左氧氟沙星片含量測定分析方法驗(yàn)證

左氧氟沙星片含量測定分析方法驗(yàn)證摘要：目的建立反相高效液相色譜法，測定左氧氟沙星片的含量。方法以C18柱為固定相；以醋酸銨高氯酸鈉溶液（取醋酸銨4.0g和高氯酸鈉7.0g，加水1300ml使溶解，用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.2）-乙腈（83:17）為流動相；稀釋劑：0.1mol/L鹽酸；檢測波長為294nm。結(jié)果左氧氟沙星在0.04μg/ml~146.36μg/ml內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)1.0000；低，中，高3種濃度的平均回收率分別為98.4%，98.2%，98.3%。結(jié)論本方法準(zhǔn)確，簡便，專屬性強(qiáng)，可用于左氧氟沙星片含量測定的考察。關(guān)鍵詞：左氧氟沙星；含量測定；分析；驗(yàn)證導(dǎo)言：通過下文實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法對左氧氟沙星片的含量進(jìn)行測定，可以為左氧氟沙星片質(zhì)量控制提供有效的依據(jù)，并且這種測量方法的專屬性強(qiáng)，精密度好，準(zhǔn)確度高，能夠?yàn)樽笱醴承瞧|(zhì)量控制提供有效的定量方法。1儀器與試劑1.1實(shí)驗(yàn)儀器本次實(shí)驗(yàn)使用的儀器是島津LC-2030C液相色譜儀、BSA124S型賽多利斯電子天平、PB-10型賽多利斯酸度計(jì)、DK-S22型恒溫?cái)?shù)顯水浴鍋。1.2實(shí)驗(yàn)試劑、樣品及對照品本次實(shí)驗(yàn)使用的試劑是高氯酸鈉、醋酸銨、鹽酸、磷酸（均為分析純）、乙腈（色譜純）及去離子水；樣品為左氧氟沙星片（樂信樂美（海南）生物科技有限公司，批號：200301）；左氧氟沙星對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：130455-201607；含量：97.3%）2實(shí)驗(yàn)方法2.1實(shí)驗(yàn)的色譜條件本次實(shí)驗(yàn)使用的色譜柱為SHIMADZUC18色譜柱（規(guī)格：4.6*250mm，5μm），其柱溫為40℃，其流動相為醋酸銨高氯酸鈉溶液（取醋酸銨4.0g和高氯酸鈉7.0g，加水1300ml使溶解，用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.2）-乙腈（83:17）；流速為1.0ml/分鐘；進(jìn)樣量為10μl；檢測波長為294nm。稀釋劑：0.1mol/L鹽酸。2.2配制供試品溶液的方法供試品貯備液：精密稱取本品細(xì)粉約0.14g（約相當(dāng)于左氧氟沙星，按C18H20FN3O4計(jì)0.1g），置100ml量瓶中，加稀釋劑適量，超聲使溶解，冷卻至室溫，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。供試品溶液：精密量取供試品儲備液1ml，至10ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。2.3專屬性①未破壞試驗(yàn)：精密量取供試品儲備液1ml，至10ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。②酸破壞試驗(yàn)：精密量取供試品儲備液1ml，至10ml量瓶中，加1mol/LHCl溶液1ml，輕輕搖勻，98℃水浴破壞6小時(shí)后，加1mol/LNaOH溶液1ml中和，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。③堿破壞試驗(yàn)：精密量取供試品儲備液1ml，至10ml量瓶中，加1mol/LNaOH溶液1ml，輕輕搖勻，98℃水浴破壞6小時(shí)后，加1mol/LHCl溶液1ml中和，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。④氧化破壞試驗(yàn)：精密量取供試品儲備液1ml，置10ml量瓶中，加3%過氧化氫溶液1ml，輕輕搖勻，90℃水浴破壞3小時(shí)后，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。⑤高溫破壞試驗(yàn)：精密量取供試品儲備液1ml，置10ml量瓶，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，98℃水浴破壞6小時(shí)后，取出，放冷，濾過，即得。⑥光照破壞試驗(yàn)：精密量取供試品儲備液1ml，置10ml量瓶，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，置光照度為4500lx±500lx、紫外照度1.5W/m2的強(qiáng)度下，放置1天，取出，濾過，即得。同法對空白溶液分別進(jìn)行上述破壞試驗(yàn)。精密量取上述溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果顯示，各破壞條件下，未破壞空白溶液及破壞后的空白溶液均對測試無干擾，各破壞溶液中雜質(zhì)峰與主峰均能達(dá)到基線分離，主峰峰純度高，物料保持平衡，表明本方法具有良好的專屬性。2.4線性精密稱取左氧氟沙星對照品50.14mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加稀釋劑適量，超聲使溶解，冷卻至室溫，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。精密量取對照品儲備液1ml，至100ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ml，至250ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液1。精密量取對照品儲備液1.0ml，置20ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液2。精密量取對照品儲備液1.5ml，置20ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液3。精密量取對照品儲備液2.0ml，置20ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液4。精密量取對照品儲備液2.5ml，置20ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液5。精密量取對照品儲備液3.0ml，置20ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液6。精密量取上述線性溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，并以主成分左氧氟沙星峰面積與其濃度計(jì)算線性回歸方程，求出相關(guān)系數(shù)r。結(jié)果顯示，在所驗(yàn)證濃度范圍（0.04μg/ml~146.36μg/ml）內(nèi)，主峰的峰面積與其相應(yīng)濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為y=56393x+17111，相關(guān)系數(shù)r為1.0000。2.5回收率按處方量配制空白輔料溶液，精密稱取9份空白輔料各約4mg，分別置9個(gè)100ml量瓶中，1~3號瓶分別加入左氧氟沙星原料約8mg，加稀釋劑適量，超聲使溶解，冷卻至室溫，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，作為80%回收率溶液；4~6號瓶分別加入左氧氟沙星原料約10mg，加稀釋劑適量，超聲使溶解，冷卻至室溫，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，作為100%回收率溶液；7~9瓶分別加入左氧氟沙星原料約12mg，加稀釋劑適量，超聲使溶解，冷卻至室溫，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，作為120%回收率溶液。另外精密稱取左氧氟沙星對照品約10mg，置100ml量瓶中，加稀釋劑適量，超聲使溶解，冷卻至室溫，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。平行配制2份溶液。精密量取對照品溶液和上述回收率溶液各10μl，分別注入到液相色譜儀中，記錄色譜圖，計(jì)算回收率，回收率%=測得量/加入量×100%。結(jié)果顯示，9份回收率溶液測得的回收率分別為98.55%，98.36%，98.22%，98.30%，97.95%，98.26%，98.31%，98.68%，98.03%，平均回收率為98.3%，RSD為0.2%，表明本方法準(zhǔn)確度良好。3討論3.1通過試驗(yàn)，確定了左氧氟沙星片的含量測定方法，測定結(jié)果可靠，方法簡便，為左氧氟沙星片的質(zhì)量控制提供了依據(jù)。3.2通過200~400nm進(jìn)行掃描，左氧氟沙星對照品溶液溶液在294nm處有最大吸收，故選擇294nm為測定波長。4結(jié)論實(shí)驗(yàn)室主要是使用高效液相色譜法測定左氧氟沙星片中左氧氟沙星的含量。此檢測方法的專屬性強(qiáng)，精密度好，準(zhǔn)確度高。本文以上研究主要是探討用反相高效液相色