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文檔簡介

《有機污染場地土壤生物修復技術規(guī)范微生物菌劑使用》

(征求意見稿)編制說明

1.任務來源

本標準編制來源于國家重點研發(fā)計劃課題“典型有機污染場地高效降解微生

物菌劑/酶制劑研發(fā)”提出編制典型有機污染場地生物修復菌劑修復技術規(guī)范的

任務。清華大學承擔《有機污染場地土壤生物修復技術規(guī)范微生物菌劑使用》

的編制工作。

2.標準制定的必要性分析

當前,石油烴和芳烴污染場地修復問題引起了世界范圍關注。在國內,隨著

我國工業(yè)化的進程,工業(yè)污染場地越來越多,基于環(huán)保部對22個省市200多個

工業(yè)污染場地調查發(fā)現(xiàn),石油化工、農藥化工、機械加工場地是有機污染物檢出

率最高的三類工業(yè)污染場地,其中石油烴和芳烴類為主要的污染物。石油污染物

具有組分復雜,難于降解,易于在植物中富集等特點。為增強對土壤中石油烴和

芳烴污染的風險控制,生態(tài)環(huán)境部將石油烴和芳烴列為土壤中重要的污染物并設

定了嚴格的控制范圍。2016年,我國頒布了《土壤污染防治行動計劃》,土壤污

染防治相關標準和技術規(guī)范得以不斷完善。2018年最新頒布的《土壤環(huán)境質量

建設用地土壤污染風險管控標準(試行)》(GB36600—2018)制定了基于對人體健

康是否有害的土壤污染風險篩選值,使土壤環(huán)境質量評估工作步入了一個嶄新的

階段。其中對C10~C40的石油烴,苯,甲苯,乙苯以及鄰二甲苯等苯系物以及

萘,苯并[a]蒽以及苯并[a]芘等多環(huán)芳烴的管制值和篩選值進行了嚴格的限定。近

年來我國修復石油烴和芳烴污染的技術主要包括化學氧化/還原、熱脫附、固化/

穩(wěn)定化以及抽出等。然而相對于這些技術,生物修復法由于其成本低、無二次污

染、操作簡單的優(yōu)點,能將污染物最終轉化為無害的產(chǎn)物,可以同時運用于土壤

和地下水修復,是一種經(jīng)濟、綠色清潔、最具前景的修復技術,尤其對于中低濃

度的石油烴和芳烴污染的土壤修復。微生物法修復污染土壤中直接影響修復效率

的是修復功能菌的修復效率,然而到目前為止,土壤中芳烴和石油烴類修復菌劑

1

的選育僅僅是基于微生物在液態(tài)培養(yǎng)基對污染物的降解或脫毒作用能力,而沒有

考慮到菌劑的擴培和制備,菌劑投加實際土壤后的存活能力和降解活性。因此需

要提出一套微生物菌劑應用于石油烴、芳烴污染土壤生物修復的技術方法,對芳

烴、石油烴污染場地土壤生物修復菌劑應用技術的規(guī)范化、標準化進一步完善,

以便進一步準確地實施生物菌劑強化修復,以及能夠更有效地評估菌劑強化技術

效果,為有機污染土壤生物修復實際場地應用奠定一定基礎。

我國關于石油烴、芳烴污染場地微生物修復技術指南部分存在一定的研究空

缺,通過項目自主研發(fā)和遴選相結合,結合相關法律法規(guī),形成石油烴、芳烴污

染場地微生物修復治理技術指南,為生態(tài)環(huán)境保護方面、特別是土壤污染防治領

域的修訂制度、更新數(shù)據(jù)、知識管理和決策支持提供有效幫助。本規(guī)范的制定,

符合新的場地污染土壤修復工程技術規(guī)范要求,有利于真正規(guī)范和進一步推進我

國場地土壤生物修復技術工作,為有機污染土壤生物修復提供參考和指導。

2

3.工作過程

3.1項目組成立

2020年11月,項目立項,簽訂任務書。

3.2開題報告與初稿

2021年~2023年,編制單位分別調研了美國、日本、歐洲等地區(qū)的土壤有機

污染生物修復相關制度、技術進展及相關工程案例,結合編制單位前期在北京、

山東、新疆等污染場地試點工程經(jīng)驗,完成《有機污染場地土壤生物修復技術規(guī)

范微生物菌劑使用》(草案)編制工作。

3.3立項論證

2023年8月,召開并通過《有機污染場地土壤生物修復技術規(guī)范微生物

菌劑使用》(草案)立項論證會,會后就與會專家提出的問題和建議繼續(xù)開展調

研及文本修改,完成《有機污染場地土壤生物修復技術規(guī)范微生物菌劑使用》

(草案)修改工作。

3.4征求意見稿起草

2024年1月10日,中國環(huán)境科學學會組織召開《有機污染場地土壤生物修

復技術規(guī)范微生物菌劑使用》(征求意見稿)技術審查會,會后根據(jù)專家意見

對文本進行了進一步修改,形成最新版本的《有機污染場地土壤生物修復技術規(guī)

范微生物菌劑使用(征求意見稿)》。

4.國內相關標準研究

針對芳烴、石油烴類污染土壤生物修復,國外在這方面起步較早,在1992年

美國國家環(huán)保局就針對微生物土壤修復技術,制定一系列相關標準,主要為US

EPA和美國海軍工程服務中心等研究所編制的相關文件;然而我國缺乏關于污染

土壤微生物修復的行業(yè)和團體標準,有關微生物法土壤修復的行業(yè)、團體標準有

《微生物法修復化工污染土壤技術規(guī)范》、《石油污染土壤微生物修復技術規(guī)范》

等。本標準采納了部分以上標準的修復技術以及其它文獻內的修復技術。本標準

增加了菌劑產(chǎn)品治理以及技術路程控制等方面的內容。

3

本標準為首次制定,與本行業(yè)現(xiàn)有的其它標準協(xié)調配套,沒有沖突。

5.芳烴-石油烴類污染土壤菌劑修復工程調研

5.1技術應用概述

廣義的生物修復,是指一切利用生物為主體的土壤或地下水污染治理技術,

包括利用植物、動物或微生物吸收、降解、轉化土壤和地下水中的污染物,使污

染物的濃度降低到可接受的水平,或將有毒有害的污染物轉化為無毒無害的物質

也包括將污染物固定或穩(wěn)定,以減少其向周邊環(huán)境的擴散。狹義的生物修復是通

過具有降解功能的細菌、酵母菌、真菌等微生物的作用,使環(huán)境介質中的污染物

得以去除或使污染物無害化的過程。石油烴、芳烴污染土壤的生物修復技術一般

可以分為兩類,原位修復技術和異位修復技術。二者的區(qū)別在于是否需要將污染

土壤進行移位和運輸。原位修復一般采用土著微生物,經(jīng)過培養(yǎng)和馴化,并通過

添加營養(yǎng)物質、電子受體、提高含氧率、含水率等人為干預手段強化修復水平。

異位修復則往往需要添加外源微生物并結合人為手段對轉移污染土壤進行修復。

原位修復包括:生物通風、生物刺激、生物強化、生物噴射、生物啜食等。生物

通風是一種強迫氧化的微生物降解方法,其目的是創(chuàng)造好氧條件來促進原位生物

降解。生物刺激是指向石油染的土壤中投加石油降解菌生長所需的N、P等營養(yǎng)

元素以及H2O2、O2等電子受體,將土壤中的C:N:P調整至適合微生物修

復的比例,刺激微生物的生長來達到增加土著微生物生物量,從而達到加速降解

石油污染物的目的。生物強化技術是通過投加一種或幾種具備高效石油降解能力

的菌株至污染土壤中,從而加快土壤中石油的去除。其核心是投加的菌體需具備

高活性和環(huán)境競爭力。生物噴射與生物通風類似,起主要去除作用的是微生物的

降解,但不同的是生物噴射幾乎不能靠污染物的揮發(fā)達到去除目的,而是通過飽

和區(qū)內高的含氧率降解部分有機物。這項技術已經(jīng)被應用于土壤中苯系物的修復。

生物啜食是利用微生物修復飽和區(qū)有機污染物的一種原位修復技術。這種方法通

過將污染的地下水抽出并加入氧氣、營養(yǎng)物質、降解微生物、表面活性劑等,刺

激土著微生物降解石油類有機污染物,再回灌到受污染的土壤中達到生物降解的

目的。此方法可以用來減少溶解在地下水以及潛水面之上的毛細上升區(qū)中的石油

類有機污染物。異位修復包括:生物堆法、生物反應器、預制床修復法。生物堆

4

法會將污染土壤堆放至一處,通過通入氣體、添加調理劑、投加營養(yǎng)成分、控制

含水率等方法提高土壤中好氧微生物的降解作用。生物反應器是將受污染的土壤

挖掘出來和水混合攪拌成泥漿,并接種微生物進行修復的方法。預制床修復法是

通過搭建不滲漏的土壤放置平臺,鋪以沙子、石子,再將污染土壤置于平臺上,

添加營養(yǎng)物質、水分或表面活性劑并定期翻動以維持微生物生長。

因此應用生物菌劑修復有機污染土壤是一種可持續(xù)利用、綠色、可達到較低

成本且比較有效的有機污染土壤生物修復技術。芳烴和石油烴類修復菌劑技術的

應用瓶頸是微生物菌劑選育僅僅是基于微生物在液態(tài)培養(yǎng)基對污染物的降解或

脫毒作用能力,而沒有考慮到菌劑的擴培與制備以及菌劑投加實際土壤后的存活

能力和降解活性等,提出一套微生物菌劑應用于石油烴、芳烴污染土壤生物修復

的技術方法標準,可以促進對芳烴、石油烴污染場地土壤生物修復菌劑技術應用。

5.2應用案例

國內外已做過土壤菌劑修復工程文獻案例5~6個。針對芳烴、石油烴類污染

土壤生物修復,國外在這方面起步較早,在1992年美國國家環(huán)保局就針對微生

物土壤修復技術,制定一系列研究計劃,目前已有大量成功的修復案例(如表5.1),

主要應用于多環(huán)芳烴(PAHs)、石油烴類(TPH)、氯代溶劑類等有機污染場地土

壤修復,且均取得了較好的修復效果,修復成本低廉。在許多情況下,往往采用

復合型污染降解菌劑實施修復(如表5.2),一些具有特殊生存能力的微生物菌劑

物種在共同接種時可以提高菌劑整體的持久性,污染物去除效果普遍可達到

75%~95%左右,處理周期3個月至2年不等,處理成本月35美元/頓~120美元/

噸土壤。

表5.1菌劑/制劑修復技術在國外的部分應用

場地名稱污染物規(guī)模

加拿大魁北克水利局PAHs污染場地

1多環(huán)芳烴9000t

修復

2南澳大利亞某燃料油污染場地石油2000m3

3北青衣土壤凈化工程石油烴65000m3

4竹篇灣財利船廠土壤修復石油烴57000m3

5加拿大某油田污染區(qū)修復氯代溶劑22000t

6英國Scunthorpe地區(qū)污染土壤修復石油烴+多環(huán)1500m3

5

芳烴

表5.2有機污染土壤中用于復合污染生物強化的生物菌劑

微生物

污染物文獻

復合菌劑

PAHs

Rhodococcussp.,Acinetobactersp.,Pseudomonas芴、菲、Yuetal.

sp.(2005)

芘)

Dasand

BacillussubtilisDM-04,PseudomonasaeruginosaM

石油烴Mukherjee

andNM

(2007)

Mycobacteriumfortuitum,Bacilluscereus,PAHs

Jacquesetal.

Microbacteriumsp.,Gordoniapolyisoprenivorans,(蒽、

(2008)

Microbacteriaceaebacterium,Fusariumoxysporum菲、芘)

Mancera-

Rhizopussp.,Penicilliumfuniculosum,Aspergillus

石油烴Lópezetal.

sydowii

(2008)

Mixture

ofPAHs

(萘,

BacillusstrainsB1F,B5AandB3G,

菲,蒽,Silvaetal.

Chromobacteriumsp.4015,Enterobacteraglomerans

芘,二苯(2009b)

sp.B1A

并[a]蒽,

苯并[a]

芘)

國內該技術研究起步晚,有關微生物法土壤修復的行業(yè)、團體標準有《微生

物法修復化工污染土壤技術規(guī)范》、《石油污染土壤微生物修復技術規(guī)范》等。近

年來,由于菌劑生物技術修復成本相對低廉,相關配套設施已能夠成套化生產(chǎn)制

造,在國內已廣泛應用于石油烴、多環(huán)芳烴等易生物降解污染土壤的修復,技術

成熟。但在苯并(a)花、二苯并(a,h)蒽等多環(huán)芳烴類及苯胺類有機污染場地能夠成

功應用的案例仍很少。本規(guī)范采納了部分以上標準的修復技術以及其它文獻內的

修復技術。本規(guī)范增加了菌劑產(chǎn)品治理以及技術路程控制等方面的內容。

5.3存在的主要問題

我國雖然已有采用生物菌劑/制劑技術修復污染土壤的工程實例,但至今未

制定該技術的技術規(guī)范,多根據(jù)修復單位的經(jīng)驗開展修復工作。造成一方面,因

6

菌劑選擇、培育與擴大培養(yǎng)的方面技術缺失,影響修復效果,另一方面因現(xiàn)場實

施技術規(guī)范缺失導致修復單位在進行污染土壤的修復過程中出現(xiàn)設計、施工考慮

不周全以及運行過程監(jiān)測評價等缺乏詳細可行的方案等因素,使最終項目的修復

效果不理想,實際的修復周期遠長于設計的周期,修復成本也隨著增加。

綜上所述,為給相關修復單位對生物菌劑/制劑修復有機污染土壤進行菌劑

選擇、培育、施工及過程評價方案設計提供技術參考,規(guī)范該技術在實際實施過

程中的各個操作環(huán)節(jié),非常有必要綜合國內外已有的工程技術經(jīng)驗,編制相應的

菌劑應用技術規(guī)范,以指導相關企業(yè)更好的運用本項技術進行污染土壤的修復。

7

6.主要內容制訂說明

6.1適用范圍

本標準規(guī)定了微生物法修復有機污染場地土壤微生物菌劑的術語和定義、總

體要求和應用流程,同時規(guī)定了微生物菌劑的選擇、制備、工程參數(shù)和輔助藥劑

選擇的技術要求,以及微生物菌劑在土壤修復應用中擴大培養(yǎng)、施工與調試、過

程監(jiān)測與評估的技術要求,為場地土壤生物菌劑修復提供技術指導。為場地土壤

生物菌劑修復提供技術指導。

本標準適用于我國芳烴類污染、石油烴污染以及芳烴-石油烴復合污染等有

機污染場地土壤的生物修復中的微生物菌劑使用。

6.2編制范圍說明

本技術規(guī)程的具體內容包括:范圍、規(guī)范性引用文件、土壤修復微生物菌劑

的術語和定義、芳烴石油烴類污染修復菌劑的篩選、菌劑的應用設計(包括菌劑

的擴培、輔助藥劑的選擇以及微生物菌劑工程參數(shù)設計)、微生物菌劑的工程施

用以及菌劑應用過程檢測等內容。特別是針對芳烴類污染,石油烴污染和石油烴

-芳烴復合污染場景下微生物降解菌劑的產(chǎn)品質量要求與菌劑應用規(guī)范。

本技術規(guī)范適用于有機污染場地,尤其是芳烴類污染,石油烴污染以及石油

烴-芳烴復合污染場地,包括石油化工、礦業(yè)、采油區(qū)、污水灌溉區(qū)、農藥化工、

機械加工等場地。

6.3規(guī)范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其

中,注日期的引用文件,僅該日期對應的版本適用于本文件;不注日期的引用文

件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB36600-2018土壤環(huán)境質量建設用地土壤污染風險管控標準(試行)

GB18597-2023危險廢物貯存污染控制標準

HJ/T415-2008環(huán)保用微生物菌劑環(huán)境安全評價導則

HJ2035-2013固體廢物處理處置工程技術導則

HJ805-2016土壤和沉積物多環(huán)芳烴的測定氣相色譜-質譜法

8

HJ25.5-2018污染地塊風險管控與土壤修復效果評估技術導則

HJ25.1-2019建設用地土壤污染狀況調查技術導則

HJ25.2-2019建設用地土壤污染風險管控和修復監(jiān)測技術導則

HJ25.3-2019建設用地土壤污染風險評估技術導則

HJ25.4-2019建設用地土壤修復技術導則

HJ1283-2023污染土壤修復工程技術規(guī)范生物堆

ISO16703:2011土壤中石油烴(C10~C40)含量的測定氣相色譜法

6.4術語和定義

1總石油烴totalpetroleumhydrocarbon,TPH

依據(jù)《污染場地術語》(HJ682—2014),本文件將其定義為“在原油中發(fā)現(xiàn)

的含有碳氫化合物組成的混合物,由是多種烴類(正烷烴、支鏈烷烴、環(huán)烷烴、芳

烴)和少量其他有機物,如硫化物、氮化物、環(huán)烷酸類等組成的混合物”。

2芳烴aromatichydrocarbon

依據(jù)《污染場地術語》(HJ682—2014),本文件將其定義為“具有芳香性的

烴,一般指分子中含有苯環(huán)的化合物,包括苯系物和多環(huán)芳烴,其中苯,甲苯,

乙苯以及二甲苯等統(tǒng)稱為苯系物,由兩個或兩個以上苯環(huán)以兩個鄰位碳原子(即

一邊)相連形成的化合物統(tǒng)稱為多環(huán)芳烴”。

3微生物菌劑microbialagents

依據(jù)2021年全國科學技術名詞審定委員會審定公布的《化工名詞(六)生

物化工》,本文件將其定義為“目標微生物(有效功能菌)經(jīng)過篩選擴培制備后制成

的活菌制劑。這種菌劑在適宜環(huán)境條件下通過自身生長代謝活動以及其它輔助菌

種或載體協(xié)同作用下,使場地環(huán)境中有機污染物降解成為低分子化合物或完全分

解為二氧化碳和水”。

4外源微生物菌劑exogenousmicrobialagent

參考2021年全國科學技術名詞審定委員會審定公布的《化工名詞(六)生

物化工》,本文件將其定義為“由一種或多種從非本土污染環(huán)境,通過人工選育

所獲得的微生物菌種(株),經(jīng)過加工制成活菌制劑,可直接應用于適當環(huán)境條

件下的土壤生物修復”。

5土著微生物菌劑indigenousmicrobialagent

9

參考2021年全國科學技術名詞審定委員會審定公布的《化工名詞(六)生

物化工》,本文件將其定義為“由一種或多種從受污染土壤本土環(huán)境中原位分離

純化,通過人工選育所獲得的微生物菌種(株),經(jīng)過加工制成活菌制品菌劑,能

在適宜環(huán)境條件下通過自身生長代謝活動以及其它輔助菌種或載體協(xié)同作用下

使場地環(huán)境中有機污染物降解成為低分子化合物或完全分解為二氧化碳和水”。

6菌劑有效性評價effectivenessevaluationofagents

參考《環(huán)保用微生物菌劑環(huán)境安全評價準則》(HJ/T415—2008),本文件將

其定義為“對微生物菌劑進行分析、測定和評估其去除土壤污染物的能力、環(huán)境

適應能力、環(huán)境安全性、穩(wěn)定性,包括菌劑產(chǎn)品應用后對土壤目標污染物降解的

功效,在土壤中的繁殖能力、恢復土壤性狀等”。

7輔助試劑adjuvant

參考2013年科學出版社的《土壤學大辭典》本文件將其定義為“滿足土壤

降解菌的需要,提高土壤微生物代謝活性,進而提高修復效率的藥劑。包括提高

污染物溶解度的助溶劑,提高微生物活性的營養(yǎng)物、電子受體以及共代謝基質等,

利于微生物附著生長的載體物質以及調節(jié)土壤性質的調理劑等”。

6.5總體要求

6.5.1一般規(guī)定

6.5.1.1微生物菌劑的應用應按照國家相關標準規(guī)范進行,遵循綠色低碳、因地

制宜與系統(tǒng)治理原則和綠色可持續(xù)修復理念,具備可行性、有效性和工程適用性,

實現(xiàn)減污降碳協(xié)同增效。

6.5.1.2微生物菌劑的選擇、制備和應用方式應根據(jù)場地污染特征、修復目標值、

生物地球化學條件、水文地質條件、現(xiàn)場試驗結果等因素確定。

6.5.1.3應對微生物菌劑應用過程中所產(chǎn)生的廢氣、廢水、固體廢物及其他污染

物進行治理,并達到國家、地方和相關行業(yè)排放標準要求。

6.5.1.4微生物菌劑環(huán)境安全評價應符合HJ/T415的規(guī)定。

6.5.1.5應在微生物菌劑投加部位就近建立獨立的菌劑存儲區(qū),在區(qū)域內明顯的

位置張貼警示標志、微生物菌劑用途和注意事項等說明,并設置專人管理。

6.5.2應用過程構成

6.5.2.1微生物菌劑的應用過程包括:菌劑篩選、菌劑的應用設計和菌劑的工程

10

施用。

6.5.2.2菌劑的篩選包括外源菌劑篩選和土著降解菌劑的篩選、菌劑的鑒定與制

備、菌劑的可行性與安全性評價。菌劑的篩選、評價應通過小試和中試實驗驗證

菌劑施用可行性和污染物降解有效性。

6.5.2.3菌劑的應用設計包括菌劑的擴大培養(yǎng)、輔助藥劑篩選和工程參數(shù)設計。

6.5.2.4菌劑制品可作為修復工程菌劑,進行工程施用,可通過原位注入、淺層

噴淋攪拌、生物堆、泥漿反應等技術,進行原位、異位修復。

6.6微生物菌劑應用流程

有機污染場地土壤生物修復技術中微生物菌劑使用流程主要由微生物菌劑

篩選、菌劑應用設計以及菌劑工程施用三部分組成(圖6.1)。

11

圖6.1微生物菌劑應用流程圖

6.6.1微生物菌劑篩選

(1)本規(guī)范中選用的微生物菌劑根據(jù)其來源不同可以分為外源微生物菌劑

和土著微生物菌劑。其中外源菌劑需通過應用到土壤修復后,對目標污染物的降

解效果來篩選,土著微生物菌劑需從污染場地土壤篩選,篩選后需測定其對目標

污染物的效果以及進行菌種鑒定。

(2)參考《農用微生物菌劑》(GB20287—2006)內有效微生物菌劑的指標

以及國內外文獻資料,本規(guī)范制訂了芳烴,石油烴以及混合污染場地降解菌劑的

產(chǎn)品要求(見表6.1)。

12

表6.1產(chǎn)品要求

菌劑類型

項目

液體固體

有效活菌數(shù)

(cells)/(億/g或億1.01.0

/L)≥

霉菌雜菌數(shù)/

3.0×1063.0×106

(個/g或個/mL)≤

雜菌率/(%)

1030

水分/(%)≤—20.0

細度/(%)≥—80

生長pH5.0~8.05.0~8.0

活菌的有效期/

36

月≥

芳烴、石油烴去實驗室評估條件下,1個月內對目標污染物降解率達到

除率(%)50%以上降解速率可接受;修復周期內場地污染土壤修復達標。

(3)國家環(huán)保總局發(fā)布了《環(huán)保用微生物菌劑環(huán)境安全評價導則》(HJ/T

415),需對篩選制備得到的微生物菌劑進行安全性評估,應委托具有CMA資質

單位開具針對菌劑的致病性和生態(tài)毒性影響進行評估。

6.6.2微生物菌劑應用設計

微生物菌劑的應用應該包括菌劑的擴培和制備,輔助藥劑的選擇以及工程參

數(shù)的確定。其中菌劑擴培的接種量應根據(jù)菌種特性以及修復工程需要來確定,擴

培過程中菌劑放大量每次宜為已有菌劑量的10倍~20倍,擴培倍數(shù)過低,不

能滿足生產(chǎn)需求,擴培倍數(shù)過高,可能導致菌株老化,影響產(chǎn)品質量。若修復過

程需要菌劑量較大,可進行多次放大培養(yǎng)。菌劑擴培需考慮到適宜微生物生長所

需的溫度、濕度、pH值以及溶解氧等參數(shù)。同時為實際使用需要,菌劑的微生

物含量應大于109CFU/mL,生長周期控制在5-10天。為了保持菌劑的修復效果,

應定期對菌劑擴培過程中菌種純度進行檢測和控制,確保修復菌種為優(yōu)勢菌。

基于本規(guī)范中微生物修復的目標為芳烴類、石油烴以及復合污染,因此輔助

藥劑的選擇范圍為營養(yǎng)藥劑、表面活性劑以及電子受體和共代謝物質,基于已有

文獻報道和經(jīng)驗,常用的輔助藥劑如表6.2所示。

(1)營養(yǎng)藥劑的選擇基于待修復場地土壤的營養(yǎng)狀況,可通過文獻中報道

的直接投加法、循環(huán)投加法以及控制緩釋法補充缺乏的營養(yǎng)藥劑。

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(2)表面活性劑的投加類型和投加量應通過小試和中試來確定,根據(jù)已有

文獻,其投加量宜為0.1%~1%,基于對環(huán)境的影響,當促進效果相同時,建議

首先使用生物合成表面活性劑,其投加方式可采用文獻中報道的直接投加法和循

環(huán)投加法。

(3)電子供體和共代謝基質的選擇應基于場地土壤的理化性質確定,一般

淺層土壤可通過平整,翻刨以及犁作等方式補充氧氣以促進生物修復,對于深層

土壤的石油烴/芳烴降解,可通過添加氧氣或硝酸鹽等促進生物修復?;谝延?/p>

文獻報道和經(jīng)驗,當場地土壤污染物濃度過高或降解菌含量過低導致降解速率較

慢時,可選擇本規(guī)范中擇自文獻的共代謝基質來促進修復效果。

表6.2土壤原位生物修復工程中常用的添加劑

生物降解類型典型污染物典型的添加劑

空氣,氧氣,雙氧水,二氧化鎂(氧

好氧氧化石油烴;芳烴化劑),麥秸以及啤酒廠殘渣等有機營

養(yǎng),磷酸鹽,銨鹽以及鉀鹽等

硝酸鹽,碳酸鹽,麥秸以及啤酒廠殘

厭氧氧化石油烴;芳烴

渣等有機營養(yǎng),磷酸鹽,銨鹽以及鉀鹽等

乙酸鹽,丙酸鹽,檸檬酸鹽,蘋果酸

鹽,葡萄糖,木糖,甘露醇,甲醇,谷氨

共代謝氧化石油烴;芳烴

酸,異亮氨酸,甲硫氨酸,色氨酸,苯甲

酸鹽,香芹酮,二戊烯以及甲基異丙苯等

根據(jù)已有文獻和經(jīng)驗,微生物菌劑的工程應用參數(shù)應基于修復的場地土壤

的孔隙度、濕度、滲透系數(shù)、有機質含量、電子受體/供體含量和土著微生物群

落組成等。

參照HJ25.4-2019選擇原位或異位修復模式。土壤滲透系數(shù)>6.0×10-4cm/s、

石油烴濃度<5%時,可進行原位修復,石油烴濃度>5%時建議采用異位修復。對

應原位或異位修復菌劑可有效降解目標污染物時的營養(yǎng)條件和環(huán)境理化條件即

為工程施用時應滿足的基本參數(shù)。

工程施用時所需的菌劑的種類和輔助藥劑的配置應基于現(xiàn)場進行的小試模

擬或中試實驗來確定。

菌劑原位和異位修復工程應用應考慮修復場地土壤的溫度、pH、鹽度、氮源、

磷源等參數(shù),參數(shù)的具體數(shù)值可通過正交或單因素試驗確定。

14

參考文獻和經(jīng)驗,生物修復場地有機污染土壤時可混合添加多種降解菌以促

進降解的效率,或者將降解菌與其它本土功能菌株(土壤改良菌、產(chǎn)表面活性劑

菌)結合應用于有機污染場地土壤以提高修復效率,根據(jù)配伍菌群的污染物降解

率調整營養(yǎng)物投加配比和環(huán)境條件參數(shù)。

6.6.3微生物菌劑工程施用

6.6.3.1菌劑修復原位應用

不同場地土壤,芳烴和石油烴的濃度以及空間分布不同,因此應調研需修復

土壤的芳烴、石油烴污染濃度和空間分布等信息來確定使用淺層攪拌或原位注入

等修復方式。

參照國內外工程經(jīng)驗,淺層攪拌修復前需進行土壤預處理,對修復區(qū)土壤進

行人工或機械混勻,混勻深度控制在修復范圍內,盡可能打碎其中的土塊,去除

大石塊。

原位注入修復前應盡可能通過補充調查明確污染范圍,在污染集中點位設置

微生物菌劑注入井。

(1)淺層攪拌修復

參考國內外工程經(jīng)驗,淺層攪拌修復可采用表面噴淋法進行菌劑施用投加,

且噴淋應均勻以保證菌劑均勻的分布于污染土壤內,且需保證噴淋后修復土壤無

大面積積水和菌液外流,根據(jù)文獻報道和經(jīng)驗,噴淋后需保證降解菌的數(shù)量不少

于107CFU/kg修復土壤能夠保持較好的修復效果。為更好的生物修復石油烴和

芳烴污染場地土壤,修復開始時可根據(jù)原土壤營養(yǎng)組成,加入部分輔助藥劑以調

節(jié)場地營養(yǎng)元素以促進微生物的代謝,并需在修復過程中保持土壤相對濕度為

40%~60%且定時補充輔助藥劑以維持微生物的高活性。

(2)原位注入修復

參考文獻及國內外工程經(jīng)驗,當污染物存在于場地土壤的深處時,可利用原

位注入菌劑等方式進行生物修復,原位注入修復可采用注入井泵送法進行菌劑施

用投加。注入井的間距的布設(一般1~2m)需根據(jù)場地土壤的滲透系數(shù)以及

修復周期來確定。原位注入修復時,可將降解菌和輔助藥劑同時泵入,在修復過

程中,可定期注入菌劑以保持場地土壤的有效活菌數(shù),對于降解菌數(shù)的測定需不

低于一周一次。

15

6.6.3.2菌劑修復異位應用

參考文獻和國內外工程經(jīng)驗,異位的生物修復可采用生物堆和生物泥漿等

方式,具體采用何種方式需根據(jù)場地條件、修復工期、土壤污染特征等綜合判

斷。生物堆菌劑施用和修復過程應參照HJ1283執(zhí)行。

生物堆堆體運行期間需定期補水以保證其含水率適宜微生物代謝,堆體土

壤中有效活菌數(shù)需控制不低于107CFU/kg,每月需監(jiān)測1~2次堆體降解微生物

數(shù)量,確保微生物群落穩(wěn)定。

參考國內外工程經(jīng)驗,生物泥漿法可向反應進藥裝置直接投加微生物菌劑

或配置菌液,在泥漿攪拌和堆置反應期間應監(jiān)測反應溫度、pH、含氧量、菌劑

微生物密度等,確保菌劑處于有效反應環(huán)境。

6.6.4監(jiān)測和過程控制

(1)工藝參數(shù)監(jiān)測

在生物修復場地土壤有機污染過程中,應對土壤的常規(guī)理化性質、細菌總數(shù)

等菌劑應用相關工藝參數(shù)進行監(jiān)測,如pH、粒徑分布、密度、孔隙度、有機質

含量、滲透系數(shù)等,參考經(jīng)驗和測定方法國標檢測方法,檢測項目和分析方法見

表9.1,分析測試應按照GB50021執(zhí)行。

表6.3監(jiān)測項目和分析方法

序號監(jiān)測項目分析方法引用標準備注

1細菌總數(shù)平板計數(shù)法GB17378.7

測定可降解目標污染

2功能微生物總數(shù)Q-PCR法——

物的微生物的總量

3pHpH計GB17378.4

4溶解氧碘量法GB17378.4

5總石油烴分光光度法HJ970-2018

6石油烴組分氣相色譜法HJ1021-2019

萃取后測定不同種類

7多環(huán)芳烴高效液相法HJ892-2017

多環(huán)芳烴的含量

萃取后測定其它芳烴

8其它芳烴類氣相質譜/液相質譜法——

含量

萃取后測定修復后次

9次生代謝產(chǎn)物氣相質譜/液相質譜法——

生代謝產(chǎn)物

10總氮過硫酸鉀氧化法GB12763.4萃取后測定總氮

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序號監(jiān)測項目分析方法引用標準備注

氨氮,亞硝氮,硝GB747

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