玉米淀粉雙酶解制取葡萄糖實(shí)驗(yàn)

玉米淀粉雙酶解制取葡萄糖實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆沼妹阜ㄋ獾矸壑苽渌馓堑脑砑胺椒āＵ莆者€原糖的化學(xué)測(cè)定。實(shí)驗(yàn)原理：1.糊化原理：將淀粉乳加熱，淀粉顆粒膨脹，由于顆粒的膨脹，晶體結(jié)構(gòu)消失，變成糊狀液體，淀粉不再沉淀，這種現(xiàn)象稱為糊化。不同的淀粉的糊化溫度不同。如玉米淀粉開(kāi)始糊化的溫度為62.0℃,中點(diǎn)溫度為67℃，終結(jié)溫度為72℃。糊化分為：預(yù)糊化（吸水），糊化（體積膨脹）。糊化過(guò)程中，要防止淀粉的老化（分子間氫鍵已斷裂的糊化淀粉又重新排列形成新的氫鍵的過(guò)程）。2.液化原理：液化是利用液化酶使糊化淀粉水解到一定的糊精和低聚糖程度，粘度大大降低，流動(dòng)性增加。淀粉的酶解法液化是以耐高溫α-淀粉酶作為催化劑，該酶作用于淀粉的α-1,4-糖苷鍵，從內(nèi)部隨機(jī)地水解淀粉，從而迅速將淀粉水解為糊精及少量麥芽糖，所以α-淀粉酶也稱內(nèi)切淀粉酶。淀粉受到α-淀粉酶的作用后，其碘色反應(yīng)發(fā)生以下變化：藍(lán)色→紫色→紅色→淺紅色→不顯色（即顯碘原色）。3.糖化理論：淀粉的酶解法糖化是以糖化酶為催化劑，該酶從非還原末端以葡萄糖為單位依次分解淀粉的α-1,4-糖苷鍵或α-1,6-糖苷鍵，由于是從鏈的一端逐漸一個(gè)個(gè)地切斷為葡萄糖，所以糖化酶也成為外切淀粉酶。4.DE值：用DE值表示淀粉水解的程度或糖化程度。糖化液中還原性糖以葡萄糖計(jì)，占干物質(zhì)的百分比稱為DE值。DE值計(jì)算：%還原糖用裴林氏法等法測(cè)定，濃度表示：葡萄糖g/100ml糖液；干物質(zhì)用阿貝折光儀測(cè)定，濃度表示：干物質(zhì)g/100ml糖液。實(shí)驗(yàn)器材儀器設(shè)備：振蕩培養(yǎng)器1臺(tái)，1000mL燒杯1個(gè)，200mL燒杯3個(gè)，500mL三角瓶1個(gè)；250mL三角瓶3個(gè)；還原糖測(cè)定裝置1套；折光儀（阿貝折光儀或手提折光儀）1臺(tái)，密度計(jì)（或密度瓶）1個(gè)，電爐1臺(tái)，水浴鍋一臺(tái)，PH計(jì)，PH試紙，白瓷板，滴定管，移液管，玻璃棒，抽濾瓶，布氏漏斗，抽氣泵，快速濾紙，玻璃珠材料試劑：淀粉、淀粉酶、糖化酶、碘液、斐林試劑配制和標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液（1.0000mol/L）配制的相關(guān)藥品，活性碳，蒸餾水。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1.實(shí)訓(xùn)步驟（1）配制還原糖測(cè)定的試劑（斐林試劑），并標(biāo)定空白。（2）準(zhǔn)備稱取150g淀粉，放入1000mL燒杯中，加水定容至500mL，調(diào)節(jié)pH6.2，按20U/g的用量加入淀粉酶，在電爐上加熱至100℃，酶解60-120min，酶解過(guò)程中進(jìn)行間歇性攪拌，不定時(shí)取樣檢測(cè)，至碘液無(wú)顯色反應(yīng)時(shí)結(jié)束液化。液化結(jié)束后，將物料冷卻至60℃，補(bǔ)水定容至500mL，混合均勻，準(zhǔn)確量取200mL，放入一個(gè)500mL三角瓶?jī)?nèi)，調(diào)節(jié)pH4.6，按300U/g的用量加入糖化酶，置于60℃、200r/min下，進(jìn)行振蕩糖化14h。糖化結(jié)束后升溫至85℃維持20min。用快速濾紙過(guò)濾剩余的液化液，對(duì)濾液進(jìn)行測(cè)量密度（用密度計(jì)測(cè)定）、錘度（用折光儀測(cè)定）和還原糖濃度（用滴定法測(cè)定），計(jì)算液化結(jié)束時(shí)的DE值。糖化結(jié)束后，加入8g/L的粉末活性碳，在60℃下振蕩脫色45min，趁熱過(guò)濾，對(duì)濾液進(jìn)行測(cè)量密度（用密度計(jì)測(cè)定）、錘度（用折光儀測(cè)定）和還原糖濃度（用滴定法測(cè)定），計(jì)算糖化結(jié)束時(shí)的DE值。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與處理液化表1：標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖的標(biāo)定記錄表123預(yù)先加入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積/mL后滴定時(shí)滴定管初讀數(shù)/mL后滴定時(shí)滴定管終讀數(shù)/mL消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積的平均值V0/mL表2：液化時(shí)還原糖濃度測(cè)定記錄表123預(yù)先加入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積/mL后滴定時(shí)滴定管初讀數(shù)/mL后滴定時(shí)滴定管終讀數(shù)/mL消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積的平均值V1/mL糖化表3：標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖標(biāo)定的測(cè)定記錄表123預(yù)先加入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積/mL后滴定時(shí)滴定管初讀數(shù)/mL后滴定時(shí)滴定管終讀數(shù)/mL正式滴定時(shí)消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積的平均值V3/mL表4：液化時(shí)還原糖濃度測(cè)定記錄表123預(yù)先加入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積/mL后滴定時(shí)滴定管初讀數(shù)/mL后滴定時(shí)滴定管終讀數(shù)/mL正式滴定時(shí)消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積的平均值V4/mL表5：液化糖化實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表液化糖化密度計(jì)（g/cm3