煙氣中主要羰基化合物的測(cè)定共同試驗(yàn)時(shí)間主要集中在2010年3月至8月，不同實(shí)驗(yàn)室采用的檢測(cè)儀器見下表9。表9共同試驗(yàn)時(shí)間及檢測(cè)儀器湖南中煙紅塔集團(tuán)福建中煙北京卷煙廠質(zhì)檢中心試驗(yàn)時(shí)間3月8-12日3月28日-5月16-21日6月20-25日8月16-20日側(cè)流吸煙機(jī)型號(hào)KC-5KC-5LM-5LM-5LM-5HPLC儀器型號(hào)AgilentHP1100AgilentHP1200

WATERSLC-510AgilentHP1200AgilentHP12009.8.3共同試驗(yàn)樣品測(cè)定方案每一實(shí)驗(yàn)室共同試驗(yàn)測(cè)試需要進(jìn)行3天，每天各3輪次，每輪次5個(gè)通道，每通道1個(gè)卷煙樣品，每輪次包括1個(gè)空白樣實(shí)驗(yàn)（空白樣編號(hào)為K）。測(cè)試牌號(hào)順序如下表所示。表10樣品測(cè)定方案第1輪第2輪第3輪第1天ABCDKBCKEAKDEAB第2天DEAKCEKBCDKBCDE第3天BKDEACDKABDEAKC9.8.4共同試驗(yàn)結(jié)果5個(gè)不同實(shí)驗(yàn)室對(duì)比驗(yàn)證共同試驗(yàn)結(jié)果分別列于下表11-表16。表11側(cè)流煙氣中羰基化合物檢測(cè)結(jié)果（湖南中煙）樣品檢測(cè)結(jié)果甲醛乙醛丙酮丙烯醛丙醛巴豆醛2-丁酮丁醛總量A平均值644.41590.4746.4417.1438.2138.9222.474.54272.1變異系數(shù)3.692.545.304.253.241.884.756.342.19B平均值512.31480.0635.8311.2320.389.2241.274.53664.5變異系數(shù)2.643.676.207.124.283.013.773.531.74C平均值731.91834.3873.0396.4435.7114.4247.680.04713.3變異系數(shù)4.113.083.654.132.142.025.056.222.87D平均值518.31724.8793.0334.4346.0101.9212.391.94122.4變異系數(shù)2.912.674.033.448.362.194.293.542.70E平均值588.41620.5888.4305.8318.8115.1232.291.14160.2變異系數(shù)1.662.766.063.833.994.216.112.673.14表12側(cè)流煙氣中羰基化合物檢測(cè)結(jié)果（云南紅塔）樣品檢測(cè)結(jié)果甲醛乙醛丙酮丙烯醛丙醛巴豆醛2-丁酮丁醛總量A平均值636.01676.5773.3417.2424.2152.2237.676.94393.8變異系數(shù)2.531.983.624.123.582.745.302.012.33B平均值546.41490.0670.4299.4325.790.6231.775.33729.5變異系數(shù)3.332.875.695.754.153.634.103.131.89C平均值798.71898.0885.2382.8434.4121.0249.984.64854.5變異系數(shù)3.662.544.203.923.412.553.571.222.02D平均值612.81793.0798.0329.1371.397.8188.082.04271.9變異系數(shù)1.883.482.996.742.954.152.661.742.49E平均值567.81630.2917.5289.6338.6121.8224.190.44280.0變異系數(shù)3.134.293.175.844.273.174.562.873.48表13側(cè)流煙氣中羰基化合物檢測(cè)結(jié)果（福建中煙）樣品檢測(cè)結(jié)果甲醛乙醛丙酮丙烯醛丙醛巴豆醛2-丁酮丁醛總量A平均值625.21633.3725.0438.3437.5148.3249.872.14329.4變異系數(shù)1.122.542.472.693.131.892.413.041.65B平均值570.51502.8668.4317.2323.796.1228.874.93782.4變異系數(shù)2.153.162.643.097.782.513.204.363.85C平均值811.91939.6933.8414.8443.3127.3262.172.55005.3變異系數(shù)2.473.794.302.804.693.522.485.343.33D平均值594.31722.5786.8347.4397.8100.4206.192.34247.4變異系數(shù)3.164.362.582.493.371.662.553.421.87E平均值542.91606.7903.8306.8353.0121.6242.597.34174.5變異系數(shù)2.382.684.597.245.433.572.694.154.11表14側(cè)流煙氣中羰基化合物檢測(cè)結(jié)果（北京卷煙廠）樣品檢測(cè)結(jié)果甲醛乙醛丙酮丙烯醛丙醛巴豆醛2-丁酮丁醛總量A平均值660.71634.5757.8329.0405.8147.1219.174.04227.9變異系數(shù)2.963.542.986.145.013.651.991.873.21B平均值532.91545.4692.3310.4369.8103.5239.376.43870.0變異系數(shù)2.583.164.686.498.703.564.253.584.57C平均值744.11797.3880.0372.9434.1121.9258.384.14692.6變異系數(shù)3.454.614.374.826.104.123.241.883.85D平均值624.81707.0801.5309.8384.3105.5232.889.94255.4變異系數(shù)1.342.022.793.213.663.472.452.252.10E平均值612.71687.2835.3306.7307.1105.7226.485.64166.6變異系數(shù)2.323.032.693.642.472.591.693.341.83表15側(cè)流煙氣中羰基化合物檢測(cè)結(jié)果（質(zhì)檢中心）樣品檢測(cè)結(jié)果甲醛乙醛丙酮丙烯醛丙醛巴豆醛2-丁酮丁醛總量A平均值676.01580.0768.8398.9444.2151.2209.276.94305.2變異系數(shù)3.692.884.285.014.652.354.126.232.14B平均值518.51559.4678.1318.2335.7104.4205.483.93803.6變異系數(shù)2.951.673.333.863.543.065.554.233.03C平均值787.31924.7957.4412.9453.1121.4265.088.35010.0變異系數(shù)3.212.094.563.456.114.322.992.333.18D平均值592.51665.0770.0311.0344.3100.5208.590.84082.5變異系數(shù)2.222.963.173.634.042.623.442.051.55E平均值554.51639.4901.8321.2342.6118.0249.298.44225.1變異系數(shù)3.462.782.884.313.291.844.143.142.02表16不同實(shí)驗(yàn)室側(cè)流煙氣中羰基化合物檢測(cè)結(jié)果分析比較樣品檢測(cè)結(jié)果甲醛乙醛丙酮丙烯醛丙醛巴豆醛2-丁酮丁醛總量A湖南中煙644.41590.4746.4417.1438.2138.9222.474.54272.3云南紅塔636.01676.5773.3417.2424.2152.2237.676.94393.9福建中煙625.21633.3725.0438.3437.5148.3249.872.14329.5北京煙廠660.71634.5757.8429.0405.8147.1219.174.04328.0質(zhì)檢中心676.01580.0768.8398.9444.2151.2209.276.94305.2平均值648.51622.9754.3420.1430.0147.5227.674.94325.8變異系數(shù)3.102.392.573.533.573.567.052.741.03B湖南中煙512.31480.0635.8311.2320.389.2241.274.53664.5云南紅塔546.41490.0670.4299.4325.790.6231.775.33729.5福建中煙570.51502.8668.4317.2323.796.1228.874.93782.4北京煙廠532.915