2025年華東師大版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年華東師大版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷170考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、圖為用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)某細(xì)菌的結(jié)果；對(duì)此下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.此結(jié)果是利用平板劃線法得到，劃線的順序是①→③→②B.圖示顯示的接種方法為涂布平板法，②處可見單菌落C.每次劃線前均需灼燒接種環(huán)，其目的都是防止雜菌污染D.培養(yǎng)基中的糖類、瓊脂等含碳物質(zhì)，可為該細(xì)菌提供碳源2、白蟻是自然環(huán)境中存在的能夠高效降解纖維素的昆蟲之一；原因是白蟻消化道中的某些微生物能分泌纖維素酶。某生物興趣小組從白蟻消化道中分離能高效降解纖維素的細(xì)菌，實(shí)驗(yàn)流程如下圖。下列敘述正確的是（）

A.纖維素酶是由多種酶組成的復(fù)合酶，其中催化纖維二糖水解的酶是C1酶和CX酶B.選擇培養(yǎng)的培養(yǎng)基中，纖維素是唯一的碳源，且要持續(xù)通入無(wú)菌空氣，提供充足氧氣C.鑒別纖維素分解菌時(shí)，不能在長(zhǎng)出菌落的培養(yǎng)基上直接滴加剛果紅染液D.要長(zhǎng)期保存菌種，可將菌液與滅菌后的甘油1∶1混合，放在-20℃的冷凍箱中保存3、關(guān)于設(shè)計(jì)試管嬰兒的問(wèn)題，下列哪項(xiàng)不合乎道德規(guī)范（）A.利用試管嬰兒提供骨髓造血干細(xì)胞救治病人B.設(shè)計(jì)試管嬰兒不考慮其性別C.利用試管嬰兒的臍帶血救治病人D.利用設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)設(shè)計(jì)畸形嬰兒，以供醫(yī)學(xué)研究4、固定化單寧酶應(yīng)用于茶飲料加工，可消除其中苦澀味。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.在單寧酶純化時(shí)可采用透析法去除雜蛋白B.化學(xué)結(jié)合法比吸附法對(duì)單寧酶活性影響更小C.酶的高效性決定固定化單寧酶不會(huì)降解茶飲料中的有益成分D.溫度、pH和重金屬離子都可能影響固定化單寧酶活性5、下列有關(guān)利用葡萄酸制果酒過(guò)程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.適當(dāng)增加酵母菌的接種量，可以縮短發(fā)酵的時(shí)間B.酒精積累是導(dǎo)致發(fā)酵液中細(xì)菌數(shù)量降低的原因之一C.果酒制成后只需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中即可制作果醋D.葡萄的品質(zhì)、酵母菌菌種的純度都會(huì)影響果酒的品質(zhì)6、如圖表示某動(dòng)物的卵子的發(fā)生過(guò)程，與此相關(guān)的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.圖中A是第一極體，B是合子，C是受精B.不同動(dòng)物排出的卵子所處細(xì)胞時(shí)期可能不同C.圖中②是減數(shù)第一次分裂，③④是減數(shù)第二次分裂D.當(dāng)觀察到兩個(gè)極體時(shí)，可以表明卵子已經(jīng)完成了受精評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)7、下列有關(guān)生物技術(shù)引起的安全性和倫理問(wèn)題的敘述，不正確的是（）A.基因編輯制造嬰兒的行為是不符合倫理道德的B.設(shè)計(jì)試管嬰兒是為了治療疾病，不會(huì)出現(xiàn)負(fù)面影響C.我國(guó)禁止生殖性克隆人和有關(guān)人胚胎干細(xì)胞的研究D.世界各國(guó)都應(yīng)該禁止在任何情況下生產(chǎn)、儲(chǔ)存和發(fā)展生物武器8、下列關(guān)于生物技術(shù)與倫理問(wèn)題的觀點(diǎn)，正確的是（）A.利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎的性別，設(shè)計(jì)試管嬰兒B.基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問(wèn)題C.運(yùn)用試管嬰兒技術(shù)解決不孕問(wèn)題D.大量引入國(guó)外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交9、下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性的敘述，正確的是（）A.病毒可感染動(dòng)物細(xì)胞，因此誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合一般不用病毒B.我國(guó)對(duì)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實(shí)行了嚴(yán)格的標(biāo)識(shí)制度C.經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌可能成為生物武器D.轉(zhuǎn)基因物種的迅速擴(kuò)散有利于增加生物多樣性10、2016年初；首位由“三合一”胚胎人工授精技術(shù)培育的嬰兒出生，其培有過(guò)程如下圖所示。下列相關(guān)說(shuō)法正確的是（）

A.“三親嬰兒”孕育過(guò)程中使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植等技術(shù)B.融合激活后的卵母細(xì)胞要培養(yǎng)到MII中期才能完成受精作用C.卵母細(xì)胞A的捐獻(xiàn)者攜帶的血友病基因能遺傳給“三親嬰兒”D.“三親嬰兒”培育技術(shù)可以用來(lái)避免細(xì)胞質(zhì)遺傳病的遺傳11、進(jìn)行土壤中尿素分解菌的選擇培養(yǎng)時(shí)，利用的培養(yǎng)基組分及含量如表所示。下列分析錯(cuò)誤的是（）。組分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4?7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0gH2O定容至1000mL

A.KH2PO4和Na2HPO4既可為菌體提供無(wú)機(jī)鹽，又可調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pHB.尿素既可為尿素分解菌提供氮源，又可對(duì)培養(yǎng)基中的微生物起選擇作用C.瓊脂既可為尿素分解菌提供碳源，又起到凝固劑的作用D.蒸餾水既可進(jìn)行定容，又可對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋以便于計(jì)數(shù)12、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設(shè)計(jì)品種乙組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。為確定品種乙的II階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，其中細(xì)胞分裂素最高濃度設(shè)為M。下列有關(guān)敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素/（μmol·L-1）生長(zhǎng)素/（μmol·L-1）I誘導(dǎo)形成愈傷組織α1b1II誘導(dǎo)形成幼芽α2b2Ⅲ誘導(dǎo)生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是II和Ⅲ階段B.實(shí)驗(yàn)中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細(xì)胞分裂素濃度的實(shí)驗(yàn)中，M為α2+2μmol·L-1D.生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素13、下圖為科學(xué)家培育克隆猴的基本步驟，下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性B.對(duì)A猴卵母細(xì)胞去核是為了保證克隆猴的核遺傳物質(zhì)都來(lái)自B猴C.必須將重組細(xì)胞培育到一定程度后才能植入代孕動(dòng)物體內(nèi)D.A猴的卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)B猴體細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)14、凋亡誘導(dǎo)因子（AIF）位于線粒體膜間隙中，它既是對(duì)細(xì)胞凋亡起重要作用的蛋白質(zhì)，又具有氧化還原酶活性。有研究表明，AIF在胃癌細(xì)胞中的表達(dá)量高于在正常胃細(xì)胞中的。某醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室人員從胃癌患者的胃癌組織中提取AIF基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并進(jìn)行鑒定，相關(guān)過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.檢測(cè)AIF在胃細(xì)胞中的表達(dá)量，可能成為預(yù)防胃癌的手段B.AIF引起的細(xì)胞凋亡是基因所決定的細(xì)胞死亡，不受環(huán)境條件的影響C.圖中逆轉(zhuǎn)錄和PCR均可獲取DNA產(chǎn)物，兩個(gè)過(guò)程所需要的原料和酶是相同的D.電泳鑒定AIF基因時(shí)，DNA分子的遷移速率與凝膠濃度和DNA分子的大小等有關(guān)15、治療性克隆的做法是先從需要救治的患者身上提取細(xì)胞，然后將該細(xì)胞的遺傳物質(zhì)植入一個(gè)去除了細(xì)胞核的卵細(xì)胞中，該卵細(xì)胞開始自行分裂，直至形成一個(gè)早期胚胎，從早期胚胎中提取胚胎干細(xì)胞后將其培養(yǎng)成人們所需要的各種人體器官。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（）A.可采用開放式培養(yǎng)的方式，置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞B.該早期胚胎發(fā)育始于受精卵，胚胎是由囊胚內(nèi)部的細(xì)胞團(tuán)不斷增殖分化而來(lái)C.治療性克隆中運(yùn)用胚胎移植技術(shù)，一般不選擇原腸胚進(jìn)行胚胎移植D.我國(guó)不贊成、不允許、不支持、不接受任何克隆性實(shí)驗(yàn)評(píng)卷人得分三、填空題(共7題，共14分)16、第一步：______17、在___________條件下，DNA與___________反應(yīng)呈現(xiàn)______________，因此_____________可以作為鑒定DNA的試劑。18、細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就______，稱為______。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面______時(shí)，細(xì)胞就會(huì)_____，這種現(xiàn)象稱為______。19、應(yīng)用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。20、請(qǐng)回答有關(guān)植物細(xì)胞工程的問(wèn)題：

（1）在植物中，一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)________的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其__________而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到_________培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到__________的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。21、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進(jìn)入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識(shí)提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。22、生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對(duì)植物無(wú)害。（選擇性必修3P111）()評(píng)卷人得分四、判斷題(共3題，共18分)23、制備單克隆抗體時(shí)，2次篩選的目的不同。()____A.正確B.錯(cuò)誤24、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來(lái)的第二代基因工程。()A.正確B.錯(cuò)誤25、生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)的區(qū)別。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共8分)26、I：“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性。某科研小組為了尋找提取臘梅DNA的優(yōu)良方法，比較了兩種提取DNA的方法，主要操作如下：

實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果如下（表中OD260反映溶液中核酸的濃度；OD280反映溶液中蛋白質(zhì)的濃度。理論上，純DNA溶液的OD260/OD280為1.8，純RNA溶液的OD260/OD280為2.0）。

。CTABSDSOD260OD280OD260/OD28OD260OD280OD260/OD280.0030.0181.8330.0060.0051.200請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

（1）與常溫下研磨相比，液氮中研磨的優(yōu)點(diǎn)是_______；CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是_______。

（2）氯仿一異戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿一異戊醇，蛋白質(zhì)等雜質(zhì)可溶于氯仿一異戊醇，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中加入氯仿一異戊醇離心后，應(yīng)取①______加異丙醇（異丙醇與水互溶）并離心進(jìn)行純化，利用異丙醇溶液純化DNA的原理是________。

（3）兩種方法中，________法提取的DNA較多，其可能原因是_______。

II：某研究組對(duì)玉米開展了組織培養(yǎng)及相關(guān)研究；A；B、C、D表示以親本植物為材料進(jìn)行的四種人工繁殖過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，外植體需要進(jìn)行消毒處理。利用圖中的部分葉片進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，需將其先用________消毒30s后；用無(wú)菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無(wú)菌水清洗2-3次。

（2）2，4-D常用于玉米愈傷組織的誘導(dǎo)，對(duì)形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進(jìn)愈傷組織再分化，在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需____（填“升高”“保持”或“降低）2，4-D的濃度。當(dāng)玉米愈傷組織在只含有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí)，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn)，但要繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加____________；以促進(jìn)苗形成。

（3）研究中用顯微鏡可以觀察到的現(xiàn)象是_______（填下列序號(hào)）。

①綠色芽點(diǎn)細(xì)胞排列松散②剛?cè)诤系碾s交細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離。

③胚狀體細(xì)胞中有葉綠體④分化的愈傷組織的各細(xì)胞的形態(tài)大小一致27、《傷寒論》中記載的芍藥甘草湯是由芍藥和甘草兩味藥物制成，具有調(diào)和肝脾，緩急止痛的作用，芍藥和甘草的主要活性成分分別為芍藥苷和甘草酸。科研團(tuán)隊(duì)通過(guò)制備抗芍藥苷的單克隆抗體，將其純化后結(jié)合在固相載體上，讓芍藥甘草湯流過(guò)，去除湯中芍藥苷，用于探究芍藥苷與芍藥甘草湯對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛作用的相關(guān)性?；卮鹣铝袉?wèn)題。

(1)制備單克隆抗體依賴的生物技術(shù)有______________、_________________等。將芍藥苷與蛋白質(zhì)結(jié)合作為抗原，定期間隔免疫小鼠，取免疫后的小鼠脾臟，剪碎并用_____________酶處理得到小鼠脾臟細(xì)胞。

(2)圖中誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合的試劑X是____________，經(jīng)選擇培養(yǎng)篩選出的細(xì)胞Y具有________________________特點(diǎn)。用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng)細(xì)胞Y并收集上清液，利用___________________技術(shù)對(duì)上清液進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)。

(3)研究人員將生理狀態(tài)相同的小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、造模組進(jìn)行如下處理，造模組前期已完成冰醋酸致痛處理（冰醋酸能引起深部的、大面積且較持久的疼痛刺激，此時(shí)小鼠會(huì)出現(xiàn)扭體反應(yīng)）。請(qǐng)完善實(shí)驗(yàn)方案。。組別前期處理后期處理對(duì)照組腹腔注射生理鹽水I造模組腹腔注射冰醋酸模型組：口服生理鹽水陽(yáng)性藥組：口服芍藥甘草湯陽(yáng)性藥組：口服芍藥甘草湯實(shí)驗(yàn)組：Ⅱ?qū)嶒?yàn)組：Ⅱ

①表中I的處理是_____________、Ⅱ的處理_______________。

②結(jié)果與分析：

若前期處理后，造模組小鼠扭體次數(shù)顯著__________對(duì)照組，表明致痛處理成功。后期處理結(jié)束后測(cè)定各組小鼠扭體次數(shù)，若結(jié)果為______________________，則表明芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共8分)28、基因定點(diǎn)整合可替換特定基因，該技術(shù)可用于單基因遺傳病的治療。苯丙酮尿癥是由某基因（A）突變引起的，將正常A基因定點(diǎn)整合到A基因突變的小鼠胚胎干細(xì)胞的染色體DNA上，替換突變基因，可用來(lái)研究該病的基因治療過(guò)程?；蚨c(diǎn)整合的過(guò)程如圖所示，已知neor基因可作為標(biāo)記基因，含有neor的細(xì)胞具有對(duì)G418的抗性?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)構(gòu)建重組載體，常用的工具酶有__________。構(gòu)建重組載體時(shí)，需要大量A基因，常用__________技術(shù)合成A基因，利用該方法合成A基因時(shí)需要設(shè)計(jì)并合成__________種引物。

(2)將重組載體導(dǎo)入患病小鼠胚胎干細(xì)胞的常用方法為__________。檢測(cè)患病小鼠胚胎干細(xì)胞中是否導(dǎo)入重組載體的方法是在含有__________的培養(yǎng)液中培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞。

(3)用圖中重組載體轉(zhuǎn)化胚胎干細(xì)胞時(shí)，會(huì)出現(xiàn)A基因錯(cuò)誤整合。錯(cuò)誤整合時(shí)，重組載體上的兩個(gè)HSV-tk至少會(huì)有一個(gè)neor一起整合到染色體DNA上。已知HSV-tk1、HSV-tk2的產(chǎn)物都把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡。將導(dǎo)入重組載體胚胎干細(xì)胞置于同時(shí)含有G418和DHPG的培養(yǎng)，存活下來(lái)的是__________（填“正確整合”或“錯(cuò)誤整合”）的胚胎干細(xì)胞。

(4)將上述篩選得到的胚胎干細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因小鼠，還需要__________技術(shù)和_________技術(shù)。29、羊乳因其營(yíng)養(yǎng)成分最接近人乳；且不含牛乳中的某些可致過(guò)敏的異性蛋白質(zhì)而受到消費(fèi)者的青睞,但市場(chǎng)上存在著用牛乳冒充羊乳欺騙消費(fèi)者的現(xiàn)象。對(duì)此，研究人員開發(fā)制了羊乳as1-酪蛋白單克隆抗體檢測(cè)試劑盒。下圖為制備as1-酪蛋白單克隆抗體的示意圖，1~6代表相關(guān)過(guò)程，a~e代表相關(guān)細(xì)胞。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

(1)過(guò)程1是指將____（填“asl-酪蛋白抗原”或“asl-酪蛋白抗體”）注入小鼠體內(nèi)，一段時(shí)間后，取小鼠的脾臟組織，剪碎后用______酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞，以獲得相應(yīng)的細(xì)胞；圖中細(xì)胞b一般選用_____細(xì)胞。

(2)對(duì)于圖中的細(xì)胞d，需用HAT選擇培養(yǎng)基篩選出_______；過(guò)程3再對(duì)其進(jìn)行_______；經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞e，該種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能大量增殖，又能產(chǎn)生asl-酪蛋白抗體。

(3)DNA的合成一般有兩條途徑。主要途徑（途徑一）是在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸，進(jìn)而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑（途徑二）是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下，經(jīng)酶催化合成DNA，而骨髓瘤細(xì)胞的DNA合成沒(méi)有此輔助途徑。根據(jù)這樣的原理，向經(jīng)誘導(dǎo)后的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合培養(yǎng)液中添加氨基嘌呤______（填“能”或“不能”）篩選所需的細(xì)胞。30、下圖是將乙肝病毒表面主蛋白基因HBsAg導(dǎo)入巴斯德畢赤酵母菌生產(chǎn)乙肝疫苗的過(guò)程示意圖。巴斯德畢赤酵母菌是一種甲基營(yíng)養(yǎng)型酵母；能將甲醇作為其唯一碳源，此時(shí)AOX1基因受到誘導(dǎo)而表達(dá)，圖中pPIC9K質(zhì)粒上5'AOX1和3'AOX1（TT）分別是基因AOX1的啟動(dòng)子和終止子。該酵母菌體內(nèi)無(wú)天然質(zhì)粒，科學(xué)家改造出了圖1所示質(zhì)粒用作載體，其與目的基因形成的重組質(zhì)粒經(jīng)酶切后可以與酵母菌染色體發(fā)生同源重組，將目的基因整合于染色體中以實(shí)現(xiàn)表達(dá)。請(qǐng)回答:

(1)用PCR技術(shù)擴(kuò)增HBsAg基因時(shí)原料是_______________，Taq酶需要_______________激活。

(2)為實(shí)現(xiàn)HBsAg基因和pPIC9K質(zhì)粒重組，設(shè)計(jì)引物時(shí)需要在引物的_______________端添加相應(yīng)限制酶的識(shí)別序列，則在HBsAg基因兩側(cè)的A和B位置添加的堿基序列分別是_______________、_______________，這樣設(shè)計(jì)的優(yōu)點(diǎn)是_______________。

(3)酶切獲取HBsAg基因后，需用_______________（填“EcoliDNA連接酶”或“T4DNA連接酶”）將其連接到pPIC9K質(zhì)粒上，形成重組質(zhì)粒，構(gòu)建重組質(zhì)粒的目的是______________。

(4)若用限制酶SnaBI、BglII聯(lián)合酶切pPIC9K質(zhì)粒，獲得的DNA片段的長(zhǎng)度分別是38kb、27kb、67kb；用限制酶BglII、AvrII聯(lián)合酶切pPIC9K質(zhì)粒，得到的DNA片段的長(zhǎng)度分別是38kb、40kb、54kb；已知HBsAg基因長(zhǎng)度是55kb。步驟3中應(yīng)選用限制酶_______________來(lái)切割重組質(zhì)粒以獲得重組DNA，切割后的重組DNA的長(zhǎng)度是_______________。

(5)轉(zhuǎn)化的酵母菌在培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后，需要向其中加入甲醇，其目的是_______________。31、研究發(fā)現(xiàn)；新冠病毒外殼中的S蛋白具有很強(qiáng)的抗原性，可利用其制備單克隆抗體，制備流程設(shè)計(jì)如下圖所示，相關(guān)限制酶及其識(shí)別序列如下表所示，請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

限制酶識(shí)別序列和切割位點(diǎn)EcoRⅠG↓AATTCBamHⅡG↓GATCCBglⅠA↓GATCTSalⅠG↓TCGAC

（1）人體內(nèi)，分泌抗體的細(xì)胞可來(lái)自于____________________細(xì)胞的增殖分化。

（2）根據(jù)病毒的結(jié)構(gòu)，圖中①過(guò)程常用__________酶處理，完成②過(guò)程需要的酶是___________。

（3）檢測(cè)④過(guò)程是否獲得成功的方法是________________________，⑥過(guò)程常用的方法是_________________。

（4）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增無(wú)限增殖調(diào)控基因時(shí)，科研人員設(shè)計(jì)了如下一對(duì)引物（部分序列）：GAATTC____和____CCTAGG，其中下劃線部分序列的設(shè)計(jì)依據(jù)是___________，方框部分序列的設(shè)計(jì)目的是___________。

（5）抗體可變區(qū)氨基酸的組成和排列順序可隨抗體結(jié)合抗原的特異性不同而有較大的變異，由于可變區(qū)中氨基酸的種類以及排列順序干變?nèi)f化，故可形成許多種具有不同結(jié)合抗原特異性的抗體。為克服鼠源性單抗輸入人體后產(chǎn)生的免疫排斥反應(yīng)，科研人員通過(guò)人工改造鼠源性單抗獲得了嵌合抗體。分析下圖，你認(rèn)為最符合臨床要求的嵌合抗體是A~D中的___________。嵌合抗體的研制屬于___________這一科技范疇。

參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、A【分析】【分析】

1.微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

2.劃線分離操作中的有關(guān)問(wèn)題：

①在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)；在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)。第一次灼燒每次劃線之前灼燒劃線結(jié)束灼燒目的避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染或感染操作者；

②在灼燒接種環(huán)之后；要等其冷卻后再進(jìn)行劃線，以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。

③在進(jìn)行第二次以及其后的劃線操作時(shí)'要從上一次劃線的末端開始劃線。每次劃線后；線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。

【詳解】

A；根據(jù)菌落的生長(zhǎng)狀態(tài)可知；此結(jié)果是利用平板劃線法得到，劃線的順序是①→③→②，A正確；

B；圖示顯示的菌落生長(zhǎng)狀態(tài)的接種方法不是涂布平板法得到的；②處可見單菌落，B錯(cuò)誤；

C；每次劃線前均需灼燒接種環(huán)；其目的都是殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，從而保證菌落來(lái)自上一次劃線的末端，C錯(cuò)誤；

D；培養(yǎng)基中的瓊脂是凝固劑；不能為細(xì)菌提供碳源，D錯(cuò)誤。

故選A。

【點(diǎn)睛】2、D【分析】【分析】

1、纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶三種；其中能夠?qū)⒗w維二糖分解為葡萄糖的是葡萄糖苷酶。

2；微生物的培養(yǎng)基的主要成分包括碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽；有的還有特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（生長(zhǎng)因子、維生素）。

3；纖維素分解菌常采用剛果紅染液進(jìn)行鑒定；剛果紅可以與纖維素結(jié)合形成紅色物質(zhì)，纖維素分解菌由于能夠?qū)⒗w維素分解而在平板上的菌落周圍出現(xiàn)無(wú)色的透明圈，透明圈的大小可以反應(yīng)纖維素分解菌產(chǎn)生的酶的多少。

【詳解】

A、纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；其中葡萄糖苷酶可以將纖維二糖分解成葡萄糖，A錯(cuò)誤；

B；從白蟻消化道中分離能高效降解纖維素的細(xì)菌；呼吸類型應(yīng)該為無(wú)氧呼吸，B錯(cuò)誤；

C；鑒別纖維素分解菌時(shí)；可以向長(zhǎng)出菌落的培養(yǎng)基上直接滴加剛果紅染液，C錯(cuò)誤；

D；要長(zhǎng)期保存菌種；采用甘油管藏的方方法，將菌液與滅菌后的甘油1∶1混合，放在-20℃的冷凍箱中保存，D正確。

故選D。3、D【分析】【分析】

本題考查生物技術(shù)中的倫理問(wèn)題。識(shí)記試管嬰兒技術(shù)和設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)的概念；明確兩者都需要采用體外受精；胚胎移植等技術(shù)。

【詳解】

A；利用試管嬰兒提供骨髓造血干細(xì)胞救治病人；合乎道德規(guī)范，A不符合題意；

B；設(shè)計(jì)試管嬰兒；不一定非考慮他的性別，合乎道德規(guī)范，B不符合題意；

C；利用試管嬰兒的臍帶血治療白血病等；合乎道德規(guī)范，C不符合題意；

D；利用設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)設(shè)計(jì)畸形胎兒；以供醫(yī)學(xué)研究，不合乎道德規(guī)范，D符合題意。

故選D。4、D【分析】【分析】

固定化酶：固定化酶是指用物理學(xué)或化學(xué)的方法將酶與固相載體結(jié)合在一起形成的仍具有酶活性的酶復(fù)合物．在催化反應(yīng)中；它以固相狀態(tài)作用于底物，反應(yīng)完成后，容易與水溶性反應(yīng)物和產(chǎn)物分離，可被反復(fù)使用；

制備固定化酶：目前；制備固定化酶的方法主要有吸附法；交聯(lián)法、包埋法等，吸附法的顯著特點(diǎn)是工藝簡(jiǎn)便且條件溫和，在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用廣泛；交聯(lián)法是利用多功能試劑進(jìn)行酶與載體之間的交聯(lián)，在酶和多功能試劑之間形成共價(jià)鍵，從而得到三維的交聯(lián)網(wǎng)架結(jié)構(gòu)；包埋法是將酶包埋在能固化的載體中。

【詳解】

A；透析法是利用膜的選擇透過(guò)性去除混合物中的小分子物質(zhì)；而單寧酶和雜蛋白都是大分子，所以不能去除雜蛋白，A錯(cuò)誤；

B；物理吸附法比化學(xué)結(jié)合法對(duì)單寧酶活性影響更小；B錯(cuò)誤；

C；酶的專一性決定固定化單寧酶不會(huì)降解茶飲料中的有益成分；C錯(cuò)誤；

D；酶需要溫和的條件；其活性受外界因素的影響，所以溫度、pH和重金屬離子都可能影響固定化單寧酶活性，D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】5、C【分析】【分析】

制作果酒利用的微生物是酵母菌；它的異化作用類型是兼性厭氧型；制作果醋利用的微生物是醋酸菌，它的異化作用類型是需氧型。

果酒制作的原理：在無(wú)氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。方程式:C?H??O?2C?H?OH+2CO?

醋酸菌在30-35℃有氧條件下糖源充足時(shí)；將葡萄糖分解成醋酸；糖源缺乏時(shí)，將乙醇變成乙醛再變成醋酸。

【詳解】

A；若適當(dāng)增加酵母菌的接種量；則可以縮短發(fā)酵的時(shí)間，A正確；

B；酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精；酒精具殺菌作用，發(fā)酵液中酒精積累是細(xì)菌數(shù)量降低的原因之一，B正確；

C；醋酸菌是需氧菌；且果醋發(fā)酵溫度高于果酒發(fā)酵溫度，因此果酒制成后需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高并且通入氧氣的環(huán)境中才可制作果醋，C錯(cuò)誤；

D；葡萄的品質(zhì)、酵母菌菌種的純度都會(huì)影響酵母菌的發(fā)酵過(guò)程；進(jìn)而影響果酒品質(zhì)，D正確。

故選C。6、C【分析】【分析】

由圖分析可知：①為減數(shù)第一次分裂前的間期；完成DNA的復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成；③表示減數(shù)第一次分裂，形成的子細(xì)胞為次級(jí)卵母細(xì)胞和極體；④為減數(shù)第二次分裂，在受精過(guò)程中，次級(jí)卵母細(xì)胞完成減數(shù)第二次分裂，并排出第二極體。A為第一極體，B為合子，C為受精作用過(guò)程。

【詳解】

A；圖中③為減數(shù)第一次分裂；④為減數(shù)第二次分裂，在受精過(guò)程中，次級(jí)卵母細(xì)胞完成減數(shù)第二次分裂，因此C是受精過(guò)程，B是合子，A正確；

B；不同動(dòng)物排出的卵子所處細(xì)胞時(shí)期可能不同；如馬、犬排出的卵子可能是初級(jí)卵母細(xì)胞，豬、羊排出的卵子可能是次級(jí)卵母細(xì)胞，B正確；

C；圖中③為減數(shù)第一次分裂；④為減數(shù)第二次分裂，C錯(cuò)誤；

D；當(dāng)觀察到兩個(gè)極體時(shí)；表明卵子已完成了受精作用，D正確。

故選C。二、多選題(共9題，共18分)7、B:C【分析】【分析】

人們現(xiàn)在的倫理道德觀念還不能接受克隆人﹔設(shè)計(jì)試管嬰兒是為了治療疾??；但有可能被濫用，如用于設(shè)計(jì)嬰兒性別等，可能會(huì)出現(xiàn)負(fù)面影響﹔進(jìn)行基因檢測(cè)時(shí)，可通過(guò)基因進(jìn)行檢測(cè)，也可通過(guò)測(cè)定基因的表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)來(lái)進(jìn)行;對(duì)于基因歧視現(xiàn)象，可通過(guò)正確的科學(xué)知識(shí)傳播；倫理道德教育和立法得以解決。

【詳解】

A；基因編輯制造嬰兒的行為不符合倫理道德；A正確；

B；設(shè)計(jì)試管嬰兒如專門用來(lái)設(shè)計(jì)嬰兒性別是不符合倫理道德的；可能會(huì)存在負(fù)面影響，B錯(cuò)誤；

C；我國(guó)禁止生殖性克隆人；但允許人胚胎干細(xì)胞的研究在有關(guān)規(guī)定下進(jìn)行，C錯(cuò)誤；

D；生物武器危害巨大；世界各國(guó)都應(yīng)禁止生物武器，D正確。

故選BC。8、B:C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全(滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變)、生物安全(對(duì)生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)。

【詳解】

A；設(shè)計(jì)試管嬰兒；會(huì)引起性別失調(diào)，違背倫理道德，我國(guó)不允許利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎的性別，A錯(cuò)誤；

B；應(yīng)基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問(wèn)題；B正確；

C；運(yùn)用試管嬰兒技術(shù)可以解決不孕問(wèn)題；C正確；

D；大量引入國(guó)外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交；可能造成基因污染和環(huán)境安全，D錯(cuò)誤。

故選BC。9、B:C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）．生物安全：①轉(zhuǎn)基因植物擴(kuò)散到種植區(qū)外變成野生種或雜草；②轉(zhuǎn)基因植物競(jìng)爭(zhēng)能力強(qiáng)，可能成為“入侵的外來(lái)物種”，③轉(zhuǎn)基因植物的外源基因與細(xì)菌或病毒雜交，重組出有害的病原體，④可能使雜草成為有抗除草劑基因的“超級(jí)雜草”。

【詳解】

A；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞可用滅活的病毒；A錯(cuò)誤；

B；我國(guó)對(duì)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實(shí)施標(biāo)識(shí)制度；比如由轉(zhuǎn)基因大豆加工制成的大豆油，標(biāo)注為“本產(chǎn)品加工原料中含有轉(zhuǎn)基因大豆，但本產(chǎn)品已不再含有轉(zhuǎn)基因成分”，其相關(guān)的生物學(xué)依據(jù)是大豆油屬于脂肪，不含目的基因編碼的蛋白質(zhì)，B正確；

C；生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等；C正確；

D；轉(zhuǎn)基因物種的無(wú)序迅速擴(kuò)散可能變成野生種類或變成入侵的外來(lái)物種；威脅生態(tài)系統(tǒng)中其他生物的生存，甚至?xí)茐纳锏亩鄻有裕珼錯(cuò)誤。

故選BC。10、A:B:D【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過(guò)體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；分析題圖：圖示表示三親嬰兒的培育過(guò)程；由圖可知，三親嬰兒的培育采用了核移植技術(shù)、體外受精技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等。

【詳解】

A；由圖可知；“三親嬰兒”孕育過(guò)程中使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、體外受精、核移植等技術(shù)，A正確；

B；融合激活后的卵母細(xì)胞要培養(yǎng)到MⅡ中期才具備受精能力；從而完成受精作用，B正確；

C；卵母細(xì)胞A的捐獻(xiàn)者提供的是細(xì)胞質(zhì)；而其攜帶的血友病基因位于細(xì)胞核內(nèi)的染色體上，所以其攜帶的血友病基因不能遺傳給“三親嬰兒”，C錯(cuò)誤；

D；“三親嬰兒”培育技術(shù)可以通過(guò)核移植來(lái)避免細(xì)胞質(zhì)遺傳病的遺傳；D正確。

故選ABD。11、C:D【分析】【分析】

實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基按照功能劃分；可以分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。

【詳解】

A、KH2PO4和Na2HPO4可為尿素分解菌提供無(wú)機(jī)鹽，H2PO4-和HPO42-又是一種調(diào)節(jié)pH的緩沖對(duì)；A正確；

B；培養(yǎng)基中除了尿素?zé)o其他含氮物質(zhì)；只有尿素分解菌能通過(guò)分解尿素進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖，故尿素既能為尿素分解菌提供氮源，又可對(duì)培養(yǎng)基中的微生物起選擇作用，B正確；

C；瓊脂不能被微生物利用；只能充當(dāng)凝固劑，C錯(cuò)誤；

D、表中的H2O為蒸餾水；起定容作用，蒸餾水不能對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋，稀釋所用的溶劑應(yīng)該是無(wú)菌水，D錯(cuò)誤。

故選CD。12、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素；同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí)；兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素，細(xì)胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會(huì)發(fā)生基因的選擇性表達(dá)，A錯(cuò)誤；

B；實(shí)驗(yàn)至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，則細(xì)胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細(xì)胞分裂素的最高濃度M應(yīng)設(shè)為a2+1.0μmol/L；C錯(cuò)誤；

D；生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素；D正確。

故選ABD。13、B:C:D【分析】【分析】

動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎。這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物，克隆動(dòng)物的核基因完全來(lái)自供體動(dòng)物，而細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自受體細(xì)胞。核移植包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植，其中體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，因?yàn)轶w細(xì)胞的全能性低于胚胎細(xì)胞。

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)；不能體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性，而是體現(xiàn)動(dòng)動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，A錯(cuò)誤；

B；去除A猴卵母細(xì)胞的細(xì)胞核；目的是排除A猴核遺傳物質(zhì)的干擾，保證克隆猴的核遺傳物質(zhì)都來(lái)自B猴，B正確；

C；必須將重組細(xì)胞培育到桑椹胚或囊胚階段后才能植入代孕動(dòng)物體內(nèi)；才可正常繼續(xù)發(fā)育，C正確；

D；卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)；故體細(xì)胞的細(xì)胞核需移植到去核卵母細(xì)胞后才能表現(xiàn)出全能性，D正確。

故選BCD。14、B:C【分析】【分析】

DNA分子具有可解離的基團(tuán)；在一定的pH下，這些基團(tuán)可以帶上正電荷或負(fù)電荷。在電場(chǎng)的作用下，這些帶電分子會(huì)向著與它所帶電荷相反的電極移動(dòng)，這個(gè)過(guò)程就是電泳。DNA分子的遷移速率與凝膠濃度和DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)。

【詳解】

A；根據(jù)題干信息；有研究表明，AIF在胃癌細(xì)胞中的表達(dá)量高于在正常胃細(xì)胞中的，因此檢測(cè)AIF在胃細(xì)胞中的表達(dá)量，可能成為預(yù)防胃癌的手段，A正確；

B；AIF引起的細(xì)胞凋亡是基因所決定的細(xì)胞死亡；會(huì)受環(huán)境條件的影響，B錯(cuò)誤；

C；逆轉(zhuǎn)錄和PCR均可獲取DNA產(chǎn)物；兩個(gè)過(guò)程所需要的原料均是脫氧核苷酸，但逆轉(zhuǎn)錄需要逆轉(zhuǎn)錄酶，而PCR需要耐高溫的DNA聚合酶，C錯(cuò)誤；

D；電泳鑒定AIF基因時(shí)；DNA分子的遷移速率與凝膠濃度和DNA分子的大小等有關(guān)，分子越大，遷移速率越慢，D正確。

故選BC。15、C【分析】【分析】

治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚；神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。中國(guó)政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；不反對(duì)治療性克隆。

【詳解】

A；開放式組織培養(yǎng)一般是指使組織培養(yǎng)脫離嚴(yán)格無(wú)菌的操作環(huán)境；在自然、開放的有菌環(huán)境中進(jìn)行操作。，動(dòng)物細(xì)胞一般不能采用這種方式，A錯(cuò)誤；

B；胚胎是由整個(gè)受精卵發(fā)育而來(lái)的；囊胚內(nèi)部的細(xì)胞不能發(fā)育為完整的胚胎，B錯(cuò)誤；

C；胚胎移植技術(shù)；一般采用桑椹胚或囊胚進(jìn)行移植，C正確；

D；我國(guó)不贊成、不允許、不支持、不接受任何形式的生殖性克?。坏遣环磳?duì)治療性克隆，D錯(cuò)誤。

故選C。三、填空題(共7題，共14分)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的獲取17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】沸水浴二苯胺藍(lán)色二苯胺18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】貼附在瓶壁上細(xì)胞貼壁相互抑制停止分裂增殖細(xì)胞的接觸抑制。19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）20、略

【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時(shí)的光照、pH和無(wú)菌環(huán)境等）；②一定的營(yíng)養(yǎng)（無(wú)機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)激素的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中；由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。

【點(diǎn)睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過(guò)程、原理及條件，掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確分析，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查?！窘馕觥竣?激素②.特有的結(jié)構(gòu)和功能③.黑暗④.分化⑤.培養(yǎng)條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽21、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。22、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時(shí)可毀壞植物，該說(shuō)法錯(cuò)誤?！窘馕觥垮e(cuò)誤四、判斷題(共3題，共18分)23、A【分析】【詳解】

制備單克隆抗體時(shí)，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選目的是獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，故正確。24、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過(guò)基因修飾或基因合成來(lái)完成的，是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來(lái)的第二代基因工程。故該說(shuō)法正確。25、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)區(qū)別；最重要的體現(xiàn)在目的不同。

【詳解】

治療性克?。菏侵赴芽寺〕鰜?lái)的組織和器官用于治療疾病，這種用于醫(yī)療目的的使用克隆技術(shù)制造胚胎稱為治療性克隆。生殖性克?。禾幱谏车哪康氖褂每寺〖夹g(shù)在實(shí)驗(yàn)室制造人類胚胎。治療性克隆和生殖性克隆最重要的差別是目的不同。五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共8分)26、略

【分析】【分析】

I：核酸是生物有機(jī)體中的重要成分；在生物體中核酸常與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，以核蛋白的形式存在。核酸分為脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）兩大類，在真核細(xì)胞中，前者主要存在于細(xì)胞核中，后者主要存在于細(xì)胞質(zhì)及核仁里。在制備核酸時(shí)，通過(guò)研磨破壞細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，使核蛋白被釋放出來(lái)。提取DNA有有多種方法，“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，二者既有區(qū)別又有聯(lián)系。

II：題圖分析：A表示利用生殖細(xì)胞得到單倍體植株；B表示通過(guò)胚狀體進(jìn)行無(wú)性繁殖；其中①為脫分化；再分化；C為植物組織培養(yǎng)；D表示植物體細(xì)胞雜交，其中②是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。

【詳解】

I：（1）液氮溫度低，液氮中研磨會(huì)研磨得更充分，在液氮中研磨DNA酶活性低，降低DNA的分解；EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量。

（2）氯仿-異戊醇密度均大于水且不溶于水；DNA不溶于氯仿-異戊醇，離心后，氯仿-異戊醇位于試管的底部，DNA溶于上清液中，所以離心后應(yīng)該取上清液；含DNA的上清液中加異丙醇離心后取的是沉淀物，說(shuō)明DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇。

（3）從表中數(shù)據(jù)可知；CTAB法提取的DNA的OD260是0.033，而SDS法提取的DNA的OD260是0.006，0.033＞0.006，所以CTAB法提取的DNA較多，根據(jù)CTAB和SDS兩種試劑作用的區(qū)別，可知CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而可提取出更多的DNA。

II：（1）植物組織培養(yǎng)過(guò)程中；整個(gè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌無(wú)毒，利用圖中的部分葉片進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，需將其先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒30s后，用無(wú)菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無(wú)菌水清洗2-3次。

（2）為促進(jìn)愈傷組織再分化；在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需降低2，4-D的濃度。當(dāng)玉米愈傷組織在只含有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí)，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn)，但要繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加適量的生長(zhǎng)素，以促進(jìn)苗形成。

（3）①芽是植物體中具有分生能力的組織；細(xì)胞排列緊密，①錯(cuò)誤；

②剛?cè)诤系闹参矬w細(xì)胞沒(méi)有成熟的大液泡；無(wú)法構(gòu)成滲透系統(tǒng)，不能發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象，②錯(cuò)誤；

③胚狀體細(xì)胞出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽；因此其細(xì)胞內(nèi)有葉綠體，③正確；

④分化的愈傷組織的結(jié)果形成了具有根和芽的胚狀體；細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生了變化，④錯(cuò)誤。

故選③。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查DNA提取原理、操作過(guò)程及實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析以及植物組織培養(yǎng)技術(shù)，意在考查學(xué)生讀圖能力和分析應(yīng)用能力?！窘馕觥垦心コ浞?，低溫抑制酶活性抑制DNA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量上清液DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇CTABCTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而能提取出更多的DNA（體積分?jǐn)?shù)為70-75%）酒精降低（適量的）生長(zhǎng)素③27、略

【分析】【分析】

1；單克隆抗體：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。具有特異性強(qiáng)、靈敏度高；并可能大量制備的特點(diǎn)。

2；單克隆抗體的制備過(guò)程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)；使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞，利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞(A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞)，不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

（1）單克隆抗體制備的基本步驟：對(duì)小鼠進(jìn)行免疫→提取B淋巴細(xì)胞→將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合→通過(guò)篩選；克隆化培養(yǎng)和擴(kuò)大化培養(yǎng)→最終注入小鼠體內(nèi)→從腹腔腹水中提取單克隆抗體；此過(guò)程依賴的生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合等。剪碎后的組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

（2）誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的試劑是聚乙二醇（PEG）；因此試劑X是聚乙二醇（PEG）。用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，只有雜交瘤細(xì)胞才能成活，因此經(jīng)選擇培養(yǎng)篩選出的細(xì)胞Y具有既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生抗體的特點(diǎn)。上清液中含有雜交瘤細(xì)胞，由于雜交瘤細(xì)胞能分泌抗體，故利用抗原-抗體雜交技術(shù)對(duì)上清液進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)，以便篩選出能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞，選擇陽(yáng)性孔中的細(xì)胞（即能產(chǎn)生芍藥苷抗體的細(xì)胞）繼續(xù)植入小鼠腹腔內(nèi)進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)，從小鼠腹水中可提取到抗芍藥苷的單克隆抗體，也可以將陽(yáng)性孔中的細(xì)胞在體外進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。

（3）①正常對(duì)照組：前期處理為腹腔注射生理鹽水(空白對(duì)照)；后期處理為a腹腔注射生理鹽水(空白對(duì)照)；造模組：模型組為口服生理鹽水(產(chǎn)生模型小鼠)，陽(yáng)性藥組為口服芍藥甘草湯(藥物具有顯著的鎮(zhèn)痛作用)，實(shí)驗(yàn)組為c口服去除芍藥苷的芍藥甘草湯(檢驗(yàn)去除芍藥苷的芍藥甘草湯是否具有鎮(zhèn)痛作用)。

②因?yàn)樵炷＝M注射了冰醋酸，結(jié)合題意可知，冰醋酸能引起小鼠的扭體反應(yīng)，因此前期處理后，造模組小鼠扭體次數(shù)顯著高于正常對(duì)照組，表明致痛處理成功。如果芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一，則陽(yáng)性藥組小鼠的扭體次數(shù)最低，實(shí)驗(yàn)組小鼠雖然口服的是去除了芍藥苷的芍藥甘草湯，但芍藥甘草湯中除了芍藥苷還有其他成分能夠起到鎮(zhèn)痛作用，則實(shí)驗(yàn)組小鼠扭體次數(shù)低于模型組，因此若結(jié)果為實(shí)驗(yàn)組小鼠扭體次數(shù)高于陽(yáng)性藥組低于模型組，則表明芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一?！窘馕觥?1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合胰蛋白（膠原蛋白）

(2)聚乙二醇（PEG）既能大量增殖，又能產(chǎn)生抗體抗原—抗體雜交

(3)腹腔注射生理鹽水口服去除芍藥苷的芍藥甘草湯高于實(shí)驗(yàn)組小鼠扭體次數(shù)高于陽(yáng)性藥組低于模型組六、綜合題(共4題，共8分)28、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲?。焕肞CR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因：DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA：分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

(1)

構(gòu)建重組載體時(shí)；需要使用的工具酶為限制酶和DNA連接酶。大量制備A基因，即特定基因的擴(kuò)增，常用PCR技術(shù)，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)需要合成基因兩側(cè)的兩種不同的引物。

(2)

由題意可知，小鼠胚胎干細(xì)胞為受體細(xì)胞，培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物時(shí)將重組載體導(dǎo)入受體細(xì)胞的常用方法為顯微注射法。由題意可知，neor為標(biāo)記基因；結(jié)合題中該基因的作用可知，欲篩選含有重組載體的小鼠胚胎干細(xì)胞，應(yīng)將處理后的胚胎干細(xì)胞放在含有G418的培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)，存活下來(lái)的即為導(dǎo)入重組載體的胚胎干細(xì)胞。

(3)

由題意可知，含有neor基因的細(xì)胞具有對(duì)G418的抗性，轉(zhuǎn)化的胚胎干細(xì)胞能在含G418的培養(yǎng)液中存活，說(shuō)明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞中含neor基因；HSV-tk1、HSV-tk2的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡，故能在含DHPG的培養(yǎng)液中存活說(shuō)明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞中不含HSVtk，則在含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中能存活的胚胎干細(xì)胞中含neor基因；而不含HSVtk，即發(fā)生正確整合的胚胎干細(xì)胞。

(4)

將正確整合的胚胎干細(xì)胞培育成小鼠；還需借助胚胎工程相關(guān)操作，如早期胚胎培養(yǎng)；胚胎移植等技術(shù)。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖形，主要考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理和應(yīng)用，正確從圖中獲取有效信息并合理運(yùn)用，屬于考綱中識(shí)記和理解層次的考查?！窘馕觥?1)限制酶和DNA連接酶PCR兩。

(2)顯微注射法G418

(3)正確整合。

(4)早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)胚胎移植技術(shù)29、略

【分析】【分析】

分析題圖，1代表用asl-酪蛋白抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫，2代表細(xì)胞融合，3指經(jīng)過(guò)克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)，篩選特定的雜交瘤細(xì)胞，4代表體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，5代表體內(nèi)培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，6代表對(duì)抗體進(jìn)行提取和檢測(cè)。a是小鼠的B淋巴細(xì)胞，b是小鼠的骨髓瘤細(xì)胞；c是細(xì)胞融合后的雜交細(xì)胞，d為雜交瘤細(xì)胞，e為產(chǎn)生asl-酪蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

（1）要制備as1-酪蛋白單克隆抗體，因而過(guò)程1要將asl-酪蛋白抗原注入小鼠體內(nèi)；將小鼠的脾臟組織分散成單個(gè)細(xì)胞，可以用胰蛋白酶、膠原蛋白酶進(jìn)行處理；圖中細(xì)胞b要具有無(wú)限增殖的能力；因而可以用小鼠的骨髓瘤細(xì)胞。

（2）對(duì)于圖中的細(xì)胞d；需要用特定的選擇培養(yǎng)基（HAT選擇培養(yǎng)基）篩選，在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)；過(guò)程3再對(duì)上述經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞e，該種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能大量增殖，又能產(chǎn)生asl-酪蛋白抗體。

（3）由題干信息知，B淋巴細(xì)胞的DNA合成途徑有兩條，骨髓瘤細(xì)胞中的DNA合成途徑只有一條。向經(jīng)誘導(dǎo)后的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合培養(yǎng)液中添加氨基嘌呤，雜交瘤細(xì)胞中的DNA合成途徑一被阻斷，可通過(guò)輔助途徑合成DNA，故向經(jīng)誘導(dǎo)后的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合培養(yǎng)液中添加氨基嘌呤能篩選雜交瘤細(xì)胞?！窘馕觥?1)asl-酪蛋白抗原胰蛋白##膠原蛋白骨髓瘤。

(2)雜交瘤細(xì)胞克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。

(3)能30、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖中質(zhì)粒含有SnaB、AvrⅡ、BglⅡ和SacI限制酶切割位點(diǎn)，其中SacI位于啟動(dòng)子上，Bgl