2024年滬教版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2024年滬教版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、如圖為形成cDNA過(guò)程和PCR擴(kuò)增過(guò)程示意圖。據(jù)圖分析；下列說(shuō)法正確的是（）

A.催化①過(guò)程的酶是RNA聚合酶B.④過(guò)程發(fā)生的變化是引物與單鏈DNA結(jié)合C.催化②⑤過(guò)程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高溫D.如果RNA單鏈中A與U之和占該鏈堿基含量的40%，則一個(gè)雙鏈DNA中，A與U之和也占該DNA堿基含量的40%2、細(xì)菌對(duì)各種抗生素的藥敏程度實(shí)驗(yàn)方法如下圖：將含有一定濃度不同抗生素的濾紙片放置在已接種被檢菌的固體培養(yǎng)基表面，抗生素向周圍擴(kuò)散，如果抑制生長(zhǎng)，則在濾紙片周圍出現(xiàn)抑菌圈，結(jié)果如下圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.抗生素Ⅲ的效果大于抗生素ⅠB.為了獲得上述結(jié)果，應(yīng)使用稀釋涂布平板法C.抑菌圈中離紙片越近的菌落對(duì)抗生素Ⅳ的抗性越強(qiáng)D.抑菌圈中出現(xiàn)菌落的原因可能是病原菌中出現(xiàn)了能抗抗生素Ⅳ的突變株3、下列關(guān)于生物技術(shù)安全性和倫理問(wèn)題的敘述，不正確的是（）A.人類對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭(zhēng)議集中在食物安全、生物安全和環(huán)境安全方面B.設(shè)計(jì)試管嬰兒實(shí)質(zhì)是選擇性移植體外受精形成的胚胎，應(yīng)予以禁止C.我國(guó)政府對(duì)生物武器采取的態(tài)度是不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散D.基因篩檢可能幫助人類及早預(yù)防某些遺傳性疾病，但也會(huì)引發(fā)基因歧視問(wèn)題4、高等哺乳動(dòng)物受精后不久；受精卵開(kāi)始進(jìn)行細(xì)胞分裂。經(jīng)桑葚胚；囊胚、原腸胚和組織器官的分化，最后發(fā)育成一個(gè)完整的幼體，從而完成胚胎發(fā)育的全過(guò)程。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.圖示是胚胎發(fā)育過(guò)程中囊胚期示意圖，①②③依次為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)B.受精卵發(fā)育至圖示時(shí)期，細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積并不增加C.胚胎發(fā)育至原腸胚時(shí)開(kāi)始細(xì)胞分化，終止于生命結(jié)束D.胚胎分割后，移植獲得的后代性別一定相同5、乙肝病毒表面主蛋白是由H基因控制合成。下圖是將H基因?qū)肽辰湍妇a(chǎn)乙肝疫苗的過(guò)程。5'A和3'TT分別是該酵母菌中某基因的啟動(dòng)子和終止子，此啟動(dòng)子還能使外源基因在酵母菌中高效表達(dá)，3'A是該基因下游的序列?？茖W(xué)家將改造過(guò)的P質(zhì)粒與H基因連接形成重組質(zhì)粒，再在重組質(zhì)粒特定部位酶切，形成的重組DNA片段可以整合到酵母菌染色體上，最終實(shí)現(xiàn)H基因的表達(dá)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可在H基因兩側(cè)分別接上SnaBI和AvrⅡ的酶切位點(diǎn)B.步驟1中，將重組質(zhì)粒先導(dǎo)入大腸桿菌的目的是復(fù)制出大量重組質(zhì)粒C.步驟3中，用BglⅡ?qū)χ亟M質(zhì)粒進(jìn)行酶切可以獲得圖示的重組DNA片段D.用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基可以篩選出含有H基因的酵母菌6、T4溶菌酶來(lái)源于T4噬菌體，是重要的工業(yè)用酶?？茖W(xué)家通過(guò)一定技術(shù)使T4溶菌酶的第3位異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼幔ó惲涟彼岬拿艽a子是AUU、AUC、AUA，半胱氨酸的密碼子是UGU、UGC），于是在該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成一個(gè)二硫鍵，從而使T4溶菌酶的耐熱性得到了提高。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.對(duì)T4溶菌酶的改造屬于蛋白質(zhì)工程的范疇B.上述改造通過(guò)至少替換T4溶菌酶DNA上的2個(gè)堿基對(duì)實(shí)現(xiàn)C.參與新的T4溶菌酶合成的tRNA種類會(huì)發(fā)生改變D.改造后的T4溶菌酶中的二硫鍵的作用類似于DNA中的氫鍵評(píng)卷人得分二、多選題(共6題，共12分)7、模型是人們?yōu)榱四撤N特定目的而對(duì)認(rèn)識(shí)的對(duì)象所做的一種簡(jiǎn)化的概括性描述。對(duì)圖示生物概念模型的分析正確的是（）

A.若該模型表示體外受精技術(shù)，則C不能直接移植到代孕母體B.若該模型表示核移植技術(shù)，則C→D過(guò)程與胚胎移植技術(shù)有關(guān)C.若B表示培養(yǎng)液和胚胎干細(xì)胞，則C→D的培養(yǎng)過(guò)程中有可能出現(xiàn)分化現(xiàn)象D.若該模型表示農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法操作流程，則C可表示Ti質(zhì)粒，D是植物細(xì)胞8、下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)及其應(yīng)用的說(shuō)法中，正確的是（）A.植物體體內(nèi)具完整細(xì)胞結(jié)構(gòu)的活細(xì)胞均可作為組織培養(yǎng)的外植體B.不同培養(yǎng)階段的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例應(yīng)不同C.單倍體育種和轉(zhuǎn)基因植物的培育需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)D.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可實(shí)現(xiàn)某些重要細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)9、農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移并隨機(jī)插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環(huán)；并以此環(huán)為模板，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列，以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說(shuō)法正確的是（）

A.進(jìn)行PCR擴(kuò)增的依據(jù)是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理B.進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要的酶有解旋酶和熱穩(wěn)定DNA聚合酶C.利用圖中的引物②、③組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列D.通過(guò)與受體細(xì)胞的基因組序列比對(duì)，可確定T-DNA的插入位置10、我國(guó)首例綠色熒光蛋白“轉(zhuǎn)基因”克隆豬的培育過(guò)程如圖所示，其中字母代表結(jié)構(gòu)或生物，數(shù)字代表過(guò)程，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.為了①和②的順利完成，需要用滅活的病毒對(duì)細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)B.將C的細(xì)胞核去掉，實(shí)質(zhì)上是去除紡錘體—染色體復(fù)合物C.為避免將E植入F時(shí)產(chǎn)生排斥反應(yīng)，移植前應(yīng)給F注射免疫抑制劑D.移入F的桑葚胚要經(jīng)歷囊胚、原腸胚等階段才能形成豬的幼體11、如圖為利用酵母菌釀制葡萄酒的實(shí)驗(yàn)裝置示意圖。下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述，正確的是（）

A.果酒發(fā)酵時(shí)，圖中裝置應(yīng)用70%的乙醇消毒和用洗潔精洗滌B.用該裝置進(jìn)行果酒發(fā)酵時(shí)，需要維持閥a、b的開(kāi)放狀態(tài)C.利用該裝置進(jìn)行果醋發(fā)酵，發(fā)酵溫度需要維持在30～35℃D.果酒、果醋發(fā)酵所用的菌種細(xì)胞內(nèi)均含有多種細(xì)胞器12、2020年7月20日，國(guó)際醫(yī)學(xué)權(quán)威期刊《柳葉刀》上發(fā)表了新冠病毒疫苗II期臨床試驗(yàn)的成果。該試驗(yàn)是由陳薇院士等人領(lǐng)銜的團(tuán)隊(duì)開(kāi)展的研究，試驗(yàn)中使用的疫苗是一種腺病毒載體重組新冠病毒疫苗(基因重組疫苗)。試驗(yàn)結(jié)果表明，單次接種疫苗28天后，99．5%的受試者產(chǎn)生了特異性抗體，95．3%受試者產(chǎn)生了中和抗體，89%的受試者產(chǎn)生了特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)。這表明，陳薇團(tuán)隊(duì)研發(fā)的新冠疫苗可為健康人群提供“三重保護(hù)”，將新冠病毒“拒之門外”。下列敘述正確的是（）A.該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B.受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后，體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的效應(yīng)T細(xì)胞C.主要通過(guò)檢測(cè)受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來(lái)評(píng)價(jià)試驗(yàn)的有效性D.新冠肺炎康復(fù)患者可以不注射該疫苗評(píng)卷人得分三、填空題(共8題，共16分)13、在篩選纖維素分解菌的過(guò)程中，人們發(fā)明了___________，這種方法能夠通過(guò)顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選。剛果紅(CongoRed，簡(jiǎn)稱__________)是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成____________，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅一纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的______________。這樣，我們就可以通過(guò)是否產(chǎn)生________________來(lái)篩選纖維素分解菌。14、統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目_____________。這是因?yàn)開(kāi)_____________________。因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用而不是用活菌數(shù)來(lái)表示。除了上述的活菌計(jì)數(shù)法外，______________也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。15、其它載體：_______16、在___________條件下，DNA與___________反應(yīng)呈現(xiàn)______________，因此_____________可以作為鑒定DNA的試劑。17、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似，常用的誘導(dǎo)因素有______等。18、應(yīng)用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。19、第四步：_____20、首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了______，方法是采用______。評(píng)卷人得分四、判斷題(共1題，共5分)21、對(duì)微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實(shí)際應(yīng)用成果最多的領(lǐng)域，是因?yàn)槲⑸锞哂猩斫Y(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單、生長(zhǎng)繁殖快、對(duì)環(huán)境因素敏感和容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作等優(yōu)點(diǎn)。（選擇性必修3P101）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共24分)22、單克隆抗體技術(shù)在生物工程中有著廣泛的應(yīng)用；下圖1是單克隆抗體制備流程圖，下圖2是我國(guó)科研人員為了準(zhǔn)確篩選沒(méi)有明顯表型特征的某種微生物所采用的流程圖，圖3是某雙特異性抗體作用示意圖，雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合。

（1）據(jù)圖2分析，科研人員利用目標(biāo)微生物編碼膜蛋白的基因序列，構(gòu)建____________________，并導(dǎo)入用__________處理的大腸桿菌細(xì)胞中；獲取大量膜蛋白。

（2）已知細(xì)胞合成DNA有“D途徑”和“S途徑”兩條途徑，其中“D途徑”能被氨基嘌呤阻斷。兔子的已免疫的淋巴細(xì)胞有上述兩種途徑，但一般不分裂增殖；兔子的骨髓瘤細(xì)胞中只有“D途徑”，但能不斷分裂增殖。據(jù)此，圖1所示的__________（填“HAT培養(yǎng)基”或“多孔板”）中添加氨基嘌呤可以達(dá)到篩選目的，其原理是______________________________。

（3）將上述帶有熒光的單克隆抗體與待分離微生物群體混合，目的是______________________________。

（4）與直接使用抗腫瘤藥物相比，將抗腫瘤藥物與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對(duì)人體的副作用更小，原因是________________________________________，體現(xiàn)的是雙特異性單克隆抗體在__________方面的用途。23、某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X；Y和Z）；每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)（能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如下圖所示。

若要制備雜交瘤細(xì)胞；需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目為40條），并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目為60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。

回答下列問(wèn)題：

（1）制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)___________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是___________小鼠，理由是______________。

（2）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交廇細(xì)胞外，可能還有________，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是________________。

（3）雜交瘤細(xì)胞中有______個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是_________條。

（4）未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是_____________________。24、干燥綜合征（SS）是臨床常見(jiàn)的一種自身免疫??；患者血清中存在多種抗體，其中以SSB抗體特異性最強(qiáng)。下圖表示科研人員利用基因工程技術(shù)獲得SSB蛋白及利用SSB蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行免疫的過(guò)程。回答下列問(wèn)題：

(1)利用RNA通過(guò)①過(guò)程獲得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護(hù)尾部不被降解。為了針對(duì)性獲得cDNA，應(yīng)如何設(shè)計(jì)逆轉(zhuǎn)錄第一步時(shí)的DNA引物______，設(shè)計(jì)引物的目的是______。

(2)為確保與pET41a質(zhì)粒定向連接，對(duì)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴(kuò)增時(shí)，應(yīng)在相應(yīng)引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位點(diǎn)。

(3)③過(guò)程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時(shí)，需要用Ca2+處理大腸桿菌，目的是______，然后將處理后的大腸桿菌先接種在添加_______的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長(zhǎng)出菌落后再利用無(wú)菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加______的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集_______菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理；篩選得到SSB蛋白。

(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測(cè)該蛋白是否具有抗原性，則后續(xù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液_______。評(píng)卷人得分六、綜合題(共2題，共20分)25、為了增加油菜種子的含油量；研究人員嘗試將酶D基因與轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連，一起導(dǎo)入油菜細(xì)胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。

（1）研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計(jì)引物，采用__________法快速擴(kuò)增從陸地棉基因文庫(kù)中獲取到的酶D基因和從擬南芥基因文庫(kù)中獲取到的轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因。所含三種限制酶（ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ）的切點(diǎn)如圖所示，則用ClaⅠ酶和______________酶處理兩個(gè)基因后；可得到A端與D端（填圖中字母）相連的融合基因。

（2）將上述融合基因插入如圖所示Ti質(zhì)粒的T—DNA中，構(gòu)建_____________________________并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含__________________的固體平板上培養(yǎng)得到含融合基因的單菌落；再利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的侵染液。

（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過(guò)程的目的是_________________________，進(jìn)一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞，該細(xì)胞通過(guò)________________技術(shù)，可培育成轉(zhuǎn)基因油菜植株。26、CCR5是人體的正?；?；其編碼的細(xì)胞膜CCR5蛋白是HIV-Ⅰ（人類免疫缺陷病毒Ⅰ型）感染的“入口”。有學(xué)者用“CRISPR/Cas9”技術(shù)對(duì)該基因進(jìn)行定點(diǎn)編輯后植入志愿者體內(nèi)，誕生了兩位嬰兒，這就是學(xué)術(shù)界和社會(huì)倫理界引起激烈爭(zhēng)論的“基因編輯嬰兒”事件。下圖1；圖2分別為相關(guān)的技術(shù)原理和實(shí)施過(guò)程。

（1）將Cas9蛋白和向?qū)NA序列注入受精卵的方法稱為_(kāi)_________。據(jù)圖推測(cè)，“CRISPR/Cas9”技術(shù)中，首先由向?qū)NA引導(dǎo)定位至目標(biāo)DNA序列，然后由Cas9蛋白將DNA切斷，其作用結(jié)果類似于基因工程中__________的作用?；蚓庉嬤^(guò)程中可能會(huì)產(chǎn)生“脫靶”（對(duì)CCR5基因以外的其他基因進(jìn)行了編輯）現(xiàn)象，最可能的原因是____________________。

（2）細(xì)胞對(duì)被切斷的DNA進(jìn)行重新連接前大都會(huì)隨機(jī)切掉或增加幾個(gè)堿基對(duì)，此過(guò)程導(dǎo)致的變異屬于______。胚胎2的兩個(gè)變異CCR5基因編碼的蛋白質(zhì)中，氨基酸數(shù)目都可能減少，原因是__________。變異的CCR5蛋白無(wú)法裝配到細(xì)胞膜上，從而實(shí)現(xiàn)了__________。

（3）基因編輯嬰兒事件，引起中國(guó)醫(yī)學(xué)與科技界的普遍震驚與強(qiáng)烈譴責(zé)。原因是__________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、B【分析】【分析】

分析題圖：圖示為形成cDNA過(guò)程和PCR擴(kuò)增過(guò)程示意圖；其中①是由RNA形成單鏈DNA的過(guò)程，為逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程；②是以單鏈DNA合成雙鏈DNA的過(guò)程，是DNA分子復(fù)制過(guò)程；③④⑤是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段，其中③是變性；④是復(fù)性、⑤是延伸階段。

【詳解】

A；①為逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程；該過(guò)程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化，A錯(cuò)誤；

B；④為復(fù)性過(guò)程；發(fā)生的變化是引物與互補(bǔ)DNA鏈結(jié)合，B正確；

C；圖中②⑤過(guò)程為DNA復(fù)制；這兩個(gè)過(guò)程都需要DNA聚合酶的催化，其中⑤過(guò)程進(jìn)行的溫度是70～75℃，因此催化該過(guò)程的DNA聚合酶能耐高溫，但催化②過(guò)程的酶不耐高溫，C錯(cuò)誤；

D；堿基U是RNA特有的堿基；雙鏈DNA不含有堿基U，D錯(cuò)誤。

故選B。2、C【分析】【分析】

本實(shí)驗(yàn)是利用抗生素抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)來(lái)檢測(cè)細(xì)菌對(duì)各種抗生素的藥敏程度；實(shí)驗(yàn)結(jié)果可通過(guò)抑菌圈的大小來(lái)確定殺菌能力，抑菌圈越大表示殺菌能力越強(qiáng)。

【詳解】

A；分析圖解可知；抗生素Ⅰ的透明圈明顯小于抗生素Ⅲ，因此對(duì)于該試驗(yàn)所用測(cè)試菌而言，抗生素I效果小于抗生素III，A正確；

B；微生物的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法；據(jù)圖可知，圖示為稀釋涂布平板法的結(jié)果，B正確；

C；在抑菌圈中出現(xiàn)的菌落均是對(duì)該種抗生素具有抗性的菌株；無(wú)法通過(guò)題圖信息分析判斷它們之間抗性的強(qiáng)弱，若要判斷它們之間抗性的強(qiáng)弱還需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)才能確定，C錯(cuò)誤；

D；抑菌圈中出現(xiàn)菌落的原因可能是病原菌中出現(xiàn)了能抗抗生素Ⅳ的突變株；能夠抵抗抗生素作用，D正確。

故選C。3、B【分析】克隆人：兩種不同觀點(diǎn)；多數(shù)人持否定態(tài)度．否定的理由：克隆人嚴(yán)重違反了人類倫理道德，是克隆技術(shù)的濫用；克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻；家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念；克隆人是在人為的制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人．肯定的理由：技術(shù)性問(wèn)題可以通過(guò)胚胎分級(jí)、基因診斷和染色體檢查等方法解決．不成熟的技術(shù)也只有通過(guò)實(shí)踐才能使之成熟．中國(guó)政府的態(tài)度：禁止生殖性克隆，不反對(duì)治療性克?。牟辉瓌t：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實(shí)驗(yàn)；

設(shè)計(jì)試管嬰兒：是指體外受精形成的胚胎在植入母體孕育前；根據(jù)人們的需要，將胚胎的一個(gè)細(xì)胞取出，進(jìn)行某些基因檢測(cè)．當(dāng)檢測(cè)結(jié)果符合人們需要是，再把胚胎植入母體孕育．否定的理由：把試管嬰兒當(dāng)作人體零配件工廠，是對(duì)生命的不尊重；早期生命也有活下去的權(quán)利，拋棄或殺死多余胚胎，無(wú)異于“謀殺”?？隙ǖ睦碛桑航鉀Q了不育問(wèn)題。

【詳解】

A；人類對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性考慮主要集中在食物安全、生物安全和環(huán)境安全方面；A正確；

B；設(shè)計(jì)試管嬰兒實(shí)質(zhì)是選擇性移植體外受精形成的胚胎；應(yīng)正確判斷其利與弊，不能完全禁止，有利方面如解決了不育問(wèn)題，不利方面如破壞了人類正常的性別比例，違反了倫理道德，B錯(cuò)誤；

C；我國(guó)政府對(duì)生物武器采取的態(tài)度是不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器；并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散，以維持全球安定，C正確；

D；基因篩檢可能幫助人類及早預(yù)防某些遺傳性疾?。坏部梢l(fā)基因歧視問(wèn)題，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】4、C【分析】【分析】

胚胎發(fā)育的過(guò)程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體。

①卵裂期：細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加。

②桑椹胚：32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎（之前所有細(xì)胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細(xì)胞）。

③囊胚：細(xì)胞開(kāi)始分化；其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔（注：囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來(lái)，這一過(guò)程叫孵化）。

④原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層；下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔，（細(xì)胞分化在胚胎期達(dá)到最大限度）。

【詳解】

A；圖示為囊胚期的胚胎；其中①為透明帶，②為滋養(yǎng)層，③為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，A正確；

B；胚胎發(fā)育的卵裂期；有段時(shí)間是在透明帶內(nèi)進(jìn)行分裂，細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積并不會(huì)增加，B正確；

C；高等哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育中的細(xì)胞分化開(kāi)始于囊胚期；終止于生命結(jié)束，C錯(cuò)誤；

D；胚胎分割后；移植獲得的后代遺傳物質(zhì)均相同，故性別相同，D正確。

故選C。5、D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟:

1；目的基因的獲取。

2；基因表達(dá)載體的構(gòu)建。

3；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。

4；目的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】

A、為實(shí)現(xiàn)H基因和P質(zhì)粒重組，只能用限制酶SnaBI和AvrⅡ切割質(zhì)粒；并在H基因兩側(cè)的接上相應(yīng)的限制酶識(shí)別序列，這樣設(shè)計(jì)的優(yōu)點(diǎn)是確保定向連接（避免質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化及自連），A正確；

B；將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌；其目的是為了讓目的基因在大腸桿菌里擴(kuò)增，獲取大量重組質(zhì)粒，B正確；

C；步驟3中；重組DNA片段首尾分別是5'和3'，用BglⅡ?qū)χ亟M質(zhì)粒進(jìn)行酶切可以獲得圖示的重組DNA片段，C正確；

D；重組DNA片段含卡那霉素基因；用含卡那霉素的培養(yǎng)基可以篩選出含有H基因的酵母菌，D錯(cuò)誤。

故選D。6、C【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。

【詳解】

A；對(duì)蛋白質(zhì)分子的設(shè)計(jì)和改造是通過(guò)蛋白質(zhì)工程來(lái)實(shí)現(xiàn)的；故對(duì)T4溶菌酶的改造屬于蛋白質(zhì)工程的范疇，A正確；

B；根據(jù)題意；要將T4溶菌酶的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?，只改變一個(gè)氨基酸，發(fā)生的是堿基的替換；兩種氨基酸最接近的密碼子是AUU和UGU，或AUC和UGC，仍然相差兩個(gè)堿基，由于DNA是雙鏈結(jié)構(gòu)，故對(duì)應(yīng)的DNA上的堿基至少要替換2個(gè)堿基對(duì)，B正確；

C；改造前組成T4溶菌酶的氨基酸中就含有半胱氨酸；改造后組成T4溶菌酶的氨基酸中也可能仍含有異亮氨酸，因此參與其合成的tRNA種類可能不變，C錯(cuò)誤；

D；改造后的T4溶菌酶多了一個(gè)二硫鍵；二硫鍵使T4溶菌酶的耐熱性提高；DNA分子中氫鍵越多，熱穩(wěn)定性越強(qiáng)，二者作用類似，D正確。

故選C。二、多選題(共6題，共12分)7、A:B:C【分析】【分析】

1；基因表達(dá)載體是目的基因和載體重組后形成的。

2；體外受精是指獲能的精子和成熟的卵細(xì)胞結(jié)合形成受精卵的過(guò)程。

3；胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性；能夠分裂和分化。

4；動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核；移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物。

【詳解】

A；若該模型表示體外受精技術(shù)；則C（受精卵）不能直接移植到代孕母體，需要將C移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。當(dāng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時(shí)，才可以將其取出向受體移植，A正確；

B；若該模型表示核移植技術(shù)；A和B表示供體細(xì)胞核和去核的卵細(xì)胞，則C→D過(guò)程表示胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)，B正確；

C；若A、B表示培養(yǎng)液和胚胎干細(xì)胞；則C→D的傳代培養(yǎng)過(guò)程中有可能出現(xiàn)分化現(xiàn)象，C正確；

D；若該模型表示農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法操作流程；則C可表示重組Ti質(zhì)粒，D是農(nóng)桿菌，D錯(cuò)誤。

故選ABC。8、A:B:C:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)：1；過(guò)程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，再分化產(chǎn)生胚狀體，最好發(fā)育成植株（新植體）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要。

2；原理：植物細(xì)胞的全能性。

3；應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（快速繁殖優(yōu)良品種、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種和突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

【詳解】

A；用于培養(yǎng)的植物細(xì)胞必須具有完整的細(xì)胞核；以保證有全套的遺傳信息，因此植物體體內(nèi)具完整細(xì)胞結(jié)構(gòu)的活細(xì)胞均可作為組織培養(yǎng)的外植體，A正確；

B；脫分化過(guò)程和再分化過(guò)程所需的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例應(yīng)不同；如生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素用量比值適中時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的形成；生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素用量比值低時(shí)，有利于芽的形成；生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素用量比值高時(shí)，有利于根的形成，B正確；

C；單倍體育種和轉(zhuǎn)基因植物的培育都要經(jīng)歷細(xì)胞到植株的過(guò)程；因此都需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，C正確；

D；利用某些細(xì)胞能產(chǎn)生特定的產(chǎn)物；通過(guò)組織培養(yǎng)使細(xì)胞數(shù)量增加，進(jìn)而增加產(chǎn)量，實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)，D正確。

故選ABCD。

【點(diǎn)睛】9、A:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2；原理：DNA復(fù)制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；PCR擴(kuò)增依據(jù)的是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理；A正確；

B；進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B錯(cuò)誤；

C；DNA的兩條鏈反向平行；子鏈從引物的3′端開(kāi)始延伸，則利用圖中的引物①、④組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列，C錯(cuò)誤；

D；通過(guò)與受體細(xì)胞的基因組序列比對(duì)；即可確定T-DNA的插入位置，D正確。

故選AD。

【點(diǎn)睛】10、A:C【分析】【分析】

分析圖解，可以看出綠色熒光蛋白“轉(zhuǎn)基因”克隆豬涉及了多項(xiàng)生物工程技術(shù)。圖中B表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建；然后將目的基因?qū)胴i胎兒的成纖維細(xì)胞，經(jīng)過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)篩選出轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞，然后該細(xì)胞的細(xì)胞核與豬的卵細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞核移植獲得重組細(xì)胞。重組細(xì)胞經(jīng)過(guò)早期胚胎培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚期，最后經(jīng)過(guò)胚胎移植技術(shù)將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內(nèi)，最后生成轉(zhuǎn)基因克隆豬。由此可見(jiàn)，該過(guò)程中利用基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。

【詳解】

A；①是將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞；直接采用顯微注射法，無(wú)需對(duì)受體細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)，②過(guò)程通常是將細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞中，然后利用電融合法使D構(gòu)建成功，A錯(cuò)誤；

B；C是處于MⅡ期的卵母細(xì)胞；這個(gè)時(shí)期的“核”實(shí)際上是紡錘體—染色體復(fù)合物，B正確；

C；受體對(duì)移入的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；因此無(wú)需給F注射免疫抑制劑，C錯(cuò)誤；

D；移入F的通常是桑葚胚；它要經(jīng)歷囊胚、原腸胚階段的發(fā)育才能成為豬的幼體，D正確。

故選AC。11、A:C【分析】【分析】

1.果酒的制作離不開(kāi)酵母菌；酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，在無(wú)氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵。溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件，20℃左右，酒精發(fā)酵時(shí)，一般將溫度控制在18~25℃，在葡萄酒自然發(fā)酵過(guò)程當(dāng)中，其主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。

2.醋酸菌是一種好氧細(xì)菌；只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)。醋酸菌對(duì)氧氣的含量特別敏感，當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí)，即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣，也會(huì)引起醋酸菌死亡。當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為30~35℃。

【詳解】

A；果酒發(fā)酵時(shí)；為了避免雜菌污染，圖中裝置應(yīng)用70%的乙醇消毒和用洗潔精洗滌，A正確；

B、用該裝置進(jìn)行果酒發(fā)酵時(shí)，需要先維持閥a，b的開(kāi)放狀態(tài)，此后閥a、閥b，發(fā)酵過(guò)程中定時(shí)打開(kāi)閥b排氣；B錯(cuò)誤；

C；利用該裝置進(jìn)行果醋發(fā)酵；發(fā)酵溫度需要維持在30～35℃，因?yàn)榇姿峋m宜的發(fā)酵溫度是30～35℃，另外還需要通入無(wú)菌空氣，保證醋酸菌代謝的需要，C正確；

D；果酒發(fā)酵的就菌種是酵母菌；酵母菌是真核生物，細(xì)胞中含有多種細(xì)胞器，果醋發(fā)酵的菌種是醋酸菌，醋酸菌是原核生物，細(xì)胞中只有核糖體這一種細(xì)胞器，D錯(cuò)誤。

故選AC。12、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已經(jīng)發(fā)展了三代：

第一代疫苗指的是滅活疫苗和減毒活疫苗；通過(guò)體外培養(yǎng)病毒，然后用滅活的病毒刺激人體產(chǎn)生抗體，它是使用最為廣泛的傳統(tǒng)疫苗；

第二代疫苗又稱為亞單位疫苗；是通過(guò)基因工程原理獲得的具有免疫活性的病原特異性結(jié)構(gòu)蛋白，刺激人體產(chǎn)生抗體；

第三代疫苗是核酸疫苗；又稱基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是將編碼某一抗原蛋白的基因作為疫苗，注射到人體中，通過(guò)正常的人體生理活動(dòng)產(chǎn)生抗原蛋白，誘導(dǎo)機(jī)體持續(xù)作出免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體。

【詳解】

A；該疫苗是基因重組疫苗；需要將腺病毒載體和新冠病毒的基因進(jìn)行連接，所以該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，A正確；

B；受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后；體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的漿細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；主要通過(guò)檢測(cè)受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來(lái)評(píng)價(jià)試驗(yàn)的有效性；C正確；

D；新冠肺炎康復(fù)患者體內(nèi)產(chǎn)生了新冠病毒抗體和和相應(yīng)的記憶細(xì)胞；可以不注射該疫苗，D正確。

故選ACD。三、填空題(共8題，共16分)13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】剛果紅染色法CR紅色復(fù)合物透明圈透明圈14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落菌落數(shù)15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】噬菌體、動(dòng)植物病毒16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】沸水浴二苯胺藍(lán)色二苯胺17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的檢測(cè)和鑒定20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因DNA分子雜交技術(shù)。四、判斷題(共1題，共5分)21、A【分析】【詳解】

微生物具有生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)，便于研究，生長(zhǎng)周期短，具有生長(zhǎng)繁殖快的優(yōu)點(diǎn)，遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單，具有容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作的優(yōu)點(diǎn)，對(duì)環(huán)境因素敏感，因此對(duì)微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實(shí)際應(yīng)用成果最多的領(lǐng)域，這句話是正確的。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共24分)22、略

【分析】【分析】

單克隆抗體制備過(guò)程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（1）

據(jù)圖分析，科研人員利用基因工程將目標(biāo)微生物編碼膜蛋白的基因序列，構(gòu)建基因表達(dá)載體，并導(dǎo)入用CaCl2處理的大腸桿菌細(xì)胞中；使目的基因增殖并表達(dá)可獲取大量膜蛋白。

（2）

雜交瘤細(xì)胞由淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而成；其合成DNA有“D途徑”和“S途徑”兩條途徑?！癏AT培養(yǎng)基”有篩選作用，在添加了氨基喋吟的HAT培養(yǎng)基中，雜交瘤細(xì)胞“D途徑”雖然被氨基嘌呤阻斷，但可通過(guò)“S途徑”合成DNA，不斷分裂增殖；而淋巴細(xì)胞和淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞因缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力，而不能在HAT培養(yǎng)基中生長(zhǎng)；骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中因DNA合成途徑被氨基嘌呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制，也不生長(zhǎng)。

（3）

帶有熒光的單克隆抗體與待分離微生物群體混合；可起到標(biāo)記目標(biāo)微生物的作用。

（4）

雙特異性單克隆抗體借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用；能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在的位置，在原位殺死癌細(xì)胞，這樣既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。體現(xiàn)的是雙特異性單克隆抗體在治療疾病方面起到運(yùn)載藥物的用途。

【點(diǎn)睛】

本題考查單克隆抗體的制備過(guò)程和動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)，意在考查學(xué)生對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解與掌握程度，培養(yǎng)了學(xué)生分析圖示、獲取信息、解決問(wèn)題的綜合應(yīng)用的能力。【解析】（1）基因的表達(dá)載體Ca2+或CaCl2

（2）HAT培養(yǎng)基淋巴細(xì)胞和淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞因缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力；故不能在HAT培養(yǎng)基中生長(zhǎng)；骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中因DNA合成途徑被氨基嘌呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制，而不生長(zhǎng)。

（3）標(biāo)記目標(biāo)微生物。

（4）雙特異性單克隆抗體能將抗癌藥物定向帶到腫瘤細(xì)胞所在位置，在原位殺死癌細(xì)胞治療疾?。ㄟ\(yùn)載藥物）23、略

【分析】【詳解】

本題以雜交瘤細(xì)胞為背景；考查了動(dòng)物細(xì)胞融合；細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化。

（1）在第四次免疫后；Y的血清抗體效價(jià)大于16000，所以最少需要經(jīng)過(guò)四次免疫.由圖可知，血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上時(shí)，Y的效價(jià)最大，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞。

（2）B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞在一起融合時(shí)；可能發(fā)生B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B細(xì)胞之間的融合，骨髓瘤細(xì)胞之間的融合和B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。由于細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。

（3）由于核膜也具有流動(dòng)性；故小鼠的免疫B淋巴細(xì)胞核與其骨髓瘤細(xì)胞核會(huì)融合形成一個(gè)雜交的細(xì)胞核。B細(xì)胞有40條染色體，骨髓瘤細(xì)胞有60條染色體，融合后的雜交瘤細(xì)胞有100條染色體。

（4）未融合的B淋巴細(xì)胞是已分化的細(xì)胞；不能無(wú)限增殖，所以多次培養(yǎng)后不能存活。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞工程，意在考查考生識(shí)記所列知識(shí)點(diǎn)，并能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力。【解析】4YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%1100不能無(wú)限增殖24、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四個(gè)步驟：目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細(xì)胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2＋處理大腸桿菌細(xì)胞；使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。

【詳解】

（1）利用RNA通過(guò)①過(guò)程（逆轉(zhuǎn)錄）獲得cDNA需要逆轉(zhuǎn)錄酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護(hù)尾部不被降解。逆轉(zhuǎn)錄第一步以mRMA為模板合成DNA單鏈；新鏈與模板鏈反向平行，由于新鏈只能由5'端向3'端延伸，所以逆轉(zhuǎn)錄第一步的引物應(yīng)與mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互補(bǔ)配對(duì)，即用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物；設(shè)計(jì)引物的目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。

（2）對(duì)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴(kuò)增時(shí)；引物的5'端結(jié)合母鏈的3'端之后DNA聚合酶開(kāi)始擴(kuò)增DNA。為確保其與pET41a質(zhì)粒定向連接，應(yīng)使用不同種的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，由圖可知，使用EcoRI酶會(huì)破環(huán)SSB基因，故應(yīng)在相應(yīng)引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位點(diǎn)。

（3）由題圖分析可知：質(zhì)粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破壞了氯霉素抗性基因，所以成功組裝的重組質(zhì)粒不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，③過(guò)程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時(shí)，需要用Ca2+處理大腸桿菌；目的是使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)，然后分別將處理后的大腸桿菌先接種在添加卡那霉素的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長(zhǎng)出菌落后再利用無(wú)菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加氯霉素的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理，經(jīng)篩選即可得到SSB蛋白。

（4）將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測(cè)該蛋白是否具有抗原性，如果該蛋白有抗原性，會(huì)引起機(jī)體的免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)抗體。則后續(xù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測(cè)其是否含有抗SSB的抗體?！窘馕觥?1)逆轉(zhuǎn)錄用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的。

(4)提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測(cè)其是否含有抗SSB的抗體六、綜合題(共2題，共20分)25、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作程序：第一步：目的基因的獲取1；原核基因采取直接分離獲得；真核基因是人工合成；2、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因；第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建；第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：用Ca2+處理。原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少，最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌。第四步：目的基因的檢測(cè)和表達(dá)。